(Luận văn thạc sĩ) xây dựng phương pháp định lượng vildaglitin trong huyết tương người bằng sắc ký lỏng khối phổ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Trần Thị Nga XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VILDAGLIPTIN TRONG HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Hà Nội – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Trần Thị Nga XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VILDAGLIPTIN TRONG HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ Chuyên ngành: Hoá phân tích Mã số: 8440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: Hướng dẫn 1: TS Dương Tuấn Hưng Hướng dẫn 2: TS Tạ Mạnh Hùng Hà Nội – 2021 i Lời cam đoan Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết luận văn trung thực Những kết luận luận văn chưa công bố cơng trình khác Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2021 Tác giả Trần Thị Nga ii Lời cảm ơn Tơi xin bày tỏ kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Dương Tuấn Hưng TS Tạ Mạnh Hùng tận tình hướng dẫn quan tâm giúp đỡ suốt trình thực hồn thành luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn thầy cô công tác Học Viện Khoa Học Công Nghệ giúp đỡ thời gian học tập trường Tôi xin cảm ơn Ban giám đốc – Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương tạo điều kiện cho học tập nghiên cứu Viện Tôi xin chân thành cảm ơn tới toàn thể cán Trung tâm đánh giá Tương đương sinh học – Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương chia sẻ giúp đỡ q trình thực luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè, đồng nghiệp giúp đỡ động viên để tơi có đủ nghị lực, tâm hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2021 Học viên Trần Thị Nga iii Danh mục ký hiệu chữ viết tắt Từ viết tắt Tên tiếng Anh Tên tiếng việt AN Analyte Chất phân tích AUC Area Under the Curve Diện tích đường cong CC Calibration Curve Đường chuẩn CV Coefficient of Variation Hệ số biến thiên Cmax Maximum Concentration Nồng độ đỉnh CTPT Molecular Formula Công thức phân tử DĐH Pharmacokinetics Dược động học EMA European Medicines Agency ESI Electrospray Ionization GLP Good Laboratory Practices HD HPLC HQC HQCS HT Cơ quan quản lý thuốc Châu Âu Ion hóa kiểu phun điện Thực hành tốt phịng thí nghiệm Hạn dùng High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao High Quality Control Mẫu kiểm tra nồng độ cao High Quality Control Mẫu kiểm tra độ ổn định Stability nồng độ cao Plasma Huyết tương iv HTT Blank Plasma Huyết tương trắng KLPT Molecular Weight Khối lượng phân tử IS Internal Standard Chất chuẩn nội LC-MS LC-MS/MS LLE LLOQ LQC LQCS Liquid Chromatography – Mass spectrometry Liquid Chromatography – Tandem Mass Spectrometry Liquid – Liquid Extraction Lower Limit of Quantification Sắc ký lỏng khối phổ Sắc ký lỏng hai lần khối phổ Chiết lỏng – lỏng Giới hạn định lượng Low Quality Control Mẫu kiểm tra nồng độ thấp Low Quality Control Mẫu kiểm tra độ ổn định Stability nồng độ thấp MeCN Acetonitril MeOH Methanol m/z Mass to charge ratio Khối lượng/điện tích MF Matrix Factor Hệ số mẫu Middle Quality Control Mẫu kiểm tra nồng độ Samples trung bình MQC MRM NTN Multiple Reaction Monitoring Đo chọn lọc đa ion Người tình nguyện v Nucleoside Reverse Thuốc ức chế enzyme Transcriptase Inhibitor chép ngược nucleosid Protein Precipitation Kỹ thuật kết tủa protein hay Technique Kết tủa protein PTHQ Regression Equation Phương trình hồi quy QC Quality Control Mẫu kiểm tra QCP Quality Control Plan Kế hoạch quản lý chất lượng NRTI PPT SĐK Số đăng kí SKD Bioavailability Sinh khả dụng SDS Sodium Dodecyl Sulfate Natri dodecyl sulfat SKĐ Sắc ký đồ SPE Solid Phase Extraction Chiết pha rắn SST System Suitablity Test Độ thích hợp hệ thống TBME TĐSH Tert butyl methyl ether Bioequivalence Tương đương sinh học Thời gian đạt nồng độ thuốc Tmax tối đa máu tR Retention Time Thời gian lưu TB Mean Trung bình ULOQ Upper Limit of Quantification Giới hạn định lượng vi The United States – The US-FDA Food and Drug Administration Cơ quan Quản lý Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ National Institute of Drug Viện Kiểm nghiệm Thuốc Quality Control Trung Ương WHO World Health Organization Tổ chức Y tế Thế giới WSS Working Standard Solutions Dung dịch chuẩn làm việc VKNTTW vii Danh mục bảng Bảng 1.1 Một số nghiên cứu định lượng VDG huyết tương người Bảng 2.1 Các chất chuẩn sử dụng .19 Bảng 2.2 Cách chuẩn bị đường chuẩn huyết tương 25 Bảng 2.3 Cách chuẩn bị mẫu LLOQ huyết tương 25 Bảng 2.4 Cách chuẩn bị mẫu QC huyết tương 26 Bảng 3.1 Điều kiện nguồn ion hoá .35 Bảng 3.2 Điều kiện sắc ký 41 Bảng 3.3 Điều kiện khối phổ định lượng VDG IS 42 Bảng 3.4 Kết đánh giá phù hợp hệ thống 44 Bảng 3.5 Ảnh hưởng mẫu trắng thời điểm trùng t R VDG IS 47 Bảng 3.6 Kết khảo sát đường chuẩn theo mô hình weighting 1/x 48 Bảng 3.7 Tín hiệu đo pic mẫu LLOQ mẫu Zero tR VDG 50 Bảng 3.8 Độ đúng, độ xác mẫu LLOQ 50 Bảng 3.9 Kết đánh giá ảnh hưởng mẫu 52 Bảng 3.10 Kết đánh giá độ nhiễm chéo 53 Bảng 3.11 Độ đúng, độ xác ngày khác ngày 54 Bảng 3.12 Độ lặp lại tiêm lại 55 Bảng 3.13 Độ đúng, độ xác pha loãng 57 Bảng 3.14 Kết khảo sát độ thu hồi IS .58 Bảng 3.15 Kết khảo sát độ thu hồi VDG 59 Bảng 3.16 Kết độ ổn định dung dịch chuẩn gốc VDG theo thời gian 61 Bảng 3.17 Kết độ ổn định dung dịch nội chuẩn gốc theo thời gian 62 Bảng 3.18 Kết độ ổn định dung dịch chuẩn gốc thời gian ngắn 62