(Luận án tiến sĩ) nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá hoạt tính gây độc tế bào của hai loài amesiodendron chinense (sapindaceae) và baccaurea sylvestris (phyllanthaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - HỒ VĂN BAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA HAI LỒI AMESIODENDRON CHINENSE (SAPINDACEAE) VÀ BACCAUREA SYLVESTRIS (PHYLLANTHACEAE) LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC Hà Nội - 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - HỒ VĂN BAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA HAI LOÀI AMESIODENDRON CHINENSE (SAPINDACEAE) VÀ BACCAUREA SYLVESTRIS (PHYLLANTHACEAE) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 944 01 14 LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS NGUYỄN QUỐC VƯỢNG TS NGUYỄN LÊ TUẤN Hà Nội - 2023 i MỤC LỤC MỤC LỤC i LỜI CAM ĐOAN ix LỜI CẢM ƠN x DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT xv DANH MỤC BẢNG BIỂU xviii DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ xx DANH MỤC PHỤ LỤC PHỔ xxiii MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Họ Bồ (Sapindaceae) chi Amensiodendron 1.1.1 Họ Bồ 1.1.2.Chi Amensiodendron 1.1.2.1 Phân loại 1.1.2.2 Phân bố đặc điểm thực vật chi Amensiodendron  Phân bố  Đặc điểm thực vật loài thuộc chi Amensiodendron .4 1.1.3 Loài trường sâng (Amesioddendron chinese) 1.1.4 Ứng dụng y học cổ truyền giá trị số lồi họ Bồ hịn(Sapindaceae) 1.1.4.1 Chi Sapindus 1.1.4.2 Chi Dodonaea 1.1.4.3 Chi Litchi 1.1.4.4 Một số chi khác 1.1.5 Thành phần hóa học lồi thuộc họ Bồ 1.1.5.1 Lớp chất saponin 1.1.5.2 Lớp chất flavonoid  Lớp chất flavonoid đơn giản  Lớp chất glycosylflavonoid 12 1.1.5.3 Lớp chất lignan 13 1.1.5.4 Các lớp chất khác 14 ii 1.1.6 Hoạt tính sinh học số lồi họ Bồ .15 1.1.6.1 Hoạt tính chống oxi hóa 15 1.1.6.2 Hoạt tính kháng khuẩn 18 1.1.6.3 Hoạt tính chống ung thư 19 1.1.6.4 Hoạt tính sinh học khác 20 1.2 Giới thiệu chi Baccaurea 21 1.2.1 Phân loại 21 1.2.2 Phân bố đặc điểm thực vật 21 1.2.2.1 Phân bố 21 1.2.2.2 Đặc điểm thực vật loài thuộc chi Baccaurea 21 1.2.2.3 Giới thiệu lồi Du mc (B sylvestris) 22 1.2.3.Ứng dụng y học cổ truyền số loài thuộc chi Baccaurea 22 1.2.4 Thành phần hóa học loài thuộc chi Baccaurea 23 1.2.4.1 Lớp chất phenolic 23 1.2.4.2 Lớp chất flavonoid 24 1.2.4.3 Lớp chất khác 24 1.2.5 Hoạt tính sinh học loài thuộc chi Baccaurea .25 1.2.5.1 Hoạt tính chống oxi hóa 25 1.2.5.2 Hoạt tính kháng khuẩn, kháng viêm kháng nấm 26 1.2.5.3 Hoạt tính chống ung thư 28 1.2.5.4 Hoạt tính sinh học khác 28 1.3 Tình hình nghiên cứu lồi Amensiodendron chinense (Merr.) Hu loài 29 Baccaurea sylvestris Lour giới Việt Nam 29 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - THỰC NGHIỆM 30 2.1 Đối tượng nghiên cứu 30 2.1.1 Loài A chinense 30 2.1.2 Loài B sylvestris 30 2.2 Phương pháp nghiên cứu 31 2.2.1 Phương pháp chiết phân lập hoạt chất 31 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc 32 iii 2.2.3 Phương pháp thử hoạt tính gây độc tế bào in vitro 32 2.2.3.1 Dòng tế bào nghiên cứu 32 2.2.3.2 Phương pháp nuôi cấy in vitro 32 2.2.4 Phương pháp thủy phân acid để xác định cấu trúc đường 32 2.3 Thiết bị hóa chất 33 2.3.1 Thiết bị 33 2.3.2 Hóa chất 34 2.4 Thực nghiệm 35 2.4.1 Chiết xuất phân lập hoạt chất từ loài A chinense 35 2.4.2 Chiết xuất phân lập hoạt chất từ hoa loài A chinense 36 2.4.3 Chiết xuất phân lập hoạt chất từ lồi B sylvestris 38 2.4.4 Hoạt tính gây độc tế bào 39 2.5 Dữ liệu phổ tính chất vật lí chất phân lập 40 2.5.1 Các chất phân lập từ loài A chinense 40  Hợp chất AC1: amesiflavone A (chất mới) 40  Hợp chất AC2: amesiflavone B (chất mới) 40  Hợp chất AC3: amesiflavone C (chất mới) 40  Hợp chất AC4: (+)-aptosimon 40  Hợp chất AC5: (+)-isolariciresinol 41  Hợp chất AC6: (-)-cleomiscosin A 41  Hợp chất AC7: (-)-cleomiscosin C 41  Hợp chất AC8: β-sitosterol 42  Hợp chất AC9: daucosterol 42  Hợp chất AC10: 4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyde 43  Hợp chất AC11: protocatechuic acid methyl ester 43  Hợp chất AC12: protocatechuic acid 43 2.5.2 Các chất phân lập từ hoa loài A chinense 43  Hợp chất AC13: astralagin 43  Hợp chất AC14: kaempferide 3-O-β-D-glucopyranoside 44  Hợp chất AC15: quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside 44 iv  Hợp chất AC16: (-)-epi-catechin 44  Hợp chất AC17: (-)-catechin 45  Hợp chất AC18: 3-methoxyluteolin (chrysoeriol) 45  Hợp chất AC3 (là chất đặt tên amesiflavone C) .45 2.5.3 Các hợp chất phân lập từ loài B sylvestris 45  Hợp chất BS1: friedelin 45  Hợp chất BS2: 3β-friedelanol 46  Hợp chất BS3: stigmast-4-en-3-one 46  Hợp chất BS4: (-)-epiafzelechin 46  Hợp chất BS5: 4-hydroxybenzaldehyde 47  Hợp chất BS6: 4-hydroxybenzoic acid 47  Hợp chất BS7: (3,4,5-trimethoxyphenyl-β-D-glucopyranoside) 47 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ loài A chinense .48 3.1.1 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ loài A chinense 49 3.1.1.1 Hợp chất AC1: amesiflavone A 49 3.1.1.2 Hợp chất AC2: amesiflavone B 58 3.1.1.3 Hợp chất AC3: amesiflavone C 67 3.1.1.4 Hợp chất AC4: (+)-aptosimon 77 3.1.1.5 Hợp chất AC5: (+)-isolariciresinol 81 3.1.1.6 Hợp chất AC6: (-)-cleomiscosin A 85 3.1.1.7 Hợp chất AC7: (-)-cleomiscosin C 88 3.1.1.8 Hợp chất AC8: β-sistosterol 91 3.1.1.9 Hợp chất AC9: daucosterol 91 3.1.1.10 Hợp chất AC10, AC11, AC12 92 3.1.2.Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ hoa loài A chinense 94 3.1.2.1 Hợp chất AC13: astralagin 94 3.1.2.2 Hợp chất AC14: kaempferide 3-O-β-D-glucopyranoside 96 3.1.2.3 Hợp chất AC15: quercetin 3-O-β-D-glucoside 98 3.1.2.4 Hợp chất AC16: (-)-epi-catechin 100 v 3.1.2.5 Hợp chất AC17: (-)-catechin 103 3.1.2.6 Hợp chất AC18: (3′-methoxyluteolin, chrysoeriol) 105 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ loài B sylvestris 107 3.2.1 Hợp chất BS1: friedelin 108 3.2.2 Hợp chất BS2: 3β-friedelanol 110 3.2.3 Hợp chất BS3: stigmast-4-en-3-one 113 3.2.4 Hợp chất BS4: (-)-epiafzelechin 115 3.2.5 Hợp chất BS5: 4-hydroxybenzaldehyde 116 3.2.6 Hợp chất BS6: 4-hydroxybenzoic acid 117 3.2.7.Hợp chất BS7: 3,4,5-trimethoxyphenol-1-O-β-D-glucopyranoside 118 3.3 Hoạt tính sinh học cao chiết hợp chất phân lập từ loài A chinense loài B sylvestris 120 3.3.1 Kết thử hoạt tính sinh học số cao chiết từ loài A chinense loài B sylvestris 120 3.3.2.Kết thử hoạt tính độc tế bào số hợp chất chọn lọc từ loài A.chinense 120 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 122 KẾT LUẬN 122 KIẾN NGHỊ 123 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 124 TÀI LIỆU THAM KHẢO 125 PHỤ LỤC PHỔ 1PL PHỤ LỤC: KẾT QUẢ THỬ ĐỘC TÍNH TẾ BÀO 131PL ix LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn khoa học PGS.TS Nguyễn Quốc Vượng TS Nguyễn Lê Tuấn, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực, khách quan chưa công bố cơng trình khác Hà Nội, ngàytháng Tác giả luận án Hồ Văn Ban x LỜI CẢM ƠN Luận án hồn thành Viện Hố sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới PGS.TS Nguyễn Quốc Vượng TS Nguyễn Lê Tuấn, người thầy tận tình hướng dẫn, hết lòng bảo tạo điều kiện giúp đỡ thời gian làm luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt q trình học tập nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn quan tâm giúp đỡ tập thể Phịng Cơng nghệ hóa dược- Viện Hóa sinh biển giúp đỡ bảo q trình làm luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới Lãnh đạo Viện Hóa Sinh Biển quý thầy cô tạo điều kiện, giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu để hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu Khoa Khoa học Tự nhiên- Đại học Quy Nhơn giúp đỡ tạo điều kiện tối để tơi học tập tốt hoàn thành luận án tiến sĩ mục tiêu đề Luận án hỗ trợ kinh phí thực khn khổ đề tài thuộc Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, hướng “ Đa dạng sinh học chất có hoạt tính sinh học”, mã số đề tài VAST 04.04/18-19 TS Trịnh Thị Thanh Vân làm chủ nhiệm Cuối tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến người thân gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên giúp đỡ tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Tác giả Hồ Văn Ban xv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT A-431 A-498 A-549 ABTS AGS aP2 Human epidermoid carcinoma cells Human Renal Carcinoma cell line Human lung cancer 2,2′-azinobis(3ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid Human gastric epithelial Gen expression of fatty acidbinding protein BHA Butylated hydroxyanisol BHT Butylated hydroxytoluene BS Baccaurea sylvestris Carbon13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (concentration to double quinone reductase activity) Correlated Spectroscopy 13 C-NMR Spectroscopy CD COSY CTPT DEPT DMSO-d6 DPPH EC50 ED50 EtOH EtOAc ESI-MS FRAP FT-IR Distortionless Enhancement by Polarization Transfer Dimethyl sulfoxide 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl Half maximal effective concentration Effective dose 50 Ethanol Ethyl acetate Electron Spray Ionization Mass Spectroscopy Ferric Reducing Antioxidant Power Fourier Transform Infrared Spectroscopy Tế bào ung thư biểu bì Tế bào ung thư biểu mô thận Tế bào ung thư phổi Tế bào ung thư biểu mô dày Gen liên kết protein acid béo Butyl hydroxyanisol (Chất bắt gốc tự chuẩn) Butyl hydroxytoluene Chất bắt gốc tự chuẩn Lồi Du Mc Cộng hưởng từ hạt nhân carbon-13 nồng độ để tăng gấp đơi hoạt tính men quinone) Phổ tương tác H-H Công thức phân tử Phổ DEPT Dimethyl sulfoxide 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl Nồng độ hiệu 50% Liều lượng hiệu 50% Ethanol Ethyl acetate Phổ khối lượng phun mù điện tử Khả khử chất oxi hóa Fe 3+ Phổ hồng ngoại biến đổi Fourier