(Luận văn) nghiên cứu khả năng nhân nhanh lan hài giáp (paphiopedilum malipoense) bằng phương pháp in vitro

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TRỊNH THỊ TUYẾT lu an n va gh tn to p ie NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP d oa nl w (Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO va an lu ll u nf LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG oi m z at nh z m co l gm @ an Lu THÁI NGUYÊN - 2016 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TRỊNH THỊ TUYẾT lu an va n NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LAN HÀI GIÁP p ie gh tn to ( Paphiopedilum malipoens) BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VITRO d oa nl w Chuyên ngành: Công nghệ sinh học lu ll u nf va an Mã số: 60.42.02.01 oi m z at nh LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG z l gm @ m co Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Văn Duy an Lu n va THÁI NGUYÊN - 2016 ac th si i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thực hiện dưới sự hướng dẫn TS Nguyễn Văn Duy Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn lu Trịnh Thị Tuyết an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii LỜI CẢM ƠN Lời tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Duy ThS Nguyễn Thị Tình, Khoa CNSH - CNTP, Trường Đại học Nơng Lâm Thái Ngun tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ suốt thời gian thực hiện hồn thành luận văn Tơi xin cảm ơn thầy cô giáo anh chi ̣ kỹ thuật viên phịng thí nghiệm ni cấy mơ tế bào thực vật , Khoa CNSH - CNTP, Trường đại học Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình làm luận văn thạc sĩ Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Trường Đại học Khoa ho ̣c - Đại học lu Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm khoa Khoa ho ̣c Sự số ng thầy cô giáo, cán an Khoa, đặc biệt sự quan tâm, giúp đỡ các anh chi ̣kỹ thuâ ̣t viên phòng thí nghiệm n va Khoa Khoa ho ̣c sự sớ ng gh tn to Tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè ln bên cạnh ủng hộ, khuyến khích, động p ie viên tạo động lực để tơi hồn thành luận văn Trong trình làm luận văn khơng tránh khỏi sai sót, tơi mong nhận oa nl w sự đóng góp quý báu từ phía thầy bạn bè để tơi làm tốt d Tác giả luận văn ll u nf va an lu oi m Trịnh Thị Tuyết z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si iii MỤC LỤC lu an n va p ie gh tn to LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục đích nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 4.1 Ý nghĩa khoa học 4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan phân loại đặc điểm lan Hài lan Hài Giáp 1.1.1 Đặc điểm thực vật học lan Hài (Paphiopedilum) 1.1.2 Đặc điểm thực vật học lan Hài Giáp 11 1.2 Khái quát nuôi cấy mô tế bào 15 1.2.1 Các vấn đề thường gặp nhân giống in vitro 15 1.2.2 Ưu nhược điểm phương pháp nuôi cấy mô 16 1.2.3 Quy trình nhân giống in vitro 18 1.2.4 Ứng dụng nuôi cấy mô nghiên cứu ứng dụng nông nghiệp 20 1.3 Tình hình nghiên cứu ni cấy mô lan Hài giới nước 21 1.3.1 Trên giới 21 1.3.2 Trong nước 24 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 26 2.2 Phạm vi nghiên cứu 27 2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 27 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si iv lu an n va p ie gh tn to 2.4 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 28 2.4.1 Hóa chất 28 2.4.2 Thiết bị 28 2.4.3 Dụng cụ 28 2.5 Phương pháp nghiên cứu 29 2.5.1 Phương pháp chuẩn bị môi trường điều kiện nuôi cấy 29 2.5.2 Phương pháp nuôi cấy in vitro 30 2.5.3 Phương pháp xử lí số liệu 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1 % đến lan Hài Giáp 33 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt lan Hài Giáp 35 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng hợp chất hữu đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 36 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan hài Hài Giáp 36 3.3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 39 3.3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 42 3.4 Kết nghiên cứu tạo in vitro hoàn chỉnh 45 3.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ lan Hài Giáp 45 3.4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính tới khả rễ 48 3.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan Hài Giáp 50 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 PHỤ LỤC d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si v DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Deoxyribonucleic acid B5: Gamborg cs, 1976 BA : - benzyl amino purine CT : Công thức CS : Cộng sự ĐC : Đối chứng KC: Knudson C MS : Murashighe Skoog, 1962 NAA : Naphthalene acetic acid PCR: Polymerase Chain Reaction lu ADN: an n va ie gh tn to Random Amplification of Polymorphic DNA p RAPD: Than hoạt tính Vacin and Went va an Woody Plant Medium – Lioyd Mc Cown, 1980 ll u nf WPM : lu VW : Schenk and Hildebrandt, 1972 d SH: oa nl w THT : oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Các nhóm lan Hài Viê ̣t Nam theo thứ ̣ng bảo tồ n của Tổ chức Bảo tồ n Thiên nhiên Quố c tế (IUCN) Bảng 2.1: Hóa chất nghiên cứu 28 Bảng 2.2: Thiết bị nghiên cứu 28 Bảng 3.1: Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% đến lan Hài Giáp 33 lu Bảng 3.2: Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm an n va hạt 35 tn to Bảng 3.3: Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh lan gh Hài Giáp 37 p ie Bảng 3.4: Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả w nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 40 oa nl Bảng 3.5: Kết nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả d nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 43 lu va an Bảng 3.6: Ảnh hưởng NAA tới sự rễ 46 u nf Bảng 3.7: Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính ảnh ll hưởng tới khả rễ 48 m oi Bảng 3.8: Sự phát triển lan Hài Giáp số giá thể ngồi mơi trường tự z at nh nhiên (sau tuần) 51 z m co l gm @ an Lu n va ac th si vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Hình thái lan Hài Giáp 13 Hình 2.1: Cây lan Hài Giáp 27 Hình 2.2: Sơ đồ thí nghiệm 29 Hình 3.1: Ảnh hưởng mơi trường tới khả nảy mầm hạt sau 12 tuần 36 Hình 3.2: Ảnh hưởng BA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 39 Hình 3.3: Ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 42 lu Hình 3.4: Ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh tới khả nhân nhanh an n va lan Hài Giáp 44 tn to Hình 3.5: Ảnh hưởng NAA tới khả rễ lan Hài Giáp 47 gh Hình 3.6: Ảnh hưởng NAA kết hợp với THT tới khả rễ lan Hài Giáp 50 p ie Hình 3.7: Ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan d oa nl w Hài Giáp 52 ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Hoa lan người biết đến sớm từ 2.800 năm TCN, coi đỉnh cao tiến hóa lồi hoa Hiện giới với 800 chi 25.000 – 30.000 lồi Họ Lan (Orchidaceae) chiếm vị trí thứ hai sau họ Cúc (Asteraceae) ngành thực vật hạt kín [20] Vì hình thái, cấu tạo hệ thống phân loại họ đa đa dạng phức tạp Việt Nam quốc gia đánh giá có sự đa dạng sinh học phong phú, phong lan Việt Nam đa dạng số loài, màu sắc chủng loại với 140 loại lu an phong lan chia thành 1000 giống nguyên thủy Chúng thường phân bố n va vùng rừng núi Cao Bằng, Sa Pa, Lào Cai, Huế, Hải Vân, Quy Nhơn, Kontum, tn to Pleiku, Ban Mê Thuật, Phan Rang, Đà Lạt, Di Linh, v.v [13] Trong số loài ie gh lan Việt Nam có nhiều quý điển hình giống Lan Hài p (Paphiopedilum) gồm 66 loài phân bố từ Ấn Độ, New Ghine vùng Đông nl w Nam Á, người Pháp gọi loài thuộc giống Hài Vệ Nữ Sabot de Venus oa người Anh dùng với ý nghĩa tương tự Lady's slippers [1] Hiện Việt Nam d tìm thấy 22 lồi thuộc chi Paphiopedilum có lồi đặc hữu có giá trị lu va an xuất hiện Việt Nam lan Hài Đỏ, lan Hài Vàng, lan Hài Tía, lan Hài Trắng, oi m Râu,…[1] ll u nf lan Hài Vân, lan Hài Vân Duyên, lan Hài Đốm, lan Hài Lông hay lan Hài z at nh Lan Hài Giáp loài lan xuất hiện số tỉnh miền núi phía bắc Bắc Kạn, Hà Giang, Hịa Bình, Lạng Sơn, Sơn La,…Loài sinh sống z khu rừng nguyên sinh rậm, thường xanh rộng hỗn giao kim @ l gm núi đá vơi kết tinh bị bào mịn mạnh độ cao từ 600 đến 1200m [16] Đây lồi lan Hài đặc biệt có hoa đẹp tao nhã với đài cánh hoa xanh m co cây, môi xám, xanh nhạt nhị lép trắng với chóp màu nâu tía, hoa có mùi thơm an Lu táo nhẹ Chúng có rộng kẻ chữ nhật đốm khảm xanh tươi n va xanh thẫm, đốm tím tía mặt dưới cụm hoa thường dài mang hoa to đơn ac th si Phụ lục 3: Thành phần mơi trường B5 (Gamborg cs, 1976) lu Muối khống Nồng dộ (mg/l) (NH4)2SO4 134 CaCl2.2H2O 150 MgSO4.7H2O 246 KNO3 2.258 MnSO4.2H2O 10 KI 0.75 Na2MoO4.2H2O 0.25 Na2H2PO4.2H2O 150 ZnSO4.7H2O 2.0 Na2EDTA.2H2O 37.2 H3BO3 CoCl2.6H2O 0.025 CuSO4.5H2O 0.025 an Đa lượng n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu Vi lượng 27.8 oi m FeSO4.7H2O z at nh 100 Nicotinic acid z Myo- inositol 10 30 an Lu Đường m co Thiamine l Các chất hữu gm @ Pyrodoxine HCl n va ac th si Phụ lục 4: Kết xử lý số liệu 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến QUẢ Lan Hài Giáp Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance lu an n va 0 ct 229.7 45.94 29.508 ct 358.9 71.78 8.722 ct 305.8 61.16 7.103 ct 5 271.1 54.22 16.852 Df MS tn to ct ANOVA gh SS F P-value F crit p ie Source of Variation Between Groups 15380.42 3845.105 309.1666 1.13E-17 2.866081 nl w 248.74 20 15629.16 24 12.437 d oa Within Groups ll u nf va an lu Total oi m Kết luận: Qua kết phân tích cho thấy F >F crit nên thời gian xử lý HgCl2 z at nh 0,1% ảnh hưởng đến kết khử trùng lan Hài Giáp z m co l gm @ an Lu n va ac th si 4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường tới khả nảy mầm hạt lan Hài Giáp Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance lu ct1 67 22.33333 8.163333 ct2 254.1 ct3 215.8 71.93333 10.17333 ct4 188.8 62.93333 9.823333 84.7 17.01 an n va Source of ie gh tn to ANOVA SS p Variation Df MS F P-value F crit nl 6609.743 1652.436 142.6645 8.96E-09 3.47805 d oa Groups w Between lu Groups 115.8267 Total 6725.569 10 11.58267 ll u nf va an Within oi m 14 z at nh Kết luận: Qua kết nghiên cứu cho thấy F > Fcrit mơi trường khác z có ảnh hưởng tới khả nảy mầm hạt m co l gm @ an Lu n va ac th si 4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 4.3.1 Chỉ tiêu hệ số nhân chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 7.85 1.57 0.102 ct2 9.52 1.904 0.09758 ct3 12.05 2.41 0.03425 ct4 ct5 5 12.5 9.35 2.5 1.87 0.1148 0.052 ANOVA SS Between Groups Within Groups 3.081064 1.60252 0.770266 9.613184 0.000167 2.866081 20 0.080126 4.683584 24 lu Source of Variation an Df MS F P-value F crit n va gh tn to ie Total p Kết luận: Qua kết phân tích cho thấy F >F crit nên số hệ số nhân chồi khác sự khác hàm lượng BA khác 4.3.2 Chỉ tiêu chiều cao chồi oa nl w d Anova: Single Factor SUMMARY an lu Count Sum 9.85 9.95 9.65 9.8 7.65 oi MS 0.398 20 1.1556 24 F crit 0.1894 9.517588 0.000177 2.866081 0.0199 an Lu P-value m co 0.7576 F l Total Df gm Within Groups SS @ Between Groups 0.0095 0.02175 0.0045 0.01675 0.047 z ANOVA Source of Variation 1.97 1.99 1.93 1.96 1.53 z at nh 5 5 m ct ct2 ct3 ct4 ct5 Average Variance ll u nf va Groups n va ac th si Kết luận: Qua kết phân tích cho thấy F >F crit nên chiều cao chồi khác sự khác hàm lượng BA khác 4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 4.4.1 Chỉ tiêu hệ số nhân chồi Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count Sum Average Variance 2.69 0.4055 BA mg/l 12.45 2.49 0.513 BA mg/l 14.13 2.826 0.31138 BA mg/l 14.92 2.984 0.34753 BA mg/l 13.95 2.79 0.288 NAA mg/l 9.6 1.92 0.02575 NAA 0,1 mg/l 14 2.8 0.15 NAA 0,3 mg/l 15.8 3.16 0.11675 16.4 3.28 0.15595 lu 13.1 2.62 0.137 n va 13.45 an ie lu BA mg/l gh tn to p d oa u nf va an NAA mg/l nl w NAA 0,5 mg/l ANOVA ll m Rows Df MS F P-value F crit 0.66576 0.16644 1.588888093 0.225425025 3.00691728 5.7856 1.4464 13.80778502 4.66784E-05 3.00691728 8.1274 24 an Lu Qua kết phân tích cho thấy: m co l Total 16 0.104753 gm 1.67604 @ Error z Columns SS z at nh Variation oi Source of n va F rows (BA) < F crit (BA) nên hàm lượng BAkhông ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu ac th si F colum (NAA) > F crit (NAA) nên hàm lượng NAA ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu 4.4.2 Chỉ tiêu chiều cao chồi Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count Sum Average Variance 10.7 2.14 0.04425 BA mg/l 10.5 2.1 0.07875 BA mg/l 11.6 2.32 0.08075 BA mg/l 11.65 2.33 0.0311 BA mg/l 10.3 2.06 0.063 NAA mg/l 10.27 2.054 0.04808 NAA 0,1 mg/l 10.8 2.16 0.05675 11.12 2.224 0.02813 NAA 0,5 mg/l 10.95 2.19 0.103 11.61 2.322 0.09442 an gh lu BA mg/l n va tn to NAA 0,3 mg/l p ie NAA mg/l d oa nl w ANOVA lu Variation SS va an Source of Df MS 0.32 u nf Columns 0.18988 Error 1.00152 Total 1.5114 P-value F crit 0.08 1.278057353 0.319606187 3.00691728 0.04747 8.758367282 0.567281274 3.00691728 ll Rows F oi m z at nh 16 0.062595 l gm @ Qua kết phân tích cho thấy: z 24 m co F rows (BA) < F crit (BA) nên hàm lượng BA không ảnh hưởng tới chiều cao chồi an Lu F colum (NAA) > F crit (NAA) nên hàm lượng NAA ảnh hưởng tới chiều cao chồi n va ac th si 4.5 Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết chuối tới khả nhân nhanh chồi lan Hài Giáp 4.5.1 Chỉ tiêu hệ số nhân chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance lu an n va 9.55 1.91 0.0155 ct2 11.05 2.21 0.4905 ct3 13.8 2.76 0.05175 ct4 12.33 2.466 0.08378 ct5 11.82 2.364 0.18748 ie gh tn to ct1 p ANOVA SS Df MS F P-value F crit d oa Variation nl w Source of 1.97316 0.49329 2.975175 0.044382 2.866081 u nf va an Groups lu Between Within ll 24 z at nh 5.2892 20 0.165802 oi Total 3.31604 m Groups z @ m co l số nhân gm Kết luận: Vì F> Fcrit hàm lượng dịch chuối có ảnh hưởng tới tiêu hệ an Lu n va ac th si 4.5.2 Chỉ tiêu chiều cao chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance lu an 11.72 2.344 0.08693 ct2 9.9 1.98 0.01575 ct3 10.1 2.02 0.037 ct4 9.72 1.944 0.00668 ct5 9.47 1.894 0.05168 Df MS n va ct1 gh tn to ANOVA p ie w Source of SS P-value F crit 0.634416 0.158604 4.004343 0.015183 2.866081 0.79216 20 0.039608 ll u nf va an Within Groups lu Groups d Between F oa nl Variation 24 z at nh 1.426576 oi m Total z cao chồi m co l gm @ Kết luận: Vì F> Fcrit hàm lượng dịch chuối có ảnh hưởng tới tiêu chiều an Lu n va ac th si 4.6 Nghiên cứu ảnh hưởng NAA tới khả rễ lan Hài Giáp 4.6.1 Chỉ tiêu tỷ lệ chồi rễ Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance lu an 274.5 54.9 0.55 ct2 442.7 88.54 4.463 ct3 411 82.2 4.83 ct4 347.2 69.44 3.313 ct5 325.9 65.18 3.862 Df MS F n va ct p ie gh tn to w ANOVA Variation oa nl Source of SS P-value F crit d lu 3615.3704 903.8426 20 265.5549 E-17 2.866081402 3.4036 oi m 68.072 ll u nf Within Groups va Groups 5.02552 an Between 3683.4424 z at nh Total 24 z gm @ m co l Kết luận: F > Fcrit nồng độ NAA có ảnh hưởng tới tiêu tỷ lệ chồi rễ an Lu n va ac th si 4.6.2 Chỉ tiêu số rễ/chồi SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ct1 10.09 2.018 0.03262 ct2 19.79 3.958 0.03832 ct3 18.5 3.7 0.075 ct4 15.6 3.12 0.037 ct5 14.4 2.88 0.057 lu an n va gh tn to ANOVA Source of P- ie SS p Variation Df MS F value oa nl Groups 7.24E- w Between F crit 11.54746 2.886866 60.15808 11 2.866081 d lu Groups 0.95976 20 0.047988 ll u nf va an Within 24 oi 12.50722 m Total z at nh z Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F > F crit nên nồng độ NAA ảnh hưởng m co l gm @ tới tiêu số rễ/chồi an Lu n va ac th si 4.6.3 Chỉ tiêu chiều dài rễ Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance lu an 11.3 2.26 0.028 ct2 18.2 3.64 0.053 ct3 17 3.4 0.065 ct4 15.22 3.044 0.05068 ct5 2.7 0.065 13.5 n va ct1 gh tn to ANOVA p ie Source of Variation SS Df MS F P-value F crit oa nl Groups w Between 6.043744 1.510936 28.86992 4.68E-08 2.866081 d lu Groups 1.04672 20 0.052336 ll u nf va an Within 24 oi 7.090464 m Total z at nh Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F > F crit nên nồng độ NAA ảnh hưởng z tới tiêu chiều dài rễ m co l gm @ an Lu n va ac th si 4.7 Nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính 4.7.1 Chỉ tiêu tỷ lệ chồi rễ Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count lu an 5 5 Average 79.78 79.68 82.04 80.14 78.76 Variance 62.732 69.147 40.828 85.818 69.063 THT 0mg/l THT 0,5 mg/l THT mg/l THT 1,5 mg/l THT 2mg/l 350.1 386 457.3 415.6 393 70.02 77.2 91.46 83.12 78.6 2.107 4.375 3.343 2.902 9.115 n va NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l Sum 398.9 398.4 410.2 400.7 393.8 tn to ANOVA gh Source of Variation ie SS 29.188 1252.172 58.18 p Rows Columns Error df 4 16 Total oa nl w MS F P-va 7.297 2.006737711 0.14202 313.043 86.0895153 1.3056 3.63625 1339.54 24 d u nf va an lu 4.7.2 Chỉ tiêu số rễ/chồi Anova: Two-Factor Without Replication ll z at nh z Variance 0.178 0.182 0.287 0.217 0.257 0.057 0.053 0.065 0.115 0.025 an Lu 2.88 3.24 3.9 3.6 m co l 14.4 16.2 19.5 18 15 Average 3.46 3.18 3.42 3.18 3.38 gm Sum 17.3 15.9 17.1 15.9 16.9 @ Count 5 5 oi THT 0mg/l THT 0,5 mg/l THT mg/l THT 1,5 mg/l THT 2mg/l m SUMMARY NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l n va ac th si ANOVA Source of Variation Rows SS 0.3616 df MS F 0.0904 1.609973286 Columns Error 3.5856 0.8984 16 0.8964 15.96438112 0.05615 Total 4.8456 24 P-value F crit 0.220173 3.006917 1.9209E05 3.006917 4.7.3 Chỉ tiêu chiều dài rễ Anova: Two-Factor Without Replication lu an n va Count 5 5 Sum 16.9 18 17.6 16.3 17.02 Average 3.38 3.6 3.52 3.26 3.404 5 5 15.1 16.6 19.2 17.5 17.42 3.02 3.32 3.84 3.5 3.484 df 4 16 MS F P-value F crit 0.086296 1.003488534 0.434525 3.00691728 0.445096 5.175775617 0.007189 3.00691728 0.085996 gh tn to SUMMARY NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l NAA 0,4 mg/l p ie THT 0mg/l THT 0,5 mg/l THT mg/l THT 1,5 mg/l THT 2mg/l Variance 0.032 0.25 0.117 0.158 0.23208 d oa nl w 0.037 0.082 0.093 0.095 0.12328 va an lu SS 0.345184 1.780384 1.375936 ll u nf oi m ANOVA Source of Variation Rows Columns Error 3.501504 24 z at nh Total z m co l gm @ an Lu n va ac th si 4.8 Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tới khả sinh trưởng phát triển lan Hài Giáp 4.8.1 Chỉ tiêu tỷ lệ sống Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 325.3 65.06 5.743 ct2 379.9 75.98 1.502 ct3 350.7 70.14 1.523 ct4 452.2 90.44 4.428 ct5 425.2 85.04 2.568 MS F lu ct1 an n va gh tn to p ie ANOVA SS df w Source of Variation oa 2176.9384 d lu 544.2346 172.6194 63.056 20 15 2.8660814 3.1528 2239.9944 24 ll oi m Total u nf va an Within Groups F crit 3.349E- nl Between Groups P-value tiêu tỷ lệ sống z at nh Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F > F crit nên giá thể có ảnh hưởng tới z m co l gm @ an Lu n va ac th si 4.8.2 Chỉ tiêu chiều cao Anova: Singl Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance lu an CT1 23.2 4.64 1.208 CT2 24.7 4.94 0.583 CT3 30.1 4.8 0.587 CT4 27.4 6.02 0.192 CT5 24 5.48 0.41 n va gh tn to ANOVA ie Source of SS p Variation d Within Groups oa nl w Between Groups Df MS 6.4456 11.92 20 F P-value F crit 1.6114 2.703691 0.05982 2.866081 0.596 va an lu Total 18.3656 24 ll u nf oi m tiêu chiều cao z at nh Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy F < F crit nên giá thể không ảnh hưởng tới z m co l gm @ an Lu n va ac th si