Đề tàixác định môi trường và điều kiện nuôi cấynhằm giảm chi phí nhân nhanh giống lancattleya ở bình dương

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2014 - 2015 ĐỀ TÀI XÁC ĐỊNH MÔI TRƯỜNG VÀ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY NHẰM GIẢM CHI PHÍ NHÂN NHANH GIỐNG LAN CATTLEYA Ở BÌNH DƯƠNG Bình Dương, năm 2015 TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2014 - 2015 ĐỀ TÀI XÁC ĐỊNH MÔI TRƯỜNG VÀ ĐIỀU KIỆN NI CẤY NHẰM GIẢM CHI PHÍ NHÂN NHANH GIỐNG LAN CATTLEYA Ở BÌNH DƯƠNG Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Minh Thanh Nam, Nữ: Nữ Dân tộc: Kinh Lớp, khoa: C12SH01 Năm thứ: 3/Số năm đào tạo: Ngành học: Sư phạm Sinh học Người hướng dẫn: Ths Phan Văn Thuần Bình Dương, năm 2015 UBND TỈNH BÌNH DƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: - Tên đề tài: Xác định môi trường điều kiện nuôi cấy nhằm giảm chi phí nhân nhanh giống lan Cattleya Bình Dương - Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Minh Thanh - Lớp: C12SH01 Khoa: Khoa học tự nhiên Năm thứ: Số năm đào tạo:3 - Người hướng dẫn: Ths Phan Văn Thuần Mục tiêu đề tài: - Khảo sát điều kiện tự nhiên Bình Dương có phù hợp cho in vitro phát triển khơng - Giảm chi phí q trình nhân giống lan Cattleya - Ứng dụng sản xuất phổ biến hộ nơng dân Tính sáng tạo: Đây đề tài mang tính thiết thực ứng dụng cao Vấn đề giảm chi phí sản xuất giá thành hoa lan Cattleya dừng lại số vấn đề việc thay tinh bột đường sucrose Mặt khác vấn đề chưa nghiên cứu điều kiện khí hậu Bình Dương vườn ươm lan Đây đề tài có tính sáng tạo cao nghiên cứu giảm chi phí lượng, hóa chất, dụng cụ, thiết bị để giảm giá thành giống Kết nghiên cứu: Kết nghiên cứu khách quan, số liệu trung thực có kết tốt kỳ vọng ban đầu Kết nghiên cứu thay phịng thí nghiệm việc ni ngồi tự nhiên mà khơng ảnh hưởng nhiều đến Đóng góp mặt kinh tế - xã hội, giáo dục đào tạo, an ninh, quốc phòng khả áp dụng đề tài: - Kết đề tài có tính ứng dụng cao lĩnh vực trồng lan Cattleya thương mại - Từ kết bàn giao sản xuất trược tiếp hộ nông dân trồng lan địa bàn tỉnh Bình Dương Nơng dân mua chồi nhỏ phịng thí nghiệm chăm xóc thành hồn chỉnh, từ đưa trồng ngồi tự nhiên Như giảm khâu trình nhân giống Ngày tháng năm Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) Nguyễn Thị Minh Thanh Nhận xét người hướng dẫn đóng góp khoa học sinh viên thực đề tài: “Đề tài kéo dài từ – tháng có đóng góp lớn sinh viên Nguyễn Thị Minh Thanh để đạt kết ban đầu Sinh viên Nguyễn Thị Minh có tinh thần làm việc nghiêm túc, khoa học, chăm hoàn thành sớm công việc giao Tôi đánh giá cao tinh thần làm việc đóng góp sinh viên Nguyễn Thị Minh Thanh” Ngày Xác nhận lãnh đạo khoa (ký, họ tên) UBND TỈNH BÌNH DƯƠNG tháng năm Người hướng dẫn (ký, họ tên) Phan Văn Thuần CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN VỀ SINH VIÊN CHỊU TRÁCH NHIỆM CHÍNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I SƠ LƯỢC VỀ SINH VIÊN: Ảnh 4x6 Họ tên: Nguyễn Thị Minh Thanh Sinh ngày: 20 tháng 12 năm 1994 Nơi sinh: Bình Thuận Lớp: C12SH01 Khóa: 2012 – 2015 Khoa: Khoa học tự nhiên Địa liên hệ: Số 3, khu 13, tổ 3, đường Huỳnh Văn Lũy, phường Phú Lợi Điện thoại: 01633931913 Email: nguyenthiminhthanh678@gmail.com II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP * Năm thứ 1: Ngành học: Sư phạm Sinh học Khoa:Khoa học tự nhiên Kết xếp loại học tập: Khá * Năm thứ 2: Ngành học: Sư phạm Sinh học Khoa:Khoa học tự nhiên Kết xếp loại học tập: Giỏi * Năm thứ 3: Ngành học: Sư phạm Sinh học Khoa:Khoa học tự nhiên Kết xếp loại học kỳ I: Giỏi Ngày Xác nhận lãnh đạo khoa (ký, họ tên) tháng năm Sinh viên chịu trách nhiệm thực đề tài (ký, họ tên) Nguyễn Thị Minh Thanh i MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC NHỮNG TỪ VIẾT TẮT iii DANH MỤC BẢNG BIỂU .iv DANH MỤC HÌNH v MỞ ĐẦU 1 Tổng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài .1 Lý chọn đề tài .2 Mục tiêu đề tài Phương pháp nghiên cứu 4.1 Điều kiện môi trường nuôi cấy 4.1.1 Môi trường nuôi cấy 4.1.2 Điều kiện phịng thí nghiệm 4.1.3 Điều kiện tự nhiên 4.2 Nghiên cứu khả tạo cụm chồi phát triển mẫu điều kiện phịng thí nghiệm tự nhiên 4.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng MS kết hợp với BAP lên khả tạo cụm chồi lan Cattleya phịng thí nghiệm ngồi điều kiện tự nhiên Bình Dương 4.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng MS kết hợp với phụ gia hữu cơ: chuối chín, nước dừa lên khả tạo cụm chồi lan Cattleya phòng thí nghiệm ngồi điều kiện tự nhiên Bình Dương 4.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng MS kết hợp với phụ gia hữu cơ: chuối chín, nước dừa than hoạt tính lên khả tạo cụm chồi lan Cattleya phịng thí nghiệm ngồi điều kiện tự nhiên Bình Dương 4.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng MS kết hợp với tổ hợp chất điều hòa sinh trưởng, phụ gia hữu cơ, than hoạt tính lên khả tạo cụm chồi lan Cattleya phòng thí nghiệm ngồi điều kiện tự nhiên Bình Dương 4.2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng bình ni cấy lên khả sinh trưởng phát triển lan Cattleya .9 4.3 Xử lý thống kê Đối tượng phạm vi nghiên cứu 5.1 Đối tượng nghiên cứu 5.2 Phạm vi nghiên cứu .9 ii Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 11 1.1 Lược sử phát triển nuôi cấy mô tế bào thực vật .11 1.2 Ứng dụng nhân giống in vitro số hoa 15 1.3 Vài nét lan Cattleya 16 1.3.1 Nguồn gốc lịch sử lan Cattleya 16 1.3.2 Đặc điểm thực vật học lan Cattleya 17 1.3.3 Phân loại 17 Chương QUY TRÌNH THÍ NGHIỆM 19 2.1 Sơ đồ quy trình thí nghiệm 19 Chương KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM 20 3.1 So sánh khác biệt điều kiện nhiệt độ, ánh sáng phịng thí nghiệm điều kiện ngồi tự nhiên Bình Dương (vườn ươm lan) 20 3.2 Nghiên cứu khả tạo cụm chồi lan Cattleya điều kiện phịng thí nghiệm điều kiện ngồi tự nhiên 21 3.3 Nghiên cứu khả tạo rễ lan Cattleya điều kiện phịng thí nghiệm điều kiện tự nhiên 23 3.4 Nghiên cứu tiêu sinh trưởng lan Cattleya điều kiện phịng thí nghiệm ngồi điều kiện ngồi tự nhiên 25 3.5 Nghiên cứu khả sinh trưởng lan Cattleya ni cấy bình tam giác (250 ml) với bịch nilon .27 3.6 Nghiên cứu khả sống sót lan Cattleya đưa đất .29 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 30 Kết luận 30 Khuyến nghị 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO .31 PHỤ LỤC iii DANH MỤC NHỮNG TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt Ý nghĩa BAP Benzyl amino purine BA N6-Benzyl adenin cs Cộng DNA Deoxyribonucleotide acid IAA β – indolacetic acid INRA Institut National de la Recherche Agronomique IRRI International Rice Research Institute KOH Kali hiđroxit MS Murashige Skoog (1962) MT Môi trường NAA 1-Naphthaleneacetic acid NaOH Natri hiđroxit Tp Thành phố 2,4-D 2,4-D dichlorophenoxy acetic acid iv DANH MỤC BẢNG BIỂU Tên bảng Trang Bảng 4.1.1 Thành phần môi trường Murashige Skoog (1962) Bảng 3.1 So sánh điều kiện ni cấy phịng thí nghiệm tự nhiên 20 Bảng 3.2 Số liệu cụm chồi lan Cattleya điều kiện phòng thí nghiệm điều kiện ngồi tự nhiên .21 Bảng 3.3 Nghiên cứu khả tạo rễ lan Cattleya điều kiện phịng thí nghiệm điều kiện tự nhiên 23 Bảng 3.4 Nghiên cứu tiêu sinh trưởng lan Cattleya điều kiện phịng thí nghiệm ngồi điều kiện ngồi tự nhiên 25 Bảng 3.5 Số liệu sinh trưởng lan Cattleya nuôi cấy bình tam giác (250 ml) với bịch nilon .28 v DANH MỤC HÌNH Tên hình Trang Hình 3.1 Điều kiện phịng thí nghiệm 20 Hình 3.2 Điều kiện tự nhiên (vườn lan) 21 Hình 3.3 Cụm chồi lan Cattleya MT12 23 Hình 3.4 Lan Cattleya MT11 (3 tháng) .24 Hình 3.5 Bộ rễ lan Cattleya MT11 tự nhiên (sau tháng) .25 Hình 3.6 Lan Cattleya MT11 (3 tháng) .27 Hình 3.7 Lan Cattleya MT11 (5 tháng) .27 Hình 3.8 Lan Cattleya MT12 bịch nilon 28 Hình 3.9 Lan Cattleya đưa đất 29 25 3.4 Nghiên cứu tiêu sinh trưởng lan Cattleya điều kiện phịng thí nghiệm ngồi điều kiện ngồi tự nhiên Các chồi lan Cattleya có kích thước 0.5 cm, không rễ, khỏe mạnh, đồng cấy môi trường khác Chia làm phần: phần ni phịng thí nghiệm, phần chuyển ni ngồi tự nhiên (vườn ươm lan) Kết sau tháng thu sau: Bảng 3.4 Số liệu sinh trưởng lan Cattleya điều kiện phịng thí nghiệm ngồi điều kiện ngồi tự nhiên STT MT1 MT2 MT3 MT4 MT5 MT6 MT7 MT8 MT9 MT10 MT11 MT12 Điều kiện phịng thí nghiệm Chiều Số Chiều Chiều cao lượng rộng dài chồi (cm) (cm) (cm) 0.67 2,02 0.62 1.06 0.81 2.92 0.94 3.2 0.73 2.83 0.93 2.30 0.41 2.24 0.27 0.57 0.63 2.56 0.63 1.96 1.13 2.17 0.55 1.81 0.53 2.75 0.48 2.20 0.84 3.02 0.72 2.93 1.01 2.59 0.90 2.73 0.80 2.85 1.13 3.90 2.27 3.40 0.63 2.34 0.61 2.16 0.4 1.03 Điều kiện tự nhiên Chiều Số Chiều Chiều cao lượng rộng dài chồi (cm) (cm) (cm) 0.57 2.11 0.61 1.37 0.67 2.56 0.76 2.76 1.00 2.79 0.83 1.90 0.81 2.74 0.83 1.77 0.67 2.57 0.67 2.10 1.17 2.93 0.85 2.03 0.57 2.27 0.45 1.90 0.83 2.31 0.74 2.7 0.87 2.67 0.70 1.76 0.73 2.83 1.07 3.27 2.07 3.01 0.63 2.24 0.57 2.43 0.61 1.58 Kết bảng 3.4 ta thấy có khác biệt lớn in vitro nuôi cấy phịng thí nghiệm ngồi điều kiện tự nhiên; số tiêu, mơi trường ngồi tự nhiên lại cho kết tốt Nhìn chung, phịng thí nghiệm phát triển tốt hơn, tỷ lệ nhiễm chết thấp khác biệt khơng đáng kể Ở ngồi tự nhiên giai đoạn tuần đầu phát triển chậm sau tốc độ phát triển lớn dần Nhưng sau 45 ngày ghi nhận có khác biệt rõ rệt bên màu sắc Cây chiếu sáng tự nhiên “xanh” phịng thí nghiệm, rộng dày hơn, đặc biệt sắc tố đỏ tía đặc trưng xuất Ghi nhận chúng tơi có kết tương tự với kết nghiên cứu Vũ Ngọc Phượng, Thái Xuân Du, Trịnh Mạnh Dũng với đề tài “Nhân giống vơ tính phong lan in vitro điều kiện ánh 26 sáng tự nhiên” Viện Sinh học Nhiệt đới Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Tác giả thay môi trường đường sucrose tinh bột nhận thấy có khác biệt lớn ni trồng phịng thí nghiệm ngồi tự nhiên sắc tố đỏ tía xuất sau 45 ngày ngồi tự nhiên Mơi trường lan Cattleya sinh trưởng mạnh MT11, cao, to, rễ nhiều dài, phát triển mạnh so với mơi trường khác A B Hình 3.6 Lan Cattleya MT11 (3 tháng) A Lan Cattleya MT11 phịng thí nghiệm B Lan Cattleya MT11 ngồi tự nhiên Hình 3.7 Lan Cattleya MT11 (5 tháng) 27 3.5 Nghiên cứu khả sinh trưởng lan Cattleya ni cấy bình tam giác (250 ml) với bịch nilon Các chồi lan Cattleya có kích thức 0.5 cm, khơng rễ, khỏe mạnh, đồng cấy bình tam giác bịch nilon MT12 để nghiên cứu khả sinh trưởng phát triển Kết sau tháng thu sau: Bảng 3.5 Số liệu sinh trưởng lan Cattleya ni cấy bình tam giác (250 ml) với bịch nilon STT Trong phịng thí nghiệm Ngồi tự nhiên Số Chiều Số Chiều Số Chiều Chiều lượng cao chồi lượng dài rễ lượng dài rộng chồi (cm) rễ (cm) (cm) (cm) 8.33 0.61 0.63 2.10 2.16 1.03 0.4 7.74 0.57 0.52 1.97 2.43 1.58 0.61 Cây in vitro chuyển vào tổ hợp môi trường tạo chồi tạo lá, qua kết thấy bình tam giác phát triển không khác biệt nhiều so với bịch nilon Cả hai cho hệ số nhân chồi cao, phát triển khỏe mạnh Hệ số nhân chồi bịch nilon tốt, đạt 7.74 chồi/mẫu, số lượng rễ trung bình 0.52 rễ/chồi, số lượng trung bình 2.43, sinh trưởng tốt Do việc thay bịch nilon bình tam giác xem giải pháp tiết kiệm chi phí sản xuất, giảm giá thành giống Sự thay không ảnh hưởng đáng kể hệ số nhân chồi, tạo rễ phát triển in vitro 28 Hình 3.8 Lan Cattleya MT12 bịch nilon 3.6 Nghiên cứu khả sống sót lan Cattleya đưa đất Sau lấy kết quả, mở nắp bình để ngồi tự nhiên ngày, sau dùng phanh gấp cụm chồi lan khỏi bình, rửa rễ vòi nước, trồng giá thể sơ dừa; tuần tưới nước - lần Sau tháng quan sát lan phát triển bình thường, tỷ lệ sống khoảng 80 - 90%, xanh trước, số mọc thêm rễ Hình 3.9 Lan Cattleya đưa đất 29 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ Kết luận: Có thể sử dụng ánh sáng tự nhiên giải pháp để thay thế, tiết kiệm lượng từ việc vận hành máy lạnh, đèn chiếu sáng, điều kiện vơ trùng…như phịng thí nghiệm việc nhân giống quy mô công nghiệp lan Cattleya Môi trường nhân chồi tốt cho lan Cattleya môi trường khảo sát MT12 Hệ số nhân chồi đạt 7.74 chồi/mẫu, số lượng rễ trung bình 0.52 rễ/chồi, số lượng trung bình 2.43 Các thao tác cấy tiến hành phịng thí nghiệm từ giai đoạn đến hệ số nhân chồi mẫu cao hồn tồn ni nhà lưới hộ gia đình trồng lan Môi trường tạo rễ tốt MT11 với số lượng rễ đạt 5.81 rễ/chồi, chiều dài trung bình rễ 3.07 cm Ở ngồi tự nhiên phát triển rễ tốt so với phịng thí nghiệm Giai đoạn hình thành phát triển rễ hồn tồn ni nhà lưới Ở ngồi tự nhiên có khác biệt khả sinh trưởng lan Cattleya so với phịng thí nghiệm, sinh trưởng khỏe mạnh có hình thành sắc tố tím đỏ chiếu sáng với cường độ lớn 30 Cây Cattleya sinh trưởng tốt nuôi bịch nilon, bịch nilon thay bình tam giác biện pháp tiết kiệm chi phí sản xuất Khuyến nghị: Để hồn thiện chu trình nhân giống lan Cattleya quy mơ cơng nghiệp hộ gia đình việc giảm chi phí sản xuất, giảm giá thành giống chúng tơi có khuyến nghị sau: - Nghiên cứu giá thể, nguồn cacbon thay đường sucrose để giảm chi phí sản xuất - Nghiên cứu vật liệu thay bình tam giác để giảm giá thành sản xuất - Nghiên cứu mùa năm thay ánh sáng nhân tạo ánh sáng tự nhiên TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước Lê Thị Lý Anh, Nguyễn Thị Hương, Nguyễn Quang Thạch (2005), “Nghiên cứu tạo củ lily in vitro sinh trưởng lily trồng từ củ in vitro”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn, 51, tr 33-35 Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Quang Thạch (2004), “Nghiên cứu nhân nhanh in vitro giống hoa cúc nhật Rivalry”, Tạp chí nơng nghiệp phát triển nơng thơn, 7,tr 927-975 Nguyễn Bá (1997), “Thực vật chuyển gene môi trường”, Sinh học ngày nay, Dịch từ La Recherch Đái Duy Ban, Lê Thanh Hịa (1996), Cơng nghệ sinh học vật nuôi trồng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Đái Duy Ban, Lữ Thị Cẩm Vân (1994), Những thành tựu khoa học kỹ thuật đưa vào sản xuất, Chuyên đề: Công nghệ gene sản xuất vacxin hệ mới, Trung tâm thông tin tư liệu, Trung tâm Khoa học tự nhiên Công nghệ Quốc gia, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Võ Văn Chi (2003), Từ điển thực vật thông dụng, Tập 2, Nxb Khoa học Kỹ thuật 31 Trịnh Mạnh Dũng & Vũ Ngọc Phượng, “Vai trò ánh sáng tự nhiên nhân giống in vitro phong lan chuối”, Viện Sinh học Nhiệt Đới Phạm Hoàng Hộ (2003), Cây cỏ Việt Nam , Quyển III, Nhà xuất trẻ, Tr 843-844 Dương Mộng Hùng (2005), "Nhân giống lan tai trâu phương pháp nuôi cấy ống nghiệm", Tạp chí Nông nghiệp phát triển nông thôn 3, Tr.126-127 10 Phan Xuân Huyên, Nguyễn Trung Ái, Nguyễn Thị Lang, cs (2004), "Phục tráng nhân nhanh giống địa lan Cymbidium ni cấy đỉnh sinh trưởng", Tạp chí Sinh học 26(1), Tr.48-54 11 Nguyễn Hồng Lộc (1998), Bài giảng ni cấy mô tế bào thực vật, Khoa sinh học, Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế 12 Nguyễn Đức Lượng, Nguyễn Thị Thủy Tiên (2002), Công nghệ tế bào, Nxb Y học, Hà Nội 13 Phan Cự Nhân, Trần Đình Miên (1997), Tìm hiểu cơng nghệ sinh học đại, Nxb Giáo dục, Hà Nội 14 Dương Tấn Nhựt Đỗ Thị Tâm (1996), "Nhân giống vơ tính số giống địa lan Cymbidium đỉnh sinh trưởng", Tạp chí Sinh học 18(1), Tr.40-42 15 Dương Tấn Nhựt, Trần Ngọc Thủy Tiên (2004), “Một số kết nghiên cứu hạt nhân tạo hoa lily (Lilium spp.)”, Tạp chí Công nghệ Sinh học, 2(3), tr 359-370 16 Mai Văn Phơ Nguyễn Hồng Lộc (1995), "Ni cấy mơ lan nghing xuân", TT Khoa học công nghệ Thừa Thiên-Huế, Tr.65-67 17 Trần Duy Quý (1997), Các phương pháp chọn tạo giống trồng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 18 Hoàng Thị Sản, Hoàng Thị Bé (2005), Phân loại học thực vật, Bộ giáo dục đào tạo – dự án đào tạo giáo viên THCS, Nxb Đại học Sư phạm 19 Lê Thanh Sang (2006), “Xác định môi trường nhân nhanh giống lan Cattleya phương pháp nuôi cấy mô”, luận văn tốt nghiệp, trường Đại học Cần Thơ 20 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật – Nghiên cứu Ứng dụng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 32 21 Nguyễn Quang Thạch, Hoàng Thị Nga, Lê Văn Vi, cs (2008), "Xây dựng quy trình kỹ thuật ni trồng địa lan Cymbidium spp cấy mô", TC Nông nghiệp phát triển nông thôn, Tr.18-22 22 Nguyễn Quang Thạch cs (2000), “Nghiên cứu nhân nhanh giống hoa chuông phương pháp ni cấy in vitro”, Tạp chí Nơng nghiệp, Cơng nghiệp, Thực phẩm, số 12, tr 548-550 23 Phan Văn Thuần (2008), “Nghiên cứu nhân giống vơ tính in vitro hoa Păng-Xê (Viola tricolor L.)”, Luận văn thạc sĩ khoa học Sinh học, Trường Đại học Khoa học-Đại học Huế 24 Hoàng Thu (2009), “nghiên cứu xây dựng qui trình nhân nhanh in vitro giống lan hồ điệp nhập nội (phalaenopsis)”,Khoa Công nghệ Sinh Học, Viện Đại Học Mở Hà Nội, luận văn tốt nghiệp 25 Thư viện tỉnh Bình dương (2015), lấy web: [ http://thuvienbinhduong.org.vn] 26 Nguyễn Văn Uyển tác giả (1984), Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống trồng, Nxb TP Hồ Chí Minh 27 Nguyễn Văn Uyển (1993), Ni cấy mô tế bào thực vật phục vụ công tác giống trồng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 28 Trung tâm cơng nghệ sinh học TP Hồ Chí Minh (27-09-2008), “Gieo hạt lan Cattleya nẩy mầm điều kiện in-vitro” Tài liệu nước 29 Arditti Joseph (2008), Micropropagation of orchids, Blackwell Pub., Malden, MA ; Oxford 30 Atique Akbar M and Shyamal Roy K (2006), “Effects of liquid medium on rooting and acclimation of regenerated microshoots of banana (Musa sapientum L.) cs Sagar”, Plant Tissue Culture & Biotech, 16(1), pp 11-18 31 Chen Jenn-Yih Mau-Shing Yeh (2002), "In Vitro Propagation of Nervilia purpurea (Hay.) Schetr And N aragoana Gaud", Journal Of Agriculture and Forestry, National Chung Hsing University College of Agriculture 51(2), Tr.21-32 33 32 Du Q., W L Chen, Z H Wang (2005), "Study on tissue culture and plant regeneration of Nervilia fordii", China journal of Chinese materia medica 30(11), Tr.812-814 33 He Fuchang, He Dingquan, Chen Xinghua (1990), "In vitro culture of Nervilia fordii", Chinese Journal of Tropical Crops 11(1), Tr.97-101 34 Li Bin (2008), "Tissue Culture of Nervilia fordii(Hance)Schltr Corm", Journal of Anhui Agricultural Sciences (35), Tr.15358-15359 35 Rober N T., Dennis J G (2000), Plant Tissue Culture Concept and Laboratory Exercise, CRC Press, New York 36 ShouLing Li, Bai YanBing, Gao Yan, cs (2009), "Propagation technique for Nervilia fordii corm tissue culture.", Guangxi Agricultural Sciences 40(7), Tr 810-812 Tài liệu internet 37 http://www.phonglanviet.com.vn/cach-trong-cac-loai-lan-thuoc-giongcattleya-a-35.aspx 38 http://sinhhocnongnghiep.vn/vi/san-pham/chi-tiet-san-pham/38-giong-lancattleya.html 39 http://vuonhoalan.net/default.asp? tab=detailnews&zone=94&id=101&tin=70&title=nguon-goc-hoa-lan-cattleya 40 http://www.botanyvn.com/print.asp?param=news&newsid=663 PHỤ LỤC Các mẫu lan Cattleya phịng thí nghiệm tự nhiên (vườn lan) tháng MT (thí nghiệm) MT1 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT2 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT3 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT4 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT5 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT6 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT7 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT8 (vườn lan) MT (thí nghiệm) MT9 (vườn lan) MT 10 (thí nghiệm) MT10 (vườn lan) MT 11 (thí nghiệm) MT11 (vườn lan) MT 12 (thí nghiệm) MT12 (vườn lan) Các mẫu lan Cattleya tự nhiên (vườn lan) tháng MT1 MT2 MT3 MT4 MT5 MT7 MT8 MT9 MT10 MT11 Các mẫu lan Cattleya trồng đất Lan Cattleya trồng đất