(Luận văn) nghiên cứu xây dựng phương pháp phân tích diphenyl phosphate (dpp) trong nước tiểu bằng phương pháp sắc ký lỏng ghép nối khối phổ (lcms) để đánh giá rủi ro sức khỏe của hóa chất này đến con người

lu NGUYỄN THỊ THANH NGA BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM VÀ ĐÀO TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ an n va Nguyễn Thị Thanh Nga p ie gh tn to w d oa nl oi lm ul nf va an lu HĨA PHÂN TÍCH NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH DIPHENYL PHOSPHATE (DPP) TRONG NƯỚC TIỂU BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG GHÉP NỐI KHỐI PHỔ (LC/MS) ĐỂ ĐÁNH GIÁ RỦI RO SỨC KHỎE CỦA HÓA CHẤT NÀY ĐẾN CON NGƯỜI z at nh LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA PHÂN TÍCH z m co l gm @ 2022 an Lu Hà Nội - 2022 n va ac th si BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ lu an va n Nguyễn Thị Thanh Nga gh tn to p ie NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH DIPHENYL PHOSPHATE (DPP) TRONG NƯỚC TIỂU BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG GHÉP NỐI KHỐI PHỔ (LC/MS) ĐỂ ĐÁNH GIÁ RỦI RO SỨC KHỎE CỦA HÓA CHẤT NÀY ĐẾN CON NGƯỜI d oa nl w va an lu oi lm ul nf Chuyên ngành : Hóa phân tích Mã số: 8440118 z at nh LUẬN VĂN THẠC SĨ NGÀNH HÓA HỌC z gm @ m co l NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : TS Trịnh Thu Hà an Lu Hà Nội - 2022 n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Những nội dung luận văn thực hướng dẫn TS Trịnh Thu Hà Mọi tham khảo dùng luận văn tơi trích dẫn nguồn gốc rõ ràng Các kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình Tơi xin chịu trách nhiệm vấn đề liên quan đến nội dung đề tài lu an Tác giả n va ie gh tn to p Nguyễn Thị Thanh Nga d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập Học viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ thầy cơ, gia đình bạn bè Với tình cảm sâu sắc, chân thành, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: Các thầy cô giáo Học viện Khoa Học Công Nghệ trang bị cho lu em kiến thức bổ ích Đây tảng vững không giúp em thời gian em thực Luận văn tốt nghiệp mà hành trang an n va chuyên môn vững kinh nghiệm lý thuyết thực tiễn mà cô truyền đạt giúp em củng cố gh tn to TS Trịnh Thu Hà – người cô quan tâm tạo điều kiện để em hoàn thành luận văn tốt nghiệp cách tốt Những kiến thức p ie kiến thức nâng cao kỹ chuyên mơn d oa nl w Em xin chân thành cảm ơn hỗ trợ kinh phí đề tài “Xây dựng quy trình tiêu chuẩn xác định chất chống cháy môi trường, vật liệu chống cháy đánh giá mức độ nguy hại đến sức khỏe người”, mã số: an lu TĐPCCC.05/21-23” giúp em hoàn thành luận văn oi lm tốt nghiệp ul nf va Sau em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè động viên, khích lệ tạo điều kiện tốt để em hồn thành khóa luận z at nh Do thời gian kinh nghiệm hạn chế, báo cáo khơng tránh khỏi thiếu sót Em mong nhận bảo, góp ý thầy cô z m co l gm @ Em xin chân thành cảm ơn an Lu n va ac th si MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu sản phẩm chuyển hóa nhóm hợp chất este hữu photphat (OPE) 1.2 Độc tính chuyển hóa triphenyl phosphate (TPP) lu thể người an 1.3 Giới thiệu hợp chất phân tích DPP va n 1.4 Nguồn gốc phát sinh diphenyl photphat (DPP) to 1.6 Phương pháp chiết tách mẫu môi trường sinh học 10 p ie gh tn 1.5 Ảnh hưởng DPP TPP tới sức khỏe người 1.6.1 Một số kỹ thuật chiết tách 10 oa nl w 1.6.2 Các phương pháp chiết tách OPFRs mẫu sinh học 12 d 1.7 Phương pháp phân tích mẫu nước tiểu 15 lu an 1.8 Các công thức tính tốn kết 17 nf va CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 19 oi lm ul 2.1 Nội dung phương pháp nghiên cứu 19 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 19 z at nh 2.1.2 Mục tiêu nghiên cứu 19 z 2.1.3 Mẫu nghiên cứu 19 gm @ 2.1.4 Nội dung nghiên cứu 19 l 2.2 Hóa chất, dụng cụ thiết bị 20 m co 2.2.1 Hóa chất 20 an Lu 2.2.2 Dụng cụ thiết bị 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu 21 va n 2.3.1 Phương pháp lấy bảo quản mẫu 21 ac th si 2.3.2 Lựa chọn điều kiện phân tích thiết bị LC/MS-MS 21 2.3.3 Xây dựng phương pháp chiết tách mẫu 21 2.4 Thẩm định phương pháp 22 2.4.1 Khảo sát đường chuẩn kiểm tra độ tuyến tính 22 2.4.2 Khảo sát giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng giới hạn định lượng phương pháp 23 2.4.3 Khảo sát độ thu hồi độ phương pháp 24 lu 2.5 Phân tích mẫu thực tế 24 an 2.6 Phương pháp xử lý số liệu 24 va n 2.7 Đánh giá mức độ phơi nhiễm DPP 24 3.1 Điều kiện phân tích chất LC-MS/MS 25 p ie gh tn to CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 3.2 Khảo sát quy trình chiết tách mẫu 28 oa nl w 3.3 Kết xác nhận giá trị sử dụng phương pháp 29 d 3.3.1 Xây dựng đường chuẩn kiểm tra độ tuyến tính 29 lu an 3.3.2 Giới hạn phát định lượng phương pháp 30 nf va 3.3.4 Khảo sát độ thu hồi độ phương pháp 32 oi lm ul 3.4 Nồng độ chất chuyển hóa DPP nước tiểu liều phơi nhiễm 34 3.4.1 Kết thông số đặc trưng mẫu nước tiểu thu thập 34 z at nh 3.4.2 Nồng độ chất chuyển hóa DPP nước tiểu 35 z 3.4.3 So sánh nồng độ DPP độ tuổi 39 gm @ 3.4.4 So sánh nồng độ DPP theo giới tính 42 l KẾT LUẬN 46 m co KIẾN NGHỊ 47 an Lu TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 n va ac th si DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tên tiếng Anh tên khoa học Tên tiếng Việt an n va GC/MS Sắc ký khí – quang khối phổ LC/MS Sắc ký lỏng – quang khối phổ LC/MSMS Sắc ký lỏng – quang hai lần khối Liquid Chromatography phổ Tandem Mass Spectrometry LOD Giới hạn phát Limit of Detection Giới hạn định lượng Limit of Quantification Methanol Methanol OPE Organophosphate este OPFRs Chất chống cháy phốt hữu SD Độ lệch chuẩn Standard Deviation RSD Độ lệch chuẩn tương đối Relative Standard Deviation ie gh tn to Acetonitril d lu ACN p LOQ Gas chromatography – Mass spectrometry Liquid chromatography Mass spectrometry oa nl w MeOH Acetonitril oi lm ul nf va an lu Este photphat Organophosphate – flame retardants z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo hợp chất nghiên cứu Hình 3.1 Đường chuẩn diphenyl photphat (DPP) 50-1000 ng/ml 29 Hình 3.2 Quy trình chiết tách DPP mẫu nước tiểu 34 Hình 3.3 Phân bố nồng độ chất chuyển hóa DPP theo độ tuổi 41 Hình 3.4: Phân bố nồng độ chất chuyển hóa DPP theo giới tính 43 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1.Điều kiện xử lý mẫu hợp chất nhóm OPFR &chất chuyển hóa 14 Bảng 1.2 Bảng điều kiện phân tích nhóm OPFR chất chuyển hóa 16 Bảng 2.1 Khảo sát cột chiết DPP nước tiểu 22 Bảng 3.1 Các điều kiện phân tích LC-MS/MS 25 Bảng 3.2 Chế độ bơm mẫu gradient 26 Bảng 3.3 Các điều kiện thiết lập LC-MS/MS xác định DPP 26 lu Bảng 3.4 Điều kiện sử dụng để phát DPP & chất chuẩn đồng hành an va gắn nhãn đồng vị DPP-d10 27 n Bảng 3.5 Hiệu suất thu hồi chất phân tích với loại cột chiết pha rắn 28 gh tn to Bảng 3.6 Giới hạn định lượng phương pháp (MDL) xác định DPP 31 p ie Bảng 3.7 Độ thu hồi hay độ phương pháp xác định DPP 32 oa nl w Bảng 3.8 Nồng độ DPP thu từ số mẫu nước tiểu (chưa hiệu chỉnh) 36 d Bảng 3.9 Tóm tắt nồng độ chất chuyển hóa DPP ban đầu nồng độ hiệu va an lu chỉnh theo trọng lượng riêng (SG_adjusted) nước tiểu thu thập Hà Nội 39 oi lm ul nf Bảng 3.10 Phân bố nồng độ DPP theo độ tuổi 40 Bảng 3.11 Phân bố nồng độ DPP theo giới tính 43 z at nh Bảng 3.12 Liều lượng phơi nhiễm ước tính hàng ngày (ng/kg bw/day) với TPP tính tốn từ nồng độ chất chuyển hóa DPP nước tiểu z thu thập Hà Nội 45 m co l gm @ an Lu n va ac th si Quantify Compound Report MassLynx V4.2 SCN1007 Page 52 of 52 Dataset: Untitled Last Altered: Printed: Monday, September 05, 2022 17:23:28 SE Asia Standard Time Monday, September 05, 2022 17:25:57 SE Asia Standard Time RT Area 53 53 082022-spl-53 # Name Sample Text U52 Type Std Conc 3.1944 16018.774 Conc %Dev 1º Ratio 4.065 54 54 082022-spl-54 U53 3.0129 4415.166 2.481 55 55 082022-spl-55 U54 3.1229 13945.326 1.237 56 56 082022-spl-56 U55 3.1394 13708.032 1.651 57 57 082022-spl-57 U56 3.1999 28127.852 2.444 58 58 082022-spl-58 U57 3.1394 13850.530 8.047 59 59 082022-spl-59 U58 3.1999 26792.289 2.893 60 60 082022-spl-60 U59 3.1009 12582.166 2.513 61 61 082022-spl-61 blank 2.9799 15521.146 0.940 62 62 082022-spl-62 chuan 1ppm 3.0954 72800968.0 18.634 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si