1584 đa dạng di truyền vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học và ứng dụng xử lý nước thải sau biogas của trại chăn nuôi heo ở đồng bằng sông cửu long luận

TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC HUỲNH VĂN TIỀN MSHV: 62031104 ĐA DẠNG DI TRUYỀN VI KHUẨN TỔNG HỢP CHẤT KẾT TỤ SINH HỌC VÀ ỨNG DỤNG XỬ LÝ NƢỚC THẢI SAU BIOGAS CỦA TRẠI CHĂN NUÔI HEO Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH VI SINH VẬT HỌC 2015 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC HUỲNH VĂN TIỀN MSHV: 62031104 ĐA DẠNG DI TRUYỀN VI KHUẨN TỔNG HỢP CHẤT KẾT TỤ SINH HỌC VÀ ỨNG DỤNG XỬ LÝ NƢỚC THẢI SAU BIOGAS CỦA TRẠI CHĂN NUÔI HEO Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH: VI SINH VẬT HỌC MÃ NGÀNH: 62 42 01 07 CÁN BỘ HƢỚNG DẪN PGS TS TRƢƠNG TRỌNG NGÔN PGS TS NGÔ THỊ PHƢƠNG DUNG 2015 LỜI CẢM TẠ Tôi xin chân thành cảm ơn: PGS.TS Trương Trọng Ngôn, GS.TS Cao Ngọc Điệp, PGS TS Hà Thanh Toàn PGS TS Ngô Thị Phương Dung dành thời gian quý báu tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành luận án Q Thầy Cơ giảng dạy chương trình nghiên cứu sinh chun ngành Vi sinh vật học, trường Đại học Cần Thơ truyền đạt cho kiến thức quý báu thời gian học tập Cán phịng thí nghiệm Vi Sinh Vật Sinh học Phân tử Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, trường Đại học Cần Thơ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án Cám ơn gia đình tất bạn bè động viên giúp đỡ tơi suốt q trình học tập thời gian thực đề tài! Tác giả HUỲNH VĂN TIỀN i CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu NCS Huỳnh Văn Tiền với hướng dẫn PGS TS Trương Trọng Ngôn PGS TS Ngô Thị Phương Dung Các số liệu kết trình bày luận văn trung thực, chưa công bố riêng lẻ tác giả khác cơng trình trước Người hướng dẫn khoa học Tác giả luận văn PGS TS TRƢƠNG TRỌNG NGÔN PGS TS NGÔ THỊ PHƢƠNG DUNG ii HUỲNH VĂN TIỀN MỤC LỤC Trang Lời cảm tạ i Lời cam đoan ii Mục lục iii Danh sách bảng vii Danh sách hình x Danh mục từ viết tắt xiii Tóm tắt xv Abstract xvii Chƣơng 1: Giới thiệu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nội dung nghiên cứu 1.2.1 Mục tiêu đề tài 1.2.2 Nội dung nghiên cứu 1.3 Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp mới, ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án 1.5 Cơ sở lý luận giả thuyết khoa học Chƣơng 2: Tổng quan tài liệu 2.1 Tổng quan chất thải chăn nuôi heo 2.1.1 Đặc điểm nước thải sau biogas chuồng trại chăn nuôi heo 2.1.2 Quản lý chất thải chăn nuôi heo giới 2.1.3 Quản lý chất thải chăn nuôi heo Việt Nam 2.2 Xử lý nƣớc thải chăn nuôi 2.2.1 Các tiêu đánh giá chất lượng nước 2.2.2 Biện pháp xử lý nước thải 2.3 Kết tụ sinh học nƣớc 2.3.1 Kết tụ sinh học (Bioflocculant) 2.3.2 Nghiên cứu vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 18 2.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến khả kết tụ vi khuẩn 23 2.3.4 Ứng dụng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học xử lý nước thải 29 iii 2.3.5 Quy trình ứng dụng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học xử lý nước thải 31 Chƣơng 3: Phƣơng pháp nghiên cứu 33 3.1 Phƣơng tiện nghiên cứu 33 3.1.1 Thời gian 33 3.1.2 Địa điểm 33 3.1.3 Vật liệu 33 3.1.4 Thiết bị 34 3.1.4 Hóa chất 34 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 35 3.2.1 Chuẩn bị mẫu 35 3.2.2 Phân lập làm 36 3.2.3 Phân tích xử lý số liệu 38 3.3 Nội dung nghiên cứu 38 3.3.1 Sơ đồ nghiên cứu tổng quát 38 3.3.2 Phân lập tuyển chọn dòng vi khuẩn tổng hợp chất kế tụ sinh học 40 3.3.3 Nhận diện vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học sinh học phân tử 41 3.3.4 Phân tích số đa dạng di truyền dựa trình tự 16S rRNA 46 3.3.5 Xác định yếu tố ảnh hưởng đến trình tổng hợp chất kết tụ sinh học hai chủng vi khuẩn tuyển chọn 47 3.3.6 Ly trích chất kết tụ sinh học 53 3.3.7 Thử nghiệm hiệu suất kết tụ nước thải chăn nuôi heo sau biogas vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 54 3.7.8 Ứng dụng chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học xử lý nước thải sau biogas 55 Chƣơng 4: Kết thảo luận 56 4.1 Kết phân lập vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học… 56 4.2 Đặc điểm dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 57 4.2.1 Đặc điểm dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học protein 57 4.2.2 Đặc điểm dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide 58 iv 4.3 Tỷ lệ kết tụ dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 59 4.3.1 Tỷ lệ kết tụ dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học protein 59 4.3.2 Tỷ lệ kết tụ dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide 59 4.4 Đặc điểm sinh học mối quan hệ di truyền chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học cao tỉnh đồng sông Cửu Long 61 4.4.1 Đặc điểm sinh học mối quan hệ di truyền chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học protein 61 4.4.2 Đặc điểm sinh học mối quan hệ di truyền chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide 68 4.5 Phân tích đa dạng di truyền chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 74 4.5.1 Đa dạng chủng loài vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học dựa vào số Shannon 76 4.5.2 Đa dạng di truyền chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 77 4.6 Xác định điều kiện tối ƣu cho khả tổng hợp chất kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P (protein) chủng vi khuẩn Bacillus aryabhattai KG12S (polysaccharide) 91 4.6.1 Mối tương quan thời gian nuôi ủ, tỷ lệ kết tụ mật độ vi khuẩn 91 4.6.2 Nhiệt độ nuôi ủ 93 4.6.3 Giá trị pH 94 4.6.4 Sự tương tác điều kiện nuôi sinh khối thời gian, pH nhiệt độ hai chủng vi khuẩn 97 4.6.5 Nguồn carbon, nguồn nitrogen khống vơ 101 4.6.6 Xác định ảnh hưởng tương tác yếu tố dinh dưỡng đến hiệu kết tụ sinh học 102 4.6.7 Ion kim loại bổ sung 106 4.6.8 Nồng độ dịch vi khuẩn bổ sung 108 4.6.9 Mối tương quan thời gian nuôi cấy, mật số vi khuẩn tỷ lệ kết tụ chủng vi khuẩn sau tối ưu 109 4.6.10 Kết sử dụng điều kiện tối ưu hai chủng vi khuẩn protein 110 v 4.6.11 Kết sử dụng điều kiện tối ưu hai chủng vi khuẩn polysaccharide 111 4.6.12 Đặc điểm sinh hóa chủng vi khuẩn có tỷ lệ kết tụ sinh học cao chọn thử nghiệm hiệu suất ứng dụng 112 4.7 Ly trích chất kết tụ sinh học đƣợc tổng hợp từ hai chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P Bacillus aryabhattai KG12S thử nghiệm hiệu kết tụ sinh học 113 4.7.1 Kết ly trích 113 4.7.2 Hiệu suất kết tụ sinh học 114 4.8 Thử nghiệm hiệu xử lý nƣớc thải sau biogas từ trại chăn nuôi heo 115 4.8.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ kết tụ (%) chủng vi khuẩn thử nghiệm nước thải thực tế 115 4.8.2 Thử nghiệm hiệu suất xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học thể tích 10 lít 119 4.8.3 Thử nghiệm hiệu suất xử lý nước thải chăn nuôi heo sau biogas chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học thể tích 100 lít 121 4.9 Hiệu xử lý nƣớc thải chăn nuôi heo sau biogas vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học thể tích m3 40 m3 122 4.9.1 Hiệu suất xử lý thể tích m3 122 4.9.2 Hiệu suất xử lý thể tích 40 m3 122 Chƣơng 5: Kết luận đề xuất 125 5.1 Kết luận 125 5.2 Đề xuất 126 Tài liệu tham khảo 127 Phụ lục 145 vi DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 Chất kết tụ sinh học tổng hợp từ chủng vi khuẩn khác từ năm 2007 – 2013 16 Bảng 2.2 Một số môi trường phân lập vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 19 Bảng 2.3 Một số cặp mồi sử dụng để nhận diện vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 20 Bảng 2.4 Ảnh hưởng nguồn carbon, nitrogen đến hiệu tổng hợp chất kết tụ sinh học đến vi khuẩn Klebsiella sp 26 Bảng 2.5 Ảnh hưởng nguồn carbon, nitrogen khoáng vô đến hiệu tổng hợp chất kết tụ sinh học đến vi khuẩn Serratia fiacria 27 Bảng 2.6 Ảnh hưởng ion kim loại đến kết tụ vi sinh vật tổng hợp chất kết tụ sinh học 27 Bảng 2.7 Liều lượng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học khác cho tỷ lệ kết tụ (%) dung dịch kaolin 29 Bảng 2.8 Ảnh hưởng liều lượng, nhiệt độ pH lên khả kết tụ chất kết tụ M-1 29 Bảng 2.9 Kết xử lý nước thải tinh bột nhân tố kết tụ 30 Bảng 2.10 Hiệu xử lý loại nước thải chất kết tụ sinh học từ vi khuẩn Serratia ficaria 31 Bảng 3.1 Một số tiêu nước thải trại chăn nuôi heo (sau biogas) huyện Bình Minh, tỉnh Vĩnh Long 34 Bảng 3.2 Môi trường phân lập vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 35 Bảng 3.3 Thành phần cho mẫu DNA thực phản ứng PCR 42 Bảng 3.4 Nghiệm thức bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên thí nghiệm 47 Bảng 3.5 Nghiệm thức bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên thí nghiệm 2a 49 Bảng 3.6 Nghiệm thức bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên thí nghiệm 2b 49 Bảng 3.7 Nghiệm thức bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên thí nghiệm 50 Bảng 3.8 Nghiệm thức thí nghiệm khảo sát tương tác yếu tố thời gian, pH nhiệt độ ủ đến tỷ lệ kết tụ hai chủng vi khuẩn 50 Bảng 3.9 Bố trí thí nghiệm theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên gồm yếu tố nguồn carbon, nitrogen khống vơ 51 vii Bảng 3.10 Nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ carbon, nitrogen khống vơ 51 Bảng 3.11 Bố trí thí nghiệm thử nghiệm hiệu suất kết tụ nước thải điều kiện phịng thí nghiệm 54 Bảng 4.1 Số mẫu phân lập số dịng vi khuẩn có khả tổng hợp chất kết tụ sinh học 56 Bảng 4.2 Các dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học protein có tỷ lệ kết tụ sinh học cao tỉnh ĐBSCL 59 Bảng 4.3 Các dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide có tỷ lệ kết tụ sinh học cao tỉnh ĐBSCL 60 Bảng 4.4 Đặc điểm sinh học 18 dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học protein 62 Bảng 4.5 Kết so sánh trình tự 16S rRNA 18 dòng vi khuẩn với dòng vi khuẩn ngân hàng gene 64 Bảng 4.6 Kết định danh 18 dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học protein 67 Bảng 4.7 Đặc điểm sinh học 16 dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide 69 Bảng 4.8 Kết so sánh trình tự 16S rRNA 16 dịng vi khuẩn so với dòng vi khuẩn ngân hàng gene 71 Bảng 4.9 Kết định danh 16 dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide 73 Bảng 4.10 Kết định danh chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học dựa phả hệ mối quan hệ di truyền 75 Bảng 4.11 Chỉ số đa dạng loài quần thể vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 76 Bảng 4.12 Chỉ số đa dạng chủng quần thể vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 77 Bảng 4.13 Giá trị Pi Theta nhóm vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học 83 Bảng 4.14 Các giá trị số haplotypes nhóm vi khuẩn 85 Bảng 4.15 Giá trị Pi Theta nhóm vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học Bacillus megaterium Bacillus aryabhattai 87 Bảng 4.16 Các giá trị số haplotypes nhóm vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học Bacillus megaterium Bacillus aryabhattai 88 Bảng 4.17 Các dạng haplotype chủng vi khuẩn Bacillus megaterium 88 Bảng 4.18 Các dạng haplotype chủng vi khuẩn Bacillus aryabhattai 88 viii Bảng 4.13b Ảnh hưởng thời gian nuôi sinh khối đến độ đục dung dich OD600 chủng vi khuẩn Bacillus aryhadtai KG12S OD660 Thời gian (giờ) Trung bình 0,12 0,11 0,12 0,12 1,43 1,41 1,41 1,42 24 1,54 1,54 1,56 1,55 48 1,64 1,65 1,65 1,65 72 1,67 1,66 1,69 1,67 96 1,60 1,61 1,6 1,60 120 1,56 1,55 1,57 1,56 144 1,43 1,83 1,14 1,47 168 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 3,96596 0,566566 2060,24 0,0000 Khác nhóm 0,0044 16 0,000275 Tổng cộng 3,97036 23 LSD1%= 0,29 CV% = 8,85 Thoi gian TS Trung bình Phân nhóm a 0,22 b 24 0,46 c 48 0,86 d 72 1,01 e 96 1,24 f 120 1,32 f 168 1,32 g 144 1,38 Bảng 4.14a Ảnh hưởng thời gian nuôi sinh khối đến mật số chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P OD660 Thời gian (giờ) Trung bình 3 3 10 10 10 103 7 24 10 10 10 107 9 48 10 10 10 3,67 109 9 72 10 10 10 6,67 109 9 96 10 10 10 7,67 109 9 120 6.10 10 10 109 9 144 10 10 10 109 8 168 10 10 10 6,67 108 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Nghiệm thức 1,15861E22 1,65515E21 97,84 0,0000 Sai số 2,70673E20 16 1,69171E19 Tổng cộng 1,18568E22 23 LSD1%= 9,80883E9 CV% = 29,54 Thoi gian TS Trung bình Phân nhóm a 6000,0 a 24 5,3E7 168 6,66667E8 a a 144 4,E9 a 48 4,E9 a 120 6,E9 b 96 3,E10 b 72 6,66667E10 195 Bảng 4.14b Ảnh hưởng thời gian nuôi sinh khối đến mật số chủng vi khuẩn Bacillus aryhadtai KG12S OD660 Thời gian Trung (giờ) bình 103 103 103 103 7 24 10 10 5,9 10 5,3 107 48 109 109 109 109 9 72 70 10 60 10 70 10 6,67 109 9 96 10 10 10 109 9 120 10 10 10 5,33 109 9 144 10 10 10 109 8 168 10 10 10 6,67 108 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 1,15861E22 1,65515E21 97,84 0,0000 Khác nhóm 2,70673E20 16 1,69171E19 Tổng cộng 1,18568E22 23 LSD1%= 9,81E+09 CV% = 29,55 Thoi gian TS Trung bình Phân nhóm a 6000,0 a 24 5,3E7 168 6,66667E8 a a 48 4,E9 a 144 4,E9 a 120 6,E9 b 96 3,E10 c 72 6,66667E10 Bảng 4.15a Tỷ lệ kết tụ kaolin chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học protein Tỷ lệ kết tụ (%) Stt Chủng vi khuẩn 10 11 12 13 14 15 16 17 18 GU048867 Bacillus megaterium strain KG32P JN642548 Bacillus megaterium strain KG61P HQ840732 Bacillus megaterium strain CT2P HQ242768 Bacillus megaterium isolate CT5P JF496506 Bacillus megaterium strain BT31P JF496506 Bacillus megaterium strain TG13P JF496506 Bacillus megaterium strain TV1P JF820121 Bacillus megaterium strain ST82P JN642548 Bacillus megaterium strain ĐT42P JF820121 Bacillus megateriumvstrain CM641P FJ976616 Bacillus megaterium strain CM64P JF496506 Bacillus megaterium strain AG49P JN642548 Bacillus megaterium strain AG84P FJ823003 Bacillus megaterium strain LA51P GU563347 Bacillus aryabhattai strain BL93P GU563347 Bacillus aryabhattai strain LA21P GU563347 Bacillus aryabhattai strain HG3P HM566988 Bacillus sp VL11P Bảng ANOVA Nguồn biến động Khác nhóm Khác nhóm Tổng cộng TBP 21885,6 34,0337 21919,6 BTD TBBP 17 1287,39 36 0,945381 53 196 76,12 74,21 57,04 21,34 73,24 89,08 52,13 75,68 69,31 66,21 78,12 65,19 68,19 93,47 24,01 74,21 53,02 31,07 78,09 73,12 56,42 19,87 72,41 88,01 51,23 76,12 68,07 64,53 77,31 66,04 67,32 92,29 22,31 73,09 51,29 30,04 79,26 72,11 55,63 19,82 72,08 88,31 50,34 77,47 68,86 64,96 75,95 67,18 69,23 94,32 25,27 74,65 52,07 29,17 Ftính Giá trị P 1361,76 0,0000 Trung Bình 77,82 73,15 56,36 20,34 72,58 88,47 51,23 76,42 68,75 65,23 77,13 66,14 68,25 93,36 23,86 73,98 52,13 30,09 LSD1%= 2,16 Ky hieu CT5P BL93P VL11P TV1P HG3P CT2P CM641P AG49P AG84P ?T42P BT31P KG61P LA21P ST82P CM64P KG32P TG13P LA51P TS 3 3 3 3 3 3 3 3 3 CV% = 1,54 Trung bình 20,3433 23,8633 30,0933 51,2333 52,1267 56,3633 65,2333 66,1367 68,2467 68,7467 72,5767 73,1467 73,9833 76,4233 77,1267 77,8233 88,4667 93,36 Phân nhóm a b c d d e f fg gh h i i i j j j k l Bảng 4.15b Tỷ lệ kết tụ kaolin chủng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide Stt Chủng vi khuẩn 10 11 12 13 14 15 16 JQ308585 Bacillus amyloliquefaciens BT2S GU122948 Bacillus amyloliquefaciens TG21S JQ407796 Bacillus aryabhattai KG12S JQ407796 Bacillus aryabhattai ĐT16S JQ407796 Bacillus aryabhattai BT1S JQ407796 Bacillus aryabhattai BL5S FJ174605 Bacillus megaterium HG1S FR821658 Bacillus megaterium CT63S JF496312 Bacillus megaterium CM31S JF935098 Bacillus subtilis AG75S FJ490057 Klebsiella pneumoniae LA1S FJ490057 Klebsiella pneumoniae ST71S GU272350 Klebsiella sp TV43S GU272350 Klebsiella sp ĐT42S EF426437 Sphingobacterium sp TG32S EF426437 Sphingobacterium sp VL4S Bảng ANOVA Nguồn biến động Khác nhóm Khác nhóm Tổng cộng TBP 18236,9 28,6202 18265,5 BTD 15 32 47 TBBP Ftính 1215,79 1359,37 0,894381 LSD1%= 2,11 Ky hieu ?T42S BL5S CT63S CM31S LA1S BT2S HG1S AG75S BT1S VL4S TV43S TG21S TG32S ST71S ?T16S KG12S TS 3 3 3 3 3 3 3 3 41,26 60,12 99,01 74,12 53,08 27,34 50,13 29,56 33,02 51,27 39,35 72,35 60,23 21,34 66,13 55,03 CV% = 1,83 Trung bình 20,2133 28,6733 30,21 32,4467 38,4733 40,6667 49,3133 50,2933 52,3133 54,2267 59,1333 59,3133 65,1567 72,1767 73,4533 98,8933 Phân nhóm a b b c d e f fg gh h i i j k k l 197 Tỷ lệ kết tụ (%) Trung bình 39,56 41,18 40,67 59,46 58,36 59,31 98,59 99,08 98,89 73,41 72,83 73,45 51,25 52,61 52,31 28,41 30,27 28,67 49,87 47,94 49,31 30,41 30,66 30,21 32,58 31,74 32,45 49,19 50,42 50,29 37,21 38,86 38,47 71,89 72,29 72,18 59,21 57,96 59,13 20,12 19,18 20,21 64,48 64,86 65,16 54,67 52,98 54,23 Giá trị P 0,0000 Bảng 4.16a Khối lượng chất kết tụ ly trích từ 100 ml dịch ni chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P Tỷ lệ kết tụ (%) Dạng kết tụ Trung bình Dịch vi khuẩn 0,33 0,34 0,34 0,34 Chất kết tụ 0,5 0,49 0,49 0,49 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Nghiệm thức 0,0368167 0,0368167 1104,50 0,0000 Sai số 0,000133333 0,0000333333 Tổng cộng 0,03695 LSD1%= 0,02 CV% = 1,39 Dang ket tu Tổng số Trung bình Phân nhóm X Dịch vi khuẩn 0,336667 X Chất kết tụ 0,493333 Bảng 4.16b Khối lượng chất kết tụ ly trích từ 100 ml dịch nuôi chủng vi khuẩn Bacillus aryhadtai KG12S Tỷ lệ kết tụ (%) Trung Dạng kết tụ bình Trước tối ưu 0,35 0,36 0,37 0,36 Sau tối ưu 0,49 0,5 0,45 0,48 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 0,0216 0,0216 54,00 0,0018 Khác nhóm 0,0016 0,0004 Tổng cộng 0,0232 LSD1%= 4,68 CV% = 3,01 Ky hieu Tổng số Trung bình Phân nhóm X Truoc toi uu 0,36 X Sau toi uu 0,48 Bảng 4.17a Tỷ lệ kết tụ kaolin dịch vi khuẩn chất kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P Tỷ lệ kết tụ (%) Dạng kết tụ Trung bình Dịch vi khuẩn 95,79 95,68 95,86 95,78 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Nghiệm thức 0,123267 0,123267 19,16 0,0119 Sai số 0,0257333 0,00643333 Tổng cộng 0,149 LSD1%= 3.00 CV% = 0,08 Dạng kết tụ Số lần Trung bình Phân nhóm Dịch vi khuẩn 95,7767 X Chất kết tụ 96,0633 X Bảng 4.17b Tỷ lệ kết tụ kaolin dịch vi khuẩn chất kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus aryhadtai KG12S Tỷ lệ kết tụ (%) Trung Dạng kết tụ bình Dịch vi khuẩn 94,19 94,56 95,29 94,68 Chất kết tụ 96,78 95,89 95,87 96,18 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 3,375 3,375 11,57 0,0272 Khác nhóm 1,1668 0,2917 Tổng cộng 4,5418 198 LSD1%= 4,68 CV% = 3,01 Chất kết tụ Tổng số Trung bình Phân nhóm X Dịch vi khuẩn 94,68 X Chất kết tụ 96,18 Bảng 4.18a Tỷ Tỷ lệ kết tụ chất thải sau hệ thống biogas dịch vi khuẩn chất kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P Tỷ lệ kết tụ (%) Dạng kết tụ Trung bình Dịch vi khuẩn 27,82 27,18 27,46 27,49 Chất kết tụ 27,98 28,01 28,00 28,00 Bảng ANOVA Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng TBP 0,39015 0,206333 0,596483 BTD TBBP Ftính Giá trị P 0,39015 7,56 0,0514 0,0515833 LSD1%= 0,85 CV% = 0,82 Dạng kết tụ Số lần Trung bình Phân nhóm Dịch vi khuẩn 27,4867 X Chất kết tụ 27,9967 X Bảng 4.18b T Tỷ lệ kết tụ chất thải sau hệ thống biogas dịch vi khuẩn chất kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus aryhadtai KG12S Tỷ lệ kết tụ (%) Dạng kết tụ Trung bình 30,18 30,12 30,12 30,14 Dịch vi khuẩn 30,08 30,79 30,79 30,55 Chất kết tụ Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 0,256267 0,256267 3,03 0,1568 Khác nhóm 0,338467 0,0846167 Tổng cộng 0,594733 LSD1%= 1,09 CV% = 0,96 Chất kết tụ Tổng số Trung bình Phân nhóm X Dịch vi khuẩn 30,14 X Chất kết tụ 30,5533 Bảng 4.19a Ảnh hưởng muối kim loại đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P Tỷ lệ kết tụ (%) Muối kim loại (1%) Trung bình KCL 18,97 19,01 18,01 18,66 NaCl 16,47 15,24 14,98 15,56 CaCl2 25,97 24,56 24,56 25,03 MgSO4 31,49 28,47 29,47 29,81 MnSO4 23,40 22,47 22,97 22,95 FeCl3 46,97 47,18 47,19 47,11 Al2(SO)4 50,97 51,47 50,68 51,04 Kaolin 4,98 5,01 5,03 5,01 Bảng ANOVA Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng cộng TBP 5083,78 8,75173 5092,53 BTD TBBP Ftính Giá trị P 726,254 1327,74 0,0000 16 0,546983 23 199 LSD1%= 1,76 CV% = 2,75 Muối kim loại Số lần Trung bình Phân nhóm Kaolin 5,00667 a NaCl 15,5633 b KCL 18,6633 c MnSO4 22,9467 d CaCl2 25,03 e MgSO4 29,81 f FeCl3 47,1133 g Al2(SO)4 51,04 h Bảng 4.19b Ảnh hưởng muối kim loại đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium TG13P Tỷ lệ kết tụ (%) Muối kim loại (1%) Trung bình 10,00 11,09 KCL 12,09 11,19 10,58 10,23 NaCl 10,21 9,89 16,98 17,56 CaCl2 18,34 17,35 22,82 22,17 MgSO4 21,17 22,53 16,32 16,43 MnSO4 17,09 15,87 37,80 38,47 FeCl3 39,51 38,09 44,53 45,12 Al2(SO4)3 45,67 45,17 1,81 2,12 Kaolin 2,39 2,17 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 4466,43 638,062 1239,24 0,0000 Khác nhóm 8,23813 16 0,514883 Tổng cộng 4474,67 23 LSD1%= 1,71 CV% = 0,96 Muoi kim loai TS Trung bình Phân nhóm a Kaolin 2,12333 b NaCl 10,2267 b KCL 11,0933 c MnSO4 16,4267 c CaCl2 17,5567 d MgSO4 22,1733 d FeCl3 38,4667 e Al2(SO)4 45,1233 Bảng 4.19c Ảnh hưởng muối kim loại đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus aryhadtai KG12S Tỷ lệ kết tụ (%) Muối kim loại (1%) Trung bình 16,84 18,27 KCL 18,97 19,01 15,81 15,17 NaCl 14,47 15,24 25,56 25,36 CaCl2 25,97 24,56 24,09 24,08 MgSO4 23,98 24,18 21,83 23,25 MnSO4 24,06 23,87 43,25 43,82 FeCl3 44,35 43,87 49,08 50,07 Al2(SO4)3 50,34 50,78 3,32 4,15 Kaolin 4,16 4,98 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 4682,64 668,948 918,01 0,0000 Khác nhóm 11,6591 16 0,728696 Tổng cộng 4694,3 23 200 LSD1%= 2,03 CV% = 3,34 Muoi kim loai TS Trung bình Phân nhóm Kaolin 4,15333 a NaCl 15,1733 b c KCL 18,2733 d MnSO4 23,2533 ef MgSO4 24,0833 f CaCl2 25,3633 g FeCl3 43,8233 h Al2(SO)4 50,0667 Bảng 4.19d Ảnh hưởng muối kim loại đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Klebsiella pneumoniae ST71S Tỷ lệ kết tụ (%) Muối kim loại (1%) Trung bình 11,86 12,29 KCL 11,93 13,09 11,08 10,98 NaCl 11,14 10,73 20,53 20,11 CaCl2 20,36 19,45 20,37 21,28 MgSO4 22,06 21,42 16,66 16,26 MnSO4 16,24 15,89 28,94 28,79 FeCl3 29,24 28,18 35,24 36,17 Al2(SO4)3 37,08 36,19 2,83 2,45 Kaolin 2,08 2,45 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 2357,7 336,814 890,44 0,0000 Khác nhóm 6,05207 16 0,378254 Tổng cộng 2363,75 23 LSD1%= 1,47 CV% = 3,32 Muoi kim loai TS Trung bình Phân nhóm a Kaolin 2,45333 b NaCl 10,9833 b KCL 12,2933 c MnSO4 16,2633 d CaCl2 20,1133 d MgSO4 21,2833 e FeCl3 28,7867 f Al2(SO)4 36,17 Bảng 4.20a Ảnh hưởng chất trợ lắng đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P Tỷ lệ kết tụ (%) Nghiệm thức Trung bình FeCl3 (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,25 g/l) 63,14 63,26 63,18 63,19 FeCl3 (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,5 g/l) 94,09 94,18 94,22 94,16 Bảng ANOVA Nguồn biến động TBP BTD TBBP Ftính Giá trị P Khác nhóm 1438,71 1438,71 352337,47 0,0000 Khác nhóm 0,0163333 0,00408333 Tổng cộng 1438,73 LSD1%= 0,24 CV% = 0,08 Chat tro lang TS Trung bình Phân nhóm X 63,1933 X 94,1633 201 Bảng 4.20b Ảnh hưởng chất trợ lắng đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium TG13P Tỷ lệ kết tụ (%) Nghiệm thức Trung bình FeCl3 (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,25 g/l) 55,78 56,02 53,66 55,15 FeCl3 (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,5 g/l) 87,08 86,23 85,25 86,19 Bảng ANOVA Nguồn biến động Khác nhóm Khác nhóm Tổng cộng LSD1%= 4,22 Chat tro lang TS 3 TBP 1444,6 5,05113 1449,65 BTD TBBP Ftính Giá trị P 1444,6 1143,98 0,0000 1,26278 CV% = 1,59 Trung bình Phân nhóm X 55,1533 X 86,1867 Bảng 4.20c Ảnh hưởng chất trợ lắng đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus aryhadtai KG12S Tỷ lệ kết tụ (%) Nghiệm thức Trung bình FeCl (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,25 g/l) 61,12 59,67 59,71 60,17 FeCl (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,5 g/l) 92,35 93,01 93,32 92,89 Bảng ANOVA Nguồn biến động Khác nhóm Khác nhóm Tổng cộng LSD1%= 2,56 Chat tro lang TS 3 TBP 1606,55 1,85493 1608,41 BTD TBBP 1606,55 0,463733 Ftính 3464,39 Giá trị P 0,0000 CV% = 0,89 Trung bình Phân nhóm X 60,1667 X 92,8933 Bảng 4.20d Ảnh hưởng chất trợ lắng đến hiệu kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Klebsiella pneumoniae ST71S Tỷ lệ kết tụ (%) Nghiệm thức Trung bình FeCl (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,25 g/l) 46,13 45,87 45,33 45,78 FeCl (0,5 g/l) + Dịch vi khuẩn (0,2 ml/l) + PAC (0,5 g/l) 78,05 77,34 78,18 77,86 Bảng ANOVA Nguồn biến động Khác nhóm Khác nhóm Tổng cộng TBP 1543,69 0,741933 1544,43 BTD TBBP 1543,69 0,185483 Ftính 8322,52 LSD1%= 1,62 CV% = 0,70 Chat tro lang Tổng số Trung bình Phân nhóm X 45,7767 X 77,8567 202 Giá trị P 0,0000 Bảng 4.21 Tỷ lệ kết tụ nghiệm thức ứng dụng vi khuẩn xử lý nước thải thể tích 10 lít Tỷ lệ kết tụ (%) Nghiệm thức Trung bình P1 P2 S1 S2 P1S1 P1S2 P2S1 P2S2 Đ/c Bảng ANOVA Nguồn biến động Khác nhóm Khác nhóm Tổng cộng LSD1%= 1,62 Nghiem thuc TS Đ/c P2 S2 P2S2 P1S2 P2S1 S1 P1S1 P1 81,08 46,23 71,23 54,76 73,21 60,24 64,35 59,34 32,77 79,17 45,21 70,21 55,32 71,89 59,87 65,19 58,87 31,21 81,74 45,43 69,41 55,45 71,97 60,74 66,76 56,74 31,63 80,66 45,62 70,28 55,18 72,36 60,28 65,43 58,32 31,87 TBP 5217,28 15,6843 5232,96 BTD TBBP Ftính 652,16 748,45 18 0,871352 26 CV% = 0,70 Trung bình Phân nhóm a 31,87 b 45,6233 c 55,1767 d 58,3167 d 60,2833 e 65,4333 f 70,2833 f 72,3567 g 80,6633 Giá trị P 0,0000 Bảng 4.22 Kết phân tích tiêu thử nghiệm hiệu suất xử lý chất thải sau hệ thống biogas chuồng trại chăn nuôi heo thể tích 10 lít chủng vi khuẩn KG12S Chỉ tiêu COD (mg/l) Hàm lượng Nitơ tổng (mg/l) TSS (mg/l) Hàm lượng Photpho tổng (mg/l) Hàm lượng Amonium (mg/l) Tỷ lệ kết tụ sau xử lý (%) Đ/C nƣớc thải sau biogas KG12S-1 KG12S-2 KG12S-3 Trung bình 1104 369,86 641 72,85 433 120,49 554 84,06 542,67 92,47 153,5 4,54 58,5 1,02 27,5 0,6 65 0,36 50,33 0,66 311,02 30,82 106,48 70,05 69,12 203 Bảng 4.22 Kết phân tích tiêu thử nghiệm hiệu suất xử lý chất thải sau hệ thống biogas chuồng trại chăn nuôi heo thể tích 10 lít chủng vi khuẩn LA51P Chỉ tiêu Tỷ lệ kết tụ sau xử lý (%) Đ/C nƣớc thải sau biogas COD (mg/l) Hàm lượng Nitơ tổng (mg/l) TSS (mg/l) Hàm lượng Photpho tổng (mg/l) Hàm lượng Amonium (mg/l) LA51P-1 LA51P-2 Trung bình LA51P-3 1104 369,86 438 98,07 247 148,51 246 131,69 310,33 126,09 153,5 4,54 37,5 1,08 21,5 0,42 27,5 0,54 28,83 0,68 311,02 84,06 112,08 117,68 104,61 Bảng 4.22 Kết phân tích tiêu thử nghiệm hiệu suất xử lý chất thải sau hệ thống biogas chuồng trại chăn nuôi heo thể tích 10 lít chủng vi khuẩn KG12S-LA51P Chỉ tiêu Tỷ lệ kết tụ sau xử lý (%) Đ/C nƣớc thải sau biogas COD (mg/l) Hàm lượng Nitơ tổng (mg/l) TSS (mg/l) Hàm lượng Photpho tổng (mg/l) Hàm lượng Amonium (mg/l) LA51P-1 LA51P-2 LA51P-3 Trung bình 1104 369,86 686 182,13 264 134,5 589 142,9 513,00 153,18 153,5 4,54 31,5 0,54 24,5 0,42 33,5 0,18 18,67 0,38 311,02 165,32 105,08 140,1 136,83 Bảng 4.22 Kết phân tích tiêu thử nghiệm hiệu suất xử lý chất thải sau hệ thống biogas chuồng trại chăn nuôi heo thể tích 100 lít chủng vi khuẩn LA51P Chỉ tiêu BOD5 200C (mg/l) COD (mg/l) Hàm lượng Nitơ tổng (mg/l) TSS (mg/l) Hàm lượng Photpho tổng (mg/l) Hàm lượng Amonium (mg/l) Đ/C nƣớc thải sau biogas Tỷ lệ kết tụ sau xử lý (%) Đ/C PAC (0,5 KG12S- KG12S- KG12S- Trung g/l) LA51P-1 LA51P-2LA51P-3 bình 1025 680 360 380 420 386,67 2314 368,93 1540 335,31 872 135,43 888 155,04 980 166,25 913,33 152,24 1975 34,29 1116,67 23,17 194 5,5 367 6,79 118 7,51 226,33 4,10 198,01 196,14 126,09 117,68 124,22 81,26 204 Bảng 4.23 Kết phân tích tiêu thử nghiệm hiệu suất xử lý chất thải sau hệ thống biogas chuồng trại chăn ni heo thể tích 100 lít chủng vi khuẩn KG12S-LA51P Chỉ tiêu BOD5 200C (mg/l) COD (mg/l) Hàm lượng Nitơ tổng (mg/l) TSS (mg/l) Hàm lượng Photpho tổng (mg/l) Hàm lượng Amonium (mg/l) Đ/C Tỷ lệ kết tụ sau xử lý (%) Đ/C nƣớc PAC (0,5 KG12S- KG12SKG12STrung thải sau g/l) LA51P-1 LA51P-2 LA51P-3 bình biogas 1025 680 170 185 215 190,00 2314 368,93 1540 335,31 409 83,13 451 93,4 516 90,06 286,67 58,84 1975 34,29 1116,67 23,17 200 8,01 291 6,46 332 5,67 274,33 6,71 198,01 196,14 64,45 61,64 63,51 63,20 Bảng 4.24 Kết phân tích tiêu thử nghiệm hiệu suất xử lý chất thải sau hệ thống biogas chuồng trại chăn ni heo thể tích m3 chủng vi khuẩn KG12S-LA51P Chỉ tiêu BOD5 200C (mg/l) COD (mg/l) Hàm lượng Nitơ tổng (mg/l) TSS (mg/l) Hàm lượng Photpho tổng (mg/l) Hàm lượng Amonium (mg/l) Đ/C Đ/C nƣớc PAC (0,5 thải sau g/l) biogas Tỷ lệ kết tụ sau xử lý (%) KG12SLA51P-1 KG12SLA51P-2 KG12SLA51P-3 Trung bình 200 145 40 38 30 36,00 403 88,73 289 39,23 85 61,64 81 70,05 90 80,14 85,33 70,61 81,5 0,48 125 17,69 28,5 2,75 29 4,4 24,5 2,03 27,33 3,06 72,85 31,76 50,5 63,89 70,61 40,37 Bảng 4.25 Kết phân tích thử nghiệm tiêu hiệu suất xử lý chất thải sau hệ thống biogas chuồng trại chăn ni heo thể tích 40 m3 chủng vi khuẩn KG12S-LA51P Chỉ tiêu BOD5 200C (mg/l) COD (mg/l) Hàm lượng Nitơ tổng (mg/l) TSS (mg/l) Hàm lượng Photpho tổng (mg/l) Hàm lượng Amonium (mg/l) Đ/C nƣớc thải sau biogas Đ/C PAC (0,5 g/l) Tỷ lệ kết tụ sau xử lý (%) KG12SLA51P-1 KG12STrung bình LA51P-2 300 501 250 407 43 83 38 75 19 37,5 12,59 2,42 5,58 6,17 3,085 137 183 50 48 24 35,87 194,46 39,23 41,47 20,735 31,.94 161,96 36,43 36,99 18,495 205 PHỤ LỤC MỘT SỐ KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ỨNG DỤNG VI KHUẨN TỔNG HỢP CHẤT KẾT TỤ SINH HỌC TRONG THỬ NGHIỆM HIỆU SUẤT XỬ LÝ NƢỚC THẢI 5.1 Mẫu đối chứng 5.2 Mẫu đối chứng xử lý nƣớc thải sau biogas trại chăn nuôi heo PAC (0,1%) 206 5.3 Nghiệm thức sử dụng kết hợp chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LA51P với Bacillus aryabhattai strain KG12S 5.3.1 Kết phân tích tiêu ứng dụng vi khuẩn thử nghiệm hiệu suất xử lý nƣớc thải sau biogas thể tích lít 5.3.2 Kết phân tích tiêu ứng dụng vi khuẩn thử nghiệm hiệu suất xử lý nƣớc thải sau biogas thể tích 100 lít 207 5.3.3 Kết phân tích tiêu ứng dụng vi khuẩn thử nghiệm hiệu suất xử lý nƣớc thải sau biogas thể tích m3 5.3.4 Kết phân tích tiêu ứng dụng vi khuẩn thử nghiệm hiệu suất xử lý nƣớc thải sau biogas thể tích 40 m3 208 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Huỳnh Văn Tiền Cao Ngọc Điệp, 2013 Phân lập, tuyển chọn phân tích đa dạng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học chất thải sau biogas từ chuồng trại heo ĐBSCL Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn, số 08 Huỳnh Văn Tiền Cao Ngọc Điệp, 2013 Phân lập, tuyển chọn phân tích đa dạng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học polysaccharide chất thải sau biogas chuồng trại nuôi heo ĐBSCL, Hội nghị khoa học Công nghệ sinh học toàn quốc 2013, 2, pp 518-522 Huỳnh Văn Tiền, Cao Ngọc Điệp Đinh Thị Bé Hiền, 2014 Tối ưu hóa khả tổng hợp chất kết tụ sinh học từ dòng vi khuẩn Bacillus megaterium longan.51 thử nghiệm xử lý nước thải sau biogas chuồng trại chăn ni heo Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn, số 17 Huỳnh Văn Tiền, Cao Ngọc Điệp Trương Trọng Ngôn, 2014 tối ưu hóa khả tổng hợp chất kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus aryabhattai KG12S thử nghiệm xử lý nước thải sau biogas từ trại chăn ni heo Tạp chí Đại học Cần Thơ (Đã duyệt xuất bản) Đề tài Khoa học Công nghệ cấp trường Đại học Cần Thơ Tên đề tài: Phân lập tuyển chọn vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học nước thải chăn nuôi heo sau biogas ĐBSCL , mã số: TNCS2012-39 – Chủ nhiệm đề tài: Huỳnh Văn Tiền – nghiệm thu năm 29/12/2012 (Kèm biên nghiệm thu) Đề tài Khoa học Công nghệ cấp trường Đại học Cần Thơ Tên đề tài: Biện pháp nâng cao tỷ lệ kết tụ dòng vi khuẩn tổng hợp chất kết tụ sinh học tuyển chọn phân lập nước thải chăn nuôi heo sau hệ thống biogas , mã số: TNCS2013-04 – Chủ nhiệm đề tài: Huỳnh Văn Tiền – nghiệm thu năm 21/03/2014 (Kèm biên nghiệm thu) Trợ hướng dẫn khoa học Luận văn Thạc sĩ, tên đề tài: Tối ưu hóa điều kiện tổng hợp chất kết tụ sinh học chủng vi khuẩn Bacillus megaterium LONGAN.51 thử nghiệm hiệu xử lý nước thải sau biogas từ trại chăn nuôi heo Tác giả: Đinh Thị Bé Hiền, học viên Cao học, khóa 19, chuyên ngành Công nghệ sinh học Kết điểm A (Kèm xác nhận phiếu nhật ký trợ nghiên cứu khoa học) 209