Phân lập và đánh giá khả năng sinh trưởng phát triển của nấm dược liệu hkg 402 và hkg 406 thu thập từ hồ kẽ gỗ hà tĩnh

664 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA HÓA HỌC ===  === ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Đề tài : PHÂN LẬP VÀ ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG PHÁT TRIỂN CỦA NẤM DƯỢC LIỆU HKG 402 VÀ HKG 406 THU THẬP TỪ HỖ KẼ GỖ - HÀ TĨNH Giáo viên hƣớng dẫn: TS Lê Văn Điệp Sinh viên thực hiện: Bùi Thị Lê Lớp: 50K- Hóa Mssv : 0952043573 Khóa: 2009 - 2014 NGHỆ AN, THÁNG 12/2013 Formatted: Left, Indent: Left: 0.5", First lin 0.5" BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP- TỰ DO- HẠNH PHÚC - NHIỆM VỤ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Bùi Thị Lê MSSV: 0952043573 Khóa: 50 Ngành: Cơng nghệ hóa thực phẩm 1.Tên đề tài Nội dung nghiên cứu: Họ tên cán hƣớng dẫn: Ngày giao nhiệm vụ đồ án : Ngày tháng năm Ngày hoàn thành đồ án : Ngày tháng năm Ngày tháng năm Chủ nhiệm môn Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ, tên) (Ký, ghi rõ họ, tên) Sinh viên hoàn thành nộp đề tài tốt nghiệp trƣớc ngày tháng năm Ngƣời duyệt (ký, ghi rõ họ, tên) BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP - TỰ DO - HẠNH - PHÚC BẢN NHẬN XÉT ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Bùi Thị Lê MSSV: 0952043573 Khóa: 50 Ngành: Cơng nghệ thực Phẩm Cán hƣớng dẫn: Cán duyệt: Nội dung nghiên cứu, thiết kế: Nhận xét cán hƣớng dẫn: Ngày tháng năm Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ, tên) BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP - TỰ DO - HẠNH – PHÚC BẢN NHẬN XÉT ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Bùi Thị Lê MSSV: 0952043573 Khóa: 50 Ngành:Cơng nghệ thực Phẩm Cán hƣớng dẫn: Cán duyệt: Nội dung nghiên cứu, thiết kế: Nhận xét cán duyệt : Formatted: Centered, Indent: Left: 3.5" Ngày tháng năm Cán duyệt (Ký, ghi rõ họ, tên) Formatted: Centered, Indent: Left: 3.42" Đồ án tốt nghiệp SVTH: Bùi Thị Lê GVHD: TS Lê Văn Điệp Lớp: 50K - CN thực phẩm C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đồ án này, tơi xin chân thành gửi lời cảm ơn tới: * Ban giám hiệu trƣờng Đại học Vinh, thầy khoa Hóa học tạo điều kiện cho suốt thời gian học tập trƣờng * TS Lê Văn Điệp giao đề tài, tận tình hƣớng dẫn động viên suốt thời gian thực đồ án tốt nghiệp * Các thầy cô, cán kỹ thuật viên phịng thí nghiệm khoa Hóa học giúp đỡ góp ý cho tơi suốt thời gian làm đề tài * Các bạn lớp 50K_ Hóa học bên tôi, giúp đỡ động viên suốt thời gian thực đề tài Cuối xin ghi nhớ công ơn cha mẹ anh chị lo lắng, chăm sóc, tạo điều kiện cho suốt thời gian học tập thực đề tài vừa qua Nghệ An, tháng 12 năm 2013 Sinh viên Bùi Thị Lê SVTH: Bùi Thị Lê i Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích Yêu cầu CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Nấm 1.1.1 Khái quát nấm 1.1.2.2 Hình thái thể 1.1.3 Các giai đoạn phát triển nấm 1.1.3.1 Giai đoạn tăng trƣởng 1.1.3.2 Giai đoạn phát triển 1.1.4 Đặc điểm dinh dƣỡng nấm 1.1.5 Điều kiện sinh thái nấm 1.1.5.1 Nhu cầu dinh dƣỡng cho phát triển hệ sợi nấm 1.1.5.2 Ảnh hƣởng yếu tố vật lý lên sinh trƣởng nấm 1.2 Nấm dƣợc liệu 1.2.1 Giá trị dƣợc liệu nấm 1.2.2 Một số loại nấm dƣợc liệu 10 1.2.2.1 Nấm linh chi 10 1.2.2.2 Nấm hƣơng 11 1.2.2.3 Mộc nhĩ 11 1.2.2.4 Đông trùng hạ thảo 12 1.3 Tổng quan vitamin 12 1.3.1 Lịch sử vitamin 12 1.3.2 Khái niệm vitamin phân loại 13 1.3.3 Vai trò đặc điểm chung vitamin 14 1.3.4 Các yếu tố ảnh hƣởng đến vitamin 15 1.3.5 Nguồn vitamin 15 SVTH: Bùi Thị Lê ii Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp 1.3.6 Vitamin nấm 15 1.3.7 Vitamin E (Tocoferol) 16 1.3.7.1 Giới thiệu vitamin E 16 1.3.7.2 Tính chất vitamin E 16 1.3.7.3 Vai trò sinh học vitamin E 18 I.3.7.4 Nguồn cung cấp vitamin E nhu cầu ngày 18 1.3.7.5 Rối loạn liên quan đến vitamin E 19 1.3.8 Vitamin C (Ascorbic acid) 19 1.3.8.1 Công thức cấu tạo 19 1.3.8.2 Tính chất vitamin C 20 1.3.8.3 Vai trò sinh học vitamin C 20 1.3.8.4 Nguồn cung cấp vitamin C nhu cầu ngày 21 1.3.8.5 Các rối loạn liên quan đến vitamin C 21 1.4 Phƣơng pháp sắc kí lỏng hiệu cao 22 1.4.1 Cơ sở lý thuyết 22 1.4.2 Nguyên tắc trình sắc ký cột 23 1.4.3 Phân loại sắc ký ứng dụng 24 1.4.4 Hệ thống HPLC 24 1.4.5 Chọn điều kiện sắc ký 28 1.4.5.1 Lựa chọn pha tĩnh 28 1.4.5.2 Lựa chọn pha động 29 1.4.6 Tiến hành sắc ký 30 1.4.6.1 Chuẩn bị dụng cụ máy móc 30 1.4.6.2 Chuẩn bị dung môi pha động 30 1.4.6.3 Chuẩn bị mẫu đo HPLC 31 1.4.6.4 Cách đo HPLC 31 1.4.7 Các đại lƣợng đặc trƣng sắc kí đồ 32 CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 33332 2.1 Thời gian, địa điểm đối tƣợng nghiên cứu 33332 SVTH: Bùi Thị Lê iii Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp 2.2 Thiết bị, vật liệu, hóa chất mơi trƣờng 33332 2.2.1 Thiết bị 33332 2.2.2 Vật liệu hóa chất 33332 2.2.3 Môi trƣờng sử dụng 34343 2.2.3.1 Môi trƣờng cấp 34343 2.2.3.2 Môi trƣờng lỏng 34343 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 35354 2.3.1 Phƣơng pháp phân lập nấm 35354 2.3.2 Quan sát hình thái giải phẫu nấm 36365 2.3.2.1 Hình thái thể 36365 2.3.2.2 Phƣơng pháp quan sát hệ sợi nấm 36365 2.3.3 Kỹ thuật cấy chuyền giữ giống 36365 2.3.4 Khảo sát tốc độ lan hệ sợi nấm số môi trƣờng cấp 36365 2.3.5 Nghiên cứu sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm số loại môi trƣờng lỏng 37376 2.3.6 Phƣơng pháp nghiên cứu số yếu tố ảnh hƣởng đến sinh trƣởng phát triển mẫu nấm 38387 2.3.6.1 Phƣơng pháp nghiên cứu ảnh hƣởng nhiệt độ đến sinh trƣởng phát triển mẫu nấm 38387 2.3.6.2 Phƣơng pháp nghiên cứu ảnh hƣởng pH đến sinh trƣởng phát triển nấm 38387 2.3.7 Phƣơng pháp khảo sát vitamin E vitamin C mẫu nấm HKG 406 39398 2.3.7.1 Khảo sát vitamin E 39398 2.3.7.2 Khảo sát vitamin C 414110 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 434312 3.1 Phân lập nấm 434312 3.2 Quan sát hình thái giải phẫu nấm 434312 3.2.1 Hình thái thể 434312 SVTH: Bùi Thị Lê iv Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp 3.2.2 Hình thái sợi nấm 444413 3.3 Tốc độ sinh trƣởng phát triển nấm loại môi trƣờng cấp 454514 3.4 Sự sinh trƣởng phát triển nấm môi trƣờng lỏng 474716 3.5 Ảnh hƣởng yếu tố đến sinh trƣởng phát triển nấm môi trƣờng lỏng ME 505019 3.5.1 Ảnh hƣởng nhiệt độ 505019 3.5.2 Ảnh hƣởng pH 525221 3.6 Khảo sát vitamin E vitamin C mẫu nấm HKG 406 535322 3.6.1 Vitamin E 535322 3.6.1.1 Xác định khoảng tuyến tính đƣờng chuẩn vitamin E 535322 3.6.1.2 Các sắc đồ vitamin E 555524 3.6.2 Vitamin C 575725 3.6.2.1 Xác định khoảng tuyến tính đƣờng chuẩn vitamin C 575725 3.6.2.2 Các sắc đồ vitamin C 595927 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 626130 4.1 Kết luận 626130 4.2 Đề nghị 626130 TÀI LIỆU THAM KHẢO 636231 SVTH: Bùi Thị Lê v Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Nhận xét: Kết cho thấy, sau 15 ngày nuôi cấy, hệ sợi nấm HKG 402 nuôi môi trƣờng ME cho thu nhận sinh khối lớn với khối lƣợng sinh khối trung bình 1,52g/100ml mơi trƣờng Ngƣợc lại, môi trƣờng PG mẫu nấm HKG 402 cho sinh khối với khối lƣợng trung bình 0,49g/100ml mơi trƣờng Kết luận: Hệ sợi nấm HKG 402 cho sinh khối lớn đƣợc nuôi môi trƣờng ME Chọn môi trƣờng ME làm môi trƣờng nhân nuôi sinh khối nấm HKG 402 để tiến hành nghiên cứu 3.5 Ảnh hƣởng yếu tố đến sinh trƣởng phát triển nấm môi trƣờng lỏng ME 3.5.1 Ảnh hƣởng nhiệt độ Bảng 3.5 Sinh khối nấm HKG 406 sinh môi trƣờng ME mức nhiệt độ khác Nhiệt độ Khối lƣợng sinh khối (g/100ml) KLTB SD 0,61 0,64 0.04 0,74 0,77 0,77 0,03 0,54 0,47 0,51 0,04 (ºC) Lần Lần Lần 25 0,63 0,69 30 0,80 35 0,51 SVTH: Bùi Thị Lê 50 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Khối lƣợng sinh khối (g/100ml) 0.9 0.8 0.7 0.6 25ºC 0.5 0.4 30ºC 0.3 35ºC 0.2 0.1 Hình 3.9 Biểu khốiđồlƣợng sinh khối 406 sinh mơi Hình 3.9.đồBiểu khối lƣợng sinhnấm khốiHKG nấm HKG 406 sinh trƣờng ME theo ramức trongnhiệt môiđộ trƣờng ME theo mức nhiệt độ Nhận xét: Trong môi trƣờng ME, nhiệt độ khác nấm HKG 406 cho khối lƣợng sinh khối khác Kết cho thấy, nhiệt độ 30 oC thu sinh khối lớn với khối lƣợng trung bình 0,77g/100ml môi trƣờng Ngƣợc lại, nhiệt độ 35oC sinh khối nấm sinh với khối lƣợng trung bình 0,51g/100ml môi trƣờng Nhiệt độ 25oC cho sinh khối 0,64g/100ml môi trƣờng Kết luận: Trong môi trƣờng ME, nấm HKG 406 phát triển tốt nhiệt độ 30oC Tiến hành ni cấy nấm HKG 406 điều kiện để tiến hành nghiên cứu sau Bảng 3.6 Sinh khối nấm HKG 402 sinh môi trƣờng ME mức nhiệt độ khác Nhiệt độ Khối lƣợng sinh khối (g/100ml) KLTB SD 1,24 1,31 0,09 1,81 1,52 0,29 (ºC) Lần Lần Lần 25 1,41 1,29 30 1,52 1,23 SVTH: Bùi Thị Lê 51 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Khối lƣợng sinh khối (g/100ml) 35 1,32 1,26 1,25 1,28 0,04 1.8 1.6 1.4 1.2 25ºC 30ºC 0.8 35ºC 0.6 0.4 0.2 Hình 3.10 Biểu đồiBiểu khốiđồ lƣợng khối Hình 3.10 khốisinh lƣợng sinhnấm khốiHKG nấm402 HKGsinh 402ra môi môiđộtrƣờng ME theo mức nhiệt độ trƣờng ME theosinh cácra mức nhiệt Nhận xét: Trong môi trƣờng ME, nhiệt độ khác nấm HKG 402 cho khối lƣợng sinh khối khác Kết cho thấy, nhiệt độ 30 oC thu sinh khối lớn với khối lƣợng trung bình 1,52g/100ml mơi trƣờng Ngƣợc lại, nhiệt độ 35oC sinh khối nấm sinh với khối lƣợng trung bình 1,28g/100ml mơi trƣờng Nhiệt độ 25oC cho sinh khối 1,31g/100ml môi trƣờng Kết luận: Trong môi trƣờng ME, nấm HKG 402 phát triển tốt nhiệt độ 30oC Tiến hành nuôi cấy nấm HKG 402 điều kiện để tiến hành nghiên cứu sau 3.5.2 Ảnh hƣởng pH Bảng 3.7 Sinh khối nấm HKG 406 sinh môi trƣờng ME giá trị pH khác SVTH: Bùi Thị Lê pH Khối lƣợng trung bình (g/100ml) SD 4,0 0,37 0,05 52 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khối lƣợng trung bình (g/100ml) Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp 4,5 0,52 0,03 5,0 0,77 0,03 5,5 0,67 0,04 6,0 0,54 0,06 6,5 0,51 0,03 7,0 0,36 0,03 0.9 0.8 0.7 4.5 0.6 0.5 5.5 0.4 6.5 0.3 0.2 0.1 đồ khối lƣợng nấm HKG 406sinh sinhraratrong mơi Hình Hình 3.11 3.11.Biểu Biểu đồ khối lƣợng sinhsinh khốikhối nấm HKG 406 môi trƣờng ME theo giá trị pH trƣờng ME theo giá trị pH Nhận xét: Tại giá trị pH khác khối lƣợng sinh khối nấm sinh khác Kết cho thấy, giá trị pH = 5, khối lƣợng sinh khối nấm HKG 406 lớn nhất, đạt 0,77g/100ml môi trƣờng Tại pH = 7, khối lƣợng sinh khối nấm HKG 406 nhất, 0,36g/100ml mơi trƣờng Kết luận: pH ảnh hƣởng đến sinh trƣởng phát triển nấm môi trƣờng lỏng Tiến hành nhân nuôi mẫu nấm HKG 406 môi trƣờng lỏng ME pH = để tiến hành nghiên cứu 3.6 Khảo sát vitamin E vitamin C mẫu nấm HKG 406 3.6.1 Vitamin E 3.6.1.1 Xác định khoảng tuyến tính đƣờng chuẩn vitamin E SVTH: Bùi Thị Lê 53 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Dãy chuẩn vitamin E đƣợc khảo sát nồng độ sau: ppm, 10 ppm, 20ppm, 40 ppm Phân tích chuẩn nói xác định phƣơng trình hồi quy tuyến tính dựa vào diện tích pic Bảng 3.8 Diện tích peak vitamin E tƣơng ứng với nồng độ chuẩn Nồng độ chuẩn Diện tích peak Lần Lần Lần 130,69550 130,58432 130,69908 10 420,45960 420,53052 420,45872 20 955,86340 955,70453 955,86503 40 1924,53967 1924,6896 1924,5384 m b R2 49,99 - 66,92 0,9996 Phƣơng trình đƣờng chuẩn vitamin E theo diện tích peak có dạng: y = mx + b Trong đó: m = 49,99 b = - 66,92 x nồng độ y diện tích peak Hệ số hồi quy tuyến tính R2 = 0.9996 SVTH: Bùi Thị Lê 54 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Hình 3.12 Đƣờng chuẩn biểu thị mối quan hệ diện tích peak thu đƣợc nồng độ chuẩn vitamin E Từ giá trị diện tích peak đo đƣợc ta tính đƣợc hàm lƣợng vitamin E (ppm) Sau ta tính hàm lƣợng Vitamin E (mg/kg) có mẫu nấm theo cơng thức sau: C = (Co/m).Vdm.f Trong : - C hàm lƣợng Vitamin E có mẫu, tính theo mg/kg - Co: Hàm lƣợng Vitamin E có dịch chiết ( Co) thông qua đƣờng chuẩn , mg/l - f: hệ số pha lỗng (nếu có) - m: khối lƣợng mẫu thử(g) - Vdm: Thể tích bình định mức mẫu(ml) Từ cơng thức ta tính đƣợc hàm lƣợng vitamin E mẫu nấm HKG 406 nhƣ sau: C = (1,80866/15).10.1 = 1,20577 (ppm) Vậy, hàm lƣợng vitamin E có mẫu nấm HKG 406 1,20577 (mg/kg) 3.6.1.2 Các sắc đồ vitamin E SVTH: Bùi Thị Lê 55 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Hình 3.13 Sắc đồ mẫu chuẩn vitamin E có nồng độ 10 ppm Hình 3.14 Sắc đồ mẫu chuẩn vitamin E có nồng độ 20 ppm SVTH: Bùi Thị Lê 56 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Hình 3.15 Sắc đồ mẫu chuẩn vitamin E có nồng độ 40 ppm Hình 3.16 Sắc đồ vitamin E mẫu nấm HKG 406 3.6.2 Vitamin C 3.6.2.1 Xác định khoảng tuyến tính đƣờng chuẩn vitamin C SVTH: Bùi Thị Lê 57 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Dãy chuẩn vitamin C đƣợc khảo sát nồng độ sau: ppm, ppm, 10 ppm, 20ppm, 50 ppm Phân tích chuẩn nói xác định phƣơng trình hồi quy tuyến tính dựa vào diện tích peak Bảng 3.9 Diện tích peak vitamin C tƣơng ứng với nồng độ chuẩn Nồng độ chuẩn Diện tích peak Lần Lần 48.76204 48.94529 m b R2 Lần 50.77779 92.59526 94.42776 96.26026 10 176.95715 177.14040 177.32365 20 50 367.16533 931.26546 385.49033 949.59046 367.53183 967.91546 18.325 -18.319 0.9999 Phƣơng trình đƣờng chuẩn vitamin C theo diện tích peak có dạng: y = mx + b Trong đó: m = 18,325 b = - 18,319 x nồng độ y diện tích pic Hệ số hồi quy tuyến tính R2 = 0.9999 1000 y = 18.325x - 18.319 R2 = 0.9999 900 800 700 area 600 Series1 500 Linear (Series1) 400 300 200 100 0 10 20 30 40 50 60 amount:(ppm) Hình 3.17 Đƣờng chuẩn biểu thị mối quan hệ diện tích peak thu đƣợc nồng độ chuẩn vitamin C SVTH: Bùi Thị Lê 58 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Từ giá trị diện tích peak đo đƣợc ta tính đƣợc hàm lƣợng vitamin C (ppm) Sau ta tính hàm lƣợng Vitamin C (mg/kg) có mẫu nấm theo cơng thức sau: C = (Co/m).Vdm.f Trong : - C hàm lƣợng Vitamin C có mẫu, tính theo mg/kg - Co: Hàm lƣợng Vitamin C có dịch chiết ( Co) thơng qua đƣờng chuẩn , mg/l - f: hệ số pha lỗng (nếu có) - m: khối lƣợng mẫu thử(g) - Vdm: Thể tích bình định mức mẫu(ml) Từ cơng thức ta tính đƣợc hàm lƣợng vitamin C mẫu nấm HKG 406 nhƣ sau: C = (13,52374/10).25.1 = 33,80935 ppm Vậy, hàm lƣợng vitamin C có mẫu nấm HKG 406 33,80935 mg/kg 3.6.2.2 Các sắc đồ vitamin C Hình 3.18 Sắc đồ mẫu chuẩn vitamin C có nồng độ 5ppm SVTH: Bùi Thị Lê 59 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Hình 3.19 Sắc đồ mẫu chuẩn vitamin C có nồng độ 10ppm Hình 3.20 Sắc đồ mẫu chuẩn vitamin C có nồng độ 20ppm SVTH: Bùi Thị Lê 60 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp Hình 3.21 Sắc đồ vitamin C mẫu nấm HKG 406 SVTH: Bùi Thị Lê 61 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận - Môi trƣờng cấp tốt mơi trƣờng PGA có bổ sung 10% giá mẫu HKG 406 môi trƣờng PGA có bổ sung 10% cà rốt mẫu HKG 402 - Môi trƣờng lỏng thu nhận sinh khối nhiều môi trƣờng ME - Trong môi trƣờng lỏng ME, nghiên cứu ảnh hƣởng nhiệt độ pH đến khả sản xuất sinh khối nấm Kết quả: + Nhiệt độ ni cấy thích hợp cho mẫu nấm HKG 406 HKG 402 30 C + pH thích hợp cho mẫu HKG 406 pH =5 - Đã khảo sát vitamin E vitamin C mẫu HKG 406 Kết mẫu nấm HKG 406 có vitamin E với hàm lƣợng 1,20577 (mg/kg) vitamin C với hàm lƣợng 33,80935 mg/kg 4.2 Đề nghị - Nhằm hoàn thiện quy trình ni cấy ứng dụng nghành dƣợc, cần tiếp tục nghiên cứu sâu kỹ thuật ni cấy, thành phần hóa học, hoạt chất sinh học có loại nấm này, đồng thời tìm mơi trƣờng tối ƣu cho nấm phát triển tốt điều kiện khí hậu khu vực Bắc Trung Bộ - Nghiên cứu ảnh hƣởng loại môi trƣờng khác đến khả sản xuất hoạt chất sinh học hữu ích - Dùng phƣơng pháp phân tích để định lƣợng hàm lƣợng dƣợc chất có nấm, từ suy tác dụng chữa trị tốt cho loại bệnh SVTH: Bùi Thị Lê 62 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đồ án tốt nghiệp GVHD: TS Lê Văn Điệp TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Tô Minh Châu, Vƣơng Thị Việt Hoa, Vũ Thị Lâm An, Lâm Thanh Hiền, Nguyễn Thị Ngọc Diệp, Nguyễn Thúy Hƣơng, 1999 Vi sinh vật học đại cương Đại học Quốc gia TP.HCM – Trƣờng Đại học Nông Lâm TP.HCM Phạm Thị Trân Châu – Nguyễn Thị Hiền – Phùng Gia Tƣờng, 2000 Thực hành sinh hóa học Nhà xuất Giáo dục Nguyên tác: Trần Quốc Lƣơng, Trần Huệ, Trần Hiểu Thanh, 1998 - Biên dịch: Công Diễn Linh chi phòng trị bệnh Nhà xuất mũi Cà Mau Nguyễn Minh Khang, 2005 Đề tài “Trồng nấm Linh chi đen” Khóa luận tốt nghiệp khoa Cơng Nghệ Sinh Học, trƣờng Đại học Nông Lâm, Tp HCM Nguyễn Lân Dũng, 2002 Công nghệ nuôi trồng nấm – Tập 1, Nhà xuất Nông Nghiệp Lê Xuân Thám, 1996 Nấm Linh chi – dược liệu quý Việt Nam Nhà xuất mũi Cà Mau Lê Duy Thắng, Trần Văn Minh, 2001 Sổ tay hướng dẫn trồng nấm Nhà xuất Nông Nghiệp Lê Duy Thắng, 1999 Kỹ thuật trồng nấm – Tập 1: Nuôi trồng số nấm ăn thông dụng Việt Nam Nhà xuất Nông Nghiệp, TP.HCM Lê Duy Thắng, 2001 Kỹ thuật nuôi trồng nấm ăn, tập Nhà xuất Nông nghiệp 10 Nguyễn Đức Lƣợng, 2003 Vi sinh học công nghiệp, tập Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.HCM 11 Nguyễn Hữu Đống, 2003 Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông nghiệp, Hà nội 12 Ngô Xuân Mạnh, Vũ Kim Bằng, Nguyễn Đặng Hùng, Vũ Thy Thƣ, 2006 Giáo trình hóa sinh thực vật Nhà xuất Nông Nghiệp SVTH: Bùi Thị Lê 63 Lớp: 50K - CN thực phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn