luận văn thạc sĩ nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của chó được tiêm vacxin vô hoạt care

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ĐỖ VĂN ĐỨC NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA CHÓ ĐƯỢC TIÊM VACXIN VÔ HOẠT CARE Chuyên ngành : Thú y Mã số : 60 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Thị Lan NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NƠNG NGHIỆP - 2016 c LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan rằng, giúp đỡ cho việc thực luận văn thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng 11 năm 2016 Tác giả luận văn Đỗ Văn Đức i c LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài này, cố gắng thân, tơi cịn nhận nhiều quan tâm giúp đỡ thầy cô giáo, gia đình, bạn bè đồng nghiệp Trước hết tơi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thị Lan tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Lời cảm ơn chân thành xin gửi tới thầy cô giáo môn Bệnh Lý - Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam giúp đỡ, tạo điều kiện suốt thời gian học tập thời gian thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè đồng nghiệp giúp đỡ động viên suốt thời gian qua Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng 11 năm 2016 Tác giả luận văn Đỗ Văn Đức ii c MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Trích yếu luận văn …………………………………………………………………………ix Thesis Abstract .x Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục đích đề tài Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Một số đặc điểm sinh lý chó 2.1.1 Thân nhiệt (0C) 2.1.2 Tần số hô hấp (số lần thở/phút) 2.1.3 Tần số tim (lần/phút) 2.2 Bệnh Care chó 2.2.1 Khái niệm, lịch sử địa dư bệnh Care chó 2.2.2 Dịch tễ học……………………………………………… ………………………….6 2.2.3 Cơ chế sinh bệnh 2.2.4 Triệu chứng, bệnh tích 11 2.2.5 Chẩn đoán 14 2.2.6 Phòng điều trị 16 1.3 Ứng dụng vacxin để phòng bệnh Care 17 Phần Đối tƣợng, địa điểm, nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.1 Đối tượng nghiên cứu 19 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 19 3.1.2 Nguyên liệu 19 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 19 3.3 Nội dung nghiên cứu 19 iii c luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care 3.3.1 Nghiên cứu lựa chọn chó thí nghiệm cho tiêm vacxin vơ hoạt Care 19 3.3.2 Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch chó tiêm vacxin vơ hoạt Care 19 3.4 Phương pháp nghiên cứu 20 3.4.1 Phương pháp tiêm vacxin vô hoạt CDV -VNUA-768 cho chó thí nghiệm 20 3.4.2 Quan sát, khám lâm sàng 21 3.4.3 Phương pháp lấy máu để kiểm tra tiêu 22 3.4.4 Xác định hàm lượng kháng thể có máu 22 3.4.5 Phương pháp RT – PCR 23 2.4.6 Phương pháp công cường độc 23 3.4.7 Phương pháp xử lý số liệu 24 Phần Kết thảo luận 25 4.1 Kết nghiên cứu lựa chọn chó thí nghiệm cho tiêm vacxin vô hoạt Care 25 4.1.1 Hàm lượng kháng thể kháng CDV chó thí nghiệm 25 4.1.2 Kiểm tra có mặt virus CDV số virus khác thể chó trước tiến hành thí nghiệm 25 4.2 Kết nghiên cứu đáp ứng miễn dịch chó tiêm vacxin vơ hoạt Care chủng CDV - VNUA - 05 26 4.2.1 Kết kiểm tra kháng thể kháng CDV chó tiêm vacxin vơ hoạt Care 26 4.2.2 Kết theo dõi số tiêu lâm sàng chó tiêm vacxin vơ hoạt Care sau thử thách cường độc 29 4.3 Kết qua theo dõi số tiêu phi lâm sàng chó tiêm vacxin vơ hoạt Care sau thử thách cường độc 47 4.3.1 Kết kiểm tra hàm lượng kháng thể 47 4.3.2 Kết kiểm tra thải virus care chó sau thử thách cường độc 49 Phần Kết luận kiến nghị 50 5.1 Kết luận 50 5.2 Kiến nghị 50 Một số hình ảnh trình nghiên cứu 54 Tài liệu tham khảo 55 iv luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care c luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ đầy đủ ARN Acid Ribonucleic BC Bạch cầu CDV Canine Distemper Virus CD Canine Distemper CPE Cytopathogenic Effect cDNA complement Acid Deoxyribo Nucleic DNA Acid Deoxyribo Nucleic IgG Immunoglobulin G Lepto Leptospira RT Reverse Transcription RT - PCR Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction DMEM Dulbecco’s Modified Eagle Medium FCS Fetal calf serum mRNA Messenger Axít ribonucleic OD Độ hấp thụ quang v luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care c luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa máu chó khỏe Bảng 3.1 Hồ sơ chó thí nghiệm 20 Bảng 3.2 Bảng bố trí lơ thí nghiệm sử dụng chủng vacxin CDV 21 vô hoạt cho chó thí nghiệm 21 Bảng 4.1 Hàm lượng kháng thể kháng CDV chó thí nghiệm 25 Bảng 4.2 Kết xét nghiệm có mặt virus Care 26 số virus khác phương pháp RT – PCR 26 Bảng 4.3 Hàm lượng kháng thể chó sau tiêm 27 vacxin vô hoạt Care 27 Bảng 4.4 Thân nhiệt chó thí nghiệm sau thử thách cường độc 29 Bảng 4.5 Tần số hơ hấp chó thí nghiệm sau 32 thử thách cường độc 32 Bảng 4.6 Tần số tim mạch chó thí nghiệm sau 35 thử thách cường độc 35 Bảng 4.7 Kết khảo sát tiêu bạch cầu công thức bạch cầu 38 chó sau thử thách cường độc 38 Bảng 4.8 Kết khảo sát số tiêu hệ hồng cầu 41 chó sau thử thách cường độc 41 Bảng 4.9 Triệu chứng lâm sàng chó sau thử thách cường độc 44 Bảng 4.11 Nghiên cứu thải virus Care chó tiêm vacxin vô hoạt Care sau công cường độc 49 vi luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care c luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care DANH MỤC HÌNH Hình 4.1 Đồ thị biểu diễn biến động hàm lượng kháng thể sau tiêm vacxin vô hoạt Care chó thí nghiệm chó đối chứng 27 Hình 4.2 Đồ thị thể thân nhiệt chó thí nghiệm 30 sau thử thách cường độc 30 Hình 4.3 Đồ thị thể tần số hơ hấp chó thí nghiệm 33 sau thử thách cường độc 33 Hình 4.4 Tần số tim mạch chó thí nghiệm sau thử thách cường độc 36 Hình 4.5 Chó chảy dịch mũi xanh……………………………………………… …….…47 Hình 4.6 Gan bàn chân sừng hóa……………………………………………… ……….47 Hình 4.7 Nốt sài vùng da bụng………………………………………………………….48 Hình 4.8 Mắt đầy dử 48 Hình 4.9 Chó ỉa chảy phân màu cà phê…………………………………………… …….48 Hình 4.10 Chó có triệu chứng thần kinh (Liệt chân sau)……………………………….48 Hình 4.11 Đồ thị biểu diễn biến động hàm lượng kháng thể chó thí nghiệm chó đối chứng sau thử thách cường độc 48 vii luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care c luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Đỗ Văn Đức Tên luận văn: “Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch chó tiêm vacxin vơ hoạt Care” Mã số: 60 64 01 01 Ngành: Thú y Tên sở đào tạo: Học Viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Đánh giá khả kích thích sản sinh kháng thể kháng CDV vacxin vơ hoạt Care chó Đánh giá số tiêu lâm sàng phi lâm sàng chó tiêm vacxin vơ hoạt Care sau cơng cường độc Từ góp phần cung cấp thơng tin khoa học việc sản xuất vacxin phòng bệnh care quy mô lớn Việt Nam Phƣơng pháp nghiên cứu chó Beagle tuần tuổi chia thành lơ (lơ thí nghiệm lơ đối chứng) Sử dụng phương pháp nghiên cứu: tiêm vacxin vô hoạt Care, quan sát, khám triệu chứng lâm sàng, lấy máu để xét nghiệm, phương pháp ELISA, phương pháp RT – PCR, phương pháp công cường độc Kết kết luận Kháng thể xuất máu chó sau 21 ngày tiêm vacxin tiếp tục trì sau 69 ngày theo dõi Chỉ tiêu lâm sàng chó tiêm vacxin vơ hoạt Care sau cơng cường độc có tăng nhẹ thân nhiệt, sau ổn định trở lại sau 10 ngày Tần số hô hấp tim mạch, tiêu huyết học (hồng cầu, bạch cầu), tiêu lâm sàng khác trạng thái sinh lý bình thường Hàm lượng kháng thể kháng CDV tăng cao sau công cường độc chó tiêm vacxin vơ hoạt Care Virus Care cường động khơng có khả gây bệnh cho chó tiêm vacxin vô hoạt CDV-VNUA-05 thải nhanh so với chó khơng tiêm viii luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care c luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care THESIS ABSTRACT Master candidate: Do Van Duc Thesis title: Studying the immune response of the vaccinated dogs inactivated Care Major: veterinary Code: 60.64.01.01 Educational organization: Vietnam National University of Agriculture (VNUA) Research Objectives Assessing the ability to stimulate the production of antibodies to CDV of inactivated vaccine in dogs Care T he rating was an indicator of clinical and non-clinical inactivated vaccinated dog Care after the toxic intensity These results would help provide scientific information in the care preventive vaccine production on a large scale in Vietnam Materials and Methods Beagle dogs weeks old were divided into treatments (experimental group and the control group) Using the methodology: inactivated vaccine Care, observation, examination of clinical symptoms, blood drawn for testing, ELISA, RT - PCR methods, methods of authoritarian power Main findings and conclusions Antibodies appear in the blood of vaccinated dogs after 21 days and continued monitoring after 69 days Clinical indicators of dogs were vaccinated inactivated virulent Care after a slight increase in body temperature, then stabilized again after 10 days The frequency of respiratory and cardiovascular, hematologic indicators (red blood cells, white blood cells) and other clinical indicators were in the normal physiological state CDV antibody concentrations increased after the toxic intensity in dogs vaccinated inactivated Care Momentum Care virus unable to cause disease in vaccinated dogs inactivated CDV-VNUA-05 and was eliminated faster than the non-vaccinated dogs ix luan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.careluan.van.thac.si.nghien.cuu.dap.ung.mien.dich.cua.cho.duoc.tiem.vacxin.vo.hoat.care c