Bước đầu nghiên cứu ảnh hưởng của xử lý đột biến in vitro bằng ethyl methane sulfunate (ems) đến sự biến dị của giống hoa lan kiếm tiên vũ (cymbidium finlaysonianum)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA XỬ LÝ ĐỘT BIẾN IN VITRO BẰNG ETHYL METHANE SULFUNATE (EMS) ĐẾN SỰ BIẾN DỊ CỦA GIỐNG HOA LAN KIẾM TIÊN VŨ (CYMBIDIUM FINLAYSONIANUM) Hà Nội - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA XỬ LÝ ĐỘT BIẾN IN VITRO BẰNG ETHYL METHANE SULFUNATE (EMS) ĐẾN SỰ BIẾN DỊ CỦA GIỐNG HOA LAN KIẾM TIÊN VŨ (CYMBIDIUM FINLAYSONIANUM) Nười thực hiện: VŨ THỊ NHINH Khóa: 62 Ngành: Cơng nghệ sinh học Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Người hướng dẫn: TS NGUYỄN THỊ LÂM HẢI Hà Nội – 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nội dung báo cáo thực trung thực hướng dẫn TS Nguyễn Thị Lâm Hải Số liệu kết báo cáo khóa luận chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan nội dung tham khảo báo cáo trích dẫn rõ ràng tên tác giả, tên cơng trình, thời gian địa điểm nguồn gốc Hà Nội, ngày 20 tháng 02 năm 2021 Sinh viên thực Vũ Thị Nhinh i LỜI CẢM ƠN Trong thời gian học tập làm việc Học viện Nông nghiệp Việt Nam, đặc biệt q trình làm khóa luận tốt nghiệp môn Công nghệ Sinh học Thực vật – Khoa Công nghệ Sinh học, hướng dẫn, dẫn dắt giúp đỡ thầy cô, bạn bè môn, em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Lời đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học tồn thể thầy dìu dắt truyền đạt kiến thức quan trọng, vô bổ ích suốt q trình học tập làm khóa luận tốt nghiệp em Đặc biệt, em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Thị Lâm Hải giành thời gian, tâm huyết, tận tình giúp đỡ hướng dẫn em suốt trình thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo môn Công nghệ Sinh học Thực vật anh chị ngồi mơn giúp đỡ, hướng dẫn để em hồn thành đề tài cách tốt Lời cuối cùng, em xin gửi lời biết ơn đến gia đình, người thân, bạn bè động viên tạo điều kiện cho em hoàn thành đề tài Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng 02 năm 2021 Sinh viên thực Vũ Thị Nhinh ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH ẢNH vii DANH MỤC CÁC CỤM TỪ - KÍ HIỆU VIẾT TẮT .ix TÓM TẮT x PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung 2.1.1 Nguồn gốc vị trí phân bố 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm thực vật học 10 2.1.4 Yêu cầu ngoại cảnh 14 2.1.5 Sâu hại, bệnh hại thường gặp lan kiếm Tiên Vũ cách phòng chống 15 2.2 Khái niệm phân loại đột biến 19 2.2.1 Khái niệm 19 2.2.2 Phân loại đột biến 19 iii 2.2.3 Cơ sở lý luận phương pháp gây đột biến 20 2.2.4 Đặc điểm số tác nhân đột biến hóa học 21 2.3 Tình hình nghiên cứu đột biến giới Việt Nam 24 2.3.1 Tình hình nghiên cứu đột biến giới 24 2.3.2 Tình hình nghiên cứu đột biến Việt Nam 27 PHẦN III: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, ĐỊA ĐIỂM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 3.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 30 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 30 3.3 Nội dung nghiên cứu 31 3.4 Phương pháp nghiên cứu 32 3.4.1 Phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 32 3.4.2 Phương pháp xử lý đột biến in vitro 33 3.5 Các tiêu theo dõi 34 3.6 Phương pháp xử lý số liệu 34 PHẦN IV: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 35 4.1 Ảnh hưởng nồng độ ethyl methane sulfunate (EMS) thời gian xử lý đến khả sống nảy mầm protocorm lan kiếm Tiên Vũ (Cymbidium finlaysonianum) 35 4.1.1 Ảnh hưởng nồng độ chất xử lý đột biến EMS đến khả sống mẫu protocorm 36 4.1.2 Ảnh hưởng nồng độ chất xử lý đột biến EMS đến khả nảy chồi mẫu protocorm 39 4.2 Ảnh hưởng nồng độ ethyl methane sulfunate (EMS) đến khả tạo biến dị protocorm lan Kiếm Tiên Vũ (Cymbidium finlaysonianum) 41 iv 4.3 Ảnh hưởng nồng độ ethyl methane sulfunate (EMS) đến sinh trưởng phát triển chồi lan kiếm Tiên Vũ (Cymbidium finlaysonianum) 46 PHẦN V: KẾT LUẬN CHUNG 53 5.1 Kết luận 53 5.2 Kiến nghị 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 Tài liệu tiếng việt 54 Tài liệu tiếng anh 55 Tài liệu tham khảo từ website 57 PHỤ LỤC 58 v DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1: Ảnh hưởng nồng độ chất xử lý EMS đến tỉ lệ chết mẫu protocorm 36 Bảng 4.2: Ảnh hưởng nồng độ chất xử lý EMS đến tỉ lệ nảy chồi mẫu protocorm 39 Bảng 4.3: Tỉ lệ dạng biến dị hình thái sau 100 ngày 44 Bảng 4.4: Ảnh hưởng nồng độ chất xử lý EMS đến tỉ lệ nảy chồi mẫu chồi 46 Bảng 4.5: Ảnh hưởng nồng độ chất xử lý EMS đến khả sinh trưởng phát sinh hình thái mẫu (sau 60 ngày) 47 Bảng 4.6: Ảnh hưởng nồng độ chất xử lý EMS đến khả sinh trưởng phát sinh hình thái mẫu (sau 90 ngày) 48 vi DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2.1: Hoa lan kiếm Tiên Vũ (http://www.orchidspecies.com) Hình 2.2: Thân hoa Lan Kiếm Lơ Hội (http://www.orchidspecies.com) Hình 2.3: Cần hoa hoa Lan kiếm đen đỏ (http://www.orchidspecies.com) Hình 2.4: Thân hoa lan Kiếm Hai Mầu http://idao.plantnet-project.org) Hình 2.5: Thân hoa lan kiếm Tiên Vũ (https://www.sciencesource.com) Hình 2.6: Thân lan kiếm Tiên Vũ (http://sieuthihoalan.com) 10 Hình 2.7: Thân lan kiếm Tiên Vũ 10 Hình 2.8: Rễ lan kiếm Tiên Vũ 11 Hình 2.9: Cần hoa hoa Lan Kiếm (https://www.orchidroots.com) 12 Hình 2.10: Lan kiếm hoa vàng lưỡi tím (http://thienduongnganhoa.com) 13 Hình 2.11: Lan Kiếm lưỡi đỏ semi alba (http://sieuthihoalan.com) 13 Hình 2.12: Sự kết cặp nhầm chuyên biệt đột biến cảm ứng alkyl hoá (thuvienso.vanlanguni.edu.vn) 23 Hình 3.1: Lan kiếm Tiên Vũ (http://vuonhoalan.com) 30 Hình 4.1: Mẫu protocorm xử lý bị chết sau phát sinh chồi 40 Hình 4.2: Dạng đối chứng 42 Hình 4.3: Dạng A 42 Hình 4.4: Dạng B 42 Hình 4.5: Dạng C 43 Hình 4.6: Dạng D 43 Hình 4.7: Dạng E 43 Hình 4.8: Dạng F 44 Hình 4.9: Dạng J 44 Hình 4.10: Chồi lan kiếm Tiên Vũ xử lý EMS sau 90 ngày nuôi cấy 51 vii Đồ thị 1: Tỉ lệ chết protocorm nồng độ sau khoảng thời gian 38 Đồ thị 2: Tỉ lệ nảy chồi protocorm nồng độ sau khoảng thời gian 40 Đồ thị 3: Sự chênh lệch chiều cao, hệ số nhân chồi nồng độ xử lý 50 viii *Môi trường MS + 30 g/L sacrose + 6,5 g/L agar, pH = 5,7 có bổ sung 0,5 mg/L BAP + 0,3 mg/L TDZ Chú thích: + Chồi phát sinh xanh đồng nhất, to khỏe đẹp ++ Chồi phát sinh có tỉ lệ cháy đầu cao +++ Chồi phát sinh có nhỏ, uốn Kết trình bày Bảng 4.6 cho thấy sau 90 ngày nuôi cấy sau xử lý đột biến EMS đưa chênh lệch chiều cao hệ số nhân nhanh chồi Sau 90 ngày nuôi cấy mẫu xử lý đột biến nồng độ xử lý 0,6% có chiều cao, hệ số nhân chồi thấp so với mẫu đối chứng mẫu xử lý nồng độ 0,4% Cụ thể, mẫu đối chứng, chiều cao chồi trung bình đạt 2,39 cm; nồng độ xử lý 0,4%, chiều cao chồi trung bình đạt 2,20 cm Trong đó, chiều cao chồi trung bình mẫu xử lý với nồng độ EMS 0,6% 1,92 cm Đối với hệ số nhân chồi, nồng độ xử lý tăng, hệ số giảm Ở mẫu đối chứng không xử lý EMS hệ số nhân nhanh đạt 8,7, nồng độ xử lý 0,4%, hệ số nhân nhanh đạt 6,6 giảm 5,9 với mẫu xử lý đột biến nồng độ EMS 0,6% Theo quan sát, chất lượng chồi giảm tăng nồng độ xử lý Ở mẫu đối chứng không xử lý, chồi thu to, hai bên mọc vươn lên thẳng, màu sắc đồng xanh đậm, cứng cáp Với chồi sau xử lý EMS nồng độ 0,4% cho thấy bị vàng phần thân lá, to, thân cứng cáp phát triển cao hướng lên Ở nồng độ 0,6% chồi sau xử lý, có chiều cao thấp so với hai nồng độ lại Lá chồi thu có màu xanh non, chồi mọc thành cụm tỉ lệ mọc xoăn cao, nhỏ mỏng 49 Hệ số 8.7 6.6 5.9 2.39 2.2 1.92 0.4 0.6 Nồng độ xử lý (%) CC NN Đồ thị 3: Sự chênh lệch chiều cao, hệ số nhân chồi nồng độ xử lý Sự chênh lệch hệ số nhân chồi chiều cao chồi nồng độ xử lý thể rõ ràng qua Đồ thị Kết thể Đồ thị cho thấy tăng nồng độ xử lý lên cao chiều cao chồi, hệ số chồi thấp Tuy nhiên, sai khác chiều cao chồi không đáng kể Như vậy, việc sử lý đột biến EMS riêng rẽ đến chồi lan kiếm Tiên Vũ, bước đầu đánh giá bước đầu có sai khác chất lượng chồi, chiều cao cây, thời gian sinh trưởng so với chồi khơng xử lý 50 Hình 4.10: Chồi lan kiếm Tiên Vũ xử lý EMS sau 90 ngày nuôi cấy Năm 2009, Nguyễn Mạnh Hùng (2009) nghiên cứu ảnh hưởng tia gamma lên cẩm chướng với vật liệu chồi in vitro cẩm chướng cắt bỏ lá, đoạn thân cắt thành mẫu có kích thước khoảng 0,5 – 1,0 cm, lựa chọn mẫu đồng nhau, đoạn thân mang mắt ngủ Mẫu nuôi cấy môi trường MS + mg/L Kinetin + 10% nước dừa nuôi cấy đĩa peptri Mẫu chiếu xạ tia gamma (nguồn Co60) liều 1, 2, 3, 4, Krad thời gian Sau khoảng thời gian nuôi cấy quan sát, tác giả đưa kết liều chiếu xạ Krad, Krad chồi phát triển tương đương đối chứng Ở liều chiếu xạ Krad, Krad sinh trưởng chồi thấp so với đối chứng Quan sát hình thái chồi liều khác nhận thấy liều chiếu thấp (1 Krad, Krad) chồi có màu xanh đậm giống đối chứng, liều chiếu cao ( Krad, Krad) chồi có màu xanh nhạt Từ tác giả đưa kết luận sinh trưởng, phát triển chồi cẩm chướng tỷ lệ nghịch với liều chiếu xạ Các dòng cẩm chướng xử lý có tốc độ tăng trưởng ban đầu 51 tương đối đồng Giai đoạn sau tốc độ tăng trưởng đối chứng cao liều xử lý khác Nghiên cứu lượng chiếu xạ cao tỉ lệ bật chồi thấp Cũng chồi liều chiếu xạ thấp (1 Krad, Krad) chồi có màu xanh đậm so với chồi liều chiếu cao (4 Krad, Krad) Năm 2010, Lê Quang Hòa tiến hành chọn lọc dạng đột biến quần thể đậu tương xử lý EMS thu kết chiều cao sau xử lý giống thấp so với giống gốc Vật liệu nghiên cứu gồm quần thể hệ M2 giống ĐT12, ĐT20, ĐVN9 xử lý EMS nồng độ 0,5% giống ĐT12, ĐT20, ĐVN9 sử dụng làm đối chứng Các điểm sinh học hệ M2, với giống ĐVN9, chiều cao gia đình dao động từ 32,7 cm – 46,4 cm so với giống gốc 43,4 cm Một số gia đình có biến động chiều cao lớn Có nhiều gia đình có chiều cao thấp so với đối chứng Ở giống ĐT12, chiều cao gia đình giao động từ 2,5 cm – 45,8 cm so với giống gốc 36,4 cm Một số gia đình có chiều cao lớn giống gốc lại gia đình có chiều cao tương đương thấp giống gốc Biến động chiều cao cá thể gia đình so với giống gốc lớn Khi xử lý EMS đối tượng giống ĐT20, chiều cao gia đình từ 50 cm – 101,8 cm so với giống gốc 79,6 cm Trong 25,17, 19, 13, 10, gia đình có chiều cao thấp nhất., cịn lại gia đình có chiều cao tương đương cao đối chứng Biến động chiều cao cá thể gia đình so với giống gốc lớn 52 PHẦN V: KẾT LUẬN CHUNG 5.1 Kết luận - Protocorm lan kiếm Tiên Vũ sử lý EMS nồng độ 0,4% giờ, bóng tối có khả tạo nhiều kiểu biến dị nồng độ 0,6% Sự tác động EMS hoàn toàn ngẫu nhiên - Việc xử lý EMS ảnh hưởng đến thời gian tái sinh, tốc độ sinh trưởng protocorm chồi - Qua lần cấy chuyển mẫu protocorm cá thể biến dị có thay đổi tỉ lệ Hình thái biến dị chủ yếu tượng trắng đầu lá, đầu có màu xanh nhạt - Việc sử lý đột biến EMS riêng rẽ đến chồi lan kiếm Tiên Vũ, bước đầu đánh giá có sai khác chất lượng chồi, chiều cao cây, thời gian sinh trưởng so với chồi không xử lý 5.2 Kiến nghị - Tiếp tục quan sát đánh giá tỉ lệ sống/chết, hệ số nhân chồi mẫu protocorm - Tiếp tục nhân nhanh số lượng mẫu xử lý tiến hành nuôi vườn ươm để đánh giá toàn diện khả phát sinh biến dị giai đoạn hoa - Mở rộng thời gian xử lý mẫu để đánh giá khả chống chịu mẫu - Kết hợp chạy thị phân tử để phát sai khác mặt di truyền mẫu qua xử lý với mẫu chưa qua xử lý 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Lê Quang Hòa (2011) Chọn lọc dang đột biến quần thể đậu tương xử lý ethyl methane sunfonate Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp – Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Mạnh Hùng (2009) Bước đầu nghiên cứu xử lý đột biến thực nghiệm cẩm chướng tia gamma Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp – Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Thị Lý Anh, Lê Hải Hà Vũ Hoàng Hiệp (2009), Ảnh hưởng xử lý Ethyl methane sulphonate in vitro cẩm chướng Tạp chí Khoa học phát triển, (2): tr.130 - 136 Nguyễn Thị Điệp, Huỳnh Thị Kim (2020), Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống in vitro lan kiếm Phan Trí (Cymbidium filaysonianum Lindl.) Tạp chí khoa học cơng nghệ đại học Thái Ngun, Số 225(08): tr.479 – 486 Nguyễn Quang Thạch Cơ sở công nghệ sinh học: tập – Công nghệ sinh học tế bào PGS.TS Dương Minh Nhựt Công nghệ sinh học thực vật: Nghiên cứu ứng dụng tập Phạm Thị Chi (2009), Nghiên cứu tạo đột biến cẩm chướng xử lý kết hợp EMS tia gamma Luận văn thạc sĩ nông nghiệp – Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Phạm Thị Mai, Lê Đức Thảo (2015), Ảnh hưởng liều chiếu xạ tia gamma (nguồn Co60) đến sinh trưởng phát triển giống hoa đồng tiền (Gerbera jamesonii) in vitro in vivo Tạp chí Khoa học Công nghệ Việt Nam, số 3(3) Phạm Văn Hảo, Lâm Ngọc Phương, Ngô Phương Ngọc Lê Minh Lý (2014) Hiệu ethyl methanesulfonate (EMS) tia gamma 54 sinh trưởng phát triển hai giống mè đen điều kiện nhà lưới Tạp chí khoa học trường Đại học Cần Thơ, Số chuyên đề: Nông nghiệp (2014) (4): tr.173-178 10.Trần Thị Thanh Thúy, Võ Cơng Thành, Phạm Thị Thanh (2019), Nghiên cứu chọn dịng lúa Nàng Tét mùa đột biến theo hướng ngắn ngày, chất lượng chống chịu mặn phương pháp sốc nhiệt Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Việt Nam, số 62(2) tháng 02.2020 11.Vũ Hoàng Hiệp (2014), Nghiên cứu tạo đột biến in vitro đánh giá sinh trưởng, phát triển, sai khác di truyền dòng đột biến giống hoa cẩm chướng quận chúa (dianthus caryophyllus l.) Luận án Tiến sĩ – Học viện Nông nghiệp Việt Nam 12.Vũ Hoàng Hiệp, Nguyễn Thị Lý Anh (2013) Ảnh hưởng xử lý đột biến in vitro ethyl methane sunphonate (EMS) kết hợp chiếu xạ tia gamma đến biến dị hoa cẩm chướng (Dianthus caryophyllus L.) Tạp chí khoa học phát triển 2013, tập 11, số 8: 1092 – 1100 Tài liệu tiếng anh G.V.S Sal Prasad, Lv Subba Rag and P Veera Reddy (2001) In vitro propagation of ochird – Dendrobium “Sonia” Indian J Plant Physiol., Vol 6, No 3, pp 284 – 288 Lazăr A, Petolescu Cerasela, Bỵtea Nicoleta, Popescu Sorina (2010) Researches concerning the behavior of Cymbidium sp protocorms cultured in “in vitro” cell culture JOURNAL of Horticulture, Forestry and Biotechnology, Volume 14(3), 188-190 Natarajan Kannan (2009) An in vitro study on micropropagation of Cymbidium orchids Current Biotica, Vol Issue 2, 2009 Nihar Ranjan Nayak, Shiba Prasad Rath, Satyanarayan Patnaik (1997) In vitro propagation of three epiphytic orchids, Cymbidium aloifolium (L.) Sw., Dendrobium anphyllum (Roxb.) Fisch And Dendrobium 55 moschatum (Buch – Ham) Sw through thidiazuron – induced high frequency shoot proliferation Scientia Horticulture 71 (1997) 243 – 250 N R Nayak, P K Chand, S P Rath and S N Patnaik (1998) Influence of some plant growth regulators on the growth and organogenesis of Cymbidium aloifolium (l.) Sw Seed-derived rhizomes in vitro In Vitro Cell Dev Biol - Plant 34: 185-18 M Girija and D Dhanavel (2009) Mutagenic Effectiveness and Efficiency of Gamma Rays Ethyl Methane Sulphonate and Their Combined Treatments in Cowpea (Vigna unguiculata L Walp) Global Journal of Molecular Sciences (2): 68-75, 2009 Maliata Athon Wanga, Hussein Shimelis, Lydia N Horn and Fatma Sarsu (2020) The Effect of Single and Combined Use of Gamma Radiation and Ethylmethane Sulfonate on Early Growth Parameters in Sorghum Multidisciplinary Digital Publishing Institute, Plants, 9, 827 Muhammad Irfan Siddique, Seungki Back, Joung-Ho Lee, Jinkwan Jo, Siyoung Jang, Koeun Han, Jelli Venkatesh, Jin-Kyung Kwon, Yeong Deuk Jo and Byoung-Cheorl Kang (2020) Development and Characterization of an Ethyl Methane Sulfonate (EMS) Induced Mutant Population in Capsicum annuum L Multidisciplinary Digital Publishing Institute, Plants, 9, 396 Ram Pal, R B Ram, R P Medhi and R C Upadhyaya (2011) Effects of – Benzylaminopurine on multiplication of protocorm like bodies (PLBS) of four Cybidium hybrids cultured invitro J Orchid Soc India, 25 (1-2), 59 – 63 10 S.M Jain, S.J Ochatt, V.M Kulkarni and S Predieri (2010) In vitro culture for mutant development International Society for Horticultural Science, No 865_6, pp 59 – 68 56 11 Sang Hoon Kim, Se Won Kim, Jaihyunk Ryu, Si-Yong Kang, ByoungCheorl Kang and Jin-Baek Kim (2020) Dark/Light Treatments Followed by γ-Irradiation Increase the Frequency of Leaf-Color Mutants in Cymbidium Multidisciplinary Digital Publishing Institute, Plants, 9, 532 12 Sang Hoon Kim, Se Won Kim, Joon-Woo Ahn, Jaihyunk Ryu, Soon-Jae Kwon, Byoung-Cheorl Kang and Jin-Baek Kim (2020) Frequency, Spectrum, and Stability of Leaf Mutants Induced by Diverse γ-Ray Treatments in Two Cymbidium Hybrids Multidisciplinary Digital Publishing Institute, Plants, 9, 546 Tài liệu tham khảo từ website http://www.orchidspecies.com http://www.orchidspecies.com http://idao.plantnet-project.org https://www.sciencesource.com http://sieuthihoalan.com https://www.orchidroots.com http://thienduongnganhoa.com http://tapchisovanlang.edu.vn 57 PHỤ LỤC Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng nồng độ ethyl methane sulfunate (EMS) đến sinh trưởng phát triển chồi hoa lan kiếm Tiên Vũ (Cymbidium finlaysonianum) sau 60 ngày theo dõi BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE TN5 19/ 2/21 20:24 :PAGE 60days VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 322889E-01 161444E-01 3.72 0.123 NL 115555E-02 577777E-03 0.13 0.879 * RESIDUAL 173778E-01 434445E-02 * TOTAL (CORRECTED) 508222E-01 635278E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE TN5 19/ 2/21 20:24 :PAGE 60days VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 200000E-01 100000E-01 3.00 0.160 NL 666667E-02 333333E-02 1.00 0.446 * RESIDUAL 133333E-01 333333E-02 58 * TOTAL (CORRECTED) 400000E-01 500000E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN5 19/ 2/21 20:24 :PAGE 60days MEANS FOR EFFECT CT - CT NOS CHIEUCAO SOCHOI 1.87667 1.56667 1.80667 1.56667 3 1.73000 1.46667 SE(N= 3) 0.380545E-01 0.333333E-01 5%LSD 4DF 0.149166 0.130660 - MEANS FOR EFFECT NL - NL NOS CHIEUCAO SOCHOI 1.80000 1.50000 1.82000 1.56667 3 1.79333 1.53333 SE(N= 3) 0.380545E-01 0.333333E-01 5%LSD 4DF 0.149166 0.130660 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 59 19/ 2/21 20:24 :PAGE 60days F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT % |NL | | | | | | | | | CHIEUCAO 1.8044 0.79704E-010.65912E-01 3.7 0.1228 0.8786 SOCHOI 1.5333 0.70711E-010.57735E-01 3.8 0.1601 0.4459 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng nồng độ ethyl methane sulfunate (EMS) đến sinh trưởng phát triển chồi hoa lan kiếm Tiên Vũ (Cymbidium finlaysonianum) sau 90 ngày theo dõi 2.25667 7.13333 2.15667 6.96667 3 2.09667 7.10000 SE(N= 3) 0.544161E-01 0.781744E-01 5%LSD 4DF 0.213299 0.306427 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN5 19/ 2/21 20:26 :PAGE 90days F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION 60 C OF V |CT |NL | | | NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS CHIEUCAO 2.1700 0.22539 SOCHOI 7.0667 1.2679 % | | | | | | 0.94251E-01 4.3 0.0113 0.2261 0.13540 1.9 0.0003 0.3743 61 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC BẢN NHẬN XÉT SINH VIÊN LÀM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Vũ Thị Nhinh Lớp: K62CNSHB Mã sinh viên: 620523 Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học, khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tên đề tài Khóa luận tốt nghiệp: Bước đầu nghiên cứu ảnh hưởng xử lý đột biến In vitro ethyl methane sulfunate (EMS) đến biến dị giống hoa lan kiếm Tiên Vũ (Cymbidium finlaysonianum) Thời gian địa điểm thực tập: Từ 09/2020 đến 02/2021 Phịng thí nghiệm mơn Cơng nghệ sinh học thực vật –Khoa công nghệ sinh học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Thời gian thực tập: Từ 09/2020 đến 02/2021 Địa điểm thực tập: Phòng thí nghiệm mơn Cơng nghệ sinh học thực vật –Khoa công nghệ sinh học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Ý KIẾN NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Tinh thần, thái độ học tập thực Khóa luận tốt nghiệp: Thái độ học tập nghiêm túc, hoàn thành tốt nội dung giao ………………………………………………………………………………………… ………… ………………………………………………………………………………………… ………….…… …………………………………………………………… ………………………………… Mức độ hồn thành Khóa luận tốt nghiệp giao:  Hoàn thành tốt: X  Hoàn thành:  Chưa hoàn thành: Năng lực sáng tạo nghiên cứu viết Khóa luận tốt nghiệp: Có lực sáng toạ nghiên cứu viết Khoá luận tốt nghiệp ………………………………………………………………………………………… ……………… …………………………………………………………………… ………………………… Kết luận:   Sinh viên đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: Sinh viên không đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp: X Hà Nội, ngày 23 tháng năm 2021 Giáo viên hướng dẫn TS Nguyễn Thị Lâm Hải