(Luận văn thạc sĩ) tổng hợp và thử hoạt tính kháng tế bào ung thư của một số dẫn chất 2 (1 naphthyl) 4 quinazolinamin min

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI CHU VĂN TOẢN TỔNG HỢP VÀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT 2-(1-NAPHTHYL)-4-QUINAZOLINAMIN LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2016 Luan van thac si BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI CHU VĂN TOẢN TỔNG HỢP VÀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT 2-(1-NAPHTHYL)-4-QUINAZOLINAMIN LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH : CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ MÃ SỐ : 60720402 Người hướng dẫn khoa học: TS Văn Thị Mỹ Huệ TS Lê Nguyễn Thành HÀ NỘI 2016 Luan van thac si LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn này, em xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Văn Thị Mỹ Huệ TS Lê Nguyễn Thành người cô, người thầy tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi động viên em suốt trình thực luận văn Em xin cảm ơn giúp đỡ nhiệt tình của: TS Nguyễn Minh Hằng, TS Cao Bích Huệ, Ths Đào Đình Cường, Ths Trần Hữu Giáp, cử nhân Nguyễn Anh Dũng, cử nhân Hà Thị Thoa, cử nhân Nguyễn Thị Tú Oanh (trung tâm nghiên cứu phát triển thuốc - Viện Hoá sinh biển - Viện Hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam), thầy mơn Hố hữu thầy mơn, phịng ban, thư viện khác trường Đại học Dược Hà Nội Mặc dù có nhiều cố gắng hạn chế thời gian, kiến thức tài liệu tham khảo nên luận văn em tránh khỏi sai sót nội dung hình thức, em mong nhận góp ý quý thầy để luận văn em hồn thiện Cuối cùng, xin cảm ơn mẹ, cảm ơn vợ bạn bè động viên giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu vừa qua Hà Nội, ngày 30 tháng năm 2016 Học viên Chu Văn Toản Luan van thac si MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC SƠ ĐỒ DANH MỤC HÌNH VẼ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 HỢP CHẤT QUINAZOLINAMIN VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC 1.1.1 Tác dụng chống ung thư 1.1.2 Các tác dụng khác 1.2 PHƯƠNG PHÁP TỔNG HỢP 10 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, HOÁ CHẤT, DUNG MÔI 12 2.2 THIẾT BỊ THÍ NGHIỆM 13 2.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 13 2.3.1 Tổng hợp hoá học 13 2.3.2 Thử tác dụng sinh học 13 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.4.1 Phương pháp tổng hợp dẫn chất quinazolinamin 13 2.4.2 Phương pháp tinh chế xác định cấu trúc 14 2.4.3 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học 14 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 18 3.1 TỔNG HỢP HOÁ HỌC 18 3.1.1 Tổng hợp dẫn chất trung gian 6-methyl-2-(naphthalen-1-yl)-quinazolin4(3H)-on (5) 19 3.1.2 Tổng hợp dẫn chất trung gian 4-cloro-6-methyl-2-(naphthalen-1-yl)quinazolin (6) 20 Luan van thac si 3.1.3 Tổng hợp dẫn chất 6-methyl-2-(naphthalen-1-yl)-4-quinazolinamin (7al) 20 3.2 THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ 40 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 43 4.1 VỀ TỔNG HỢP HOÁ HỌC 43 4.2 VỀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 43 4.2.1 Phổ hồng ngoại 43 4.2.2 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 44 4.2.3 Phổ khối lượng MS 47 4.3 VỀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ 48 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 KẾT LUẬN 50 KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Luan van thac si DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT 13 C-NMR Carbon Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13 H-NMR C) Hydro Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) ATCC the American Type Culture Collection (Tổ chức tài nguyên tiêu chuẩn vật liệu sinh học Mỹ) BRCP Breast Cancer Resistant Protein (Protein kháng ung thư vú) CA Carbonic anhydrase CTCT Công thức cấu tạo CTPT Công thức phân tử DMAC N,N-dimethylacetamid DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium (Môi trường nuôi cấy tế bào ung thư) DMF Dimethylformamid DMSO Dimethylsufoxid EC50 Half Maximal Effective Concentration (Nồng độ 50% có tác dụng tối đa) EGFR Epidermal growth factor receptor (Yếu tố tăng trưởng biểu mô) ESI Electron Spray Ionization (Ion hoá phun điện tử) GI50 Half Maximal Grow Inhibitory Concentration (Nồng độ 50% ức chế tối đa phát triển) Hep-G2 Hepatocellular Carcinoma (Tế bào ung thư gan) IC50 Half maximal inhibitory concentration (Nồng độ ức chế tối đa 50% tế bào) IR Infrared spectrometry (Phổ hồng ngoại) J Hằng số tương tác spin-spin (đơn vị Hz) KB Human Epidermic Carcinoma (Tế bào ung thư biểu mô) Luan van thac si LU Human Lung Carcinoma (Tế bào ung thư phổi) MCF-7 Human Breast Carcinoma (Tế bào ung thư vú) MIC Minimum inhibitory concentration (Nồng độ ức chế tối thiểu) MS Mass spectrometry (Phổ khối lượng) MTT 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid NCI National Cancer Institute (Viện Ung thư Quốc Gia Hoa Kỳ) OD Optical density (Mật độ quang học) PIK3 Phosphatidylinositol-3-kinase SKLM Sắc ký lớp mỏng δ (ppm) Độ dịch chuyển hoá học (phần triệu) Luan van thac si DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 2.1: Ngun liệu, hố chất, dung mơi dùng nghiên cứu 12 Bảng 3.1: Kết tổng hợp dẫn chất 7a-l 28 Bảng 3.2: Giá trị nhiệt độ nóng chảy Rf dẫn chất 7a-l 29 Bảng 3.3: Số liệu phổ 1H-NMR chất 7a-l 30 Bảng 3.4: Số liệu phổ 13C-NMR chất 7a-l 33 Bảng 3.5: Số liệu phổ MS chất 7a-l 36 Bảng 3.6: Số liệu phổ IR dẫn chất 7a-l 38 Bảng 3.7: Hoạt tính gây độc tế bào chất 7a-l 40 Luan van thac si DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 3.1: Sơ đồ tổng hợp dẫn chất trung gian 18 Sơ đồ 3.2: Sơ đồ tổng hợp dẫn chất 7a-l 18 Sơ đồ 3.3: Tổng hợp dẫn chất trung gian 20 Sơ đồ 3.4: Tổng hợp dẫn chất 7a 20 Sơ đồ 3.5: Tổng hợp dẫn chất 7b 21 Sơ đồ 3.6: Tổng hợp dẫn chất 7c 22 Sơ đồ 3.7: Tổng hợp dẫn chất 7d 22 Sơ đồ 3.8: Tổng hợp dẫn chất 7e 23 Sơ đồ 3.9: Tổng hợp dẫn chất 7f 24 Sơ đồ 3.10: Tổng hợp dẫn chất 7g 24 Sơ đồ 3.11: Tổng hợp dẫn chất 7h 25 Sơ đồ 3.12: Tổng hợp dẫn chất 7i 25 Sơ đồ 3.13: Tổng hợp dẫn chất 7j 26 Sơ đồ 3.14: Tổng hợp dẫn chất 7k 27 Sơ đồ 3.15: Tổng hợp dẫn chất 7l 27 Sơ đồ 4.1: Cơ chế phản ứng amin với dẫn chất 4-cloro-quinazolin 43 Luan van thac si DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1: Cấu trúc khung quinazolinamin Hình 1.2: Cấu trúc số thuốc mang khung quinazolinamin Luan van thac si Luan van thac si Phụ lục 9.3: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) chất 7i Luan van thac si Phụ lục 9.4: Phổ khối lượng (MS) chất 7i Luan van thac si Phụ lục 10.1: Phổ hồng ngoại (IR) chất 7j Luan van thac si Phụ lục 10.2: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR) chất 7j Luan van thac si Phụ lục 10.3: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) chất 7j Luan van thac si Phụ lục 10.4: Phổ khối lượng (MS) chất 7j Luan van thac si Phụ lục 11.1: Phổ hồng ngoại (IR) chất 7k Luan van thac si Phụ lục 11.2: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR) chất 7k Luan van thac si Phụ lục 11.3: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) chất 7k Luan van thac si Phụ lục 11.4: Phổ khối lượng (MS) chất 7k Luan van thac si Phụ lục 12.1: Phổ hồng ngoại (IR) chất 7l Luan van thac si Phụ lục 12.2: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR) chất 7l Luan van thac si Phụ lục 12.3: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) chất 7l Luan van thac si Phụ lục 12.4: Phổ khối lượng (MS) chất 7l Luan van thac si Phụ lục 13: Kết thử hoạt tính gây độc tế bào dẫn chất 7a-l