DNA của vi khuẩn được gắn gốc methyl bởi enzyme giới hạn Câu 6 : ccdB gene sử dụng nhằmA.. tỉ lệ khuẩn lạc tạo thành và lượng vector sử dụng B.. tỉ lệ khuẩn lạc tạo thành và microgram ve
PHẦN TRẮC NGHIỆM (0.1 đ/câu đúng) Câu : Sử dụng Alkaline Phosphatase xử lý vector nhằm A Gắn nhóm 5’ phosphate B Tránh tượng vector tự nối C Loại bỏ nhóm 5’ phosphate D Giúp vector gắn lại Câu : S1 nuclease? A tác động sợi đôi DNA C tác động sợi đơn DNA tác động lên sợi đơn sợi đôi DNA D thu nhận từ E coli B Câu : lacZΔM15 có ý nghĩa: A Một phần gene lacZ biểu cần phải có tiến trình alpha complementation B Gene lacZ với đột biến vị trí M15 C tồn gene lacZ D phần gene lacZ Câu : Enzyme chuyển đoạn DNA từ vị trí sang vị trí khác là: A Transposase B Endonuclease C Ligase D Transciptase Câu : Tại DNA vi khuẩn không bị enzyme cắt phân hủy? A enzyme cắt không nhận biết DNA B enzyme cắt nhận biết DNA chính nó C DNA vi khuẩn gắn gốc phosphate enzyme giới hạn Câu : ccdB gene sử dụng nhằm A Kiểm soát chết tế bào D DNA vi khuẩn gắn gốc methyl enzyme giới hạn B Tăng lượng tế bào tái tổ hợp C Kiểm soát sinh tế bào D Giảm lượng tế bào tái tổ hợp Câu : DNA polymerase I gồm tiểu đơn vị có chức khác nhau, ? A Cả hai đoạn có hoạt tính 5’-3’ polymerase B Đoạn nhỏ gọi Klenow 3’-5’ exonuclease C Đoạn nhỏ đầu C terminal đoạn lớn đầu N terminal Câu : Hiệu suất biến nạp là: A tỉ lệ khuẩn lạc tạo thành lượng vector sử dụng C tỉ lệ khuẩn lạc tạo thành lượng DNA Câu : A C Câu 10 : D Đoạn nhỏ có hoạt tính 5’-3’ exonuclease đoạn lớn có hoạt tính 5’-3’ polymerase 3’-5’ exonuclease tỉ lệ khuẩn lạc tạo thành microgram vector sử dụng D tỉ lệ khuẩn lạc tạo thành microgram mẫu DNA chèn vector B chèn vào vector TA cloning phương pháp tạo dòng Nucleotid A gắn vào đầu vector B Hiệu thấp Nucleotide T gắn vào sản phẩm PCR D Dễ thực Các bước việc tạo thư viện gene gồm: i) Phân đoạn DNA iii) Khuếch đại v) Chuẩn bị vector A ii)-i)-v)-iv)-iii) C ii)-v)-i)-iv)-iii) Câu 11 : Có thể loại phản ứng nối ii) Tách chiết DNA gene iv) Nối chuyển vào tế bào vật chủ B i)-ii)-iii)-iv)-v) D v)-ii)-i)-iii)-iv) A C Câu 12 : Polymerases có loại ? B A C Câu 13 : Hiện tượng alpha-complementation là: A α = β + ω C α + β = ω β = α + ω B D Câu 14 : A C Câu 15 : A C Câu 16 : A D B β = α + ω D α + β = ω Khi điện di DNA sợi đơn RNA, kiểu gel sử dụng? Hồi tính B biến tính agarose gel D polyacrylamide gel Trong tổng hợp sợi cDNA thứ hai RNaseH sử dụng nhằm Loại bỏ toàn sợi RNA B Loại bỏ sợi RNA tổng hợp sợi cDNA Tổng hợp sợi cDNA thứ nhì D Tạo điểm hở sợi RNA Polymerases thêm nucleotide không cần sợi khuôn là? Terminal transferase thêm nucleotides đầu 3’ C Pfu polymerase B Reverse transcriptase D Taq polymerase thêm nucleotides đầu 5’ sản phẩm Câu 17 : M13 gây hại vi khuẩn cách A Phá vỡ vách tế bào B Phân chia kiểm soát C Làm chậm sinh trưởng D Phân hủy vách tế bào Câu 18 : Tại reverse transciptases chép sai nhiều so với polymerases? A Có hoạt tính exonucleolytic activity B Do tổng hợp DNA từ RNA C Khơng có 3’-5’ exonucleolytic D Khơng có 5’-3’ exonucleolytic Câu 19 : Phosphatase dùng: A loại bỏ nhóm phosphate DNA thay B thủy phân nhóm phosphate DNA hydrogen thay nhóm hydroxyl C thêm nhóm phosphate vào vị trí nhóm hydroxyl DNA Câu 20 : DNA polymerase I hoạt tính ? A 5’-3’ DNA synthesis C 5’-3’ exonuclease D thay hydrogen DNA với nhóm phosphate B 3’-5’ exonuclease D 3’-5’ DNA synthesis Câu 21 : Sau cắt enzyme, đoạn polynucleotide có dạng A Đầu tận sợi đôi B Cả hai đầu tận sợi đơn sợi đôi C Đầu tận sợi đơn D Một đầu sợi đơn đầu sợi đôi Câu 22 : Endonuclease enzyme cắt đoạn polynucleotide A cắt vị trí đoạn B cắt đầu ngồi đoạn C cắt phía trong, khơng cắt đầu ngồi Câu 23 : Taq polymerase khơng có chức năng? D vị trí A 3’-5’ exonuclease C 5’-3’ polymerase Câu 24 : bla gene? A Gene báo cáo C Gene kháng kháng sinh B 5’-3’ exonuclease D Cả 5’-3’ polymerase 5’-3’ exonuclease B Mã hóa enzyme beta- galactosidase D Mã hóa enzyme beta- lactamase Câu 25 : Xử lý với exonuclease giúp loại bỏ: A plasmid DNA B DNA chromosome C protein D RNase Câu 26 : Phương pháp self priming dùng tổng hợp cDNA A Đoạn DNA đầu 5’ bị B Sử dụng phổ biến C Tạo cấu trúc vịng D Ít sử dụng phương pháp RNaseH Câu 27 : Nếu tất nucleotides diện ngẫu nhiên với tần suất nhau, tần suất xuất trình tự gồm nucleotides bao nhiêu? A 1/16 B 1/256 C 1/64 D 1/8 Câu 28 : Phản ứng nối đạt hiệu cao A Nối đầu so le B Nối đầu C Câu 29 : A C Câu 30 : A C Câu 31 : Tùy thuộc vào điều kiện phản ứng D Cả hai trường hợp Nếu linker kết hợp với phân tử khác marker chọn lọc gọi enhancer B linker cải biến cassette D adaptors Đầu primer phải bắt cặp tốt với sợi khuôn? Cả hai B 3’ 5’ D Một hai Khuếch đại đẳng nhiệt A Thực 650C B Taq polymerase dùng C Không cần đun nóng làm lạnh D Phải có thiết bị đắt tiền bước phản ứng Câu 32 : Cắt phần (partial digestion) với enzyme hiểu ? A Điều kiện phản ứng để đoạn DNA không B kỹ thuật sử dụng xây dựng thư viện bị cắt tất vị trí nhận biết enzyme cắt sử dụng C Chỉ nửa trình tự nhận biết DNA nhận biết gene D Số lượng đoạn DNA tạo cắt phần với số lượng DNA tạo cắt toàn phần Câu 33 : Tại vector thiết kế với phần gene lacZ A Chỉ phần gene lacZ biểu B Plasmid cần đoạn gene lacZ thành protein C Toàn gene lac Z có kích thước lớn Câu 34 : Methylase có chức ? A loại nhóm methyl khỏi DNA D Tồn gene lacZ khơng hoạt động B thêm nhóm methyl vào DNA C thêm vào loại nhóm methyl D tổng hợp nhóm methyl Câu 35 : Lợi biểu protein dạng dung hợp tăng cường ổn định, cuộn gấp, ? A hòa tan, tạo cầu nối disulphide B khơng hịa tan, tạo cầu nối disulphide C khơng hịa tan, tạo cầu nối phosphodiester D hòa tan, tạo cầu nối phosphodiester Câu 36 : Sau lai, để nhận biết vị trí DNA probe cần sử dụng phương pháp? A Chiếu UV B Nhuộm C Câu 37 : A C Quan sát kính hiển vi điện tử Promoters sử dụng nhiều là: bacteriophage T7 D Nhờ chất phát sáng B bacteriophage T7 and SP6 baceriophage Mu D bacteriophage SP6 Câu 38 : Hệ thống tái tổ hợp bacteriophage lambda có đặc điểm A chèn gene vi khuẩn vào gene B điểm đặc biệt vi khuẩn phage phage gọi attP C điểm đặc biệt vi khuẩn attB D chèn gene phage vào gene vi phage attP khuẩn Câu 39 : Tiến trình đưa sản phẩm PCR vào vector để tạo dòng A chèn B tạo vector tái tổ hợp C xây dựng thư viện D tạo hard copy Câu 40 : Có phương pháp thu nhận DNA plasmid từ vi khuẩn? A B C D Câu 41 : Trình tự nhận biết Sau3A '| GATC 3' DpnI 'GA | TC 3' Câu đúng? A Đầu tạo DpnI sợi đơn Đầu tận tạo thành hai enzyme khơng tương thích D Các đầu Sau3A sợi đôi B C Đầu tận tạo thành hai enzyme tương thích Câu 42 : Loại DNA di chuyển nhanh điện di? A Siêu xoắn B đứt gãy C siêu xoắn vòng di chuyển vận tốc D Vòng nhanh Câu 43 : Nếu đoạn DNA cắt với hai enzyme khác A Tăng hiệu nối C Nối với vector theo chiều Khó chèn vào vector D Dễ chèn vào vector Câu 44 : Tên enzyme cắt tách từ dòng R vi khuẩn Escherichia coli ? A EcoR1 B EcorI C EcoRI D EcoRI Câu 45 : Hai đầu so le nối với A liên kết ion C liên kết hydro Câu 46 : lacZ gene? A Tạo màu xanh B B liên kết đồng hóa trị D liên kết Van-der-waal B Mã hóa beta galactosidase enzyme C Kháng kháng sinh D Tổng hợp X-gal Câu 47 : The tac promoter tạo vùng _ trp promoter vùng _ lacUV5 promoter A 10, 10 B 35, 35 C 10, 35 D 35, 10 Câu 48 : Có kiểu enzyme cắt? A B C D Câu 49 : Biểu thể lai gồm T7 promoter lac operator cần phải có: A T7 DNA polymerase B T7 RNA polymerase C Cả T7 RNA polymerase chất cảm ứng D Chất cảm ứng IPTG IPTG Câu 50 : Trình tự nhận biết BamHI 5’ G|GATCC 3’ cắt tạo nên A Đầu tận sợi đôi B Đầu 3’ sợi đơn C Đầu 5’ sợi đơn D Đầu tận sợi đơn PHẦN TỰ LUẬN Để tìm hiểu đặc điểm protein Mi-SP1, trình tự gene Mi-sp1 mã hóa cho protein tạo dịng Trình tự Mi-sp1 (402 bp) ATGAATCCACAAAGAATGC .NNNNNNNNNN GGCAGCATTTCTTTAA Để thuận lợi cho tạo dòng thứ cấp (subcloning) cho mục đích nghiên cứu biểu gene, Minc17980 khuếch đại PCR gắn thêm trình tự nhận biết enzyme A (G_A_C_) đầu 5’ enzyme B đầu 3’(_G_A_C) Hãy cho biết trình tự primer sử dụng (15 nu đầu tiên) cách tính nhiệt độ bắt cặp ? (1 điểm) Tiến hành phản ứng PCR, tính lượng sử dụng thành phần phản ứng (1 điểm) Thành phần Nồng độ đầu Nồng độ cuối Thể tích (l) Buffer 10 X 1X dNTP 10 mM mM Primer (F) 10 M 0,4 M Primer (R) 10 M 0,4 M DNA template (10 ng/ul) 5-10 ng Pfu polymerase (2U/ul) 1U ddH2O Tổng thể tích 20 Bản đồ vector pGEM-T Easy Sản phẩm PCR tinh tạo dịng với hệ thống vector pGEM-T Easy Hãy trình bày phương pháp nối sản phẩm PCR vector? (1 điểm) Biến nạp sản phẩm nối vào tế bào E.coli JM109 phương pháp sốc nhiệt Hãy trình bày phương pháp sàng lọc dòng tế bào mang vector tái tổ hợp (1 điểm) Kết giải trình tự cho thấy thu nhận đoạn mã hóa Minc17980 Để tìm hiểu gene Minc17980 biểu đâu thể tuyến trùng, tiến hành phương pháp lai chỗ Mẫu dò (probe) tổng hợp cách sử dụng dUTP-dioxygenin Hãy trình bày phương pháp tổng hợp mẫu dò phát Mi-sp1(RNA) mẫu dò làm đối chứng (1 điểm) TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐÁP ÁN ĐỀ THI KẾT THÚC HỌC PHẦN – ĐỀ SỐ 001 Đề thi môn: CƠNG NGHỆ DI TRUYỀN Mã mơn học: 211113 Học kỳ: I Năm học: 2017 - 2018 Nhóm: Phần TRẮC NGHIỆM Câu số 10 Đáp án B C A A D B D A D A Câu số 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Đáp án C C D B D A C C B D Câu số 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Đáp án B C A D B A B A C B Câu số 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 Đáp án A B C B A D B D D A Câu số 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 Đáp án B A C C C B D D C C Câu số 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 Đáp án Phần Tự luận Cầu 1: - GGATCCATGAATCCACAAAGA (0.5 đ) - GGTACCTTAAAGAAATGCTGC (0.5 đ) Câu 2: Thành phần Nồng độ đầu Nồng độ cuối Thể tích (l) Buffer 10 X 1X (0.2 đ) dNTP 10 mM mM 0.4 (0.2 đ) Primer (F) 10 M 0,4 M 0.8 (0.1 đ) Primer (R) 10 M 0,4 M 0.8 (0,1 đ) DNA template (10 ng/ul) 5-10 ng 1.0 (0.2 đ) 1U 1.0 (0,2 đ) Pfu polymerase (2U/ul) Cầu 3: Câu 4: - ddH2O 14 Tổng thể tích 20 Gắn đuôi dA vào sản phẩm PCR (0,5 đ) Gắn vào vector theo hệ thống TA cloning (0,5 đ) Nuôi mơi trường có bổ sung Ampiciline, chất cảm ứng IPTG, chất phản ứng X-Gal (0,5 đ) Chọn lọc hệ thống xanh trắng phản ứng enzyme beta galactosidase phản ứng với chất tạo màu xanh (0,5 đ) Câu - Sử dụng enzyme T7 RNA polymease tổng hợp RNA đánh dấu (0,5 đ) Sử dụng SP6 RNA polymerse tổng hợp RNA đánh dấu (0,5 đ) TRƯỞNG BỘ MÔN/BCN KHOA (Ký, ghi rõ họ tên) GIẢNG VIÊN (Ký, ghi rõ họ tên)