Xây dựng quy trình thực nghiệm phân tích định lượng chloramphenicol tồn dư trong một số sản phẩm động vật bằng phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ kép (lc ms ms) tại việt nam

BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ĐỖ THỊ THÁI NGUYÊN Đỗ Thị Thái Ngun HĨA PHÂN TÍCH XÂY DỰNG QUY TRÌNH THỰC NGHIỆM PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG CHLORAMPHENICOL TỒN DƯ TRONG MỘT SỐ SẢN PHẨM ĐỘNG VẬT BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG GHÉP KHỐI PHỔ KÉP (LC – MS/MS) TẠI VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC 2023 Hà Nội - Năm 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Đỗ Thị Thái Nguyên XÂY DỰNG QUY TRÌNH THỰC NGHIỆM PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG CHLORAMPHENICOL TỒN DƯ TRONG MỘT SỐ SẢN PHẨM ĐỘNG VẬT BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG GHÉP KHỐI PHỔ KÉP (LC – MS/MS) TẠI VIỆT NAM Chuyên ngành : Hóa phân tích Mã số: 44 01 18 LUẬN VĂN THẠC SĨ NGÀNH HĨA PHÂN TÍCH NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : PGS.TS Đào Việt Hà TS Bùi Quang Minh Hà Nội - Năm 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài nghiên cứu luận văn cơng trình nghiên cứu tơi dựa tài liệu, số liệu tơi tự tìm hiểu nghiên cứu hướng dẫn khoa học PGS TS Đào Việt Hà Tiến sĩ Bùi Quang Minh, khuôn khổ nội dung Hợp phần đề án trọng điểm cấp Viện Hàn lâm KHCNVN, mã số TĐĐTB0.01/21-23 Chính vậy, kết nghiên cứu đảm bảo trung thực khách quan Đồng thời, kết chưa xuất nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực sai hoàn chịu trách nhiệm trước phát luật Tác giả luận văn Đỗ Thị Thái Nguyên LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn thạc sĩ, bên cạnh nỗ lực cố gắng thân cịn có hướng dẫn nhiệt tình q Thầy Cơ, động viên, ủng hộ gia đình đồng nghiệp suốt thời gian học tập nghiên cứu thực luận văn thạc sĩ Đặc biệt, xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Đào Việt Hà TS Bùi Quang Minh – thông qua đề tài TĐĐTB0.01/21-23 trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ kiến thức, tài liệu phuơng pháp để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu khoa học Xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn đến Ban lãnh tồn thể q Thầy, Cơ phịng Đào tạo Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tận tình truyền đạt kiến thức quý báu, tạo điều kiện thuận lợi tốt cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu thực đề tài luận văn Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn đến gia đình, anh chị bạn đồng nghiệp hỗ trợ cho tơi nhiều suốt q trình học tập, nghiên cứu thực đề tài luận văn thạc sĩ MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1.1 CHLORAMPHENICOL 1.1.1 Tính chất Chloramphenicol 1.1.2 Tình hình sử dụng Chloramphenicol thực phẩm chứa tồn dư Choloramphenicol việt Nam năm gần 1.1.3 Các phương pháp phân tích Chloramphenicol (CAP) thực phẩm 1.1.4 Kỹ thuật chiết ly pha rắn (Solid – Phase Extraction) 12 1.1.5 Kỹ thuật phân mảnh thường dùng phân tích Chloramphenicol phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò khổi phổ (LC/ MS – MS) 16 1.1.6 Một số quy trình xác định dư lượng Chloramphenicol phương pháp Sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ (LC – MS/MS) 17 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 23 2.1.1 Đối tượng phân tích 23 2.1.2 Hóa chất 23 2.1.3 Dụng cụ 23 2.1.4 Thiết bị nghiên cứu 23 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.2.1 Tối ưu hóa điều kiện sắc ký lỏng siêu cao (UPLC) 24 2.2.2 Tối ưu hóa điều kiện phân tích Chloramphenicol thiết bị sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ lần 24 2.2.3 Tối ưu hóa qui trình xử lý mẫu xác định hàm lượng CAP mẫu thịt động vật phương pháp LC-MS/MS 26 2.2.4 Xây dựng quy trình định lượng CAP tồn dư sản phẩm động vật phương phá p sắc ký lỏng ghép khối phổ (LC–MS/MS) 32 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Kết tối ưu hóa điều kiện phân tích Chloramphenicol thiết bị sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ lần 33 3.2 Kết tối ưu hóa điều kiện sắc ký lỏng siêu cao (UPLC) 34 3.3 Kết tối ưu hóa quy trình xử lý mẫu phương pháp xác định hàm lượng hàm lượng Chloramphenicol mẫu thịt động vật phương pháp sắc lỏng hiệu cao ghép đầu dò khối phổ (UPLC – MS/MS) 36 3.4 Kết tối ưu quy trình chiết tách làm giàu chất phân tích Chloramphenicol qua cột chiết pha rắn 38 3.5 Kết xây dựng quy trình thực nghiệm định lượng Chloramphenicol tồn dư sản phẩm thịt động vật phương pháp sắc ký lỏng siêu ghép nối khối phổ lần (LC – MS/MS) 39 3.6 Kết thẩm định quy trình định lượng Chloramphenicol tồn dư sản phẩm thịt động vật phương pháp sắc ký lỏng siêu ghép nối khối phổ lần (UPLC – MS/MS) 44 3.6.1 Xác định giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) phương pháp 44 3.6.2 Xác định độ chụm (độ lặp lại độ tái lặp) phương pháp 45 3.6.3 Đánh giá hiệu suất thu hồi phương pháp 47 3.7 Kết phân tích số mẫu thực tế 49 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 51 KẾT LUẬN 51 KIẾN NGHỊ 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT ACN AOAC Acetonitrile Association of Official Hiệp hội nhà hóa phân Analytical Chemists tích thức Đại lượng phân tử sinh học ARN APCI Atmospheric Chemical Source Pressure Ionization Ion hóa hóa học áp suất khí CAP Chloramphenicol ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay Kỹ thuật miễn dịch liên kết Enzyme ESI ElectroSpray Ionization ion hóa mẫu phương pháp ion FTIR Fourier transform infrared Phổ hồng ngoại GC - ECD Gas Chromatography Sắc ký khí đầu dị Electron Capture Detector cộng kết điện tử GC - MS Gas chromatography Mass Spectrometry Sắc ký khí Khối phổ Good manufacturing practice Thực hành sản xuất tốt HACCP Hazard Analysis and Critical Control Point Hệ thống phân tích mối nguy kiểm sốt điểm tới hạn HPLC High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC - UV High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao GMP Chromatography Ultraviolet đầu dò UV ISO International Standard Organization Tổ chức tiêu chuẩn quốc tế LC – MS/MS Liquid Chromatography Mass Spectrometry Sắc ký lỏng Khối phổ kép LOD Limit of Detection Giới hạn phát LOQ Limit of Quantification Giới hạn định lượng MRM Multiple monitoring NAFIQUAD National Agro-ForestryFisheries Quality Assurance Department Cục quản lý nông lâm thủy sản OD Optical Density Mật độ quang SEM Nitrofurazone Kháng sinh Semicarbazide Semicarbazide Metabolite thuộc nhóm Nitrofurazone reaction Kỹ thuật ghi phổ đa phản ứng MRM SOP Standard Operation Procedure Quy trình thao tác chuẩn SPE Solid Phase Extraction Kỹ thuật chiết pha rắn Tiêu chuẩn việt Nam TCVN UPLC Ultra Performacnce Liquid Chromatography Sắc ký lỏng siêu hiệu UPLC – MS/MS Ultra Performacnce Liquid Chromatography Mass Spectrometry Sắc ký lỏng siêu hiệu ghép khối phổ kép DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Chương trình pha động phân tích CAP mẫu cá 20 Bảng 1.2 Chương trình pha động phân tích CAP mẫu mật ong 21 Bảng 1.3 Chương trình pha động phân tích CAP mẫu sữa 22 Bảng 1.4 Điều kiện phân mảnh CAP CAP_d5 23 Bảng 3.1 Các thông số tối ưu điều kiện khối phổ phân tích CAP 34 Bảng 3.2 Hệ pha động chương trình gradient tối ưu cho phân tích CAP 36 Bảng 3.3 Hệ pha động chương trình gradient tối ưu cho phân tích CAP 41 Bảng 3.4 Điều kiện phân mảnh ion CAP CAP _ D5 42 Bảng 3.5 Bảng kết khảo sát giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) phương pháp 45 Bảng 3.6 Kết khảo sát độ lặp lại độ tái lặp phương pháp 47 Bảng 3.7 Kết khảo sát hiệu suất thu hồi phương pháp 48 45 lặp lại lần Gom toàn dịch ly tâm cho qua cột chiết pha rắn SPE C 18 để loại bỏ tạp chất làm giàu nồng độ chất phân tích - đáp ứng yêu cầu kỹ thuật sắc ký khối phổ Cột SPE - C18 hoạt hóa mL Methanol, mL nước siêu tinh khiết trước cho mẫu thử qua cột Sau dịch chiết mẫu hấp thụ qua cột SPE, tiến hành rửa tạp mL nước, rửa giải mL Methanol, thu dung dịch rửa giải vào vial Phần dung dịch rửa giải làm khơ khí trơ Nitơ, phần cặn thu hòa tan mL dung dịch NaCl 4%, vortex kỹ để hịa tan hịa tồn lượng cắn, ngồi dung dịch NaCl % cịn có tác dụng kết tủa thành phần Protein mẫu thử Tiếp tục thêm mL n_Hexan vào dịch chiết mẫu tiến hành vortex, ly tâm tách lớp để loại bỏ toàn thành phần lipit mẫu thử (nằm lớp n_hexan) Lớp NaCl 4% chiết lại qua mL dung mơi EthylcAcetate để thu hồn tồn Chloramphenicol Làm khơ dung mơi Ethyl acetate khí Nitơ, hòa tan cặn hỗn hợp dung dịch H2O : ACN (80:20), lọc qua màng 0,20 µm trước phân tích hệ thống sắc ký lỏng hiệu siêu cao UPLC – LCMS/MS Tiến hành phân tích thiết bị Sắc ký lỏng hiệu siêu cao ghép nối đầu dò khối phổ lần (UPLC – MS/MS) – Xevo TQ – Scronos Waters với điều kiện cụ thể sau: - Cột nhồi sắc ký pha đảo C18, (dài 50 mm, đường kính mm; hạt nhồi 1,7 µm); có gắn cột bảo vệ loại - Nhiệt độ cột: 40 0C - Nhiệt độ buồng tiêm mẫu: 20 0C - Thể tích tiêm mẫu: 10 µL - Pha động Gradient hai kênh theo Bảng 3.3 Bảng 3.3 Hệ pha động chương trình gradient tối ưu cho phân tích CAP Thời gian (phút) Tốc độ dịng (mL/ phút) A (%) B (%) 0,4 90 10 0,4 0,4 90 10 0,8 0,4 95 46 1,5 0,4 95 1,6 0,4 90 10 3,0 0,4 90 10 - Chế độ ion hóa: ES- Nhiệt độ hóa dung môi: 400 0C - Nhiệt độ nguồn ion hóa: 150 0C - Tốc độ khí mang: 1000L/ - Chế độ quét MRM, theo điều kiện phân mảnh trình bày Bảng 3.4 Bảng 3.4 Điều kiện phân mảnh ion CAP CAP _ D5 Chất phân tích Chloramphenicol Chloramphenicol – d5 Ion sơ cấp (m/z) Ion thứ cấp (m/z) Điện (V) Năng lượng va chạm (V) 152,00 45 12 257,00 45 157,00 45 20 320,86 326,00 Tiến hành song song mẫu chuẩn mẫu thử điều kiện phân tích, hàm lượng Chloramphenicol mẫu thử xác định phương pháp ngoại chuẩn Đường chuẩn điểm xây dựng cách pha chất chuẩn Chloramphenicol mẫu trắng thịt gà chiết tách theo quy trình tối ưu Hình 3.6 Dãy chuẩn tiến hành khảo sỏt cú nng t 0,5 ữ 2,5 àg/L Kt khoảng tính tuyến tính thể Hình 3.9 3.10 47 Hình 3.9 Kết khảo sát khoảng tuyến tính đường chuẩn phương pháp Compound name: chloramphenicol Correlation coefficient: r = 0.999672, r^2 = 0.999343 Calibration curve: 859.674 * x + -35.7591 Response type: External Std, Area Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: 1/x, Axis trans: None 1.50 Residual 1.00 0.50 0.00 -0.50 -1.00 -1.50 Conc 2000 Response 1500 1000 500 -0 -0.00 Conc 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 Hình 3.10 Đồ thị khảo sát khoảng tuyến tính đường chuẩn phương pháp Từ kết khảo sát, phương trình hồi quy tuyến tính là: y = 859,674 *x + (-35,7591) với hệ số tương quan tuyến tính r2 = 0,999 Hệ số tương quan hoàn toàn đáp ứng yêu cầu AOAC hệ số hồi quy tuyến tính 48 r2 ≥ 0,99) [28] Cùng khong nng tuyn tớnh t 0,5 ữ 2,5 àg/L kết khảo sát luận văn có hệ số hồi quy tuyến tính r cao (0,999 > 0,997) [13] Kết cho thấy điều kiện tối ưu tính tương thích hệ thống, quy trình xử lý mẫu, hóa chất, yếu tố người,… đáp ứng yêu cầu đánh giá phương pháp thử Việc xây dựng phương trình hồi quy tuyến tính có hệ số hồi quy tuyến tính r gần đạt giá trị có ý nghĩa lớn việc tính tốn kết luận hàm lượng chất phân tích mẫu thử; nâng cao độ xác, độ tin cậy kết phân tích Hàm lượng Chloramphenicol mẫu thử xác định phương pháp ngoại chuẩn thơng qua phương trình hồi quy tuyến tính có dạng y = a*x + b Trong đó: - hệ số a, b: xác định qua đường chuẩn thực tế tiến hành trước lần phân tích - đánh giá tương thích hệ thống - y: diện tích peak CAP phát mẫu thử - x: nồng độ CAP phát mẫu thử 3.6 Kết thẩm định quy trình định lượng Chloramphenicol tồn dư số sản phẩm thịt động vật phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ (UPLC – MS/MS) 3.6.1 Xác định giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) phương pháp: Kết khảo sát giới hạn phát LOD thể Bảng 3.6 Bảng 3.6 Bảng kết khảo sát giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) phương pháp Lần TN Hàm lượng (CAP) (µg/Kg) 0,22 0,22 0,21 0,22 0,22 Độ lệch chuẩn –SD LOD (µg/Kg) LOQ (µg/Kg 0,010 0,03 0,10 49 0,23 0,24 0,23 0,22 10 0,24 Trung bình (µg/Kg) 0,225 R 7,717 Với giới hạn phát quy trình nghiên cứu có giá trị 0,03 µg/Kg – ngưỡng phát đủ điều kiện để phát hàm lượng tồn dư Chloramphenicol thực phẩm cho mặt hàng xuất thị trường giới - đạt mục tiêu luận văn 3.6.2 Xác định độ chụm (độ lặp lại độ tái lặp) phương pháp Kết khảo sát độ lặp lại độ tái lặp phương pháp thể Bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết khảo sát độ lặp lại độ tái lặp phương pháp Lần TN Hàm lượng CAP TNV (µg/kg) Hàm lượng CAP TNV (µg/kg) Hàm lượng CAP TNV (µg/kg) 79,25 78,99 77,74 78,32 80,23 79,52 80,26 81,07 79,02 81,65 78,61 80,45 80,03 79,15 78,95 Trung bình (µg/kg) 79,90 79.61 79,14 Sr 1,24 1,01 0,98 RSDr (%) 1,55 1,27 1,24 SR 0,39 50 0,49 RSDR (%) Giới hạn RSDR theo Codex 2016 - RSDr ≤ 15 (%) - RSDR ≤ 22 (%) Kết luận [37] Đạt Kết khảo sát độ lặp lại độ tái lặp cho thấy phương pháp có độ chụm, độ ổn định, độ tin cậy cao để phân tích dư lượng Chloramphenicol số sản phẩm có nguồn gốc từ thịt động vật 3.6.3 Đánh giá hiệu suất thu hồi phương pháp Kết hiệu suất thu hồi thể Bảng 3.8 Bảng 3.8 Kết khảo sát hiệu suất thu hồi phương pháp Lần TN Lượng thêm vào Lượng tìm thấy TB lượng tìm thấy (ppb) (ppb) (ppb) 00 9,66 / / 16,8300 85,61 47,4700 95,59 68,6700 98,58 Hiệu suất thu hồi (%) Yêu cầu theo AOAC Kết luận Nền / 9,74 0,10 M1 9,75 10,13 0,50 M2 10,12 10,65 1,00 M3 Tại mức nồng độ thêm vào ≤ 1,00 ppb 50% ÷ 120% Đạt Đạt Đạt 10,64 Kết khảo sát cho thấy hiệu suất thu hồi 03 mức nồng độ 0,1 ppb; 0,5 ppb; 1,0 ppb đạt 80 % đáp ứng yêu cầu đánh giá phương pháp hội đồng châu Âu AOAC [27,29] Đặc biệt điểm nồng độ 0,1 ppb (LOQ thực nghiệm) có hiệu suất thu hồi lớn 85% - kết 51 cho thấy giới hạn định lượng phương pháp có ý nghĩa thực tiễn, ổn định, độ tin cậy cao q trình phân tích kết luận mẫu thử dư lượng Chloramphenicol mẫu thử 3.7 Kết phân tích số mẫu thực tế Kết phân tích 12 mẫu có nguồn gốc từ thịt động vật (khơ bị, thịt đà điểu, chả lụa, tơm, thịt gà, …) lấy gửi đến Trung tâm Kiểm Nghiệm Khánh Hòa năm 2022, phương pháp tối ưu phát 2/12 mẫu dương tính Chloramphenicol có nồng độ 0,51 µg/Kg 0,72 µg/Kg Kết khảo sát thể qua bảng 3.9 Bảng 3.9 Kết CAP phân tích mẫu thực STT 10 11 12 Mẫu Chả lụa 0086/ 22 GKNTP Thịt đà điểu 0325/22 LKNTP Tôm 515/22 GKNTP Thịt heo 909/ 22 GKNTP Thịt bò 910/ 22 GKNTP Thịt gà 911/ 22 GKNTP Khơ bị 917/ 22 LKNTP Thịt gà 918/22 GKNTP Khơ gà 919/22 LKNTP Chả lụa 1056/ 22 GKNTP Nem 1061/22 GKNTP Thịt đà điểu 1066/ 22 GKNTP Hàm lượng CAP (µg/kg) Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) 0,72 Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) 0,51 Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) Khơng phát (LOD: 0,03 µg/kg) Không phát (LOD: 0,03 µg/kg) Không phát (LOD: 0,03 µg/kg) Trong tháng 7/2022, phương pháp tham gia thử nghiệm thành thạo Viện kiểm nghiệm An toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia tổ chức mẫu thủy sản mã số H22.23, mã số phịng thí nghiệm: PTN 09 Kết đạt với hệ số Zcore = -1,01 (< 2) 52 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã xây dựng quy trình thực nghiệm định lượng Chloramphenicol tồn dư sản phẩm thịt động vật phương pháp sắc ký lỏng khối phổ kép LC – MS/MS phịng thí nghiệm thuộc Trung tâm Kiểm nghiệm tỉnh Khánh Hòa, với quy trình xử lý mẫu để có giới hạn phát 0,03 µg/Kg, giới hạn định lượng (LOQ) 0,1 µg/Kg – đáp ứng yêu cầu theo định 2002/657/CE uy ban châu Âu (< 0,3 µg/ Kg) Quy trình thực nghiệm tối ưu điều kiện phân tích Chloramphenicol tồn dư sản phẩm thịt động vật: điều kiện bắn phá chế độ ES âm (320 → 152, 320 → 257), sử dụng dung mơi Ethyl acetate để chiết mẫu; q trình chiết tách làm giàu mẫu qua cột chiết pha rắn với ml methanol để rửa giải; phân tích sắc ký lỏng hiệu siêu cao với chế độ gradient pha động amoniacetate methanol Xác định đượng khoảng tuyến tính phương pháp với khoảng nồng độ CAP từ 0,1 µg/kg đến 2,5 µg/kg Quy trình thực nghiệm có tính ổn định độ chụm, tin cậy cao, đặc biệt hiệu suất thu hồi cao 85% mức nồng độ khác Sử dụng quy trình thực nghiệm này, phát mẫu dương tính Chloramphenicol công tác tra giám sát an toàn vệ sinh thực phẩm địa bàn tỉnh Khánh Hòa KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu thăm dò, thử nghiệm quy trình định lượng đồng thời tồn dư nhóm Phenicol (Flophenicol, Thiamphenicol, Chloramphenicol) thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng ghép nối đầu dò khối phổ xử lý mẫu qua cột sắc ký lực đặc hiệu với nhóm Phenicol để tăng hiệu tách chiết tiết kiệm hóa chất, thời gian phân tích 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y Tế, 2017, Dược điển Việt Nam V, Nhà xuất y học Hà Nội Phạm Khắc Hiếu, Lê Thị Ngọc Diệp, 1997, Giáo trình dược lý học, Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội, trang 182 – 184 Wongtavatchai, J.G McLean, F Ramos, D Arnold, 2004, Chloramphenicol, Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives,53, – 62 Bộ Nông Nghiệp, 2016, Thông tư số 10/2016/TT - BNN quy định CAP khơng phép có mặt sản xuất, kinh doanh động vật cạn thủy sản Đỗ Hương, 2016, Thay đổi kiểm soát dư lượng kháng sinh thủy sản xuất khẩu, Cục Quản lý Chất lượng Nông lâm sản Thủy sản (Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn Lê Ngọc Anh, 2016, Chống lạm dụng kháng sinh chăn nuôi, Sở Nông Nghiệp Phát Triển Nông Thôn Hà Nội Bộ khoa học công nghệ, 2009, Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8140 : 2009 thịt sản phẩm thịt – Xác định CAP – phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Bộ Thủy Sản, 2003, Tiêu chuẩn ngành 28 TCN 186 : 2003 hàm lượng CAP thủy sản – phương pháp định lượng sắc ký khí Robert and Fischer,1978, High performance Liquid – Chromatographic Assay for CAP in Biological Fluids, Clinical Chemistry, 24 (5), pp.778 – 781 10 Rebecca S.N, Eduardo W-B, Marlice A.S.M, 2006, Food safety evaluation: Detection and cofirmination of CAP in milk by high performace liquid Chromatography –tandem mass Spectrometry, Analytica Chimica Acta, (565), 97 – 102 11 Letícia R Guidi1, Luiza H M Silva Christian Fernandes, Nicki J Engeseth Maria Beatriz A Gloria, 2015, LC-MS/MS determination of chloramphenicol in food of animal origin in Brazil, Scientia Chromatographica 2015, 7(4), pp 287-295 12 Barbara K Neuhaus, Jeffrey A Hurlbut Walter Hammack, LC/MS/MS Analysis of Chloramphenicol in Shrimp, FDA/ORA/DFS No 4290 54 13 Widiastuti R, Anastasia Y, 2014, Detection of Chloramphenicol Residue in Bovine Meat Using Liquid Chromatography Mass Spectrometry, Toxicology Department, Indonesian Research Center for Veterinary Science, 19 (1), pp 74 – 79 14 Phạm Kim Đăng, Marie – Louise Sippo, Guy Degand, Caroline Douny, Guy Maghuin – Rogister, 2007, Chuẩn hóa phương pháp sàng lọc định tính kiểm sốt tồn dư kháng sinh thực phẩm có nguồn gốc động vật theo quy định 2002/657/EC, Tạp chí khoa học kỹ thuật nông nghiệp, ĐHNN I, (1) 24 – 30 15 Chu Phạm Ngọc Sơn, Phan Văn Tiến, Bùi Quốc Anh 2014, xu hướng công nghệ phát triển dư lượng kháng sinh thủy sản – phương pháp phát nhanh, Phát dư lượng CAP kit Elisa, Trung tâm Thông tin Khoa học Công nghệ TP HCM 16 Phạm Kim Đăng, Vũ Thị Ngân, Phạm Hồng Ngân, 2014, Xác định đồng thời dư lượng kháng sinh CAP, Florphenicol, Thiamphenicol số sản phẩm động vật phương pháp sắc ký lỏng khối phổ LC – MSMS, Tạp chí Khoa học Phát triển, tập 12 (2) 17 Dimple D.Shah, Marian Twohig, Jennifer A Burgess, 2012, Quantification of Chloramphenicol in Chicken using Xevo TQD with RADAR technology, Waters Corporation 18 Trần Phương Phương, 2011, Chloramphenicol, Điều trị 19 Hắc Bá Thành, Nguyễn Thị Thu, Nguyễn Văn Cường, Nguyễn Thị Diệu Thúy, S.A.Eremin, I.A.Shanin, 2016, Xây dựng phương pháp miễn dịch liên kết Enzyme trực tiếp phát dư lượng Chloramphenicol sữa, Tạp chí khoa học, Trường đại học Hồng Đức, (29), tr 121 – 127 20 Trần Quốc Dung, Nguyễn Hoàng Lộc, Trần Lệ Dung, 2006, Công nghệ chuyển gen (Động vật, thực vật), Nhà xuất Huế, tr 94 – 96 21.Mikkelsen R.S and C Eduador, 2004, Bioanalytical Chemistry, WileyInterscience, 1st edition, pp 375 – 422 22 Phạm Xuân Kỳ, Đào Việt Hà, Nguyễn Thu Hồng, 2013, Đánh giá khả áp dụng kít Elisa nghiên cứu tích Chloramphenicol tôm bạc Penaeus setiferus ghẹ chấm Portunus trituberculatus, Tuyển tập nghiên cứu biển, tập19, tr 134 – 142 55 23 Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hùng Việt, 1985, Các phương pháp sắc ký, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội, tr 38 – 60 24 Phạm Hùng Việt, 2003, Cơ sở lý thuyết phương pháp sắc ký, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội, tr 21 – 45 25 Hồ Viết Quý, 2009, Các phương pháp phân tích cơng cụ hóa học đại, Nhà xuất đại học sư phạm, tr 397 – 438 26 Nguyễn Hữu Đỉnh, Trần Thị Đà, 1999, Ứng dụng số phương pháp phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử, Nhà xuất giáo dục, tr 388 – 456 27 Đồn Cao sơn, 2010, Thẩm định phương pháp phân tích phân tích hóa học vi sinh vật, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Hà Nội, tr -35 28 TCVN ISO/IEC 17025:2017 (ISO/IEC 17025:2017), Yêu cầu chung lực phòng thử nghiệm hiệu chuẩn 29 AOAC, 2016, Appendix F: Guideline for Standard Method Performance Requirements, pp.1 – 30 A Yibar, F Cetinkaya, and G E Soyutemiz, 2011, ELISA screening and liquid chromatography-tandem mass spectrometry confirmation of chloramphenicol residues in chicken muscle, and the validation of a confirmatory method by liquid chromatography-tandem mass spectrometry, Department of Food Hygiene and Technology, pp 2619 – 2631 31 Mahmoud Abd Elkhabeer, Gouda A Ramadan Gouda, Lamia Ryad, Eglal R Souaya, 2020, Analytical Method Optimization and Determination of Sulfonamides, Chloramphenicol and Tetracyclines Drug Residues in Chicken Meat across Egypt, Journal of Food Processing and Technology, 825 (11), pp -14 32.K Jayalakshmi, M Paramasivam, M Sasikala, TV Tamilam and A Sumithra, 2017, Review on antibiotic residues in animal products and its impact on environments and human health, India Journal of Entomology and Zoology Studies, 5(3): 1446-1451 33 Nguyễn Minh Đức, 2006, Sắc ký lỏng hiệu cao số ứng dụng vào nghiên cứu, kiểm nghiệm dược phẩm, dược liệu hợp chất tự nhiên, NXB Y học, Thành Phố Hồ Chí Minh, tr 138 – 149 34.Allen PPfenning, Jose E Roybal, Heidi S Rupp, Sherri B Turnipseed, Steve A Gonzales, Jeffrey A Hurlbut, 2000, Simultaneous 56 Determination of Residues of CAP, Florfenicol, Florfenicol Amine, and Thiamphenicol in Shrimp Tissue by Gas Chromatography with Electron Capture Detection, AOAC, 83 (1), 26-30 35 Adela Krivohlavek, Irena Zuntar, Martina Ivesic, Ivana Mandic Andacic & Sandra Sikic, 2014, Medicinska naklada - Zagreb, Croatia, Food safety is an important public health issue: Chloramphenicol residues detemination by Liquid chromatography Tandem mass spectometry (LC – MS/MS) in honey,26, (3) 537-545 36.Julijonas Petraitis and Audrius Padarauskas, 2006, Chloramphenicol determination in milk by liquid chromatography – tandem mass spectrometry, Chemistry Department, National Veterinary Laboratory, Vilnius, Lithuania, Vol 17, (2–3), 25–29 37 Ủy ban Tiêu chuẩn thực phẩm quốc tế, 2016, Codex Alimentarius Commission 57 PHỤ LỤC Phồ đồ phân tích mẫu dương tính với CAP Trung tâm Kiểm Nghiệm năm 2022 58 Phồ đồ phân tích CAP mẫu thủy sản mã số H22.23 phịng thí nghiệm PTN 09 59 Quyết định việc nghiệm thu ứng dụng đề tài Trung tâm Kiểm nghiệm Khánh Hòa