Giáo trình hoạt chất sinh học từ vi sinh vật

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI GIÁO TRÌNH HOẠT CHẤT SINH HỌC TỪ VI SINH VẬT Chủ biên: PGS.TS Phạm Thị Tâm Các tác giả: Lê Minh Hà, Vũ Thị Bích Huyền, Nguyễn Thị Thu Hiền, Lê Minh Hải, Võ Thị Bích Thuỷ Hà Nội, 2022 LỜI NÓI ĐẦU Hoạt chất sinh học từ vi sinh vật đối tƣợng mà nhà khoa học, nhà sản xuất toàn giới lĩnh vực công nghiệp dƣợc, công nghiệp thực phẩm sản xuất chế phẩm ứng dụng nông nghiệp, lâm nghiệp, nuôi trồng thuỷ sản quan tâm Giáo trình giới thiệu nguồn vi sinh vật, quy trình lên lên thu nhận hoạt chất; giới thiệu hoạt chất phƣơng pháp sàng lọc hoạt chất từ vi sinh vật bao gồm: - Hoạt chất kháng vi sinh vật; - Hoạt chất chống khối u; - Hoạt chất ức chế enzyme; - Các hoạt chất có hoạt tính dƣợc lý điều hồ miễn dịch vận mạch; - Hoạt chất ứng dụng nông nghiệp; - Nguồn phân lập số loài vi sinh vật có hoạt chất hữu dụng, quy trình lên men cải biến sản xuất hoạt chất từ vi sinh vật Với nội dung đề cập trên, giáo trình tài liệu để giảng dạy học phần Các hoạt chất từ vi sinh vật cho học viên hệ đào tạo thạc sỹ ngành công nghệ sinh học, công nghệ thực phẩm đồng thời tài liệu có giá trị tăng cƣờng, củng cố kiến thức liên quan đến vi sinh vật, công nghệ hoạt chất từ vi sinh vật, công nghệ sản xuất dƣợc phẩm, thực phẩm chức năng; công nghệ sản xuất chế phẩm phục vụ sản xuất nơng nghiệp có nguồn gốc tự nhiên Q trình biên soạn sách có thiếu sót định, tập thể tác giả mong nhận đƣợc ý kiến góp ý ngƣời đọc để hồn thiện sách lần xuất sau Trân trọng BAN BIÊN SOẠN MỞ ĐẦU Vi sinh vật sinh vật có kích thƣớc cực nhỏ, khơng thể quan sát đƣợc mắt thƣờng, chúng bao gồm vi khuẩn cổ, vi khuẩn, vi nấm, động vật nguyên sinh, tảo virus Sự đa dạng vi sinh vật nguồn cung cấp lƣợng lớn hợp chất có hoạt tính độc đáo, khoảng 23.000 chất chuyển hóa thứ cấp từ vi sinh vật đƣợc biết đến, xạ khuẩn tạo khoảng 42%, vi nấm tạo lƣợng tƣơng đƣơng khoảng 42%, 16% lại đƣợc tạo vi khuẩn Những hợp chất có hoạt tính sinh học có nguồn gốc từ vi sinh vật đƣợc gọi hoạt chất sinh học, hợp chất chất chuyển hóa thứ cấp, chúng hormone tăng trƣởng, sắc tố, kháng sinh, kháng virus, chất chống oxy hoá, chất chống ung thƣ, chất điều hoà miễn dịch, chất ứng dụng sản xuất nông nghiệp,… Các hợp chất không đƣợc sử dụng cho tăng trƣởng phát triển vi sinh vật nhƣng chúng có tiềm ứng dụng hiệu cho sức khỏe ngƣời, vật nuôi trồng Việc tìm kiếm sử dụng chất chuyển hóa thứ cấp có hoạt tính từ vi sinh vật thu hút ý, quan tâm số lƣợng lớn nhà khoa học phạm vi tồn cầu, hƣớng tìm kiếm đƣợc tiếp cận theo hai hƣớng, bao gồm để nhận biết hợp chất tự nhiên có lợi để xác định sinh vật sản xuất hợp chất để khai thác chúng cách hợp lý Từ kết phát vi sinh vật tổng hợp chất chuyển hóa thứ xây dựng chiến lƣợc lƣu giữ, bảo quản loài tiềm để phát triển loại thuốc Các hoạt chất sinh học đƣợc phát không ngừng gia tăng, hoạt động chúng đƣợc thay đổi nhiều thập kỷ qua, theo đó, thuốc kháng sinh có đích công không đơn vi khuẩn mà cịn vi sinh vật khác nhƣ nhƣ nấm, động vật nguyên sinh Bên cạnh đó, hợp chất hoạt tính sinh học có chất ―phi kháng sinh‖ tăng số lƣợng với tăng mạnh nguồn vi sinh vật sản xuất chất chuyển hóa Sự phát triển cơng nghệ sinh học phân tử, đặc biệt công nghệ DNA tái tổ hợp đóng vai trị quan trọng việc chế tạo giống vi sinh vật biến đổi gen sàng lọc vi sinh vật có tiềm Đồng thời, đa dạng phƣơng pháp sàng lọc hoá sinh đại cho phép phát hoạt tính sinh học hợp chất biết nhƣ dẫn xuất chúng Trƣớc năm 1965, hoạt động tìm kiếm, sàng lọc hoạt chất sinh học từ vi sinh vật tập trung vào mục tiêu thuốc kháng sinh, nhiên, sau đó, nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học khác đƣợc quan tâm nghiên cứu Đến năm 1990, tỷ lệ chất có hoạt tính sinh học ―phi kháng sinh‖ đƣợc phát 53% Trong thập kỷ gần đây, hoạt chất sinh học đƣợc phát đƣợc sử dụng nhiều lĩnh vực, bên cạnh loại hoạt chất kháng khuẩn, chúng chất điều hòa miễn dịch, chất ức chế enzym, tác nhân dẫn truyền thần kinh, chống khối u, ức chế enzyme, điều hồ q trình chuyển hố CHƢƠNG HOẠT CHẤT KHÁNG VI SINH VẬT Hoạt chất kháng khuẩn Penicillin, đƣợc phát Fleming vào năm 1928, đƣợc tiếp tục nghiên cứu hoạt tính Chain cơng (1940) nhƣ chất hóa trị liệu Cùng năm đó, Waksman bắt đầu sàng lọc chất kháng khuẩn xạ khuẩn đất tạo ra, phát xạ khuẩn có khả sản sinh hoạt chất chống khối u Sau nhiều loại kháng sinh có tác dụng tốt mặt lâm sàng nhƣ streptomycin, chloramphenicol (chloromycetin), chlortetracycline (aureomycin), neomycin, oxytetracycline (terramycin), erythromycin, đƣợc phát hiện, hầu hết bệnh nhiễm trùng vi khuẩn dƣờng nhƣ đƣợc giải Với liệu pháp kháng sinh, bệnh nhiễm trùng huyết nhiễm Streptococcus Staphylococcus nhiễm trùng đƣờng ruột nặng vi khuẩn Gram âm gây giảm đáng kể, tuổi thọ trung bình ngƣời đƣợc tăng dần lên Tuy nhiên, khoảng 10 năm sau liệu pháp kháng sinh đƣợc sử dụng phổ biến giới, số loài vi khuẩn gây bệnh nhƣ Staphylococcus, Mycobacterium vi khuẩn đƣờng ruột Gram âm xuất khả kháng lại số loại thuốc kháng sinh Sau đó, chủng vi khuẩn kháng thuốc đƣợc sử dụng làm sinh vật thử nghiệm để phát triển đƣợc loại kháng sinh hữu hiệu Sau chế kháng kháng sinh vi khuẩn nhƣ biến đổi enzyme, giảm tính thấm tế bào, giảm lực ribosome đƣợc làm sáng tỏ, nhiều dẫn xuất kháng sinh đƣợc nghiên cứu mặt hóa học sinh học dựa tảng thông tin chế kháng thuốc Các chiến lƣợc phƣơng pháp sàng lọc kháng sinh hữu ích đƣợc điều chỉnh Các kết nghiên cứu chế hoạt động kháng sinh đƣợc áp dụng cho phƣơng pháp sàng lọc, độc tính chọn lọc hoạt chất điều trị phải vƣợt trội tác dụng phụ Từ quan điểm này, số loại kháng sinh -lactam chất ức chế sinh tổng hợp thành tế bào vi khuẩn đƣợc phát phƣơng pháp sàng lọc khác Tuy nhiên, bệnh viện xảy vấn đề nhiễm trùng hội bệnh nhân sau mổ, phần suy giảm miễn dịch chống lại mầm bệnh khác nhau, với mầm bệnh yếu Những bệnh nhiễm trùng hội chủ yếu vi khuẩn Gram âm nhƣ Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus sp Serratia marcescens gây Ngày nay, số nỗ lực to lớn việc tạo loại kháng sinh kháng khuẩn đƣợc thực hiện, chúng vƣợt trội độc tính chọn lọc, đặc tính dƣợc động học điều trị bệnh nhiễm trùng phức tạp gồm bệnh nhiễm trùng hội Để khám phá loại kháng sinh có hiệu quả, có hai đối tƣợng cần đƣợc nghiên cứu mà bị tách rời Một "phát hiện" chất chuyển hóa hai "sản xuất" chất chuyển hóa có hoạt tính Vấn đề bao gồm cách phát vi sinh vật cách để vi sinh vật sản xuất chất chuyển hóa khác Vấn đề thứ hai cần phát hiệu lực hiệu hoạt tính chất chuyển hóa Các phƣơng pháp sàng lọc hoạt chất kháng khuẩn đƣợc điều chỉnh phù hợp với các đặc điểm gây bệnh tác nhân vi sinh vật chế hoạt động kháng sinh Theo truyền thống, hoạt tính kháng khuẩn đƣợc phát phƣơng pháp khuếch tán thạch sử dụng số chủng vi khuẩn gram dƣơng gram âm làm sinh vật thử nghiệm Từ năm 1970, phƣơng pháp đƣợc thay thành công cách phát dựa thay đổi hình thái sinh vật thử nghiệm, sử dụng thể đột biến siêu nhạy, ức chế hoạt tính enzyme vi khuẩn, ứng dụng kháng thể đơn dòng thử nghiệm chất hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme Phƣơng pháp thử nghiệm khuếch tán thạch sử dụng số vi khuẩn làm sinh vật thử nghiệm giải pháp đơn giản dễ sử dụng việc sàng lọc loài vi sinh vật sản sinh hoạt chất có hoạt tính kháng khuẩn Tuy nhiên, phƣơng pháp có hạn chế việc xác định chất nhóm chất có hoạt tính kháng khuẩn mẫu vi khuẩn mục tiêu Hiện nay, công nghệ sinh học đại cho phép sử dụng nhiều phƣơng pháp để sàng lọc hiệu hoạt chất kháng khuẩn Sử dụng thể đột biến kháng kháng sinh Sự phát triển tác nhân gây bệnh có khả kháng kháng sinh thúc đẩy nỗ lực tìm kiếm loại thuốc kháng sinh có hoạt tính chống lại vi khuẩn kháng thuốc Theo đó, thể đột biến kháng thuốc đƣợc sử dụng quy trình sàng lọc chủng kháng thuốc theo chế ức chế enzyme ức chế hệ thống vận chuyển qua màng tế bào Trong quy trình sàng lọc gần đây, để tìm kháng sinh ngiowf ta sử dụng chủng đột biến kháng kháng sinh Staphylococcus aureus 4R (có nguồn gốc từ chủng S aureus FDA 209P), chủng có đặc điểm đột biến kháng tetracycline, erythromycin, chloramphenicol streptomycin Để tìm kháng sinh nhạy cảm với chủng Staphylococcus aureus 4R, khoảng 2.000 chủng xạ khuẩn đƣợc sử dụng, từ phát loại kháng sinh có chất dipeptide có tên alahopcin Thuốc kháng sinh đƣợc cho chất ức chế tổng hợp thành tế bào vi khuẩn, ức chế liên kết axit [3H] diaminopimelic Escherichia coli Alahopcin cho thấy khả liên kết với erythromycin chống lại vi khuẩn kháng thuốc, đặc biệt loài vi khuẩn kháng macrolid Trong quy trình sàng lọc khác để phát kháng sinh có chất oligopeptide, chủng đột biến kháng thuốc Bacillus subtilis SRY-7 đƣợc sử dụng làm vi sinh vật thử nghiệm Sử dụng chủng vi sinh vật đột biến siêu nhạy với kháng sinh Để trực tiếp phát lƣợng nhỏ kháng sinh đƣợc tạo dịch nuôi cấy phƣơng pháp khuếch tán thạch truyền thống, ngƣời ta sử dụng thể đột biến siêu nhạy sinh vật thử nghiệm thông thƣờng Trong phần lớn nghiên cứu sàng lọc hoạt chất kháng khuẩn, chủng đột biến nhạy với nhiều loại thuốc thƣờng đƣợc sử dụng, nhiên, trƣờng hợp đặc biệt, với lƣợng nhỏ kháng sinh đƣợc tạo chủng đột biến siêu nhạy với loại kháng sinh cụ thể đƣợc ƣu tiên nghiên cứu sử dụng Kháng sinh pyrrole-amidine TAN-868 A có hoạt tính chống lại vi khuẩn, nấm động vật nguyên sinh có nguồn gốc từ xạ khuẩn Streptomyces idiomorphus đƣợc phát thông qua chủng vi khuẩn Micrococcus flavus siêu nhạy Sử dụng vi khuẩn kỵ khí thử nghiệm điều kiện kỵ khí Các bệnh nhiễm trùng hội số vi khuẩn kỵ khí có khả gây tỷ lệ tử vong cao Để tìm kiếm kháng sinh chống lại vi khuẩn kỵ khí, lồi Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium, Peptococcus, vi khuẩn kỵ khí khác đƣợc sử dụng làm sinh vật thử nghiệm Một số Clostridium difficile, tác nhân gây bệnh gây bệnh viêm đại tràng màng giả lồi vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt Để ni cấy Clostridium difficile, đĩa thạch hai lớp đƣợc chuẩn bị, đó, vi khuẩn đƣợc cấy bề mặt lớp thạch bên dƣới lớp thạch phía có vai trò ngăn oxy cung cấp chất dinh dƣỡng Bằng phƣơng pháp này, số kháng sinh thiotetromycin, luminamicin, lustromycin, closetomicin A, B1, B2, C, D đƣợc tìm thấy Từ năm 1987- 1988, số nhà khoa học mô tả phƣơng pháp việc phát abbeymycin, coloradocin (luminamicin), tirandalydigin kỹ thuật nuôi yếm khí Ngƣời ta thấy hoạt tính kháng khuẩn fosfomycin điều kiện kỵ khí mạnh điều kiện hiếu khí, dựa thực tế này, việc sàng lọc kháng sinh có hoạt tính mạnh điều kiện kỵ khí đƣợc ƣu tiên so với điều kiện hiếu khí Trong số vài kháng sinh đƣợc lựa chọn hệ thống sàng lọc này, kháng sinh SF-2312, axit 1,5-dihydroxy-2-oxopyrrolidin-3-yl-phosphonic đƣợc tìm thấy Phát khả liên hợp Trong lĩnh vực lâm sàng, việc sử dụng kết hợp hai nhiều hoạt chất kháng khuẩn để điều trị bệnh nhiễm trùng vi khuẩn nghiêm trọng cần thiết Cách tiếp cận dựa sở hoạt chất hoạt động phối hợp với thể sống (in vivo) Thử nghiệm sàng lọc kháng sinh có hoạt tính kháng khuẩn chống lại vi khuẩn E coli đƣợc thử nghiệm với spiramycin- loại kháng sinh khơng có hiệu việc chống lại vi khuẩn gram âm Hoạt chất kháng khuẩn dịch lên men chủng vi sinh vật đƣợc xác định phƣơng pháp khuếch tán thạch đĩa giấy sử dụng vi khuẩn E coli ATCC 26 làm sinh vật thử nghiệm, liều spiramycin 40 µg/ml Nghiên cứu phát đƣợc loại kháng sinh ký hiệu CV-l Mặc dù hoạt tính kháng khuẩn CV-1 yếu, nhƣng cho tác dụng chống lại vi khuẩn E coli kết hợp với spiramycin CV-l có cơng thức 1,2-diamino-l, 2-N, N'-carbonyl-l, 2-dideoxy-a-Dglucose hydrat dƣờng nhƣ hoạt động theo chế ức chế tổng hợp lipopolysaccharide Lipopolysaccharide màng vi khuẩn có vai trị nhƣ hàng rào vận chuyển, kết hợp CV-1 với màng dƣờng nhƣ tạo khả xâm nhập spiramycin vào tế bào vi khuẩn E coli tiêu diệt chúng Thử nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme miễn dịch phóng xạ Các thử nghiệm miễn dịch với nhiều loại khác đƣợc sử dụng rộng rãi phịng thí nghiệm lâm sàng để phát phân tích định lƣợng kháng thể, hormones thuốc dịch thể Trong phịng thí nghiệm vi sinh nơng nghiệp, thí nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme (ELISA) đƣợc áp dụng để phát định lƣợng nhanh độc tố nấm mốc Một số nghiên cứu thực phát triển ELISA để phát kháng sinh aminoglycoside sinh khối lên men chủng vi sinh vật, kháng sinh dẫn xuất erythromycin, hoạt chất chống nấm da đƣợc phát kỹ thuật 1.1 Xác định kháng sinh biết Việc phát kháng sinh ngày trở nên khó khăn hơn, nên thử nghiệm cần phải tăng độ nhạy với thời gian thử nghiệm ngắn Hơn nữa, việc xác định nhanh chóng xác loại kháng sinh điều hồn tồn cần thiết để tránh lãng phí nỗ lực trùng lặp Trong hầu hết phịng thí nghiệm, liệu sẵn có phổ kháng vi khuẩn phổ sắc ký lớp mỏng giấy kháng sinh biết đƣợc sử dụng để xác định phân loại kháng sinh ban đầu môi trƣờng nuôi cấy thô Các nghiên cứu đề cập đến việc xác định sớm kháng sinh dựa kháng sinh biết đƣợc thực dựa phƣơng pháp vật lý, phƣơng pháp tia X, khối phổ, cộng hƣởng từ hạt nhân Để biết liệu loại kháng sinh đƣợc phát hay đƣợc xác định, cần đƣợc so sánh đặc điểm vật lý, hóa học với đặc điểm hợp chất biết sở liệu kháng sinh Ngày nay, 6.000 loại thuốc kháng sinh số lƣợng tƣơng tự chất chuyển hố khơng hoạt động vi sinh vật tạo đƣợc đƣa vào sở liệu chứa kháng sinh với đặc điểm vật lý, hóa học sinh học Sàng lọc trực tiếp mục tiêu Phƣơng pháp sàng lọc tiếp cận theo hƣớng tập trung vào chế hoạt động kháng sinh Thông thƣờng, sở kết nghiên cứu chế hoạt động kháng sinh có hiệu tốt đƣợc biết, số đồng phân cấu trúc thay chúng tiếp tục đƣợc phát Đôi khi, enzyme vị trí thụ thể hoạt chất kháng khuẩn biết đƣợc ghi nhận sử dụng làm mục tiêu sàng lọc 1.2 Các chất ức chế tổng hợp thành tế bào vi khuẩn 10 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an diacetyl, hai cho thấy độ nhạy cao gốc guanidine amidine Hình 57 Cấu trúc hố học alkaloid dƣơng tính với thuốc thử Sàng lọc hóa học sử dụng phản ứng màu đƣợc mô tả hƣớng tới việc tìm kiếm hợp chất có nhóm chức phân tử hợp chất kháng sinh có hoạt tính dƣợc lý biết Mặc dù hợp chất có hoạt tính sinh học hiệu staurosporine chƣa đƣợc tìm thấy phƣơng pháp nhƣng nay, nguyên tắc, phƣơng pháp cho hiệu tốt việc tìm kiếm hợp chất quan trọng nhƣ β-lactams prostaglandins 5.3 Sàng lọc thuốc thử ehrlich tetrazolium Việc phát hợp chất phƣơng pháp sàng lọc hóa học dựa phản ứng màu thƣờng gặp phải vấn đề sau: 245 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an i) Ngay hợp chất có hoạt tính sinh học đƣợc phát tách chiết thông qua phƣơng pháp sàng lọc dựa hoạt tính sinh học khả ứng dụng sản xuất nông nghiệp sản xuất thuốc cho ngƣời động vật thấp ii) Nhiều chất chuyển hóa thứ cấp vi sinh vật chƣa đƣợc biết chƣa đƣợc khai thác phƣơng pháp sàng lọc thơng thƣờng khơng có khả phát Phƣơng pháp sàng lọc sử dụng thuốc thử ehrlich tetrazolium đƣợc sử dụng để sàng lọc hợp chất từ xạ khuẩn Streptomyces có tính đặc hiệu cao nhóm chức indole, urea, furan, pyrrole thƣờng có chất chuyển hóa thứ cấp (Hình 58) Urdamycins, benzanthraquinones biến đổi hợp chất dƣơng tính với thuốc thử Ehrlich Các urdamycin cho hoạt tính kháng khuẩn, ức chế phát triển tế bào bạch cầu L-1210 hoạt tính tăng sinh Phức hợp kháng sinh cho thấy ức chế tăng trƣởng đặc biệt mạnh mẽ Streptomyces phổ kháng khuẩn Elloramycin hợp chất liên quan đến tetracenomycin, đƣợc phân lập từ S olivaceus sp Tu 2353 thể hoạt tính kháng khuẩn chọn lọc chống lại vi khuẩn gram dƣơng Elloramycin đƣợc đặc trƣng kháng sinh sở hữu khung tetracenon đƣợc glycosid hóa với L- rhamnose đƣợc permethyl hóa Streptazolin, axit (3S,8E)-1,3-dihydroxy-8-decene-5-one, axit (E)-3-(1H-pyrrol-3-yl)-2-propenoic đƣợc phát thuốc thử ehrlich 246 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 58 Cấu trúc hoá học số chất chuyển hoá thứ cấp đƣợc phát thuốc thử ehrlich tetrazolium Cùng phƣơng pháp cách tiếp cận nhƣ trên, hợp chất sphydrofurans A, A 2, A3, phosphoramidon với gốc cấu trúc nhất, phosphoramide đƣợc sàng lọc thành công Một hợp chất khác, 2-etyl-5(3-indoly1) oxazole cho phản ứng màu đỏ tím với thuốc thử Ehrlich màu xanh lam thử nghiệm Barrollier Hợp chất giống hệt với 247 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an pimprimethine, thu đƣợc từ dịch nuôi cấy Streptoverticillium olivoreticuli, chất tƣơng tự với pimprinin C; đƣợc biết có hoạt tính chống động kinh ức chế monoamin oxidase Rất khó để phát hợp chất thuộc loại từ dịch nuôi cấy cách sàng lọc dựa hoạt tính kháng khuẩn Một số nghiên cứu khác báo cáo việc sử dụng thuốc thử tetrazolium màu xanh để phát số hợp chất có cấu trúc hoạt tính sinh học từ Streptomyces có β-Oxotryptamine α-hydroxy-βoxotryptamine, tiền chất pimprinine Hợp chất ketalin (7-methyl-2methaleno-4-oxonona-1,3,8-triol) đƣợc phát theo phƣơng pháp này, hợp chất khơng có hoạt tính kháng khuẩn nhƣng thể hoạt tính tƣơng tự pheromones trùng Ferrithiocin, chất chuyển hóa chứa sulfur đƣợc phân lập từ S antibioticus Hợp chất khơng thể hoạt tính kháng khuẩn chống lại vi khuẩn gram dƣơng gram âm nhƣng giúp tăng cƣờng hiệu cephalosporin C Differolide giúp tăng cƣờng hình thành sợi nấm khí sinh bào tử S Glaucescens đƣợc sử dụng nhƣ yếu tố tăng trƣởng nuôi cấy số chủng xạ khuẩn thuộc loài Streptomyces KD 16-UI đƣợc phân lập sau đƣợc phát phản ứng màu sử dụng thuốc thử triphenyl tetrazolium chloride có hoạt tính kháng khuẩn 5.4 Các phƣơng pháp sàng lọc hoá học khác Nhiều hợp chất từ vi sinh vật tìm thấy dịch nuôi cấy xạ khuẩn Streptomyces với hỗ trợ phƣơng pháp hóa học sử dụng sắc ký lớp mỏng (TLC) với thuốc thử nhuộm đặc hiệu cho nhóm chất Hợp chất 3-hydroxyquinoline-2-carboxylic (Hình 59) chất chuyển hóa từ S griseoflavus đƣợc phát thấy sắc ký TLC silica gel, theo đó, hợp chất xuất huỳnh quang có màu vàng lục đậm dƣới ánh sáng UV (366 nm) Dạng muối canxi hợp chất trƣớc chƣa đƣợc phân lập nhƣng dạng axit tự đƣợc báo cáo sản phẩm xà phịng hố từ cinropeptin 248 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Muối canxi khơng có hoạt tính ức chế tế bào khơng có hoạt tính kháng khuẩn, nhƣng cho thấy khả kích thích tăng trƣởng chống lại virus herpes simplex Cũng phƣơng pháp sử dụng sắc ký TLC, nhiều hợp chất đƣợc đƣợc phát nhƣ polyol chứa vòng lớn nhƣ amycins A B có liên quan chặt chẽ với azalomycins; hợp chất SM l96A, 196B angucyclinones đƣợc tách chiết từ Streptomyces sp; naphthomevalin, dihydro-naphthoquinone có hoạt tính kháng khuẩn; axit saphenic methyl ether axit 6-axetylphenazine-1-carboxylic đƣợc tách chiết từ chủng Streptotnyces antibioticus Hình 93 Cấu trúc hóa học số chất chuyển hóa đƣợc sàng lọc phƣơng pháp hóa học khác Một phƣơng pháp khác đƣợc sử dụng để sàng lọc hợp chất từ vi sinh vật gây tăng tính thẩm thấu tế bào EDTA, kháng sinh diphenylether đƣợc đặt tên ethericins A B đƣợc phân lập từ chủng nấm mốc thuộc loài Aspergillus đƣợc phát phƣơng pháp này; aspermutarubrol đƣợc phân lập nhƣ chất ức chế tự phát triển từ Aspergillus, giống với ethericin A 249 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Các aurachin, alkaloid quinoline đƣợc phát liệu quang phổ 1H-NMR (cộng hƣởng từ hạt nhân) từ sinh khối lên men chủng Stigmatella aurantiaca Sg a15 Các aurachin bao gồm bốn thành phần, A, B, C D có hoạt tính chống lại vi khuẩn gram dƣơng gây ức chế q trình oxy hóa NADH ty thể tim bị tƣơng tự nhƣ stigmatellin Sàng lọc hóa học phƣơng pháp đơn giản, nhanh chóng để phát phân lập chất chuyển hóa Trong thực tế, khả tìm kiếm hợp chất có hoạt tính sinh học sàng lọc hóa học dƣờng nhƣ hiệu so với phƣơng pháp sàng lọc sinh học thông thƣờng Trong số hợp chất thu đƣợc sàng lọc hóa học, staurosporine ví dụ điển hình tính hiệu phƣơng pháp 250 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Abdel-Gawad, A.M (2002) Biological Control of Some Tomato Diseases Caused by Fusarium spp and Alternaria spp Ph.D Thesis, p: 106 Faculty of Science, Cairo University, Cairo, Egypt Al-Shuneigat J., Cox S.D and Markham J.L.,(2005).Effects of a topical essential oilcontaining formulation on biofilm-forming coagulasenegative staphylococci Lett Appl Microbiol., 41: 52-55 Arai, K., Rawlings, B.J., Yoshizawa, Y and Vederas, C., (1989) Comparision of stereochemistry of polyketide and fatty acid enoyl thiol ester reductase J Am.Chem.Soc.111, 3391-3399 Asha B B., Nayaka S C., Udaya shankar A C., Srinivas C and Niranjana S R., (2011) Selection of effective bio-antagonistic bacteria for biological control of tomato wilt caused by Fusarium oxysporum f Sp Lycopersici The Bioscan 6:239 - 244 Bais Y.G., Nimbekar T.P., Wanjari B.E., Timande S.P., (2012) Isolation of antibacterial compound from marine soil Actinomycetes International journal of Biomedical and Advance Research, 3:193-197 Bhaskar J., Usman M., Smitha S., and Bhat G K (2004): Bacteriological profile of street foods in Mangalore Indian J Med Microbiol 22, 197-198 Bhattacharyya P N and Jha D K (2011) Optimization of cultural conditions affecting growth and improved bioactive metabolite production by a sub surface Aspergillus strain TSF 146 International journal of Applied Biology and Pharmaceutical Technology 11:23 - 29 Burkholder, P.R.; Pfister, R.M & Leitz, F.H (1966) Production of a Pyrrole Antibiotic by marine bacteria Applied Microbiology 14:649- 653 Collins J K., Thornton G., Sullivan G O., (1998) Selection of probiotic strains for human application Int Dairy J., 8, 487–490 10 Dikin A., Sijam K.N., Kadir J and Seman I.A (2007) Effect of Different Carbon Sources and Peptones on the Production of Antimicrobial Substances 251 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an from Bacteria against Schizophyllum commune FR International Journal Of Agriculture & Biology 14:113 - 129 11 Dikin A., K Sijam, J Kadir and A.S Idris, (2005) Extraction of Antimicrobial Substances from Antagonistic Bacteria against Schyzophyllum commune Fr In: Proc 27th Malaysian Microbiology Symposium Innovation through Microbes Grand Plaza Parkroyal Penang Malaysia, 24-27 November 2005 12 Duffy B.K and G Defago, (1999) Environmental factors modulating antibiotic and siderophore biosynthesis by Pseudomonas fluorescens biocontrol strains Appl Environ Microbiol., 65: 2429–2438 13 Ekelund F., Ronn R and Christensen S., (2001) Distribution with depth of protozoa, bacteria and fungi in soil profiles from three Danish forest sites Soil Biol Biochem 33:475-48 14 El-Banna N.M., (2006) Effect of carbon sources on the antimicrobial activity of Corynebacterium kutscheri and Corynebacterium xerosis.African J Biotechnol., 5: 833–835 15 Esquenazi E., Coates R.C., Grindberg R.V., Ishoey T., Brinda D., (2009) Single Cell genome amplification accelerates identification of the apratoxin biosynthetic pathway from a complex microbial assemblage PLoS ONE 6: e 18565 16 Gebreel, H.M., El-Mehalawy A.A., El-Kholy I.M., Rifaat H.M and Humid A.A., (2008) Antimicrobial Activities of Certain Bacteria Isolated from Egyptian Soil Against Pathogenic Fungi J Agric Biol Sci., 4: 331– 339 17 Hannusch, D.J and G.J Boland, (1996) Interaction of air temperature, relative humidity and biological control agents on grey mould of bean European J Plant Pathol., 102: 133–142 252 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 18 Heydari, A and I.J Misaghi, (1998) Biocontrol activity Burkholderia cepacia against Rhizoctonia solani in herbicide-treated soil Plant Soil, 202: 109–116 19 Hirayama K, Rafter J (2000) The role of probiotic bacteria in cancer prevention Microbes Infect 2: 681-686 20 Ismail Kola, Ph.D (Med), is Senior Vice-President of Basic Research at Merck Research Labs, 126 East Lincoln Avenue, Rahway, New Jersey 07075, USA 21 John Landis, Ph.D., is Senior Vice-President Pharmaceutical Sciences and Compliance Clinical Sciences at ScheringPlough Research Institute, 2000 Galloping Hill Road, Kenilworth New Jersey 07033, USA 22 Khamna S., Yokota A., Peberdy J.F., Lumyong S., (2009) Antifungal activity of Streptomyces spp isolated from rhizosphere of Thai medicinal plants Int J Integr Biol., 6(3): 143-147 23 Kobayashi M., Aoki S., Sakai H., Kawazoe K., Kihara N., Sasaki T., Kitagawa I., Altohyrtin A., (2000) A potent anti-tumor macrolide from the Okinawan marine sponge Hyrtios altum Tetrahedron Lett., 34, 2795–2798 24 Kurze, S and H Bahl, (2001) Biological control of fungal strawberry diseases caused by Serratia plymuthica HRO-C48 Plant Dis., 85: 529– 534 25 Lee, Y K., Senthilkumar, M., Kim, J H., Swarnalakshmi K., Annapurna K., (2008) Purification and partial characterization of antifungal metabolite from Paenibacillus lentimorbus WJ5 World J Microbio and Biotechno 24 (12), 3057- 3062 26 Nakamura, H.; Iitaka, Y.; Kitahara, T.; Okazaki, T.; Okami, Y (1977) Structure of asplasmomycin Journal of Antibiotics, 30, 714-719 27 Newman D J and Cragg G M (2007), ―Natural products as sources of new drugs over the last 25 years, ‖Journal of Natural Products, vol 70, no 3, pp 461–477 28 Ogata K,Osawda H,Tani Y (1977) J Ferment Technol 55:28 253 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 29 Okami, Y (1986) Marine microorganisms as a source of bioactive agents MicrobialEcology 12:65–78 30 Pandey B, Ghimire P, Vishvanath P, Agrawal T.,(2004), Study on the antibacterial activity of the Actinomycetes isolated from the Khumbu Region of Nepal, Proceeding from, the great Himalays: Climate, Health, Ecology, Management and conservation Kathmandu; 12-15 31 Pollock, S & Safer, H M (2001) Bioinformatics in the Drug Discovery Process Annual Reports in Medicinal Chemistry 32 Rajvanshi A., Kulshreshtha S., Nigam V K., Gothwal R K and Pareek R P., (2011) Antagonistic properties of different bacteria isolated from salads Asian J Exp Science 25:45 - 51 33 Rajvanshi A., Nigam V K., Kulshreshtha S and Pareek R.P., (2012) Characterization of bacteriocin production from a new lactic acid bacteria World journal of pharmacy and pharmaceutical sciences.1:100 - 1112 34 Rajvanshi, A., (2010) Bacterial load on street vended salads in Jaipur city, India Internet J food Safety., 12, 136-139 35 Shank, R C (1974) "Role of Aflatoxin in Human Disease" In Rodricks, J.V (ed.), Mycotoxins and other fungal related food problems American Chemical Society, Washington, D.C pp 51-58 36 Shiozawa H, Kagasak T, Kinoshita T and Haruyama H, Thiomarinol (1993) a new hybrid antimicrobial antibiotic produced by a marine bacterium, J Antibiot, 46, 1834- 1841 37 Shoda, M (2000) Review: Bacterial control of plant diseases Journal of Bioscience and Bioengineering 89: 515-521 38 Silo-suh, L.A., Lethbridge, B.J., Raffel, S.J., He, H., Clardy, J and Handelsman, J (1994) Biological activites of two fungistatic antibiotics produced by Bacillus cereus UW85 Applied Microbiology 60: 2023-2030 254 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn and Environmental C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 39 Slininger, P and M.A Shea-Wilbur, (1995) Liquid culture pH, temperature and carbon (not nitrogen) source regulate phenazine productivity of teke-all biocontrol agent Pseudomonas fluorescens, p 2-79 Appl Microbiol Biotechnol., 43: 794–800 40 Strobel G A (2003) ―Endophytes as sources of bioactive products,‖ Microbes and Infection, vol 5, no 6, pp 535–544 41 Tayung, K and Jha, D K (2007) Antimicrobial activity of a compound produced by Aspergillus sp.DEF 505, an endophyte on Taxus baccata J Microbial World 9: 287-292 42 Thakur, D., Bora, T C., Bordoloi, G N and Mazumdar, S (2009) Influence of nutrition and culturing conditions for optimum growth and antimicrobial metabolite production by Streptomyces sp.201 J Med Mycol 19:161-167 43 Wang H.M., J.L Pan, C.Y Chen, C.C Chiu, M.H Yang, H.W Chang, et al (2010) Identification of anti-lung cancer extract from Chlorella vulgaris C-C by antioxidant property using supercritical carbon dioxide extraction Process Biochemistry 45: 1865–1872 44 Wang, J., Huang, Y., Fang, M., Zhang, Y., Zheng, Z., Zhao, Y and Su, W (2002) Brefeldin A, a cytotoxin produced by Paecilomyces sp and Aspergillus clavatus isolated from Taxus mairei and Torreya grandis FEMS Immunol Med Microbiol 34:51-57 45 Wang, S.L., Shih, I.L., Wang, C.H., Tseng, K.C., Chang, W.T., Twu, Y.K., Ro, J.J and Wang, C.L (2002) Production of antifungal compounds from chitin by Bacillus subtilis Enzyme Microbial Technology 31:321-328 46 Wicklow, D.T., B.K Joshi and W.R Gamble, (1998) Antifungal metabolites (Monorden, Monocillin IV, and Cerebrosides) from Humicola fuscoatra Traaen NRRL 22980, a mycoparasite of Aspergillus flavus sclerotia Appl Environ Microbiol., 64: 4482–4484 255 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 47 Wilcox MH (2003) Clostridium difficile infection and pseudomembranous colitis Best Practise and Research 17(3): 475-493 48 Yang, S S.; Cragg, G M.; Newman, D J.; Bader, J P (2001), Natural product-based anti-HIV drug discovery and development facilitated by the NCI developmental therapeutics program J Nat Prod., 64: 265–277 49 Zhang L., An R., Wang J et al., (2005), ―Exploring novel bioactive compounds from marine microbes,‖Current Opinion in Microbiology, vol 8, no 3, pp 276–281 50 Zhou, F., Guo, H., Liu, Y., Jiang, Y., (2007) Chemometric data analysis of marine water quality and source identification in Southern Hong Kong Marine Pollution Bulletin 54, 745–756 256 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG HOẠT CHẤT KHÁNG VI SINH VẬT Hoạt chất kháng khuẩn 1.1 Xác định kháng sinh biết 10 1.2 Các chất ức chế tổng hợp thành tế bào vi khuẩn 10 1.3 Sản xuất kháng sinh -lactam từ xạ khuẩn 14 1.4 Sàng lọc kháng sinh glycopeptide 25 1.5 Sàng lọc kháng sinh nhóm aminoglycoside 26 Hoạt chất kháng nấm 30 2.1 Phƣơng pháp sàng lọc đĩa giấy 32 2.2 Ức chế tổng hợp thành tế bào 34 Hoạt chất kháng virus 42 3.1 Các phƣơng pháp sàng lọc hợp chất kháng virus phịng thí nghiệm 45 3.2 Các phƣơng pháp sàng lọc chất kháng HIV 53 Hoạt chất kháng ký sinh trùng 58 4.1 Sàng lọc loại hoạt chất chống lại sinh vật nguyên sinh 61 4.2 Sàng lọc thuốc kháng sinh tẩy giun sán 67 CHƢƠNG HOẠT CHẤT CHỐNG KHỐI U 72 Các hoạt chất chống khối u 72 1.1 Phƣơng pháp sàng lọc dựa mơ hình khối u động vật 77 1.2 Phƣơng pháp vi khuẩn 82 1.3 Phƣơng pháp sàng lọc in vitro chất chống khối u kháng ung thƣ liên quan đến biến đổi nguyên bào sợi phôi gà bị nhiễm virus Rous sarcoma 83 1.4 Phƣơng pháp sàng lọc chất chống khối u hệ phƣơng pháp khơng có tế bào 83 Chất cảm ứng biệt hoá tế bào 86 2.1 Tế bào bạch cầu phƣơng pháp sàng lọc chung 87 CHƢƠNG HOẠT CHẤT ỨC CHẾ ENZYME 99 Enzyme chuyển hoá angiotensin 100 257 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Enzyme hydroxymetylglutaryl-CoA reductase (HMG-CoA reductase) 105 Glucosyltransferase 106 Enzyme aldose reductase 108 Aminopeptidase B 110 Enzyme adenosine deaminase 113 Protein kinase C 115 Protein kinase đặc hiệu với tyrosine 119 Chiến lƣợc để tìm kiếm chất ức chế enzyme 122 CHƢƠNG MỘT SỐ HỢP CHẤT CĨ HOẠT TÍNH DƢỢC LÝ KHÁC 128 Chất điều hoà miễn dịch 128 1.1 Các phƣơng pháp sàng lọc in vitro 134 1.2 Phƣơng pháp in vivo 139 1.3 Một số phƣơng pháp sàng lọc đặc trƣng chất điều hòa miễn dịch 141 Hoạt chất kháng bổ thể 147 Hoạt chất có hoạt tính vận mạch 150 3.1 Phƣơng pháp sàng lọc in vitro in vivo với chất ức chế kết tụ tiểu cầu 151 3.2 Phƣơng pháp siêu dung hợp 157 3.3 Thử nghiệm phân giải cục máu đông euglobulin 158 3.4 Thử nghiệm phƣơng pháp đo huyết áp động mạch nhịp tim 160 CHƢƠNG HỐ CHẤT ỨNG DỤNG TRONG NƠNG NGHIỆP 162 Hoạt chất diệt nấm kháng khuẩn 162 Hoạt chất diệt cỏ 172 2.1 Hợp chất có hoạt tính diệt cỏ từ vi sinh vật 173 2.2 Phƣơng pháp sàng lọc 178 Hợp chất có hoạt tính diệt côn trùng, trừ sâu bệnh, kháng cầu trùng 184 3.1 Thuốc diệt côn trùng tổng hợp 187 3.2 Các loại thuốc trừ côn trùng, sâu bệnh có nguồn gốc từ chất chuyển hóa vi sinh vật188 3.2 Hoạt chất kháng cầu trùng 202 CHƢƠNG NGUỒN PHÂN LẬP, LÊN MEN VÀ CẢI TIẾN TRONG SẢN XUẤT KHÁNG SINH TỪ VI SINH VẬT 209 Lựa chọn nguồn vi sinh vật tổng hợp hợp chất có hoạt tính sinh học 209 1.1 Môi trƣờng sống Actinomyces 209 1.2 Phƣơng pháp phân lập Actinomyces 210 258 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn