Nghiên cứu một số đặc tính của vi khuẩn escherichia coli phân lập từ ngan mắc colibacillosis

Nghiên cứu một số đặc tính của vi khuẩn escherichia coli phân lập từ ngan mắc colibacillosis

NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI PHÂN LẬP TỪ NGAN MẮC COLIBACILLOSIS Nguyễn Thị Liên Hương Trung tâm Nghiên cứu Gia cầm Thuỵ Phương Tóm tắt   E. coli    E. coli  E. coli E. coli   E. coli phân E. coli  kháng nguyên O: O8 (8,3%). E. coli   E. coli --10 ngày,   E. coli   1. Đặt vấn đề   Colibacillosis E. coli gây ra (hay E. coli     E. coli E. coli   (Delicato và cs, E. coli  E. coli    “Nghiên cứu một số đặc tính của vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ ngan mắc Colibacillosis”  trên ngan. 2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2.1. Đối tượng nghiên cứu E. coli  2.2. Vật liệu nghiên cứu -   -  E. coli   -   2.3. Địa điểm và thời gian nghiên cứu - Trung tâm n  -  2.4. Phương pháp nghiên cứu 2.4.1. Phương pháp chẩn đoán bệnh  2.4.2. Phương pháp lấy mẫu   o -  2.4.3. Phương pháp phân lập và giám định vi khuẩn  -  2.4.4. Phương pháp xác định một số yếu tố liên quan đến độc lực của vi khuẩn -  -   -  E. coli  2.4.5. Phương pháp xác định serotyp kháng nguyên O của các chủng vi khuẩn phân lập được  2.4.6. Phương pháp xác định khả năng mẫn cảm với kháng sinh   2.4.7. Phương pháp kiểm tra độc lực của vi khuẩn E. coli trên phôi trứng  E. coli   -6 /phôi (~400-   E. coli  2.4.8. Xử lý số liệu  3. Kết quả và thảo luận 3.1. Đánh giá tình hình ngan nghi mắc Colibacillosis     Bảng 3.1. Tình hình ngan nghi mắc Colibacillosis từ năm 2007–2009 tại một số cơ sở nuôi ngan   ngan theo dõi   Colibacillosis     2007 3.790 378 9,97 121 3,19 2008 5.881 567 9,64 155 2,64 2009 6.578 512 7,78 134 2,04  16.249 1.457 8,97 410 2,52     2,04%.    3.2. Kết quả phân lập và giám định vi khuẩn E. coli từ các phủ tạng của những ngan nghi mắc Colibacillosis 3.2.1. Kết quả phân lập vi khuẩn E. coli từ phủ tạng của ngan bệnh E. coli  E. coli í,  Bảng 3.2. Kết quả phân lập vi khuẩn E. coli từ phủ tạng của ngan bệnh     Máu tim 37/122 30,33  68/122 55,74  102/122 83,61 Túi khí 101/122 82,79 Gan 122/122 100,0 Lách 119/122 97,54  E. coli  túi khí E. coli là 30,33%. 3.2.2. Kết quả giám định một số đặc tính sinh hóa  Có 6/1   2     glucose là 100%, mannitol là 95,1%, sorbitol là 93,4%; maltose là 91,0%; xylose là 79,5%.     E. coli   3.3. Kết quả xác định một số yếu tố gây bệnh của các chủng vi khuẩn E. coli phân lập được 3.3.1. Kết quả xác định các yếu tố bám dính 3.3.1.1. Kết quả xác định yếu tố bám dính F1 (F1 fimbirae)   - >E. coli   -Mannose (Mannose -Mannose (Mannose Sensitive),   Bảng 3.3. Kết quả xác định gen quy định khả năng sản sinh F1 fimbriae bằng phản ứng PCR   Gen xác  Mã hóa protein     F1 fimbriae FimA  109/122 89,34 FimH  Fimbriae 30/122 24,59  24,59%) mang gen FimH.  --in vitro,   3.3.1.2. Kết quả xác định yếu tố bám dính P fimbriae và yếu tố xâm nhập (Intimin)    Pap  -  fimbriae và eae -  E. coli   en và cs (2001), Delicato và cs  3.3.2. Kết quả xác định một số gen liên quan đến khả năng thu nhận sắt  E. coli -Moulin và Fairbrother, 1999) [9]. Bảng 3.4. Kết quả xác định gen quy định khả năng thu nhận sắt của các chủng E.coli phân lập được   Gen xác  Mã hóa protein       IutA  112/122 91,80 IucA  98/122 80,32 iutA iucA, E. coli iutA. 3.3.3. Kết quả xác định khả năng kháng bổ thể trong huyết thanh gia cầm  E. coli   -Moulin và Fairbrother, 1999).  Bảng 3.5. Kết quả xác định khả năng kháng bổ thể trong huyết thanh gà của các chủng E. coli phân lập được     103/122 84,43  19/122 15,57  0 0  0 0  than  Vandekerchove và cs (2005), Brenda và cs (1993).   Các gen Iss, Tsh và CvaC   cs, 2003, Skyberg và Horne, 2003, Kelly và cs, 2004; Ewers và Janen, 2005, Dissanayake và cs, 2007). E. coli,  ng gen CvaC ( 71,31%). 3.3.4. Kết quả xác định một số loại độc tố E. coli   3.3.5. Tổng hợp các yếu tố độc lực có trong các chủng E. coli phân lập từ ngan bệnh và ngan khỏe Bảng 3.6. Tỷ lệ các gen quy định một số yếu tố độc lực có trong các chủng E. coli phân lập từ ngan bệnh và ngan khỏe    (n=122) =12)   (+)   (+)  Các  bám dính F1 Fimbriae (protein chính) FimA 109 89,34 3 25,0 9,39  bám dính) FimH 30 24,59 0 P Fimbriae PapC 65 53,28 0 Protein Intimin (bám dính và  eae 6 4,92 0   thu    IutA 112 91,80 3 25,0 2,4  IucA 98 80,33 3 25,0 2,19   kháng  trong  thanh   Iss 84 68,85 2 16,67 0,000321   Tsh 73 59,84 1 8,33 0,000618 Colicin V CvaC 87 71,31 2 16,67 0,000131    Cnf1 0 0 0   Cnf2 30 24,59 0 ga 1 Stx1 6 4,92 0  Stx2 0 0 0  E. coli  E. coli   E. coli aC. E. coli    -Siek và cs (2005) [20], McPeake và cs (2005) [18], Vandekechove và cs (2005) [22]. 3.3.6. Kết quả xác định serotyp của các chủng vi khuẩn E. coli phân lập được 3.3.6.1. Đối với các chủng E. coli từ ngan bệnh E. coli    O,    . M  Thành Thìn và cs (2008b) [5]. 3.3.6.2. Đối với các chủng E. coli từ ngan khỏe   3.3.7. Mối liên quan giữa serotyp O và tổ hợp của các yếu tố gây bệnh Biểu đồ. Kết quả xác định serotyp O của các chủng vi khuẩn E. coli phân lập được từ ngan bệnh E. coli   FimA/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss; FimA/PapC/IutA/IucA/Tsh; và FimA/IutA/IucA/CvaC/Iss  - hi xem xét   FimA/PapC/IutA/IucA/Tsh và FimA/IutA/IucA (4,1%).  -   3.3.8. Kết quả gây bệnh thực nghiệm trên phôi trứng 3.3.8.1. Đặc tính của các chủng vi khuẩn E. coli dùng gây bệnh thực nghiệm trên phôi trứng -N12, E-N17, E- N21, E-N27, E-N35, E-N36, E-N47, E-N62, E-N63, E-  E- - Bảng 7. Tóm tắt đặc tính của các chủng vi khuẩn E. coli dùng gây bệnh thực nghiệm   Serotyp O  E-N12 FimA/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss O8  E-N17 FimA/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss O143  E-N21 FimA/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss O1  E-N27 FimA/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss O143  E-N35 FimA/FimH/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss O1  E-N36 FimA/PapC/IutA/IucA/Tsh O8  E-N47 FimA/FimH/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss/Cnf2 O15  E-N62 FimA/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss/Cnf2 O115  E-N63 FimA/PapC/eae/IutA/CvaC/Tsh/Iss O115  E-NK2 FimA/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss O115  E-G163 FimA/FimH/PapC/IutA/IucA/CvaC/Tsh/Iss ? Gà E-R   3.3.8.2. Kết quả gây nhiễm thực nghiệm các chủng vi khuẩn E. coli trên phôi trứng  - - -N35, E-N47 và E- phôi 100% ngay sau khi tiêm 1--   gian phôi     E. coli    4. Kết luận và đề nghị 4.1. Kết luận  - Colibacillosis   - E. coli    -E. coli  bình. - E. coli E. coli gen Iss, Tsh và  - E. coli  E. coli  O: O8 (8,3%). - E. coli    - E. coli -5 ngày, phôi -  4.2. Đề nghị khoa  Tài liệu tham khảo 1. Nguyễn Xuân Bình (2006) 2. Vũ Duy Giảng (2007).  3. Nguyễn Đức Lưu, Nguyễn Hữu Vũ (2000).   43, 66, 117. 4. Võ Thành Thìn, Ellen Ons, Nguyễn Viết Không, Bruno Goddeeris (2008a).     65. 5. Võ Thành Thìn, Ellen Ons, Bruno Goddeeris (2008b).  - 43. [...]... “Characterization of Escherichia coli isolated from cases of avian Colibacillosis , Can J Vet Res (57), pp 146-151 7 De Campos T.A (2005) Adhesion properties, Fimbrial expression and PCR detection of adhesion-related genes of avian Escherichia coli strains, Veterinary microbiology (106), pp 275- 285 8 Delicato E R., Benito Guimaraes de Brito (2003) Virulence-associated genes in Escherichia coli isolates from... Research, (36), pp 241-256 21 Skyberg, J A, S M Horne (2003) Characterizing avian Escherichia coli isolates with multiplex polymerase chain reaction, Avian Deseases (47), pp 1441- 1447 22 Vandekerchove, F Vandemaele, C Adriaensen (2005) Virulence-associated traits in avian Escherichia coli: Comparison between isolates from Colibacillosis- affected and clinically healthy layer flocks, Veterinary microbiology... (1992) “Role of Fimbriae adhensins in pathogenesis of Escherichia coli infections”, J Microbiol (38), pp 720 – 727 16 Janßen T, Christine Schwarz, Petra Preikschat, Matthias Voss, Hans-C Philipp, Lothar H.Wieler (2001) Virulence-associated genes in avian pathogenic Escherichia coli (APEC) isolated from internal organs of poultry having died from colibacillosis (291), pp 371-378 17 Kelly A Tivendale,... Nolan (2003) A and Richard E WooleyPrediction of Chicken Embryo Lethality with the Avian Escherichia coli Traits Complement Resistance, Colicin V Production, and Presence of the Increased Serum Survival Gene Cluster (Iss) (47), pp 370 – 379 14 Gross W G (1994) Diseases due to Escherichia coli in poultry In Escherichia coli in Domestic Animals and Humans, Edited by C L Gyles Wallingford, England: CAB... Crabb, and Glenn F Browning (2004) Association of Iss and iucA, but Not Tsh, with Plasmid-Mediated Virulence of Avian Pathogenic Escherichia coli, vol 72, No 11, pp 6554 - 6560 18 McPaeke, S.J.W., J.A Smyth, H.J Ball (2005), Characterisation of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) associated with colisepticaemia compared to faecal isolates from healthy birds, Veterinary microbiology (110), pp 245... (1992) Pap- and pil-related DNA sequences and other virulence determinants associated with Escherichia coli isolated from septicemic chickens and turkeys, Infection and Immunity 60 (7), pp 2648–2656 12 Ewers C., Janen, T (2005) Rapid Detection of Virulence-Associated Genes in Avian Pathogenic Escherichia coli by Multiplex Polymerase Chain Reaction, Avian Deseases (49), pp 269 – 273 13 Gibbs P.S, A John... poultry with Colibacillosis, Veterinary microbiology (94), pp 97-103 9 Dho – Moulin M., J M Fairbrother (1999) Avian pathogenic Escherichia coli (APEC), Vet Res (30), pp 299 – 316 10 Dissanaya D.R.A., T.G Wijewardana., G.A Gunawardena and I.R Poxton (2007) Occurrence of Temperature Sensitive Haemagglutinin (TSH), Increase Serum Survival (ISS) and Col V Plasmid (CVA C) Genes in Chicken E coli in Relation . NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI PHÂN LẬP TỪ NGAN MẮC COLIBACILLOSIS Nguyễn Thị Liên Hương Trung tâm Nghiên cứu Gia cầm Thuỵ Phương Tóm.   Nghiên cứu một số đặc tính của vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ ngan mắc Colibacillosis  trên ngan. .    3.2. Kết quả phân lập và giám định vi khuẩn E. coli từ các phủ tạng của những ngan nghi mắc Colibacillosis 3.2.1. Kết quả phân lập vi khuẩn E. coli từ phủ tạng của ngan bệnh E.