Cndt2_Nguyễn Đức Lợi_21126398_T2_789.Pdf

Giảng viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC BÀI BÁO CÁO CÔNG NGHỆ DI TRUYỀN II... Kết quả điện

Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC

Họ và tên : NGUYỂN ĐỨC LỢI MSSV : 21126398

Niên khóa : 2021 – 2025

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

BÀI BÁO CÁO CÔNG NGHỆ DI TRUYỀN II

Giảng viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

BÀI BÁO CÁO CÔNG NGHỆ DI TRUYỀN II

MỤC LỤC

Trang

MỤC LỤC i

DANH SÁCH CÁC HÌNH ii

CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Mục tiêu 1

1.3 Nội dung thực hiện 1

CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2

2.1 Thời gian và địa diểm nghiên cứu 2

2.2 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2

2.2.1 Vật liệu 2

2.2.2 Phương pháp thực hiện 2

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 5

3.1 Kết quả đo OD 5

3.2 Kết quả điện di kiểm tra nồng độ DNA 5

3.3 Kết quả điện di kiểm tra GMO 6

DANH SÁCH CÁC HÌNH

Trang

Hình 2.1 Mẫu bắp chưa được nghiền 2

Hình 2.2 800 μl dịch nổi và CI sau ly tâm 3

Hình 2.3 Hút 300 μl dịch nổi qua eppendorf mới 3

Hình 2.4 500 μl Ethanol 70o để rửa mẫu 4

Hình 3.1 Kết quả đo OD 5

Hình 3.2 Kết quả đo điện di kiểm tra nồng độ DNA 5

Hình 3.3 Kết quả đo điện di kiểm tra GMO 6

CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Công nghệ sinh học biến đổi gen (GMO) ngày càng được ứng dụng rộng rãi trong sản xuất nông nghiệp, mang lại nhiều lợi ích như năng suất cao, khả năng chống chịu sâu bệnh tốt hơn Tuy nhiên, việc sử dụng GMO cũng tiềm ẩn một số nguy cơ cho sức khỏe con người và môi trường, dẫn đến nhiều tranh luận và lo ngại Do đó, việc kiểm tra và xác định GMO trong thực phẩm là vô cùng quan trọng để đảm bảo an toàn cho người tiêu dùng

1.2 Mục tiêu

Kiểm tra mẫu bắp hoặc đậu có phải là thực vật chuyển gene hay không

1.3 Nội dung thực hiện

Tách chiết DNA từ mẫu thực vật bằng các phương pháp điện di, PCR, đo OD kiểm tra chất lượng mẫu thực vật

CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

2.1 Thời gian và địa diểm nghiên cứu

Thời gian: 8h sáng thứ 5 ngày 23/5 và thứ 3 ngày 4/6

Địa điểm: phòng 101, Viện nghiên cứu Sinh học, Trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh

2.2 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu

2.2.1 Vật liệu

Sử dụng mẫu bắp số 2 dùng làm thức ăn cho gia súc ở Đồng Nai

2.2.2 Phương pháp thực hiện

Bước 1: Cân 0,05g mẫu bắp đã được nghiền sẵn cho vào eppendorf 1500 μl

Bước 2: Hút 600 μl SDS chia ra 2 lần hút, lần đầu hút 400 μl sau đó dùng chày nhựa nghiền nát mẫu, lần thứ hai hút tiếp 200 μl SDS

Bước 3: Hút 600 μl PCI lắc mạnh, lắc đều

Bước 4: Đem eppendorf chứa mẫu ly tâm 10000 vòng/phút trong 5 phút để tách lớp Bước 5: Hút 500 μl dịch nổi qua eppendorf mới

Bước 6: Hút 1V (300 μl) CI xong lắc mạnh và ly tâm 10000 vòng/phút trong 5 phút

Hình 2.1 Mẫu bắp chưa được nghiền

Bước 7: Hút 300 μl dịch nổi qua eppendorf mới cho 0,6V (180 μl) Isopropanol để kết tủa

Bước 8: Ủ lạnh ở -20oC trong 30 phút

Bước 9: Ly tâm 10000 vòng/phút trong 10 phút

Bước 10: Đổ bỏ dịch nổi, sau đó rửa bằng 500 μl Ethanol 70o

Hình 2.2 800 μl dịch nổi và CI sau ly tâm

Hình 2.3 Hút 300 μl dịch nổi qua eppendorf mới

Bước 11: Phơi khô và dùng TE để bảo quản

Bước 12: Đo OD và điện di để xem hàm lượng DNA

Bước 13: PCR dùng 11,5 μl đã được trộn sẵn và 1 μl mẫu DNA bắp số 2

Bước 14: Điện di mẫu xem có phải GMO hay không, 10 μl Loading dye và Gel Red với 5 μl mẫu DNA bắp số 2

Hình 2.4 500 μl Ethanol 70o để rửa mẫu

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1 Kết quả đo OD

Kết quả cho thấy tỉ lệ A260/A280 là 1,931 nằm trong khoảng hợp lệ, chứng tỏ ly trích mẫu tương đối sạch, nồng độ DNA đạt 41,48 ng/μl nằm ở mức sử dụng được nên đồ

thị nhìn chưa được đẹp vì ở bước sóng 260 vẫn còn chưa sạch

3.2 Kết quả điện di kiểm tra nồng độ DNA

Kết quả có xuất hiện band sáng chứng tỏ thao tác làm chính xác không bị lủng giếng hay bị tràn DNA tuy nhiên vẫn còn 1 số RNA tồn dư gây nên vệt sáng ở dưới band

Hình 3.1 Kết quả đo OD

Hình 3.2 Kết quả đo điện di kiểm tra nồng độ DNA

3.3 Kết quả điện di kiểm tra GMO

Kết qua điện di cho thấy 2 band sáng có thể kết luận mẫu bắp số 2 ở Đồng Nai dùng cho gia súc là thực vật chuyển gene

Hình 3.3 Kết quả đo điện di kiểm tra GMO