(Luận văn) khảo sát ảnh hưởng của ph đến sự sinh trưởng và sinh lý của tảo silic entomoneis sp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Nguyễn Huỳnh Như lu an n va gh tn to KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA pH ĐẾN SỰ p ie SINH TRƯỞNG VÀ SINH LÝ CỦA TẢO SILIC d oa nl w Entomoneis sp ll u nf va an lu m oi LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC z at nh z m co l gm @ an Lu Thành phố Hồ Chí Minh - 2019 n va ac th si BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Nguyễn Huỳnh Như lu an va n KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA pH ĐẾN SỰ tn to ie gh SINH TRƯỞNG VÀ SINH LÝ CỦA TẢO SILIC p Entomoneis sp oa nl w d Chuyên ngành: Sinh thái học ll u nf va an lu Mã số: 8420120 oi m z at nh LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC z @ gm NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: m co l TS NGUYỄN ĐỨC HƯNG an Lu Thành phố Hồ Chí Minh - 2019 n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài nghiên cứu thân thực hiện, số liệu, kết trình bày luận văn hồn tồn xác, trung thực chưa có cơng bố Tơi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm kết nêu luận văn Tác giả Nguyễn Huỳnh Như lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si LỜI CẢM ƠN Để có kết ngày hôm nay, trước tiên xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban chủ nhiệm Khoa quý thầy cô Khoa Sinh học - Trường Đại học Sư phạm Tp Hồ Chí Minh giúp đỡ tơi hồn thành chương trình học thực cơng tác nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến TS Nguyễn Đức Hưng - người tận tình hướng dẫn tơi suốt q trình thực đề tài Đồng thời, xin chân thành cảm ơn đến em Nguyễn Văn Duy em sinh viên phòng thí nghiệm Sinh học - Khoa Sư phạm Khoa học Tự nhiên Trường Đại học Sài Gòn hết lòng giúp đỡ chuẩn bị dụng cụ thí nghiệm cho lu an thực đề tài n va Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới tất người thân gia tn to đình, bạn bè lớp giúp đỡ, động viên mặt vật chất tinh thần p ie gh để tơi hồn thành đề tài w TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 d oa nl HỌC VIÊN u nf va an lu Nguyễn Huỳnh Như ll oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục từ viết tắt Danh mục hình MỞ ĐẦU .1 Chương TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan tảo silic lu 1.1.1 Đặc điểm hình thái cấu tạo tế bào .4 an va 1.1.2 Đặc điểm sinh trưởng n 1.1.3 Các hình thức sinh sản 1.1.5 Tính sinh thái số tảo silic tiêu biểu .10 ie gh tn to 1.1.4 Sự thích ứng phù du tảo silic 10 p 1.1.6 Vai trò tảo silic .11 w 1.2 Một số yếu tố môi trường ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển tảo silic .12 oa nl 1.2.1 Ánh sáng .12 d 1.2.2 Nhiệt độ .12 an lu 1.2.3 Thành phần dinh dưỡng 13 u nf va 1.2.4 Độ mặn 14 1.2.5 Yếu tố pH 15 ll m 1.3 Tổng quan chi tảo Entomoneis 16 oi 1.3.1 Vị trí phân loại chi tảo Entomoneis 16 z at nh 1.3.2 Lược sử nghiên cứu vi tảo 17 1.3.3 Ứng dụng thực tiễn số loài thuộc chi tảo Entomoneis 20 z @ Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 gm 2.1 Thời gian, địa điểm vật liệu nghiên cứu 21 m co l 2.1.1 Thời gian nghiên cứu 21 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 21 an Lu 2.1.3 Vật liệu nghiên cứu .21 2.2 Phương pháp nghiên cứu 22 n va ac th si 2.2.1 Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 22 2.2.2 Chuẩn bị dụng cụ thí nghiệm, mơi trường nguồn giống 22 2.2.3 Định danh phân tử tảo Entomoneis sp mã vạch ADN 23 2.2.4 Xác định mật độ tế bào tảo silic Entomoneis sp 26 2.2.5 Xác định thời gian hệ tốc độ tăng trưởng 28 2.2.6 Đo hiệu suất lượng tử tối đa quang hệ II 29 2.2.7 Xác định pH dịch nuôi tảo 30 2.2.8 Bố trí thí nghiệm 30 2.2.9 Phương pháp xử lý số liệu 31 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 lu 3.1 Kết phân tích trình tự vùng gen rbcL-3P Entomoneis sp 32 an 3.1.1 Kết tách chiết ADN tổng số khuếch đại vùng gen rbcL-3P va n kĩ thuật PCR .32 3.1.3 Xây dựng phát sinh chủng lồi trình tự rbcL-3P .35 gh tn to 3.1.2 Kết phân tích trình tự sau hiệu chỉnh .33 p ie 3.2 Ảnh hưởng mật độ ban đầu đến sinh trưởng tảo silic Entomoneis sp môi trường F/2 36 nl w 3.2.1 Đường cong tăng trưởng tảo silic Entomoneis sp 36 d oa 3.2.2 Màu sắc dịch nuôi tảo silic Entomoneis sp môi trường F/2 .39 an lu 3.2.3 Tốc độ tăng trưởng, suất sinh khối Entomoneis sp 40 va 3.3 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng sinh lý Entomoneis sp 42 u nf 3.3.1 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng Entomoneis sp 42 ll 3.3.2 Sự biến thiên pH qua ngày với giá trị pH ban đầu khác 48 m oi 3.3.3 Ảnh hưởng pH đến hiệu suất lượng tử tối đa Entomoneis sp 49 z at nh KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .52 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 z m co l gm @ PHỤ LỤC an Lu n va ac th si DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT lu an Ký hiệu BM Biomass productivity Năng suất sinh khối bp Base pair Cặp Base Dd Division per day Fv/ Fm N OD Optical density Mật độ quang PSII Photosystem II Quang hệ II SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn Scanning Electron Microscopy Kính hiển vi điện tử quét Doubling time Thời gian hệ Tiếng Anh Tiếng Việt Thời gian phân chia ngày Variable chlorophyll fluorescence/ Hiệu suất lượng tử tối đa maximal chlorophyll fluorescence quang hệ II Ngày n va STT gh tn to SEM td 12 μ Tế bào an lu tb d 11 oa nl w 10 p ie Tốc độ tăng trưởng ll u nf va Growth rate oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc vỏ tảo silic .4 Hình 1.2 Các pha tăng trưởng tảo .6 Hình 1.3 Sơ đồ biểu diễn thay đổi huỳnh quang Hình 1.4 Vịng đời tảo silic với sinh sản vơ tính hữu tính .9 Hình 2.1 Hình thái tảo Entomoneis sp., thước tỉ lệ ứng với 10 μm 21 Hình 2.2 Sơ đồ mô tả bước nghiên cứu đề tài 22 Hình 2.3 Thiết bị thu sinh khối tảo 23 Hình 2.4 Sơ đồ thiết kế mồi để khuếch đại trình tự gen rbcL-3P .24 Hình 2.5 Thiết bị buồng đếm hồng cầu xác định mật độ tảo 27 lu an Hình 2.6 Mối tương quan tuyến tính mật độ tế bào độ hấp thụ 28 n va Hình 2.7 Thiết bị đo hiệu suất lượng tử tối đa quang hệ II 30 to Hình 2.8 Thiết bị đo pH 30 gh tn Hình 3.1 Kết kiểm tra độ tinh ADN Nanodrop 32 p ie Hình.3.2 Kết điện di sản phẩm PCR vùng rbcL-3P tảo silic Entomoneis sp (1) thang ADN chuẩn (2) 33 nl w Hình 3.3 Kết tra cứu kĩ thuật BLAST GenBank 34 d oa Hình 3.4 Mơ hình phát sinh Entomoneis sp phân tích trình tự an lu vùng gen rbcL-3P nghiên cứu 36 Hình 3.5 Đường cong tăng trưởng Entomoneis sp mật độ ban đầu va u nf khác 38 ll Hình 3.6 Màu sắc dịch nuôi Entomoneis sp từ ngày đến ngày 14 40 m oi Hình 3.7 Màu sắc dịch nuôi qua ngày ảnh hưởng mức pH z at nh khác (từ trái sang phải mức pH tăng dần từ 6,0 - 8,5) 44 Hình 3.8 Đường cong sinh trưởng tảo Entomoneis sp với giá trị pH z gm @ khác 45 Hình 3.9 Tốc độ tăng trưởng suất sinh khối Entomoneis sp l m co giá trị pH ban đầu khác .47 Hình 3.10 Giá trị pH thay đổi qua ngày 49 an Lu Hình 3.11 Chỉ số Fv/ Fm thay đổi qua ngày 51 n va ac th si DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Danh sách chất dinh dưỡng cần thiết cấu tạo nên tảo silic 14 Bảng 2.1 Các thành phần có phản ứng khuếch đại trình tự rbcL-3P 25 Bảng 2.2 Chu kì nhiệt khuếch đại trình tự rbcL-3P 25 Bảng 3.1 Kết BLAST vùng gen rbcL-3P mẫu tương đồng sở liệu ngân hàng gen quốc gia Hoa Kì 35 Bảng 3.2 Mật độ tế bào tảo silic Entomoneis sp ảnh hưởng mật độ ban đầu khác .37 Bảng 3.3 Mật độ tế bào cực đại tảo silic Entomoneis sp môi trường DAM F/2 .39 lu an Bảng 3.4 Tốc độ tăng trưởng, thời gian phân chia ngày, thời gian hệ n va suất sinh khối Entomoneis sp mật độ khác .40 tn to Bảng 3.5 Mật độ tế bào Entomoneis sp với giá trị pH khác 42 gh Bảng 3.6 Tốc độ tăng trưởng, suất sinh khối thời gian phân chia p ie tảo silic Entomoneis sp tác động pH khác 46 w Bảng 3.7 Giá trị pH biến thiên qua ngày 48 d oa nl Bảng 3.8 Chỉ số Fv/ Fm thay đổi qua ngày với pH ban đầu khác .50 ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Vi tảo biển loài tảo đơn bào sống trơi nước, có khả quang hợp tạo chất hữu Vì vậy, vi tảo xem mắt xích quan trọng chuỗi thức ăn tự nhiên giữ vai trò hệ thống lọc sinh học giúp ổn định thông số môi trường Trong nuôi trồng thủy sản, vi tảo vô quan trọng nguồn thức ăn cho động vật phù du, loại ấu trùng, động vật thân mềm ăn lọc, cá bột số loài cá trưởng thành Nếu thiếu vi tảo, nguồn lợi hải sản khơng thể tồn khơng có nguồn thức ăn hữu ban đầu [1] Ngồi ra, cịn góp phần bảo vệ mơi lu an trường ni thủy sản cách tiêu thụ bớt lượng muối khoáng dư thừa n va nuôi trồng công nghiệp để tạo nguồn thức ăn nuôi tôm hay thuốc bổ trợ giàu tn to protein, vitamine, carotenoid, astaxanthine, acid béo khơng bão hịa vi khống gh dùng cho người,… p ie Trong số loài vi tảo biển, tảo silic chiếm khoảng 60% - 70% thành phần w lồi sinh khối [1] Vì vậy, phân bố tảo silic thường phản ánh đầy đủ xu oa nl chung toàn sinh vật phù du Vỏ silic tảo bền không bị phân hủy d sau tảo chết, số lượng lớn mảnh vỏ dần tích lũy đáy thủy vực tạo an lu thành lớp diatomid dày Diatomid loại nguyên liệu xốp, nhẹ, mịn khai thác u nf va sử dụng vận chuyển chất lỏng nitroglycerin, làm vật liệu lọc, xử lý ô nhiễm môi trường, vật liệu cách nhiệt, làm chất phụ gia sản xuất kem đánh răng, xi ll oi m măng, phân bón,…[2] Các tầng diatomid cịn sở để xác định tuổi lớp địa z at nh tầng lịch sử vỏ Trái đất từ cuối kỷ Jura Ngày nay, vật liệu từ tảo silic cung cấp nhiều mặt hàng khác từ sơn móng tay, vật liệu xây dựng, nhiên z liệu sinh học kiểm soát dịch hại @ gm Ngồi ra, tảo silic cịn nhiều ứng dụng khác khám phá dầu, kiểm tra pháp l y, thị mơi trường, tạo mơ hình sinh học, kiểm tra độc tính dinh dưỡng m co hệ sinh thái nước [3] Đặc biệt, loài chi tảo Entomoneis có giá trị kinh an Lu tế lớn, ứng dụng ngành dược phẩm, thực phẩm chứng minh có nguồn acid eicosapentaenoic (EPA) acid arachidonic (ARA, 20:4ω6) cao [4] Vì vậy, chi n va ac th si PL Phụ lục 2: Các loại hóa chất sử dụng để pha mơi trường F/2 + Pha chế dung dịch gốc khoáng đa lượng Hoá chất Khối lượng cân/50 mL nước Nồng độ dung dịch gốc cất NaNO3 75,0 g/L 3,75 g NaH2PO4.H2O 5,0 g/L 0,25 g Na2SiO3.9H2O 30,0 g/L 1,50 g + Pha chế dung dịch gốc sơ cấp khoáng vi lượng Hoá chất Khối lượng cân/50 mL nước cấp cất FeCl3.6H2O - - Na2EDTA.2H2O - - lu Nồng độ dung dịch gốc sơ an n va tn to 9,000 g 22,0 g/L 1,100 g CoCl2.6H2O 10,0 g/L 0,500 g CuSO4.5H2O 9,8 g/L 0,490 g 6,3 g/L 0,315 g gh 180,0 g/L ie MnCl2.4H2O ZnSO4.7H2O p d oa nl w Na2MoO4.2H2O lu 1,17 x10-2 M (3,15 g/L) 0,1575 g oi z at nh Na2EDTA.2H2O Lượng lấy/50 mL dd m FeCl3.6H2O Nồng độ mong muốn ll cấp u nf Hoá chất/Dd gốc sơ va an + Pha chế dung dịch gốc khoáng vi lượng 1,17 x10-2 M (4,36 g/L) Ddgsc CuSO4.5H2O 3,93 x10-5 M Ddgsc Na2MoO4.2H2O 2,60 x10-5 M 50 µL 50 µL an Lu 4,20 x10-5 M m co Ddgsc CoCl2.6H2O 50 µL l 7,65 x10-5 M gm Ddgsc ZnSO4.7H2O 50 µL @ 9,10 x10-4 M z Ddgsc MnCl2.4H2O 0,218 g 50 µL n va ac th si PL + Pha chế dung dịch gốc sơ cấp vitamin Hoá chất Nồng độ dd gốc Khối lượng cân/50 mL sơ cấp nước cất - - Thiamine.HCl (Vitamin B1) Biotin (Vitamin H) 1,0 g/L 0,05 g Cyanocobalamin (Vitamin B12) 1,0 g/L 0,05 g + Pha chế dung dịch gốc vitamin lu Lượng lấy/50 an Nồng độ mong muốn n va Vitamin x10-4 M 5,92 (200 10 mg mg/L) gh tn to Thiamine.HCl (Vitamin B1) mL dd chung Ddgsc Biotin (Vitamin H) 50 µL 7,38 x10-7 M 50 µL ie 4,10 x10-6 M p Ddgsc Cyanocobalamin (Vitamin nl w B12) d oa + Pha chế môi trường cuối Nồng độ sử an lu Dung dịch dụng Nồng độ cuối môi dụng trường mL 8,82 x10-4 M mL 3,62 x10-5 M mL 1,06 x10-4 M Ddg NaNO3 u nf va Lượng sử ll 75 g/L § xem bảng 2.5 0,5 mL 1‰ nồng độ bảng 2,3 m co mL l § xem bảng 2.3 gm @ Dd gốc vitamin z Dd gốc vi lượng 30 g/L z at nh Ddg Na2SiO3.9H2O g/L oi m Ddg NaH2PO4.H2O 1‰ nồng độ bảng 2,5 an Lu n va ac th si PL Phụ lục Kết giải trình tự vùng gen rbcL-3P sau loại bỏ trình tự mồi GCGTTTCTTATACTGTATGGAAGGTATTAACCGTGCATCAGCATCAACAGGTGAA ACAAAAGGTTCTTACTTAAACATCACTGCTGGTACAATGGAAGAAGTTTACAAAC GTGCTGAATACGCTAAAGCAGTAGGTTCTGTAATTGTTATGATCGATTTAGTTATG GGTTATACAGCTATTCAATCAATTGCATACTGGGCTCGTGAAAACGATATGTTATT ACACTTACACCGTGCTGGTAACTCTACATACGCACGTCAAAAAAATCATGGTATT AACTTCCGTGTTATCTGTAAGTGGATGCGTATGGCTGGTGTAGATCATATCCACGC TGGTACAGTTGTAGGTAAATTAGAAGGTGATCCTTTAATGATTAGAGGTTTCTAC GATATTTTACGTGAAACTAACTTAGATGTTAACTTACCATACGGTATTTTCTTCGA AATGACATGGGCAAGTTTACGTCGTTGTATGCCTGTAGCTTCAGGTGGTATTCACT GTGGTCAAATGCACCAATTAGTTCACTACTTAGGTGATGACGTAGTATTACAATTC lu an GGTGGTGGTACAATCGGTCACCCTGATGGTATTCAAGCAGGTGCTACAGCTAACC n va GTGTTGCATTAGAAGCAATGGTATTAGCTCGTAACGAAGGTGCTGACTACTTCAA CCCACAAGTTGGTCCTCAAATTTTACGTGAGGCAGCTAAAACATGTGGTCCTTTA to gh tn CAAACAGCTTTAGACTTATGGAAAGATATCAGCTTCAACTACACATCTACAGATA CAGCTGATTTCGCTACAACACCTACAGCAAACGTATAATAAATTAATTCTAAAAC ie p ACTTAAGGAGTATTTGAATAGTG Phụ lục Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng mật độ ban đầu w oa nl khác đến sinh trưởng tảo silic Entomoneis sp d N1 N 4 4 oi m 7.720000 ll u nf 19.250000 z at nh 22.843750 1.000 1.000 1.000 gm @ 1.000 29.426250 z Sig Subset for alpha = 0.05 va Mật độ an lu Duncan Means for groups in homogeneous subsets are displayed m co l a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 an Lu n va ac th si PL N2 Duncan Mật độ N Subset for alpha=0.05 13.452500 26.750000 30.327500 4 37.042500 Sig 1.000 068 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 lu an N3 va n Duncan N Subset for alpha=0.05 1 p ie gh tn to Mật độ 20.2775 27.287500 35.347500 42.357500 1.000 d oa Sig nl 4 w 2 1.000 1.000 1.000 lu an Means for groups in homogeneous subsets are displayed u nf va a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 ll m Duncan N oi Mật độ N4 4 4 1.000 1.000 49.750000 1.000 1.000 m co Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 42.980000 l Sig 35.370000 gm @ 28.355000 z z at nh Subset for alpha=0.05 an Lu n va ac th si PL N5 Duncan Mật độ N Subset for alpha=0.05 1 33.087500 4 4 38.595000 41.802500 50.765000 Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 N6 lu an N Subset for alpha=0.05 n va Duncan Mật độ 39.830000 4 4 p ie gh tn to Sig 41.710000 220 nl w 1.000 46.820000 46.820000 151 d oa Means for groups in homogeneous subsets are displayed va an lu a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 u nf Duncan ll N Subset for alpha=0.05 oi m Mật độ N7 4 4 49.115000 1.000 992 1.000 m co Means for groups in homogeneous subsets are displayed an Lu a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 55.012500 l Sig 49.095000 gm 41.027500 @ z z at nh n va ac th si PL N8 Duncan Mật độ N Subset for alpha=0.05 43.657500 4 4 47.845000 54.890000 62.187500 Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 lu N9 an Duncan va n Mật độ N Subset for alpha=0.05 to ie gh tn 45.375000 54.187500 56.720000 p w Sig 59.718750 oa nl 56.720000 1.000 220 151 d an lu Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 u nf va ll N10 oi N 4 48.542500 50.282500 162 an Lu Means for groups in homogeneous subsets are displayed m co Sig a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 50.075000 l gm 47.450000 @ z Subset for alpha=0.05 z at nh Mật độ m Duncan n va ac th si PL N11 Duncan Mật độ N Subset for alpha=0.05 41.075000 45.615000 47.325000 4 54.542500 Sig 1.000 423 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 lu an N12 va n Duncan Mật độ N Subset for alpha=0.05 4 4 p ie gh tn to Sig 42.087500 w 48.480000 50.180000 50.285000 342 oa nl 1.000 d Means for groups in homogeneous subsets are displayed lu u nf va an a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 ll m N oi Duncan Mật độ N13 39.842500 41.397500 299 46.147500 56.457500 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed an Lu a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 m co l gm @ 4 4 z Sig z at nh Subset for alpha=0.05 n va ac th si PL N14 Duncan Mật độ N Subset for alpha=0.05 1 34.095000 38.187500 41.625000 4 Sig 1.000 063 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 57.562500 1.000 Phụ lục Phân tích phương sai yếu tố ảnh hưởng pH đến mật độ tảo silic Entomoneis sp lu an N1 n va Duncan pH N Subset for alpha=0.05 2 7.05750 7.29000 7.29000 7.37000 7.37000 7.40250 7.40250 4 7.44500 7.44500 7.83750 Sig .254 112 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 N2 Duncan pH N Subset for alpha=0.05 6.23500 6.66000 7.47250 4 7.61000 7.68750 7.98000 Sig .133 100 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si PL 10 N3 Duncan pH N Sig Subset for alpha=0.05 6.01250 6.50250 4 4 4 7.33250 7.70750 lu an n va p ie gh tn to N d oa nl w 7.12500 7.18000 4 4 4 8.90500 094 1.000 N4 Duncan Subset for alpha=0.05 8.01250 8.38750 8.38750 8.75000 lu 856 226 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 9.85250 1.000 242 ll u nf va an Sig 7.70750 8.17000 077 169 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 pH gm @ 9.07500 9.26250 Means for groups in homogeneous subsets are displayed .503 10.26250 an Lu 145 m co l Sig 4 4 4 8.01250 8.31250 8.45250 Subset for alpha=0.05 z N z at nh Duncan pH oi m N5 1.000 n va ac th si PL 11 N6 Duncan pH Sig N Subset for alpha=0.05 6.53000 7.60750 7.60750 7.85750 4 1.000 366 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size=4.000 9.39500 9.42750 900 lu Phụ lục Phân tích phương sai nhân tố thay đổi pH qua ngày mức pH ban đầu khác an N1 Duncan Subset for alpha = 0.05 n va N 7.33500 p 7.61250 7.82000 7.89750 8.00750 8.16250 1.000 oa nl w 4 4 4 1.000 1.000 120 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 d Sig ie gh tn to Mức u nf va an lu ll N2 7.40500 7.51250 z at nh Subset for alpha = 0.05 z 7.94250 8.03500 8.10750 8.03500 8.10750 8.26500 085 l gm @ 4 4 4 oi 382 209 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 m co Sig m Mức N an Lu n va ac th si PL 12 N3 Duncan Subset for alpha = 0.05 Mức N 4 7.76750 Sig 4 7.88250 8.04750 6.77250 7.30250 8.04750 8.24500 227 1.000 1.000 109 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 lu an N4 n va Duncan Mức N to Subset for alpha = 0.05 p ie gh tn 6.87500 7.34500 7.81000 4 7.91750 8.08250 Sig 1.000 1.000 126 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 d oa nl w 8.08250 8.28750 220 u nf va an lu ll oi N m Duncan Mức N5 Subset for alpha = 0.05 z at nh 6.62250 7.09000 7.64000 4 7.80000 7.80000 8.02750 Sig 1.000 1.000 242 103 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 z l gm @ m co 8.30750 1.000 an Lu n va ac th si PL 13 Mức N6 Duncan Subset for alpha = 0.05 N Sig 6.38500 4 4 4 7.12000 7.57750 7.88500 8.01250 1.000 1.000 1.000 232 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 lu va n N p ie gh tn to Sig 6.43500 6.84000 7.42500 7.89000 8.03500 oa nl w 4 4 4 8.26750 1.000 N7 Duncan Subset for alpha = 0.05 an Mức d 1.000 1.000 1.000 173 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 8.32750 1.000 ll u nf va an lu 7.78500 8.03250 l gm 159 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 m co Sig 7.44250 @ 4 4 4 z 6.56500 6.72500 z at nh N oi m Mức N8 Duncan Subset for alpha = 0.05 8.31250 1.000 an Lu n va ac th si PL 14 Phụ lục Ảnh hưởng pH đến Fv/ Fm N1 Duncan pH N Subset for alpha = 0.05 4 4 4 Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 .72750 73000 73250 73250 73250 73500 442 lu an N2 n va Duncan pH N Subset for alpha = 0.05 tn to 73000 73250 73250 73500 73750 73750 059 p ie gh 4 4 4 Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 d oa nl w u nf va an lu N Subset for alpha = 0.05 oi m pH N3 ll Duncan z @ m co l Sig .054 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 .74250 74750 272 gm 4 4 4 z at nh 73250 73500 73500 73750 74250 an Lu n va ac th si PL 15 N4 Duncan pH N Subset for alpha = 0.05 73250 74250 74250 74250 4 74750 Sig .054 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 .74250 74250 74250 74750 75000 321 lu an N5 va n Duncan pH to N Subset for alpha = 0.05 72500 4 4 Sig 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 ie gh tn p 74500 74500 74750 75000 75250 332 d oa nl w u nf va an lu N6 ll N oi m Duncan pH z at nh Subset for alpha = 0.05 1 72500 73750 74000 74000 74500 4 74500 Sig .191 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 z m co l gm @ an Lu n va ac th si PL 16 N7 Duncan pH N Subset for alpha = 0.05 2 69500 70750 71500 72000 4 Sig .155 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 .70750 71500 72000 73250 73500 126 lu an N8 n va Duncan pH N Subset for alpha = 0.05 69250 69750 70250 72000 72750 053 p ie gh tn to 63000 4 4 Sig 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si