Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Họ và tên : NGUYỂN ĐỨC LỢI MSSV : 21126398
Niên khóa : 2021 – 2025 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC
BÀI BÁO CÁO
CÔNG NGHỆ DI TRUYỀN II
Trang 2Giảng viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC
BÀI BÁO CÁO
CÔNG NGHỆ DI TRUYỀN II
Trang 31.3 Nội dung thực hiện 1
CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2
2.1 Thời gian và địa diểm nghiên cứu 2
2.2 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2
2.2.1 Vật liệu 2
2.2.2 Phương pháp thực hiện 2
CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 5
3.1 Kết quả đo OD 5
3.2 Kết quả điện di kiểm tra nồng độ DNA 5
3.3 Kết quả điện di kiểm tra GMO 6
Trang 4DANH SÁCH CÁC HÌNH
Trang
Hình 2.1 Mẫu bắp chưa được nghiền 2
Hình 2.2 800 μl dịch nổi và CI sau ly tâm 3
Hình 2.3 Hút 300 μl dịch nổi qua eppendorf mới 3
Hình 2.4 500 μl Ethanol 70o để rửa mẫu 4
Hình 3.1 Kết quả đo OD 5
Hình 3.2 Kết quả đo điện di kiểm tra nồng độ DNA 5
Hình 3.3 Kết quả đo điện di kiểm tra GMO 6
Trang 5CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU
1.1 Đặt vấn đề
Công nghệ sinh học biến đổi gen (GMO) ngày càng được ứng dụng rộng rãi trong sản xuất nông nghiệp, mang lại nhiều lợi ích như năng suất cao, khả năng chống chịu sâu bệnh tốt hơn Tuy nhiên, việc sử dụng GMO cũng tiềm ẩn một số nguy cơ cho sức khỏe con người và môi trường, dẫn đến nhiều tranh luận và lo ngại Do đó, việc kiểm tra và xác định GMO trong thực phẩm là vô cùng quan trọng để đảm bảo an toàn cho người tiêu dùng
1.2 Mục tiêu
Kiểm tra mẫu bắp hoặc đậu có phải là thực vật chuyển gene hay không
1.3 Nội dung thực hiện
Tách chiết DNA từ mẫu thực vật bằng các phương pháp điện di, PCR, đo OD kiểm tra chất lượng mẫu thực vật
Trang 6CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
2.1 Thời gian và địa diểm nghiên cứu
Thời gian: 8h sáng thứ 5 ngày 23/5 và thứ 3 ngày 4/6
Địa điểm: phòng 101, Viện nghiên cứu Sinh học, Trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh
2.2 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Vật liệu
Sử dụng mẫu bắp số 2 dùng làm thức ăn cho gia súc ở Đồng Nai
2.2.2 Phương pháp thực hiện
Bước 1: Cân 0,05g mẫu bắp đã được nghiền sẵn cho vào eppendorf 1500 μl
Bước 2: Hút 600 μl SDS chia ra 2 lần hút, lần đầu hút 400 μl sau đó dùng chày nhựa nghiền nát mẫu, lần thứ hai hút tiếp 200 μl SDS
Bước 3: Hút 600 μl PCI lắc mạnh, lắc đều
Bước 4: Đem eppendorf chứa mẫu ly tâm 10000 vòng/phút trong 5 phút để tách lớp Bước 5: Hút 500 μl dịch nổi qua eppendorf mới
Bước 6: Hút 1V (300 μl) CI xong lắc mạnh và ly tâm 10000 vòng/phút trong 5 phút
Hình 2.1 Mẫu bắp chưa được nghiền
Trang 7Bước 7: Hút 300 μl dịch nổi qua eppendorf mới cho 0,6V (180 μl) Isopropanol để kết tủa
Bước 8: Ủ lạnh ở -20oC trong 30 phút
Bước 9: Ly tâm 10000 vòng/phút trong 10 phút
Bước 10: Đổ bỏ dịch nổi, sau đó rửa bằng 500 μl Ethanol 70o
Hình 2.2 800 μl dịch nổi và CI sau ly tâm
Hình 2.3 Hút 300 μl dịch nổi qua eppendorf mới
Trang 8Bước 11: Phơi khô và dùng TE để bảo quản
Bước 12: Đo OD và điện di để xem hàm lượng DNA
Bước 13: PCR dùng 11,5 μl đã được trộn sẵn và 1 μl mẫu DNA bắp số 2
Bước 14: Điện di mẫu xem có phải GMO hay không, 10 μl Loading dye và Gel Red với 5 μl mẫu DNA bắp số 2
Hình 2.4 500 μl Ethanol 70o để rửa mẫu
Trang 9CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1 Kết quả đo OD
Kết quả cho thấy tỉ lệ A260/A280 là 1,931 nằm trong khoảng hợp lệ, chứng tỏ ly trích mẫu tương đối sạch, nồng độ DNA đạt 41,48 ng/μl nằm ở mức sử dụng được nên đồ
thị nhìn chưa được đẹp vì ở bước sóng 260 vẫn còn chưa sạch
3.2 Kết quả điện di kiểm tra nồng độ DNA
Kết quả có xuất hiện band sáng chứng tỏ thao tác làm chính xác không bị lủng giếng hay bị tràn DNA tuy nhiên vẫn còn 1 số RNA tồn dư gây nên vệt sáng ở dưới band
Hình 3.1 Kết quả đo OD
Hình 3.2 Kết quả đo điện di kiểm tra nồng độ DNA
Trang 103.3 Kết quả điện di kiểm tra GMO
Kết qua điện di cho thấy 2 band sáng có thể kết luận mẫu bắp số 2 ở Đồng Nai dùng cho gia súc là thực vật chuyển gene
Hình 3.3 Kết quả đo điện di kiểm tra GMO