Bài thu hoạch thực hành sinhlý gia súc buổi thứ nhất khảo sát cung phản xạ, quan sát hoạt động tim vàhệ tiêu hóa của ếch

TÊN KHOA: THÚ Y – CHĂN NUÔI TÊN MÔN HỌC: THỰC HÀNH SINH LÝ GIA SÚC BÀI THU HOẠCH THỰC HÀNH SINH LÝ GIA SÚC TÊN SINH VIÊN - MSSV : Phạm Đăng Khoa - 2287500104 LỚP : 22DTYA1 NHÓM THỰC HÀNH: Sáng thứ ba TÊN GIẢNG VIÊN : TS Nguyễn Thị Lan Anh BUỔI THỨ NHẤT: KHẢO SÁT CUNG PHẢN XẠ, QUAN SÁT HOẠT ĐỘNG TIM VÀ HỆ TIÊU HĨA CỦA ẾCH I Mục đích u cầu: Mục đích: - Khảo sát thành phần thuộc cung phản xạ thực hủy thành phần để nhận biết ếch bị phản xạ - Xác định, quan sát mô tả hoạt động bơm máu tim; phân biệt tâm nhĩ, tâm thất mạch máu ni tim; khảo sát tính tự động tim - Nhận diện phân tách đầy đủ quan tham gia tiêu hóa ếch Yêu cầu: - Quan sát mô tả hoạt động tim, nhận biết phân biệt tâm thất, nhĩ mạch máu nuôi tim Khảo sát tính tự động tim - Nhận biết tách đầy đủ quan tham gia tiêu hóa II Dụng cụ nguyên liệu: Dụng cụ: - Bao tay y tế, dây nilon, kim cong may, đinh cố định ếch, bơng gịn, dao mổ, kéo, nhíp, bàn mổ cao su, khay đựng bàn mổ, cốc thủy tinh, đồng hồ bấm giờ, điện thoại để quay phim, chụp ảnh, ghi nhận trình thực Nguyên liệu: - Mỗi nhóm ếch sống, axit hcl, nước lạnh III Tiến hành thí nghiệm: Chuẩn bị mẫu: - Dùng vật nhọn đâm xuyên miệng ếch sử dụng dây nilon treo ếch lên giá Khảo sát cung phản xạ: - Dùng nhíp nhúng chân ếch vào lọ chứa axit loãng - Hiện tượng quan sát được: Ếch cịn phản xạ co giật Qua đó, ta xác định ếch cịn đầy đủ thành phần cung phản xạ mà hệ thần kinh điều khiển phản xạ đáp ứng thể có kích thích phải thơng qua bao gồm: thụ quan (da), dây thần kinh truyền vào, thần kinh trung ương (não tủy), dây thần kinh truyền quan đáp ứng (ở trường hợp phần chân) - Tiếp theo dùng dao mổ cắt đứt dây thần kinh chân ếch lấy gịn thấm thuốc gây tê sát vào vị trí mổ Sau nhúng chân ếch vào dung dịch axit - Hiện tượng quan sát được: ếch không phản xạ Sau thành phần cung phản xạ ếch hồn tồn khả phản xạ chân chân tiếp xúc với axit loãng ban đầu 3 Khảo sát hoạt động tim tính tự động tim: - Đầu tiên, ta tháo gỡ dây nilon để hạ ếch xuống bàn mổ cao su đặt khay nhựa cố định tứ chi ếch đinh ghim - Dùng kéo kẹp cắt bỏ khoảng da ngực hình tam giác Dùng kéo nâng sụn xương ức,  bấm nhát hình chữ V giới hạn mỏm xương ức bụng thẳng Để tránh cắt phải mạch làm tổn thương tim, nâng mũi kéo cắt dọc hai đường sát hai bên xương ức Cuối cùng, cắt đường ngang phía đầu trước sụn xương ức Lật bỏ xương ức thấy tim lộ rõ xoang bao tim Cắt bỏ xoang bao tim (không chạm mũi kéo vào tim) - Ta quan sát tim ếch có ngăn gồm tâm nhĩ tâm thất Ngồi ra, máu ni thể ếch máu pha - Tim ếch trung tâm hệ tuần hoàn, hoạt động co dãn tim để đẩy máu vào mạch máu, hút máu tim qua van tim ngăn chứa máu ngăn tim Tim vừa hút vừa đẩy, mạch quản đường dẫn dịch máu, dịch bạch huyết từ  phận tim chiều ngược lại - Máu bơm từ tim qua động mạch, tiểu động mạch, mao quản đổ vào tĩnh mạch tim Máu lưu thông nhanh động mạch (khoảng 50 cm/s), chậm mao quản (khoảng 0,8cm/s) nhanh dần tĩnh mạch (khoảng 33cm/s) - Sau quan sát cấu tạo đếm nhịp tim kết tần số tim ghi nhận khoảng 54 nhịp/phút - Bước tiếp theo, dùng nhíp lật ngược tim lên phía trên, đặt sợi vắt ngang xoang nhĩ tâm nhĩ Lật tim lại tư ban đầu thắt lại (nút thắt thứ nhất) Luồn qua mặt sau tim, ngang chỗ rãnh nhĩ thất, thắt nút vào rảnh nhĩ thất (nút thắt thứ hai) Sau thắt sợi vào 1/3 tâm thất - Sau buộc chắn, ta cắt nút buộc cắt rời tim khỏi thể ếch hoàn toàn - Ngâm tim ếch vào lọ nước sạch, ta thấy tim co bóp nhịp nhàng khoảng thời gian định lượng (ở trường hợp protein phosphatase) tính tự động nhờ hạch tự động 4 Khảo sát nhận biết quan tham gia tiêu hóa, tách phận nộp mẫu theo nhóm - Hệ tiêu hóa ếch tập hợp nhiều quan tham gia tiết dịch tiêu hóa nghiền nát thức ăn bao gồm: + Ống tiêu hóa: khoang miệng, thực quản, dày, ruột non, ruột già + Tuyến tiêu hóa: tuyến gan-mật, tuyến tụy BUỔI THỨ HAI: KỸ THUẬT SỬ DỤNG KÍNH HIỂN VI QUANG HỌC, XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG HỒNG CẦU VÀ BẠCH CẦU I Kỹ thuật sử dụng kính hiển vi quang học: Mục đích yêu cầu: Mục đích: - Giúp sinh viên biết cách sử dụng bảo quản máy - Hướng dẫn sinh viên quan sát tế bào máy Yêu cầu: - Sinh viên thành thạo cách sử dụng kính hiểu vai trị phận kính 2 Khái niệm nguyên tắc: Khái niệm: Kính hiển vi quang học dụng cụ khơng thể thiếu phịng thí nghiệm  Ngun tắc: Kính hiển vi phóng đại tế bào nhiều lần Người sử dụng kính chọn độ phóng đại thích hợp (40, 100 ) Ngun liệu, dụng cụ:  Nguyên liệu: - Dầu soi kính, giấy mềm lau kính, dung dịch lau kính, bơng gịn, bao tay y tế - Tiêu máu Dụng cụ: Kính hiển vi quang học Tiến hành thí nghiệm: B1: Cắm vào điện 220v bật nguồn kiểm tra đèn chiếu sáng hoạt động hay khơng, sau chỉnh độ sáng phù hợp B2: Chỉnh thị kính đưa vật kính số vào ổ khớp B3: Đặt tiêu vào bàn để xem Sau trải nghiệm qua máy em có rút lưu ý sau cách sử dụng kính: Để quan sát hình ảnh cách rõ nét ta nên để độ sáng phù hợp, canh chỉnh tiêu vào trung tâm Xem tiêu tự vật kính nhỏ đến vật kính lớn chỉnh từ từ việc sử dụng óc vĩ cấp Khi xem vật kính lớn ta nên để ý khoảng cách giá đỡ mẫu vật kính Muốn xem vật kính 100 sau vật kính 40 thấy rõ ta xoay vật kính 40 khỏi khớp nhỏ giọt dầu vào Đây hình ảnh mà nhóm chúng em dã quan sát ghi nhận lại sau buổi thực hành này.  II Xác định tỷ dung tốc độ lắng hồng cầu Mục đích yêu cầu: Mục đích: Tìm hiểu tình trạng hồng cầu huyết tương Yêu cầu: Xác định tốc độ lắng hồng cầu sau 15, 30, 45, 60 phút Nguyên liệu dụng cụ:  Nguyên liệu: - Máu kháng đông Dụng cụ: - Máy ly tâm, bơng gịn, bóp cao su, pipetpaster, ống wintrobe 3 Tiến hành thí nghiệm: - Đầu tiên chuẩn bị ống wintrobe để đựng máu Dùng pipet cao su để hút máu cho vào ống đến vạch mức ống wintrobe Sau để ống lắng tự nhiên ống lại ta bỏ vào máy ly tâm với tốc độ 3000 vòng/phút 30 phút Kết ta thu hoạch được: Ống lắng tự nhiên Ống máy ly tâm Ống lắng tự nhiên Thời gian (phút) 15 30 45 60 Chiều cao (mm) 0.3 0,75 1,5 Ống ly tâm Thời gian (phút) 15 30 45 60 Chiều cao (mm) 0.5 1,55 2,1 2,8  Nhận xét: Sau xét nghiệm ta thấy khác biệt thời gian lắng ống Ống có hỗ trợ từ máy có tốc độ lắng nhanh so với ống để lắng tự nhiên Thí nghiệm chưa thực đạt thời gian cách thực chưa gây tình trạng nên qua e rút kinh nghiệm sau: + Phải xác cho kĩ thuật thực + Nếu muốn để máu ngồi thời gian trước làm nên trộn lại Ý nghĩa: Dựa vào tốc độ lắng hồng cầu giúp chúng em dễ dàng theo dõi tình trạng viêm nhiễm để theo dõi điều trị III Xác định số lượng hồng cầu bạch cầu Mục đích u cầu: Mục đích: Tìm hiểu tình trạng sức khỏe vật ni thơng qua thí nghiệm u cầu: Biết cách đếm hồng cầu bạch cầu Nguyên liệu dụng cụ:  Nguyên liệu: Máu kháng đông, dung dịch pha lỗng hồng cầu bạch cầu Dụng cụ: Kính hiển vi, buồng đếm, ống trộn bạch cầu hồng cầu, lamella, bóp,  pipet, bơng gịn, cốc để vệ sinh ống trộn (cốc nước, cốc nước cất cốc nước muối) Tiến hành thí nghiệm: Thí nghiệm đếm hồng cầu - Đầu tiên ta vệ sinh ống trộn hồng cầu, pipet cốc chuẩn bị, sau lấy pipet hút lượng máu nhỏ để lên lame, lại tiếp tục lấy ống trộn hồng cầu hút máu đến vạch 0,5 hút thêm dung dịch pha loãng hồng cầu đến vạch 101 Ta tiến hành trình trộn để nghỉ phút Đậy lame vào khu vực tráng bạc buồng đếm (đã vệ sinh) tiến hành công đoạn quan sát đếm hồng cầu Thí nghiệm đếm bạch cầu: - Đầu tiên ta vệ sinh ống trộn bạch cầu, pipet cốc chuẩn bị, sau lấy pipet hút lượng máu nhỏ để lên lame, lại tiếp tục lấy ống trộn bạch cầu hút máu đến vạch 0,5 hút thêm dung dịch pha loãng hồng cầu đến vạch 11 Ta tiến hành trình trộn để nghỉ phút Đậy lame vào khu vực tráng bạc buồng đếm (đã vệ sinh) tiến hành công đoạn quan sát đếm bạch cầu  Nhận xét: Qua thí nghiệm kết khơng đạt tiêu thiếu kĩ năng, thời gian thiết bị phịng thí nghiệm không đủ để hỗ trợ  Những kinh nghiệm: + Để có kết xác đẹp nên vệ sinh pipet, buồng đếm hút thể tích dung dịch ống trộn + Máu để lâu phải trộn lại trước cho vào sử dụng Ý nghĩa: Xác định số lượng hồng cầu bạch cầu giúp hiểu rõ tình trạng sức khỏe vật ni tìm hướng giải có vấn đề BUỔI THỨ BA: XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ HUYẾT ÁP, TẦN SỐ NHỊP TIM, KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG ASTT LÊN MÀNG HỒNG CẦU I Xác định tần số nhịp tim huyết áp lúc nghỉ ngơi lúc vận động: Mục đích yêu cầu: Mục đích: Giúp chúng em hiểu biết vai trò nhịp tim, yếu tố làm thay đổi tần số nhịp tim Yêu cầu: Qua em biết nguyên lý cách sử dùng dụng cụ đo huyết áp, hiểu ý nghĩa thông số huyết áp Nguyên liệu dụng cụ:  Nguyên liệu: Bạn thực tập Dụng cụ: Bộ dụng cụ đo huyết áp, ống nghe nhịp tim Tiến hành thí nghiệm: Đo trạng thái bình thường - Đầu tiên ta phải xác định mạch người cần đo (ở trạng thái nghỉ ngơi) cách lấy tay ta chạm vào phần gấp khuỷu tay trái vị trí 2/3 Sau xác định ta dùng túi cao su quấn ngang tay, nhét ống tai nghe vào vị trí mạch ta vừa xác định Kiểm tra van xem khóa chưa tiến hành bóp bóng tăng từ đến 160 Xả van từ từ theo dõi đồng hồ ghi nhận kết Đo trạng thái hoạt động - Ta thực bước khác chỗ phải cho người cần đo hoạt động (chạy) Sau lần đo trạng thái khác kết là: Trạng thái Cực đại Cực tiểu Bình thường 110 70 Hoạt động 140 90  Nhận xét: Để có kết xác ta cần lưu ý điểm sau: + Không nên quấn túi cao su chặt lỏng, ta nên quấn vừa đủ để túi không bị tuột xuống lúc đo + Không nên đo đo lại bạn hoài liên tục gây thương tổn đến bạn sai số + Tới trường hợp vận động nên thật vận động đừng chút lười  biếng mà kết khơng rõ ràng Ý nghĩa: Qua giúp em biết thêm cách đo biết thêm phần dấu hiệu nhận biết thú ni có bình thường hay khơng thơng số huyết áp Nếu cô cho tụi em đo thêm vật ni tụi em chưa có hội II. Khảo sát ảnh hưởng ASTT lên màng hồng cầu: Mục đích u cầu Mục đích: Hiểu vai trị ASTT dung dịch màng hồng cầu Yêu cầu: Quan sát màng hồng cầu bị ảnh hưởng thay đổi ASTT dung dịch Nguyên liệu dụng cụ:  Nguyên liệu: Máu kháng đông, cốc dd nhược trưởng, cốc dd ưu trương, cốc dd đẳng trương Dụng cụ: lame, lamella, kính hiển vi, pipetpaster Tiến hành thí nghiệm: - Tiến hành chuẩn bị miếng lame lamella, dùng ống pipetpaster (đã làm sạch) hút lượng máu, nhỏ ¼ giọt vào miếng lame chuẩn bị Sau ta nhỏ lên khoảng – giọt dung dịch ưu trương, nhược trương, đẳng trương theo thứ tự Xong trộn lấy lamella đậy lên lame Đánh số cho lame đợi kết quả.   Nhận xét: + Dung dịch ưu trương (NaCl 5%): ASTT dd lớn ASTT hồng cầu nên nước từ hồng cầu dung dịch làm hồng cầu teo lại, gây phá hủy màng hồng cầu, màng tế bào có vết nhăn đậm màu + Dung dịch nhược trương (NaCl 0.5%): ASTT dd nhỏ ASTT hồng cầu nên nước từ dung dịch vào làm hồng cầu căng phồng lên vỡ + Dung dịch đẳng trương (NaCl 0.9%): Trong dung dịch đẳng trương, tế  bào hồng cầu bình thường khơng bị vỡ Ý nghĩa: Sau thí nghiệm cho em biết quan trọng việc ổn định ASTT, định đến hình dạng, kích thước hồng cầu, từ ảnh hưởng đến chức hoạt động, sinh lý hồng cầu BUỔI THỨ TƯ: PHƯƠNG PHÁP TẠO TIÊU BẢN MÁU, XÁC LẬP CÔNG THỨC VÀ NHẬN DẠNG CÁC LOẠI BẠCH CẦU TRONG TIÊU BẢN I Phương pháp tạo tiêu máu: Mục đích yêu cầu: Mục đích: + Trang bị cho học viên kỹ thục hành tạo vết phết nhuộm tiêu máu Yêu cầu: + Học viên nằm vững nguyên lý kỹ thuật nhuộm + Nhận dạng loại bạch cầu tiêu từ xác định cơng thức Ngun liệu dụng cụ:  Nguyên liệu: Máu kháng đông, dầu soi kính, bơng gịn Dụng cụ: Kính hiển vi, lame, pipetpaster, cồn methanol, thuốc nhuộm (eosin, xanh methylen), nước cất Tiến hành thí nghiệm: - Đầu tiên chọn miếng lame (đã vệ sinh) có phần đầu thật nhẵn Dùng  pipetpaster hút máu nhỏ lên miếng lame A giọt máu nhỏ, sau ta dùng miếng lame lại để lên mặt miếng lame A trước giọt máu kéo cho máu trải cạnh miếng lame B kéo dứt khoát Tạo vệt máu hình lưỡi mèo, sau ta bắt đầu nhỏ cồn lên mặt miếng lame A chờ khô - Nhuộm màu tiêu bản: Sau khô, ta lấy miếng lame nhúng vào dung dịch eosin 1p30s lấy chờ khơ, sau tiếp tục nhúng vào dung dịch xanh methylen vòng 1p30s lấy để khoảng 30s đem rửa nước (nước chảy dịng nhỏ) Rồi đặt lên kính hiển vi bắt đầu tìm phân biệt bạch cầu tiêu Từ xác định cơng thức  bạch cầu Loại Ái toan Ái kiềm bạch cầu Trung Lâm ba tính Đơn Tổng nhân cộng Số lượng 35 45 15 100 Tỷ lệ 35 45 15 100 (%)  Nhận xét: Trong vấn đề khiến em bạn khó khăn việc  phết máu Sau N lần làm làm lại em rút số kinh nghiệm sau: + Máu không nên nhỏ nhiều không tạo vệt phết + Khi phết nên kéo nhanh dứt khốt khơng nhấc tay lên đừng kéo q dài + Có thất bại rửa lame r chờ khô làm lại đừng gấp để làm lại lần + Hãy đẩy đừng kéo máu làm máu phần đầu dày + Đừng ấn nhẹ đừng mạnh, dùng lực vệt máu đẹp Ý nghĩa: Qua giúp chúng em hiểu thêm dạng bạch cầu cách lập công thức bạch cầu Phần giúp em hiểu tình trạng bệnh lý vật ni Và phần rèn tính kiên trì bình tĩnh thơng qua phết máu BUỔI THỨ NĂM KHẢO SÁT SỰ TRƯƠNG NỞ CỦA PROTEIN TRONG DUNG DỊCH AXIT, TÁC DỤNG TIÊU HÓA CỦA ENZYME (INVITRO), SO SÁNH SỰ TIÊU HÓA GIỮA CÁC NHĨM I Mục đích u cầu: Mục đích: Nhận biết vai trị HCL dịch vị, enzyme việc tiêu hóa chứng minh enzyme có vai trị tiêu hóa thức ăn u cầu: Thực INVITRO ghi nhận kết II Nguyên liệu dụng cụ:  Nguyên liệu: Sợi chà heo (đã ngâm dd sẵn), dung dịch axit HCl (pH=3, pH=4), gói thức ăn gram, gói enzyme gram, nước cất, Dụng cụ: Lame, Lamella, kính hiển vi, ống nghiệm, khuấy, cốc thủy tinh, nồi đun sơi III Tiến hành thí nghiệm: Khảo sát trương nở protein môi trường pH - Chuẩn bị miếng lame gấp chà ngâm dung dịch (Hcl pH= Hcl pH= 4) giáo viên chuẩn bị tiến hành quan sát.  Hcl pH= Hcl pH= Khảo sát tiêu hóa tác dụng enzyme, tác động học kết hợp gia nhiệt - Chuẩn bị ống nghiệm bỏ vào ống ống 1g thức ăn, sau ta đánh số thứ tự để phân biệt từ đến Tiếp theo ta bắt đầu cho ống 1g enzyme trừ cốc thứ ta không cho - Tiếp đến cho dung dịch Hcl pH= vào ống thứ nhất, Hcl pH= vào ống thứ 2, nước vào ống cuối Đều thể tích 16 ml - Khuấy hỗn hợp ống đũa khuấy chuẩn bị thêm cốc nước ấm khoảng 40 độ để bỏ ống vào khuấy nhẹ tiếng 30  phút, ghi nhận kết Tên ống Ống Ống Ống Ống Mùi Cực nồng mùi  Nồng mùi cám Hơi nồng mùi Kém nồng cám cám Màu đoạn Vàng Vàng nhẹ Vàng Hơi đục vàng Độ dài đoạn Dài Dài nhì Dài thứ ba Dài thứ tư Độ dài đoạn Dài thứ tư Dài thứ ba Dài nhì Dài  Nhận xét: Qua thí nghiệm cho thấy rõ quan trọng pH việc tiêu hóa nhiệt độ thích hợp Ống (pH= 3) có tiêu hóa vượt trội ống cịn lại chứng minh mơi trường xúc tác enzyme quan trọng định đến q trình tiêu hóa Cịn ống khơng có enzyme kết khơng có tiêu hóa BÀI BÁO CÁO CỦA EM ĐẾN ĐÂY LÀ KẾT THÚC EM CẢM ƠN CÔ ĐÃ HƯỚNG DẪN VÀ QUAN SÁT TỤI EM GIÚP CHO TỤI EM CÓ NHỮNG KIẾN THỨC VÀ TRẢI NGHIỆM THIẾT THỰC TRONG TƯƠNG LAI EM CẢM ƠN CÔ RẤT NHIỀU