Luận án Tiến sĩ Nghiên cứu cơ sở khoa học bảo tồn nguồn gen các loài thuộc chi Lan kim tuyến (Anoectochilus Blume) tại Thanh Hoá

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT TRƯỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP NGUYỄN TRỌNG QUYỀN NGHIÊN CỨU CƠ SỞ KHOA HỌC BẢO TỒN NGUỒN GEN CÁC LOÀI THUỘC CHI LAN KIM TUYẾN (Anoectochilus Blume) TẠI TỈNH THANH HOÁ Ngành Q Mã số 9620211 LUẬN ÁN TIẾN SĨ LÂM NGHIỆP NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC GS.TS HOÀNG VĂN SÂM PGS TS BÙI VĂN THẮNG H Nộ - 2022 i LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn khoa học GS.TS Hoàng Văn Sâm PGS TS Bùi Văn Thắng Luận án thực thời gian từ năm 2017-2021 Các kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác trừ báo cáo, báo nghiên cứu cộng Các số liệu tham khảo, hình ảnh có trích dẫn nguồn rõ ràng Tác N ễ T ọ ậ Q ề ii LỜI CẢM ƠN Trong trình thực luận án tơi ln nhận quan tâm, hướng dẫn tận tình thầy giáo hướng dẫn khoa học, xin gửi lời cám ơn sâu sắc đến GS.TS Hoàng Văn Sâm PGS.TS Bùi Văn Thắng Luận án sản phẩm theo hợp đồng đề tài Quỹ gen cấp Quốc gia mã số NVQG-2016/07 Trân trọng cám ơn lãnh đạo Bộ, lãnh đạo Văn phịng Chương trình trọng điểm cấp Nhà nước, Vụ Khoa học CN ngành kinh tế - kỹ thuật, Bộ Khoa học Công nghệ, UBND tỉnh Thanh Hóa phê duyệt, giao tơi làm Chủ nhiệm đề tài cho phép sử dụng số kết nghiên cứu đề tài để thực luận án Xin gửi lời cám ơn sâu sắc đến đồng chí lãnh đạo, cán có liên quan Sở Nông nghiệp PTNT, Viện Nông nghiệp, Chi cục Lâm nghiệp (tên gọi trước đây), Chi cục Kiểm lâm, Vườn Quốc gia Bến En, Các Khu BTTN Xuân Liên, Pù Hu, Pù Luông khu rừng đặc dụng tỉnh Thanh Hóa, Trung tâm nghiên cứu dược liệu Bắc Trung Bộ - Viện Dược liệu tạo điều kiện giúp tơi q trình điều tra, nghiên cứu luận án Quá trình thực luận án, tơi nhận hướng dẫn tận tình thầy giáo, cô giáo trường Đại học Lâm nghiệp, Viện nghiên cứu có liên quan; cộng tác nhà khoa học: TS Khuất Thị Hải Ninh, ThS Nguyễn Thị Huyền, ThS Nguyễn Thị Thơ (Viện công nghệ sinh học Lâm nghiệp, Trường Đại học Lâm Nghiệp), TS Đỗ Đăng Giáp (Viện Sinh học nhiệt đới, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam), ThS Phan Thị Thơ (chuyên gia xử lý thống kê) Cho phép gửi lời cám ơn trân trọng tất hướng dẫn cộng tác quý báu Trân trọng biết ơn gia đình, người thân quan tâm động viên tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành luận án Hà Nội, ngày 15 tháng năm 2022 Tác N ễ T ọ Q ề iii MỘT SỐ THUẬT NGỮ DÙNG TRONG LUẬN ÁN Đa dạng sinh học: Sự đa dạng tất loài sinh vật thuộc hệ sinh thái mặt đất, biển hệ sinh thái nước khác tổ hợp sinh thái mà sinh vật thành phần; bao gồm đa dạng loài hệ sinh thái Loài đặc hữu: Những loài phân bố tự nhiên giới hạn địa lý hay nhiều khu vực, lớn nhỏ Rừng đặc dụng: Rừng xác định chủ yếu để bảo tồn thiên nhiên, mẫu chuẩn hệ sinh thái rừng quốc gia; nguồn gen sinh vật rừng; nghiên cứu khoa học; bảo vệ di tích lịch sử, văn hoá, danh lam thắng cảnh; phục vụ nghỉ ngơi, du lịch, kết hợp phịng hộ, góp phần bảo vệ môi trường (bao gồm Vườn quốc gia, khu bảo tồn thiên nhiên, rừng cảnh quan rừng thực nghiệm nghiên cứu khoa học) Rừng phòng hộ: Rừng xác định chủ yếu để phục vụ cho mục đích bảo vệ tăng cường khả điều tiết nguồn nước, bảo vệ đất, chống xói mịn, chống sa mạc hố, góp phần hạn chế thiên tai, điều hịa khí hậu, bảo đảm cân sinh thái an ninh môi trường Rừng sản xuất: Rừng sử dụng chủ yếu để sản xuất, kinh doanh gỗ, lâm sản ngồi gỗ kết hợp phịng hộ, bảo vệ mơi trường Rừng tự nhiên: Khu rừng hình thành lồi địa mà khơng phải người trồng Rừng trồng: Rừng nhân tạo, thường trồng để phục vụ mục đích, nhu cầu người Sách đỏ/Danh lục đỏ: Danh sách loài hiếm, bị đe doạ nguy cấp phủ nước IUCN quy định iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ TỪ VIẾT TẮT STT Vế ắ A dễ Anoectochilus A.formosanus Anoectochilus formosanus Hayata A.calcareus A.elwesii A.setaceus Nộ d Anoectochilus calcareus Aver Anoectochilus elwesii (C.B.Clarke ex Hook.f.) King & Pantl Anoectochilus setaceus Blume A annamensis Anoectochilus annamensis Aver AFLP BAP Viết tắt “Amplified Fragment Length Polymorphism”, Đa hình độ dài nhân chọn lọc Là chất điều hòa sinh trưởng 6-Benzylaminopurine, benzyl adenine Công ước thương mại quốc tế loài động, thực vật CITES hoang dã nguy cấp (Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora) Phân tử mang thông tin di truyền quy định hoạt 10 DNA động sống (sinh trưởng, phát triển sinh sản) sinh vật nhiều loài virus (Viết tắt cụm từ Deoxyribonucleic acid) Bảo tồn ngoại vi (hay bảo tồn chuyển chỗ) 11 Ex situ 12 GPS 13 GTSD Giá trị sử dụng 14 In-situ Bảo tồn nội vi (hay bảo tồn chỗ) 15 In vitro Tiếng Latinh, nghĩa "trong ống nghiệm" Hệ thống định vị toàn cầu (Global Positioning System) Là tiêu chuẩn hệ thống quản lý chất lượng áp dụng 16 ISO/IEC chuyên biệt cho phòng thử nghiệm hiệu chuẩn, tổ 17025 chức quốc tế tiêu chuẩn hóa ISO (International Organization for Standardization) ban hành v 17 ISSR 18 Lan kim tuyến 19 NAA Viết tắt “Inter-Simple Sequence Repeats”, Chuỗi lặp lại đơn giản Tên gọi chung cho loài thuộc chi Lan Kim tuyến (Anoectochilus Blume) Viết tắt “Naphthalene axit axetic”, chất điều hịa sinh học thúc đẩy phân chia mở rộng tế bào Viết tắt “Murashige and Skoog medium”, tên 20 MS loại môi trường tổng hợp pha sẵn, phát minh nhà khoa học thực vật Toshio Murashige Skoog Folke K vào năm 1962 21 KBTTN Khu bảo tồn thiên nhiên 22 KHCN Khoa học công nghệ 23 Knud 24 NĐ 25 PCR 26 PIC 27 RAPD 28 Rêu khô 29 SĐVN Sách đỏ Việt Nam 30 VQG Vườn Quốc gia 31 UV 32 WWF 33 IUCN Viết tắt Knudson (Knudson, 1946), tên loại môi trường tổng hợp pha sẵn Nghị Định Viết tắt "Polymerase-Chain-Reaction", phản ứng nhân DNA dựa chu kỳ nhiệt Viết tắt “Polymorphic Information Content” Viết tắt “Random amplified polymorphic DNA” kỹ thuật phân tử dựa nguyên tắc PCR Loại rêu bán sẵn thị trường cho nhu cầu trồng lan (còn gọi dớn) Viết tắt “Ultraviolet”; gọi tia tử ngoại, tia cực tím Quỹ Quốc tế Bảo vệ Thiên Nhiên (World Wide Fund For Nature) Viết tắt “International Union for Conservation of vi Nature and Natural Resources”, Liên minh Quốc tế Bảo tồn Thiên nhiên Tài nguyên Thiên nhiên 34 EN 35 VU 36 CR Viết tắt “Endangered”, Nguy cấp (trong sách đỏ IUCN) Viết tắt “Vulnerable”, Sắp nguy cấp (trong sách đỏ IUCN) Viết tắt “Critically Endangered”, Cực kỳ nguy cấp (trong sách đỏ IUCN) Viết tắt “species” phần tên loài cụ thể gặp 37 sp loài chưa biết (trong danh pháp latinh, hay tên khoa học) 38 spp Loài phụ nhiều cấp bậc thấp loài (trong danh pháp latinh, hay tên khoa học) Viết tắt “Unweighted Pair Group Method using 39 UPGMA arithmetic Averages”- phương pháp nhóm cặp khơng trọng số với giá trị trung bình số học Viết tắt “National Center for Biotechnology 40 NCBI Information”, Trung tâm Thông tin Công nghệ sinh học Quốc gia, đơn vị trực thuộc Thư viện Y học Quốc gia Hoa Kỳ, trực thuộc Viện Y tế Quốc gia Hoa Kỳ 41 IVA 42 IVB Kiểu rừng nguyên sinh (trong Qui phạm Thiết kế Kinh doanh rừng, QPN – 84 ) Rừng thứ sinh phục hồi (trong Qui phạm Thiết kế Kinh doanh rừng, QPN – 84) Rừng bị khai thác mức có thời gian phục hồi tốt Đặc trưng cho kiểu hình thành tầng 43 IIIa2 vươn lên chiếm ưu sinh thái với lớp địa phận có đường kính 20 – 30cm Rừng có tầng trở lên, tầng tán khơng liên tục hình thành chủ yếu từ vii tầng trước đây, rải rác cịn có số to khoẻ vượt tán tầng rừng cũ để lại (trong Qui phạm Thiết kế Kinh doanh rừng, QPN – 84 ) Rừng bị khai thác vừa phải phát triển từ IIIA2 lên Quần thụ tương đối khép kín với nhiều tầng 44 IIIa3 Đặc trưng kiểu khác với IIIA2 chỗ số lượng nhiều có số có đường kính lớn (> 35cm) khai thác sử dụng gỗ lớn (trong Qui phạm Thiết kế Kinh doanh rừng, QPN – 84) Kiểu IIIB đặc trưng quần thụ bị chặt chọn lấy gỗ quí, gỗ tốt chưa làm thay đổi 45 IIIB đáng kể kết cấu ổn định rừng Khả cung cấp rừng nhiều, rừng giầu trữ lượng với thành phần gỗ lớn cao (trong Qui phạm Thiết kế Kinh doanh rừng, QPN – 84) 46 IIIB-NIII 47 NIII Rừng gỗ xen nứa (Trạng thái gỗ IIIN+ nứa NIII) (trong Qui phạm Thiết kế Kinh doanh rừng, QPN – 84) Nứa to D > 5cm (trong Qui phạm Thiết kế Kinh doanh rừng, QPN – 84) viii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỘT SỐ THUẬT NGỮ DÙNG TRONG LUẬN ÁN iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ TỪ VIẾT TẮT iv MỤC LỤC viii DANH MỤC CÁC HÌNH .xiii MỞ ĐẦU Chươ TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Thông tin chung chi Lan kim tuyến .4 1.2 Thơng tin số lồi thuộc chi Lan kim tuyến liên quan đến nghiên cứu 1.2.1 Kim tuyến trung (Anoectochilus annamensis Aver) 1.2.2 Kim tuyến đá vôi (A.calcareus Aver) 1.2.3 Giải thùy Elwes (A.elwesii (C.B.Clarke ex Hook.f.) King & Pantl) 1.2.4 Lan gấm (A formosanus Hayata) .8 1.2.5 Kim tuyến tơ (A.setaceus Blume) .10 1.3 Tình hình nghiên chi Lan kim tuyến 11 1.3.1 Tình hình nghiên cứu đa dạng lồi thuộc chi Lan kim tuyến 11 1.3.2 Tình hình nghiên cứu bảo tồn nguồn gen loài thuộc chi Lan kim tuyến 14 1.3.3 Tình hình nghiên cứu giá trị dược liệu thành phần dược tính lồi thuộc chi Lan kim tuyến 15 1.4 Tình hình nghiên cứu loài Lan gấm (A.fomosanus) 21 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nhân giống Lan gấm 21 1.4.2 Tình hình nghiên cứu kỹ thuật trồng Lan gấm 23 1.4.3 Tình hình nghiên cứu đặc điểm di truyền loài Lan gấm 26 1.5 Khái quát công tác bảo tồn thông tin khu rừng đặc dụng có phân bố loài thuộc chi Lan kim tuyến tỉnh Thanh Hố 28 1.5.1 Cơng tác quy hoạch rừng đặc dụng địa bàn tỉnh Thanh Hoá 28 1.5.2 Điều kiện tự nhiên khu rừng đặc dụng có phân bố tự nhiên lồi thuộc chi Lan kim tuyến tỉnh Thanh Hoá 28 ix Chươ NỘI DUNG, ĐỊA ĐIỂM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 Nội dung nghiên cứu .37 2.2 Địa điểm nghiên cứu .37 2.3 Phương pháp nghiên cứu 38 2.3.1 Phương pháp kế thừa tài liệu 38 2.3.2 Phương pháp chuyên gia 38 2.3.3 Phương pháp vấn 38 2.3.4 Phuơng pháp điều tra ngoại nghiệp 39 2.3.5 Phuơng pháp xây dựng đồ phân bố 44 2.3.6 Nghiên cứu đặc điểm di truyền loài Lan gấm 45 2.3.7 Phuơng pháp phân tích hóa học .47 2.3.8 Phuơng pháp thí nghiệm 50 2.3.9 Phương pháp xử lý số liệu 60 Chươ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 61 3.1 Tính đa dạng thành phần lồi thuộc chi Lan kim tuyến Thanh Hóa 61 3.1.1 Kết điều tra đánh giá đa dạng thành phần loài 61 3.1.2 Phân bố loài thuộc chi Lan kim tuyến Thanh Hóa 63 3.2 Nghiên cứu mơ tả hình thái, sinh thái lồi thuộc chi Lan kim tuyến Thanh Hóa 66 3.2.1 Kim tuyến Trung (Anoectochilus annamensis Aver) 66 3.2.2 Kim tuyến đá vôi (Anoectochilus calcareus Aver) 68 3.2.3 Giải thùy Elwes (Anoectochilus elwesii (C.B.Clarke ex Hook.f.) King & Pantl) 69 3.2.4 Lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) 71 3.2.5 Kim tuyến tơ (Anoectochilus setaceus Blume) 72 3.2.2 Cơ sở khoa học tra cứu nhanh nhận biết số loài thuộc chi Lan kim tuyến tỉnh Thanh Hoá 74 3.3 Nghiên cứu đa dạng di truyền loài Lan gấm nguồn gen tỉnh Thanh Hố 76 3.3.1 Phân tích đa dạng di truyền Lan gấm thị RAPD 76 Mua Xuan 5.7320 Sig .145 083 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Duongkinh Subset for alpha = 0.05 Mua Duncana N Mua Dong 1.7667 Mua Thu 1.8056 Mua Xuan 1.8826 Mua Ha 1.9069 Sig .130 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 .323 Phụ ục 13 Kế q xử hố k “S h fomorsanus) sa 12 há ưở câ La o h ấm (A ướ ” Descriptives 95% Confidence N Chieucao Duongkinh Mean Std Std Interval for Mean Deviation Error Lower Upper Bound Bound Maximum 1.00 4.3200 0.4551 0.2627 3.1895 5.4505 3.87 4.78 2.00 4.9800 0.4987 0.2879 3.7412 6.2188 4.52 5.51 3.00 5.4667 0.5150 0.2973 4.1873 6.7460 4.95 5.98 4.00 5.6933 0.5200 0.3002 4.4015 6.9852 5.17 6.21 5.00 6.3600 0.4419 0.2551 5.2622 7.4578 5.97 6.84 6.00 6.7433 0.2810 0.1622 6.0454 7.4413 6.45 7.01 7.00 7.0667 0.4124 0.2381 6.0423 8.0910 6.74 7.53 8.00 7.4900 0.3606 0.2082 6.5943 8.3857 7.19 7.89 9.00 8.3933 0.3496 0.2019 7.5248 9.2618 8.13 8.79 10.00 9.1600 0.3831 0.2212 8.2082 10.1118 8.90 9.60 11.00 11.0233 0.4607 0.2660 9.8789 12.1677 10.61 11.52 12.00 12.9067 0.5463 0.3154 11.5496 14.2637 12.34 13.43 Total 36 7.4669 2.4958 0.4160 6.6225 8.3114 3.87 13.43 1.00 1.6800 0.1044 0.0603 1.4206 1.9394 1.56 1.75 2.00 1.7433 0.0896 0.0517 1.5207 1.9660 1.64 1.80 3.00 1.8300 0.0872 0.0503 1.6134 2.0466 1.73 1.89 4.00 1.8900 0.1127 0.0651 1.6101 2.1699 1.76 1.96 5.00 1.9900 0.1044 0.0603 1.7306 2.2494 1.87 2.06 6.00 2.0833 0.0808 0.0467 1.8825 2.2841 1.99 2.13 7.00 2.1733 0.0643 0.0371 2.0136 2.3330 2.10 2.22 8.00 2.2433 0.1250 0.0722 1.9327 2.5539 2.10 2.33 9.00 2.3733 0.0666 0.0384 2.2079 2.5387 2.30 2.43 10.00 2.5400 0.0794 0.0458 2.3428 2.7372 2.45 2.60 11.00 2.6833 0.0666 0.0384 2.5179 2.8487 2.61 2.74 12.00 2.8267 0.0651 0.0376 2.6650 2.9883 2.76 2.89 Total 36 2.1714 0.3701 0.0617 2.0462 2.2966 1.56 2.89 ANOVA Sum of Squares Chieucao Minimum Between Mean df Square 213.323 11 19.3930 4.691 24 0.1955 Groups Within Groups F 99.2210 Sig 3.07E-17 Total Duongkinh Between Groups Within Groups Total 218.014 35 4.603 11 0.4185 192 24 0.0080 4.795 35 52.3997 4.80E-14 Chieucao Subset for alpha = 0.05 Duncana Thang 1.00 N 4.3200 2.00 4.9800 4.9800 3.00 5.4667 4.00 5.6933 5.00 6.00 6.7433 6.7433 7.00 7.0667 7.0667 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 Sig 5.6933 6.3600 6.3600 7.4900 8.3933 9.1600 11.0233 12.9067 080 0.0726 0.0771 075 061 1.000 1.000 1.000 1.000 Duongkinh Subset for alpha = 0.05 Thang Duncana N 1.00 1.6800 2.00 1.7433 1.7433 3.00 1.8300 1.8300 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 2.5400 11.00 2.6833 12.00 Sig 1.8900 1.8900 1.9900 1.9900 2.0833 2.0833 2.1733 2.1733 2.2433 2.2433 2.3733 2.6833 2.8267 062 0.0680 0.1832 213 229 347 087 061 061 Phụ ục 14 Kết qu so sánh trình tự đoạn gen matK Lan gấm nghiên cứu (LKT) với mã gen khác Ngân hàng gen NCBI AJ543911.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA KU687098.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA JN166019.1 CCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA JN166018.1 CCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA EU797512.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA KY966708.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA EU797513.1 AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA LKT AAGATGTTCCTTCTTTGCATTTGTTGCGATTTATTTTCCACGAATATCATAATTTGAAGA **************************************************** AJ543911.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT KU687098.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT JN166019.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT JN166018.1 GTATCATTACTTCAAAGAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGATTTTTTT EU797512.1 GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT KY966708.1 GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT EU797513.1 GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT LKT GTATCATTACTTCAAATAAATCCATTCACGTTTTTTCAAAAAAAAAGAAAAGAATTTTTT ***************************************************** ***** AJ543911.1 GGCTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTTTTTCTTTTTCTTCGTAAAA KU687098.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA JN166019.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA JN166018.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA EU797512.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA KY966708.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA EU797513.1 GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA LKT GGTTCCTACATAATTTTTATGTATATGAATGCGAATATCTCTTTCTTTTTCTTCGTAAAA *********************************************************** AJ543911.1 AGTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTCATG KU687098.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG JN166019.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG JN166018.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG EU797512.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG KY966708.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG EU797513.1 ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG LKT ATTCTTCTTATTTACGATCAACATCTTTTGGAGTCTTTATTGAGCGAACACTTTTTTATG * ****************************************************** ** AJ543911.1 TAAAAATGGAATCTATTTTAGTAGTGTATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGCTCC KU687098.1 TAAAAATTGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC JN166019.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCCGGTTCC JN166018.1 TAAAAATTGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC EU797512.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC KY966708.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC EU797513.1 TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC LKT TAAAAATGGAATCTATTCTAGTAGTATATTTTAATTCTTTTCAGAGGATTCTCTGGTTCC ****** ********* ******* ***************************** *** AJ543911.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGGCTTCAAAGG KU687098.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAATAATTCTGACTTCAAAGG JN166019.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAGGTAATTTTGACTTCAAAGG JN166018.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAATAATTCTGACTTCAAAGG EU797512.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGG-AAAGTAATTCTGACTTCAAAGG KY966708.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGACTTCAAAGG EU797513.1 TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGACTTCAAAGG LKT TCAAAGATCCTTTCATACATTATGTTCGATATCAAGGAAAAGTAATTCTGACTTCAAAGG ************************************ ********************** AJ543911.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGGCAATTTTATT KU687098.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT JN166019.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT JN166018.1 GAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT EU797512.1 TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT KY966708.1 TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT EU797513.1 TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT LKT TAACTCTTATTCTGATGAAGAAATGGAATTTTCATGTTGTGAATTTTTGTCAATTTTATT ************************************************ ********* AJ543911.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT KU687098.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT JN166019.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT JN166018.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT EU797512.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT KY966708.1 TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT EU797513.1 TTCACTTTTGGTCTCAACTTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT LKT TTCACTTTTGGTCTCAACCTTATAGGATCCATATAAAGCAATTACCCAACTATTCCTTCT ****************** **************************************** AJ543911.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC KU687098.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC JN166019.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC JN166018.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC EU797512.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC KY966708.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC EU797513.1 CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC LKT CTTTTCTGGGGTATTTTTTAAGTGTACAAAAAAAAACTTTGGTAGTAAGAAATCAAATGC *********************************************************** AJ543911.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTCTGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA KU687098.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA JN166019.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA JN166018.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA EU797512.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA KY966708.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCATAGCCCCAGTTA EU797513.1 TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCGTAGCCCCAGTTA LKT TAGAGAATTCCTTTCTAATAAATACTATGACTAAGAAATTAGATACCGTAGCCCCAGTTA ********************************************** ************ AJ543911.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA KU687098.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCGGGTCATCCTATTA JN166019.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCGGGTCATCCTATTA JN166018.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCGGGTCATCCTATTA EU797512.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA KY966708.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA EU797513.1 TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA LKT TTTCTCTTATTGGATCATTGTCGAAAGCTCAATTTTGTACTATATCAGGTCATCCTATTA ********************************************** ************* AJ543911.1 GTAAACCAATTTGGACCGATTTATCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTGTCGGAAAT KU687098.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTTTCGGAAAT JN166019.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCTATTTTGTCGGAAAT JN166018.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTTTCGGAAAT EU797512.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCAATTTTGTCGGAAAT KY966708.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCAATTTTGTCGGAAAT EU797513.1 GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTGTCGGAAAT LKT GTAAACCCATTTGGACTGATTTTTCGGATTCTGATATTATTGATCGATTTTGTCGGAAAT ******* ******* ***** ********************** ***** ******** AJ543911.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA KU687098.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAA - JN166019.1 GTAAAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA JN166018.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA EU797512.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA KY966708.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA EU797513.1 GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA LKT GTAGAAATCTTTGTCGTTATCACAGCGGATCCTCAAAAAAAAAAGTTTTGTATCGTATAA ******************************************* AJ543911.1 AATATATA KU687098.1 JN166019.1 AATATATAT- JN166018.1 AATATATAT- EU797512.1 AATATATATT KY966708.1 AATATATATT EU797513.1 AATATATATT LKT AATATATATT Phụ ục 15 Mộ số hì h h hoạ độ h ậ Mộ số hì h h đ ề a hực địa Mộ số hì h h h mẫ La k m ế Mộ số hì h h h hâ ố in vitro câ nhân in vitro a b c d e f ố La ấm (A.formosanus) Mộ số hì h h h hể La ấm (A.formosanus) (a: Rêu khô, b: hỗn hợp, c: cát vàng, d: dương xỉ, e,f: xơ dừa) a b c d e Mộ số hì h Thườ h hoạ độ hệ ườ h X â , Tha h Hóa ( áp a h vớ vù xã Vạ X â , h õ KBTTN X â L ệ ) (a,b: làm nhà trông coi, bảo vệ trường nghiên cứu; c,d: vận chuyển nguyên vật liệu nghiên cứu giá thể; e: nhà lưới nghiên cứu trồng lan gấm) Mộ số hì h h xã Vạ X â , h h ệ Thườ La ấm (A.formosanus) o h X â , Tha h Hóa ( áp a h vớ vù KBTTN Xuân Liên) a b c d e f ướ õ Mộ số hì h h h La ấm (A.formosanus) dướ (a,b: rừng gỗ tự nhiên, c,d: rừng gỗ - tre nứa tự nhiên, e: rừng trồng luồng, f: rừng trồng keo) Mộ số hì h h Phụ ục 16 b o ồ La ấm (A.formosanus) dướ Ph ế phỏ kh vấ ườ dâ địa phươ đặc dụ có phâ bố o ỗ- e ứa ự h v cá m cô ác h ộc ch La k m ế (Anoectochilus B me) Tha h Hoá Họ tên người vấn:…………………………………………… Địa chỉ:……………………………………………………………………… Nộ d STT phỏ vấ Trên địa bàn có phân bố tự nhiên Lan kim tuyến hay khơng? Có lồi Lan kim tuyến? Trên địa bàn người dân có vào rừng thu hái Lan kim tuyến hay không, thời điểm thu hái vào tháng ? Phương thức thu hái nào? Sản lượng thu hái giai đoạn 2000-2010 (bình quân người/ngày)? Sản lượng thu hái giai đoạn 2011-2020 (bình quân người/ngày)? Số vụ vi phạm khai thác Lan kim tuyến trái phép xử lý theo quy định pháp luật? Gh chép hô phỏ vấ Ghi