(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu sự biến động của một số chất có hoạt tính thẩm thấu trong cây đậu tương (glycine max (l ) merrill) chịu hạn qua các giai đoạn phát triển

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC QUY NHƠN NGUYỄN ĐOÀN HOÀNG VŨ NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỘNG CỦA MỘT SỐ CHẤT h CĨ HOẠT TÍNH THẨM THẤU TRONG CÂY ĐẬU TƯƠNG (Glycine max L Merrill) CHỊU HẠN QUA CÁC GIAI ĐOẠN PHÁT TRIỂN LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Bình Định - Năm 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC QUY NHƠN NGUYỄN ĐOÀN HOÀNG VŨ NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỘNG CỦA MỘT SỐ CHẤT h CĨ HOẠT TÍNH THẨM THẤU TRONG CÂY ĐẬU TƯƠNG (Glycine max L Merrill) CHỊU HẠN QUA CÁC GIAI ĐOẠN PHÁT TRIỂN Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 Người hướng dẫn: TS Trương Thị Huệ LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu mà tơi thực hướng dẫn khoa học TS Trương Thị Huệ Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Bình Định, tháng năm 2017 Học viên h Nguyễn Đoàn Hoàng Vũ LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài này, cố gắng phấn đấu thân, tơi cịn nhận nhiều giúp đỡ tận tình thầy cô, bạn bè Trước tiên xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến cô TS Trương Thị Huệ, Phó trưởng khoa Sinh – KTNN, tận tình hướng dẫn, động viên giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình thực đề tài để tơi hồn thành tiến độ trau dồi cho thân kiến thức chun mơn bổ ích phục vụ cho cơng việc sau Đồng thời, xin chân thành gởi lời cảm ơn đến Ban chủ nhiệm Khoa Sinh – KTNN, thầy cô giáo môn giảng dạy, truyền đạt cho kiến thức tảng để hồn thành đề tài Trân trọng cảm ơn gia đình, người thân bạn bè ln động viên, h giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành tốt luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn! Bình Định, tháng 08 năm 2017 Người thực Nguyễn Đoàn Hoàng Vũ MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu nghiên cứu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung đậu tương 1.1.1 Nguồn gốc phân loại đậu tương 1.1.2 Đặc điểm thực vật học đậu tương 1.1.3 Giá trị sử dụng đậu tương 1.1.4 Tình hình sản xuất đậu tương giới Việt Nam 1.2 Cơ sở sinh lý, hóa sinh tính chịu hạn 1.2.1 Ảnh hưởng hạn trồng h 1.2.2 Cơ sở sinh lý, hóa sinh sinh học phân tử tính chịu hạn 10 1.3 Vai trị hợp chất có hoạt tính thẩm thấu việc đánh giá khả chịu hạn 13 1.3.1 Proline vai trò proline 13 1.3.2 Glycine betaine vai trò glycine betaine 16 1.3.3 Các chất đường vai trò đường chế chống chịu hạn 16 1.3.4 Protein tổng số vai trò protein tổng số 18 1.4 Tình hình nghiên cứu tính chịu hạn đậu tương Thế giới Việt Nam 19 1.4.1 Tình hình nghiên cứu tính chịu hạn đậu tương giới 19 1.4.2 Nghiên cứu tính chịu hạn đậu tương Việt Nam 20 1.5 Kỹ thuật điện di protein gel polyacrylamide 21 1.5.1 Gel polyacrylamide có SDS (SDS – PAGE) 21 1.5.2 Chạy điện di nhuộm băng 23 Chương ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Đối tượng nghiên cứu 24 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 24 2.3 Hóa chất thiết bị 25 2.3.1 Hóa chất nguyên liệu khác 25 2.3.2 Thiết bị dụng cụ thí nghiệm 25 2.4 Nội dung nghiên cứu 25 2.4 Phương pháp nghiên cứu 26 2.4.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 26 2.4.2 Phương pháp xác đinh áp suất thẩm thấu 27 2.4.2 Các tiêu nghiên cứu phương pháp xác định 28 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 34 3.1 Sự biến động hàm lượng proline đậu tương trình gây hạn 34 h 3.1.1 Sự biến động hàm lượng proline trình gây hạn giai đoạn mầm 34 3.1.2 Sự biến động hàm lượng proline trình gây hạn giai đoạn non 37 3.1.3 Sự biến động hàm lượng proline trình gây hạn giai đoạn hoa 40 3.1.4 Sự biến động hàm lượng proline trình gây hạn giai đoạn tạo 43 3.2 Sự biến động hàm lượng đường khử đậu tương trình gây hạn 45 3.2.1 Sự biến động hàm lượng đường khử trình gây hạn giai đoạn mầm 45 3.2.2 Sự biến động hàm lượng đường khử trình gây hạn giai đoạn non 48 3.2.3 Sự biến động hàm lượng đường khử trình gây hạn giai đoạn hoa 50 3.2.4 Sự biến động hàm lượng đường khử trình gây hạn giai đoạn tạo 53 3.3 Sự biến động hàm lượng glycine betaine đậu tương trình gây hạn 56 3.3.1 Sự biến động hàm lượng glycine betaine trình gây hạn giai đoạn mầm 56 3.3.2 Sự biến động hàm lượng glycine betaine trình gây hạn giai đoạn non 58 3.3.3 Sự biến động hàm lượng glycine betaine trình gây hạn giai đoạn hoa 61 3.3.4 Sự biến động hàm lượng glycine betaine trình gây hạn giai đoạn tạo 63 3.4 Sự biến động hàm lượng protein tổng số đậu tương trình gây hạn 66 3.4.1 Sự biến động hàm lượng protein tổng số trình gây hạn giai đoạn mầm 66 3.4.2 Sự biến động hàm lượng protein tổng số trình gây hạn giai đoạn non 68 h 3.4.3 Sự biến động hàm lượng protein tổng số đậu tương giai đoạn hoa 71 3.4.4 Sự biến động hàm lượng protein tổng số giai đoạn tạo 73 3.5 Sự biến động phổ điện di protein tổng số đậu tương trình gây hạn qua giai đoạn phát triển 76 3.5.1 Kiểm tra protein tổng số tách chiết điện di gel polyacrylamide có SDS (PAGE-SDS) 76 3.5.2 Sự biến động phổ điện di protein tổng số đậu tương trình gây hạn giai đoạn non 77 3.5.3 Sự biến động phổ điện di protein tổng số đậu tương trình gây hạn giai đoạn hoa 79 3.5.4 Sự biến động phổ điện di protein tổng số đậu tương trình gây hạn giai đoạn tạo 81 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tổng lượng chất rắn APS Ammonium persulfate ASTT Áp suất thẩm thấu CBB – G250 Coomassie brilliant Blue – G250 ĐC Đối chứng Cs Cộng KHKT Khoa học kỹ thuật RADP Random amplified polymorphic DNA ROS Reactive oxygen species SDS Sodium dodecyl sunfate SDS – PAGE Sodium dodecyl sunfate - polyacrylamide gel electrophoresis TEMED N, N, N’, N’ – Tetramethylethylenediamine TN Thí nghiệm β – ME Beta – mecapthoethanol h %T DANH MỤC BẢNG Tên bảng Trang 1.1 Sản lượng đậu tương Việt Nam giai đoạn 20112015 2.1 Đặc điểm nông học giống đậu tương nghiên cứu 24 2.2 Thành phần gel cô gel tách acrylamide SDS – PAGE 31 3.1 Hàm lượng proline mầm đậu tương 34 3.2 Hàm lượng proline đậu tương giai đoạn non 38 3.3 Hàm lượng proline đậu tương giai đoạn hoa 41 3.4 Hàm lượng proline đậu tương giai đoạn tạo 43 3.5 Hàm lượng đường khử đậu tương giai đoạn mầm 46 3.6 Hàm lượng đường khử đậu tương giai đoạn non 48 3.7 Hàm lượng đường khử đậu tương giai đoạn hoa 50 3.8 Hàm lượng đường khử đậu tương giai đoạn tạo 53 3.9 Hàm lượng glycine betain mầm đậu tương giai đoạn mầm 57 3.10 Hàm lượng glycine betain đậu tương giai đoạn non 59 h Số hiệu 3.11 Hàm lượng glycine betain đậu tương giai đoạn hoa 61 3.12 Hàm lượng glycine betain đậu tương giai đoạn tạo 63 3.13 Hàm lượng protein tổng số mầm đậu tương 66 3.14 Hàm lượng protein tổng số đậu tương giai đoạn non 69 3.15 Hàm lượng protein tổng số đậu tương giai đoạn hoa 71 3.16 Hàm lượng protein tổng số đậu tương giai đoạn tạo 74 h