(Luận văn) nghiên cứu nhân giống cây bạch đàn lai u6 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào

i ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM ĐỖ THÚY LINH lu an va n NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BẠCH ĐÀN LAI U6 to p ie gh tn BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC nf va an lu Chuyên ngành Khoa : Công nghệ sinh học : CNSH - CNTP : 2011 - 2015 z m co l gm @ Khoá học : Chính quy z at nh oi lm ul Hệ đào tạo an Lu Thái Nguyên, năm 2015 n va ac th si ii ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM ĐỖ THÚY LINH lu an va n NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BẠCH ĐÀN LAI U6 to p ie gh tn BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC an lu : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Lớp : K43 - CNSH nf va Hệ đào tạo z at nh oi Khoá học lm ul Khoa : CNSH - CNTP : 2011 - 2015 z Giảng viên hƣớng dẫn : ThS Dƣơng Mạnh Cƣờng @ m co l gm ThS Lê Thị Hảo an Lu Thái Nguyên, năm 2015 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Qua tháng thực tập Bộ môn Công Nghệ Tế Bào, Viện Khoa học Sự Sống đến em hoàn thành đề tài Để đạt kết ngày hôm nay, em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa, Viện Khoa Học Sự Sống, tạo điều kiện giúp đỡ em thời gian qua Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo Th.S Dương Mạnh Cường, Th.S Lê Thị Hảo người thầy, người cô trực tiếp hướng dẫn, tận tình bảo giúp đỡ em suốt q trình nghiên cứu, học tập hồn thành đề tài lu Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, an Em xin chân thành cảm ơn! n va động viên, giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu to gh tn Thái nguyên, ngày tháng năm 2014 p ie Sinh viên thực d oa nl w nf va an lu Đỗ Thúy Linh z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1 Kết ảnh hưởng nồng độ BAP đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 (sau 25 ngày nuôi cấy) 32 Bảng 4.2 Kết ảnh hưởng kinetin đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 (sau 25 ngày nuôi cấy) 35 Bảng 4.3 Kết ảnh hưởng kết hợp kinetin IAA đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 (sau 25 ngày nuôi cấy) 37 lu Bảng 4.4 Kết ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi bạch đàn an lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) 39 va n Bảng 4.5 Kết ảnh hưởng IAA đến khả rễ chồi bạch đàn to gh tn lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) 41 p ie Bảng 4.6 Kết ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) 42 nl w Bảng 4.7.Kết nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến tỉ lệ sống d oa bạch đàn lai (sau 60 ngày trồng) 45 nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 4.1 Biểu đồ thể ảnh hưởng BAP đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn 33 Hình 4.1 Ảnh hưởng BAP đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 34 Hình 4.2 Biểu đồ thể ảnh hưởng kinetin đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn 35 Hình 4.2 Ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 36 lu Hình 4.3 Biểu đồ thể ảnh hưởng Kinetin kết hợp với IAA đến khả an nhân nhanh chồi bạch đàn 37 va n Hình 4.3 Ảnh hưởng kết hợp kinetin IAA đến khả nhân to gh tn chồi bạch đàn lai U6 38 ie Hình 4.4 Biểu đồ thể ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi p bạch đàn 40 nl w Hình 4.5 Biểu đồ thể ảnh hưởng IAA đến khả rễ chồi d oa bạch đàn 41 an lu Hình 4.6 Biểu đồ thể ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn 43 nf va Hình 4.6 Ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả rễ z at nh oi lm ul chồi giống bạch đàn lai U6 44 z m co l gm @ an Lu n va ac th si iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT lu 2,4-D : 2,4-diclorophenolxy acetic acid BAP : Benzyl amino purin ĐC : Đối chứng Cs : Cộng CT : Công thức CV : Coeficient of Variation ĐTST : Điều tiết sinh trưởng an Đất tầng B: Đất p ie gh tn to Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Singnificant Difference Test MS : Murashige & Skoog (1962) NAA : 1- Napthalene acetic acid : Nhà xuất TB : Trung bình nl w : Indole - - butylric acid oa n va IBA NXB d : Thidiazuron nf va : Woody Plant Medium z at nh oi lm ul WPM an lu TDZ z m co l gm @ an Lu n va ac th si v MỤC LỤC PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Bạch đàn 2.1.1 Nguồn gốc phân loại Bạch đàn lu an 2.1.2 Đặc điểm thực vật học n va 2.2 Giá trị kinh tế cây bạch đàn urophylla 2.3.1 Sơ lược lịch sử nuôi cấy mô tế bào thực vật gh tn to 2.3 Khái quát nuôi cấy mô tế bào thực vật p ie 2.3.2 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.3 Cơ sở khoa học phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật nl w 2.4 Các giai đoạn nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 d oa 2.4.1 Chuẩn bị mẫu 11 an lu 2.4.2 Khử trùng mẫu cấy 11 nf va 2.4.3 Tạo chồi nhân nhanh 12 lm ul 2.4.4 Tạo mơ hồn chỉnh 13 2.4.5 Chuyển in vitro vườn ươm 14 z at nh oi 2.5 Các nhân tố ảnh hưởng tới trình nhân giống bạch đàn urophylla 14 2.5.1 Môi trường nghiên cứu 14 z 2.4.2 Các điều kiện nghiên cứu 19 gm @ 2.4.3 Vật liệu nghiên cứu 20 l 2.4.4 Điều kiện vô trùng 20 m co 2.4.5 Buồng nuôi cấy 21 an Lu 2.5 Tình hình nghiên cứu bạch đàn nước giới 21 2.5.1 Tình hình nghiên cứu nhân giống bạch đàn giới 21 n va ac th si vi 2.5.2 Tình hình nghiên cứu nhân giống bạch đàn nước 22 PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 25 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu: 25 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 25 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 25 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 25 3.2.2 Thời gian tiến hành 25 lu 3.3 Nội dung nghiên cứu 25 an va 3.4 Phương pháp nghiên cứu 26 n 3.5 Các tiêu theo dõi 31 gh tn to 3.6 Phương pháp xử lý số liệu 31 p ie PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 4.1 Kết ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả nl w nhân chồi bạch đàn lai U6 32 d oa 4.2 Kết ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả an lu rễ chồi bạch đàn lai U6 39 nf va 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến tỷ lệ sống 44 bạch đàn lai 44 lm ul PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 z at nh oi 5.1 Kết luận 47 5.2 Kiến nghị 47 z TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 gm @ I Tiếng Việt 48 m co l II Tiếng Anh 50 an Lu n va ac th si PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong năm gần đây, công nghiệp Việt Nam ngày phát triển nhanh, có ngành sản xuất giấy đồ gỗ gia dụng Một số công nghiệp lâu năm trọng phát triển đem lại nhiều lợi ích kinh tế cho người nơng dân có bạch đàn lai U6 (hay gọi bạch đàn nâu) lu Bạch đàn lai U6 có tên khoa học Eucalyptus urophylla S.T Blake, an thuộc họ Sim Myrtaceae (Hoàng Thị Sản cs, 2009) [13].Là loại mọc tự va n nhiên có nguồn gốc từ châu Úc, chúng sinh trưởng phổ gh tn to sinh thái rộng tập trung vùng thấp ven biển, mọc ie vùng cao (2000m so với mặt biển) hay vùng khô cạn (sa mạc p bán sa mạc) Ở Việt Nam gây trồng bạch đàn từ năm 1930 hai nl w miền Nam, Bắc Hiện bạch đàn trồng phổ biến nhiều nơi, d oa mang lại nhiều lợi ích cho người như: Tăng hiệu kinh tế, nâng cao thu an lu nhập nhiều người dân góp phần xóa đói giảm nghèo số tỉnh nf va miền núi Việt Nam (Lê Đình Khả cs, 2002) [5] Giống bạch đàn lm ul urophylla loại có khả sinh trưởng nhanh, có biên độ sinh thái z at nh oi rộng, dễ trồng nhiều loại địa hình khác nhau, có khả chịu gió bão sử dụng để làm rừng phịng hộ, chống xói mịn đất đai Ngồi ra, giống bạch đàn có dạng thân thẳng, thon đẹp, tỉa cành tự nhiên tốt, không để lại z vết sẹo thân nên thu hút nhiều người trồng số giống bạch l gm @ đàn khác (Lê Đình Khả, 2003) [6] co Bạch đàn lai công nghiệp dài ngày nước ta số quốc m gia khác Ở nước ta, bạch đàn lai trồng sau 7-8 năm cho thu an Lu hoạch gỗ để làm nguyên liệu chế biến bột giấy Sau 15 năm, Bạch đàn n va ac th si khai thác làm gỗ gia dụng, gỗ xây dựng (Lê Sơn cs, 2005) [14] Hiện nay, nhu cầu sử dụng người ngày cao làm cho lượng gỗ giấy tiêu thụ ngày nhiều việc sản xuất chưa đáp ứng đủ yêu cầu diện tích trồng bạch đàn ngày thu hẹp dần lượng giống đưa thị trường chưa đáp ứng đủ yêu cầu người trồng (Đoàn Thị Mai cs, 2010) [10] Do đó, để đáp ứng cho thị trường sản xuất giấy sản xuất đồ gia dụng, cần phải có số lượng giống với chất lượng đảm bảo, ổn định lu đồng Trong đó, việc sản xuất giống hạt hay công nghệ an giâm hom cho hiệu sản xuất không cao nguyên nhân như: Hệ số va n nhân giống chưa cao, giống sản xuất khơng hồn tồn bệnh, sản gh tn to xuất phụ thuộc vào thời vụ, khó khăn việc vận chuyển nơi khác ie nhau… gây ảnh hưởng đến giống suất sau (Nguyễn p Đức Thành, 2000) [18] nl w Nhằm đáp ứng nhu cầu thực tiễn trên, tiến hành đề tài: an lu mô tế bào” d oa “Nghiên cứu nhân giống bạch đàn lai U6 phương pháp nuôi cấy nf va 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài z at nh oi cấy mô tế bào lm ul Nghiên cứu nhân giống bạch đàn lai U6 phương pháp nuôi + Xác định ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả z @ nhân chồi bạch đàn lai U6 co rễ chồi bạch đàn lai U6 l gm + Xác định ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả m + Xác định ảnh hưởng số giá thể đến tỉ lệ sống bạch an Lu đàn lai U6 vườn ươm n va ac th si 42 * Nhận xét: Qua bảng 4.4 hình 4.4, sau 20 ngày nuôi cấy ta thấy môi trường không bổ sung IAA ta thấy số rễ đạt 1,01 rễ/cây, rễ ngắn, màu nâu Mặt khác, mơi trường có bổ sung IAA số rễ/cây chiều dài TB rễ tăng dần theo cơng thức Trong đó, cơng thức môi trường bổ sung IAA với nồng độ 0,4 mg/l cho số rễ/cây cao đạt 2,92 số rễ/cây, chiều dài rễ 1,6 cm Bảng 4.6 Kết ảnh hƣởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) Tỷ lệ Số rễ/ thức IBA ( mg/l) rễ (%) (rễ) CT1(ĐC) 0,0 31.54 1.01 0.26 Nâu 0,1 94.4* 3.8* 1.60* Trắng 0,2 83.3* 3.4* 2.00* Trắng 0,3 96.4* 4.3* 1.90* Trắng 83.2* 3.1* 1.60* Trắng 0,5 87.0* 3.6* 1.80* Trắng 5.03 0.95 0.12 3.50 1.60 4.20 an Nồng độ lu lu Chiều dài Công rễ (cm) n va gh tn to p ie CT2 Màu sắc TB rễ CT3 nf va z at nh oi lm ul CV% 0,4 an LSD d CT6 oa CT5 nl w CT4 Ghi chú: (*) Chất lượng rễ xấu; (**) Chất lượng rễ trung bình; (***) Chất lượng rễ tốt; ns: sai khác khơng có ý nghĩa; * sai khác có ý nghĩa z m co l gm @ an Lu n va ac th si 43 lu an Hình 4.6 Biểu đồ thể ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn va n (sau 20 ngày nuôi cấy) to tn * Nhận xét: ie gh Qua bảng 4.6 hình 4.6, chúng tơi nhận thấy tỷ lệ rễ biến động từ p 31.54% đến 96,40% Sau 20 ngày nuôi cấy, môi trường không bổ sung nl w IBA ta thấy tỷ lệ rễ đạt 31.54%, số rễ/cây đạt 1.01 rễ, chiều dài rễ d oa ngắn, chất lượng rễ kém, rễ có màu nâu Trong mơi trường có bổ sung IBA, ta an lu thấy nồng độ IBA 0,3 mg/l cho tỷ lệ rễ tốt đạt 96,40 %, số rễ/cây đạt nf va 4.30 rễ, chiều dài rễ cao, chất lượng rễ tốt, rễ có màu trắng Tăng nồng độ lm ul IBA tỷ lệ rễ tăng nhẹ từ 83,20% lên 87,00%, chất lượng rễ trung bình Theo tác giả Lê Sơn cs (2002) nghiên cứu nuôi cấy mô thành công z at nh oi cho giống bạch đàn lai U29C3 Kết cho thấy mơi trường rễ thích hợp môi trường MS* bổ sung IBA nồng độ 1.5mg/l tỷ lệ rễ đạt 97.3% (Lê Sơn z @ cs, 2002) [13] l gm Darus H Ahmas thuộc viện nghiên cứu lâm nghiệp Malaysia đưa kết rễ Bạch đàn E pellita Những chồi nhân nhanh có chiều cao co m >0,5cm cấy vào mơi trường tạo rễ chất điều hồ sinh trưởng tốt an Lu n va ac th si 44 cho tạo rễ IBA 1000 ppm với tỷ lệ rễ 40% (O L Gamborg, G C Phillips, 1997) [26] So sánh kết nghiên cứu chúng tơi với cơng trình cơng bố cho thấy kết nghiên cứu tác giả có khác nhau, điều giải thích khác biệt giống bạch đàn thành phần môi trường tác giả khác nên dẫn đến kết khác lu an n va p ie gh tn to IBA 0,3mg/l nl w IBA 0,0mg/l d oa Hình 4.6 Chồi bạch đàn lai U6 mơi trƣờng rễ có bổ sung chất điều tiế an lu sinh trƣởng (sau 25 ngày nuôi cấy) lm ul bạch đàn lai nf va 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số giá thể đến tỷ lệ sống Đây giai đoạn cuối quy trình nhân giống in vitro, có ý nghĩ z at nh oi định đến hiệu phương pháp nhân giống Các có đủ rễ, thân, từ bình ni cấy đưa vườn ươm Cây đưa z vườn ươm có tỷ lệ sống cao hiệu kỹ thuật nhân giống @ m co l gm lớn, ý nghĩa thuyết phục khả ứng dụng cao an Lu n va ac th si 45 Bảng 4.7.Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số giá thể đến tỉ lệ sống bạch đàn lai (sau 60 ngày trồng) Công Giá thể thức CT1 Đất tầng B ( ĐC) CT2 50% đất tầng B + 50% Số (cây) sống (cây) 30 15 50,00 30 27 90,00 30 21 70,00 30 16 53,33 30 19 63,33 trấu hun 50% đất tầng B + 50% lu CT3 an va bã nấm 50% đất tầng B+ 30% n CT4 to trấu hun + 20% phân gà ie 50% đất tầng B + 30% p gh tn trấu hun + 20% bã nấm CT5 (%) sau 60 ngày w 5,9 an lu * Nhận xét: 7,3 d LSD oa nl CV% Tỷ lệ sống Số nf va Qua bảng 4.7 ta thấy CT2 cho tỷ lệ sống cao đạt 90%, CT tỷ lệ lm ul sống thấp đạt 50% sau 30 ngày nuôi cấy z at nh oi Với giá trị LSD đạt 7,3 cơng thức 2, cơng thức 3, cơng thức sai khác có ý nghĩa với đối chứng Theo dõi kết sau 60 ngày trồng, tỷ lệ sống in vitro giá thể đất tầng B + trấu hun (1:1) đạt 90% sinh z vàng, thối gốc), tỷ lệ sống thấp đạt 50% l gm @ trưởng phát triển tốt Trên giá thể đất tầng B phát triển (lá co Theo Đoàn Thị Mai cs (2000), đưa giá thể thích hợp cho Bạch m đàn 45% đất tầng B + 45% trấu hun + 10% phân chuồng hoai mục cho tỷ lệ an Lu n va ac th si 46 phát triển đạt 93.33% sinh trưởng phát triển tốt (Đoàn Thị Mai cs,2000) [9] Kết lý giải sau: Giá đất tầng B + trấu hun với tỷ lệ 1:1 có độ tơi xốp, giàu dinh dưỡng dễ thích nghi, bị úng hay thối rữa, phát triển tốt Giá thể có chứa 100% đất tưới nước, đất dễ bị sít xuống, khơng có độ tơi xốp, khó nước, rễ bị chẹt khó hút nước chất dinh dưỡng Kết luận: Giá thể thích hợp cho sinh trưởng phát triển Bạch lu đàn gian đoạn vườn ươm đất tầng B + trấu hun với tỷ lệ 1:1, cho tỷ lệ sống an cao, phát triển tốt n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 47 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Mơi trường MS* có bổ sung 30g/l saccarose + 100mg/l myo inositol + 5,5g/l agar + BAP 0,6 mg/l; pH = 5,7 thích hợp cho nhân nhanh chồi bạch đàn in vitro cho hệ số nhân chồi đạt 3,55 lần chiều cao trung bình chồi đạt 3,47cm Mơi trường MS* có bổ sung saccarose 30g/l + myo inositol 0,1g/l + agar 5,5g/l + IBA 0,3mg/l; pH= 5,7 môi trường rễ thích hợp tạo hồn chỉnh lu cho trung bình số rễ/cây đạt 4,30 rễ/cây chiều dài trung bình rễ đạt 1,90 cm, tỷ an lệ rễ đạt 96,40% va n Giá thích hợp cho Bạch đàn nuôi cấy mô cho ỷ lệ sống cao gh tn to đất tầng B + trấu hun với tỷ lệ 1:1 cho tỷ lệ sống đạt 90,00 %, phát p ie triển tốt 5.2 Kiến nghị nl w Cần tiếp tục đưa giống bạch đàn ni cấy mơ ngồi sản xuất diện d oa rộng để khảo sát sinh trưởng, phát triển, suất kiểm tra chất lượng giống an lu Đưa công nghệ sản xuất bạch đàn kỹ thuật nuôi cấy mô nf va quy mô công nghiệp nhằm cung cấp giống phục vụ sản xuất, thương phẩm z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Nguyễn Thị Lý Anh cs (2008), Nhân giống bạch đàn urophylla U6 kỹ thuật thủy canh, Tạp chí Khoa học Phát triển 2008: Tập VI, Số 4: 305-311 Ngơ Xn Bình (2010), Nuôi cấy mô tế bào thực vật - Cơ sở lý luận ứng dụng, NXB Khoa học - Kỹ thuật, Hà Nội Phạm Tiến Dũng (2003), Xử lý kết thí nghiệm máy tính lu IRRISTAT 4.0 Windows, NXB Nông Nghiệp an Đặng Ngọc Hùng (2009), Nghiên cứu nhân giống dòng bạch đàn lai va n UE35 UE56 Eucalyptus urophylla E Exserta phương to Thái Nguyên ie gh tn pháp nuôi cấy mô, luận văn thạc sĩ lâm sinh, trường Đại học Nơng lâm p Lê Đình Khả cs (2002), Công nghệ nhân giống sản xuất giống oa nl w trồng, giống lâm nghiệp giống vật nuôi, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, trang 166 - 182 d an lu Lê Đình Khả (2003), Chọn tạo nhân giống cho số loài trồng nf va rừng chủ yếu Việt Nam, NXB Nông nghiệp, Hà Nội z at nh oi học Huế, TP Huế lm ul Nguyễn Hoàng Lộc (2006), Giáo trình cơng nghệ tế bào, Nhà xuất đại Đoàn Thị Mai (2004), Báo cáo kết thực đề tài: KC.04.08 Hồn thiện quy trình nhân nhanh giống trồng rừng suất cao z @ công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật cho số dòng keo lai, bạch l gm đàn lai keo tràm, Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam co Đoàn Thị Mai cs (2000), Kết bước đầu nhân giống bạch đàn lai m phương pháp nuôi cấy mô phân sinh, Tạp chí Lâm Nghiệp, số 10 - an Lu 2000 n va ac th si 49 10 Đoàn Thị Mai cs (2010), Báo cáo tổng hợp kết khoa học, Nghiên cứu nhân nhanh giống keo lai tự nhiên, keo lai nhân tạo, bạch đàn uro, bạch đàn lai nhân tạo( chọn tạo) lát hoa công nghệ tế bào, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 11 Đoàn Thị Nga, 1997,Trung tâm nghiên cứu nguyên liệu giấy Phù Ninh, Ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô nhân hom lâm nghiệp Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 12 Nguyễn Hoàng Nghĩa (2000), Chọn giống bạch đàn Eucalyptus theo sinh lu trưởng kháng bệnh Việt Nam, NXB Nông nghiệp, Hà Nội an 13 Hồng Thị Sản cs (2009), Giáo trình Phân loại học thực vật, NXB va n Giáo dục chất lượng cao phương pháp nuôi cấy mô, Viện Khoa học Nông p ie gh tn to 14 Lê Sơn cs (2005), Nhân giống số loài trồng rừng có suất, nghiệp Việt Nam nl w 15 Nguyễn Ngọc Tân, Trần Hồ Quang (1997).Nhân giống lai bạch d oa đàn liễu bạch đàn trắng phương pháp nuôi cấy mô.Kết an lu nghiên 117 cứu Khoa học chọn giống rừng.Nhà xuất nông nf va nghiệp, trang 103- 107 lm ul 16 Nguyễn Ngọc Tân cs (1997) Nhân giống Keo Lai nuôi cấy mô z at nh oi phân sinh.Kết nghiên cứu Khoa học chọn giống rừng Tập 2, Chủ biên Lê Đình Khả Nhà xuất Nông nghiệp, trang 147 - 152 17 Nguyễn Quang Thạch (2000), Giáo trình sinh lý thực vật, NXB Nơng z @ nghiệp, Hà Nội co ứng dụng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội l gm 18 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật - nghiên cứu m 19 Nguyễn Kim Thanh (2005), Giáo trình sinh lý học thực vật, Nxb Giáo an Lu dục, Hà Nội n va ac th si 50 20 Nguyễn Quang Thạch cs (2009), Giáo trình sở cơng nghệ sinh học, Nxb Nông Nghiệp, Hà Nội 21 Đỗ Năng Vinh (2002), Công nghệ sinh học trồng, Nxb Nông Nghiệp, Hà Nội 22 Vũ Văn Vụ cs (2008), Giáo trình cơng nghệ sinh học, Nxb Giáo Dục II Tiếng Anh 23 Bhat K M and Hwanok Ma (2002), Teak growers unite, in ITTO tropical forest update, pp - lu 24 Dodd J H., Roberts L W.(1999), Experiments in plant tissue culture, an Cambridge University press, United Kingdom va n 25 Eldridge K, J Davidson, C Harwood and G van Wyk (1996) Eucalyptus to April 10,1996 p ie gh tn provenances for short rotation forestry Experiment Station, HARC, 25 Harwood, C E., 1998 Eucalyptus pellita, An annotated Biography nl w CSIROnForestry and Forest Products, Australia 70 pp d oa 26 Gamborg O L, G C Phillips (1997), “Plant Cell, Tissue and Organ an lu culture-bG Fundamental Methods cell spinger”, Lab Manual nf va 27 Higa, A.R., & Resende, M D V., 1994 Breeding acacia mearnsii in lm ul Southern Brazil.Australia Tree Species Research in China ACIAR z at nh oi Proceedings, No.48, Ed A G Brown, pp 158 - 160 28 Sharma J K (1994), Pathological investigations in forest nurseries and plantations in Vietnam, FAO VIE/92/022 Hanoi, Vietnam 46 p z gm @ 29 Trindate, H Ferreina, J G Pais, M S Aloni, R (1990), The role of Cytokinin and auxin in rapid multiplication of shoots of Eucalyptus l m co globolus grown in vitro, Aust For 53(4), pp 221-223 an Lu n va ac th si Kết ảnh hƣởng BAP đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4.90185 980370 638.00 0.000 R 120333E-01 601666E-02 3.92 0.055 * RESIDUAL 10 153663E-01 153663E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 4.92925 289956 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTBC FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE VARIATE V004 CCTBC lu an n va p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.02885 405770 71.10 0.000 R 653333E-02 326667E-02 0.57 0.586 * RESIDUAL 10 570668E-01 570668E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.09245 123085 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE MEANS FOR EFFECT T - T NOS 3 3 3 HSNC 1.51000 1.75000 1.65000 3.00000 2.11000 2.49000 d oa nl w CCTBC 1.60000 1.90000 2.09000 2.60000 1.81000 1.65000 lu nf va an SE(N= 3) 0.226321E-01 0.436145E-01 5%LSD 10DF 0.713145E-01 0.137431 - R NOS 6 HSNC 2.05333 2.08500 2.11667 CCTBC 1.91833 1.94167 1.96500 z at nh oi lm ul MEANS FOR EFFECT R - SE(N= 6) 0.160033E-01 0.308401E-01 5%LSD 10DF 0.504269E-01 0.971783E-01 - z gm @ ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - |R | | | | | m 0.0549 0.5858 an Lu HSNC CCTBC GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= 18) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | | | 18 2.0850 0.53848 0.39200E-01 1.9 0.0000 18 1.9417 0.35084 0.75543E-01 3.9 0.0000 co OBS l VARIATE n va ac th si Kết ảnh hƣởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 7.41820 1.48364 256.24 0.000 R 270000E-02 135000E-02 0.23 0.798 * RESIDUAL 10 579005E-01 579005E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 7.47880 439929 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTBC FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE VARIATE V004 CCTBC lu an n va T p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 16.6894 3.33788 ****** 0.000 R 490000E-02 245000E-02 0.75 0.499 * RESIDUAL 10 325014E-01 325014E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 16.7268 983929 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE MEANS FOR EFFECT T NOS 3 3 3 HSNC 1.51000 3.60000 2.80000 3.00000 3.16000 2.81000 CCTBC 1.60000 4.75000 3.65000 3.23000 3.45000 2.62000 d oa nl w nf va an lu SE(N= 3) 0.439319E-01 0.329147E-01 5%LSD 10DF 0.138431 0.103716 MEANS FOR EFFECT R HSNC 2.82833 2.81333 2.79833 CCTBC 3.19500 3.22000 3.23500 z at nh oi NOS 6 lm ul R SE(N= 6) 0.310646E-01 0.232742E-01 5%LSD 10DF 0.978856E-01 0.733380E-01 - z ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE @ | | | 0.7979 0.4989 m an Lu HSNC CCTBC |R | | co OBS GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= 18) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | | | 18 2.8133 0.66327 0.76092E-01 2.7 0.0000 18 3.2167 0.99193 0.57010E-01 1.8 0.0000 l VARIATE gm F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - n va ac th si Kết ảnh hƣởng kết hợp BAP với kinetin đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE VARIATE V003 HSNC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5.10180 1.02036 316.23 0.000 R 481333E-01 240667E-01 7.46 0.011 * RESIDUAL 10 322667E-01 322667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 5.18220 304835 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTBC FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE VARIATE V004 CCTBC lu an LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF n va p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.97865 595730 184.63 0.000 R 481334E-01 240667E-01 7.46 0.011 * RESIDUAL 10 322666E-01 322666E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 3.05905 179944 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE MEANS FOR EFFECT T NOS 3 3 3 HSNC 3.60000 4.16000 4.60000 5.10000 4.32000 3.60000 d oa nl w T an lu CCTBC 3.60000 3.16000 3.93000 4.40000 3.32000 3.60000 nf va SE(N= 3) 0.327957E-01 0.327956E-01 5%LSD 10DF 0.103340 0.103340 - lm ul MEANS FOR EFFECT R NOS 6 HSNC 4.16667 4.23000 4.29333 CCTBC 3.60500 3.66833 3.73167 z at nh oi R z SE(N= 6) 0.231900E-01 0.231900E-01 5%LSD 10DF 0.730727E-01 0.730726E-01 - @ l gm ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - |R | | | | | an Lu HSNC CCTBC GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= 18) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | | | 18 4.2300 0.55212 0.56804E-01 1.3 0.0000 18 3.6683 0.42420 0.56804E-01 1.5 0.0000 m OBS co VARIATE 0.0105 0.0105 n va ac th si Kết ảnh hƣởng NAA đến khả rễ chồi bạch đàn lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE VARIATE V003 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 11.6464 2.32928 ****** 0.000 R 533332E-03 266666E-03 0.25 0.786 * RESIDUAL 10 106672E-01 106672E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 11.6576 685741 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTBR FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE VARIATE V004 CDTBR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.40280 480560 223.86 0.000 R 533334E-03 266667E-03 0.12 0.884 * RESIDUAL 10 214666E-01 214666E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.42480 142635 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE VARIATE V005 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1151.20 230.241 87.96 0.000 R 2.25275 1.12637 0.43 0.666 * RESIDUAL 10 26.1753 2.61753 * TOTAL (CORRECTED) 17 1179.63 69.3901 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS SR/C CDTBR TLRR 1.13000 0.310000 60.2400 2.20000 1.02000 74.2200 3 3.34000 1.05000 65.4400 3.55000 1.45000 83.3400 2.85000 1.35000 70.1333 2.37000 1.10000 61.2400 SE(N= 3) 0.188567E-01 0.267499E-01 0.934083 5%LSD 10DF 0.594180E-01 0.842897E-01 2.94333 MEANS FOR EFFECT R R NOS SR/C CDTBR TLRR 2.58000 1.04000 68.6083 2.57333 1.04667 69.2800 2.56667 1.05333 69.4183 SE(N= 6) 0.133337E-01 0.189150E-01 0.660496 5%LSD 10DF 0.420149E-01 0.596019E-01 2.08125 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T |R | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SR/C 18 2.5733 0.82809 0.32661E-01 1.3 0.0000 0.7856 CDTBR 18 1.0467 0.37767 0.46332E-01 4.4 0.0000 0.8842 TLRR 18 69.102 8.3301 1.6179 2.3 0.0000 0.6658 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si Kết ảnh hƣởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE VARIATE V003 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.39700 479400 72.31 0.000 R 147000E-01 734998E-02 1.11 0.369 * RESIDUAL 10 663001E-01 663001E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.47800 145765 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTBR FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE VARIATE V004 CDTBR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5.19100 1.03820 175.77 0.000 R 213333E-02 106667E-02 0.18 0.838 * RESIDUAL 10 590667E-01 590667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 5.25220 308953 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE VARIATE V005 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 541.139 108.228 12.93 0.001 R 131.809 65.9044 7.87 0.009 * RESIDUAL 10 83.6910 8.36910 * TOTAL (CORRECTED) 17 756.639 44.5082 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS SR/C CDTBR TLRR 3.43000 0.410000 83.3300 3.77000 1.60000 94.4400 3 3.35000 2.02000 83.3000 4.27000 1.90000 96.4400 3.12000 1.64000 83.2200 3.60000 1.83000 87.0333 SE(N= 3) 0.470107E-01 0.443722E-01 1.67024 5%LSD 10DF 0.148132 0.139818 5.26298 MEANS FOR EFFECT R R NOS SR/C CDTBR TLRR 3.55500 1.55333 84.9983 3.59000 1.56667 87.3433 3.62500 1.58000 91.5400 SE(N= 6) 0.332416E-01 0.313759E-01 1.18104 5%LSD 10DF 0.104745 0.988665E-01 3.72149 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T |R | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SR/C 18 3.5900 0.38179 0.81425E-01 2.3 0.0000 0.3688 CDTBR 18 1.5667 0.55584 0.76855E-01 4.9 0.0000 0.8381 TLRR 18 87.961 6.6714 2.8929 3.3 0.0005 0.0089 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si Kết ảnh hƣởng IAA đến khả rễ chồi bạch đàn lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE VARIATE V003 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 12.8712 2.57424 937.20 0.000 R 133333E-01 666667E-02 2.43 0.137 * RESIDUAL 10 274672E-01 274672E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 12.9120 759529 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTBR FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE VARIATE V004 CDTBR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 3.20860 641720 307.04 0.000 R 271000E-01 135500E-01 6.48 0.016 * RESIDUAL 10 209002E-01 209002E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 3.25660 191565 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE VARIATE V005 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1920.73 384.146 24.75 0.000 R 6.81008 3.40504 0.22 0.808 * RESIDUAL 10 155.183 15.5183 * TOTAL (CORRECTED) 17 2082.73 122.513 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS SR/C CDTBR TLRR 1.01000 0.260000 65.5700 2.82000 1.04000 75.2000 3 3.31000 1.30000 83.3300 3.19000 1.35000 88.8500 3.60000 1.60000 98.0000 2.99000 1.21000 87.0333 SE(N= 3) 0.302584E-01 0.263946E-01 2.27437 5%LSD 10DF 0.953455E-01 0.831703E-01 7.16663 MEANS FOR EFFECT R R NOS SR/C CDTBR TLRR 2.78667 1.07833 82.7750 2.82000 1.12833 82.3800 2.85333 1.17333 83.8367 SE(N= 6) 0.213960E-01 0.186638E-01 1.60822 5%LSD 10DF 0.674194E-01 0.588103E-01 5.06757 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T |R | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SR/C 18 2.8200 0.87151 0.52409E-01 1.9 0.0000 0.1372 CDTBR 18 1.1267 0.43768 0.45717E-01 4.1 0.0000 0.0157 TLRR 18 82.997 11.069 3.9393 4.7 0.0000 0.8082 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si