Tóm tắt luận án Tiến sĩ Y học: Nghiên cứu đa hình gen TNF-α–308 và TGF-β1-509 ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan có HBsAg dương tính

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y PHAN THỊ HIỀN LƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐA HÌNH GEN TNF - α – 308 VÀ TGF- β1 509 Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN CĨ HBsAg DƯƠNG TÍNH Chun ngành: Nội khoa Mã số: 72 01 07 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2020 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI HỌC VIỆN QUÂN Y Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Bá Vượng PGS.TS Trần Việt Tú Phản biện 1: PGS TS Vũ Văn Khiên Phản biện 2: GS TS Nông Văn Hải Phản biện 3: PGS TS Hoàng Thanh Tuyền Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp trường họp Học viện Quân y vào hồi: ngày tháng Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc Gia Thư viện Học viện Quân Y năm ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư biểu mô tế bào gan (UTBMTBG) bệnh lý ác tính hay gặp có ngun nhân nhiễm viêm gan virus B (HBV) mạn Đây loại ung thư có tiên lượng xấu với thời gian sống thêm ngắn, liên quan đến chẩn đoán sớm cịn nhiều hạn chế Đa hình gen (SNP: Single nucleotide polymorphism) vật chủ đóng vai trị quan trọng, định đáp ứng miễn dịch thể nhiễm HBV, ảnh hưởng đến trình hình thành UTBMTBG Nghiên cứu đa hình gen giúp phân tầng đối tượng nguy cơ, cải thiện phát sớm, tăng điều trị Gần đây, nhiều nghiên cứu cho thấy điểm đa hình TNF- αα α- α308 αG>A αvà TGF–β1β1-509 αC>T liên quan đến tăng nguy bị UTBMTBG Người mang alen A TNF- αα α–β1 α308 G>A, αalen αT αcủa αTGF–β1β1- α509 αC>T tăng nguy bị UTBMTBG cao người mang alen cịn lại Các điểm đa hình αảnh hưởng đến tiến triển UTBMTBG thơng qua việc kiểm sốt nồng độ cytokine tương ứng Trong vi môi trường sinh u cytokine tương tác, hỗ trợ, tăng cường tác dụng Việt Nam quốc gia có tỷ lệ nhiễm HBV mắc UTBMTBG cao với hậu vô nặng nề Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng điểm đa hình với nguy UTBMTBG Vì vậy, đề tài “Nghiên cứu đa hình gen TNF-α-308 G>A TGF-β1-509C>T bệnh nhân UTBMTBG có HBsAg dương tính” tiến hành với mục tiêu: Xác αđịnh αtỷ αlệ αkiểu αgen αvà αalen αcủa α2 αđiểm αđa αhình αgen TNF-α –β1 α308, αTGF-β1-509 αở αbệnh αnhân αUTBMTBG αcó αHBsAg α(+) Phân αtích αmối αliên αquan αcủa αđa αhình αgen αTNF-α α–β1 α308, αTGFβ1- α509 αvới αnguy αcơ αUTBMTBG αvà αmột αsố αđặc αđiểm αlâm αsàng, cận αlâm αsàng αcủa αbệnh αnhân αUTBMTBG αcó αHBsAg α(+) * Những đóng góp luận án - Là cơng trình Việt Nam nghiên cứu tỷ lệ kiểu gen, alen TNF-α α–β1 α308 αG>A, αTGF–β1β1- α509 αC>T αtrên αngười khỏe mạnh, viêm gan B mạn UTBMTBG có HBsAg (+) * αTNF-α α–β1 α308 αG>A + Kiểu gen AA xuất nhóm UTBMTBG 0,98%, tỷ lệ alen A TNF- αα α–β1 α308 thấp người khỏe mạnh chiếm 5,4%, có tương đồng với quần thể người châu Á + αTỷ lệ alen A nhóm khỏe mạnh, VGBM UTBMTBG 5,4%, 5,83% 13,2% Có khác biệt tỷ lệ kiểu gen GG, GA, kiểu alen nhóm UTBMTB so với khỏe mạnh, VGMT * αTGF–β1β1- α509 αC>T + Tỷ lệ alen T nhóm khỏe mạnh, VGBM UTBMTBG 52,9%; 61,67%; 63,24% Có khác biệt tỷ lệ alen nhóm UTBMTBG khỏe mạnh - Đề tài alen A, kiểu gen chứa alen A TNF- αα α-308 tăng nguy bị UTBMTBG so với alen G kiểu gen chứa alen G Alen T, kiểu gen chứa alen T TGF-β1-509 tăng nguy bị UTBMTBG so với alen C kiểu gen chứa alen C Hai điểm đa hình gen tương tác hiệp đồng gây tăng nguy bị UTBMTBG * Bố cục luận án Luận án gồm 113 trang (chưa kể tài liệu tham khảo phụ lục) đó: Đặt vấn đề 02 trang; Chương Tổng quan 31 trang; Chương Đối tượng phương pháp nghiên cứu 17 trang; Chương Kết nghiên cứu 30 trang; Chương Bàn luận 30 trang; Kết luận 02 trang; Kiến nghị 01 trang Luận án có 46 bảng, 23 hình 125 tài liệu tham khảo (14 tài liệu tiếng Việt 111 tài liệu tiếng Anh) CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương ung thư biểu mô tế bào gan UTBMTBG loại ung thư đứng hàng thứ 10 loại ung thư phổ biến toàn cầu Nằm khu vực Đơng Nam Á, điểm nóng giới UTBMTBG, Việt Nam có tỷ lệ mắc bệnh cao Tương ứng với tỷ lệ mắc tử vong cao UTBMTBG, thực trạng nhiễm HBV đáng lo ngại, theo Robert G.G cs (2011) Việt Nam quốc gia có tỷ lệ nhiễm HBV cao giới với gần 12% người có HBsAg (+), khoảng 10 triệu người chung sống với HBV mạn Năm 2018, GLOBOCAN công bố tỷ lệ mắc UTBMTBG chuẩn theo tuổi (ASRI) tính chung cho hai giới Việt Nam 23,2 xếp thứ tồn cầu UTBMTBG có mối liên quan chặt chẽ với nhiễm HBV Tuy nhiên, thực tế bệnh nhân nhiễm HBV phát triển thành UTBMTBG Do đó, HBV thể vật chủ có vai trị quan trọng, tương tác với gây nên bệnh cảnh cuối 1.2 Khái niệm đa hình nucleotide đơn (SNP) Bộ gen người, phần lớn bảo tồn trình tiến hóa, 99,5% số gen hai cá thể giống hệt nhau, khác biệt chiếm 0,1% - 0,5% Đây điểm mấu chốt tạo cá thể có đặc điểm, tính trạng khác (hình dạng, bệnh di truyền …) Nhiều yếu tố hệ gen góp phần tạo nên khác biệt trên, SNP đóng vai trị quan trọng SNP định nghĩa thay đổi base đơn lẻ chuỗi trình tự DNA, thay đổi chiếm tỉ lệ ≥ 1% cộng đồng lớn tiếp tục di truyền SNP nằm vùng khác gen, vùng khởi động gen (promoter), đóng vai trị quan trọng giúp kiểm sốt bắt đầu mức độ chép gen Gen αTNF-α α–β1 α308 αG>A Gen TNF-α (Tumor necrosis factor - alpha) nằm locus 21.3 nhánh ngắn NST (6p21.3), gen TNF-α có nhiều điểm đa hình Trong đó, điểm đa hình vị trí -308 vùng khởi động có vai trị quan trọng SNP có alen: alen G alen A, alen A chiếm tỷ lệ thấp Tỷ lệ kiểu gen alen đa hình đơn TNF-α 308G>A αđa dạng quần thể khác Gen TGF-β1- α509C>T Gen TGF-β1 α(Transforming Growth Factor, Beta 1) nằm nhánh dài NST số 19 (19q13.1-13.3) Nhiều điểm đa hình đơn xác định gen TGF-β1, SNP vị trí C-509T thuộc vùng khởi động gen điểm đa hình quan trọng liên quan đến khả chép gen, sản xuất TGF β huyết tương Tỷ lệ kiểu alen gen TGFβ1 α–β1 α509 αC>T đa dạng quần thể khác 1.3 TNFα-308G>A, TGF-β1-509C>T nguy ung thư biểu mô tế bào gan Gần hàng loạt nghiên cứu giới tiến hành cho thấy ảnh hưởng đa hình gen TNF-α -308 G/A, TGF-β1-509 αC>T αvới nguy viêm gan mạn UTBMTBG virus viêm gan, tác giả cho đa hình gen ảnh hưởng tới nguy UTBMTBG thơng qua việc kiểm sốt nồng độ TNFα, TGFβ huyết tương Gen αTNF-α -308 G/A Teixeira A.C cs (2013) nghiên cứu liên quan đa hình TNF-α -308 G/A với nguy bị UTBMTBG Brazil 120 bệnh nhân ung thư 202 người khỏe mạnh Kết tăng nguy UTBMTBG người mang alen A, gen GA TNF–β1 αα α–β1 α308 so với alen G gen GG (OR = 1,82; 95%CI = 1,07-3,08; p=0.0351), (OR = 2,51, 95%CI = 1,39-4,51; p = 0,0031) Tsai J F cs (2017) tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng TNF –β1 αα α–β1 α308 G/A với nguy UTBMTBG có liên quan HBV 200 UTBMTBG nhiễm HBV 200 BN xơ gan nhiễm HBV thấy người mang gen GA so với người mang gen GG tăng nguy UTBMTBG với OR = 2,34; 95% CI (1,29 – 4,25); p = 0,004 Gen TGF-β1-509C>T Ma J (2015) nghiên cứu 393 BN viêm gan C thấy nguy UTBMTBG cao bệnh nhân mang gen TT so CC với OR= 1,820, p = 0.036 hay người mang alen T so alen C tăng nguy ung thư 1,383, p = 0,028 Phối αhợp αTNFα-308G>A, αTGF-β1-509C>T α UTBMTBG bệnh phức tạp chịu tác động nhiều yếu tố, vai trị gen quan trọng, thực tế khơng SNP lý giải đầy đủ chế phức tạp bệnh, SNP đóng vai trị nhỏ diễn biến hình thành, phát triển bệnh Vì vậy, xu hướng nghiên cứu tổ hợp kiểu gen, kiểu alen SNP khác với nguy mắc bệnh, giúp phân tầng đối tượng nguy cơ, cải thiện phát sớm hiệu điều trị Bei C.H cs (2014) đánh giá tác dụng điểm SNP gen IL2, αIFN-γ, αIL-1β, α IL-6 IL10 với nguy UTBMTBG Trung Quốc 720 BN ung thư 784 người khỏe mạnh kết luận: không SNP gây tăng nguy ung thư, phân tích phối hợp điểm SNP thấy có tăng nguy ung thư với OR = 1,821; 95%CI = 1,078 - 3,075 Tác giả kết luận có tương tác SNP làm tăng nguy UTBMTBG El Din N.G cs (2017) đánh giá ảnh hưởng TNF-α α-308 TGF–β1β1–β1509 tiến triển xơ gan HCV thấy kết hợp TNFα-308 αAA TGF-β1-509 αTT so với kiểu TNF αGG + TGF αCC αtăng nguy xơ gan, OR = 6,4; 95%CI = 1,490 – 27,641; p = 0,013 Kết thấy có ảnh hưởng hiệp đồng gen riêng TNF-α tăng nguy xơ gan 2,8 lần, riêng TGF-β1 tăng nguy xơ gan 2,9 lần 1.4 Tình hình nghiên cứu đa hình gen TNFα – 308 G>A TGFβ1- 509 C>T Việt Nam Gần đây, vai trò điểm đa hình gen UTBMTBG bắt đầu nghiên cứu Việt Nam Tuy nhiên, tính đến theo chúng tơi biết chưa có nghiên cứu điểm đa hình TNF- αα- α308 TGF-β- α509 bệnh nhân UTBMTBG Dunstan S.J cs (2012) nghiên cứu 2350 người Việt Nam khỏe mạnh thấy tỷ lệ alen A TNF-α-308 chiếm 7% Trần Đình Trí (2017) nghiên cứu gen TNFα α–β1 α308 αG>A BN ung thư dày thấy tỷ lệ alen A 17,1% Như vậy, tỷ lệ alen A TNF-α α–β1 α308 quần thể người Việt Nam thấp, tương đồng với nước vùng châu Á Điểm đa hình TGF-β1- α509 αC>T nghiên cứu nhiều giới với vai trò định nhiều bệnh Tuy nhiên, quần thể người Việt Nam, chúng tơi cố gắng tìm kiếm chưa thấy nghiên cứu điểm đa hình công bố CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 102 BN UTBMTBG, 60 BN VGBM, 102 người khỏe mạnh 2.1.1 Nhóm bệnh Tiêu αchuẩn αchọn α α - Chẩn đoán xác định UTBMTBG theo hướng dẫn Bộ Y tế Việt Nam năm 2012, có tiêu chuẩn sau [20] + Bằng chứng giải phẫu bệnh lý mô bệnh học tế bào học + Hình ảnh điển hình CT ổ bụng có cản quang MRI ổ bụng có cản từ + αFP ≥ 400 ng/ml - Bệnh nhân có HBsAg (+) - Bệnh nhân lần chẩn đoán UTBMTBG Tiêu αchuẩn αloại αtrừ - Bệnh nhân nhiễm HIV - Bệnh nhân nhiễm HCV - Bệnh nhân nghiện rượu - Bệnh nhiễm độc gan thuốc, hóa chất - Ung thư gan di từ quan khác - Bệnh nhân cần sinh thiết gan để chẩn đốn có chống định sinh thiết gan (TC< 80 G/l, PT < 60%) 2.1.2 Nhóm chứng 2.1.2.1 Nhóm 1: 60 bệnh nhân viêm gan B mạn tính Tiêu αchuẩn αchọn: BN chẩn đốn VGBM theo hướng dẫn Bộ Y Tế Việt Nam 2014 - HBsAg (+) ≥ tháng HBsAg (+) Anti HBc IgG (+) - ALT, AST tăng đợt liên tục tháng - Có chứng tổn thương mô bệnh học tiến triển (xác định sinh thiết gan, đo độ đàn hồi gan Fibrotest) Tiêu αchuẩn αloại αtrừ: - Có tiền sử nghiện rượu, - Dùng thuốc gây nhiễm độc gan - Bệnh nhân nhiễm HCV - Bệnh nhân nhiễm HIV - BN có chống định sinh thiết gan (TC< 80 G/l, PT < 60%) 2.1.2.2 Nhóm 2: lựa chọn 102 người cho máu khỏe mạnh - Người cho máu có HBsAg (-), Anti HCV (-), Anti HIV (-) 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu: mô tả cắt ngang, bệnh chứng 2.2.2 Cỡ mẫu nghiên cứu Công thức: n = Z21-α/2 Theo Hu Q CS (2014) tỷ lệ alen A TNF-α α- α308 nhóm bệnh (10,2%), nhóm chứng (7,5%) Thay vào công thức trên, số bệnh nhân tối thiểu cần 97, nghiên cứu lấy n = 102 bệnh nhân 2.2.4 Cách thức tiến hành 2.2.4.1 Thu nhận bệnh nhân nhóm chứng  Đối tượng nghiên cứu khám lâm sàng, cận lâm sàng (huyết học, sinh hóa, vi sinh), theo bệnh án mẫu - Siêu αâm αổ αbụng: đánh giá nhu mô gan (VGBM) - CT αhoặc αMRI: đặc điểm u, huyết khối TMC, di - Sinh αthiết αvà αchẩn αđoán αmô αbệnh αhọc α + UTBMTBG: với khối u chưa điển hình UTBMTBG + VGBM: αđánh giá theo Metavir, chọn BN có kết F0-F3  Người khỏe mạnh α: 102 người cho máu BV Quân y 103 2.2.4.3 Phân tích gen TNF-α – 308 G>A TGF-β1 – 509C>T Giải trình tự gen trực tiếp α hệ thống ABI PRISM 3500 Trình tự tham chiếu gen lấy từ sở liệu Genbank α 2.2.5 Các số nghiên cứu 2.2.5.1 Đặc điểm nhóm nghiên cứu - αTuổi: αnhóm ≤ 40, 41-50, 51-60 , 61-70, > 70 tuổi, tuổi trung bình - αGiới: αnam, nữ; tỷ lệ nam/nữ - αTriệu αchứng: αlâm sàng, cận lâm sàng, giai đoạn bệnh - Chẩn αđoán αhình αảnh: αđặc điểm αu gan, huyết khối TMC, di - Đặc αđiểm αmơ αbệnh αhọc: αđộ biệt hóa UTBMTBG: cao, vừa, thấp 2.2.5.2 Tỷ lệ kiểu gen TNF-α – 308 G>A, TGF- β1 – 509 C>T - Gen αTNF-α α–β1 α308: tỷ lệ alen G, alen A, gen: AA, AG, GG - Gen αTGF- αβ1-509: tỷ lệ alen C, alen T, gen: CC, CT, TT - Hai αgen αphối αhợp αgen: GGCC, GGTT, GGCT, GACC, GATT, GACT, AACC, AATT, AACT 2.2.5.3 Mối tương quan TNF-α-308, TGF-β1-509 với nguy ung thư biểu mô tế bào gan đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng - So αsánh αtỷ αlệ αkiểu αgen, αalen: αTNF-α α–β1 α308 αG>A, αTGF- αβ1-509 αC>T nhóm nhóm nghiên cứu - Tính αnguy αcơ αmắc αUTBMTBG: kiểu gen, kiểu alen khác TNF-α α–β1 α308 αG>A, αTGF- αβ1-509 αC>T, phối hợp gen Chúng chia gen tốt tác dụng bảo vệ, gen xấu tăng nguy UTBMTBG Phối hợp gen: phối hợp tốt - có gen tốt đồng hợp tử, 11 Bảng 3.15 Kiểu gen alen TNF-α-308 nguy UTBMTBG (chứng người khỏe mạnh) UTBMTBG n=102 Khỏe mạnh n=102 OR (95%CI) p Kiểu gen (n) GG 76 91 Ref GA 25 11 2,721 (1,258 – 5,888) 0,009 AA - - GA + AA 26 11 2,830 (1,313 – 6,100) 0,006 Kiểu alen (2n) Alen G 177 193 Ref Alen A 27 11 2,676 (1,290 – 5,555) 0,006 (Viết αtắt: αRef- αReference) - Kiểu gen GA, kiểu (GA + AA) so với kiểu gen GG, tăng khả mắc UTBMTBG với OR = 2,721; 95% CI (1,258 – 5,888); p = 0,009 OR = 2,830; 95% CI (1,313 – 6,100); p = 0,006 - Người mang alen A có khả mắc UTBMTBG cao người mang alen G OR= 2,676; 95% CI (1,290 – 5,555); p = 0,006 Nhóm αchứng αlà αngười αkhông αUTBMTBG α(VGBM α+ αkhỏe αmạnh) Bảng 3.16 TNF-α-308G>A nguy UTBMTBG với nhóm chứng người khơng UTBMTBG (VGBM + khỏe mạnh) Kiểu gen alen UTBMTBG n = 102 Không ung thư n = 162 OR (95%CI) p Kiểu gen (n) GG 76 144 Ref GA 25 18 2,632 (1,351 – 5,125) 0,004 AA - - AA + AG 26 18 2,737 (1,412 – 5,306) 0,002 Kiểu alen (2n) 12 Alen G 177 306 Ref Alen A 27 18 2,593 (1,389 – 4,842) 0,002 - Kiểu gen GA, kiểu gen GA + AA So với kiểu gen GG tăng nguy UTBMTGB với OR = 2,632; 95% CI (1,351 – 5,125); p = 0,004 OR = 2,737; 95% CI (1,412 – 5,306); p = 0,002 - Alen A so với alen G khả nguy UTBMTBG với OR = 2,593; 95% CI (1,389 – 4,842); p = 0,002 Nhóm αchứng αlà αbệnh αnhân αVGBM Bảng 3.17 TNF- α- 308G>A nguy UTBMTBG với nhóm chứng bệnh nhân VGBM Kiểu gen, UTBMTBG VGBM alen n= 102 n= 60 OR (95%CI) p Kiểu gen (n) GG 76 53 Ref GA 25 2,491 (1,004 – 6,178) 0,044 AA - - AA + AG 26 2,590 (1,048 – 6,405) 0,035 Kiểu alen (2n) Alen G 177 113 Ref Alen A 27 2,462 (1,038 – 5,843) - 0,036 Kiểu gen GA, kiểu gen GA + AA so kiểu gen GG tăng khả mắc UTBMTBG với OR = 2,491; 95% CI (1,004 – 6,178); p = 0,044; OR = 2,590; 95% CI (1,048 – 6,405); p = 0,035 - Alen A có khả mắc UTBMTBG cao alen G có ý nghĩa với OR = 2,462; 95% CI (1,038 – 5,843); p = 0,036 3.2.1.2 Đa hình gen TNF-α-308 G>A triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng giai đoạn UTBMTBG Theo bảng 3.18, 3.19, 3.20, 3.21 3.22 khác biệt kiểu đa hình gen TNF-α-308 αG>A với số đặc điểm 13 lâm sàng, cận lâm sàng tuổi, đặc điểm khối u, tiểu cầu, αFP, HBV DNA, huyết khối TMC, di căn, giai đoạn UTBMTBG 4.3 Đa hình gen TGF-β1-509 C>T 4.3.1 Tỷ lệ kiểu gen, alen TGF-β1-509 C>T - Kiểu gen CT chiếm ưu nhóm nhóm UTBMTBG, VGBM người khỏe mạnh Alen T nhóm ung thư (63,24%), nhóm VGBM (61,67%), nhóm khỏe mạnh (52,94%) - Có khác biệt có ý nghĩa tỷ lệ alen nhóm UTBMTBG người khỏe mạnh với p = 0,035 4.3.2 Đa hình gen TGF-β1-509 C>T UTBMTBG 4.3.2.1.Đa hình gen TGF-β1-509 C>T nguy UTBMTBG Bảng 3.23 TGF-β1-509 C> T nguy UTBMTBG với nhóm chứng người khỏe mạnh Kiểu gen, UTBMTBG Khỏe mạnh alen n= 102 n= 102 OR (95%CI) p Kiểu gen (n) CC 14 23 Ref CT 47 50 1,544 (0,712 – 3,351) 0,270 TT 41 29 2,323 (1,026 – 5,258) 0,041 CC 14 23 Ref TT + CT 88 79 1,830 (0,881 – 3,799) CT + CC 61 73 Ref TT 41 29 1,692 (0,943 – 3,036) 0,102 0,077 Kiểu alen (2n) Alen C 75 96 Ref Alen T 129 108 1,529 (1,029 – 2,271) 0,035 - Kiểu gen TT so với gen CC tăng khả mắc UTBMTBG với OR = 2,323; 95% CI (1,026 – 5,258); p = 0,041 14 - Kiểu alen T so với alen C tăng khả mắc UTBMTBG với OR = 1,529; 95% CI (1,029 – 2,271); p = 0,035 Bảng 3.24 3.25: kiểu gen alen TGF-β1-509 không thấy ảnh hưởng đến nguy bị UTBMTBG, dùng nhóm chứng người khơng UTBMTBG, VGBM 4.3.2.2 Đa hình gen TGF-β1-509 C>T triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng giai đoạn UTBMTBG Theo bảng 3.26, 3.27, 3.28, 3.29 3.30 khơng có khác biệt kiểu đa hình gen TGF-β1-509 αC>T với số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng tuổi, đặc điểm khối u, tiểu cầu, αFP, HBV DNA, huyết khối TMC, di căn, giai đoạn UTBMTBG 4.4 Kết hợp đa hình gen TNF-α-308 G>A, TGF-β1-509 C>T Nhận thấy kiểu gen GG TNF-α-308 αG>A kiểu gen CC TGF-β1- α509 αC>T xuất nhiều hơn, có ý nghĩa nhóm khơng ung thư so với nhóm ung thư Kiểu gen chứa alen A TNF-α α–β1 308 kiểu gen chứa alen T TGF-β1- α 509 αtăng nguy UTBMTBG so với kiểu gen cịn lại Do chúng tơi xét GG kiểu gen tốt so với gen AA, CC kiểu gen tốt so với TT, chia xuất phối hợp hai gen sau: - Kiểu phối hợp tốt: gen tốt đồng hợp tử GG CC - Kiểu phối hợp trung bình: gen tốt đồng hợp tử GG CC - Kiểu phối hợp xấu: khơng có gen tốt đồng hợp tử 4.4.1 Mối liên quan đa hình gen TNF-α-308 G>A TGFβ1-509 C>T nguy UTBMTBG Nhóm αchứng αlà αngười αkhỏe αmạnh Bảng 3.31 Đa hình gen TNF-α – 308 G>A, TGF-β1-509 C> T nguy UTBMTBG với nhóm chứng người khỏe mạnh Kiểu gen, alen UTBMTBG n= 102 Khỏe mạnh n= 102 OR (95%CI) p 15 Tốt 23 Ref TB 72 68 2,706 (1,169 – 6,261) 0,017 Xấu 21 11 4,879 (1,688 – 14,098) 0,003 Nhóm αchứng αlà αngười αkhỏe αmạnh - Kiểu phối hợp TB, xấu tăng nguy UTBMTGB so với kiểu phối hợp tốt, OR = 2,706; 95%CI (1,169 – 6,261); p = 0,017 OR = 4,879; 95%CI (1,688 – 14,098); p = 0,003 Nhóm αchứng αlà αngười αkhơng αUTBMTBG α(VGBM α+ αkhỏe αmạnh) Bảng 3.32 Đa hình hai gen TNF-α-308 G>A, TGF-β1- 509 C> T nguy UTBMTBG với nhóm chứng người khơng ung thư Kiểu gen, alen UTBMTBG n= 102 Không ung thư (n= 162) OR (95%CI) Tốt 32 Ref TB 72 112 2,286 (1,031 – 5,070) 0,038 Xấu 21 18 4,148 (1,571– 10,956) 0,003 p - Kiểu phối hợp trung bình, xấu có khả mắc UTBMTGB cao phối hợp tốt với OR = 2,286; 95% CI (1,031 – 5,070); p = 0,038 OR = 4,148; 95% CI (1,571 – 10,956); p = 0,003 Nhóm chứng BN VGBM, khơng thấy liên quan nguy mắc UTBMTBG so sánh kiểu phối hợp gen, alen 4.4.2 Liên quan đa hình gen số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, giai đoạn UTBMTBG Theo bảng 3.34, 3.35, 3.36, 3.37, 3.38 không thấy ảnh hưởng phối hợp điểm đa hình với số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng tuổi, đặc điểm khối u, tiểu cầu, αFP, HBV DNA, huyết khối TMC, di căn, giai đoạn UTBMTBG CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 4.1 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân UTBMTBG 16 Bệnh nhân UTBMTBG có tuổi trung bình 57,4 ± 9,7 Người trẻ 37 tuổi, người lớn tuổi 80 tuổi Đa số bệnh nhân độ tuổi 51-70, chiếm 67,2% Tỷ lệ nam/nữ: 11,8/1 Tại thời điểm chẩn đốn số bệnh nhân khơng có triệu chứng chiếm 13,7% Kích thước trung bình tổng u: 10,80 ± 12,02 cm, u < cm có tỷ lệ thấp (29,4%), u > 10 cm có tỷ lệ cao (37,3%), huyết khối TMC (22.5%), di khác (19,6%) Các số cận lâm sàng dao động, αFP < 400 ng/ml (52,9%), HBV DNA ≥ 104 (66,7%) Đa số bệnh nhân thuộc giai đoạn Okuda II (58,8%), Barcelona B C (35,2%) (36,3%), bệnh nhân phát giai đoạn sớm Okuda I 36,3%, Barcelona A chiếm tỷ lệ thấp (27,5%) Như biết nhiễm HBV mạn yếu tố nguy quan trọng gây UTBMTBG, đối tượng nghiên cứu bệnh nhân UTBMTBG có HBsAg (+), thời điểm chẩn đốn có 49% bệnh nhân biết bị nhiễm HBV trước Những phân tích phản ánh khách quan, xác thực trạng quản lý UTBMTBG Việt Nam cịn yếu Kết có nguyên nhân từ hiểu biết người dân đến thiếu chương trình sàng lọc cần thiết cho đối tượng nguy cao người nhiễm HBV Kết luận tương tự nhận định Robert G (2012) nghiên cứu tình hình bệnh gan Việt Nam Kết cho thấy đa số bệnh nhân UTBMTBG chẩn đoán muộn Đây thực rào cản cho công tác điều trị, dẫn đến tiên lượng sống thêm bệnh nhân 4.2 Đa hình gen TNF-α-308 G>A 4.2.1 Tỷ lệ kiểu gen, alen TNF-α-308 G>A - Tỷ lệ kiểu gen GG ưu tất nhóm, cao nhóm khỏe mạnh, kiểu gen GA xuất cao nhóm UTBMTBG Có khác biệt tỷ lệ kiểu gen GG GA nhóm UTBMTBG với nhóm khỏe mạnh VGBM (p < 0,05) - Kiểu gen AA xuất nhóm UTBMTBG với tỷ lệ 0,98% 17 - Tỷ lệ alen A nhóm khỏe mạnh, VGBM UTBMTBG 5,4%, 5,83% 13,2% Có khác biệt tỷ lệ alen nhóm UTBMTB so với người khỏe mạnh VGBM (p < 0,05) - Dustan S J cs (2012) nghiên cứu 2350 người Việt Nam khỏe mạnh thấy tỷ lệ alen A 7% Sự khác biệt nhỏ kết chúng tơi Dustan tác giả thực nghiên cứu người Nam Việt Nam, lấy người khỏe mạnh Bắc Việt Nam Bên cạnh đó, Dunstan S.J chọn ngẫu nhiên người khỏe mạnh, không loại trừ trường hợp nhiễm virus HBV, HCV HIV Tác giả Li Z (2017) tiến hành phân tích gộp 7254 người khơng ung thư thấy tỷ lệ alen A người châu Á khỏe mạnh 6,44%, giống với tỷ lệ 5,4% - Kết tương đồng với Radwan M.I (2012) nghiên cứu 160 người khỏe mạnh, 152 BN xơ gan viêm gan C 128 BN UTBMTBG có viêm gan C Ai Cập thấy: tỷ lệ alen A nhóm ung thư cao 19,5%, xơ gan 15,8%, khỏe mạnh 7,5% Tỷ lệ kiểu gen GG nhóm khỏe mạnh 85%, xơ gan 71,1% ung thư 64,1% Kiểu gen AG + AA xuất thấp khỏe mạnh 15%, cao nhóm xơ gan 28,9% ung thư 35,9% Tỷ lệ kiểu gen, alen nhóm đạt khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,001 4.2.1 Đa hình gen TNF-α-308 G>A liên quan đến UTBMTBG Nhóm αchứng αlà αngười αkhỏe αmạnh: - Người mang kiểu gen GA có khả mắc UTBMTGB cao người mang kiểu gen GG với OR = 2,721; 95% CI (1,258 – 5,888); p = 0,009 Gen GA + AA so với GG, tăng khả mắc UTBMTBG với OR = 2,830; 95% CI (1,313 – 6,100); p = 0,006 Người mang alen A có khả mắc UTBMTBG cao người mang alen G, OR= 2,676; 95% CI (1,290 – 5,555); p = 0,006 Nhóm αchứng αlà αngười αkhông αUTBMTBG α(VGBM α+ αkhỏe αmạnh): 18 - Kiểu gen GA tăng nguy UTBMTGB so với kiểu gen GG với OR = 2,632; 95% CI (1,351 – 5,125); p = 0,004 Kiểu gen GA AA, tăng nguy UTBMTBG so với kiểu gen GG, với OR = 2,737; 95% CI (1,412 – 5,306); p = 0,002 Alen A có khả UTBMTBG cao alen G với OR = 2,593; 95% CI (1,389 – 4,842); p = 0,002 Kết tương tự Feng H cs (2014) nghiên cứu Trung Quốc 753 BN UTBMTBG 760 người không ung thư thấy gen AA so với GG liên quan đến tăng nguy UTBMTBG (OR= 5,12; 95% CI = 2,31 – 7,82) Kiểu gen AG + AA tăng nguy UTBMTBG 5,59 Alen A so với alen G tăng nguy ung thư OR= 4,18; 95% CI = 1,76 – 6,97) Tác giả kết luận đa hình gen TNF-α –β1 α308 liên quan đến nguy UTBMTBG dân tộc Hán Nhóm αchứng αlà αbệnh αnhân αviêm αgan αB αmạn - Người mang gen GA so gen GG tăng nguy UTBMTGB với OR = 2,491; 95% CI (1,004 – 6,178); p = 0,044 Người mang gen GA AA so với gen GG, tăng khả mắc UTBMTBG, OR = 2,590; 95% CI (1,048 – 6,405); p = 0,035 Người mang alen A có khả mắc UTBMTBG cao người mang alen G, OR = 2,462; 95% CI (1,038 – 5,843); p = 0,036 Tsai J.F cs (2017) nghiên cứu Đài Loan 200 BN UTBMTBG nhiễm HBV 200 BN xơ gan HBV nhằm đánh giá ảnh hưởng TNF- αα α–β1 α308 LT-α α+252 với nguy UTBMTBG liên quan đến HBV thấy: gen AG tăng nguy ung thư so với gen GG (OR = 2,85, 95% CI = 1,60-5,6, p = 0,004) Tác giả cho HBV loại virus sinh ung thư, kích thích sản xuất TNFα Như vậy, nhiễm HBV mạn, thể vật chủ virus góp làm tăng sản xuất TNFα, từ tăng nguy UTBMTBG Xiao Q cs (2016) tiến hành phân tích gộp 12 nghiên cứu với 1580 UTBMTBG nhiễm HBV, 2033 người nhiễm HBV 1116