luận văn thạc sĩ nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitron và trồng cây sâm cau curculigo orchioids gaertn trong vườm ươm

HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ BÌNH NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG CÂY SÂM CAU (CURCULIGO ORCHIOIDES GAERTN.) TRONG VƯỜN ƯƠM Ngành; Khoa học trồng Mã số: 8620110 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Ích Tân TS Phạm Hương Sơn NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2019 c LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn, thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Bình i c LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Ích Tân TS Phạm Hương Sơn tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài! Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, môn Canh tác học, khoa Nông học, Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình thực đề tài hồn thành luận văn! Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán viên chức Phòng thí nghiệm Phát triển Ứng dụng Y sinh cơng nghệ cao, Viện Ứng dụng Công nghệ, Bộ Khoa học Công nghệ giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài! Tơi xin trân trọng cảm ơn TS Nguyễn Thị Lài tận tâm giúp đỡ, hướng đẫn động viên tơi suốt q trình thực đề tài! Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi mặt, động viên khuyến khích tơi q trình học tập mình./ Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Bình ii c MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Trích yếu luận văn viii Thesis abstract x Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp mới, ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Giới thiệu sâm cau 2.1.1 Vị trí phân bố phân loại 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.1.3 Đặc điểm sinh thái học 2.1.4 Thành phần hóa học 2.1.5 Giá trị sử dụng 2.1.6 Thực trạng khai thác loài Sâm cau Việt Nam 2.2 Một số kết nghiên cứu sâm cau giới việt nam 2.2.1 Tình hình nghiên cứu Sâm cau giới 2.2.2 Tình hình nghiên cứu Sâm cau nước 12 2.3 Các nhân tố ảnh hưởng tới q trình nhân giống ni cấy mơ tế bào 14 2.3.1 Môi trường nuôi cấy 14 2.3.2 Các chất điều hòa sinh trưởng 15 2.3.3 Môi trường vật lý 16 2.3.4 Vật liệu nuôi cấy 17 2.3.5 Điều kiện vô trùng 17 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 18 3.1 Địa điểm nghiên cứu 18 3.2 Thời gian nghiên cứu 18 iii c 3.3 Đối tượng/vật liệu nghiên cứu 18 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu 18 3.3.2 Vật liệu nghiên cứu 18 3.4 Nội dung nghiên cứu 20 3.5 Phương pháp nghiên cứu 20 3.5.1 Phương pháp nhân giống in vitro 20 3.5.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 21 3.5.3 Các tiêu theo dõi 25 3.5.4 Phương pháp xử lý số liệu 26 Phần Kết thảo luận 27 4.1 Nghiên cứu khử trùng tạo vật liệu khởi đầu cho nuôi cấy in vitro sâm cau 27 4.1.1 Ảnh hưởng chất khử trùng tới tỷ lệ sống mẫu cấy 27 4.1.2 Ảnh hưởng chất chất kích thích sinh trưởng TDZ đến khả tạo vật liệu khởi đầu 30 4.2 Nghiên cứu nhân nhanh chồi sâm cau 32 4.2.1 Ảnh hưởng tổ hợp chất điều tiết sinh trưởng (TDZ + IBA) đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau 33 4.2.2 Ảnh hưởng phloroglucinol (PG) đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau 35 4.2.3 Ảnh hưởng AgNO3 đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau 37 4.2.4 Ảnh hưởng tảo Spirulina đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau 38 4.3 Nghiên cứu tạo in vitro hoàn chỉnh 41 4.3.1 Ảnh hưởng iba đến tạo in vitro hoàn chỉnh 41 4.4 Nghiên cứu kỹ thuật trồng sâm cau vườn ươm 45 4.4.1 Ảnh hưởng giá thể khác đến sinh trưởng phát triển Sâm cau in vitro vườn ươm 46 4.4.2 Ảnh hưởng số loại phân bón khác đến sinh trưởng phát triển Sâm cau in vitro vườn ươm 51 Phần Kết luận kiến nghị 57 5.1 Kết luận 57 5.2 Kiến nghị 57 Tài liệu tham khảo 59 Phụ lục 63 Phụ lục Thành phần loại môi trường nuôi cấy 63 iv c luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt CT Công thức CV% Hệ số biến động (Correlation of Variants) Đ/C Đối chứng IBA Indolbutyride acid LSD0,05 So sánh theo giá trị khác biệt có ý nghĩa nhỏ mức α  0,05 MS Murashige and Skoog PG phloroglucinol TDZ Thidiazuron luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom v luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom c luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Phân loại Sâm sau Bảng 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng chất khử trùng H2O2 NaOCl 22 Bảng 4.1 Ảnh hưởng chất khử trùng H2O2 lên mẫu cấy Sâm cau 27 Bảng 4.2 Ảnh hưởng chất khử trùng NaOCl lên mẫu cấy Sâm cau 29 Bảng 4.3 Ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng TDZ đến khả tạo chồi từ mẫu cấy ban đầu (sau tuần nuôi cấy) 31 Bảng 4.4 Ảnh hưởng tổ hợp (TDZ + IBA) đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau (sau tuần nuôi cấy) 34 Bảng 4.5 Ảnh hưởng phloroglucinol (PG) đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau (sau tuần nuôi cấy) 36 Bảng 4.6 Ảnh hưởng AgNO3 đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau (sau tuần nuôi cấy) 37 Bảng 4.7 Ảnh hưởng tảo Spirulina đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau (sau tuần nuôi cấy) 39 Bảng 4.8 Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ sinh trưởng chồi Sâm cau in vitro (6 tuần nuôi cấy) 42 Bảng 4.9 Ảnh hưởng giá thể trồng khác đến chiều cao Sâm cau in vitro giai đoạn vườn ươm 47 Bảng 4.10 Ảnh hưởng giá thể trồng khác đến số Sâm cau in vitro giai đoạn vườn ươm 49 Bảng 4.11 Ảnh hưởng giá thể trồng khác đến sinh trưởng phát triển Sâm cau in vitro giai đoạn vườn ươm (sau 10 tuần) 50 Bảng 4.12 Ảnh hưởng phân bón khác đến chiều cao Sâm cau in vitro giai đoạn vườn ươm 52 Bảng 4.13 Ảnh hưởng phân bón khác đến số Sâm cau in vitro giai đoạn vườn ươm 54 Bảng 4.14 Ảnh hưởng phân bón khác đến đến sinh trưởng phát triển Sâm cau in vitro giai đoạn vườn ươm 55 luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom vi luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom c luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Thân rễ Sâm cau Hình 2.2 Lá Sâm cau Hình 2.3 Hoa Sâm cau .6 Hình 2.4 Quả hạt Sâm cau Hình 3.1 Mẫu Sâm cau đưa vào ni cấy in vitro 18 Hình 3.2 Growmore (N: P: K = 30: 10: 10) 19 Hình 3.3 B1 Thái Lan 19 Hình 3.4 Atonik 1.8 SL 19 Hình 4.1 Ảnh hưởng chất khử trùng H2O2 đến tỷ lệ mẫu sống .28 Hình 4.2 Ảnh hưởng chất khử trùng NaOCl đến tỷ lệ mẫu sống 29 Hình 4.3 Mẫu nảy chồi sau tuần nuôi cấy 30 Hình 4.4 Ảnh hưởng nồng độ TDZ đến số chồi 32 mẫu cấy ban đầu .32 Hình 4.5 Ảnh hưởng tổ hợp nồng độ (TDZ+IBA) đến 34 số chồi Sâm cau 34 Hình 4.6 Ảnh hưởng tổ hợp (TDZ + IBA) đến khả nhân nhanh chồi Sâm cau 35 Hình 4.7 Ảnh hưởng AgNO3 đến số chồi Sâm cau 38 Hình 4.8 Ảnh hưởng tảo Spirulina đến số chồi Sâm cau 39 Hình 4.9 Kết nhân nhanh chồi Sâm cau 41 Hình 4.10 Ảnh hưởng IBA đến tạo in vitro hoàn chỉnh .44 Hình 4.11 Cây in vitro hồn chỉnh 44 Hình 4.12 Cây Sâm cau đưa ngồi vườn ươm .46 Hình 4.13 Ảnh hưởng giá thể trồng khác đến tỷ lệ sống .51 Sâm cau in vitro giai đoạn vườn ươm 51 Hình 4.14 Sâm cau giai đoạn vườn ươm 56 luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom vii luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom c luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Thị Bình Tên luận văn: Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitro trồng Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) vườn ươm Ngành: Khoa học trồng Mã số: 8620110 Tên sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitro trồng Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) vườn ươm nhằm cung cấp giống Sâm cau phục vụ phát triển sản xuất Phương pháp nghiên cứu Nội dung nghiên cứu: - Nghiên cứu khử trùng tạo vật liệu khởi đầu cho nuôi cấy in vitro Sâm cau - Nghiên cứu nhân nhanh chồi Sâm cau - Nghiên cứu tạo in vitro hoàn chỉnh - Nghiên cứu kỹ thuật trồng Sâm cau vườn ươm Vật liệu nghiên cứu bao gồm: Cây Sâm cau thu thập Sơn La Phương pháp nghiên cứu: Phương pháp bố trí thí nghiệm phịng thí nghiệm: Các thí nghiệm bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên (CRD) với lần nhắc lại Phương pháp bố trí thí nghiệm vườn ươm: Các thí nghiệm bố trí theo khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCBD) với lần nhắc lại Kết thảo luận Khử trùng mẫu Sâm cau nuôi cấy thích hợp sử dụng NaOCl nồng độ 2% khoảng thời gian 15 phút, tỷ lệ mẫu sống đạt tới 81,0% Môi trường khởi động tạo vật liệu khởi đầu thích hợp mơi trường MS + 30 g/1 sucrose + 5,5 g/1 agar + 200 ml/l nước dừa + g/l than hoạt tính + 1,5 mg/l TDZ, pH 5,5 cho số chồi đạt 3,1 chồi; số lá/chồi đạt 2,7 lá, chồi sinh trưởng mức độ sau tuần nuôi cấy Môi trường nhân nhanh chồi thích hợp mơi trường MS + 30 g/1 sucrose + 5,5 g/1 agar + 200 ml/l nước dừa + g/l than hoạt tính + 1,5 mg/l TDZ + 0,5 mg/l IBA + 1,0 mg/l AgNO3 + 50 mg/l tảo Spirulina, pH 5,5 cho tỷ lệ mẫu tạo chồi đạt 80,9%; số chồi đạt luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom viii luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom c luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom 20,8 chồi; số lá/chồi đạt 5,2 lá, chồi mập, cứng, xanh bóng sau tuần ni cấy Tạo hồn chỉnh in vitro thích hợp môi trường MS + 30 g/1 sucrose + 5,5 g/1 agar + 200 ml/l nước dừa + g/l than hoạt tính + 0,5 mg/l IBA, pH 5,5 cho cho tỷ lệ chồi rễ đạt 100%, chiều cao đạt cao 11,8cm; số 7,2 lá; số rễ đạt 10,3 rễ chiều dài rễ đạt 5,1cm sau tuần nuôi cấy Khả sống phát triển Sâm cau đưa từ ống nghiệm nuôi cấy mô vườn ươm phụ thuộc chặt chẽ vào giá thể trồng loại phân bón + Giá thể thích hợp giá thể Mùn rừng + Vụn xơ dừa (70:30) cho tỷ lệ sống tiêu sinh trưởng phát triển đạt cao đạt 97,8%; chiều cao đạt 16,4cm; số đạt 6,6 lá; số rễ xuất 6,4 rễ; khỏe, mập, to xanh đậm sau 10 tuần trồng + Ở giai đoạn vườn ươm dùng phân bón Growmore Mỹ (30:10:10) phun 1lần/tuần cho sinh trưởng phát triển tốt nhất, mập khỏe màu xanh bóng Chiều cao đạt cao 22,6 cm; số đạt 11,0 số rễ đạt cao 9,7 rễ luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom ix luan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uomluan.van.thac.si.nghien.cuu.ky.thuat.nhan.giong.in.vitron.va.trong.cay.sam.cau.curculigo.orchioids.gaertn.trong.vuom.uom c