Nghiên cứu tạo màng cellulose vi khuẩn tầm cao chiết dược liệu và định hướng ứng dụng trong điều trị vết thương

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA QUÁCH PHONG ĐẠT NGHIÊN CỨU TẠO MÀNG CELLULOSE VI KHUẨN TẨM CAO CHIẾT DƯỢC LIỆU VÀ ĐỊNH HƯỚNG ỨNG DỤNG TRONG ĐIỀU TRỊ VẾT THƯƠNG Chuyên ngành: Kỹ thuật Hóa học Mã số: 8520301 LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng 07 năm 2023 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA –ĐHQG -HCM Cán hướng dẫn khoa học: TS Lê Xuân Tiến, TS Tống Thanh Danh Cán chấm nhận xét 1: TS Phan Thị Hoàng Anh Cán chấm nhận xét 2: TS Đỗ Tường Hạ Luận văn thạc sĩ bảo vệ Trường Đại học Bách Khoa, ĐHQG Tp HCM ngày 25 tháng 07 năm 2023 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: Chủ tịch: PGS.TS Mai Huỳnh Cang Thư ký: TS Phan Nguyễn Quỳnh Anh Phản biện 1: TS Phan Thị Hoàng Anh Phản biện 2: TS Đỗ Tường Hạ Ủy viên: TS Lê Vũ Hà Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá LV Trưởng Khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn sửa chữa (nếu có) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG PGS.TS Mai Huỳnh Cang TRƯỞNG KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: Quách Phong Đạt MSHV: 2170967 Ngày, tháng, năm sinh: 02/10/1999 Nơi sinh: Bình Định Chuyên ngành: Kỹ thuật Hóa học Mã số: 8520301 I TÊN ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU TẠO MÀNG CELLULOSE VI KHUẨN TẨM CAO CHIẾT DƯỢC LIỆU VÀ ĐỊNH HƯỚNG ỨNG DỤNG TRONG ĐIỀU TRỊ VẾT THƯƠNG (DEVELOPMENT OF BACTERIAL CELLULOSE PADS INCORPORATED WITH HERBAL EXTRACTS FOR WOUND TREATMENT) II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: − − − III IV V Nuôi cấy tạo màng cellulose vi khuẩn, đánh giá tính chất màng Đánh giá hoạt tính kháng viêm, kháng khuẩn, làm lành vết thương cao chiết rễ dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng Đánh giá hoạt tính kháng viêm thúc đẩy lành vết thương màng tẩm dược liệu NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: 05/09/2022 NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 11/06/2023 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: TS Lê Xuân Tiến, TS Tống Thanh Danh Tp HCM, ngày 11 tháng 06 năm 2023 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS Lê Xuân Tiến TS Tống Thanh Danh CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO PGS.TS Lê Thị Hồng Nhan TRƯỞNG KHOA KỸ THUẬT HĨA HỌC i LỜI CẢM ƠN Hành trình hồn thành luận văn không ngắn không dài, hành trình chắn em khơng thể đến cuối khơng có hỗ trợ động viên người bên cạnh Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn đến cô Nguyễn Kim Minh Tâm, thầy Lê Xuân Tiến thầy Tống Thanh Danh thầy mơn Hóa Hữu Công nghệ Sinh học, trường Đại học Bách Khoa Thành phố Hồ Chí Minh ln tận tình hỗ trợ em, dạy kiến thức quý giá để em hồn thành luận văn Em xin cảm ơn cô Huỳnh Ngọc Trinh thầy cô, anh, chị, em môn Dược lý, trường Đại học Y dược Thành phố Hồ Chí Minh trang bị kiến thức kỹ cho em, quan tâm đến tiến độ thực em, tạo điều kiện thuận lợi suốt trình em thực nghiên cứu Cảm ơn người bạn, người em lab Cơng nghệ Sinh học 108B2 đồng hành suốt thời gian qua Cảm ơn bạn team Rùa hỗ trợ nhiệt tình q trình hồn thành luận văn Con xin cảm ơn ba má gia đình ln bên cạnh tạo điều kiện tốt để theo đuổi tri thức Cảm ơn người yêu thương bên cạnh, cổ vũ động viên suốt chặng đường thực luận văn Xin cảm ơn người thương yêu gia đình ln đồng hành, gắn bó, động viên, tạo điều kiện sống học tập Xin chân thành cảm ơn đến tất người Quách Phong Đạt ii TÓM TẮT LUẬN VĂN Luận văn thực nuôi cấy chủng vi khuẩn Acetobacter xylinum để tạo màng cellulose sinh học điều kiện nuôi cấy tĩnh Màng sau làm có màu trắng sáng, khả hút nước thoát nước tốt Độ bền kéo 32.67 ± 0.59 MPa, độ dãn dài 33.5% Quan sát hình thái cấu trúc màng cho thấy sợi cellulose mảnh, đan xen tạo không gian chiều bên Cao chiết rễ dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng dùng để tẩm lên màng cellulose vi khuẩn Khảo sát hoạt tính kháng viêm thơng qua khả ổn định màng tế bào hồng cầu, IC50 cao chiết rễ dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng 1653.44 ± 72.35 µg/mL, 1494.54 ± 101.62 µg/mL Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn phương pháp khuếch tán đĩa thạch cho thấy cao dâu tằm có hoạt tính mạnh chủng Gram (+) Staphylococcus aureus (20.97 ± 0.67 mm 100 mg/mL), Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) (19.93 ± 0.29 mm 100 mg/mL), Staphylococcus epidermidis (16.97 ± 0.15 mm 100 mg/mL) khơng có khả ức chế Pseudomonas aeruginosa Thử nghiệm hoạt tính lành vết thương chuột cho thấy cao chiết rễ dâu tằm cho hiệu tốt so với tinh dầu hương nhu trắng Phần trăm lành vết thương đạt 89.03 ± 9.33% sau 16 ngày Tẩm cao chiết rễ dâu tằm lên màng cellulose vi khuẩn để thử nghiệm hoạt tính lành vết thương chuột cho thấy nồng độ cao dâu tằm 50 mg/mL cho hoạt tính chữa trị tốt Phần trăm lành vết thương đạt 98.10 ± 2.44% sau 16 ngày Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô không điều trị iii ABSTRACT This research aims to investigate the cultivation of Acetobacter xylinum bacterial strain for the synthesis of bacterial cellulose under static culture conditions The resulting membrane exhibited a bright white color, good water absorption, and water release capabilities The tensile strength of the membrane was measured at 32.67 ± 0.59 MPa with a tensile strain of 33.5% Morphological analysis of the membrane structure revealed interconnected and delicate cellulose fibers, creating a threedimensional internal space To enhance the properties of the bacterial cellulose membrane, root bark of Morus alba L extracts and Ocimum gratissimum L essential oil were applied The antiinflammatory activity was evaluated by assessing the stability of red blood cell (RBC) membranes, IC50 of root bark of Morus alba L extracts and Ocimum gratissimum L essential oil is 1653.44 ± 72.35 µg/mL, 1494.54 ± 101.62 µg/mL, respectively The antibacterial activity was determined through the disc diffusion assay, demonstrating potent activity of root bark of Morus alba L extracts against three Gram-positive strains: Staphylococcus aureus (20.97 ± 0.67 mm at 100 mg/mL), MethicillinResistant Staphylococcus aureus (MRSA) (19.93 ± 0.29 mm at 100 mg/mL), and Staphylococcus epidermidis (16.97 ± 0.15 mm at 100 mg/mL) However, no inhibitory effect was observed against Pseudomonas aeruginosa In vivo wound healing experiments on mice indicated that the root bark of Morus alba L extracts showed superior efficacy compared to Ocimum gratissimum L essential oil, with a wound closure rate of 89.03 ± 9.33% after 16 days Furthermore, the bacterial cellulose membrane was coated with various concentrations of root bark of Morus alba L extracts to evaluate its wound healing activity on mice The highest therapeutic effect was achieved at a concentration of 50 mg/mL, resulting in a wound closure rate of 98.10 ± 2.44% after 16 days These findings were statistically significant when compared to the untreated control group iv LỜI CAM ĐOAN Tôi tên Quách Phong Đạt, học viên cao học ngành Kỹ thuật Hóa học, khóa 2021, Khoa Kỹ thuật Hóa học, trường Đại học Bách Khoa Thành phố Hồ Chí Minh, xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thực hiện, số liệu kết nghiên cứu thực hướng dẫn khoa học TS Lê Xuân Tiến TS Tống Thanh Danh Tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm kết nghiên cứu luận văn tốt nghiệp Tp Hồ Chí Minh, ngày 11 tháng 06 năm 2023 Học viên thực v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT LUẬN VĂN ii ABSTRACT iii MỤC LỤC v DANH MỤC HÌNH viii DANH MỤC BẢNG x DANH MỤC PHỤ LỤC .xi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xii LỜI MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1.1 TỔNG QUAN .2 Vi khuẩn Acetobacter xylinum màng cellulose vi khuẩn 1.1.1 Vi khuẩn Acetobacter xylinum 1.1.2 Đặc tính màng cellulose vi khuẩn (BC) .3 1.1.3 Nuôi cấy vi khuẩn Acetobacter xylinum tạo màng BC .5 1.1.4 Các ứng dụng màng BC 1.2 Bệnh học bỏng .8 1.2.1 Cơ chế tổn thương bỏng 1.2.2 Phân loại cấp độ bỏng 1.3 Quá trình lành vết thương da vai trò loại màng sử dụng che phủ vết thương 12 1.3.1 Các giai đoạn trình lành vết thương .12 1.3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình lành vết thương .13 1.3.3 Các loại băng che phủ vết thương .15 vi 1.4 Một số dược liệu dùng điều trị vết thương .17 1.4.1 Hương nhu trắng .17 1.4.2 Dâu tằm .21 1.5 Mục tiêu nghiên cứu đề tài 28 1.6 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 28 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Nguyên liệu, hóa chất thiết bị .29 2.1.1 Nguyên liệu đối tượng nghiên cứu 29 2.1.2 Hóa chất 30 2.1.3 Thiết bị 31 2.2 Nội dung nghiên cứu 32 2.3 Phương pháp nghiên cứu 33 2.3.1 Hoạt hóa giống 33 2.3.2 Lên men thu màng BC thô 34 2.3.3 Tinh chế màng BC thô 35 2.3.4 Đánh giá tính chất màng BC tinh chế 35 2.3.5 Phương pháp xác định khả kháng viêm cao chiết dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng .38 2.3.6 Phương pháp xác định khả kháng khuẩn .41 2.3.7 Phương pháp xác định khả làm lành vết thương chuột 44 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .48 3.1 Thu hoạch màng đánh giá tính chất màng BC tinh chế 48 3.1.1 Kết tạo màng BC thô 48 3.1.2 Tinh chế màng BC 49 3.1.3 Đánh giá tính chất màng BC tinh chế 49 vii 3.1.4 Kết luận 55 3.2 Hoạt tính sinh học cao chiết rễ dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng 56 3.2.1 Kết so sánh khả kháng viêm 56 3.2.2 Kết so sánh khả kháng khuẩn 57 3.2.3 Kết so sánh khả làm lành vết thương 60 3.2.4 Kết luận 63 3.3 Kết kháng khuẩn làm lành vết thương màng BC tẩm dược liệu .63 3.3.1 Kết kháng khuẩn màng BC tẩm cao chiết rễ dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng 63 3.3.2 Hiệu làm lành vết thương màng BC tẩm cao chiết rễ dâu tằm .67 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 70 4.1 Kết luận .70 4.2 Kiến nghị .70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 PHỤ LỤC .82 76 [50] M S Butt, A Nazir, M T Sultan, and K Schroën, "Morus alba L nature's functional tonic," Trends in food science & technology, vol 19, no 10, pp 505512, 2008 [51] H Đ Hải., "Rau rừng Việt Nam" Available: https://hodinhhai.blogspot.com/2014/05/ June 11, 2023 [52] J Du, Z.-D He, R.-W Jiang, W.-C Ye, H.-X Xu, and P P.-H But, "Antiviral flavonoids from the root bark of Morus alba L," Phytochemistry, vol 62, no 8, pp 1235-1238, 2003 [53] M Li, X Wu, X Wang, T Shen, and D Ren, "Two novel compounds from the root bark of Morus alba L," Natural product research, vol 32, no 1, pp 36-42, 2018 [54] T Fukai, K Satoh, T Nomura, and H Sakagami, "Preliminary evaluation of antinephritis and radical scavenging activities of glabridin from Glycyrrhiza glabra," Fitoterapia, vol 74, no 7-8, pp 624-629, 2003 [55] K Park, J You, H Lee, N Baek, and J Hwang, "Kuwanon G: an antibacterial agent from the root bark of Morus alba against oral pathogens," Journal of ethnopharmacology, vol 84, no 2-3, pp 181-185, 2003 [56] M Kaushik, A Kaushik, and K Murti, "Exploration of healing promoting potentials of leaves of Morus alba L in albino rats," American Journal of Pharmacology and Toxicology, vol 8, no 3, p 95, 2013 [57] D S Kim, Y M Kang, W Y Jin, Y Y Sung, G Choi, and H K Kim, "Antioxidant activities and polyphenol content of Morus alba leaf extracts collected from varying regions," Biomedical reports, vol 2, no 5, pp 675-680, 2014 [58] Y.-X Wu, Y.-J Kim, T.-H Kwon, C.-P Tan, K.-H Son, and T Kim, "Antiinflammatory effects of mulberry (Morus alba L.) root bark and its active compounds," Natural product research, vol 34, no 12, pp 1786-1790, 2020 77 [59] G Pourramezan, A Roayaei, and Q Qezelbash, "Optimization of culture conditions for bacterial cellulose production by Acetobacter sp 4B-2," Biotechnology, vol 8, no 1, pp 150-154, 2009 [60] E Elsacker, S Vandelook, B Damsin, A Van Wylick, E Peeters, and L De Laet, "Mechanical characteristics of bacterial cellulose-reinforced mycelium composite materials," Fungal biology and biotechnology, vol 8, no 1, pp 1-14, 2021 [61] K Fijałkowski, A Żywicka, R Drozd, M Kordas, and R Rakoczy, "Effect of cultivation conditions on the selected properties of bacterial cellulose," Polish Journal of Chemical Technology, vol 18, no 4, pp 117-123, 2016 [62] C T Chou, "The Antiinflammatory Effect of an Extract of Tripterygium wilfordii Hook F on Adjuvant‐induced Paw Oedema in Rats and Inflammatory Mediators Release," Phytotherapy Research: An International Journal Devoted to Medical and Scientific Research on Plants and Plant Products, vol 11, no 2, pp 152-154, 1997 [63] M Jutel, T Watanabe, M Akdis, K Blaser, and C A Akdis, "Immune regulation by histamine," Current opinion in immunology, vol 14, no 6, pp 735740, 2002 [64] U Shinde, A Phadke, A Nair, A Mungantiwar, V Dikshit, and M Saraf, "Membrane stabilizing activity—a possible mechanism of action for the antiinflammatory activity of Cedrus deodara wood oil," Fitoterapia, vol 70, no 3, pp 251-257, 1999 [65] L G Matasyoh, J C Matasyoh, F N Wachira, M G Kinyua, A W T Muigai, and T K Mukiama, "Chemical composition and antimicrobial activity of the essential oil of Ocimum gratissimum L growing in Eastern Kenya," African journal of biotechnology, vol 6, no 6, 2007 [66] M Balouiri, M Sadiki, and S K Ibnsouda, "Methods for in vitro evaluating antimicrobial activity: A review," Journal of pharmaceutical analysis, vol 6, no 2, pp 71-79, 2016 78 [67] S Kongruang, "Bacterial cellulose production by Acetobacter xylinum strains from agricultural waste products," in Biotechnology for Fuels and Chemicals: Proceedings of the Twenty-Ninth Symposium on Biotechnology for Fuels and Chemicals, Springer, 2008, pp 763-774 [68] N Halib et al., "Potential applications of nanocellulose-containing materials in the biomedical field," Materials, vol 10, no 8, p 977, 2017 [69] I Wilson, M Henry, R Quill, and P Byrne, "The pH of varicose ulcer surfaces and its relationship to healing," VASA Zeitschrift fur Gefasskrankheiten vol 8, no 4, pp 339-342, 1979 [70] O Eskilson et al., "Nanocellulose composite wound dressings for real-time pH wound monitoring," Materials Today Bio, vol 19, p 100574, 2023 [71] S Kaewnopparat, K Sansernluk, and D Faroongsarng, "Behavior of freezable bound water in the bacterial cellulose produced by Acetobacter xylinum: An approach using thermoporosimetry," Aaps PharmSciTech, vol 9, pp 701-707, 2008 [72] S.-B Lin, C.-P Hsu, L.-C Chen, and H.-H Chen, "Adding enzymatically modified gelatin to enhance the rehydration abilities and mechanical properties of bacterial cellulose," Food Hydrocolloids, vol 23, no 8, pp 2195-2203, 2009 [73] Y Dahman, "Nanostructured biomaterials and biocomposites from bacterial cellulose nanofibers," Journal of Nanoscience and Nanotechnology, vol 9, no 9, pp 5105-5122, 2009 [74] W.-C Lin, C.-C Lien, H.-J Yeh, C.-M Yu, and S.-h Hsu, "Bacterial cellulose and bacterial cellulose–chitosan membranes for wound dressing applications," Carbohydrate polymers, vol 94, no 1, pp 603-611, 2013 [75] E E Kiziltas, A Kiziltas, and D J Gardner, "Synthesis of bacterial cellulose using hot water extracted wood sugars," Carbohydrate Polymers, vol 124, pp 131-138, 2015 79 [76] S Yano, H Maeda, M Nakajima, T Hagiwara, and T Sawaguchi, "Preparation and mechanical properties of bacterial cellulose nanocomposites loaded with silica nanoparticles," Cellulose, vol 15, no 1, pp 111-120, 2008 [77] M P Illa, C S Sharma, and M Khandelwal, "Tuning the physiochemical properties of bacterial cellulose: effect of drying conditions," Journal of Materials Science, vol 54, no 18, pp 12024-12035, 2019 [78] A Ajayi et al., "Anti-inflammatory, anti-nociceptive and total polyphenolic content of hydroethanolic extract of Ocimum gratissimum L leaves," African journal of medicine and medical sciences, vol 43, no Suppl 1, p 215, 2014 [79] I Karam et al., "Lowering effects of aspirin eugenol ester on blood lipids in rats with high fat diet," Lipids in Health and Disease, vol 15, pp 1-5, 2016 [80] L Sethuram, J Thomas, A Mukherjee, and N Chandrasekaran, "Eugenol microemulsion reinforced with silver nanocomposite electrospun mats for wound dressing strategies," Materials Advances, vol 2, no 9, pp 2971-2988, 2021 [81] H J Eo et al., "Anti-inflammatory and anti-cancer activity of mulberry (Morus alba L.) root bark," BMC complementary and alternative medicine, vol 14, no 1, pp 1-9, 2014 [82] L K Parnell, R Tanaka, and S W Volk, "Yoshikiyo Akasaka: Impact on wound healing across the globe," Wound Repair and Regeneration, vol 30, no 6, pp 613-616, 2022 [83] F Lowy, "Staphylococcus aureus infections N Engl J Med," The New England Journal of Medicine, vol 339, no 8, pp 520-532, 1998 [84] H W Boucher and G R Corey, "Epidemiology of methicillin-resistant Staphylococcus aureus," Clinical infectious diseases, vol 46, no Supplement_5, pp S344-S349, 2008 [85] L R Mulcahy, V M Isabella, and K Lewis, "Pseudomonas aeruginosa biofilms in disease," Microbial ecology, vol 68, pp 1-12, 2014 80 [86] M Zhu et al., "Bioguided isolation, identification and bioactivity evaluation of anti-MRSA constituents from Morus alba Linn," Journal of Ethnopharmacology, vol 281, p 114542, 2021 [87] G Škovranová, M Čulenová, J Treml, L Dzurická, I Marova, and A Sychrová, "Prenylated phenolics from Morus alba against MRSA infections as a strategy for wound healing," Frontiers in Pharmacology, vol 13, 2022 [88] R S Melo et al., "Chemical composition and antimicrobial effectiveness of Ocimum gratissimum L essential oil against multidrug-resistant isolates of Staphylococcus aureus and Escherichia coli," Molecules, vol 24, no 21, p 3864, 2019 [89] T Adebolu and S A Oladimeji, "Antimicrobial activity of leaf extracts of Ocimum gratissimum on selected diarrhoea causing bacteria in southwestern Nigeria," African Journal of Biotechnology, vol 4, no 7, pp 682-684, 2005 [90] C V Nakamura, T Ueda-Nakamura, E Bando, A F N Melo, D A G Cortez, and B P Dias Filho, "Antibacterial activity of Ocimum gratissimum L essential oil," Memórias Instituto Oswaldo Cruz, vol 94, pp 675-678, 1999 [91] I Ec et al., "Phytochemical constituents and wound healing properties of ointment formulations of Ocimum Gratissimum crude aqueous leaf extracts," Journal of Pharmaceutical & Allied Sciences, vol 16, no 4, 2019 [92] F Osuagwu et al., "Wound healing activities of methanolic extracts Ocimum gratissimum leaf in Wistar rats-a preliminary study," African Journal of Medicine and medical sciences, vol 33, no 1, pp 23-26, 2004 [93] A Scalise, Alessandro Bianchi, Caterina Tartaglione, Elisa Bolletta, Marina Pierangeli, Matteo Torresetti, Mario Marazzi, and Giovanni Di Benedetto., "Microenvironment and microbiology of skin wounds: The role of bacterial biofilms and related factors," Semin Vasc Surg., vol 28, pp 151–159, 2015 [94] A Khalid et al., "Bacterial cellulose–TiO nanocomposites promote healing and tissue regeneration in burn mice model," RSC advances, vol 7, no 75, pp 4766247668, 2017 81 [95] T G Volova et al., "Antibacterial properties of films of cellulose composites with silver nanoparticles and antibiotics," Polymer Testing, vol 65, pp 54-68, 2018 [96] L Li et al., "Antibacterial activity of α-terpineol may induce morphostructural alterations in Escherichia coli," Brazilian Journal of Microbiology, vol 45, pp 1409-1413, 2014 [97] Y Qiu, Q Wang, Y Chen, S Xia, W Huang, and Q Wei, "A novel multilayer composite membrane for wound healing in mice skin defect model," Polymers, vol 12, no 3, p 573, 2020 [98] F Wahid et al., "Fabrication of bacterial cellulose-based dressings for promoting infected wound healing," ACS Applied Materials & Interfaces, vol 13, no 28, pp 32716-32728, 2021 82 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Cơng thức mơi trường Hestrin – Schramm Hóa chất Khối lượng (hoặc thể tích) Glucose 20 g Pepton 10 g (NH4)2SO4 8g (NH4)H2PO4 10 g Nước dừa 1L Điều chỉnh pH = 4.5 acid acetic Phụ lục 2: Tính chất vật lý màng BC • pH màng BC sau tinh chế Lần 7.540 • pH Lần 7.550 Lần 7.550 Độ bền kéo màng BC tinh chế Độ bền kéo (MPa) Lần Lần Lần 33.100 32.000 32.909 • Độ sáng (L) màng BC tinh chế Mẫu BC thô BC tinh chế • Lần 34.91 46.84 Lần 34.90 46.49 Lần 33.85 47.04 Lần 35.04 46.89 Lần 35.10 46.50 Trọng lượng khô màng Trọng lượng khô S= x 4.5 (cm) Lần Lần Bề dày 6.5 6.4 Khối lượng ban đầu (g) 30.100 29.180 Khối lượng sau sấy (g) 0.210 0.200 Lần 6.5 26.890 0.190 Lần 6.5 29.120 0.190 83 Phụ lục 3: Thí nghiệm hút nước màng BC Thời gian Ngâm Ngâm Ngâm Ngâm 12 Ngâm 24 Số lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Khối lượng màng ban đầu (g) 7.694 7.484 7.41 7.53 7.527 7.129 7.128 7.277 7.861 7.431 7.954 7.51 7.302 7.672 7.77 Khối lượng màng sau sấy (g) 0.043 0.046 0.045 0.064 0.056 0.044 0.044 0.049 0.068 0.045 0.074 0.053 0.036 0.053 0.064 Khối lượng màng hút nước (g) 0.117 0.123 0.121 0.156 0.145 0.143 0.139 0.147 0.162 0.161 0.174 0.152 0.137 0.148 0.162 Phụ lục 4: Thí nghiệm nước màng BC Mẫu M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10 Khối lượng ban đầu (g) 6.121 5.412 5.919 6.106 5.459 6.147 5.941 6.855 6.778 5.927 Khối lượng sau (g) 5.582 4.846 5.384 5.543 4.950 5.482 5.287 6.232 6.116 5.376 Khối lượng sau (g) 5.136 4.387 4.856 5.112 4.462 5.131 4.792 5.791 5.613 4.944 Khối lượng sau (g) 4.674 3.935 4.364 4.638 4.020 4.637 4.331 5.263 5.143 4.444 Khối lượng sau (g) 4.168 3.409 3.823 4.100 3.532 4.096 3.824 4.702 4.614 3.907 Khối lượng sau 12 (g) 3.338 2.594 3.024 3.356 2.837 3.118 2.914 3.737 3.706 2.963 84 Phụ lục 5: Khả kháng viêm cao dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng • Cao dâu tằm Nồng độ (µg/mL) Lần A1 Lần Lần Lần A2 Lần Lần Control Blank IC50 lần IC50 lần IC50 lần IC50 tb SD IC50 500 1000 1500 2000 2500 0.325 0.322 0.331 1.475 1.488 1.481 1.260 1.255 1.263 1.502 1.509 1.497 1.426 1.428 1.426 1.506 1.511 1.515 1.605 0.064 1594.67 1734.25 1631.41 1653.44 72.35 1.439 1.435 1.433 1.497 1.505 1.495 1.402 1.412 1.411 1.454 1.476 1.463 250 500 1000 1750 2000 0.546 0.535 0.525 1.574 1.521 1.535 0.715 0.697 0.708 1.473 1.451 1.445 0.823 0.811 0.793 1.46 1.433 1.452 1.653 0.052 1611.44 1427.26 1444.93 1494.54 101.62 1.246 1.235 1.264 1.415 1.42 1.412 1.46 1.453 1.421 1.535 1.497 1.485 • Tinh dầu hương nhu trắng Nồng độ (µg/mL) Lần A1 Lần Lần Lần A2 Lần Lần Control Blank IC50 lần IC50 lần IC50 lần IC50 tb SD IC50 • Chứng dương Dexamethasone Nồng độ (µg/mL) Lần A1 Lần Lần A2 Lần 100 200 400 600 800 0.034 0.039 0.026 1.416 0.022 0.036 0.034 1.385 0.059 0.027 0.011 1.125 0.039 0.015 0.022 0.754 0.013 0.025 0.014 0.565 85 Nồng độ (µg/mL) Lần Lần Control Blank IC50 lần IC50 lần IC50 lần IC50 tb SD IC50 100 200 400 600 800 1.426 1.454 1.391 1.402 1.136 1.147 1.735 0.055 547.86 581.53 663.17 597.52 59.29 0.783 0.834 0.642 0.806 Phụ lục 6: Đường kính vịng kháng khuẩn cao chiết rễ dâu tằm (mm) Cao chiết Nồng độ S.a TB SD MRSA TB SD P.a TB SD S.e TB SD Dâu tằm Gentamicin 500 g/mL 3.125 6.25 12.5 25 50 100 21.6 21.7 21.4 21.567 0.153 22.4 22.9 22.2 22.500 0.361 27.1 27.5 27.5 27.367 0.231 22.6 22.9 22.8 22.77 0.15 14.2 13.3 13.3 13.600 0.520 13.5 13.1 13.7 13.43 0.31 - 14.9 14.6 14.7 14.73 0.15 14.3 14.6 14.9 14.60 0.30 - 16.7 15.8 17.2 16.57 0.71 15.5 16.4 16.6 16.17 0.59 - 17.2 17.1 18.0 17.43 0.49 17.2 17.7 18.2 17.70 0.50 - 19.2 18.9 18.8 18.97 0.21 18.6 19.4 19.2 19.07 0.42 - 21.4 20.2 21.3 20.97 0.67 19.6 20.1 20.1 19.93 0.29 - 11.4 10.9 10.6 10.97 0.40 11.7 12.0 12.0 11.90 0.17 13.8 13.5 13.7 13.67 0.15 14.3 15.2 14.9 14.80 0.46 15.6 16.2 15.9 15.90 0.30 16.8 17.1 17.0 16.97 0.15 86 Phụ lục 7: Đường kính vòng kháng khuẩn tinh dầu hương nhu trắng (mm) Tinh dầu Nồng độ S.a TB SD MRSA TB SD P.a TB SD S.e TB SD Hương nhu trắng Gentamicin 500 g/mL 3.125 6.25 12.5 25 50 100 20.9 21.2 21.1 21.07 0.15 22.7 22.6 22.7 22.67 0.06 27.3 27.9 27.7 27.633 0.306 22.6 22.2 22.2 22.33 0.23 - 10.1 9.7 9.8 9.87 0.21 - 10.3 10.6 9.6 10.17 0.51 11.5 10.7 10.9 11.03 0.42 - - - 11.1 11.0 12.0 11.37 0.55 11.6 11.8 12.3 11.90 0.36 9.2 9.0 9.0 9.07 0.12 - 14.7 14.7 14.0 14.47 0.40 15.9 15.6 15.7 15.73 0.15 9.5 9.7 9.3 9.50 0.20 10.9 10.1 11.6 10.87 0.75 16.8 17.2 16.4 16.80 0.40 16.1 16.9 16.9 16.63 0.46 10.1 10.0 10.1 10.07 0.06 11.6 11.4 12.1 11.70 0.36 16.8 17.7 17.7 17.40 0.52 20.9 21.1 20.9 20.97 0.12 10.6 11.0 10.5 10.70 0.26 12.6 12.4 12.8 12.60 0.20 Phụ lục 8: Đường kính vịng kháng khuẩn tẩm màng BC với cao dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng (mm) Mẫu Nồng độ S.a TB SD MRSA BC tẩm cao dâu tằm 25 33.33 50 100 23.5 24.2 25 27.9 24 24.8 25.3 28 28.2 27.5 27.7 23.750 24.500 25.150 27.860 0.354 0.424 0.212 0.270 23.8 25.1 25.2 27.7 BC tẩm tinh dầu hương nhu trắng 25 33.33 50 100 21.6 21.4 22.3 24.1 21.5 21.7 22.6 24.3 24 24.4 24 21.550 21.550 22.450 24.160 0.071 0.212 0.212 0.182 22.8 24 25.3 29.4 87 Mẫu TB SD P.a S.e TB SD BC tẩm cao dâu tằm 23.8 25.2 25.1 27.1 27.3 28.2 27.7 23.800 25.150 25.150 27.600 0.000 0.071 0.071 0.424 20 20.3 22.3 25.5 20.5 20.5 22.2 25.8 25.8 25.7 25.6 20.250 20.400 22.250 25.680 0.354 0.141 0.071 0.130 BC tẩm tinh dầu hương nhu trắng 22.9 24.2 25.5 29.5 29.4 29.3 29.6 22.850 24.100 25.400 29.440 0.071 0.141 0.141 0.114 19.7 19.7 22.7 23.6 19.9 20 22.3 23.7 23.6 23.7 23.5 19.800 19.850 22.500 23.620 0.141 0.212 0.283 0.084 Phụ lục 9: Diện tích vết bỏng điều trị cao dâu tằm tinh dầu hương nhu trắng (cm2) Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày 10 Ngày 11 Ngày 12 Ngày 13 Ngày 14 Ngày 15 Ngày 16 (V) 3.339 2.844 2.575 2.449 2.245 2.118 2.036 1.835 1.449 1.297 1.226 1.025 0.576 0.471 0.352 0.347 Lô bôi cao dâu tằm Lô bôi tinh dầu hương nhu (VI) (VII) (VIII) (IX) (X) (XI) 3.478 3.516 3.302 3.618 4.145 3.234 3.325 3.443 2.826 3.405 4.017 3.085 3.256 3.293 2.794 3.336 3.702 2.811 3.106 3.1 2.768 3.315 3.612 2.652 2.996 2.897 2.404 2.992 3.323 2.41 2.684 2.712 2.136 2.841 3.179 2.178 2.574 2.64 2.053 2.838 3.012 1.876 2.391 2.474 1.976 2.655 2.923 1.64 1.95 2.138 1.836 2.439 2.865 1.463 1.386 1.932 1.725 1.875 2.795 1.404 1.154 1.894 1.678 1.775 2.775 1.372 0.945 1.645 1.521 1.739 2.509 1.254 0.671 1.523 1.509 1.553 2.047 0.481 0.429 1.2 1.397 1.352 1.689 0.403 0.329 0.97 1.175 1.027 1.594 0.264 0.802 0.352 0.827 1.437 0.127 88 Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày 10 Ngày 11 Ngày 12 Ngày 13 Ngày 14 Ngày 15 Ngày 16 (I) 3.283 3.126 3.064 2.978 2.863 2.794 2.637 2.346 1.994 1.963 1.812 1.794 1.679 1.569 0.988 0.463 Lô bệnh (II) (III) 3.885 3.701 3.649 3.63 3.531 3.475 3.316 3.222 3.214 2.942 2.801 2.844 2.688 2.836 2.59 2.791 2.417 2.6 2.318 2.591 2.224 2.323 1.935 2.213 1.561 2.14 1.357 1.866 1.051 1.224 0.915 0.674 (IV) 3.429 3.309 3.26 3.115 3.006 2.974 2.903 2.554 2.079 2.01 1.985 1.692 1.492 1.378 0.932 0.885 Phụ lục 10: Diện tích vết bỏng đắp màng BC tẩm cao chiết rễ dâu tằm (cm2) Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày 10 Ngày 11 Ngày 12 Ngày 13 Ngày 14 Ngày 15 Ngày 16 (I) 3.517 3.432 3.35 3.088 2.821 2.497 2.456 2.31 2.004 1.987 1.906 1.843 1.695 1.445 1.153 0.754 Lô bệnh (II) (III) 3.88 3.731 3.749 3.657 3.527 3.563 3.386 3.342 3.207 3.21 2.975 3.043 2.732 2.875 2.645 2.541 2.517 2.341 2.287 2.226 2.196 2.041 1.903 1.784 1.738 1.642 1.245 1.241 1.12 1.098 0.846 1.054 (IV) 3.636 3.571 3.301 3.205 3.188 2.942 2.902 2.885 2.665 2.365 2.264 1.897 1.775 1.63 1.175 0.676 BC tẩm EtOH:Glycerin (V) (VI) (VII) (VIII) 3.367 4.174 3.725 3.287 3.215 4.035 3.702 3.116 3.182 3.957 3.614 3.022 3.176 3.703 3.513 2.865 3.173 3.446 3.448 2.726 2.863 3.132 3.271 2.465 2.671 2.97 2.992 2.217 2.374 2.813 2.745 1.746 2.279 2.718 2.633 1.2 1.932 2.145 2.571 0.947 1.712 1.657 2.48 0.709 1.474 1.543 1.415 0.631 1.393 1.116 0.575 0.215 1.294 0.845 0.503 0.117 1.161 0.408 0.427 0.109 0.635 0.28 0.412 0.032 89 Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày 10 Ngày 11 Ngày 12 Ngày 13 Ngày 14 Ngày 15 Ngày 16 Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày 10 Ngày 11 Ngày 12 Ngày 13 Ngày 14 Ngày 15 Ngày 16 (IX) (X) 3.974 3.324 3.901 3.289 3.893 3.262 3.745 2.932 3.549 2.691 3.497 2.61 2.914 2.595 2.231 2.361 1.501 2.032 1.232 1.996 1.073 1.984 0.865 1.463 0.413 0.682 0.312 0.511 0.217 0.411 0.157 0.39 (XVI) 3.612 3.563 3.457 3.263 2.551 2.345 2.115 1.845 1.646 1.347 1.045 0.874 0.348 0.301 0.253 0.012 BC tẩm cao 25 mg/mL (XI) (XII) (XIII) (XIV) (XV) 3.889 3.613 3.301 3.827 3.25 3.835 3.545 3.212 3.789 3.104 3.778 3.432 3.089 3.727 3.041 3.611 2.931 2.803 3.702 3.038 3.548 2.735 2.776 3.618 3.036 3.231 2.452 2.567 3.312 2.876 3.041 2.379 2.403 3.201 2.724 3.002 2.056 2.394 3.023 2.645 2.988 1.747 2.303 2.746 2.578 2.654 1.232 2.211 2.736 2.41 2.417 0.748 2.18 2.724 2.391 2.064 0.642 2.106 2.623 2.231 1.522 0.569 2.013 2.563 2.172 1.503 0.217 1.474 1.637 1.963 1.497 0.088 0.867 0.844 1.767 0.364 0.026 0.551 0.745 1.666 BC tẩm cao 50 mg/mL (XVII) (XVIII) (XIX) (XX) 3.633 4.451 4.313 3.121 3.602 4.332 4.242 3.017 3.546 4.045 4.046 2.904 3.332 3.912 3.83 2.547 3.264 3.72 3.734 1.909 2.765 2.863 3.102 1.845 2.587 2.358 2.973 1.707 2.446 2.121 2.261 1.145 2.47 2.087 1.83 0.56 2.23 1.664 1.784 0.312 1.963 1.388 1.237 0.134 1.543 1.063 1.011 0.068 0.712 0.598 0.858 0.023 0.564 0.503 0.632 0.005 0.293 0.466 0.153 0.147 0.257 0.055 (XXI) 4.326 4.126 4.112 3.776 3.517 3.063 2.476 2.066 1.436 1.066 0.512 0.331 0.194 0.114 0.094 PHẦN LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ tên: Quách Phong Đạt Ngày, tháng, năm sinh: 02/10/1999 Ngày, tháng, năm sinh: 02/10/1999 Nơi sinh: Bình Định Địa liên lạc: 497 Hòa Hảo, Phường 7, Quận 10, TP.HCM QUÁ TRÌNH ĐÀO TẠO (Bắt đầu từ Đại học đến nay) 09/2017 − 11/2021: Đại học quy, ngành Kỹ thuật Hóa dược, Khoa Kỹ thuật hóa học Trường ĐH Bách Khoa - ĐHQG TP.HCM 09/2021 − nay: Học viên cao học, Khoa Kỹ thuật Hóa học, Trường ĐH Bách Khoa ĐHQG TP.HCM Q TRÌNH CƠNG TÁC (Bắt đầu từ làm đến nay) 04/2022 − 03/2023: Kỹ thuật viên, Công ty SGS Việt Nam TNHH 07/2023 − nay: Nhân viên kinh doanh, Công ty TNHH SatiCus