(Luận văn) nghiên cứu tổng hợp dẫn xuất selen hóa từ pectin phân lập từ cây cúc quỳ tithonia diversifolia

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HOÁ HỌC  NGUYỄN TRUNG ANH lu an n va tn to TỪ PECTIN PHÂN LẬP TỪ CÂY CÚC QUỲ p ie gh NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP DẪN XUẤT SELEN HÓA d oa nl w TITHONIA DIVERSIFOLIA CỬ NHÂN HÓA HỌC nf va an lu KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu Đà Nẵng – 2018 n va ac th si ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HOÁ HỌC NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP DẪN XUẤT SELEN HÓA lu TỪ PECTIN PHÂN LẬP TỪ CÂY CÚC QUỲ an TITHONIA DIVERSIFOLIA n va tn to ie gh KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP p CỬ NHÂN HÓA HỌC d oa nl w lu LỚP : Nguyễn Trung Anh nf va an SVTH: TS Giang Thị Kim Liên z at nh oi lm ul GVHD: 14CHD z m co l gm @ an Lu Đà Nẵng – 2018 n va ac th si ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐH SƯ PHẠM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: NGUYỄN TRUNG ANH Lớp: 14CHD Tên đề tài lu Nghiên cứu tổng hợp dẫn xuất selen hóa từ pectin phân lập từ cúc quỳ an Tithonia Diversifolia va n Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị tn to - Nguyên liệu: Pectin phân lập từ cúc quỳ Tithonia Diversifolia ie gh - Dụng cụ, thiết bị: ống sinh hàn, bình cầu, cốc thủy tinh, bình định mức, ống p đong, pipet, giấy loc, máy bơm chân không, phễu, máy khuấy từ, … Nội dung nghiên cứu nl w oa - Tổng hợp dẫn xuất selen hóa từ pectin phân lập từ cúc quỳ Tithonia d Diversifolia đường hóa học lu an - Xác định phương án tối ưu (thay đổi khối lượng) để tổng hợp dẫn xuất selen hóa nf va - Nghiên cứu cấu trúc cúa chất hữu tổng hợp phương pháp phổ z at nh oi lm ul - Nghiên cứu hoạt tính chống oxi hóa khả gây độc tế bào dẫn xuất thu Giáo viên hướng dẫn: TS Giang Thị Kim Liên Ngày giao đề tài: 3/2017 z m co l gm @ Ngày hoàn thành: 3/2018 an Lu n va ac th si Chủ nhiệm khoa Giáo viên hướng dẫn PGS.TS Lê Tự Hải TS Giang Thị Kim Liên Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho khoa ngày tháng năm 2018 Kết điểm đánh giá lu an Ngày tháng năm 2018 n va CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài tốt nghiệp này, em xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến TS Giang Thị Kim Liên tận tình hướng dẫn, giúp đỡ , nhiệt tình tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian làm khóa luận Em xin cảm ơn chị học viên cao học Bùi Vũ Thục Uyên giúp đỡ em nhiều suốt trình thực nghiên cứu Em xin cảm ơn thầy cô quản lí phịng thí nghiệm khoa Hóa tạo điều kiện cho em sử dụng phịng thí nghiệm tham gia nghiên cứu Do lần đầu tham gia nghiên cứu thực nghiệm nên em tránh lu an khỏi thiếu sót, em mong nhận ý kiến đóng góp thầy để em va hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp n tn to Nghiên cứu tài trợ Quỹ phát triển khoa học công nghệ quốc Em xin chân thành cảm ơn! p ie gh gia (NAFOSTED) đề tài mã số 106-NN.02-2013.49 w oa nl Đà Nẵng, ngày 20 tháng năm 2018 d Sinh viên thực nf va an lu z at nh oi lm ul Nguyễn Trung Anh z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Đối tượng phạm vi nghiên cứu Mục đích nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu .2 4.1 Phương pháp nghiên cứu lí thuyết 4.2 Phương pháp thực nghiệm Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài .2 5.1 Ý nghĩa khoa học lu an 5.2 Ý nghĩa thực tiễn Bố cục đề tài n va 1.1 Cây cúc quỳ gh tn to CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU p ie 1.1.1 Đặc điểm chung 1.1.2 Nguồn gốc phân bố .5 oa nl w 1.1.3 Ứng dụng 1.2 Pectin d an lu 1.2.1 Nguồn gốc nf va 1.2.2 Cấu tạo .7 lm ul 1.2.3 Tính chất đặc trưng 1.2.4 Ứng dụng 11 z at nh oi 1.3 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 12 1.3.1 Ngoài nước 12 z 1.3.2 Trong nước 13 gm @ CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 l 2.1 Nguyên liệu 14 m co 2.2 Hóa chất thiết bị 14 2.2.1 Hóa chất 14 an Lu 2.2.2 Thiết bị, dụng cụ 14 n va ac th si 2.3 Các phương pháp nghiên cứu 15 2.3.1 Phương pháp tổng hợp hợp chất hữu 15 2.3.2 Phương pháp tinh chế 15 2.3.3 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất hữu .16 2.3.4 Phương pháp khảo sát hoạt tính gây độc tế bào .21 2.4 Sơ đồ nghiên cứu 23 2.5 Quy trình tổng hợp .24 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 28 3.1 Cấu trúc dẫn xuất Selen hóa 28 3.1.1 Sắc kí thẩm thấu gel GPC dẫn xuất selen hóa 28 lu an 3.1.2 Phổ hồng ngoại dẫn xuất Selen hóa 30 n va 3.1.3 Phổ khối lượng ESI-MS dẫn xuất selen hóa 32 3.3 Xác định khả gây độc tế bào ung thư pectin dẫn xuất Selen hóa 36 p ie gh tn to 3.2 Hoạt tính chống oxy hóa pectin dẫn xuất Selen hóa 34 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 nl w Kết luận 37 d oa Kiến nghị 37 nf va an lu TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT lu an : Phổ hấp thu nguyên tử (Atomic Absorption Spectrometry) ESI : Phương pháp phun mù điện tử (Electron Spray Ionization) FT-IR : Phổ kế hồng ngoại GPC : Sắc ký gel (Gel Permeation Chromatography) Hela : Ung thư cổ tử cung HepG2 : Ung thư gan IC50 : Nồng độ ức chế 50% (Inhibitory Concentration 50) IR : Phổ hồng ngoại (Infrared Spectrometry) MCF7 : Ung thư vú MKN7 : Tế bào ung thư dày MS : Phổ khối lượng (Mass Spectrometry) NCI : Viện Ung thư Quốc Gia Hoa Kỳ (Nation Cancer Institue) n va AAS tn to : Mật độ quang học (Optical Density) SRB : Sulforhodamine B TCA : Axit trichloroaxetic p ie gh OD : Pectin phân lập từ cúc quỳ Tithonia Diversifolia oa nl : Dẫn xuất pectin selen hóa d TDP-Se w TDP nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Tên bảng bảng Trang 1.1 Tác dụng DE lên tạo gel 10 3.1 Khối lượng phân tử pectin dẫn suất Selen hóa 28 3.2 Các phân mảnh phổ khối ESI-MS mẫu 33 pectin pectin Selen hóa lu Hoạt tính gây độc tế bào ung thư MKN7 mẫu TDP an 3.3 36 n va TDP-Se p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu Tên hình Trang hình Cây hoa cúc quỳ 1.2 D – Galacturonic acid 1.3 Đơn vị cấu trúc pectin 1.4 Mơ hình cấu tạo pectin 1.5 Cơng thức HM pectin 1.6 Công thức LM pectin Pectin phân lập từ cúc quỳ Tithonia Diversifolia 14 Qúa trình thẩm tách 16 lu 1.1 an n va gh tn to 2.1 p ie nl w 2.2 2.3 Sơ đồ minh họa họat động hệ ESI-MS 2.4 Mơ hình hoạt động máy đo quang phổ FT-IR 2.5 Mơ hình máy đo GPC 2.6 Mơ hình máy quang phổ AAS 20 2.7 Quy trình tổng hợp dẫn xuất Selen hóa từ pectin 23 2.8 Bộ thiết bị dùng để phân tán pectin 2.9 Hỗn hợp thu sau 16 đun hồi lưu 2.10 Dung dịch (pH=7) tạo kết tủa EtOH 96% d oa 16 lu nf va an 18 19 z at nh oi lm ul z gm @ 24 co l 25 m 25 an Lu n va ac th si 26 Đem li tâm lấy phần bã rửa với C2H5OH 96% Tiếp theo, hòa tan nước thẩm tách dung dịch màng thẩm tách MWCO 14000 dòng nước chảy vòng 48 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w Hình 2.11 Bắt đầu thẩm tách dung dịch vòng 48 ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Hình 2.12 Hiện tưởng sau vài thẩm tách n va ac th si 27 Sau selen hóa thu ba mẫu dẫn xuất selen hóa TDP – Se01 (500mg) , TDP – Se02 (300mg) TDP – Se03 (700mg) lu an n va p ie gh tn to nl w d oa Hình 2.13 Các dẫn xuất selen hóa ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 28 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Cấu trúc dẫn xuất selen hóa 3.1.1 Sắc kí thẩm thấu gel GPC dẫn xuất selen hóa Để chứng minh phản ứng tổng hợp xảy ra, cần xác định cấu trúc số thông số sản phẩm thơng qua sắc kí GPC quang phổ AAS Được đặc trưng khối lượng phân tử trung bình khối lượng (Mw), khối lượng phân tử trung bình số(Mn), khối lượng phân tử trung bình z(Mz), độ phân tán (PDI, Mw/Mn) cho tất mẫu trình bày Bảng 3.1 Kết cho thấy dẫn xuất pectin selen hóa có hàm lượng Se trọng lượng phân tử khác thu cách thay đổi điều kiện phản ứng lu an Bảng 3.1 Khối lượng phân tử pectin dẫn xuất selen hóa n va Hàm lượng tn to Mẫu Mw x 104 Mn x 104 Mz x 104 Mw/Mn 1,39 1,15 1,74 1,21 1887 2,47 1,90 3,23 1,30 2,45 1,92 3,20 1,28 1,87 3,03 1,25 oa nl w Pectin z at nh p ie gh Se (μg/g) d Pectin Selen hóa u nf va 1695 ll Pectin Selen hóa an lu TDP – Se01 1203 2,34 z @ TDP – Se03 oi Pectin Selen hóa m TDP – Se02 l gm Giá trị Mw tăng -OH mà thay HSeO− [10] Vì vậy, giả định Mw mẫu pectin selen hóa cao m co diện nhóm chức chứa selen thêm vào thay nhóm hydroxyl an Lu pectin n va ac th si 29 lu an n va ie gh tn to p Hình 3.1 Sắc kí đồ thẩm thấu gel - GPC mẫu Pectin d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Hình 3.2 Sắc kí đồ thẩm thấu gel - GPC mẫu dẫn xuất Selen hóa n va ac th si 30 3.1.2 Phổ hồng ngoại dẫn xuất Selen hóa lu an n va p ie gh tn to Hình 3.3 Phổ FT-IR TDP (được kế thừa từ nghiên cứu trước) d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Hình 3.4 Phổ FT-IR dẫn xuất pectin selen hóa TDP-Se01 n va ac th si 31 lu an n va tn to p ie gh Hình 3.5 Phổ FT-IR dẫn xuất pectin selen hóa TDP-Se02 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Hình 3.6 Phổ FT-IR dẫn xuất pectin selen hóa TDP-Se03 n va ac th si 32 Dựa vào phổ FT-IR dẫn xuất pectin selen hóa so sánh với phổ FT-IR pectin (kế thừa nghiên cứu trước), nhận thấy chúng tương đồng với Đỉnh khoảng 3400 2930 cm-1 TDP Se-TDP tương ứng hấp thụ C-H dao động kéo dài O-H Các dao động thuộc vùng từ 2200 đến 950 cm-1, coi "dấu vân tay" cacbohydrat, đặc trưng cho loại polysaccharide [12] Các dải 1722 1651 cm-1 quy kết tương ứng với nhóm cacbonyl (C = O) kéo giãn rung động nhóm methyl este hóa khơng este hóa carboxyl pectin Đặc biệt, so sánh phổ hồng ngoại pectin pectin selen hóa cho thấy, phổ dẫn xuất selen hóa xuất thêm dải hấp thụ 640 cm-1, vạch hấp thụ không xuất phổ TDP Theo nghiên cứu trước lu an [13], dải đặc trưng 600 - 700 cm-1 biểu dao động kéo dài Se-O-C bất n va đối xứng Điều chứng tỏ dẫn xuất pectin selen hóa tổng hợp thành tn to cơng theo quy trình Như biết, phổ khối lượng ESI-MS công cụ nghiên cứu p ie gh 3.1.3 Phổ khối lượng ESI-MS dẫn xuất selen hóa w cấu trúc hữu hiệu hợp chất hữu nói chung polysaccharide nói oa nl riêng Con đường phân mảnh để tạo nên ion q trình ion hóa d phân tử polysaccharide dựa phân ly liên kết C-O đơn vị lu an saccharide chuỗi phân tử [11] u nf va Trong phổ MS TDP đỉnh (đỉnh có cường độ cao nhất) m/z 177 đỉnh m/z 189 axit galacturonic thành phần phân tử ll oi m TDP Thêm vào đó, đỉnh 358 tồn đơn vị rhamnose galacturonic z at nh liên kết phân tử.Trong phổ này, đỉnh m/z 475 có cường độ thấp gán cho phân mảnh [(GalA - OH + Na) RhaAra] + cho thấy thay arabinose z chuỗi bên trái xương sống rhamnogalacturonan @ gm Tuy nhiên, phổ MS TDP-Se, đỉnh m/z 475 có cường độ cao l góp mặt đáng kể ion [(GalA-O) (NaSeO3) Rha + H+] Bên cạnh đó, m co phổ Se-TDP xuất số ion 521, 645, điều không an Lu chứng minh thành cơng q trình Selenyl hóa mà cịn khẳng định mối liên kết homogalacturan rhamnogalacturonan TDP (Bảng 3.2.) n va ac th si 33 Bảng 3.2 Các phân mảnh phổ khối ESI-MS mẫu pectin pectin selen hóa m/z Phân mảnh TDP TDP- TDP- TDP- Se1 Se2 Se3 [GalA – OH]+ x x x x 189 [GalA –CO + Na]+ x x x x 340 [GalARha ]+ x x x 358 [GalARha + H2O]+ x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x lu 177 an n va p ie gh tn to oa nl w 475 [(GalA – O –H+ +Na+)RhaAra ]+ d [{(GalA–O )(NaSeO3)} Rha +H+ ]+ an lu [GalA{(GalA–OH) (NaSeO3)} + ll u nf H2O]+ va 521 [GalAGalARha + H2O]+ x oi z at nh [GalA{(GalA-OH)(NaSeO3)}Rha – l gm @ Na+ + H3O]+ z 645 m 534 thay thành công TDP q trình selenyl hóa m co Nói tóm lại, kết chứng minh nhóm selenyl an Lu n va ac th si 34 lu an n va gh tn to p ie Hình 3.7 Phổ ESI-MS mẫu TDP d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z l gm @ Hoạt tính chống oxy hóa pectin dẫn xuất selen hóa an Lu 3.2 m co Hình 3.8 Phổ ESI-MS mẫu TDP-Se01 n va ac th si 35 Đồ thị biểu diễn khả quét gốc hydroxyl tự pectin từ cúcquỳ dẫn xuất Selen hóa trình bày hình 3.9 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w an lu u nf va Hình 3.9 Khả quét gốc hydroxyl tự pectin dẫn xuất Selen hóa ll oi m Từ đồ thị cho thấy, khoảng nồng độ nghiên cứu từ 0,01 – mg/mL, z at nh nồng độ pectin TDP dẫn xuất TDP-Se tăng, khả quét gốc tự pectin dẫn xuất tăng dần Hoạt tính dẫn quét gốc hydroxyl mẫu TDP-Se01 z cao so với pectin va dẫn xuất Tại nồng độ nghiên cứu mg/mL, khả @ gm quét gốc hydroxyl tự mẫu TDP-Se01, TDP-Se02, TDP-Se03 lần l lượt 65,7, 59,5 55,3% khả quét gốc tự pectin nồng an Lu rệt hoạt tính chống oxy hóa pectin m co độ đạt 42,8% Kết cho thấy q trình selen hóa giúp tăng cường rõ n va ac th si 36 Xác định khả gây độc tế bào ung thư pectin dẫn xuất Selen 3.3 hóa Hoạt tính gây độc tế bào ung thư mẫu TDP-Se TDP khảo sát thử nghiệm SBR dịng tế bào MKN7 Kết trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư MKN7 mẫu TDP dẫn xuất TDP-Se TDP- TDP- TDP- (µg/ml) Se1 Se2 Se3 89,94 80,96 77,65 22,13 10 96,47 64.98 61,95 59,67 10,79 90,28 51,15 47,85 43,76 3,7 0,4 55,11 21,12 20,09 18,87 -2,5 0,08 19,79 83,59 ± 92,58 ± 0,10 0,05 >100 IC50 0,35 ± 0,03 lu Nồng độ an 200 n va Ellipticine (µg/ml) ie gh tn to 100 Nồng độ TDP p 50 oa nl w 20 72.93 ± d lu IC50 u nf va an 0,07 ll Kết cho thấy TPD-Se ức chế gia tăng tế bào ung thư oi m dày người MKN7, tỷ lệ ức chế Se-TDP tăng đáng kể tăng liều tỷ lệ ức z at nh chế Se-TDP cao hẳn so với TDP Ngồi ra, TDP với liều thấp tạm thời gây tăng sinh tế bào Giá trị IC50 TDP-Se01 (72.93 μg/mL), TDP- z Se02 (83.59 μg/mL), TDP-Se03 (92.58 μg/mL) thu từ tỷ lệ ức chế Điều @ gm gợi ý seleno-polysaccharide thu từ selenyl hóa tăng lên đáng xuất có hoạt tính chống ung thư m co l kể độc tế bào tế bào khối u, hứa hẹn giải pháp tạo dẫn an Lu n va ac th si 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua trình nghiên cứu, thu kết sau đây: Tổng hợp dẫn xuất selen hóa từ pectin thơng qua đường hóa học thấy điều kiện tối ưu (khối lượng) để tổng hợp dẫn xuất selen hóa 700C lượng pectin ban đầu 500mg Xác định cấu trúc pectin selen hóa phương pháp phổ IR với dải phổ có bước sóng 700 – 600 cm-1 đặc trưng cho dao động kéo dài Se – O – C bất đối xứng; phương pháp GPC xác định thông số Mw, Mn, Mz Từ lu đó, so sánh cấu trúc dẫn xuất pectin selen hóa với pectin chứng an va minh thành công trình selenyl hóa từ pectin n Hoạt tính sinh học pectin selen hóa nghiên cứu so sánh với gh tn to pectin Khả quét gốc hydroxyl tự mẫu dẫn xuất selen hóa 65,7% (TDP-Se01), 59,5 (TDP-Se02) 55,3%( TDP-Se03); Giá trị IC50 ie p dẫn xuất TDP-Se01 (72.93 μg/mL), TDP-Se02 (83.59 μg/mL), TDP-Se03 (92.58 nl w μg/mL) thu từ tỷ lệ ức chế oa Kết nghiên cứu hoạt tính cho thấy nhóm selen thêm phân tử d pectin làm tăng hoạt tính chống oxi hóa hoạt tính gây độc tế bào ung lu va an thư dòng MKN7 Kết hứa hẹn q trình selenyl hóa giải pháp hiệu oi m Kiến nghị ll u nf nâng cao hoạt tính chống ung thư pectin z at nh Do thời gian nghiên cứu có hạn, thông qua kết đề tài tiếp tục nghiên cứu hồn chỉnh quy trình bán tổng hợp dẫn suất selen hóa để nâng cao hiệu suất z tiến hành quy mô lớn, tiếp tục khảo sát điều kiện khác (như nhiệt độ) ảnh @ gm hưởng đến trình tổng hợp phản ứng hóa học nghiên cứu m co l sâu đến hoạt tính sinh học dẫn xuất selen hóa phục vụ Y học an Lu n va ac th si 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT [1] Lê Hoàng Duy, Bài giảng Các phương pháp phổ nghiệm xác định hợp chất hữu [2] Nguyễn Thị Hiếu, Đồ án chuyên môn: Nghiên cứu Pectin ứng dụng công nghệ thực phẩm [3] Nguyễn Thị Thanh Ngọc, Chiết xuất pectin từ phế Bưởi [4] Hồ Viết Quý , Các phương pháp phân tích đại ứng dụng hóa học, NXB Đại học Quốc gia, Hà Nội, 1998 [5] Trần Minh Trang, Phạm Tiến Dũng, Lê Quốc Phong, Đinh Minh Hiệp, Nghiên lu an cứu khả hấp thu Selenium nấm Ophiocordyceps sinensis ni n va cấy lỏng, Tạp chí phát triển KH&CN, Tập 19, Số T6, 53-60, 2016 tn to [6] Nguyễn Đình Triệu, Các phương pháp phân tích vật lý hóa lý, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, 2001 gh Lê Ngọc Tú (chủ biên), Hóa sinh công nghiệp, NXB Khoa học kỹ thuật Hà p ie [7] w Nội, 2002 [8] oa nl TIẾNG ANH Bo Yuan, Xu-qin Yang, Meng Kou, Chang-yan Lu, Yuan-yuan Wang, Jun d an lu Peng, Ping Chen, and Ji-hong Jiang, Selenylation of Polysaccharide from the va Sweet Potato and Evaluation of Antioxidant, Antitumor, and Antidiabetic Ji Y-B, Dong F, Lang L, et al, Optimization of Synthesis, Characterization and Cytotoxic Activity of oi m [9] ll u nf Activities, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2017 Seleno-Capparis spionosa L Polysaccharide, z at nh International Journal of Molecular Sciences, 2012 z [10] Lee J-H, Lee Y-K, Chang YH., Effects of Selenylation modification on @ structural and antioxidant properties of pectic polysaccharides extracted from gm l Ulmus pumila, L International Journal of Biological Macromolecules, 2017 m co [11] Kailemia MJ, Ruhaak LR, Lebrilla CB, Amster IJ., Oligosaccharide Analysis By Mass Spectrometry: A Review Of Recent Developments, Analytical an Lu chemistry, 2014 n va ac th si 39 [12] Kyomugasho C, Christiaens S, Shpigelman A, Van Loey AM, Hendrickx ME., FT-IR spectroscopy, a reliable method for routine analysis of the degree of methylesterification of pectin in different fruit- and vegetable-based matrices, Food Chemistry, 2015 [13] Qin T, Chen J, Wang D, Hu Y, Wang M, Zhang J, Nguyen TL, Liu C, Liu X, Optimization of Selenylation conditions for Chinese angelica polysaccharide based ống nghiệm immune-enhancing activity, Carbohydrate Polymers, 2013 [14] Yuan B, Yang X-q, Kou M, Lu C-y, Wang Y-y, Peng J, Chen P, Jiang J-h., Selenylation of Polysaccharide from the Sweet Potato and Evaluation of Antioxidant, Antitumor, and Antidiabetic Activities, Journal of Agricultural lu an and Food Chemistry, 2017 va [15] Wang J, Zhao B, Wang X, Yao J, Zhang J., Synthesis of Selenium-containing n gh tn to polysaccharides and evaluation of antioxidant activity in vitro, International Journal of Biological Macromolecules, 2012 p ie [16] Zhen-Yuan Zhu, Synthesis, characterization and antioxidant activity of w selenium polysaccharide from Cordyceps militaris oa nl WEBSITES d [17] https://baigiang.violet.vn/present/show/entry_id/6851905 lu an [18] http://biomedia.vn/review/phuong-phap-khoi-pho-ms.html 2.3.3 u nf va [19] http://dieuduongchuyennghiep.vn/News/Default.aspx?Mod=ViewNews&Cate ID=3&NewsID=10192 ll oi m [20] http://doan.edu.vn/do-an/gioi-thieu-ve-pectin-25557/ z at nh [21] https://en.wikipedia.org/wiki/Pectin [22] https://en.wikipedia.org/wiki/Tithonia_diversifolia z [23] https://glossary.periodni.com/glossary.php?en=dialysis [24] https://hoadepviet.com/hoa-da-quy-cach-trong-va-cham-soc-hoa-da-quy/ gm @ l [25] http://hoatetdep.com/net-dep-cua-loai-hoa-da-quy/ m co [26] http://hungthinhvietnam.com/news/26-pectin-va-cac-ung-dung.html [27] http://nguyenquan.vn/tac-dung-lam-dep-da-cua-bot-pectin-chiet-xuat-tu-qua- an Lu tao/ n va ac th si 40 [28] http://www.ippa.info/types_of_pectin.htm 1.2.3 [29] http://suckhoenamviet.com/co-che-tac-dung-va-duoc-tinh-cua-pectin [30] http://thanhtrangpharma.com/selen-co-vai-tro-gi-doi-voi-co-the-connguoi.html [31] https://toc.123doc.org/document/374328-chuong-2-luoc-khao-tai-lieu.htm [32] https:// vi.wikipedia.org/wiki/Dã_quỳ [33] http://www.worldagroforestry.org/treedb/AFTPDFS/Tithonia_diversifolia.PD F lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si