Thử nghiệm khả năng bảo quản vi khuẩn lactic bằng than bùn bột mì và glucose

TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP - TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN CHUYÊN ĐỀ TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC THỬ NGHIỆM KHẢ NĂNG BẢO QUẢN VI KHUẨN LACTIC BẰNG THAN BÙN, BỘT MÌ & GLUCOSE TRƯƠNG TẤN SANG Niên khóa 2017-2021 AN GIANG, THÁNG NĂM 2021 TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN CHUYÊN ĐỀ TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC THỬ NGHIỆM KHẢ NĂNG BẢO QUẢN VI KHUẨN LACTIC BẰNG THAN BÙN, BỘT MÌ & GLUCOSE TRƯƠNG TẤN SANG MÃ SỐ SV: DSH173279 GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN: NGUYỄN HỮU THANH AN GIANG, THÁNG NĂM 2021 i CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG Chuyên đề tốt nghiệp “Thử nghiệm khả bảo quản vi khuẩn lactic Than Bùn, Bột Mì Glucose”, sinh viên Trương Tấn Sang thực hướng dẫn TS Nguyễn Hữu Thanh Phản biện Phản biện TS ĐOÀN THỊ MINH NGUYỆT TS BẰNG HỒNG LAM Cán hướng dẫn TS NGUYỄN HỮU THANH ii LỜI CẢM TẠ Đầu tiên, muốn dành lời cảm ơn đến gia đình ln ủng hộ hỗ trợ nhiệt tình mặt tinh thần chi phí để hồn thành tốt nghiên cứu Với lịng biết ơn chân thành nhất, tơi xin gửi lời cảm ơn đến quý anh chị, quý thầy cô tại khu thí nghiệm tận tình dạy, truyền đạt kiến thức quý báo giúp đỡ trình học tập thực nghiên cứu tại khu thí nghiệm Và cuối xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc gửi đến TS Nguyễn Hữu Thanh người thầy giành nhiều thời gian, công sức tận tình hướng dẫn, truyền dạy kiến thức, kinh nghiệm nhiều tài liệu cho tơi suốt q trình nghiên cứu để tơi hồn thành tốt chun đề tốt nghiệp Vì thời gian có hạn nên đề tài khơng tránh khỏi thiếu sót mong nhận ý kiến đóng góp q Thầy, Cơ, anh chị để đề tài hồn thiện iii TĨM TẮT Giống vi khuẩn Lactobacillus acidophilus có nguồn gốc từ chế phẩm thương mại Antibio Pro, tiến hành nghiên cứu bảo quản chủng giống Than bùn, Bột Mì Glucose nhiệt độ 50 ºC Kết cho thấy ba chất có khả bảo quản sinh khối vi khuẩn L acidophilus Mật số vi ổn định thời gian từ ngày đến ngày thứ 21 khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê mức 95% Tuy nhiên đến ngày 49, mật số vi khuẩn bảo quản Bột Mì tương đương 6,45 Log[CFU/mL], Than Bùn Glucose tương đương 5,5 Log[CFU/mL], Như vậy, ba chất Than Bùn, Bột Mì Glucose có khả bảo quản ổn định mật số L acidophilus 21 ngày 50 ºC iv LỜI CAM KẾT Tôi xin cam kết chuyên đề nghiên cứu riêng Các hình ảnh, liệu có xuất xứ rõ ràng, khoa học Các kết chưa dùng cho bất kỳ chuyên đề cùng cấp khác An Giang, ngày 25 tháng năm 2021 Người thực Trương Tấn Sang v MỤC LỤC DANH SÁCH BẢNG viii DANH SÁCH HÌNH ix CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.3 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.4 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 1.5 NHỮNG ĐÓNG GÓP CỦA ĐỀ TÀI CHƯƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 TỔNG QUAN VỀ VI KHUẨN LACTIC 2.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Phân loại 2.2 TỔNG QUAN VỀ VI KHUẨN L acidophilus 2.2.1 Nguồn gốc 2.2.2 Đặc điểm 2.2.3 Tính chất đặc trưng 2.2.4 Vai trò 2.2.5 Ứng dụng 2.3 BỘT MÌ 2.3.1 Khái niệm 2.3.2 Tính chất 2.3.3 Ứng dụng 2.4 GLUCOSE 2.4.1 Khái niệm 2.4.3 Ứng dụng 2.5 THAN BÙN 10 2.5.1 Khái niệm 10 2.5.3 Tính chất 10 2.5.2 Vai trò ứng dụng 11 vi 2.6 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC VỀ PHƯƠNG PHÁP BẢO QUẢN VI KHUẨN LACTIC 11 CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU .14 3.1.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 14 3.1.2 Thiết bị, vật liệu hóa chất nghiên cứu 14 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19 4.1 XÁC ĐỊNH MẬT SỐ TĂNG TRƯỞNG CỦA VI KHUẨN L acidophilus THEO THỜI GIAN 19 4.2 KẾT QUẢ BẢO QUẢN L acidophilus TRONG MÔI TRƯỜNG THAN BÙN, BỘT MÌ VÀ GLUCOSE 20 4.3 SO SÁNH KHẢ NĂNG BẢO QUẢN CỦA THAN BÙN, BỘT MÌ VÀ GLUCOSE 24 CHƯƠNG KIẾN NGHỊ VÀ KẾT LUẬN 26 5.1 KẾT LUẬN 26 5.2 KIẾN NGHỊ .26 TÀI LIỆU THAM KHẢO 27 PHỤ LỤC 29 vii DANH SÁCH BẢNG Bảng 1: Thành phần loại môi trường nuôi cấy vi sinh vật 15 Bảng 2: Mật số vi khuẩn theo thời gian 19 Bảng 3: Mật số vi khuẩn bảo quản Than Bùn theo thời gian 20 Bảng 4: Mật số vi khuẩn bảo quản Bột Mì theo thời gian…………… 22 Bảng 5: Mật số vi khuẩn bảo quản Glucose theo thời gian 23 viii DANH SÁCH HÌNH Hình 1: Chế phẩm Antibio Pro 14 Hình 2: Khuẩn lạc vi khuẩn L acidophilus 19 Hình 3: Thay đổi mật số Lactobacillus acidophilus bảo quản Than Bùn theo thời gian 21 Hình 4: Thay đổi mật số Lactobacillus acidophilus bảo quản Bột Mì theo thời gian 22 Hình 5: Thay đổi mật số Lactobacillus acidophilus bảo quản Bột Mì theo thời gian 24 Hình 6: Hình thái khuẩn lạc L acidophilus bảo quản (A) than bùn, (B) bột mì (C) glucose……………………………… ………………… 24 Hình 7: Bảng so sánh mật số chủng vi khuẩn L acidophilus bảo quản mơi trường Than Bùn, Bột Mì, Glucose…………………….25 ix Cho sinh khối vi khuẩn L acidophilus tăng sinh cho vào ống falcon có dung tích 50mL sau đây: Ống 1: 10g than bùn + 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 2: 10g bột mì + 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 3: 10g Glucose+ 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 4: 10g than bùn + 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 5: 10g bột mì + 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 6: 10g Glucose + 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 7: 10g than bùn + 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 8: 10g bột mì + 10mL sinh khối vi khuẩn Ống 9: 10g Glucose + 10mL sinh khối vi khuẩn Sau cho vào chất mang sinh khối vi khuẩn ống bọc thêm parafilm nhằm hạn chế nguy lây nhiễm Sấy nhiệt độ 50 0C Tiến hành khảo sát liên tục theo mốc thời gian: ngày, ngày, 14 ngày, 21 ngày, 28 ngày, 35 ngày 42 ngày 49 ngày Hút 0,1 mL sinh khối vi khuẩn, trải môi trường MRS Agar, vi khuẩn trải nồng độ pha loãng 10-4, 10-5, 10-6 , 10-7 nồng độ lặp lại lần Đĩa sau trải ủ 37 ºC 24 Tính mật số vi khuẩn Sau 24 cấy vi khuẩn môi trường thạch đĩa, ta tiến hành đếm số lượng khuẩn lạc phương pháp đếm trực tiếp Cách tính mật số tương tự thí nghiệm 18 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 XÁC ĐỊNH MẬT SỐ TĂNG TRƯỞNG CỦA VI KHUẨN L acidophilus THEO THỜI GIAN Để làm sở cho thí nghiệm bảo quản, nghiên cứu tiến hành xác định đường cong tăng trưởng L acidophilus môi trường MRS để khảo sát mật số vi khuẩn theo thời gian cách đếm trực tiếp để xác định mật số vi khuẩn qua mốc thời gian: 0h, 12h, 24h, 36h 48h kết trình bày sau (Bảng 2) Bảng 2: Sự thay đổi mật số vi khuẩn L acidophilus môi trường MRS theo thời gian Thời gian (giờ) Mật số Log[CFU/mL] 6,23c 12 6,9b 24 7,00b 36 7,16ab 48 7,82a Theo kết ghi nhận bảng 2, mật số L acidophilus tăng nhanh chóng từ 6,23 Log[CFU/mL] ban đầu lên Log[CFU/mL] sau 24 Khi thời gian ni cấy kéo dài mật số tiếp tục tăng 7,82 Log[CFU/mL] tại 48 khơng có khác biệt ý nghĩa mặt thống kê Nên chọn thời gian 48 cho ni cấy dùng cho nghiên cứu Hình 2: Khuẩn lạc vi khuẩn L acidophilus 19 Đồng thời với xây dựng đường cong tăng trưởng, nghiên cứu quan sát đặc điểm hình thái chủng Lactobacillus acidophilus có nguồn gốc từ chế phẩm Antibio Pro Quan sát kính hiển vi cho thấy chủng L acidophilus thí nghiệm có hình dạng kh̉n lạc trịn, màu trắng sữa, tế bào có hình dạng que thường kết đơi tạo thành chuỗi (Hình 2) Sinh trưởng tốt mơi trường hiếu khí 4.2 KẾT QUẢ BẢO QUẢN L acidophilus TRONG MƠI TRƯỜNG THAN BÙN, BỘT MÌ VÀ GLUCOSE Với mong muốn bảo quản vi khuẩn lâu tốt điều kiện đơn giản hơn, nghiên cứu thử nghiệm bảo quản L acidophilus than bùn, bột mì, glucose Đây cách bảo quản đơn giản, thử nghiệm thành công hứa hẹn tiết kiệm khoảng chi phí cho q trình giữ giống vi kh̉n lactic 4.2.1 Bảo quản L acidophilus Than Bùn Khả bảo quản than bùn L acidophilus theo thời gian tiến hành khảo sát từ ngày đến ngày 49, dịch tăng sinh vi khuẩn lactic sau 48 trộn với than bùn theo tỉ lệ 1:1, sau vortex kết khảo sát liên tiếp qua tuần trình bày bảng hình 3: Bảng 3: Sự thay đổi mật số vi khuẩn L.acidophilus than bùn theo thời gian Mật số Log[CFU/mL] Thời gian (ngày) 7,33abc 8,46a 14 7,90ab 21 7,54abc 28 6,67bc 35 6,47c 42 6,57c 49 5,50bc *Ghi chú:những giá trị ký tự cột có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% 20 Kết thể bảng hình ta thấy: Mật số vi khuẩn bảo quản than bùn tăng mạnh ngày khác biệt mặt thống kế, ngày mật số 7,33 Log[CFU/mL] đến ngày mật số tăng lên 8,45 Log[CFU/mL] điều chứng minh than bùn có khả giúp vi khuẩn lactic phát triển Ngày 14 21 bắt đầu giảm nhẹ Sau 28 ngày có dấu hiệu giảm nhẹ xuống 6,67 Log[CFU/mL] Ngày 35, ngày 42 mật số vi khuẩn ổn định ngày 49 giảm mạnh Tuy ngày 42 mật số vi khuẩn tăng lên so với ngày 35 khơng có khác biệt ý nghĩa mặt thống kê Vậy kết luận, than bùn có khả giữ ổn định mật số vi khuẩn 21 ngày Mật số Log[CFU/mL] 10 7 14 21 28 35 42 49 Thời gian (ngày) Hình 3: Thay đổi mật số Lactobacillus acidophilus bảo quản Than Bùn theo thời gian 4.2.2 Bảo quản Lactobacillus acidophilus Bột Mì Tương tự than bùn, thí nghiệm khả bảo quản vi khuẩn lactic từ ngày đến ngày 49 mơi trường bột mì, dịch tăng sinh vi khuẩn lactic sau 48 trộn với bột mì theo tỉ lệ 1:1, sau vortex kết khảo sát liên tiếp qua tuần trình bày bảng hình Theo kết thể bảng hình ta thấy mật số vi khuẩn bảo quản bột mì tăng mạnh ngày khác biệt mặt thống kế, ngày mật số 7,73 Log[CFU/mL] đến ngày mật số tăng lên 8,27 Log[CFU/mL] điều chứng minh bột mì có khả giúp vi khuẩn lactic phát triển Ngày 14 đến ngày 28 giảm nhẹ đạt 7,77 Log[CFU/mL] tại ngày 28 Giảm mạnh từ ngày 28 đến ngày 49 Tuy ngày thứ 28 mật số vi khuẩn tăng lên so với ngày 21 khơng có khác biệt ý nghĩa mặt thống kê Vậy kết luận, bột mì có khả giữ ổn định mật số vi khuẩn 21 ngày 21 Bảng 4: Sự thay đổi mật số vi khuẩn L acidophilus Bột Mì theo thời gian Thời gian (ngày) Mật số Log[CFU/mL]* 7,73ab 8,27a 14 8,05ab 21 7,76ab 28 7,77ab 35 7,22abc 42 6,96bc 49 6,45c *Ghi chú: những giá trị ký tự cột có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Mật số Log[CFU/mL] 10 7 14 21 28 35 Thời gian (ngày) 42 49 Hình 4: Thay đổi mật số L acidophilus bảo quản Bột Mì theo thời gian 22 4.2.3 Bảo quản L acidophilus Glucose Đối với Glucose tương tự than bùn bột mì, thử nghiệm khả bảo quản vi khuẩn lactic từ ngày đến ngày 49 mơi trường chứa glucose, dịch tăng sinh vi khuẩn lactic sau 48 trộn với glucose theo tỉ lệ 1:1, sau vortex kết khảo sát liên tiếp qua tuần trình bày bảng hình Bảng 5: Sự thay đổi mật số vi khuẩn L.acidophilus Glucose theo thời gian Thời gian (ngày) Mật số Log[CFU/mL]* 7,47abc 7,83a 14 7,74ab 21 7,12abc 28 7,02bc 35 7,21abc 42 6,85c 49 5,50d *Ghi chú: những giá trị ký tự cột có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Kết thể bảng hình cho thấy mật số vi khuẩn bảo quản glucose tăng mạnh ngày khác biệt mặt thống kế, ngày mật số 7,47 Log[CFU/mL] đến ngày mật số tăng lên 7,83 Log[CFU/mL] điều chứng minh glucose có khả giúp vi khuẩn lactic phát triển Ngày 14 đến ngày 21 giảm đạt 7,12 Log[CFU/mL] tại ngày 21 Từ ngày 28 đến ngày 42 mật độ vi khuẩn ổn định ngày 49 giảm mạnh Tuy ngày 35 mật số vi khuẩn tăng lên so với ngày 28 khơng có khác biệt ý nghĩa mặt thống kê Vậy kết luận, glucose có khả giữ ổn định mật số vi khuẩn 21 ngày 23 Mật số Log[CFU/mL] 10 7 14 21 28 35 Thời gian (ngày) 42 49 Hình 5: Thay đổi mật số L acidophilus bảo quản Glucose theo thời gian 4.3 SO SÁNH KHẢ NĂNG BẢO QUẢN CỦA THAN BÙN, BỘT MÌ VÀ GLUCOSE Để lựa chọn loại chất mang thích hợp nhằm ổn định mật số L acidophilus trình bảo quản việc phân tích, so sánh khả bảo quản ba loại chất mang than bùn, bột mì glucose cần thiết Quan sát đặc điểm hình thái khuẩn lạc cho thấy khơng có khác L acidophilus bảo quản ba loại chất mang (Hình 6) Nhìn chung khuẩn lạc giữ đặc điểm điển hình L acidophilus với hình trịn, màu trắng sữa Điều cho thấy chất mang không làm ảnh hưởng đến hình thái vi khuẩn (A) (B) (C) Hình 6: Hình thái khuẩn lạc L acidophilus bảo quản (A) than bùn, (B) bột mì (C) glucose Tiến hành so sánh mật số vi khuẩn khơng có chất bảo quản loại mơi trường ngày 21 loại mơi trường có khả bảo quản tốt vi khuẩn 21 ngày, kết thể hình 24 Mật số Log[CFU/mL] 7.54 7.76 Than Bùn Bột Mì 7.123 Khơng chất bảo vệ Glucose Chất bảo vệ Hình 7: Bảng so sánh mật số chủng vi khuẩn L acidophilus bảo quản môi trường Than Bùn, Bột Mì, Glucose Theo kết phân tích mật số L acidophilus hình thấy loại mơi trường than bùn, bột mì glucose có khả bảo quản tốt vi khuẩn Mật số ban đầu L acidophilus 6,23 Log[CFU/mL] Sau 21 ngày bảo quản, mật số vi khuẩn lại bột mì cao đạt 7,76 Log[CFU/mL] Tiếp theo than bùn với 7,54 Log[CFU/mL] cuối glucose với 7,12 Log[CFU/mL] Tuy nhiên, khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê với độ tin cậy 95% Trong trường hợp chất bảo quản, vi kh̉n chết hồn tồn Như kết chứng minh loại mơi trường than bùn, bột mì glucose có khả bảo quản tốt vi khuẩn L acidophilus, bột mì có khả bảo quản mật số vi khuẩn tốt so với than bùn glucose 25 CHƯƠNG KIẾN NGHỊ VÀ KẾT LUẬN 5.1 KẾT LUẬN Qua kết thí nghiệm đưa kết luận: Cả chất bổ sung Than Bùn, Bột Mì Glucose bảo quản vi kh̉n L acidophilus Mật số vi khuẩn sống sót sau 21 ngày bảo quản 50 oC khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so với ban đầu Trong trường hợp khơng có chất bảo quản vi kh̉n chết hoàn toàn So sánh khả bảo quản Than Bùn, Bột Mì Glucose Bột Mì bảo quản vi khuẩn L acidophilus tốt 5.2 KIẾN NGHỊ Cần nghiên cứu phân tích xa thay đổi trình trao đổi chất L acidophilus suốt thời gian bảo quản để hiểu rõ chế bảo vệ chất bảo quản Nghiên cứu ứng dụng sinh khối L acidophilus bảo quản chất bảo vệ vào thực tế 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO Stackebrandt E., Teuber M (1988), Molecular taxonomy and phylogenetic position of lactic acid bateria, Biochimie, 90 (3), pp 317-324 Espina, F and V.S Packard 1979 Survival ofLactobacillus acidophilus in a spray-drying process J Food Prot 42: 149–152B De Giulio, P Orlando, G Barba, R Coppola, M De Rosa, A Sada, PP DePrisco &F Nazzaro (2005) Use of alginate and cryo-protective sugars to improve the viability of lactic acid bacteria after freezing and freeze-drying.World Journal of Microbiology and Biotechnology, 21, 739–746 Noordiana N., Fatimah A B., Mun A S (2013), " Antibacterial agents produced by lactic acid bacteria isolated from Threadfin Salmon and Grass Shrimp", International Food Research Journal, 20(1), pp 117 - 124 Mahdi Ghanbari and Mansooreh Jami (2012), Lactic Acid Bacteria and Their Bacteriocins: A Promising Approach to Seafood Biopreservation, 516525 Bashir K, Swer TL, Prakash KS, Aggarwal M (2017) Physico-chemical and functional properties of gamma irradiated whole wheat flour and starch LWT-Food Sci Technol 76, 131–139 Miklós péter kalapos., (2008), Methylglyoxal and glucose metabolism: a historical perspective and future avenues for research Võ Đình Ngộ, Nguyễn Siêu Nhân, Trần Mạnh Trí, Nhà xuất Khoa học kĩ thuật năm 2017 Samar L., Hadda O., Nicolas A., Ziad F., Pascal M., Abdellatif B (2012), "Lacticin LC14, a new bacteriocin produced by Lactococcus lactis BMG6.14: isolation, purification and partial characterization",Infect Disord Drug Targets, pp 316 - 325 Handa and Sharma (2016), Lactobacillus plantarum have also been used in the production of phabs as microbial inoculum in Lahaul and Spiti regions of Himachal Pradesh, pp 111-118 Claude P Champagne, Francine Mondou, Yves Raymond, Denis Roy (1996) Effect of polymers and storage temperature on the stability of freeze-dried lactic acid bacteria.Food Research International, 5-6, 555-562 https://doi.org/10.1016/0963-9969(95)00050-X E Elizabeth Tymczyszyn, Esteban Gerbino, Andrés Illanes, Andrea GómezZavaglia (2011) Galacto-oligosaccharides as protective molecules in the preservation of Lactobacillus delbrueckii subsp Bulgaricus.Cryobiology, 2, 123-129) https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2011.01.013 Yi-Chieh Wang, Roch-Chui Yu, Cheng-Chun Chou.(2004) Viability of lactic acid bacteria and bifidobacteria in fermented soymilk after drying, subsequent rehydration and storage.International Journal of Food Microbiology, 2, 20927 217.https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2003.12.001Get content rights and Stéphanie Passot, Stéphanie Cenard, Inès Douania, Ioan Cristian Tréléa, Fernanda Fonseca (2012).Critical water activity and amorphous state for optimal preservation of lyophilised lactic acid bacteria.Food Chemistry, 4, 1699-1705.https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2011.06.012 28 PHỤ LỤC PHÂN TÍCH THỐNG KÊ PL1.1: Bảng phân tích thống kê thay đổi mật số vi khuẩn L acidophilus môi trường MRS theo thời gian ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3.89544 0.97386 Within groups 1.2434 10 0.12434 Total (Corr.) 5.13884 14 7.83 0.0040 Multiple Range Tests for Density by Time Method: 95 percent Duncan Time Count Mean Homogeneous Groups 6.23 X 12 6.9 X 24 X 36 7.16 XX 48 7.82 X PL1.2: Bảng phân tích thống kê tổng mật độ vi khuẩn sau 49 ngày môi trường chứa Than Bùn, Bột Mì Glucose Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 22.7609 23 0.989603 Within groups 17.7861 48 0.370543 Total (Corr.) 40.5469 71 Method: 95 percent Duncan Time_Medium Count Mean Homogeneous Groups 49-glu 5.50333 XXXXX 49-than 5.50333 XXXX 49-botmi 6.45667 X 35-than 6.47667 X 42-than 6.57333 XX 28-than 6.67667 XXX 29 2.67 0.0021 42-glu 42-botmi 6.85667 XXXXX 6.96667 XXXXX 28-glu 7.02 21-glu 35-glu 7.12333 XXXXXX 7.21333 XXXXXX 35-botmi 0-than 0-glu 21-than 7.47667 XXXXXXX XXXXXXX 7.54 0-botmi 7.73 14-glu 21-botmi 7.74667 XXXXXX XXXXXX 7.76 28-botmi 7.77 7-glu 14-than 7.83667 XXXXX 7.90333 XXXX 14-botmi 7-botmi 8.05333 XXX .XX 8.27 7-than 8.45667 X XXXXX 7.22667 XXXXXX XXXXXXX 7.33 XXXXXX XXXXXX PL1.3: Bảng phân tích thống kê mật độ vi khuẩn mơi trường chứa Than Bùn Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 10.7108 1.53011 Within groups 7.20353 16 0.450221 Total (Corr.) 17.9143 23 Method: 95 percent Duncan Time Count Mean Homogeneous Groups 49 5.05333 XX 35 6.47667 X 42 6.57333 X 28 6.67667 XX 7.33 XXX 21 7.54 XXX 30 3.40 0.0202 14 7.90333 XX 8.45667 X PL1.4: Bảng phân tích thống kê mật độ vi khuẩn mơi trường chứa Bột Mì Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 7.60012 1.08573 Within groups 16 0.372692 5.96307 Total (Corr.) 13.5632 Method: 95 percent Duncan Time Count Mean 2.91 0.0363 23 Homogeneous Groups 49 6.45667 X 42 6.96667 XX 35 7.22667 XXX 7.73 XX 21 7.76 XX 28 7.77 XX 14 8.05333 XX 8.27 X PL1.5: Bảng phân tích thống kê mật độ vi khuẩn môi trường chứa Glucose Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 11.193 1.599 Within groups 2.51587 16 0.157242 Total (Corr.) 13.7089 23 Method: 95 percent Duncan Time Count Mean Homogeneous Groups 49 5.50333 X 42 6.85667 X 28 7.02 21 7.12333 XXX 35 7.21333 XXX 7.47667 XXX XX 31 10.17 0.0001 14 7.74667 XX 7.83667 X 32