Luận án Tiến sĩ Nghiên cứu nhiễm giun, sán đường tiêu hóa và hô hấp ở lợn bản địa tỉnh Điện Biên, đặc điểm bệnh do giun phổi Metastrongylus spp. gây ra và biện pháp phòng trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NCS NGUYỄN VĂN TUYÊN NGHIÊN CỨU NHIỄM GIUN, SÁN ĐƯỜNG TIÊU HĨA VÀ HƠ HẤP Ở LỢN BẢN ĐỊA TỈNH ĐIỆN BIÊN, ĐẶC ĐIỂM BỆNH DO GIUN PHỔI Metastrongylus spp GÂY RA VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y Thái Nguyên ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NCS NGUYỄN VĂN TUYÊN NGHIÊN CỨU NHIỄM GIUN, SÁN ĐƯỜNG TIÊU HĨA VÀ HƠ HẤP Ở LỢN BẢN ĐỊA TỈNH ĐIỆN BIÊN, ĐẶC ĐIỂM BỆNH DO GIUN PHỔI Metastrongylus spp GÂY RA VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Ngành: Ký sinh trùng Vi sinh vật học Thú y Mã số: 64 01 04 LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: GS TS Nguyễn Thị Kim Lan PGS TS Nguyễn Thị Ngân Thái Nguyên LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi với hướng dẫn GS.TS Nguyễn Thị Kim Lan PGS.TS Nguyễn Thị Ngân Các số liệu, kết nghiên cứu luận án hoàn toàn trung thực chưa cơng bố cơng trình khoa học khác Mọi thơng tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc TÁC GIẢ Nguyễn Văn Tuyên LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy hướng dẫn: GS TS Nguyễn Thị Kim Lan PGS TS Nguyễn Thị Ngân người hướng dẫn, bảo, động viên tơi tận tình suốt q trình nghiên cứu hồn thành Luận án Tôi xin chân thành cảm ơn Thầy giáo, Cô giáo trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Ngun giảng dạy, hướng dẫn tơi hồn thành học phần chuyên đề suốt trình đào tạo Nhân dịp này, tơi xin gửi lời cảm ơn tới Ban Giám đốc, Ban Đào tạo sau đại học - Đại học Thái Nguyên; Ban Giám hiệu, phịng Đào tạo, Ban Chủ nhiệm Khoa Chăn ni - Thú y, trường Đại học Nông Lâm tạo điều kiện thuận lợi để học tập nghiên cứu Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến Ban Giám hiệu trường Cao đẳng Kinh tế - Kỹ thuật Điện Biên tạo điều kiện thời gian, hỗ trợ phần kinh phí cho tơi q trình học tập Tơi xin trân trọng cảm ơn PGS TS Phạm Ngọc Doanh - Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Việt Nam; PGS TS Nguyễn Thanh Tùng - Trường Đại học Cần Thơ; kỹ thuật viên phòng Siêu cấu trúc - Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương, kỹ thuật viên khoa xét nghiệm Bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên, Chi cục Thú y tỉnh Điện Biên giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn chia sẻ thành với Cựu học sinh Lị Văn Dung (khóa 29); Khồng Văn Liễu, Nguyễn Thị Dung, Chu Dèn Sơn, Thào A Chìa, Vừ A Tủa, Lị Văn Thức, Sào Khóa Lèn (khóa 32) ngành Chăn nuôi Thú y cựu sinh viên Vàng A Sình (khóa 8); Cháng A Hạng, Hồ A Ly, Giàng Thị Dí (khóa 9); Qng Văn Dy, Vừ A Dơ (khóa 10) ngành Chăn ni, trường Cao đẳng Kinh tế - Kỹ thuật Điện Biên tham gia thu thập mẫu giúp tơi q trình triển khai thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới người bạn, người thân gia đình, bố, mẹ, chị em gái giúp đỡ, kịp thời động viên tạo điều kiện thuận lợi suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận án Xin trân trọng cảm ơn tất giúp đỡ quý báu Thái Nguyên, ngày tháng năm NGHIÊN CỨU SINH MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC .iii DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH .viii MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài Những đóng góp đề tài .3 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 1.1 Cơ sở khoa học đề tài 1.1.1 Giun, sán ký sinh lợn 1.1.2 Bệnh giun phổi lợn .8 1.2 Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam 14 1.2.1 Trên giới 14 1.2.2 Ở Việt Nam .23 1.3 Điều kiện tự nhiên, điều kiện kinh tế - xã hội tình hình chăn ni lợn tỉnh Điện Biên .28 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 32 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu .32 2.1.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 32 2.2 Vật liệu nghiên cứu 32 2.2.1 Động vật loại mẫu nghiên cứu .32 2.2.2 Dụng cụ hóa chất sử dụng nghiên cứu 33 2.3 Nội dung nghiên cứu 33 2.3.1 Nghiên cứu thành phần lồi đặc điểm nhiễm giun, sán đường tiêu hóa hô hấp lợn địa tỉnh Điện Biên 33 2.3.2 Nghiên cứu giun phổi Metastrongylus spp bệnh giun phổi gây lợn địa 34 2.4 Phương pháp nghiên cứu 35 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu thành phần lồi đặc điểm nhiễm giun, sán đường tiêu hóa hô hấp lợn địa tỉnh Điện Biên 35 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu giun phổi Metastrongylus spp bệnh giun phổi gây lợn địa 40 2.4.3 Phương pháp xử lý số liệu 48 Chương : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 49 3.1 Thành phần loài đặc điểm nhiễm giun, sán đường tiêu hóa hơ hấp 49 3.1.1 Thành phần loài giun, sán ký sinh lợn địa 49 3.1.2 Đặc điểm nhiễm giun, sán đường tiêu hóa hô hấp lợn địa 55 3.2 Giun phổi Metastrongylus spp bệnh giun phổi gây lợn .65 3.2.1 Định danh loài giun phổi thu từ lợn địa 65 3.2.2 Đặc điểm dịch tễ bệnh giun phổi Metastrongylus spp lợn địa 75 3.2.3 Nguy nhiễm giun phổi lợn theo phương thức chăn nuôi 88 3.2.4 Vật chủ trung gian giun phổi 89 3.2.5 Đặc điểm bệnh lý lâm sàng bệnh giun phổi lợn địa 98 3.2.6 Nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh giun phổi cho lợn địa 109 3.2.7 Đề xuất biện pháp phòng chống tổng hợp bệnh giun phổi cho lợn 112 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 114 Kết luận 114 Đề nghị 115 TÀI LIỆU THAM KHẢO 117 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT bp: base pair ĐC: Đối chứng n: dung lượng mẫu Nxb: Nhà xuất P: độ tin cậy PCR: Polymerase Chain Reaction SGN: Sau gây nhiễm STT Số thứ tự spp.: species pluralis TN: Thí nghiệm TT: Thể trọng A sufrartyfex Artyfechinostomum sufrartyfex A suum: Ascaris suum A strongylina Ascarops strongylina F buski: Fasciolopsis buski H rubidus Hyostrongylus rubidus O dentatum Oesophagostomum dentatum M elongatus: Metastrongylus elongatus M pudendotectus: Metastrongylus pudendotectus M salmi: Metastrongylus salmi M asymmetricus: Metastrongylus asymmetricus M hirudinaceus: Macracanthorhynchus hirudinaceus P sexalatus Physocephalus sexalatus T suis Trichocephalus suis S ransomi: Strongyloides ransomi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần lồi giun, sán ký sinh ống tiêu hóa hô hấp lợn Bảng 1.2 Tỷ lệ nhiễm loài giun, sán lợn giới 15 Bảng 1.3 Tỷ lệ nhiễm loài giun phổi lợn giới .18 Bảng 1.4 Tỷ lệ nhiễm loài giun, sán lợn Việt Nam 24 Bảng 1.5 Tỷ lệ nhiễm loài giun phổi lợn Việt Nam 27 Bảng 2.1 Số lượng mẫu kiểm tra theo tiêu nghiên cứu 36 Bảng 2.2 Sơ đồ bố trí thí nghiệm gây nhiễm giun phổi cho lợn địa 44 Bảng 2.3 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tẩy giun phổi lợn gây nhiễm 46 Bảng 3.1 Thành phần loài phân bố lồi giun, sán đường tiêu hóa hô hấp lợn địa tỉnh Điện Biên .49 Bảng 3.2 Tỷ lệ nhiễm giun, sán lợn địa tỉnh Điện Biên (qua mổ khám) 55 Bảng 3.3 Tỷ lệ nhiễm giun, sán lợn địa tỉnh Điện Biên (qua xét nghiệm phân) 57 Bảng 3.4 Tỷ lệ nhiễm giun, sán lợn địa theo lứa tuổi 59 Bảng 3.5 Tỷ lệ nhiễm giun, sán lợn địa theo phương thức chăn nuôi 61 Bảng 3.6 Tỷ lệ nhiễm giun, sán lợn địa theo mùa năm 62 Bảng 3.7 Tỷ lệ nhiễm giun, sán lợn địa theo địa hình 64 Bảng 3.8 Kết định danh loài giun phổi lợn địa tỉnh Điện Biên 65 Bảng 3.9 Kết đo kích thước giun M elongatus M pudendotectus ký sinh lợn địa tỉnh Điện Biên 66 Bảng 3.10 Khoảng cách di truyền loài Metastrongylus elongatus dựa phân tích trình tự ITS2 71 Bảng 3.11 Khoảng cách di truyền loài M elongatus M pudendotectus dựa phân tích trình tự cox1 73 Bảng 3.12 Kết mổ khám thu thập giun phổi lợn địa Điện Biên 75 Bảng 3.13 Tỷ lệ cường độ nhiễm giun phổi lợn địa tỉnh Điện Biên 76 Bảng 3.14 Tỷ lệ cường độ nhiễm đơn lẻ hỗn hợp giun phổi 79 Bảng 3.15 Tỷ lệ cường độ nhiễm giun phổi lợn địa theo lứa tuổi 81 Bảng 3.16 Tỷ lệ cường độ nhiễm giun phổi lợn địa theo mùa năm 83 Bảng 3.17 Tỷ lệ cường độ nhiễm giun phổi lợn địa theo vùng địa hình 84 Bảng 3.18 Tỷ lệ cường độ nhiễm giun phổi lợn địa theo phương thức chăn nuôi 86 Bảng 3.19 Nguy nhiễm giun phổi lợn theo phương thức chăn nuôi 88 Bảng 3.20 Thành phần phân bố loài giun đất tỉnh Điện Biên 90 Bảng 3.21 Tỷ lệ cá thể theo loài giun đất thu thập tỉnh Điện Biên .96 Bảng 3.22 Tỷ lệ cường độ nhiễm ấu trùng giun phổi giun đất thu thập Điện Biên .97 Bảng 3.23 Thời gian giun phổi hồn thành vịng đời lợn gây nhiễm 99 Bảng 3.24 Diễn biến lâm sàng lợn địa sau gây nhiễm giun phổi 100 Bảng 3.25 Sự thay đổi tiêu hệ bạch cầu lợn địa sau gây nhiễm 101 Bảng 3.26 Tổn thương đại thể lợn mắc bệnh giun phổi gây nhiễm 103 Bảng 3.27 Tổn thương vi thể lợn mắc bệnh giun phổi gây nhiễm 105 Bảng 3.28 Triệu chứng lâm sàng lợn nhiễm giun phổi địa phương 107 Bảng 3.29 Tổn thương đại thể lợn mắc bệnh giun phổi địa phương 108 Bảng 3.30 Thử nghiệm hiệu lực thuốc tẩy giun phổi lợn gây nhiễm 109 Bảng 3.31 Hiệu lực thuốc tẩy giun phổi cho lợn diện hẹp thực địa 110 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Phân loại trứng ký sinh lợn (Soulsby, 1988) Hình 1.2 Vịng đời phát triển giun phổi lợn Metastrongylus spp Hình 1.3 Bản đồ Việt Nam 29 Hình 1.4 Bản đồ tỉnh Điện Biên 29 Hình 3.1 Giun dày Gnathostoma sp thu thập từ dày lợn tỉnh Điện Biên 52 Hình 3.2 Hình thái giun dày Gnathostoma sp (hình kẻ vẽ) .52 Hình 3.3 Ảnh đầu phần thân trước giun Gnathostoma sp 52 Hình 3.4 Ảnh gai móc phần đầu giun Gnathostoma sp .52 Hình 3.5 Ảnh gai phần thân giun Gnathostoma sp 53 Hình 3.6 Ảnh gai phần đuôi giun Gnathostoma sp 53 Hình 3.7 Cây phát sinh chủng loại lồi Gnathostoma xây dựng từ trình tự ITS2 phương pháp Maximum Likelihood 54 Hình 3.8 Cây phát sinh chủng loại loài Gnathostoma xây dựng từ trình tự cox1 phương pháp Maximum Likelihood 54 Hình 3.9 Giun trịn Metastrongylus elongatus Gmelin, 1790 ký sinh lợn Điện Biên 67 Hình 3.10 Giun tròn Metastrongylus pudendotectus Wostokow, 1905 ký sinh lợn Điện Biên .69 Hình 3.11 Cây phát sinh chủng loại lồi Metastrongylus xây dựng từ trình tự ITS2 phương pháp Maximum Likekliwood 72 Hình 3.12 Cây phát sinh chủng loại loài Metastrongylus xây dựng từ trình tự cox1 phương pháp Maximum Likekliwood 74 Hình 3.13 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm giun phổi lợn địa tỉnh Điện Biên 78 Hình 3.14 Biểu đồ cường độ nhiễm giun phổi lợn địa tỉnh Điện Biên 78 Hình 3.15 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm đơn lẻ hỗn hợp giun phổi 79 Hình 3.16 Đồ thị biến động nhiễm giun phổi lợn địa theo tuổi 82 Hình 3.17 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm giun phổi lợn địa theo mùa năm 83 Hình 3.18 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm giun phổi lợn địa theo địa hình 85