Microsoft Word Bao cao de tai keo phau thuat y te doc 1 BéytÕ b¸oc¸okÕtqu¶nghiªncøu®ÒtµicÊpbé tªn®Òtµi nghiªncøuchÕt¹okeodïngtr ongphÉuthuËtytÕ ChñnhiÖm®Òtµi KSCaoV©n§iÓm C¬quanchñtr×®Òtµi ViÖntrangth[.]
Mụcđíchnghiêncứu
Nghiênc ứ u c h ế t ạ o k e o d á n s ử d ụ n g trongp h ẫ u t h u ậ t y t ế n h ằ m t ạ o r a m ộ t vậ tliệucótácdụnglàmkínvếtth−ơngkhôngcầnkhâugiúpbệnhnhânrútngắnthờig i a n n ằ m viện,h ỗ trợtrongc á c tr−ờngh ợ p p h ẫ u t h u ậ t đ ặ c biệtn h−ghéptạng,giảip hÉuthÈmmü v.v
Keop h ẫ u t h u ậ t c ầ n c ó m ộ t sốy ê u c ầ u t h i ế t y ế u n h−:đủsứckếtdính,t ạ o p o l y m e r h o á t r o n g m ô i tr−ờngẩ m , t h í c h h ợ p v ớ i s i n h h ọ c , t á i t h ấ m d ầ n d ầ n kh ông gâyphảnứngcủacơthểvớivậtlạ.
Ph−ơngphápnghiêncứu
- Xácđ ị n h p h−ơngphápt ổ n g h ợ p b ằ n g ph−ơngphápthayđ ổ i i t ỉ l ệ c ấ u t ử t h a m giaphảnứngvàđiềukiệntiếnhànhphảnứngđểthuđ−ợcsảnphẩmk e o theo ýmuèn.
- Nghiêncứuthựcnghiệmtrêncơthểđộngvật(invivo)vàtrongốngnghiệm(invitro)x ácđịnhtínhphùhợpsinhhọc,khảnăngliềnmôcủakeo.
Kếtquảnghiêncứu
Đềtàidonhómnghiêncứuđãnghiêncứuchếtạokeo,thiếtkếchếtạobaobì, đánhgiávàkiểmtracácchỉtiêukỹthuậtđápứngtiêuchuẩncơsởđãxâydựngc h o sản phẩm.Keođ−ợcgọitênlàKeophẫuthuậtytếôLEPAMEDằ.
Sảnphẩmcủađềtài
- Chếtạo2000ốn gkeoLEPAMEDđãđ−ợcth ửnghiệmtínhphùh ợp sinhh ọ c , độantoàn,độvôtrùng.
Kếtluậnrútratừnghiêncứu
Keop h ẫ u t h u ậ t d ù n g t r o n g y tếLEPAMEDd o V i ệ n t r a n g thiếtb ị v à c ô n g t r ì n h y t ế n g h i ê n c ứ u c h ế t ạ o l à m ộ t loạik e o phùh ợ p s i n h h ọ c , c ó k h ả n ă n g kh án g khuẩnvàkhảnănglàmliềnvếtthươngvớicácđặctínhsau:
- Kếtdínhngayhaibờmépvếtthương,bềmặtvếtthươngphẳng.LEPAMEDđãcón hiềuưuđiểmđángkể:sửdụngdễdàng,nhanh,khônggây đau,đỡphảicắtchỉsaukhikhâuvàdùngbênngoàicóthểđạtđ−ợccáckếtquả thẩmmỹ chấpnhậnđ−ợc
Đặtvấnđề
Tìnhhìnhnghiêncứun−ớcngoài
Mộtsốnướct rê n t h ế g i ớ i đã n g h i ê n c ứ u c h ế tạ o l o ạ i k e o tươngt ự nhưKeoD e m a b o n c ủ a HãngE T H Y C O N (Mỹ)h i ệ n n ắ m 8 0 % t h ị tr−ờngt h ế giớivềv ậ t liệu p hẫut h u ậ t v ớ i d u n g l−ợng5 5 0 triệuUSD/ năm,keoGistocrilc ủ a c ô n g tyB B R A U N (CHLBĐ ứ c ) , k e o Intermilc ủ a h ã n g LOCTITE( A n h ) , k e o Afon-2,syakobodcủacáchãngNhật,keoSpofa(BaLan). TạiItalysảnxuấtkeoGlubranvàGlubran-
2docôngtyGEMs.r.ltrêncơsởm u a bảnquyềncủaNgatừnăm1997.Glubanđ−ợ ccấpchứngchỉCEcủaChâu Âun ă m 1 9 9 8 , F D A củaM ỹ G i á bánk e o 20$/1mlt h e o cáct u y ế n p h â n p h ố i độcquyền.
Tìnhhìnhnghiêncứutrongn−ớc
HiệnnayởViệtNammớichỉsảnxuấtchỉkhâuphẫuthuậttừruộtđộngvật.Việnt rangthiếtbịvàcôngtrìnhytếsảnxuấttừruộtbò,CôngtyCPTnhậpbánt h à nh phẩm chỉkhâuphẫuthuậtvềtiệttrùngvàđónggói.Hiệnmộtsốbệnhviện đãcósửdụngkeophẫuthuậttrongmộtsốcaphẫuthuậtđặcbiệt,nh−ngch−acó đơnvịnàonghiêncứusảnxuất.
Mụctiêunghiêncứu
- Chết ạ o k e o p h ẫ u t h u ậ t c ó k h ả năngkếtd í n h c a o v ớ i đ ộ m ề m d ẻ o t−ơng đ−ơngđ ộ đ à n h ồ i củad a , k h ô n g l à m tổnth−ơngcơt h ể sống,đ à o t h ả i n h a n h
Tổngquanchung
Tìnhhìnhnghiêncứunướcngoàiliênquanđếnkeophẫuthuậtytế
TạiNga,keo“Sulfacrilat”đ−ợcchếtạotừnăm1992,bảnquyềnsángchếsốA C 1 0
N g a , c h i n h á n h Si b eri nghiêncứuứngdụngtừnăm1963,Cụcứngdụngd−ợcphẩmv àdụngcụyt ế BộYtếLiênXôchophépsửdụngtừ16-5-
15.000cam ổ K e o Sulfacrilatđ−ợcp h é p s ử d ụ n g r ộ n g rãit ừ 1 9 9 9 theog i ấ y p hépsố292/0699/99-1-21ngày8-12-
1999.TạiNgakeođượcứngdụngrộngrãitr on g cácbệnhviệntrungươngvàđịaphư ơng,trongquânđộivàcáclựcl−ợngv ũ t r a n g , Bộc ứ u t r ợ k h ẩ n cấpNga.Sảnphẩmđ− ợcứ n g d ụ n g t r o n g p h ẫ u t h u ậ t c h o trẻsơsinh,phẫuthuậtthầnkinh,phụkhoa,tiêuh oá,hôhấp
120s.K h ô n g g â y n h i ễ m t r ù n g v à t á i n h i ễ m trùn g, kh ôn g đểlạisẹo, gờ, khảnă ngcầmm á u hoà nt oà nt ro ng mổ gan,tim , nộitạng,giúptiếtkiệmcácvậtt−cầmmá uđắttiền,rútngắnthờigianhậuphẫu.Tiệntrongsửdụngbảoquản,cótínhphổcậpcao ,ứngdụngrộng.
- Làl o ạ i p o l y m e t ổ n g h ợ p b a o g ồ m Etyl-xyanuacrylat,Butylacrylat( c ó t í n h đànhồi)Sufoacrylat(hợpchấtchốngviêm,khángkhuẩn)
-120s)tạothànhmộtchấtkeotrongsuốtdínhbềmặtcầndánvàonhau.Khi đãpolimehoácongótkhôngđángkể.Trongcơthểkeophânhuỷdần,sựpháttriểncủam ôliênkếtqualớpkeodiễnradoviệcphânhuỷnhanhchóngcácphầnphântửl−ợngthấpv àtạothànhcáclỗ.Sựphânhuỷhoàntoàndiễnratrongcơthểsau30-
-Kết dính x−ơngsụn, kết dínhcơ liêns−ờnvàcổsống
-Kếtd í n h , c ầ m m á u vớit ổ c h ứ c n h u m ô t r o n g cácp h ẫ u t h u ậ t g a n , lách,t ô y , thËn
* Nghiênc ứ u đ ộ c t í n h t ế b à o , khảnăngt − ơngt h í c h m á u , k h ả n ă n g c h ố n g n h i ễ m khuẩnc ủ a keocyanoacrylatc ủa keoGlubranv à Glubran2 sảnxuấtt ạ i Italy
Khản ă n g t h í c h ứ n g s i n h h ọ c c ủ a 2 l o ạ i k e o c y a n o a c r y l a t e trongphẫut h u ậ t (Glubranv à Glubran2 ) đ−ợcc u n g cấpb ở i G e n e r a l E n t e r p r i s e M a k e t i n g , Via reggio,Lucca,I t a l y , đ ã đ−ợck i ể m c h ứ n g vềt í n h gâyđ ộ c t ế b à o , k h ả n ă n g thích ứngvớimáucũngnh−đánhgiávềkhảnăngkhángkhuẩn.Cácthửnghiệmv ề độc tí nh đ ốiv ới tế bào vàk hả nă ng t−ơngthíchvớim áu đ−ợct h ự c h iệ nvớ icácl o ạ i k e o t ạ o p o l y m e r S ử d ụ n g xétn g h i ệ m h ấ p t h u m à u đ ỏ trungt í n h , c á c c h ấ t thảitừ Glubransau kh ipolymerhoálàk hô ng độc vớicác tế bà o L929với m ứ c độlàmloã nglà1/10trongmôitr−ờngnuôicấy.Glubranlàgiảmthờigianh o ạt hoáthrombo plastin(APTT)tạonêncáctácdụngmongmuốnvềcầmmáu.S ự rútngắnAPTTquyế tđịnhđếnhiệuquảcầmmáuvàsựgắnkếtbởikeo.
Mặtkhácch−at h ấ y sựk h á c n h a u v ề hoạtt í n h c ủ a P r o t h r o m b i n , fibrinogen,số l−ợngtiểucầu, bạchcầukhidùngkeo.Ch−athấysựkhácbiệtgiữaGlubranv à G l u b r a n 2 đ ố i v ớ i t í n h t h í c h ứ n g m á u Kh ản ă n g k h á n g k h u ẩ n c ủ a d u n g d ị c h ke ok h i ch−apolymerh o á đ ã đ−ợck i ể m c h ứ n g v ớ i Bacillussubtilisvar.nigert r o n g 3tuầnđốivớicảGlubranvàGlubran2đềukhôngthấykếtquả.
Nóitómlại,tổnthươngđốivớitếbàolànặngvớidungdịchchưaphaloãng.Vớid u n g d ị c h p h a loãngt h ì cót h ể ch ấ p n h ậ n đ−ợc.Ng−ợcl ạ i , k hản ă n g t h í c h hợpv ớ i m á u c ó t h ể c h ấ p nhậnđ−ợck h i d ù n g keo.K h ô n g c ó sựk h á c biệtg i ữ a G l u b r a n vàG lubran2saukhiđãpolymerhoá.
Trongn g h i ê n c ứ u t í n h t h í c h ứ n g s i n h h ọ c c ủ a 2 l o ạ i k e o đ ã đ−ợctiếnh à n h t r o n g phòngthínghiệm.Cả2đềukếtdínhvàpolymerehoánhanhởmôitrường
V à n h ữ n g t i ế n b ộ t r o n g ứ n g d ụ n g p h ẫ u t h u ậ t k h i n ó đ−ợcsửd ụ n g t r o n g v iệ c gắnkếtcácmépvếtthương,đặctínhkếtdínhtốttrongnhiềuứngdụngphẫuthuậtnhưng sựp h ù h ợ p s i n h h ọ c m ớ i l à nềnt ả n g q u a n t r ọ n g T h ử nghiệmđ ộ c tínhtếbàodựat rênthửnghiệmnhiệmđỏtrungtính.
Khimàngtếbàobịtổnthươngbởicácchấtđộc,màuđỏtrungtínhsẽkhôngt h ể v à o t r o n g t ế bàom à c ũ n g k h ô n g g i ữ t r o n g t ế b à o T ế b à o t ổ n t h−ơngc à n g nặngcànghấpthụítmàuđỏtrungtính.Trongnghiêncứu,saukhixửtrívớicácch ấ t c h i ế t t ừ keoc á c t ế bàođ−ợcn g â m t r o n g d u n g d ị c h đ ỏ t r u n g t í n h S a u đ ó d u n g dịchlysingđ−ợcthêmvàođểloạibỏt h u ố c nhuộmnộibàobằngcáchđosựhấpt hụcủamàuđ−ợcgiảiphóng,mộtchỉsốđángtincậyvềsốl−ợngtếbàos ố n g sóttrongm ẫuchứađựng.
Kinhnghiệmc h o t h ấ y v ớ i c á c c h ấ t t h ử k h á c n h a u , m ộ t g i á trị< 7 0 % tếb à o s ốngsótsaun h ữ n g thửnghiệmsi n h h ọ c cu ng cấ p ng−ỡngđ ộc 70%.
Nhữngc h ấ t c h i ế t t ừ Glubranv à G l u b r a n 2 s a u k h i p o l y m e r e h o á đ ề u đ ộ c t ế b à o K h i p h a l o ã n g 1 / 1 0 c ả 2 k e o đềuk h ô n g t h ấ y tínhđ ộ c t ế b à o vàk h ả n ă n g c h ị u đựngcủatếbàolàtốtvàtỷlệsốngsót>70%.Nhữngnghiêncứukháccũngc h o thấyi sobutylcyanoacrylateítđộchơn.
Khôngt h ấ y s ự k h á c n h a u giữa2 l o ạ i keot r o n g h o ạ t đ ộ n g prothrombinv à fibrinogen,sốl−ợngbạchc ầ u , t i ể u c ầ u S ự p h ù h ợ p m á u đ ố i v ớ i 2 loạik e o l à t−ơ ngđương.Cácchấtchiếttừ2loạikeokhôngcóảnhhưởngđếntanmáutrênt ế bàohồng cầungười.Cáccyanoacrylatecũngcóảnhhưởngđôngmáu. Đánhg i áv ề t í n h khángk h u ẩ n : cáckeokhôngngănchặnđ−ợcsự pháttriểnc ủ a v i k h u ẩ n B a c i l l u s s u b t i l i s n h−ngg i ả m s ự n h i ễ m k h u ẩ n Tuyn h i ê n đ ố i v ớ i c ác vikhuẩnkhácch−acónghiêmcứu.
Cáctácg iả khác cũ ng đã chứngmi nh rằngcyanoacrylatecótí nh bấ th oạt vi k h u ẩ n , tuynhiênvớiph−ơngphápthửnghiệmkhác.
Khôngthấysựkhácnhaugiữa2loạikeotronghoạtđộngprothrombinvàfibrin ogen,sốlượngbạchcầu,tiểucầu.Sựphùhợpmáuđốivới2loạikeol à tươngđươn g.
Chúngtôicót h ể t h ấ y r ằ n g đ ộ c t í n h t ế b à o l à n ặ n g n ế u c á c k e o k h ô n g p h a loãngvàcóthểchấpnhậnđ−ợckhikeophaloãng.Ng−ợclạitínhphùhợpmáucóthểc hấpnhậnđ−ợc.Khôngcósựkhácnhaugiữa2loạikeosaukhipolymereh o á Cảhailo ạikeođềukhôngcókhảnăngngănchặnvikhuẩnBacillussubtilisv a r n i g e r pháttriể nnh−ngcóthểhạnchếsựlâynhiễm.
Năm2007,Cơquand−ợcphẩmvàthựcphẩmHoaKỳđãchấpthuậnchosử d ụ n g k e o fibrinc ó tênb i ệ t d−ợcl à Evicel,m ộ t sảnphẩmd ạ n g l ỏ n g d ù n g đ ể n g ă n c h ặ n r ỉ m á u từn h ữ n g m ạ c h m á u n h ỏ t ro n g l ú c phẫut h u ậ t Evicell à m ộ t p h−ơngtiệ nhiệuquảđểcầmmáuchảytừnhữngmạchmáunhỏtrongquátrìnhphẫut h u ậ t m à cá cb i ệ n p h á p k h á c n h−khâuc ầ m m á u , c h ậ m m á u hoặcc á c k ỹ t h u ậ t kinhđiểnkh áckhônghiệuquảhoặckhôngápdụngđ−ợc,GiámđốcTrungt â m nghiêncứuvàđá nhgiásinhhọccủaFDABSJesseGoodmanđãnhậnđịnhn h−vậy.
SảnphẩmnàyđượcđiềuchếtừhuyếtthanhngườigồmcóFibrinogencôđặcv à t h r o m b i n , hai c h ấ t t h−ờngđ−ợct h ú c đ ả y sự đ ô n g máu.C ả h a i c hấ t đ ã đ−ợc điwufchếqua2giaiđoạnđểgiảmbớtnguycơlâynhiễmvirus.Tuynhiênnguycơt i ề m t à n g l â y truyềnc á c v i r u s quađ−ờngm á u vẫnc h−at h ể triệtt i ê u h o à n toànđ−ợ c.
Trongm ộ t nghiênc ứ t rê n 1 4 7 b ệ n h nhâ n,h iệ u q u ả c ủ a Ev ice lđ−ợcsos á n h v ớ i k ỹ t h u ậ t c ầ m m á u t i ê u chuẩnl à é p m ộ t m i ế n g ghépb ằ n g plasticlênmạchm áu hở,83%trongsốbệnhnhândungEvicelhếtchảymáutrong4phút,sovới3 9 , 7 % ở n h ó m c ò n lại.Tuyn h i ê n chúngc h ú n g c ũ n g đ ề u c ó tácd ụ n g p h ụ n h ẹ n h−gâythi ếumáuhoặcnhiễmtrùngvếtghép,th−ờnglànhẹvàxảyravớitỷlệt−ơngđ−ơngcảởhain hãm.
Tr−ớcđ â y F D A đ ã c h ấ p n h ậ n c h o m ộ t t i ề n c h ấ t c ủ a E v i c e l l à Crossealv à o n ă m 2003đểdùngtrongphẫuthuậtgan.Evicelđ−ợcsảnxuấtbởicôngtyd−ợcphẩms inhhọcOMRIXbiopharmaceuticalsLTD,KiryatOno,Israel.
Tìnhhìnhnghiêncứutrongn−ớcvềkeophẫu thuậtytế
Hiệnnayv i ệ c s ử d ụ n g c á c h ợ p c h ấ t polimevàoy t ế n g à y c à n g p h á t t r i ể n , n g a y cảtronglĩnhvực sửdụngcácloạikeotổnghợptrongcácphẫuthuậtytế M ộ t sốnghiêncứuvề keo đãđược trình bày dưới đây:
2.2.2.1Keo dántrêncơsởProtein a) Keodáncónguồngốcđộngvậtđâylàmộtloạipolimetựnhiêndẫnxuấtt ừ co lagen-yếutốchủyếucấuthànhnêndađộngvật,môghép,xương b) Keot ừ m á u : t h à n h p h ầ n c ơ bảnc ủ a k e o m á u k h ô tanl à protein,abuminh u y ế t t h a n h M á u t h−ờngc h−ac á c cácthànhphầnproteinkhácn h−mfibri nv à hemoglobinđ−ợct ạ o phứcn ặ n g vớic á c i o n k i m loạiđ ể l à m keo.Môit rườngkiềmsẽphântánmáukhôtantớimộtmứnhấtđịnhvàprotein sẽtrởth ànhmộtloạikeodánmạnh. c) Keoxyanoacrylat
Xyanoacrylatlàmộttrongcácloại keocó thểchếtạođểcảithiệnđ−ợccác đặctínhnh−tốcđộđóngrắn,độbềnnhiệt,điềukiệnđóngrắn.
Kháin i ệ m xyanoacrylatl à t ừ c ấ u t r ú c h o á h ọ c c ủ a vậtl i ệ u n à y H ì n h 1 mi êu tảcôngthứccủaxyanoacrylat
- KeoxyanoacrylatcấutạotừC,H,OvàN.Cáchcácnguyêntửnàyđ−ợcsắpxếptrongph ântửrấtquantrọngbởisựsắpxếphaycấuthànhcủanguyêntử ảnhhưởngđếntínhchấthoáhọccủaphântử.
- NhómC N đ−ợcg ọ i l à n h ó m nitrinh a y x y a n o N g o à i v i ệ c g ọ i t ê n t h e o n h ó m này,nhómxyanophâncựccaovàchophântửmộtsốđặctínhmạnh củakeodán.Phầncònlạicủaphântử,phầnacrylatcũngphâncựcvàcũngt ă n g cườngđặctínhchokeodán.
- KýhiệuRđ−ợcsửdụngtronghoáhữucơđểtr−ngchophầnphântửkhácn h a u g i ữ a cácn h ó m h ợ p c h ấ t T ro n g n h ó m x y a n o a c r y l a t , n h ó m R l à a l c o l tạ othànhestevớiphầnaxitacryliccủaphântử.Kiểualcolđ−ợcsửdụngsẽchokeo d á nx y a n o ac ry l a t t ê n g ọi củ a nó.Víd ụMetylxyanoacrylatl à es te đ−ợctạobởialcolmetylicvàaxitxyanoacrylat.
- Tấtcảcác p hâ n t ửtạih ìn h2 đềul à chấ tl ỏ n g l oã ng dạn g nướcở nhiệtđộ p h ò n g
Tạitrạngtháiđộnhớtthấp,cácphântửcóthểchảytựdotrênbềmặtcủac á c phần đ−ợcdán.LiênkếtđôiCỉratrongbảng1làchungdotấtcảcácxyanoacrylat c ó t h ể p hản ứ n g s a o c h o c á c p h ầ n t ử k ề n h a u đ−ợcl i ê n k ế t vớinhauđểtạo thànhmạchlớn Cácmạchlớnđếnmức keodánsangdạng rắn,chắc.Phảnứ ngđóđ−ợcgọilàphảnứngtrùnghợp,đ−ợcminhhọatại
Chấtk h ơ i m à o đ i ề u c h ỉ n h phảnứ n g trùngh ợ p h a y phảnứ n g đ ó n g r ắ n c ủ a c á c k e o dánxyanoacrylatcóthểlàbấthóachấtnàogốctạogốctựdo.Bứcxạđiệntừd−ớidạng nhiệthaytiatửngoạicũngcóthểkhơimàophảnứngnh−ngchỉđủđểg â y ranhữngvấn đềvớisảnphẩmcóthờihạn.Cáchthườngdùnghơnđểtrùng h ợ p xyanoacrylatlàkh ơimàoanionic.Bấtcứphântửnàokiềmhơnnướcđềucót h ể khơimàophảnứngđóngrắ n.Kiểutrùnghợpnàynhanhhơnnhiềukiểutrùnghợ pgốc tự do là ng uyê n nhând ẫ n đ ế n x ya n o a c ry l a t đ ó n g rắ n n h a n h Ch í n h tốc độđ ó n g rắnn h a n h h ơ n b ấ t k ỳ t í n h c h ấ t n à o k h á c l à m keodánn à y p h ổ b i ế n Nhiềul o ạ i k e o d á n c h ắ c h ơ n v à b ề n h ơ n x y a n o a c r y l a t nh−ngk h ô n g lo ạin à o đóngrắnnhanhvàvớinhiềuloạichấtnềnnh−xyanoacrylat. Đểhiểurõhơnvềhóahọccủaquátrìnhtrùnghợpcầnphảitìmhiểurõhơnđiềukiệnápdụngnó cóảnhhưởnglớnđếnhiệuquảcủachúng.Cácpolimethườnggặpnhưpolyetylen,polystyre n,vàPVCđ−ợctổnghợptrongcácthiếtbịphảnứngtinhxảo.Cácthôngsốnh−nhiệtđộnồng độmonome,vàl−ợngchấthoạthóađ−ợckiểmsoátkhắtkhe.
Vớikeoxyanoacrylat,thiếtbịphảnứngđ−ợcsửdụngđểchuyểnmonomethànhch ấ trắncứnglàkhônggiangiữacácphầnđ−ợcdán.Khicáckeothayđổitrongkh ôn ggia nnày,hiệuquảcủakeodánsẽthayđổi.Cácthôngsốnh−nhiệtđộ,độẩ m , khônggiangi ữacácphầnvàkiểubềmặtcầndáncóthểthayđổinhiều.
Bảng1 c h ỉ r a m ộ t s ố k i ể u estex y a n o a c r y l a t C ó n h ữ n g s ự k h á c biệtk h ó thấ yg i ữ a chúngđ−ợcsửdụngtrongnhữngứngdụngriêng.
Metylxyanoacrylatlàlàhợpchấtphâncựchơnbấtkỳhợpchấtnàokhác,nóchok e o đón grắnsựcốkếtcaohơn,hayđộbềnnội.
−ớtbềmặtdễdànghơnvàlàdungmôitốthơnsovớimetyleste.Sựkháckhácb i ệ t vềh iệuquảnàynênng−ờitath−ờngsửdụngmetylchokimloạivàetylchoc á c vậtliệukhác Đốivớiallylxyanoacylatphântửnàychứamộtliênkếtđôithứhaicóthểphảnứngsaukhichuỗ ipolimeđầutiênđ−ợctạothành.Quátrìnhdánthứcấpnàycóthểdiễnragiữacácmạchpolime liềnkềnhau,gâynêntạol−ớimạch.Cácmạchpolime đượctạolướiđóbềnnhiệthơnpolimekhôngtạolưới.
Kiểut h ứ 4 c ủ a x y a n o a c r y l a t đ−ợcđ−ar a t r o n g h ì n h 2 l à estea l k o x y a l k y l Me th ox ye ty l x y a n o a c r y l a t v à m e t o x y isopropylxyanoacrylatestecót ấ t cả tínhc h ấ t mongmuốnc ủ a metyl,etylvàalkylxyanoacrylatvớiưuđiểmb ổ xunglà ápxuấthơithấp.Kếtquảlàcácmonomecórấtíthaykhôngcómùi,chúngđ−ợcứ n g dụn gphổbiếntrongcácmôitrườngmàbayhơilàmộtvấnđềcầnlưuý.
Ngoàil ợ i í c h í t m ù i , g i ả m t ạ o s−ơngc á c k e o dánn à y t ạ o li ên k ế t c h ắ c v ớ i c á c ch ấ t nềncónăngl−ợngthấpvàcácvậtliệukhódán.
Keodántrêncơsởcácnhómxyanoacrylatđãxuấthiệnnhiềutrênthịtrường,nhóm đồngnhấtcóđặcđiểmđặcbiệtlàmộtnhómnitrin(C=N)đốinghịchvớimộtnhómeste(COO R),ởđóRcóthểlàmetyl,etyl,propilhaybutyl.Monometrùnghợpvớinước,độẩmhoạtđộng nh−mộtchấtxúctác.Quátrìnhtrùnghợpkhôngbịthunhỏ đángkể vàtínhphâncựcmạnhcủapolimetạo nênlựcdính nổibật.
Ankyl2-xyanoacrylatđ−ợcđiềuchếbằngcáchnhiệtphânpoly(ankyl2- xyanoacrylat)đ−ợct ạ o r a k h i focmandehytng−ngt ụ vớiankylx y a n o a c r y l a t t−ơngứng.
CN nCH2O+nCH2( C N ) C O O R - CH2–C-COOR+ nHO2 n nCH2=C(CN)COOR
Dạngngoài Trongchấtlỏngkhôngmùi ĐiểmsôiºC 48-49ở 2.5–2.7mm Độnhớtở25ºC(Brookfield),cp 2.2
Các monome tinh khiếtcó thểtựtrùnghợpởcảtrạngtháilỏngvàhơi.
Cácmonometrùnghợpđ−ợckhơimàogốctựdo.Ưcchếkhảnăngtrùngh ợ p s ớ m c ủ a a n k y l 2 - xyanoacrylatp h ụ thuộcvàok h ả n ă n g c ủ a c h ấ t ứ c c h ế hoặchệứcchếđểngă nchặnvàlàmchậmcảhaikiểutrùng hợp.Cácch ấ t ứcchếtrùnghợpphalỏng làpoly(phôtphricaxit)phôtphopentoxit, o- sulfobenzoicanhydricax it Cácchấtức chếtrùnghợpphahơilàNitơox it vàlưuhuỳnhdioxit.
Mặcdùmonomeankyl2- xyanoacrylatlàkeodántốt,tínhchảylỏngcủan ólạikhôngphùhợpvớimột sốvậtliệutrongứngdụng.Monomecóthể đ−ợcb ổ x u n g t á c n h â n làmđ ặ c h o ặ c đ i ề u c h ế đ ể t ạ o r a d ạ n g v ậ t l i ệ u t ừ l oãngđếngelđặc.
N- butyl xyanoacrylat ( B460) N- butyl xyanoacrylat ( B60) Metyl xyanoacrylat (ME 2 ) Methoxy xyanoacrylat (MO 460)
Bảng3.Tínhchấthóalýcủakeodánmetyl-2-xyanoacylat Đặcđiểmbênngoài S−ơng,chấtlỏngkhôngmùi Độnhớtở25ºC(Brookfield),cp 100
Khốil−ợng riênglit/kg 9.5 ĐiểmchớpcháyvàđiểmcháyºC 82
Đốit−ợngvàph−ơngphápnghiêncứu
Đốit−ợngnghiêncứu
Vậtliệunghiêncứu
Thiếtkếnghiêncứu
Kếtquảnghiêncứu
Nghiêncứuxâydựngtiêuchuẩnkeo
Nghiêncứuph−ơngpháptổnghơpkeo
Chếtạo4mẫukeo,thửnghiệmcác chỉtiêukỹthuậtlựachọnmẫucóthôngsốkỹt huậttốtnhấtlàLPM-10
STT Kýhiệu Trọngl−ơng baob×
Tổng 2386,8g b) Quy trình công nghệ chế tạokeo Butylxyanoacrylat
-Phònglàmviệc:phảiđảmbảovôtrùng,nhiệtđộ≤15OºC, độẩm≤65%.
+Dụngcụ:đãlàmsạchvàsấykhônh−:bìnhnhựa250ml,đũathuỷtinh,ống ®ong,b×nhthuûtinh500ml vv
(Mỗil ô s ả n x u ấ t 1 0 0 0 - 2 0 0 0 mlk e o c ầ n c ó 1 0 b ì n h 2 5 0 m l v ì s ẽ t ổ n g h ợ p 20 0ml keo/1lọ)
3 ổnđ ị n h p h a h ơ i : c h o SO 2vào t ừ n g b ì n h 2 5 0 m l v ớ i l−ợngy ê u c ầ u 0,005% sauđóđậychặtnắpbình
4 ổnđịnhphalỏngcủamonomebằngAxitAceticvớil−ợng0.005%chotừtừaxit Ace ticvàocáclọcóchứamonomevàlắcđều,đểổnđịnh.
5 Tăngk h ả n ă n g khángkhuẩnb ằ n g cáchch o thêmSM A t r o n g đ i ề u k i ệ n n h i ệ t độ≤15ºC.
7 Đểkeovàotủlạnhởnhiệtđộ≤4ºCvàtheodõi,sau48gđóngkeovàotuyphànkí nvàbảoquảntrongđiềukiện≤4ºC
Bằng PP đốt S ổn định pha lỏng của B60 (Bằng CHCOOH) ổn định pha hơi của B60
Tăng khả năng kháng khuẩn bằng FF thêm SMA §ãng tuyp
Kiểm tra các thông số kü thuËt
Bảo quản theo yêu cầu c) Sơ đồtómtắtcôngnghệ chế tạo keo
Nghiêncứuxác địnhcác chỉtiêukỹthuậtcủakeo
- Xácđịnhtốcđộđóngrắn,nhiệtđộđóngrắnvàthờigianlàmviệccủakeotrongmôitrườ ngtựnhiên:chomẫukeolêntấmkínhvàtheodõiquátrìnhgel hóatrongđiềukiệnphòngthínghiệm
- Xácđịnhcấutrúc:saukhimẫukeođ−ợcđóngrắnhoàntoàntiếnhànhghiphổ hồngngoạiđểxácđịnhcấu trúccủa keo sauđóngrắn
- Xácđịnhđộbềnkéotr−ợt:mốidántrêndađ−ợcchếtạotheotiêuchuẩnt h ử n g h i ệ m k í c h t h−ớcm ố i d á n 1 x 2 c m S a u k h i t ạ o m ố i d á n , đ ể mộtthờigia nđểquátrìnhđóngrắnxảyrahoàntoàn.Tiếnhànhxácđịnhđộbềnkéotr− ợttrênthiếtbịZMGI-250(Germany) c) Cáccôngcụnghiêncứu
Tốcđ ộ đ ó n g r ắ n , n h i ệ t đ ộ đ ó n g r ắ n v à thờig i a n l à m v i ệ c c ủ a k e o tro ng môitr−ờngtựnhiên
Khảosá t k h ả năn gđ ó n g rắ n c ủ a cácm ẫu ke o ở n h i ệ t độ phòngq u atheodõithờiđiểmbắtđầugelhóavàthờigianđểquátrình đóngrắnhoàntoàn.
Mẫuk e o s a u k h i đ ó n g r ắ n hoànt o à n đ−ợcphânt í c h t r ê n t h i ế t bịp h ân tíchphổhồngngoại(Bảng4)
Bảng4.Kếtquảquykếtcácpicdaođộngđặctr−ngchocấutrúccủavậtliệuđ−ợct rìnhbày
Hiệuứ n g n h i ệ t c ủ a q u á t r ì n h p h â n h ủ y m ẫ u k e o s a u đ ó n g rắnđ−ợcx á c địnhtrênthiếtbịphântíchnhiệtDSC.Kếtquảđ−ợcthốngkêtrênbảng5.
1 5 0 ˚Cứngvớisựb a y h ơ i c ủ a n−ớcc ó mặtt r o n g m ẫ u ; h i ệ u ứ n g n h i ệ t trong k h o ả n g 1 5 0 -260Cứngvớisựphânhủymẫu
Bảng6.Sựthayđổikhốilượngmẫunghiêncứutheochươngtrìnhn hi ệt độ0-
Kếtq u ả n g h i ê n c ứ u ( đ ồ t h ị T G A v à b ả n g t r ê n chot h ấ y , c á c m ẫ u cóđộbềnn hiệtđ ế n k h o ả n 180˚C).M ẫ u p h â n h ủ y m ạ n h trongk h o ả n g n h i ệ t đ ộ 1 8 0 –
Cácmẫuk e o d á n trênd a c h ế tạot h e o t i ê u c h u ẩ n p h é p đ o đ−ợcxácđịnhđộb ề n k éotr−ợttrênthiếtbịZMGI-250.Kếtquảđ−ợcthốngkê tạibảng7.
Nghiêncứuthựcnghiệmtrêncơthểđộngvật(invivo)vàtrongốngnghiệm(invitro)
- Đánhgiácácchỉtiêuvềkhảnăngcầmmáu,làmliềnvếtth−ơng,cácchỉti êuvềđạithể vithểđốivớicácvếtthươngda,vếtthươngtạng b) Cácchỉtiêunghiêncứu
- Cácc h ỉ t i ê u h ì n h tháih ọ c ( đ ạ i t h ể , vit h ể )v ù n g m ô t h ử nghiệmv ớ i k e o c) Kết quả nghiên cứu trênđộng vật
% đ ố i v ớ i k e o Glubranv à Glubran2 [ 3 ] Đốiv ớ i Lepamedt ỷ l ệ nàyl à 7 1 %
(đốivớinguyênbàosợi).Nh−vậy,vềđộctínhtếbào,keoLepamedcótỷlệsố ng củatế bàot−ơng đ−ơngGlubranvàGlubran2.
3 SaudùngkeoLepamed20ngàyvà40ngày,tấtcảcácxétnghiệmvềsốl ượng hồngcầu,h à m lượnghuyếtsắct ố,hematocrit,t h ểt í c h t r u n g b ì n h hồngcầu,sốlượng bạchcầu,côngthứcbạchcầuvàsốlượngtiểucầucủathỏlôtrị( c ó dùngkeoLepameds aukhiphẫuthuật)đềukhôngcósựkhácbiệtcóýnghĩat h ốngkêsovớithỏlôchứng(khô ngdùngkeoLepamedsaukhiphẫuthuật)vàsovớithờiđiểmtrướckhiphẫuthuật(p>0 ,05).
- Đối vớivếtth−ơng dado cắt
Thiếtkế, chếtạokhuôntuýpđựng keovàbaobìbênngoài
Làhộphìnhkhốichữnhậtcókíchthước140x80x40mm,sáumặtđềucóchữvàb i ểu tượng. Hộpđ−ợcm ở t h e o chiềuđ ứ n g v à c ó 2 m ặ t k í c h th−ớc1 4 0 x 8 0 l à m ặ t c h í n h a) Mặt1(Mặttr−ớc)
Kíchth−ớc140x80mmcó3mầunềntrắng, ghivàxanhd−ơng.Phầnmầunềnm ầ u t r ắ n g ở t r ê n c ù n g cao3 0 m m , p h ầ n n ề n m ầ u g h i ở g i ữ a c a o 5 0 m m , p h ầ n n ề n mầuxa nhd−ơngởd−ớicao10mm.
- Hàngd−ớilàdòngchữinhoa:" LEPAMED "mầuxanhd−ơngchiềucaochữlà9 mm2 /3phầntrênchữcónhữngnétkẻ,1/3chữmầuxanhd−ơng.Trongtấtcảcácc h ữ LEPAM ED,c h ữ A n h ô c a o h ơ n c ả h à n g c h ữ v à b ê n p h ả i phíat r ê n h à n g c h ữ cóc h ữ Rnằmtrong vòngtrònnhỏmầuđen
Trênphầnnềnmầuxanhd−ơngcódòngchữth−ờngmầutrắngkíchth−ớcchữ2mm:" Nơisả nxuất:40Ph − ơngMai-ĐốngĐa-HàNội" b) Mặt2(Mặtsau)
Kíchth−ớc140x80mm.Cũngcóbamầunềnnh−mặt1,cácchữtạihaiphầnnềnt r ắ n g và nềnghicũngnh−mặtmột.
Trênphầnmầuxanhd−ơngcódòngchữ "Đọckỹh − ớngdẫntr − ớckhisửdụng "m ầ u đ ách÷th−êngk Ý c h th−íc2mm. c) Mặt3và4(Mặttrênvàđáyhộp)
ED "mầutrắngchiềucaochữ14mm,chữcóhaiphần:2/3chữcókẻxanhtr ắn gv à 1 / 3 c h ữ m ầ u x a n h d−ơng.T ạ i mặtđ á y c ó t h ê m c h ữ : " Giấyp h é p SX "mầut rắ n g d) Mặt5và6(Haimặtcạnh)
Cónềnmầutrắngtrêncónhãnhiệuhànghóahìnhtròncóbamầuvàng,đỏ,xanh đãđ−ợcđăngkýnhãnhiệuhànghóasố75571ngàycấp28.9.2006.T ạimặt5 cóhaidòngchữ" Lôsảnxuất"và"hạnsửdụng"
Bànluận
NhiệtđộcơthểthỏtrướcvàsaudùngkeoLepamed
Saukhinhỏkeovàovếtth−ơngphầnmềmvùngl−ngthỏvàchonghỉngơi90phútt r o n g phò ngtốinhiệtđộcơthểthỏkhôngtăng,thậmchícóxuhướnggiảmnhẹsovớilúcchưan h ỏ k e o Đ i ề u n à y c h ứ n g t ỏ keoL e p a m e d k h ô n g g â y p h ả n ứ n g v i ê m c ấ p c ũ n g nh−dịứ ngchocơthể,k h ô n g làmthayđổiđiểmđặtnhiệtđộR ơ l e ) củacơthểtại t h â n n ã o Vi ệ c n h i ệ t đ ộ c ơ thểg i ả m n h ẹ cót h ể do t h ỏ đ−ợcn g h ỉ n g ơ i h o à n toànt r o n g phòngtối.Chú ngtôichọnthỏlàmđộngvậttrongthínghiệmnàyvìthỏlàloại độngv ậ t c ó t h â n nhiệtr ấ t n h ạ y c ả m L−ợngkeod ù n g đ ể g â y s ố t c h o m ỗ i t h ỏ l à 2 g i ọ t / c o n 2kgtheochúngtôilàđủđểgâyphảnứngnếucó.Kếtquảnàycủachúngtôicũ ng phùh ợpvớikếtquảnghiêncứuthửnghiệmgâysốttrênthỏđốivớikeoBiogluesurgi ca l Adhesiv ed o C t y Cryolife( M ỹ ) c h ế t ạ o : n h i ệ t đ ộ chênhl ệ c h < 0 , 5 đ ộ C - ( n o n pyrogenic)– đ−ợccoilàkhôngsốt.(3)
ĐộctínhcủakeoLepamedđốivớinguyênbàosợi
Độct í n h t ế bà o l à y ế u t ố đ−ợcchol à quant r ọ n g nhấ t đ ố i vớit ấ t cả c ác l o ạ i k e o s i n h h ọ c k h i đ−avàoc ơ t h ể V ớ i n ồ n g đ ộ phal o ã n g 1 / 1 0 , t ỷ l ệ s ố n g s ó t c ủ a t ế b à o L929n uôicấylà>70%đốivớikeoGlubranvàGlubran2[3].ĐốivớiLepamedtỷlện à y là71% (đốivớinguyênbàosợi).Nh−vậy,vềđộctínhtếbào,keoLepamedcótỷl ệ sốngcủa tếbàot−ơngđ−ơngGlubranvàGlubran2.
Sởdĩchúngtôisửd ụ n g nguyênbàosợinuôicấythaychoL929vìtheochúngtôingu yê nbàosợilàloạitếbàođóngvaitròchủyếutrongquátrìnhlàmliềnvếtthương.Mặc dùkếtquả nghiêncứuchothấyvớinồngđộphaloãng1/10keoLepamedđ−ợcc h o l à k h ô n g đ ộ c đ ố i vớinguyênb à o s ỵ i nuôic ấ y , songcácl o ạ i k e o k h i sưd ơ n g th−ờnglàkeoởdạngch
−ađ−ợcphaloãng,đậmđặc100%,kểcảcácloạikeođãvà đangsửdụngtrênthếgiớinh−Glubran.Mứcđộđậmđặcnàycóthểlàmchếtmộtlớptế bàok h i t i ế p x ú c t r ự c tiếpv ớ i k e o m à n g u y ê n n h â n l à d o t r o n g q u á t r ì n h polymerh ó a , kéođ ãlàmphátsinhnhiệtđộkhoảng45 0 C.Bởivậy,việchạnchếđếnmứcthấpnhấtl−ợngkeot rongmộtlầnsửdụnglàrấtcầnthiết,saocholớpkeocàngmỏngcàngt ố t
Cácchỉsốhuyếthọcvàhóasinh
SaudùngkeoLepamed20ngàyvà40ngày,tấtcảcácxétnghiệmvềsốlượnghồngcầu,hàml ượnghuyếtsắctố,hematocrit,thểtíchtrungbìnhhồngcầu,sốlượngbạchcầu,côngthứcbạchc ầuvàsốlượngtiểucầucủathỏlôtrị(códùngkeoLepamedsauk h i phẫuthuật)đềukhôngcós ựkhácbiệtcóýnghĩathốngkêsovớithỏlôchứng( k h ô n g d ù n g k e o Lepameds a u k h i phẫuthuật)v à sov ớithờiđ iểmtrướck h i phẫuthuật(p>0,05).
Kếtquả2lầnxétnghiệmmáutrên14thỏSa u 20ngàyvà40ngàyphẫuthuật,lấymỏut hỏ,xộtnghiệmlạicỏcchỉsốhuyếthọcnhưtrờnchokết qu ả khácbiệtk h ô n g cóýnghĩathốn gkêsovớicácmẫumáutrướckhisửdụngkeo.Chúngtôiđặcb i ệ t chúýđếncácchỉsốvềhồn gcầu,bạchcầu,tiểucầu,cácmengan.SửdụngkeophẫuthuậtLepamedsaukhi phẫuthu ậtkhônglàmthayđổikếtquảcácxétnghiệmđ ánhgiáchứcnăngtạomáu(sốlượnghồngcầu ,hàmlượnghuyếtsắctố,hematocrit,t h ểtíchtrungbìnhhồngcầu,sốlượngbạchcầu,côngthứ cbạchcầuvàsốlượngtiểucầu)ở t h ỏthựcnghiệm.C ò nc á c c h ỉ sốkhác,đ ặ c b i ệ t l à b ạ c h c ầ u ( s ố l−ợng,c ô n g t h ứ c ) , cácmengan,lànhữngchỉsốcóliênquannhiềuđếnkhảnăngphùhợ psinhhọcc ủ a vậtliệuđềuthayđổikhôngcóýnghĩathốngkê.Kếtquảnàycủachúngtôicũ ngp h ù hợpvớikếtquảcủaL.Montanarovàcộngsựđãnghiêncứutrênhailoạikeophẫuthu ật làGlubranvàGlubran2[3].
KhảnăngkhángkhuẩncủakeoLepamed
Trênt h ự c t ế s ử d ụ n g , c h ú n g tôin h ậ n t h ấ y t ấ t c ả c á c v ế t th−ơngc ó s ử d ụ n g k e o L e p a m e d t r o n g ổ b ụ n g c ũ n g n h−n g o à id a đ ề u k h ô , k h ô n g c h ả y m ủ , d ị c h M ặ c d ù tr−ớc khi sửdụngkeokhôngđ−ợchấp, sấytiệt trùng.
Cáckếtquảnghiêncứuvisinhvậtbằngph−ơngphápkhuyếchtántrênthạchchoth ấ yk e o Lepamedc h o h a i v ù n g k h á n g k h u ẩ n V ù n g 1 d o t á c đ ộ n g c ơ h ọ c c ủ a s ự polymerh ó a g â y r a làmứ c c h ế sựphátt r i ể n đ ố i vớit ấ t c ả cácv i k h u ẩ n V ù n g n à y k h ô n g s ử d ụ n g đ ể đ á n h g i á k h ả n ă n g k h á n g khuẩnc ủ a k e o V ù n g h a i c h o thấyLepamedcókhảnăngứcchếsựpháttriểncủa3loạicầukhuẩngramd−ơng:S.aureus;S e p i d e r m i d i s ; S pneumoniae.T u y n h i ê n k ế t q u ả cũngc h o thấyL e p a m e d k h ô n g có khảnăngkhángvới2loạivikhuẩngramâmlàE.colivàP.aeruginosa.Nộid u n g nghiêncứu nà yc h ú n g tôidựa th eo ph−ơngphápcủaJamesV.v à cộngsựtrên k e o N-
[4].Kếtquảcủachúngtôicũngphùhợpvớikếtquảcủan h ó m tácgiảnày.Tuynhiênđ−ờngkín hvùng2củachúngtôilớnhơn.
Khảnăngcầmmáuvàkếtdínhvếtth−ơng
−ahaimépvếtth−ơngápsátvàonhau,giữtrongvòng30giâychothấyvếtth−ơnggầnnh− hoàntoànkhôngcònchảymáunhờmiệmgvếtthươngđãbịtkíndos ự k ế t d í n h c ủ a k e o , t r o n g k h i c á c v ế t t h−ơngk h ô n g d ù n g keomáuvẫnchảy.( H 1 , A,B).
Thửnghiệmn à y c h ứ n g t ỏ Lepamedc ó k h ả n ă n g c ầ m m á u rấ t t ố t đ ố i vớ i c á c m ô da, tổchứcdướida.Tuynhiên,đốivớicácmôchứanhiềumáunhưgan,cácthaotáct hườnggặp khókhăndomáuchảynhiều.
Mặtkh ác, dothờigianpolymerhóacủ ake ođể tạorasựkếtd ín hkhánhanh nên p h ẫ u thuậtviêncầnkếthợpmộtlúc3độngtác:thấmmáu,nhỏkeovàéphaimépvếtthươnghoặcd à n đ ề u k e o l ê n mặtc ắ t
(H 2 , 3 ) Vế t th−ơngd a v à m ô m ề m nếuc ó c h i ề u dàiv−ợtquá2cm,nênkhâutăngc−ờng,k hôngnênchỉdùngmộtmìnhkeo.
Cáckếtquảđạithể,vithểmôthửnghiệm
- Đốivớicácvếtthươngdasau1tuầnđãcóbiểuhiệnliềnđối vớicảhainhómcósửd ụ n g keovàkhôngsửdụngkeo.Tấtcảcácvếtthươngđềukhô,khô ngchảydịch,k hô ngcómủ,khôngs−ngtấy,phùnề.Mặtd−ớidavàvùngcơd−ớidathửng hiệmk h ô n g cóbiểuhiệnkhácth−ờng.D−ớikínhhiểnviquanghọc,bằngph−ơngpháp n h u ộ m 2màuHematoxylinvàEosin,vùngdarạchcósửdụngkeođểdính2mépv ế t t hương,sau1tuầncấutrúcđãđượctáitạogầnnhưhoàntoàn.Cáctếbàolớp đáytăngsinhlàmchobiểubìởvùngnàydàylênsovớivùngchungquanh.Từhaimépvếtt h−ơngb i ể u b ì c ó h ì n h l−ỡirìu,b ò dầnvàot r u n g t â m C ó t h ể q u a n s á t thấysựtậptru ngcủacáctếbàoviêmnh−lymphobào,t−ơngbàophíad−ớilớpvẩymáuh o ạ i t ử T u y n h i ê n ở n hó mc ó sửd ụ n g k e o c h o t h ấ y t rê n b ề m ặ t v ế t t h−ơngphẳng,ng−ợclạiởcácvếtt h−ơngkhôngdùngkeo,bềmặtlõmxuống.
- Đốivớicácvếtthươngdasau4tuần,vềmặtđạithểkhôngcósựkhácbiệtnhiềug i ữ a nhómcósửdụngkeovànhómkhôngsửdụngkeo.Tuynhiêncáchìnhảnhvithểc h o t h ấ y b i ể u b ì t r o n g v ế t t h−ơngở n h ó m k h ô n g d ù n g k e o d à y h ơ n , k h ô n g phẳng v à k h ô n g đ ồ n g đ ề u s o vớiv ù n g c h u n g q u a n h N g−ợcl ạ i b i ể u b ì c ủ a v ế t th
−ơngd a c ó s ử d ụ n g k e o r ấ t phẳng,đ ộ d à y t−ơngđ−ơngvớiđ ộ d à y b i ể u b ì d a vùng x ungquanh,(H.4;5).
H.5.Hìnhảnhvithểvếtth − ơngdathỏcódùngkeoLepamedsau4tuầnt h í nghi ệm(H.Ex50)
Tấtcảcácvếtthươngdacósửdụngkeođềukhôngthấytăngsinhquánhiềutếbàoviêm.Điề unàycũngchứngtỏLepamedkhônggâyphảnứngviêmthảiloại,đ−ợcmôt h ử nghiệmchấ pnhận.Kếtquảnàycũngphùhợpvớimộtsốtácgiảnghiêncứutrên phếq u ả n , p h ổ i vàd â y t h ầ n kinhc ừ u đ ố i vớik e o s i n h h ọ c c ó t h à n h phầnt−ơngtựL e p a m e d
[5,6]Sởdĩchúngtôikhôngdùngchỉkhâuphẫuthuậtlàmvậtliệuchứngvìcóthểảnhh−ởng đếnđ ộ c h í n h xácc ủ a c á c k ế t q u ả t r o n g c á c n ộ i d u n g n g h i ê n c ứ u k h á c , đặcbiệtlàcá cchỉsốsinhhóa,huyếthọc.
Kếtquảcủachúngtôivớivếtth−ơngsaukhixẻrờihoàntoànvớiđ−ờngxẻdài1cmtrênganchuộ tvàdùngkeoLepameddínhhaimặtxẻ,4tuầnsauhìnhảnhđạithểchothấyđườngxẻbiếnthànhsẹo. Haivùngganxẻđãliềnhoàntoànlạivớinhau,đườngxẻ đãbiếnthànhmộtmàngliênkếtmỏngnốihaivùngganbịxẻlạivớinhau.Xungquanhmàngnàycấu trúcnhumôganbìnhth−ờng.Khôngthấysựtậptrungcáctếbàoviêm.Vìthờigianvàkinhphícóhạ nnêntrongcôngtrìnhnàychúngtôich−ađisâunghiêncứuvềsựsốphậncủamàngliênkếtnàytheot hờigian,liệunócóthểsẽmỏngdầnvàbiếnmấtsaunhiềutháng.
Hìnhảnhđạithểvàvithểởnhữngvếtthươngganchuộtbịcắtmộtphầnvàdùngk eop h ủ b ề m ặ t c ũ n g chot h ấ y m ặ t c ắ t đ−ợcm ô l i ê n k ế t c h e phủt rê n b ì n h diệnk h á p h ẳn g so vớimặtcắtkhông phủkeo Cáctế bào ganmớitáitạo,bàot−ơngcóphầnn h ạ t màuhơnc áctếbàoganởvùng xungquanh Nhumôgankhôngcósựbiếnđổicấutrúc,khôngthấy cáctếbàoviêm.Trongnhiềutrườnghợpkhimổrachúngtôiđềut h ấ y cómạcnốilớnbòđếnch ephủvùngganbịcắt.Theochúngtôiđâylàphảnứngt ự nhiêncủacơthểtr−ớcmộttạngnào đótrongởbụngbịtổnthương,chảymáu.Tấtc ả cácchuộtthựcnghiệmkhimổđểlấymẫus au4tuầnchúngtôikhôngthấycómáuhaydịchtrongổbụng.Chúngtôichỉgặpmộttr−ờn ghợpdínhcáctạnglạivớinhau.Nguyênnhâncóthểdophẫuthuật.Mặcdùvậychúngtôic ũngk h u y ế n cáonêntuânt hủtheođúngnguyêntắcsửdụngkeo.
Nhưvậy,cáckếtquảnghiêncứuhìnhtháihọc,kểcảđạithểvàvithểchothấycácvết thươ ngdùngkeophẫuthuậtLepamedđềuliền,khônggâyphảnứngviêmthảiloạit ạ i chỗđốivớic ơthểsửdụng.
KeoLepamedlàvậtliệusinhhọcdạngn−ớc,chỉpolymerhóakhigặpmôitr−ờngẩ m K hivàocơthể,saukhiđ−ợcpolymerhóađểtạokhảnăngkếtdính,cácphântửcấuthànhs ẽbịcắtdầncácmạchliênkết.Quátrìnhnàygiốngnh−hiệnt−ợngđụclỗt rê n màngkeokết nốihaimặtcủavếtth−ơng,chophéphệthốngmạch,thầnkinhcủah a i mặtmôbịcắtliênhệv ànốilạivớinhau.Keochỉtồntạikhoảng2tuầntrongcơt h ể nênđâycũnglànguyênnhâ nlàmgiảmkh 7 0 % [3].Đây đ−ợccoilàkhôngđộcvớitếbào.
Vềtínht−ơngthíchvớimáu:theoL.Montanarovàcộngsựcảhailoạikeophẫut h u ậ t G l u b r a n v à G l u b r a n 2 sauthửn g h i ệ m đ ề u k h ô n g làmthayđ ổ i cóý n g h ĩ a cácc hỉtiêuvềhoạtđộngcủaprothrombin,fibrinogen,sốl−ợnghồngcầu,t i ể u cầucũngnh
Nhiễmkhuẩnlàmộtyếutốrấtquantrọnglàmcảntrởsựliềnvếtth−ơng.T h e o NguyễnTrọngLưukhisốlượngvikhuẩnvượtquá100000/1grammôthìq u á trình liềnvếtth−ơngcóthểbịcảntrởnghiêmtrọng[1].Bởivậy,tấtcảcácv ậ t liệusinhhọ ckhiđ−avàocơthểđềuphảiđảmbảovôtrùng.Mộtsốloạikeod ù n g trongphẫuthuật đãđ−ợcđánhgiálàngoàikhả năngvôtrùngcòncókhả n ă n g ứcchếmộtsốloạivik huẩn.TheoJamesV.vàcộngsự,k e o sinhhọcN-
2Butylcyanoacrylatecókhảnăngứcchếsựpháttriểncủamộtsốcầukhuẩngramd−ơng nh−ngkhônglàmứcchếsựpháttriểncủacácvikhuẩngramâm.Hailoạik e o hiệnđangs ửdụngrộngrãitrênthếgiớilàGlubranvàGlubran2cũngđ−ợct h ô n g báolàcókhảnă ngứcchếsựpháttriểncủavikhuẩn.
Quátrìnhl iề nvếtth−ơngl à m ộ t q uá trìn h rấ t p h ứ c t ạp , t rả i q u a 5g i a i đ o ạ n c h í n h vớisựthamgiacủanhiềuloạitếbàovàonhữngthờiđiểmkhácnhau. đôngmáu:tiểucầu,fibrin viêm:bạchcầutrungtính,đạithựcbào,lymphobào tạomôxơ:proteoglycan,nguyênbàosơị,collagen biểumôhóa:tạomạch sửachữa:collagenliênkếtchéo,sẹotr−ởngthành
Mỗiloạitếbàođảmnhiệmmộtchức năngtrongcảmộtquitrìnhtừkhivếtth− ơngxuấthiệnđếnkhivếtthươngliềnhoàntoàn.Tiểucầulàlọaitếbàođầut i ê n đ i đ ế n v ế t t h−ơngl à m n h i ệ m v ụ c ầ m m á u vàk h ở i p h á t h à n g l o ạ t c h o q u á trìnhsửac h ữ a l à m lànhv ế t thương.B ạ c h cầut r u n g t í n h đếns a u đ ó v ớ i c h ứ c năng th ực b ào,loạib ỏcácm ôt ổn th−ơng,cácdịvật, gâygiãnmạch, tăngtínht h ấ m maomạc h,tạođiềukiệnchocác tếbàokháccónguồngốctừmáuđivàovếtth−ơng.Chúngt hườngchếttheochươngtrìnhsaukhiđãkếtthúcnhiệmvụ.Nguyênbàosợilàl o ạ i TB chiếmưut h ế t r o n g m ô liênk ế t , c h ú n g giữvait r ò q u a n trọngtrongviệcthànhl ậpbộkhungcủamôliênkếtdocókhảnăngtạorac ác l o ạ i s ợ i l i ê n k ế t n h−collage n,e l a s t i n , proteoglycan,glycoprotein Nguyênb à o sợiđóngvaitròquantrọngtron gquátrìnhtạosẹo,làmlànhvếtth−ơng.Khim ô liênkếtbịhuỷhoại, nguyênbàosợisẽd ichuyểnđến,tăngsinh,tạoramộtl−ợnglớnchấtnềncollagengiúpchoviệccôlậpvàsửa chữavếtth−ơng.[2]
Thỏđ ực , gi ốn gn ộ i đ ị a , m ỗ i co n nặngk h o ả n g 2 k g d o T ru n g t â m nghiênc ứ u d ê v à t h ỏ S ơ n T â y c u n g c ấ p T h ỏ đ−ợcs ử d ụ n g trongn g h i ê n c ứ u đánhgiácácchỉsốvềsinhhóa,huyếthọc,gâysốtvàthínghiệmcácvếtthươ ngdavùngl−ng.
Chuộtcốngtrắngthínghiệm,180–200g/ con,doHọcviệnquânycungcấp.Chuộtcốngđ−ợcsửdụngnghiêncứucácvếtth− ơngtạng
15thỏchia2lô:8conđể1tuầnsau mổ,7conđể4tuầnsaumổ.Lấymáu địnhlượngcácchỉsốhuyếthọc,sinhhóa,lấytiêubảnmôhọcsaukhitạovếtthươn gdacósửdụngkeoLepamed.
Chuộtcốngtrắn g1 2c o n sửd ụ n g t ro n g thín gh iệ mcắtvà xẻgan(6cắ tg an ,6 xẻg a n ) t ro n g đ ó 8 c o n sử d ụ n g k e o Lepamedd í n h v ế t th−ơng,4 conchứ ng(khôngsửdụngkeo).
- Cốđịnhthỏl ê n bànm ổ , c h o n g h ỉ nghơih o à n toànt r o n g phòngt ố i 9 0 p h ú t
- Rạchd a v ù n g l−ng,n h ỏ l ê n vếtth−ơngv ừ a r ạ c h m ỗ i c o n 2 g i ọ t keo Lepamed.
- Chothuốcn h u ộ m t ế b à o vàocácgiếngcón g u y ê n b à o s ợ i v à cácd u n g dịc ht h ử N ế u t ế b à o chếtt h ì d u n g d ị c h t r o n g g i ế n g s ẽ t r o n g , k h ô n g c ó màu.Nếutếbàosốngthìdungdịchsẽcómàuxanhen.Độđậmnhạtphụthuộcv àotỷlệsốngcủatếbào.
- Đánhgiásốnguyờnbàosợicũnsốngtrongcỏcdungdịch.S o sánhtỷlệtếb à o s ố n g trongc á c d u n g dịch,c ó phal o ã n g Lepamedvớin h a u , vớidungdịchc hứng.
- Lấymáuthỏ3lầnđịnhl−ợngcácchỉsốsinhhoá,huyếthọc:mẫuchứng,m ẫu sau khisửdụngkeo6ngàyvà12ngày.
- Lậpbảng,sosánhsựkhácbiệt vềhồngcầu, huyếtsắctố,bạchcầu,tiểu c ầ u , các me ng a n v v…
- Nuôicấy5 loạiVKchủngquốctế,t r o n g đ ó3 loạig r a m d ương,2 loại gramâm
3.3.5.Đánhgiácácchỉtiêuvềkhảnăngcầmmáu,làmliềnvếtthương,cácchỉt i ê u vềđạ ithÓ,vithÓ
Thỏgâymê,rạchdadọchaibênsốngl−ng,bênphải3vết,bêntrái2vết,mỗiv ế t d à i 2 c m , s â u q u á l ớ p b i ể u b ì C á c v ế t t h−ơngb ê n p h ả i sauk h i t h ấ m máu,d ùngmộtgiọtkeoLepamednhỏlên,dùngkẹpkéohaimépvếtth−ơnglại,g i ữ 3 0 g i â y C á c v ế t th−ơngb ê n t r á i đ ể l i ề n t ự d o N g a y t ạ i l ú c t i ế n h à n h t h ử nghiệm,ch ụpản ht h e o d õi và đ á n h g i á k hảnăngcầmm á u , cốđ ị n h v ế t t h−ơngcủakeoLepam ed.
Thỏt i ế p tụcn u ô i và t h e o d õ i d i ễ n b i ế n s i n h h o ạ t , vếtth−ơngt ạ i chỗs a u m ổ Đến2thờiđiểm:1tuầnvà4tuần,chụpảnhđạithểvếtthương2bên,lấydavùngthửng hiệmhaibêncốdịnhtrongdungdịch,đúcnến,cắtlát,nhuộmH.E, đánhgiáhìnhảnhvithểbằngkínhhiểnviquanghọc.Sosánhvếtthươngcósửd ụ n g keoLepamedvàvếtth−ơngliềntựdo.
Chuộtthínghiệm:xẻ1rãnhlàmđứthoàntoànởmặttrờn1thuỳgancủamỗichu ột,mỗiđườngdài1,0cm.Thấmmáuthậtkhô,nhỏmộtgiọtkeoLepamedv à o r ã n h g a n đ ã x ẻ , d ù n g h a i n g ó n t a y é p h a i m é p g a n x ẻ l ạ i , giữcốđịnhtron gvòng30giây.Chụpảnhđánhgiákhảnăngcầmmáuvàl à m liềnvếtthươngcủa keoLepamed.
Chuộtchứng:tiếnhànht−ơngtựnh−chuộtthínghiệm.Khôngdùngkeo đểgắnvếtthương b Thínghiệmcắtgan
Chuộtt h í n g h i ệ m : c ắ t b ỏ m ộ t p h ầ n n g o ạ i v i c ủ a mộtt h u ỳ g a n.T h ấ m máuthậtsạch,nhỏmộthoặchaigiọtkeophẫuthuậtLepamedlờnmặtcắtc ò n lại,chúýdànđềukeotrêntoànbộmặtcắt.Chụpảnhđánhgiákhảnăngcầ mmáucủakeoLepamedtrênmặtcắt
Cả2 n h ó m đ ề u n u ô i vàtheodừidiễnbiếncủachuộtsau4tuần.Đ á n h g i á t ì n h t r ạ n g toànthân,tạichỗ.Đỏnhgiỏđạithểsaukhimởổbụng,lấymôthínghiệm,c ố đ ị n h , đúc ,c ắ t , n h u ộ m H E , đ á n h g i á t r ê n k í n h h i ể n v i q u a n g h ọ c K ỹ thuậtt h ự c hiệnt ạiBộmônMô-Phôitr−ờngĐạihọcYHànội.
TT Nhiệt độtrướcSDkeo NhiệtđộtrướcSD keo Chênhlệch
NhËnxÐt:saunhỏkeo90phút,cả5thỏđềukhôngsốt.Nhiệtđộcóxuh ướnggiảm đều.Trungbìnhgiảm>0,3độC.
Nhậnxột:Cỏcgiếngc ú nồngđ ộ L e p a m e dđặc:d u n g d ịcht r o n g giếngk h ụ n g m à u Cỏcgiếngcúnồngđộphaloóngẵ:d u n g dịchcómàuxanhnhạt,từ1/10trởxuốn g,d u n g d ịchtrongcácgiếngc ó m à u xanhđen.Nhưvậy,t ỷl ệk e o L e p a m e d phal oãng1 / 1 0 trởxuốngcácnguyênbàosợicótỷlệsốngcao.Địnhlượngchothấytỷlệnày là71,26%.
Bảng2.Sốl − ợnghồngcầuthỏtr − ớcvàsaudùngkeoLepamed6,12ngày
Kếtquảtrìnhbàyởbảng2chothấy:sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,sốlượnghồn gcầuthayđổicóýnghĩaở2lôsovớilôchứng(p0.05)
Kếtquảtrìnhbàyởbảng4chothấy:sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,sốlượnghuyếtsắctố thayđổicóýnghĩaở2lôsovớilôchứng(p0.05).
Kếtquảtrìnhbàyởbảng5chothấy:Tỷlệbạchcầulymphovàđanhântrungtínhthay đổikhôngcóýnghĩaở2lôthỏdùngkeo6ngàyvà12ngàysovớitrướckhidùngkeo(P
Bảng6 Sốl − ợngtiểucầuthỏtr − ớcvàsaudùngkeoLepamed6,12ngày
Kếtquảtrìnhbàyởbảng6chothấy:sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,sốl ượngtiể ucầuthayđổikhôngcóýnghĩaở2lôsovớilôchứng(p>0.05).
Bảng7.ASTth ỏtr − ớcvàsaudùngkeoLepamed6,12ngày
Kếtquảbảng7chothấy:Sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,hoạtđộenzymAST ở2lôthayđổikhôngcóýnghĩasovớilôchứng(p>0.05).
Bảng8.ALTth ỏtr − ớcvàsaudùngkeoLepamed6,12ngày
Kếtquảbảng8chothấy:Sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,hoạtđộenzymAST ở2lôthayđổikhôngcóýnghĩasovớilôchứng(p>0.05).
Kếtquảbảng9chothấy:Sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,hàmlượngalbumintrongmáuthỏở 2lôthayđổikhôngcóýnghĩasovớilôchứng(p>0.05)
Sau6 n g à y v à 1 2 n g à y d ù n g k e o , h à m lượngc h o l e s t e r o l t r o n g máut h ỏở 2 l ô thayđổikhôngcóýnghĩasovớilôchứng(p>0.05).
Bảng11.Bilirubintoànphầntrongmáu thá trướcvàsausửdụngkeo6,12ngày
Sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,lượngbilirubintoànphầntrongmáuthỏở2lôt h a y đổik hôngcóýnghĩasovớilôchứng(p>0.05).
Sau6ngàyvà12ngàydùngkeo,lượngcreatinintrongmáuthỏở2lôthayđổikhôngcó ýnghĩasovớilôchứng.(p>0.05).
4.4 Kếtq u ả đ á n h g i á khảnăngứ c c h ế củakeoLepamedlên5 l o ạ i v i kh uẩ n chủngquốctếth−ờnggặ p
STT Vikhuẩn Đườngkínhvùng1(mm) Đườngkínhvùng2( mm) Lần
Vùng1quansátđượcởtấtcảcácđĩathạchthửnghiệm.Cácvikhuẩnbịứcchếsựp h á t triểnt r o n g v ù n g n à y l à d oyếut ốl ý học( nhiệtđ ộ t ỏar a k h i ke o polymerh ó a t r o n g m ụ i trườngthạchl à c h ế t h o ặ c ứ c c h ế v i k h u ẩ n ) V ù n g n à y k h ô n g sửdụngđ ểđánhgiákhảnăngkhángkhuẩncủavậtliệunghiêncứu.
Vựng2chỉquansỏtquansỏtđượcr ừ ràngtrờncácđĩathửnghiệmvớicỏcchủngcầu khuẩnG r a m d ươngvớicácđườngk ớ n h k h ỏ c n h a u , t ừ3 2 –
39mm.Nhưvậy,LEPAMEDcókhảnăngứcchếsựpháttriểncủacáccầukhuẩnGramd ươngthửnghiệm.Vớicácvi khuẩnG ra m âm,khôngquansát thấyvòngvô khuẩnn ằmbờnngoàivựng1(khôngcóvùng2)cúnghĩalàLEPAMEDkhôngcókhảnăng ứcchếsựpháttriểnđ ố i vớicácvikhuẩnn y.à d1:®−êngkÝnh vùng1d 2 : đ−ờngkính vùng2 H.4.LepamedkhángvớiS.aureus.Đườngkínhvùng2khárộng.(39mm)
Saukhirạchda,máuđ−ợcthấmkhô,quyệthaimépvếtth−ơngbằngmộtlớ p ke oLepamedmỏng, dùngkẹpphẫutíchkhép haimépvếtth−ơngvàonhaukhoảng3
0 g i â y S a u k h i tháok ẹ p , h a i mépvếtth−ơngđ ã d í n h c h ặ t v à o n h a u , tạ o t h à n h m ộ t d ả i m ô c ứ n g , vếtth−ơngk h ô n g cònc h ả y m á u
(H.9B).T ạ i v ế t t h−ơngk h ô n g d ù n g keo,t i ế p tụcc h ả y m á u t r o n g vàip h ú t v à c h ỉ cầmm á u s a u k h i tạodảimáuđôngtrênbềmặtgiữahaimépvếtthương.(H.9A)
Cắtbỏmộtphầnthùyganvùngngoạivi,mặtcắtcònlạichảymáunhiều. (H.10A ) T u y n h i ê n s a u k h i đ−ợcphủm ộ t lớpkeoLepamedtrongkhoảng10g i â y , l ớpkeođôngđặclại,mặtcắtngaylậptứckhôngcònchảymáu.(H.10B)
A Ch−aphủkeo Lepamed B.PhủkeoLepamedsau10giây
Tạih a i b ờ m é p vếtth−ơng,m ộ t l ớ p keoL e p a m e d m ỏ n g đ−ợcđ−avào,k h é p haibờméovếtthươngbằnghaingóntay,đểkhoảng10giây,haimépvếtt hươngdí nhliền,khôngcònchảymáu.(H11.A,B)
H.11Vếtth−ơngxẻdọcthùyganA.Ch−aphủkeoLepamed;BĐãphủkeoLepamed
Tấtc ả đ ộ n g vậtt h í n g h i ệ m s a u m ổ đ ề u sống,ă n u ố n g , sinhh o ạ t b ì n h t h−ờng.C á c v ế t m ổ t i ế n t r i ể n t ố t t h e o t h ờ i g i a n , k h ô , k h ô n g c h ả y d ị c h , m ủ Khôngcóhiệnt−ơngnhiễmtrùng
Vếtth−ơngcósưdơngkeoởgiaiđoạnmộttuầnmiƯngkhô,haimépkhítvàítti ếtdịchhơnởvếtth−ơngkhôngdùngkeo. ởgiaiđoạn4tuần,tấtcảcácvếtthươngđềuliềnởcảthỏdùngkeovàkhôngd ù n g k e o
T u y n h i ê n c á c v ế t t h−ơngc ó d ù n g k e o Lepameds ẹ o đ ẹ p h ơ n v ế t th−ơngkhô ngdùngkeo.(H.12AvàB)
Saukhiphụchồithànhbụng,độngvậtđ−ợcthảvềchuồngvànuôitiếp.Khiphẫ ut í c h l ấ y m ẫ u l à m t i ê u bản,t r o n g ổ b ụ n g k h ô n g cóh i ệ n t−ợngc h ả y m á u t r o n g , khôngviêm,dính.Mộtsốvếtthươngcómạcnốiđếnchephủ.(H.12A,B).
A Vùnggansaukhic ắ t đ−ợcphủke oLepamed.4 tuầns a u ganmớitáitạo, v ù n g nhumôganmớinhạtmàu,mạcnốiđếnchephủ
B Vùngga nsauk h i x ẻ d ù n g k e o Lepamedd í n h ha i m é p v ế t t h−ơng.4 tuầnsauđ
4.4.4.1.th−ơngda thỏ vùng l−ng sau1 tuần thí nghiệm
Vìvếtthươngvùngnàykhôngđượckhâu,đểliềntựdonênmôvùngnàyhơil õ m xuố ng,t r ê n mặtcắtcóhìnhchữV.Tạiđáyvếtthương,môliênkếtđãpháttriển,dạngcấutrúc môhạt.Trênbềmặt,tếbàoviêmtậptrungdàyđặc.Từ2 bờmépvếtthương,biểumôđangti ếnvàocóhìnhl−ỡirìunh−ngch−anốiliềnvớinhau.Trênbềmặtvếtth−ơngvẫntồntạivẩy máuvàmôhoạitử.(H.13)
Quát r ì n h t ạ o m ô h ạ t ở v ù n g c h â n b ì v à s ự p h á t t r i ể n c ủ a b i ể u b ì t ừ 2 m é p v ế t th ươngc ũ n g c ó h ì n h ả n h tươngt ự nhưđãm ô trảở t r ê n T u y n h i ê n b ề m ặ t v ế t t hươn gp h ẳ n g T r ê n b ề m ặ t , m ộ t d ả i m á u môh o ạ i t ử d à y n ố i l i ề n 2 m é p v ế t th−ơn g.Cáctếbàoviêmxuấthiệngiữavẩymôhoạitửvàlớpmôhạtđangpháttr iể n. (H.14)
4.4.4.2 Vếtth−ơng da thỏ vùngl−ngsau4 tuần thínghiệm
Vếtt h−ơngđ ã l i ề n h o à n t o à n C h â n b ì vàh ạ b ì m ô l i ê n kếtp h á t t r i ể n , n h ú c hân bìcao,rấtítlông.Biểumôdàygồmnhiềuhàngtếbàosừng,pháttriểnm ạ n h hơn, dàyhơnvùngchungquanhvếtth−ơng.(H.15)
Biểumômớisinhdàyhơnbiểumôvùngxungquanh.Nhúchânbìphẳng,chânb ìc hủyếulàmôliênkết,rấtítcáccụmnanglông(H.16)
Haimépđườngxẻ đã liềnhoà nt oà n bởimộtmôliênkết mỏng, khôngđều M ô g a n x u n g q u a n h d ả i m ô l i ê n k ế t b ì n h t h−ờng.Mộts ố v ù n g x u n g h u y ế t Đỉnhmépvếtth−ơngmôliênkếtdàyhơnhẳnvùngxungquanh.(H.17H.Ex5 0 )
H.17 Hìnhả n h vit h ể vếtth−ơngg a n c h u ộ t s a u x ẻ 4 t u ầ n k h ô n g p h ủ ke oLepamed(H.Ex50)
- Vếtth−ơngxẻdọcthùygancósửdụngkeoLepamed:Môganhaibênđ−ờngxẻcũ ngđãliềnhoàntoàn,liênkếtvới nhaubởimộtdảimôliênkếtmỏng.Cáctếbàoga nquanhvếtth−ơnghoàntoànbìnhth−ờng.(H4.10A.H.Ex50B.H.Ex 200)
Phầnnhumôbịcắtđ−ợcchephủbởimôliênkếtvàmỡcủamạcnối,cótr−ờngh ợpchephủcảmôtụy.Diệnchephủth−ờngkhôngphẳng.Cáctếbàoganvùngnàycóbàot− ơngsángmàu,cấutrúcnhumôganbìnhth−ờng.(H.19)
Lepamedsau4 t u ầ n Mặtcắtc ò n l ạ i đ ã l i ề n n h−ngk h ô n g phẳng,m ô c ủ a m ạ c n ố i vàtụyđếnchephủ.(H.Ex50)
Môganthuộcphầncònlạisaut h ủ thuậtcắtbỏmộtphầnthùygancóphủk eo Lepa medsau4tuÇn.
Tầngmôliênkếtmớisinhchephủmôgantươngđốiphẳng,dày,cótếbàolimph oxâmnhập,liênhệchặtchẽvớimôgan.Môgantiếpxúcvớitầngmôliênk ết c ó c ấ u t r ú c h o à n toànb ì n h t h−ờng.T u y n h i ê n cáctếbà og a n c ũ n g c ó b à o t−ơngsángmàu.Ph íangoàitầngmôliênkếtlàmôcủa mạcnối.(H.20A,B)
L e p a m e d sau4tuần.Tầngmôliênkếtchephủmặtcắtphẳngtươngđốiphẳng,l i ên hệ chặtchẽvớimôgan,cáctếbàogancóbàot−ơngsángmàu.(A.H.Ex50B H.E400)
KeophẫuthuâtLepamedd o Việnt r a n g thiếtbịYtếsảnxuấtđãđượ cthửnghiệmtrê ncơthểđộngvật(invivo)vàtrongốngnghiệm(invitro)tạiBộmônM ô Phôivớisựphối hợpmộtsốBộmônkháccủaTrườngĐạihọcYHàNội.M ô h ì n h t h ửnghiệmc ó t h a m khảom ộ t sốk ỹ t h u ậ t v à ph−ơngphápcủac ỏ c n ướcvàdựatrờnkếtquảthửnghiệm2 mẫukeocóthànhphầnhóahọct−ơngtựkeoLepamedcủaItaliađ óđượcsửd ụngt ừl õ u t r ờ n t h ếgiớil à G l u b r a n v à Glubran2 Kếtq u ảt h ửnghiệmt ạ i c h ỗ t r ê n đ ộ n g vËtchothấyk e o phẫuthuậtL e p a m e d c ó k h ản ăngkếtd í n h c a o saukhoảng1 p h ú t sửd ụngtrờnmụđ ộ ngvật.Q u ỏ t r ỡ n h kếtd ớ n h c ú t ỏ c dụngcầmm á u t ứ c t h ờ i , t h a ychỉk h â u n ốivếtt hương.N h ữngyếut ốn à y đápứ ngv a i t r ò t h a y thếc á c mũik h â u t r o n g phẫuthuật.Bệnhnhândùngkeothaychoviệckhâubằngchỉsẽrútngắnthờigia nnằmviện,khôngphảiquaylạibệnhviệnđểcắtchỉ,vếtmổsẽcósẹođẹphơn.Vìcókhảnăn gcầmmáunhanhnênkeocóthểdùngđểsơcứubướcđầucácvếtthươngmạchmáulớntron gkhichuyểnvềcáctrungtâmngoạikhoa.
Cỏckếtq u ản g h i ờ n cứuvềk h ả n ă n g gâysốt,đ ộ ct ớ n hđốiv ớ i t ế b à o , tínhtươn gthíchvớimáu,k h ảnăngkhỏngkhuẩn,khảnăngphùhợpvàliềnmôcủakeophẫuth uậtLepamedchothấykhôngcósựkhácbiệtnhiềusovới2loạikeocủaItalialàGlubranv àGlubran2.
Sauk h i n h ỏk e o vàovếtthươngphầnm ềmvù ng l ưngthỏv à c h o n g h ỉn g h ơi9 0phúttrong phòngtốinhiệtđộcơthểth ỏkhôngtăng,thậmchícóxuhướnggiảmnhẹs ov ớil ú c chưan h ỏk e o Điềunàychứngt ỏkeoL e p a m e d k hôn g gâyphảnứngviê mcấpcũngnhưdịứngchocơthể,khônglàmthayđổiđiểmđặtnhiệtđộ(Rơle)củacơthể tạithânnão.Việcnhiệtđộcơthể giảmnhẹcóthểdothỏđượcnghỉnghơihoàntoàntrongphòngtối.Chúngtôichọ nthỏlàmđộngvậttrongthínghiệmnàyvìthỏlàloạiđộngvậtcóthânnhiệtrấtnhạyc ảm.Lượngkeo dù ng đểgây sốtcho mỗithỏlà2 giọt/ con2k gt h e o chúngtôilàđủ đểgâyphảnứngnếucó.Kếtquảnàycủachúng tôicũn gp h ù hợpvớikếtquảnghiêncứuthửnghiệmgâysèttrênthỏđốivớikeoBiogluesurgica lAdhesivedoCtyCryolife(Mỹ)chếtạo:nhiệtđộchênhlệch70%đốivớikeoGlubranvàGlubran2[3].Đốiv ớiLepamedt ỷ lệnàylà7 1%
(đốivớinguyênbàosợi).Nhưvậy,vềđộctínhtếbào,keoLepamedcótỷlệsốngcủat ếbàotươngđươngGlubranvàG lu br a n 2.Sởd ĩ chúngtô isửdụngn gu yên bà o sợi nuôicấ yt hay choL 92 9vìt h e o chúngtôinguyênbàosợilàloạitếbàođóngvaitròch ủyếutrongquátrìnhlà m liềnvếtth−ơng.Mặcdùkếtquảnghiêncứuchothấyvớinồng độphaloãng1 / 1 0 k e o L e p a m e d đ−ợcchol à k h ô n g đ ộ c vớinguyênb à o sợin u ô i c Ê y , songcácloạikeo khisửdụngth−ênglàkeo ởdạngchưađượ cphaloãng, đậm đặc1 0 0 % , kểcảcácloạikeođãvàđangsửdụngtrênthếgiớinhưGlubran.Mứcđộđậm đặcnàycút h ể l mà chếtm ộ t l ớ ptếbàokhitiếpxỳctrựctiếpvớikeomànguyờnnhõn làdo trongq u á t r ì n hp o l y m e r h úa, keođól à mphỏtsinhnhiệtđộkhoảng45độC. Bởivậy,việchạnchếđếnmứcthấpnhấtl−ợngkeotrongm ột lầnsửdụnglàrấtcầnthiế t,saocholớpkeocàngmỏngcàngtốt.
Kếtq u ả2 lầnxétn g h i ệ m m á ut r ờ n 1 5 t h ỏc ỏ c h n h a u 6 ngày(6;và12n g à y ) c h okếtq u ảkhácbiệtk h ô n g c ó ý nghĩathốngk ê s o vớicácmẫum á u t r ướckhisử dụngkeo.Chúngtôiđặcbiệtchúýđếncácchỉsốvềhồngcầu, bạchcầu,tiểucầu,cỏcmengan.Tuynhiênch ú n g tôicó ghinhậnsựkhỏcbiệtv ềsốl ượ ngv à huyếtsắct ốh ồngcầu(giảm)g i ữan h ó m c h ứng( t r ướck h i sửdụngkeo)vàhai nhúmsửdụngkeo.Đềnghịtiếptụcnghiêncứuthêm.Còncácch ỉ s ố k h á c , đ ặ c b i ệ t l à bạchc ầ u (sốl−ợng,c ô n g t h ứ c ) , cácm e n g a n - đ â y l à n h ữ n g chỉsốcóliênquannhiềuđếnkhảnăngphùhợpsinhhọccủavậtliệuđ ềuthayđ ổ i k h ô n g cóý n g h ĩ a t h ố n g kê.Kếtq u ả n à y củachúngt ô i c ũ n g p h ù h ợ p v ớ i k ế t q u ả c ủ a L.M o n t a n a r o v à c ộ n g s ự đ ã nghiênc ứ u t r ê n h a i l o ạ i k e o p h ẫ u t h u ậ t làGlubranvàGlubran2[3].
Trênthựct ếsửd ụng,c h ú n g tôinhậnthấytấtcảc á c vếtthươngc ó sửd ụngkeo
L e p a m e d t r o n g ổbụngcũngn h ưngoàid a đềuk h ô , kh ôn g chảymủ,dịch.Mặcdùt rướckhisửdụngkeokhôngđượchấp,sấytiệttrùng.
Cáckếtq u ản g h i ê n cứuv i sinhvậtbằngp h ươngp h á p khuyếcht á n trênthạchc hothấykeoLepamedchohaivùngkhángkhuẩn.Vùng1dotácđộngcơhọccủas ựp o l y m e r h ú a g õ y r al à m ứ c c h ế s ự phátt r i ể n đ ố i vớit ấtcảc ỏ c v i khuẩn.V ự n g n à y k h ô n g sửdụngđ ể đ ánhg i á k h ảnăngk h á n g khuẩncủak e o V ù n g h a i c h o thấyL epamedc ó k h ả n ă n g ứ c c h ế sựphátt r i ể n của3 loạicầukhuẩngramdương:S.aureu s;S.epidermidis;S.pneumoniae.Tuynhiênkếtquảc ũ n g chothấyL e pa m e d khô ngcókhảnăngkhángvớicác2loạivikhuẩngram âml àE c o l i v à P aeruginosa.N ộ i d u n g nghiênc ứ u nàyc h ú n g t ô i d ự a t h e o ph−ơngphápcủaJamesV.vàcộngsựtrênkeoN-2Butylcyanoacrylate.
[4].Kếtq u ả c ủ a c h ú n g tôic ũ n g phùh ợ p v ớ i k ế t q u ả c ủ a n h ó m t á c g i ả n à y T u y n h i ê n đ−ờngkínhvùng2củachúngtôilớnhơn.
Hìnhảnhtrêncácvếtth−ơngdasaukhicắt,thấmmáunhanhvàphủkeoLepam edsauđóđưahaimépvếtthươngápsátvàonhau,giữtrongvòng
30giâychothấyvếtth−ơnggầnnh−hoàntoànkhôngcònchảymáunhờmiệm gvếtt h−ơngđ ã b ị t k í n d o s ự k ế t d í n h củak e o , trongk h i cácv ế t th−ơngk h ô n g dùn gkeomáuvẫnchảy.
(H.9,A,B).ThửnghiệmnàychứngtỏLepamedc ó khảnăngcầmmáurấttốtđốivớic ácmôda,tổchứcdướida.Tuynhiên,đốiv ớ i cácmôchứanhiềumáunhưgan,cácthaot ácth−ờnggặpkhókhăndomáuch ả y n h i ề u M ặ t khác,d o t h ờ i g i a n polymerh ó a c ủak e o đ ể t ạ o r a s ự k ế t d í n h k h á nhanhnênphẫuthuậtviêncầnkếthợpmộtlúc3đ ộngtác:thấmmáu,n h ỏ keov à é p h a i m é p vếtt hươngh o ặ c d à n đềuk e o l ê n mặ tcắt.
( H 1 0 , 1 1 ) V ế t t h−ơngd a v à m ô m ề m nếuc ó chiềud à i v−ợtq u á 2 c m , n ê n k h â u t ă n g c−ờng,kh ôn gnênchỉdùngmộtmìnhkeo.
- Đốivớicỏcvếtthươngdasau1tuầnđócúbiểuhiệnliềnđốivớicảhain h ó m c ó s ử d ụ n g k e o v à k h ô n g sửd ụ n g k e o Tấtcảc ỏ c vếtthươngđềuk h ụ , khụngchảydịc h,khôngcómủ,khôngsưngtấy,phùnề.Mặtdướidavàvùngcơdướidathửnghiệmkhô ngcóbiểuhiệnkhácthường.Dướikínhhiểnviquangh ọc,bằngphươngphápnhuộ m2màuHematoxylinvàEosin,v ù n g darạchcósửdụngkeođểdính2mépvếtthư ơng,sau1tuầncấutrúcđãđượctáitạogầnnh ưhoàntoàn.Cáctếbàolớpđáytăngsinhl àmchobiểubỡởvựngnàydàylờnsovớivựngchungquanh.Từhaimépvếtth−ơngbiểub ìcóhìnhl−ỡirìu,bòdầnv àot r u n g t â m C ó t h ểq u a n sỏtthấys ựtậpt r u n g củac ỏ c t ếb à o viờmn h ưlymphobào,t−ơngbàophíad−ớilớpvẩymáuhoạitử.Tuynhiờn ởnhómcósửdụngk e o c h o t h ấ y t r ê n b ề mặtv ế t th−ơngp h ẳ n g , n g−ợcl ạ i ở các v ế t th−ơngk hôn gdùngkeo,bềmặtlõmxuống.
- Đốivớic ác vếtt hươngdasau4t uầ n, vềmặ tđạith ểk h ô n g có sựkh ác b iệ t n h i ề u g i ữ a n h ó m c ó s ử d ụ n g k e o v à n h ó m k h ô n g sửd ụ n g k e o T u y n h i ê n cá ch ì n h ả n h v i t h ể c h o t h ấ y b i ể u b ì t r o n g vếtt h−ơngở n h ó m k h ô n g d ù n g keodày hơn,khôngphẳng v à kh ôn gđồngđềusovớivùngchungq uan h Ng−ợclại biểubìcủavếtthươngdacósửdụngkeorấtphẳng,độdàytươngđươngvớiđộd à y biể ubìdavùngchungquanh,(H.15;16).
Tấtcảc á c v ế t th−ơngd a cós ử d ụ n g keođ ề u k h ô n g t h ấ y t ă n g s i n h q u á n h i ề u tếbàoviêm.ĐiềunàycũngchứngtỏLepamedkhônggâyphảnứngviêmthải loại,đ−ợcmôthửnghiệmchấpnhận.Kếtquảnàycũngphùhợpvớimộtsốt á c g i ả n g h i ê n c ứ u t r ê n p h ế q u ả n , p h ổ i v à d â y t h ầ n k i n h c ừ u đ ố i v ớ i k e o sinhh ọ c cóth ànhphầnt−ơngtựLepamed.
−ởngđếnđộchínhxáccủacáckếtq u ả t ro n g c á c n ộ i dungn g h i ê n c ứ u khác,đ ặ c b i ệ t l à c á c ch ỉ s ố sinhh ó a , h u y ế t h ọ c
1 c m t r ê n g a n chu ộtvà d ù n g ke oLepamedd í n h hai mặtxẻ,4 tuầns a u hình ảnhđ ạithểchothấyđườngxẻbiếnthànhsẹo.Haivựngganxẻđóliềnhoàntoànlạivớinhau,đư ờngxẻđãbiếnthànhmộtmàngliênkếtmỏngnốihaivùngg a n bịxẻlạivớinhau.Xungq uanhmàngnàycấutrúcnhumôganbìnhthường.Khôngthấysựt Ë p trungcáctếbàovi êm.Vìthờigianvàkinhphícóhạnnêntrongcôngtrìnhnàychúngtôichưađisâun ghiờncứuvềsựsốphậncủamàngl i ờ n kếtn à y t h e o thờig i a n ,l i ệ u n ócú thểs ẽmỏng dầnv à biếnmấts a u nhiềuth á ng
Hỡnhảnhđạithểvàvithểởnhữngvếtth−ơngganchuộtbịcắtmộtphầnv àdựngk eophủbềmặtcũngchothấymặtcắtđượ cmôliênkếtchephủtrênb ì n h diệnkháphẳ ngsovớimặtcắtkhụngphủkeo.Cỏctếbàoganmớitỏitạo,b ào t−ơngc ú phầnn h ạtm à uh ơnc á c t ế b à o g a n ở vùngx u n g q u a n h N h u m ô g a n k h ô n gc ú s ựb i ếnđ ổ ic ấut r ỳ c , k h ụ n g thấyc ỏ c t ếbàov i ờ m T r o n g n h i ề u t r−ờnghợpk h i mổrachỳn gtôiđềuthấycómạcnốilớnbòđếnchephủvùngganbịcắt.Theochúngtôiđâyphảnứ ngtựnhiêncủacơthểtrướcmộttạngnàođótrongởbụngbịtổnthương,chảymáu.Tấtcả cácchuộtthựcnghiệmkhimổđ ể lấymẫusau4tuầnchúngtôikhôngthấycómáuhaydịc h trongổ bụng.Chúngt ô i c h ỉgặpmộtt r ườngh ợpd í n h c á c tạnglạivớin h a u N g u y ê n nhâncóthểdophẫuthuật.Mặcdùvậychúngtôicũngkhuyếncáonênt u â n thủtheođ úngnguyêntắcsửdụngkeo.
Nhưvậy,cáckếtquảnghiêncứuhìnhtháihọc,kểcảđạithểvàvithểchothấyc á c v ếtt h ươngd ù n g k e o phẫuthuậtLepamedđềuliền,k h ô n g g â y phảnứ ngviêmthảilo ạitạichỗđốivớicơthểsửdụng.
KeoLepamedlàvậtl i ệusinhh ọcdạngn ước,chỉpolymerhóakhig ặpm ô i trường ẩm.Khivàocơthể,saukhiđượcpolymerhóađểtạokhảnăngkếtdính,cácphântửcấ uthànhsẽbịcắtdầncácmạchliênkết.Quátrìnhnàygiốngn h ưhiệntượngđụclỗtrênm àngkeokếtnốihaimặtcủa vếtth−ơng,chophộphệthốngmạch,thầnkinhcủahaimặ tmôbịcắtliênhệvànốilạivớinhau.Keochỉtồntạikhoảng2tuầntrong cơth ểnênđâyc ò n g l à n g u y ê n n h â n l à m giảmk h ảnănggõyphảnứngviờmthảiloại.Vỡkeokhụngphả ilàvậtliệurắn,khôngcốđịnhtạimộtmônàotrongthờigiandàinênviệcnghiêncứuvềhì nhtháihọcđ ố ivớicácmôtiếpxúctrựctiếpvớikeolàkhókhăn.Theochúngtôi,cáckết q u ảnghiêncứuv ềđ ộ ct í n h tếb à o , k h ản ăngt ươngthíchvớimáu,k h ản ăngkhán g khuẩncầnđượcxemlànhữngyếutốquantrọngđ ể đánhgiákhảnăngphùhợpsinhh ọccủavậtliệu.Khảnăngliềnmô,tìnhtrạngmôtạivùngtiếpxúcv ớikeovềmặthìnhthái học,cóthểxemlànhữngyếutốđánhgiáhiệuquảsửd ụngcủakeotrêncơthểsống.
Kếtdínhngayhaibờmépvếtth−ơng,bềmặtvếtth−ơngphẳng.S a u 4t uầnthửnghiệm:
Vếtth−ơngdakhô,cấutrúccáctầngmôdagầnnh−trạngtháibìnht h−ờng
2 Tiếptụcnghiêncứuthêmtrênmộtsốtạngrỗngvàm ô cứng(nhưnốiruột,bịtl ỗthủn gd ạd à y , gắnkếtxươngg ã y , t r ộnk e o v ớib ộtxươnglấpc á c ổ khuyếtxương).