Phân lập và xác định cấu trúc một số hợp chất phenolic từ hạt cây bình bát (annona reticulata l ) ở việt nam

3 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH NGUYỄN THỊ CẨM VÂN “PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC MỘT SỐ HỢP CHẤT PHENOLIC TỪ HẠT CÂY BÌNH BÁT (ANNONA RETICULATA L.) Ở VIỆT NAM” LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC VINH, 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH NGUYỄN THỊ CẨM VÂN “PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC MỘT SỐ HỢP CHẤT PHENOLIC TỪ HẠT CÂY BÌNH BÁT (ANNONA RETICULATA L.) Ở VIỆT NAM” CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỮU CƠ Mã số: 60440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS TRẦN ĐÌNH THẮNG VINH, 2015 LỜI CẢM ƠN Luận văn đƣợc thực phịng thí nghiệm chun đề Hóa hữu - Khoa Hóa, Trung tâm Kiểm định an tồn thực phẩm mơi trƣờng, Trƣờng Đại học Vinh, Viện Hóa học - Viện khoa học công nghệ Việt Nam Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến:  PGS.TS Trần Đình Thắng - Phó Trƣởng khoa - Khoa Hóa, Trƣờng Đại học Vinh giao đề tài, tận tình hƣớng dẫn, tạo điều kiện suốt q trình thực luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn:  PGS.TS Lê Văn Hạc, PGS TS Nguyễn Hoa Du, PGS.TS Hoàng Văn Lựu, TS Lê Đức Giang - Khoa Hóa, Trƣờng Đại học Vinh tạo điều kiện thuận lợi, động viên tơi q trình làm luận văn  TS Đỗ Ngọc Đài giúp thu mẫu vật  TS Trần Huy Thái (Viện sinh thái tài nguyên sinh vật, Viện khoa học công nghệ Việt Nam) giúp định danh mẫu vật Nhân dịp này, xin gởi lời cảm ơn đến thầy cơ, cán Bộ mơn Hóa hữu cơ, Khoa Hóa, Phịng Đào tạo Sau Đại học, bạn đồng nghiệp, học viên cao học, sinh viên, gia đình ngƣời thân động viên giúp đỡ hoàn thành luận văn Vinh, ngày tháng 10 năm 2015 Nguyễn Thị Cẩm Vân MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ MỞ ĐẦU 10 Lý chọn đề tài 10 Nhiệm vụ nghiên cứu 10 Đối tƣợng nghiên cứu 11 Chƣơng 12 TỔNG QUAN 12 1.1 Chi Na (Annona) 12 1.1.1 Đặc điểm thực vật chi Na 12 1.1.2 Thành phần hóa học 12 1.1.2.1 Các hợp chất acetogenin 12 1.1.2.2 Các hợp chất diterpenoit kauran 20 1.1.2.3 Các hợp chất lignan 23 1.1.2.4 Các hợp chất flavonoit 24 1.1.2.5 Hợp chất cyclopeptit 25 1.1.3 Sử dụng hoạt tính sinh học 26 1.1.3.1 Sử dụng 26 1.1.3.2 Hoạt tính sinh học 27 1.2 Cây Bình Bát 27 1.2.1 Đặc điểm thực vật 27 1.2.2 Thành phần hóa học 29 1.2.2.1 Alkaloit 30 1.2.2.2 Amin béo 30 1.2.2.3 Diterpen 30 1.2.2.4 Acetogenin 31 1.2.2.5 Cyclopeptit 31 1.2.3 Sử dụng hoạt tính sinh học 31 1.2.3.1 Sử dụng 31 1.2.3.2 Hoạt tính sinh học 31 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Chƣơng 33 PHƢƠNG PHÁP VÀ THỰC NGHIỆM 33 2.1 Nguyên liệu, phƣơng pháp thiết bị 33 2.1.1 Phƣơng pháp lấy mẫu 33 2.1.2 Phƣơng pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất 33 2.1.3 Phƣơng pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 33 2.1.4 Thiết bị 33 2.2 Phân lập hợp chất 34 2.3 Các số vật lý 35 Chƣơng 37 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 3.1 Phân lập hợp chất 37 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất A 37 3.3 Xác định cấu trúc hợp chất B 42 3.4 Xác định hợp chất C 50 KẾT LUẬN 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT CC: Column Chromatography (Sắc ký cột) FC: Flash Chromatography (Sắc ký cột nhanh) TLC: Thin Layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) IR: Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại) MS: Mass Spectroscopy (Phổ khối lƣợng) EI-MS: Electron Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối va chạm electron) ESI-MS: Electron Spray Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối lƣợng phun mù electron) H-NMR: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy 13 C-NMR: Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an COSY: Correlation Spectroscopy s: singlet br s: singlet ti t: triplet d: dublet dd: dublet duplet dt: dublet triplet m: multiplet TMS: Tetramethylsilan DMSO: DiMethylSulfoxide DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Bảng 1.2: Bảng 1.3: Bảng 1.4 Bảng 3.1: Bảng 3.2: Bảng 3.3: Các hợp chất acetogenin Tran g 13 Các hợp chất acetogenin 19 Các hợp chất diterpenoit kauran Thành phần dinh dƣỡng 100g thịt Bình bát 21 32 Số liệu phổ NMR hợp chất A 42 Số liệu phổ NMR hợp chất B Số liệu phổ NMR hợp chất C 46 54 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1: Hình 3.1: Hình 3.2: Hình 3.3: Hình 3.4: Hình 3.5: Hình 3.6: Hình 3.7: Hình 3.8: Hình 3.9: Hình 3.10: Hình 3.11: Hình 3.12: Hình 3.13: Hình 3.14: Hình 3.15: Hình 3.16: Hình 3.17: Hình 3.18: Hình 3.19: Hình 3.20: Cây bình bát Phổ 1H-NMR hợp chất A Phổ 1H-NMR (dãn) hợp chất A Phổ 13C-NMR hợp chất A Phổ 13C-NMR (dãn) hợp chất A Phổ 1H-NMR hợp chất B Phổ 1H-NMR (dãn) hợp chất B Phổ 13C-NMR hợp chất B Phổ 13C-NMR (dãn) hợp chất B Phổ HSQC hợp chất B Phổ HMBC hợp chất B Phổ CÓY hợp chất B Phổ 1H-NMR hợp chất C Phổ 1H-NMR (dãn) hợp chất C Phổ 1H-NMR (dãn) hợp chất C Phổ 13C-NMR hợp chất C Phổ 13C-NMR (dãn) hợp chất C Phổ DEPT hợp chất C Phổ DEPT (dãn) hợp chất C Phổ HSQC hợp chất C Phổ HMBC hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Trang 31 43 44 44 45 48 49 49 50 51 52 53 56 57 57 58 58 59 59 60 61 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Các sản phẩm thiên nhiên có hoạt tính sinh học có ứng dụng lớn nhiều lĩnh vực khác sống, đặc biệt dùng làm thuốc chữa bệnh Các loại thuốc thảo mộc gây tác dụng phụ độc hại cho ngƣời sử dụng Các hợp chất phenolic thực vật nhƣ axit phenolic, flavonoit flavonoit polyme ngày thu hút đƣợc nhiều quan tâm tính chất chống oxi hóa, tác dụng phịng ngừa ung thƣ bệnh liên quan đến tim mạch Các nghiên cứu (hóa học, dƣợc lý học, lâm sàng) phần lý giải đƣợc mối liên quan sức khỏe ngƣời việc tiêu thụ sản phẩm thực phẩm giàu hoạt chất phenolic thiên nhiên Các hợp chất phenolic chiếm vị trí đáng kể số nhóm hợp chất thiên nhiên có tác dụng dự phòng ung thƣ [1],[4] Việt Nam nằm vùng nhiệt đới ẩm, gió mùa nên có hệ thực vật phong phú đa dạng với 12.000 loài, bao gồm 300 họ 1.200 chi Nguồn thực vật phong phú cung cấp cho ngƣời nhiều sản phẩm thiên nhiên có giá trị Nhiều loài cỏ đƣợc sử dụng nhƣ dƣợc liệu q, số có Bình bát (Annona reticulata L.) thuộc họ Na (Annonaceae) Cây Bình bát (Annona reticulata L.) loài phổ biến nƣớc Việt Nam, Trung Quốc đƣợc dùng làm thuốc chữa bệnh, hầu hết phận có tác dụng riêng Theo kinh nghiệm dân gian toàn Bình bát có vị chát, có độc đặc biệt hạt vỏ thân, có tác dụng sát trùng Quả xanh có tác dụng làm se, trừ lỵ, trị giun Hạt Bình bát chữa tiêu chảy, kiết lỵ, nhƣng độc, nên thƣờng dùng [6], [7] Nhiều loại hợp chất đƣợc nghiên cứu, phân lập xác định cấu trúc từ Bình bát, nhiên nhóm hợp chất phenolic thực vật chƣa đƣợc nghiên cứu nhiều Chính tơi chọn đề tài “Phân lập xác định cấu trúc số hợp chất phenolic từ hạt Bình bát (Annona reticulata L.) Việt Nam” từ góp phần xác định thành phần hố học Bình bát tìm nguồn nguyên liệu cho ngành dƣợc liệu, hƣơng liệu Nhiệm vụ nghiên cứu Trong luận văn này, chúng tơi có nhiệm vụ: - Chiết chọn lọc với dung mơi thích hợp để thu đƣợc hỗn hợp hợp chất hạt Bình bát (Annona reticulata L.) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - Sử dụng phƣơng pháp sắc ký kết tinh phân đoạn để phân lập hợp chất - Sử dụng phƣơng pháp phổ để xác định cấu trúc hợp chất thu đƣợc Đối tƣợng nghiên cứu Đối tƣợng nghiên cứu Bình bát (Annona reticulata L.) thuộc họ Na (Annonaceae) Việt Nam Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Chi Na (Annona) 1.1.1 Đặc điểm thực vật chi Na Chi Na (Annona) thuộc họ Na (Annonaceae) sinh trƣởng chủ yếu vùng nhiệt đới, có lồi sinh sống vùng ơn đới Khoảng 900 lồi Trung Nam Mỹ, 450 loài châu Phi loài khác châu Á [1], [5] Các loài thuộc chi Na có đơn, mọc so le (mọc cách), có cuống mép nhẵn Lá mọc thành hai hàng dọc theo thân Vết sẹo nơi đính thƣờng nhìn thấy rõ mạch dẫn Cành thƣờng dạng zíc zắc Chúng khơng có bẹ Hoa đối xứng xuyên tâm (hoa đều) thƣờng lƣỡng tính Ở phần lớn lồi đài hoa nối với gốc hoa Có cánh hoa có màu nâu hay vàng, nhiều nhị hoa mọc thành hình xoắn ốc nhƣ nhiều nhụy hoa, nhụy có bầu nhụy dạng ngăn chứa nhiều tiểu nỗn Hoa đơi mọc trực tiếp cành lớn thân Quả nang, bế hay đa [1] Các thuộc chi Na có lớn, nhiều thịt, ăn đƣợc Nhiều lồi đuợc sử dụng sản xuất nƣớc hoa hay đồ gia vị Các lồi thân gỗ cịn dùng làm củi đốt [1] Vỏ cây, rễ số loài đƣợc sử dụng y học dân tộc Bên cạnh đó, nghiên cứu dƣợc lý tìm thấy khả kháng nấm, kháng khuẩn đặc biệt khả sử dụng hóa học trị liệu từ số thành phần hóa học lá, rễ vỏ cây, quả, vỏ quả…[3], [4], [7] Chi Annona (8 loài) gồm: Annona cherimola, A glabra, A montana, A muricata, A reticulata, A squamosa, A artemoya (A cherimola x squamosa), A purpurea [1] 1.1.2 Thành phần hóa học Những năm gần chi Na đƣợc nhiều nhà khoa học giới quan tâm nghiên cứu Đặc biệt, nhóm nghiên cứu Yang-Chang Wu (Đài Loan) tìm đƣợc 100 hoạt tính sinh học chất tách từ chi Na (Annona) 1.1.2.1 Các hợp chất acetogenin Các hợp chất acetogenin thiên nhiên có mạch cacbon dài từ 35-37, đƣợc bắt nguồn từ axit béo C-32/C-34 kết hợp với đơn vị 2-propanol, acetogenin có tính chất nhƣ chuỗi dài aliphatic gắn vào vịng -lacton có Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.13: Phổ COSY hợp chất B Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.4 Xác định hợp chất C Hợp chất C chất bột màu trắng Phổ khối lƣợng va chạm electron (EIMS) cho pic ion phân tử m/z 370 [M]+ tƣơng ứng với công thức phân tử C17H22O9 Phân tích liệu phổ EI-MS, 1H-NMR, 13C-NMR so sánh với liệu phổ hợp chất B nhận thấy nhóm chức ancol trị trí C-9 hợp chất B bị oxi hóa thành nhóm chức andehit hợp chất C, đƣợc thể qua tín hiệu cộng hƣởng proton δ 9,66 (1H, d, J= 7,5 Hz) ppm tín hiệu cộng hƣởng cacbon C-9 δ 196,0 ppm Qua phân tích liệu phổ EI-MS, 1HNMR, 13C-NMR kết hợp với tài liệu [19] [40] khẳng định hợp chất C Sinapaldehyde glucoside Bảng 3.3: Bảng số liệu phổ hợp chất C Vịtrí DEPT Hợpchất C δH(ppm) Sinapaldehyde glucoside [19] δC (ppm) δH* (ppm) 132,0 δC* (ppm) C CH C 155,1 152,8 C 138,8 136,9 C 155,1 152,8 CH CH 7,63(1H,d,J =16Hz) 154,7 7,61 (1H, d, J= 15,6Hz) 153,4 CH 6,73 (1H, dd, J = 15,5; 7,5 Hz) 129,2 6,72 (1H, dd, J= 16,0; 8,0 Hz) 127,9 CHO 9,66 (1H, d, J= 7,5 Hz) 196,0 9,49 (1H, d, J= 7,6 Hz) 194,5 OCH3 3,92 (6H, s, OCH3) 57,1 3,84 (6H, s, OCH3) 56,5 5,06 (1H, d, J= 7,2 Hz) 103,1 7,06 (1H, s) 7,06 (1H, s) 107,8 107,8 129,4 7,01 (1H, s) 7,01 (1H, s) 106,9 106,9 Glu 1’ CH 2’ CH 77,86 73,8 3’ CH 75,7 76,5 5,06 (1H, d, J = 7,5 Hz) 104,7 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 4’ CH 71,34 69,4 5’ CH 78,5 75,8 6’ CH2 3,68 (1H, dd, J = 12,0; 5,5 Hz) 3,80 (1H, dd, J = 12,0; 2,0 Hz) 62,54 3,65 (1H, dd, J= 12,4; 5,2 Hz) 3,76 (1H, dd, J= 12,4; 2,0 Hz) H (500 MHz DMSO-d6) C (125 MHz DMSO-d6) H* (400 MHz D2O) C* (100 MHz DMSO-d6) Sinapaldehyde glucoside Hình 3.14: Phổ khối lƣợng (EI-MS) hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 60,2 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.15: Phổ 1H-NMR hợp chất C Hình 3.16: Phổ 1H-NMR (dãn) hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.17: Phổ 1H-NMR (dãn) hợp chất C Hình 3.18: Phổ 13C-NMR hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.19: Phổ 13C-NMR (dãn) hợp chất C Hình 3.20: Phổ DEPT hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.21: Phổ DEPT (dãn) hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.22: Phổ HSQC hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.23: Phổ HMBC hợp chất C Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hố học hạt Bình bát Việt Nam thu đƣợc số kết nhƣ sau: - Bằng phƣơng pháp ngâm chiết với dung môi chọn lọc cất thu hồi dung môi thu đƣợc cao tƣơng ứng cao n-hexan (31g), cao etylaxetat (82g), cao butanol (47g), pha nƣớc - Phân lập hợp chất từ cao n-hexan phƣơng pháp sắc ký thu đƣợc hợp chất A (11,3mg) hợp chất B (10,6mg) - Phân lập hợp chất từ cao etylaxetat phƣơng pháp sắc ký thu đƣợc hợp chất C (12,38mg) - Đã tiến hành sử dụng phƣơng pháp phổ đại: phổ khối lƣợng (EI-MS), phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC COSY để xác định cấu trúc hợp chất tách đƣợc Các kết phổ cho phép khẳng định chất A Axit vanilic, chất B Eleutheroside B, chất C Sinapaldehyde glucoside Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Tiến Bân (2000), Họ Na (Annonaceae), Thực vật chí Việt Nam, Flora of Vietnam, Nhà xuất khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Tiến Bân (Chủ biên) (2003), Danh lục lồi thực vật Việt Nam, Nhà xuất Nơng nghiệp, Hà Nội Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội Nguyễn Thƣợng Dong ngƣời khác (2006), Nghiên cứu thuốc từ thảo dược, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Trần Đình Đại (1998), Khái quát hệ thực vật Việt Nam Hội thảo Việt-Đức Hoá học hợp chất thiên nhiên, Hà Nội, tr 17-27 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam Nhà xuất Trẻ, TP Hồ Chí Minh, 242-244 Đỗ Tất Lợi (1999), Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Trần Văn Sung (2002), Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hoá hữu Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hùng Việt (1985), Các phương pháp sắc ký, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Tiếng Anh 10 Ahammadsahib K I., Hollingworth R M., McGovren J P., Hui Y H., McLaughlin J L (1993), Mode of action of bullatacin: a potent antitumor and pesticidal annonaceous acetogenin, Life Sci., 53, pp 1113-1120 11 Chang F R., Wu Y C., Duh C Y.,Wang S K., (1993), Studies on the acetogenin of Formosan Annonaceaes plants, II Cytotoxic acetogenins from Annona reticulata J Nat Prod 56 (10), 1688-1694 12 Chang F R., Chen J L., Chiu H F., Wu M J., Wu Y C., (1998), Acetogenins from seeds of Annona reticulata Phytochemistry 47 (6), 1057-1061 13 Chang F R., Wei J L., Teng C M., Wu Y C., (1998), Antiplatelet Aggregation Constituents from Annona purpurea, J Nat Prod., 61, Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 1457-1461 14 Chang S W., Kim K H., Lee K., Choi S U., Ryu S Y., Lee K R., (2009), Phytochemical constituents of Bistortamanshuriensis., Nat P Sci., 15 (4), p 234 – 240 15 Gleye C, Duret P, Laurens A, Hocquemiller R, Cave´ A (1998), cis-monotetrahydrofuran acetogenins from the roots of annona muricata, J Nat Prod., 61, 576-579 16 Gleye C, Laurens A, Laprévoete O, Serani L, Hocquemillre R (1999), Isolation and structure elucidation of sabadelin, an acetogenin from roots of annona muricata, Phytochemistry 52, 1403-1408 17 Gleye C, Laurens A, Hocquemiller Cave´ R A (1997), Isolation of montecristin, a key metabolite in biogenesis of acetogenins from annona muricata and its structure elucidation by using tandem mass spectrometry, J Org Chem., 62, 510-513 18 Gleye C, Raynaud S, Fourneau C, Laurens A, Laprévote O, Serani L, Fournet A, Hocquemiller R (2000), Cohibins C D, two important metabolites in the biogenesis of acetogenins from annona muricata and annona nutans, J Nat Prod., 63, 1192-1196 19 Ivan S., Andrew M., Kurt H., (1991), The isolation of Eleutherococcus senticosus constituents by centrifugal partition chromatography and their quantitative determination by high performance liquid chromatography., Phytochem Anal., 2., p 137142 20 Jaramillo M C, Arango G J, González M C, Robledo S M, Velez I D (2000), Cytotoxicity and antileishmanial activity of Annona muricata pericarp, Fitoterapia 71, pp 183-186 21 Jeong M L., Myoung H L., Suk B P., Ki W O., Chan S Jung., In Y B., Sanghyun L., (2014), Analysis of Yield of Eleutherosides B and E in Acanthopanaxdivaricatusand A koreanum Grown with Varying Cultivation Methods , Scientific World J 22 Joseph T E., Alexander I G., Peter G W., (1987), Chemistry in the Annonaceae, XXIV Kaurane and kaur-16-ên diterpenes from the Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an stem bark ò Annona reticulata J Nat Prod 50 (5), 979-983 23 Kim G S, Zeng L, Alali F, Rogers L L, Wu F E, McLaughlin J L, Sastrodihardjo S (1998), Two new mono-tetrahydrofuran ring acetogenins, annomuricin E and muricapentocin, from the leaves of annona muricata, J Nat Prod., 61, 432-436 24 Li C M, Tan N H, Lu Y P, Liang H L, Mu Q, Zheng H L, Hao X J, Zhou J (1995), Annomuricatin A, a new cyclopeptide from the seeds of annona muricata, Acta Botanica Yunnanica, 17(4), 459-462 25 Li C M, Tan N H, Zheng H L, Mu Q, Hao X J, He Y N, Zou J (1998), Cyclopeptide from the seeds of annona muricata, Phytochemistry, 48, 555-556 26 Li.C.M, Tan.N.H, Zheng H.L et al Cyclopeptide from the seeds of annona glabra (1995),Chin Chem lett, 6, 39-40 27 Li D Y, Yu J G, Luo X Z, Yang S L, Muricatenol, a Linear Acetogenin from annona muricata (Annonaceae) (2000), Chinese Chemical Lettersl, 11, 239-242 28 Liaw C C, Chang F R, Lin C Y, Chou.C.J, Chiu.H.F, Wu M J, and Wu Y C (2002), New cytotoxic monotetrahydrofuran annonaceous acetogenins from annona muricata, J Nat Prod., 65, 470-475 29 Maeda U., Hara N., Fujimota Y., Srivastava A., Gupta Y K., Sahai M., (1993), N-fatty acyl tryptamines from Annona reticulata Phytochemistry 34 (6), 1633-1635 30 Maria U., Joanna N., Renata D P., Kinga K P., Monika M., Lidia R., Gerard N., (2014), Detection of pharmacological active compounds of the Asteraceae family and their chemotaxonomical implications., J Plant Sci., 2(5), p 187-191 31 Mansoor A., Khalid A., (1995), Hypotensive action of syringing from Syringa vulgaris., Phytother Res., 9, p 452 – 454 32 Ma B., Zhang Q., Liu Y., Xu Q., Li X., Yang X., Yao D., Sun J., Cui G., Ying H., (2013), Simultaneous determination of Eleutheroside B and Eleutheroside E in rat plasma by high performance liquid chromatography–electrospray ionization mass spectrometry and its Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an application in a pharmacokinetic study., J Chromatogr B, 917– 918, p 84– 92 33 Pinto A C Q., Cordeiro M C R., Andrade S R M., Ferreira F R., Filgueiras H A C., Alves R E., Kinpara D I (2005), Annona species, International Centre for Underutilised Crops, University of Southampton, Southampton, U.K 34 Pinto A C Q., Cordeiro M C R., Andrade S R M., Ferreira F R., Filgueiras H A C., Alves R E., Kinpara D I (2005), Annona species, International Centre for Underutilised Crops, University of Southampton, Southampton, U.K 35 Saad J M., Hui Y H., Rupprecht J K., Anderson J E., Kozlowski J F., Zhao G X., Wood K V., McLaughlin J L., (1991), Reticulatacin: A new bioactive acetogenin from Annona reticulata (Annonaceae) Tetrahedron 47 (16/17), 2751-2756 36 Srinivas E K., Reddy C S., Ganapaty S., Analgesic and antiinflammatory activity of stem bark of Annona reticulata L J Che Pharm Sci (3), 100 – 104 37 Suresh H M., Shivakumar B., Shivakumar S I., (2012), Aporphine alkaloids from the roots of Annona reticulata on human cancer cell lines International Journal of Plants research (3), 57-60 38 Suresh H M., Shivakumar B., Shivakumar S I., (2012), Aporphine alkaloids from the roots of Annona reticulata on human cancer cell lines International Journal of Plants research (3), 57-60 39 Suresh H M., Shivakumar B., Shivakumar S I., (2012) Inhibitory potential of the ethanol extract of Annona reticulata Linn Against melanoma tumor J Nat Pharm (4), 168-172 40 Wang C., Chao Z., Sun W., Wu X., Yoichiro I., (2014), Isolation of glycosides from the barks of Ilex rotunda by high speed countercurrent chromatography., J Liq Chromatogr Relat Technol., 37 (16)., p 2363-2376 41 Wélé A, Zhang Y, Caux C, Brouard J.P, Pousset J.P, Bodo B (2004), Annomuricatin C, a novel cyclohexapeptide from the seeds of annona muricata, C R Chimie 7, 981–988 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn