Đánh giá ảnh hưởng của một số điều kiện nuôi cấy đến sự sinh trưởng của chủng nấm linh chi qn09 thu thập tại quảng nam

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG CỦA CHỦNG NẤM LINH CHI QN09 THU THẬP TẠI QUẢNG NAM HÀ NỘI – 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG CỦA CHỦNG NẤM LINH CHI QN09 THU THẬP TẠI QUẢNG NAM Sinh viên thực : PHẠM PHƢƠNG ANH Khóa : 63 Ngành : Cơng nghệ Sinh học Giáo viên hƣớng dẫn : ThS Trần Đông Anh HÀ NỘI - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: “Đánh giá ảnh hƣởng số điều kiện nuôi cấy đến sinh trƣởng chủng nấm Linh chi QN09 thu thập Quảng Nam” trực tiếp thực dƣới hƣớng dẫn ThS Trần Đông Anh Số liệu kết nghiên cứu khóa luận hồn tồn xác, trung thực chƣa đƣợc công bố tài liệu, báo tạp chí Các thơng tin tham khảo đƣợc trích dẫn khóa luận đƣợc trích dẫn rõ ràng tên tác giả, tên cơng trình, thời gian, địa điểm nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2022 Sinh viên Phạm Phƣơng Anh i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian đƣợc học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, bên cạnh cố gắng nỗ lực thân, nhận đƣợc hƣớng dẫn, bảo tận tình thầy giáo, giáo anh chị, bạn Và động viên, giúp đỡ tận tình bạn bè, gia đình Tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc Học viện, Ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học thầy giáo, cô giáo truyền đạt cho kiến thức quý báu suốt thời gian học tập rèn luyện Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới Th.S Trần Đông Anh - Bộ môn Công nghệ Vi sinh, Khoa Công nghệ Sinh học - Học viện Nơng nghiệp Việt Nam, ngƣời tận tình hƣớng dẫn, bảo tạo điều kiện cho suốt q trình thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Với lịng biết ơn sâu sắc tơi xin gửi lời cảm ơn đến TS Ngô Xuân Nghiễn, TS Nguyễn Thị Bích Thùy, ThS Nguyễn Thị Luyện - Bộ môn Công nghệ Vi sinh KS Nguyễn Thị Huyền Trang giúp đỡ hƣớng dẫn thời gian làm khóa luận tốt nghiệp Trong q trình thực đề tài, xin gửi lời cảm ơn đến anh chị bạn, em Trung tâm Đào tạo, Nghiên cứu Phát triển nấm ăn nấm dƣợc liệu - Khoa Công nghệ Sinh học giúp đỡ tạo điều kiện tốt suốt thời gian thực tập hồn thành khóa luận Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, lời cảm ơn chân thành tới gia đình, ngƣời thân, bạn bè ln đồng hành, động viên, giúp đỡ tạo động lực cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận tốt nghiệp Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2022 Sinh viên Phạm Phƣơng Anh ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .vii TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP viii Phần I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu, yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục tiêu đề tài Đánh giá ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy đến sinh trưởng chủng nấm linh chi QN09 thu thập Quảng Nam 1.2.2 Yêu cầu đề tài Phần II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tình hình nghiên cứu, sản xuất nấm ăn nấm dƣợc liệu giới 2.2 Tình hình nghiên cứu, sản xuất nấm ăn nấm dƣợc liệu Việt Nam 2.3 Giới thiệu nấm linh chi 2.3.1 Vị trí nấm linh chi phân loại nấm học 2.3.2 Đặc điểm hình thái 2.3.3 Chu kỳ sống nấm linh chi 2.4 Thành phần hóa học nấm linh chi (Ganoderma lucidum sp.) 2.5 Giá trị dƣợc liệu 10 2.5.1 Chống ung thư 11 2.5.2 Kháng khuẩn kháng virus 11 2.5.3 Tác dụng bệnh tim mạch 12 2.5.4 Tác dụng đến hệ miễn dịch 12 2.5.5 Chống oxy hóa 12 2.5.6 Các công dụng khác 13 2.6 Đặc điểm nuôi trồng nấm linh chi 13 iii 2.6.1 Nguồn chất 13 2.6.2 Điều kiện ngoại cảnh 15 2.7 Tình hình ni trồng nấm linh chi giới nƣớc 16 Phần III: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Đối tƣợng nghiên cứu 18 3.2 Vật liệu thí nghiệm 18 3.2.1 Nguyên liệu 18 3.2.2 Các điều kiện, trang thiết bị sử dụng thí nghiệm 18 3.3 Địa điểm nghiên cứu 18 3.4 Thời gian nghiên cứu 19 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.6 Nội dung nghiên cứu 19 3.7 Phương pháp tiến hành 22 3.8 Xử lý số liệu 22 Phần IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 23 4.2 Ảnh hƣởng nguồn Cacbon đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 25 Hình 4.2: Ảnh hƣởng nguồn carbon đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 (thứ tự ảnh từ CT1 – CT5) 28 4.3 Thí nghiệm 3: Đánh giá ảnh hƣởng nguồn Nito đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 28 4.4 Thí nghiệm 4: Đánh giá ảnh hƣởng nồng độ pH đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 31 Phần V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 5.1 Kết luận 35 5.2 Kiến nghị 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO 36 PHỤ LỤC 38 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Các hoạt chất sinh học dẫn xuất nấm Linh chi Bảng 4.1 Ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng khác đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 23 Bảng 4.2 Ảnh hƣởng nguồn Cacbon khác đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 26 Bảng 4.3 Ảnh hƣởng nguồn Nito khác đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 .29 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng độ pH khác đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 .32 v DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Chu kì phát triển nấm Linh chi Hình 4.1: Ảnh hƣởng mơi trƣờng dinh dƣỡng khác đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 25 Hình 4.2: Ảnh hƣởng nguồn carbon đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 (thứ tự ảnh từ CT1 – CT5) 28 Hình 4.3: Ảnh hƣởng nguồn nito đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 (thứ tự ảnh từ CT1 – CT6) 31 Hình 4.4: Ảnh hƣởng độ pH đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 (thứ tự ảnh từ CT1 – CT6) 34 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Ý nghĩa Viết tắt CT : Công thức CT1 : Công thức CT2 : Công thức CT3 : Công thức CT4 : Công thức CT5 : Công thức CT6 : Công thức CV(%) : Sai số thí nghiệm QN - 09 : Quảng Nam 09 PDA : Potato Dextrin Agar : Ganoderma lucidum LSD0,05 : Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 5% MT : Môi trƣờng TGST : Thời gian sinh trƣởng vii TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Tên đề tài khóa luận: “Đánh giá ảnh hƣởng số điều kiện nuôi cấy đến sinh trƣởng chủng nấm linh chi QN09 thu thập Quảng Nam” Giảng viên hƣớng dẫn: Th.S Trần Đông Anh Sinh viên thực hiện: Phạm Phƣơng Anh Lớp: K63 – CNSHP ( Pohe) Đề tài : “Đánh giá ảnh hƣởng số điều kiện nuôi cấy đến sinh trƣởng chủng nấm linh chi QN09 thu thập Quảng Nam” nhằm đánh giá ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng, nguồn Cacbon, nguồn Nito pH đến khả sinh trƣởng chủng nấm linh chi QN09 nhân giống Qua xác định đƣợc mơi trƣờng thích hợp để nhân giống chủng nấm linh chi QN09 để tiến hành nuôi trồng đạt suất cao Kết nghiên cứu ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng cho thấy: hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 sinh trƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng cám gạo tốt Kết đánh giá khả sinh trƣởng hệ sợi nấm linh chi QN09 môi trƣờng nhân giống có bổ sung nguồn hàm lƣợng cacbon cho thấy: mơi trƣờng Cám gạo có bổ sung D- Fructose thích hợp với sinh trƣởng hệ sợi nấm linh chi QN09 Kết đánh giá khả sinh trƣởng hệ sợi nấm linh chi QN09 môi trƣờng nhân giống có bổ sung nguồn hàm lƣợng Nito cho thấy: mơi trƣờng Cám gạo có bổ sung D – Fructose Cao nấm men thích hợp với sinh trƣởng hệ sợi nấm linh chi QN09 Trên môi trƣờng nhân giống có thay đổi pH cho thấy: mơi trƣờng pH = thích hợp với sinh trƣởng hệ sợi nấm linh chi QN09 viii Bảng 4.3 Ảnh hƣởng nguồn Nito khác đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 Chỉ tiêu Đƣờng kính hệ sợi sau ngày ni cấy (mm) Cơng thức Thời gian hệ sợi mọc kín mặt thạch (ngày) Tốc độ mọc hệ sợi (mm/ngà y) Độ dày hệ sợi nấm (đơn vị) Đặc điểm hình thái hệ sợi Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi CT1 75,22 9,7 1,05 ++ trung bình, tốc độ mọc trung bình, mọc đồng Hệ sợi trắng, CT2 78,77 8,2 1,12 +++ mƣợt, mật độ sợi dày, mọc đồng Hệ sợi trắng, mƣợt, mật CT3 82,44 9,5 1,17 ++ độ sợi trung bình, mọc đồng CT4 69,22 12,00 29 0,99 + Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi mỏng, tốc độ mọc chậm, mọc đồng Hệ sợi trắng, mƣợt, mật CT5 74,00 10,8 1,06 + độ sợi mỏng, tốc độ mọc chậm, mọc đồng Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi CT6 85,53 7,0 1,22 +++ dày, tốc độ mọc nhanh, mọc đồng LSD0.05 4,32 0,74 CV % 3,1 3,7 Ghi chú: Mỏng + Trung bình ++ Dày +++ 30 Hình 4.3: Ảnh hƣởng nguồn nito đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 (thứ tự ảnh từ CT1 – CT6) Bên cạnh thời gian hệ sợi sinh trƣởng kín thạch độ dày hệ sợi tiêu quan tâm đánh giá Thời gian hệ sợi sinh trƣởng kín bề mặt thạch dao động từ 7,0 - 12 ngày Trên CT6 có thời gian sợi sinh trƣởng kín đĩa ngắn (7 ngày), mật độ hệ sợi đạt mức dày công thức CT1,CT3 cho thấy thời gian sợi ăn kín bề mặt thạch từ 9.5 - 9,7 CT4 cơng thức hệ sợi mọc kín đĩa chậm khoảng thời gian 12 ngày, hệ sợi mỏng Qua bảng 4.3, cho thấy nấm linh chi QN09 sinh trƣởng tốt môi trƣờng bổ sung 2g Cao nấm men/1000ml mơi trƣờng (CT6) cho đƣờng kính trung bình hệ sợi thời gian hệ sợi sinh trƣởng kín bề mặt thạch mức nhanh, độ dày hệ sợi dày tốc độ mọc đồng nhất, tiếp đến môi trƣờng sử dụng Malt extra hiệu nguồn nito Ure Từ thí nghiệm này, cao nấm men đƣợc chọn nguồn nito thích hợp để nghiên cứu tiếp 4.4 Thí nghiệm 4: Đánh giá ảnh hƣởng nồng độ pH đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 Sau nhận đƣợc kết môi trƣờng tốt thơng qua thí nghiệm Tiến hành thí nghiệm với điều kiện chuẩn độ pH lần lƣợt từ pH = 4, pH=5, pH =6, pH=7, pH=8, pH=9 Ngày bung sợi ngày thứ kể từ ngày cấy Với độ pH = mơi trƣờng thích hợp để hệ sợi phát triển tối ƣu Hóa chất để chuẩn độ là dung dịch HCl NaOH, HCl để giảm độ pH NaOH giúp tăng độ pH Sau hấp mơi trƣờng độ pH có thay đổi tăng lên so với ban đầu, nhiên không nhiều pH môi trƣờng ảnh hƣởng lớn đến sinh trƣởng nấm, pH ảnh hƣởng đến hoạt tính enzyme, đến khả hịa tan hợp chất 31 Đƣờng kính trung bình hệ sợi sau ngày, thời gian hệ sợi sinh trƣởng kín bề mặt thạch độ dày hệ sợi đƣợc thể qua bảng 4.4: Bảng 4.4 Ảnh hƣởng độ pH khác đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 Chỉ tiêu Công thức CT1 CT2 CT3 Đƣờng kính hệ sợi sau ngày nuôi cấy (mm) 48,56 65,00 60,89 Thời gian Độ dày hệ sợi mọc Tốc độ mọc hệ kín mặt hệ sợi sợi nấm thạch (mm/ngày) (đơn vị) (ngày) 10,1 0,83 9,0 0,97 10,4 0,91 32 Đặc điểm hình thái hệ sợi +++ Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi nhanh, tốc độ mọc nhanh, mọc đồng +++ Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi dày, tốc độ mọc nhanh, mọc đồng ++ Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi trung bình, tốc độ mọc trung bình, mọc đồng CT4 CT5 48,22 42,48 12,00 13,6 0,78 0,65 CT6 26,31 14,8 0,49 LSD0.05 6,42 0,19 0,85 CV % 7,3 6,0 Ghi chú: : mỏng; +: trung bình; ++: dày; +++ 33 ++ Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi trung bình, tốc độ mọc trung bình, mọc đồng + Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi mỏng, tốc độ mọc chậm, mọc đồng + Hệ sợi trắng, mƣợt, mật độ sợi mỏng, tốc độ mọc chậm, mọc đồng Hình 4.4: Ảnh hƣởng độ pH đến sinh trƣởng hệ sợi chủng nấm linh chi QN09 (thứ tự ảnh từ CT1 – CT6) Bên cạnh thời gian hệ sợi sinh trƣởng kín thạch độ dày hệ sợi tiêu quan tâm đánh giá Thời gian hệ sợi sinh trƣởng kín bề mặt thạch dao động từ 9.0 - 15 ngày Trên bảng cho thấy CT2 có thời gian sợi sinh trƣởng kín đĩa ngắn (9 ngày), mật độ hệ sợi đạt mức dày công thức CT1,CT3,CT4 cho thấy thời gian sợi ăn kín bề mặt thạch mức trung bình CT6 cơng thức hệ sợi mọc kín đĩa chậm khoảng thời gian 15 ngày, hệ sợi mỏng Qua bảng 4.3, cho thấy nấm linh chi QN09 sinh trƣởng tốt môi trƣờng pH = 34 Phần V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ thí nghiệm rút đƣợc số kết luận nhƣ sau: Khi nghiên cứu ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN 09, môi trƣờng dịch chiết cám gạo môi trƣờng sinh trƣởng tốt hệ sợi Với thời gian sinh trƣởng kín bề mặt thạch 7.63 ngày Khi nghiên cứu ảnh hƣởng nguồn cacbon đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09, kết cho thấy bổ sung nguồn cacbon D – Frutose hệ sợi nấm phát triển nhanh, sợi dày trắng mƣợt Thời gian sinh trƣởng kín bề mặt thạch 9.77 ngày Khi bổ sung nguồn nito khác hệ sợi nấm linh chi QN09 phát triển nhanh môi trƣờng nito Cao nấm men Thời gian sinh trƣởng kín bề mặt thạch ngày Trong môi trƣờng pH = 5, hệ sợi giống nấm linh chi QN 09 phát triển dày nhanh điều kiện pH khác Thời gian hệ sợi mọc kín đĩa ngày 5.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu, thử nghiệm nhân giống nấm linh chi QN09 nguồn dinh dƣỡng khác (dịch chiết, nguồn cacbon, ) Tiếp tục nghiên cứu khả sinh trƣởng phát triển nấm linh chi QN09 giai đoạn nuôi trồng ( yếu tố ngoại cảnh, chất, tỉ lệ phối trộn ) 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt: Nguyễn Thị Chính Phát triển cơng nghệ sản xuất nấm dƣợc liệu phục vụ tăng cƣờng sức khỏe Dự án cấp nhà nƣớc, Trƣờng ĐH Khoa học tự nhiên – ĐHQG Hà Nội (2005) Nguyễn Thị Chính Hồn thiện công nghệ sản xuất nấm dƣợc liệu theo hƣớng công nghiệp để tạo thực phẩm chức hỗ trợ điều trị bệnh viêm gan B, tiểu đƣờng, khối u, ung thƣ, nâng cao sức khỏe Báo cáo tổng kết dự án khoa học công nghệ, Quỹ phát triển Khoa học Công nghệ (2011) Nguyễn Lân Dũng , Công nghệ trồng nấm tập 2, NXB Nông nghiệp (2003) Nguyễn Lân Dũng Công nghệ nuôi trồng nấm, Tập (Tái lần thứ 2), Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội (2004) Nguyễn Lân Dũng (2010), Kỹ thuật nuôi trồng nấm, NXB Nông nghiệp (2010) Nguyễn Hữu Đống, Đinh Xuân Linh (2000) Nấm ăn nấm dƣợc liệu – công dụng công nghệ nuôi trồng Nhà xuất Hà Nội (2000) Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn, Zani Fedirico Cơ sở khoa học công nghệ nuôi trồng Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội (2002) Trịnh Tam Kiệt Nấm lớn Việt Nam Tập NXB Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Hà Nội (2011) Trịnh Tam Kiệt Nấm lớn Việt Nam Tập NXB Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Hà Nội (2012) 10 Trịnh Tam Kiệt Nấm lớn Việt Nam Tập Nhà xuất Khoa học tự nhiên Công nghệ, Hà Nội (2013) 11 Đỗ Tất Lợi Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội (1999) 12 Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Thị Sơn Kỹ thuật trồng, chế biến nấm ăn, nấm dƣợc liệu Nhà xuất Nông nghiệp (2007) 13 Đinh Xuân Linh - Thân Đức Nhã - Nguyễn Hữu Đống - Nguyễn Thị Sơn - Nguyễn Duy Trình - Ngơ Xn Nghiễn (2012) Kĩ thuật trồng, chế biến nấm ăn nấm dƣợc liệu ( Tái lần 2) Nhà Xuất Nông nghiệp, Hà Nội 14 Trần Văn Mão Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông nghiệp, Hà nội (2004) 15 Trần Văn Mão, Trần Tuấn Kha Kỹ thuật trồng nấm ăn nấm dƣợc liệu Nhà xuất Nông nghiệp (2014) 16 Lê Xuân Thám (1996) Nghiên cứu đặc điểm sinh học đặc điển hấp thu khoáng nấm Linh chi Ganoderma lucidum (Leyss.ex Fr).Karst Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học, Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà nội, Việt nam 17 Lê Xuân Thám (1996) Nấm Linh chi - dƣợc liệu quí việt nam Nhà xuất mũi Cà Mau 18 Lê Duy Thắng (2001) Kỹ thuật nuôi trồng nấm ăn tập Nhà xuất Nông nghiệp 36 Tài liệu Tiếng Anh Boh B (2013) Ganoderma lucidum: a potential for biotechnological production of anticancer and immunomodulatory drugs Recent Pat Anticancer Drug Discov 8(3): 255–87 Chi JH, Ha TM, Kim YH, Rho YD (1996) Studies on the main factors affecting the mycelial growth of Phellinus linteus Korean J Mycol 24(3):214–222 Gao Y H, Sai H, Chen G L, Ye J X, Zhou S F (2003) A randomized, placebocontrolled, multi-center study of Ganoderma lucidum (W Curt.: Fr.) Lloyd (Aphyllophoromycetideae) polysaccharides (Ganopoly) in patients with advanced lung cancer Int J Med Mushrooms 5:368–81 Han XH, Wang MC, Wang HZ, He B (2003) A preliminary study on nutritional conditions for the strain mycelium growth of several cultivars of Ganoderma J Hainan Nor Univ (Nat Sci) 16:88–92 (In Chinese) Sanodiya, B.S., Thakur, G.S., Baghel, R.K., Prasad, G.B., Bisen, P.S., (2009) Ganoderma lucidum: a potent pharmacological macrofungus Curr Pharm Biotechnol (10),pp 717–742 Song M, Kim N, Less and Hwang S (2007) Use of Whey Permeate for cultivating Ganoderma lucidum Mycelia J Dairy Sci 90 (5): 2141-2146 S W Chiu, Z.M Wang, T.M Leung, D Moore (2000) Food and chemical toxicology pp 173-178 Teow S Effective dosage of the extract of Ganoderma lucidum in the treatment of various ailments In: Royse DJ editor(s) Mushroom Biology and Mushroom Products Pennsylvania: Pennsylvania State University, 1996 Wachtel-Galor S,, J, Yuen, J,A, Buswell and I,F,F, Benzie (2011) Chapter Ganoderma lucidum (Lingzhi or Reishi) A Medicinal Mushroom, In Herbal Medicine: Biomolecular and Clinical Aspects, eds, I,F,F, Benzie and S, Wachtel-Galor, Boca Ratonm (Florida): CRC Press, pp 175-199 10 Wang Chi, Zh, Y, Hua, (1994), A new kind of preparation of Ganoderma lucidum in treating 35 patients with coronary cardiac disease, Proc, 94 Inter, Sym, On Ganoderma Res., p58-9, Beijing China 11 Wang L1, Chen X, Wang Q, Hao J, Lan J (2011) Effect of different light of LED light quality on growth and antioxidant enzyme activities of Ganoderma lucidum China Journal of Chinese Materia Medica 36(18):2471-2474 12 Wang Zhiqiang, (2009), Rare mushroom cultivation, Shanghai, China 13 Wasser, S,P, (2010), Reishi, In Encyclopedia of Dietary Supplements (2nd edition), eds, P,M, Coates, J,M, Betz, M,R, Blackman, G,M, Cragg, M, Levine, J, Moss, J,D, White, New York-London: Informa Healthcare, pp 680-690 14 Zhao J D, Zhang X Q.(1994) Importance, distribution and taxonomy of Ganodermataceae in China Proceedings of Contributed Symposium, B 5th International Mycological Congress, Vancouver 1994 1994 August Pp 14-21 37 PHỤ LỤC 4.1 Ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DK7N FILE TN1 7/ 9/22 22:46 :PAGE Thi nghiem Anh huong cua moi truong dinh duong VARIATE V003 DK7N LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 303.903 151.952 2.78 0.120 CT 1195.52 298.879 5.47 0.021 * RESIDUAL 437.512 54.6890 * TOTAL (CORRECTED) 14 1936.93 138.352 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKD FILE TN1 7/ 9/22 22:46 :PAGE Thi nghiem Anh huong cua moi truong dinh duong VARIATE V004 TGKD LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 693333E-01 346666E-01 0.75 0.507 CT 29.7773 7.44433 160.67 0.000 * RESIDUAL 370667 463333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 30.2173 2.15838 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDM FILE TN1 7/ 9/22 22:46 :PAGE Thi nghiem Anh huong cua moi truong dinh duong VARIATE V005 TDM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 163333E-01 816666E-02 5.30 0.034 CT 115507 288767E-01 18.73 0.001 * RESIDUAL 123333E-01 154167E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 144173 102981E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1 7/ 9/22 22:46 :PAGE Thi nghiem Anh huong cua moi truong dinh duong MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 DK7N 60.8640 50.2660 52.9320 TGKD 9.94000 9.82000 9.78000 TDM 1.01800 0.948000 0.948000 SE(N= 5) 3.30723 0.962635E-01 0.175594E-01 5%LSD 8DF 10.7846 0.313906 0.572595E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS DK7N TGKD 38 TDM 47.1100 10.2667 0.973333 45.8867 10.9000 0.896667 3 49.6633 11.5333 0.883333 63.2233 8.90000 0.973333 67.5533 7.63333 1.13000 SE(N= 3) 4.26962 0.124276 0.226691E-01 5%LSD 8DF 13.9228 0.405250 0.739217E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1 7/ 9/22 22:46 :PAGE Thi nghiem Anh huong cua moi truong dinh duong F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE DK7N TGKD TDM GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 54.687 15 9.8467 15 0.97133 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 11.762 7.3952 13.5 0.1204 1.4691 0.21525 2.2 0.5068 0.10148 0.39264E-01 4.0 0.0342 |CT | | | 0.0207 0.0000 0.0005 | | | | 4.2 Ảnh hƣởng nguồn cacbon đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DK7N FILE TN2 8/ 9/22 12: :PAGE Thi nghiem 2: Anh huong cua nguon carbon VARIATE V003 DK7N LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 154.345 77.1724 31.61 0.000 CT 853.739 213.435 87.43 0.000 * RESIDUAL 19.5300 2.44125 * TOTAL (CORRECTED) 14 1027.61 73.4010 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKD FILE TN2 8/ 9/22 12: :PAGE Thi nghiem 2: Anh huong cua nguon carbon VARIATE V004 TGKD LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 108000 540000E-01 0.05 0.953 CT 4.47333 1.11833 1.01 0.457 * RESIDUAL 8.85867 1.10733 * TOTAL (CORRECTED) 14 13.4400 960000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDMS FILE TN2 8/ 9/22 12: :PAGE Thi nghiem 2: Anh huong cua nguon carbon VARIATE V005 TDMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 129333E-02 646666E-03 1.40 0.302 CT 302933E-01 757334E-02 16.35 0.001 * RESIDUAL 370667E-02 463333E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 352933E-01 252095E-02 - 39 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN2 8/ 9/22 12: :PAGE Thi nghiem 2: Anh huong cua nguon carbon MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 DK7N 64.2000 59.1320 56.4660 TGKD 9.96000 9.96000 9.78000 TDMS 0.892000 0.886000 0.870000 SE(N= 5) 0.698749 0.470603 0.962635E-02 5%LSD 8DF 2.27855 1.53459 0.313906E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DK7N 67.2233 62.4433 68.0000 51.4433 50.5533 TGKD 9.90000 10.9333 9.76667 9.46667 9.43333 TDMS 0.873333 0.880000 0.966667 0.833333 0.860000 SE(N= 3) 0.902081 0.607545 0.124276E-01 5%LSD 8DF 2.94160 1.98114 0.405250E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN2 8/ 9/22 12: :PAGE Thi nghiem 2: Anh huong cua nguon carbon F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE DK7N TGKD TDMS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 59.933 15 9.9000 15 0.88267 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.5674 1.5625 2.6 0.0002 0.97980 1.0523 10.6 0.9527 0.50209E-010.21525E-01 2.4 0.3024 |CT | | | 0.0000 0.4573 0.0008 | | | | 4.3 Ảnh hƣởng nguồn nito đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DK7N FILE TN3 8/ 9/22 13:34 :PAGE Thi nghiem 3: Anh huong cua cac nguon Nito VARIATE V003 DK7N LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 2.66654 1.33327 0.24 0.795 CT 529.592 105.918 18.82 0.000 * RESIDUAL 10 56.2924 5.62924 * TOTAL (CORRECTED) 17 588.551 34.6206 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKD FILE TN3 8/ 9/22 13:34 :PAGE Thi nghiem 3: Anh huong cua cac nguon Nito VARIATE V004 TGKD LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 224060E-14 112030E-14 0.00 1.000 40 CT 47.7400 9.54800 0.00 1.000 * RESIDUAL 10 *********** *********** * TOTAL (CORRECTED) 17 47.7400 2.80824 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDMS FILE TN3 8/ 9/22 13:34 :PAGE Thi nghiem 3: Anh huong cua cac nguon Nito VARIATE V005 TDMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 744444E-03 372222E-03 0.23 0.803 CT 109828 219656E-01 13.35 0.000 * RESIDUAL 10 164556E-01 164556E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 127028 747222E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3 8/ 9/22 13:34 :PAGE Thi nghiem 3: Anh huong cua cac nguon Nito MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 6 DK7N 77.7767 77.8333 76.9900 TGKD 9.53333 9.53333 9.53333 TDMS 1.11000 1.10667 1.09500 SE(N= 6) 0.968611 0.000000 0.165608E-01 5%LSD 10DF 3.05213 0.000000 0.521836E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS DK7N TGKD TDMS 75.2233 9.70000 1.05333 78.7767 8.20000 1.12333 3 82.4433 9.50000 1.17667 69.2233 12.0000 0.990000 74.0000 10.8000 1.06000 85.5333 7.00000 1.22000 SE(N= 3) 1.36982 0.000000 0.234205E-01 5%LSD 10DF 4.31636 0.000000 0.737988E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3 8/ 9/22 13:34 :PAGE Thi nghiem 3: Anh huong cua cac nguon Nito F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE DK7N TGKD TDMS GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 77.533 18 9.5333 18 1.1039 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.8839 2.3726 3.1 0.7952 1.6758 0.00000 0.0 1.0000 0.86442E-010.40565E-01 3.7 0.8031 |CT | | | 0.0001 1.0000 0.0005 | | | | 4.4 Ảnh hƣởng độ pH đến phát triển hệ sợi nấm linh chi QN09 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DK7N FILE TN4 8/ 9/22 14:46 :PAGE Thi nghiem 4: Anh huong cua pH den su phat trien cua he soi VARIATE V003 DK7N 41 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 43.1129 21.5564 1.73 0.226 CT 2863.21 572.641 45.89 0.000 * RESIDUAL 10 124.778 12.4778 * TOTAL (CORRECTED) 17 3031.10 178.300 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKD FILE TN4 8/ 9/22 14:46 :PAGE Thi nghiem 4: Anh huong cua pH den su phat trien cua he soi VARIATE V004 TGKD LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 776231E-14 388115E-14 0.00 1.000 CT 74.5050 14.9010 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 110600E-04 110600E-05 * TOTAL (CORRECTED) 17 74.5050 4.38265 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDMS FILE TN4 8/ 9/22 14:46 :PAGE Thi nghiem 4: Anh huong cua pH den su phat trien cua he soi VARIATE V005 TDMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 190000E-02 950001E-03 0.44 0.662 CT 481733 963467E-01 44.26 0.000 * RESIDUAL 10 217667E-01 217667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 505400 297294E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4 8/ 9/22 14:46 :PAGE Thi nghiem 4: Anh huong cua pH den su phat trien cua he soi MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 6 DK7N 46.3883 49.6000 49.7383 TGKD 11.6500 11.6500 11.6500 TDMS 0.760000 0.785000 0.775000 SE(N= 6) 1.44209 0.429340E-03 0.190468E-01 5%LSD 10DF 4.54409 0.135286E-02 0.600170E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 DK7N 48.5567 65.0000 60.8867 48.2233 42.4767 26.3100 TGKD 10.1000 9.00000 10.4000 12.0000 13.6000 14.8000 TDMS 0.830000 0.976667 0.913333 0.783333 0.646667 0.490000 SE(N= 3) 2.03943 0.607178E-03 0.269362E-01 5%LSD 10DF 6.42631 0.191324E-02 0.848769E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4 8/ 9/22 14:46 :PAGE Thi nghiem 4: Anh huong cua pH den su phat trien cua he soi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION 42 C OF V |NL |CT | DK7N TGKD TDMS (N= 18) NO OBS 18 48.576 18 11.650 18 0.77333 SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.353 3.5324 7.3 0.2261 2.0935 0.10517E-02 0.0 1.0000 0.17242 0.46655E-01 6.0 0.6622 43 | | | 0.0000 0.0000 0.0000 | | |