luận văn thạc sĩ nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà vịt đối với vaccine h5n1 tại 03 huyện tĩnh gia quảng xương

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN LƯƠNG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACCINE H5N1 TẠI 03 HUYỆN TĨNH GIA, QUẢNG XƯƠNG, NHƯ THANH TỈNH THANH HÓA, BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - 2015 n ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN LƯƠNG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACCINE H5N1 TẠI 03 HUYỆN TĨNH GIA, QUẢNG XƯƠNG, NHƯ THANH TỈNH THANH HÓA, BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ Ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Giảng viên hướng dẫn: PGS TS ĐẶNG XUÂN BÌNH THÁI NGUYÊN - 2015 n i LỜI CẢM ƠN Trong trình thực đề tài, tơi nhận giúp đỡ nhiệt tình, quý báu nhiều cá nhân tập thể tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận văn Trước hết xin bày tỏ cảm ơn trân trọng tới giảng viên hướng dẫn khoa học PGS TS Đặng Xuân Bình người tận tình hướng dẫn, bảo tơi suốt thời gian thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn góp ý thầy giáo khoa Chăn nuôi Thú y, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho thực đề tài Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Trung tâm Chẩn đoán Thú y Vùng (Vinh), Cục thú y Trung ương, Ban lãnh đạo Chi cục Thú y tỉnh Thanh Hóa, Ban lãnh đạo Trạm thú y huyện Tỉnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tạo điều kiện giúp đỡ q trình học tập thực đề tài Tơi xin cảm ơn gia đình người thân, cán bộ, đồng nghiệp luôn động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Thái Ngun, ngày 20 tháng năm 2015 TÁC GIẢ LUẬN VĂN Lê Văn Lương n ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực, lần triển khai địa bàn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh, tỉnh Thanh Hóa chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn Thái Nguyên, ngày 20 tháng năm 2015 TÁC GIẢ LUẬN VĂN Lê Văn Lương n iii MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu 3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn .3 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung cúm gia cầm 1.2 Tình hình dịch cúm gia cầm giới nước .5 1.2.1 Tình hình dịch cúm gia cầm giới 1.2.2 Tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam 1.2.3 Tình hình dịch cúm gia cầm Thanh Hóa 1.3 Đặc điểm sinh học virus cúm type A 1.3.1 Đặc điểm cấu trúc chung virus thuộc họ Orthomyxoviridae 1.3.2 Đặc điểm hình thái, cấu trúc virus cúm type A 10 1.3.3 Đặc tính kháng nguyên virus cúm type A 11 1.3.4 Thành phần hóa học virus .13 1.3.5 Quá trình nhân lên tác động gây bệnh virus 13 1.3.6 Độc lực virus 14 1.3.7 Danh pháp .15 1.3.8 Phân loại virus 15 1.3.9 Nuôi cấy lưu giữ virus cúm gà 16 1.3.10 Miễn dịch chống bệnh cúm gia cầm .16 1.4 Dịch tễ học bệnh cúm gia cầm 20 1.4.1 Phân bố dịch 20 1.4.2 Động vật cảm nhiễm .20 1.4.3 Động vật mang virus .21 1.4.4 Sự truyền lây 22 1.4.5 Sức đề kháng virus cúm 23 1.5 Triệu chứng, bệnh tích bệnh cúm gia cầm 23 1.5.1 Triệu chứng lâm sàng bệnh cúm gia cầm 23 n luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong iv 1.5.2 Bệnh tích bệnh cúm gia cầm 24 1.6 Chẩn đoán bệnh 25 1.7 Kiểm soát bệnh 26 1.8 Vaccine phòng bệnh cúm gia cầm .27 1.8.1 Các loại vaccine phòng bệnh cúm gia cầm 28 1.8.2 Một số loại vaccine phòng bệnh cúm gia cầm cách sử dụng .29 1.9 Nghiên cứu nước bệnh cúm gia cầm .30 Chương 2: NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .32 2.1 Nội dung nghiên cứu 32 2.1.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm phạm vi nước tỉnh Thanh Hóa giai đoạn 2012-2014 32 2.1.2 Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, vịt tiêm phòng vaccine H5N1 năm 2014 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa 32 2.1.3 Giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng vaccine type A H5N1 .32 2.1.4 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 33 2.2 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 33 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu .33 2.2.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu .33 2.3 Vật liệu nghiên cứu 33 2.4 Phương pháp nghiên cứu 33 2.4.1 Phương pháp điều tra dịch tễ học 33 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 .34 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm phạm vi nước tỉnh Thanh Hóa giai đoạn 2012-2014 44 3.1.1 Diễn biến bệnh cúm gia cầm giai đoạn từ 2012 đến 2014 phạm vi nước 44 luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong n luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong v 3.1.2 Tổng hợp tình hình bệnh cúm gia cầm H5N1 địa phương phạm vi nước năm 2014 45 3.1.3 Tình hình bệnh cúm type A H5N1 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh năm 2014 49 3.1.4 Tình hình bệnh cúm type A H5N6 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh năm 2015 49 3.1.5 Tình hình bệnh cúm gia cầm type A theo phương thức chăn nuôi huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 51 3.1.6 Tình hình gà mắc bệnh cúm gia cầm H5N1 theo quy mô đàn gia cầm năm 2014 53 3.2 Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, vịt tiêm phòng vaccine H5N1 năm 2014 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa 56 3.2.1 Kết tiêm phòng vaccine cúm cho đàn gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh .56 3.2.2 Giám sát lâm sàng đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm H5N1 57 3.2.3 Giám sát huyết học đàn gà sau tiêm phòng vaccine cúm H5N1 .59 3.2.4 Khảo sát đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vaccine cúm A H5N1 .63 3.3 Giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng vaccine type A H5N1 .65 3.4 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 66 3.4.1 Nguyên nhân dịch cúm gia cầm tiếp tục xảy địa phương 66 3.4.2 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm 67 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .69 5.1 Kết luận 69 5.2 Đề nghị .70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong n luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong vi DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ARN Acid ribonucleic Ct Cycle threshold Cs Cộng GMT Geometic Mean Titer H Hemagglutinin HPAI High Pathogenicity Avian Influenza KT Kiểm tra N Neuraminidase NNo & PTNN Nông nghiệp phát triển nông thôn OIE Office International Epizooties PBS Phosphate Buffered Saline RT - PCR Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction RTRT - PCR Real time Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction WHO World Health Organization XN Xét nghiệm luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong n luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong vii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Trình tự chuỗi mẫu dị Primer cho RTRT - PCR phát cúm gia cầm 38 Bảng 2.2 Chu kỳ nhiệt bước phiên mã ngược (RT) dùng cho Quiagen one step RT - PCR kit .41 Bảng 2.3 Chu kỳ nhiệt cho tổng hợp gen cặp mồi 41 Bảng 3.1: Kết điều tra tình hình bệnh cúm gia cầm giai đoạn 2012 – 2014 phạm vi nước .44 Bảng 3.2: Kết điều tra tình hình bệnh cúm gia cầm H5N1 địa phương năm 2014 .46 Bảng 3.3: Kết điều tra bệnh cúm gia cầm type A H5N1 năm 2014 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 49 Bảng 3.4: Kết điều tra bệnh cúm gia cầm type A H5N6 năm 2015 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 50 Bảng 3.5: Kết điều tra gia cầm mắc bệnh cúm gia cầm type A H5N1 năm 2014 theo phương thức chăn nuôi 51 Bảng 3.6: Kết điều tra gia cầm mắc bệnh cúm gia cầm type A H5N6 năm 2015 theo phương thức chăn nuôi 52 Bảng 3.7: Kết điều tra tình hình gà ni Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh năm 2014 mắc cúm gia cầm type A H5N1 theo quy mô đàn .54 Bảng 3.8: Kết điều tra tình hình gà, vịt nuôi Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh năm 2015 mắc cúm gia cầm type A H5N6 theo quy mô đàn .55 Bảng 3.9: Kết tiêm phòng vaccine cúm H5N1 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa năm 2014 56 Bảng 3.10: Kết theo dõi độ an toàn vaccine cúm H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET-Vifluvac) đàn gia cầm tiêm phòng 58 Bảng 3.11: Kết giám sát đàn gia cầm trước tiêm vaccine H5N1 59 Bảng 3.12: Hiệu giá kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET-Vifluvac) 60 luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong n luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong viii Bảng 3.13: Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 63 Bảng 3.14: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt tiêm vaccine cúm A H5N164 Bảng 3.15: Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt tỉnh tiêm vaccine cúm A H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET- Vifluvac) qua thời điểm .65 Bảng 3.16: Kết giám sát lưu hành virus cúm type A H5N1 đàn gà tiêm phòng vaccine 66 luan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuongluan.van.thac.si.nghien.cuu.mot.so.dac.diem.dich.te.benh.cum.gia.cam.va.dap.ung.mien.dich.cua.ga.vit.doi.voi.vaccine.h5n1.tai.03.huyen.tinh.gia.quang.xuong n