Đánh giá an toàn và tác dụng của chế phẩm premix had trên chuột nhắt trắng swiss albino

HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM HỒNG TRUNG HƯNG ĐÁNH GIÁ AN TOÀN VÀ TÁC DỤNG CỦA CHẾ PHẨM PREMIX HAD TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG SWISS ALBINO Ngành: Thú y Mã số: 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Bá Tiếp TS Đoàn Hữu Thiển NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2020 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu khoa học riêng Các số liệu, kết luận văn trung thực, xác chưa công bố công trình khác Mọi giúp đỡ thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 30 tháng năm 2020 Tác giả luận văn Hoàng Trung Hưng i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn tốt nghiệp, ngồi nỗ lực phấn đấu khơng ngừng thân, nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ thầy cô, bạn bè đồng nghiệp Trước tiên, xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam, Ban Chủ nhiệm khoa Thú y tồn thể thầy giáo giúp đỡ tơi q trình học tập Học Viện, trang bị cho kiến thức chuyên môn nghề nghiệp tư cách đạo đức làm tảng cho sống cơng việc Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc, kính trọng ngưỡng mộ đặc biệt tới: TS Nguyễn Bá Tiếp – Trưởng môn Giải phẫu – Tổ chức – Phôi thai, Khoa Thú y – Học viện Nông nghiệp Việt Nam TS Đoàn Hữu Thiển – Viện trưởng – Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin Sinh phẩm Y tế tận tình dạy, trực tiếp hướng dẫn ThS Nguyễn Chí Hiếu, anh (chị) đồng nghiệp khoa Động vật thực nghiệm thầy cô môn Giải phẫu – Tổ chức – Phôi thai dành thời gian q báu hỗ trợ tơi suốt q trình học giúp tơi hồn thành tốt đề tài Và cuối tơi xin gửi lời cảm ơn tới người thân gia đình, anh chị đồng nghiệp, bạn bè ln động viên, giúp đỡ để tơi hồn thành tốt trình học tập luận văn tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 30 tháng năm 2020 Tác giả luận văn Hoàng Trung Hưng ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract x Phần Mở đầu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 Ý nghĩa khoa học, ý nghĩa thực tiễn 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn 1.3.3 Đóng góp Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Lịch sử phát kháng sinh 2.2 Hiện tượng kháng kháng sinh 2.3 Các chế phẩm thay kháng sinh chăn nuôi 2.3.1 Probiotic 2.3.2 Thảo dược (plant extracts) 2.3.3 Tinh dầu (essential oil) 10 2.3.4 Axit hữu (organic acids) 11 2.4 Nghệ 13 2.4.1 Giới thiệu 13 2.4.2 Tác dụng curcumin 14 2.4.3 Cơ chế tác động curcumin 15 2.5 Diệp hạ châu 18 2.5.1 Giới thiệu 18 2.5.2 Tác dụng Diệp hạ châu 18 2.5.3 Cơ chế tác động 18 2.6 Atiso 19 2.6.1 Giới thiệu 19 iii 2.6.2 Tác dụng Atiso 19 2.6.3 Cơ chế tác động 20 2.7 Cấu tạo hệ tiêu hóa chuột 20 2.8 Cấu tạo gan 20 Phần Đối tượng - nội dung - phương pháp nghiên cứu 21 3.1 Đối tượng 21 3.1.1 Đối tượng 21 3.1.2 Địa điểm, thời gian 21 3.2 Nội dung nghiên cứu 21 3.3 Phương pháp nghiên cứu 21 3.3.1 Bố trí thí nghiệm 21 3.3.2 Phương pháp theo dõi tiêu an toàn 23 3.3.3 Phương pháp theo dõi lượng thức ăn thu nhận 23 3.3.4 Phương pháp mổ khám 24 3.3.5 Phương pháp làm tiêu vi thể 24 3.3.6 Đánh giá biến đổi vi thể: 25 3.3.7 Phương pháp phân tích số liệu 25 Phần Kết thảo luận 26 4.1 Ảnh hưởng chế phẩm Premix had đến tiêu an toàn chuột nhắt 26 4.1.1 Trạng thái thể chuột thí nghiệm 26 4.1.2 Tỷ lệ chết 28 4.1.3 Ảnh hưởng đến tăng trọng 28 4.2 Ảnh hưởng Premix had đến khả chuyển hóa thức ăn 30 4.2.1 Ảnh hưởng đến lượng thức ăn thu nhận 30 4.2.2 Ảnh hưởng đến hệ số chuyển hóa thức ăn 31 4.3 Ảnh hưởng chế phẩm Premix had đến gan ruột chuột thí nghiêm 32 4.3.1 Ảnh hưởng đến gan 32 4.3.2 Ảnh hưởng chế phẩm Premix had đến ruột non chuột thí nghiệm 39 Phần Kết luận kiến nghị 46 5.1 Kết luận 46 5.2 Kiến nghị 46 Tài liệu tham khảo 46 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Nghĩa tiếng anh Nghĩa tiếng việt AP activator protein Protetin hoạt hóa COX-2 cyclooxygenase-2 cyclooxygenase-2 IAP Intestinal alkaline phosphatase Enzyme phốt phát kiềm đường ruột LPS lipopolysaccharide lipopolysaccharide NF-κB nuclear factor-kappa B Yếu tố hạt nhân kappa B PGE2 prostaglandin E2 prostaglandin E2 TLR toll-like receptor Vị trí thụ cảm giống Toll v DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Các loài vi khuẩn sử dụng phổ biến chế phẩm sinh học Bảng 3.1 Bố trí thí nghiệm 23 Bảng 4.1 Lượng thu nhận thức ăn (g/con/ngày) 30 Bảng 4.2 Ảnh hưởng chế phẩm đến hệ số chuyển hóa thức ăn chuột thí nghiệm 31 Bảng 4.3 Khối lượng gan tỷ lệ với khối lượng thể 32 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Cơng thức cấu tạo curcumin 13 Hình 4.1 Chuột thí nghiệm bình thường 26 Hình 4.2 Khối lượng thể chuột thí nghiệm 28 Hình 4.3 Khu vực trung tâm tiểu thùy gan chuột số nhóm ĐC: Quanh tĩnh mạch tiểu thùy (CV) tế báo gan (mũi tên màu xanh), HE X40 34 Hình 4.4 Xung quanh gan lớp tổ chức liên hết (mũi tên xanh) bao quanh mô gan với tế bào gan (mũi tên vàng), tế bào Kuffer (mũi tên trắng) nhiều loại tế bào khác, HE X400 34 Hình 4.5 Khu vực trung tâm tiểu thùy gan chuột nhóm PH 5.0: Quanh tĩnh mạch tiểu thùy (CV) tế báo gan (mũi tên màu xanh) tế bào gan bị biến đổi (mũi tên màu vàng), HE X400 35 Hình 4.6 Mơ gan chuột thuộc số nhóm PH 5.0, tế bào gan bình thường (mũi tên xanh) xuất bên cạnh tế bào gan bị thối hóa (mũi tên đỏ) Nhiều tế bào lympho (mũi tên vàng) xuất sinusoid (mũi tên trắng), HE X 400 36 Hình 4.7 Mơ gan khơng chuột số nhóm bổ sung Doxycyclin, HE X100 38 Hình 4.8 Gan chuột số nhóm bổ sung Doxycycline, ngồi tế bào gan bình thường (mũi tên đỏ) cịn xuất tế bào bạch cầu trung tính (mũi tên xanh) tế bào lympho (mũi tên vàng) xuất sinusoid (mũi tên trắng) HE X 400 37 Hình 4.9 Gan chuột số nhóm bổ sung Doxycycline, ngồi tế bào gan bình thường (mũi tên xanh) tế bào Kupffer (mũi tên vàng) xuất tế bào bạch cầu lympho (mũi tên vàng) xuất sinusoid (mũi tên đen), Đặc biệt, xuất đám nhân tế bào gan bao xung quanh xoang (mũi tên đỏ), HE X 400 38 Hình 4.10 Vùng mơ gan chuột só thuộc nhóm bổ sung Doxycycline Một thành ống mật (A) dày lên; lịng ống mật khơng cịn trống rỗng; tĩnh mạch gian thùy dãn rộng với nhiều tế bào lympho (mũi tên đỏ) Vùng có tế bào gan nguyên vẹn (mũi tên xanh) xen kẽ với sinusoid (mũi tên trắng) có tế bào lympho bên (mũi tên vàng) 38 vii Hình 4.11 Tá tràng chuột nhóm đối chứng, số tế bào đỉnh lơng nhung (mũi tên đỏ) có xu hướng bong ra; tế bào biểu mơ ruột có nhân đáy (mũi tên xanh); tế bào hình đài (mũi tên đen) xen kẽ với tế bào biểu mô; phần thân lơng nhung có lympho (mũi tên vàng), HE X400 40 Hình 4.12 Khơng tràng chuột nhóm đối chứng A, lớp vòng; B, lớp dọc; C, lớp niêm; D, lớp đệm; E, lông nhung (thuộc biểu mô niêm mạc) HE X400 41 Hình 4.13 Khơng tràng chuột nhóm PH 2.5 A, lớp dọc; B, lớp vòng; C, lớp đệm HE X400 41 Hình 4.14 Hồi tràng chuột nhóm PH 1.25 A, lớp áo ngoài; B, lớp dọc; C, lớp vòng; D, lớp hạ niêm mạc; E, niêm; F, lớp đệm; G, biểu mô niêm mạc HE X400 42 Hình 4.15 Chiều cao chiều rộng lơng nhung biểu mơ tá tràng (* = sai khác có ý nghĩa với giá trị tương ứng nhóm cịn lại; p