KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM E. coli VÀ Coliforms TRONG NƯỚC UỐNG, NƯỚC CÓ GAS, NƯỚC CÓ CỒN TRÊN ĐỊA BÀN QUẬN THỦ ĐỨC | Khóa luận tốt nghiệp

Ngày nay, khi cuộc sống con người ngày càng được nâng cao thì điều mà họ quan tâm là vệ sinh ăn uống. Hàng năm có hàng trăm ca ngộ độc thực phẩm phải nhập viện, gây hậu quả nghiêm trọng đến sức khoẻ của cộng đồng. Điều này không chỉ phổ biến ở Việt Nam mà ngay cả các nước khác trên thế giới cũng vậy. Một trong những nguyên nhân gây ra tình trạng này là sự hiện diện quá mức cho phép các vi sinh vật gây hại trong thực phẩm. Để có các biện pháp phòng tránh, ngăn chặn và làm giảm bớt số ca ngộ độc thực phẩm. Chúng tôi tiến hành khảo sát sự hiện diện của Coliforms vàE. coli trong các loại nước uống đang lưu hành trên thị trường. Mục tiêu là xác định và đánh giá giới hạn định lượng và mật độ nhiễm Coliforms và E. coli trong các loại nước uống.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC  ĐỒN NGỌC TUẤN KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM E coli VÀ Coliforms TRONG NƯỚC UỐNG, NƯỚC CÓ GAS, NƯỚC CÓ CỒN TRÊN ĐỊA BÀN QUẬN THỦ ĐỨC LUẬN VĂN KỸ SƯ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM E coli VÀ Coliforms TRONG NƯỚC UỐNG, NƯỚC CÓ GAS, NƯỚC CÓ CỒN TRÊN ĐỊA BÀN QUẬN THỦ ĐỨC LUẬN VĂN KỸ SƯ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giáo viên hướng dẫn Th.S NGUYỄN TIẾN DŨNG Sinh viên thực ĐỒN NGỌC TUẤN KHĨA: Thành phố Hồ Chí Minh MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC FACULTY OF BIOTECHNOLOGY  INVESTIGATING THE INFECTION RATE OF E coli AND Coliforms IN BOTTLED WATER, SOFT WATER AND BEER IN THU DUC DISTRICT GRADUATION THESIS MAJOR: BIOTECHNOLOGY Professor Ms NGUYEN TIEN DUNG HCMC, Student DOAN NGOC TUAN TERM: LỜI CẢM ƠN Em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ban Giám Hiệu trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học, tất quý thầy cô tận tâm dạy dỗ, truyền đạt tri thức khoa học kinh nghiệm quý báu cho em suốt trình rèn luyện học tập trường Đặc biệt em xin chân thành cảm ơn đến thầy Nguyễn Tiến Dũng tạo điều kiện tốt nhất, tận tình hướng dẫn giúp đỡ em suốt thời gian thực tập tốt nghiệp bước đầu nghiên cứu khoa học Em xin cảm ơn thầy Hồ Thanh Bá, Nguyễn Thị Hun Phịng thí nghiệm Cơng Nghệ Sinh Học Môi Trường, trường Đại học Nông Lâm với gia đình bạn bè thân yêu lớp Cơng Nghệ Sinh Học khóa 28 hết lòng quan tâm hỗ trợ, động viên tạo điều kiện thuận lợi cho em thực tốt khóa luận Một lần em xin chân thành cảm ơn tất Sinh viên Đồn Ngọc Tuấn iv TĨM TẮT ĐỒN NGỌC TUẤN, Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Tháng 8/2006 “KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM E coli VÀ Coliforms TRONG NƯỚC UỐNG, NƯỚC CÓ GAS, NƯỚC CÓ CỒN TRÊN ĐỊA BÀN QUẬN THỦ ĐỨC” Giáo viên hướng dẫn: Th.S NGUYỄN TIẾN DŨNG Ngày nay, sống người ngày nâng cao điều mà họ quan tâm vệ sinh ăn uống Hàng năm có hàng trăm ca ngộ độc thực phẩm phải nhập viện, gây hậu nghiêm trọng đến sức khoẻ cộng đồng Điều không phổ biến Việt Nam mà nước khác giới Một nguyên nhân gây tình trạng diện mức cho phép vi sinh vật gây hại thực phẩm Để có biện pháp phòng tránh, ngăn chặn làm giảm bớt số ca ngộ độc thực phẩm Chúng tiến hành khảo sát diện Coliforms E coli loại nước uống lưu hành thị trường Mục tiêu xác định đánh giá giới hạn định lượng mật độ nhiễm Coliforms E coli loại nước uống Những kết đạt được: Có khác biệt giới hạn định lượng Coliforms E coli nhóm nước uống, nước có gas nước có cồn Đồng thời xác định giới hạn định lượng loại nước uống Trong 45 mẫu khảo sát, tỷ lệ nhiễm Coliforms E coli vượt tiêu cho phép mẫu nước khơng đóng chai 100%, mẫu nước đóng chai 0% Có khác biệt lớn mật độ nhiễm Coliforms E coli loại nước giải khác đóng chai khơng đóng chai Ngồi cho thấy khơng có khác biệt loại nước nhóm v MỤC LỤC TRANG Trang tựa Lời cảm tạ iv Tóm tắt v Mục lục vi Danh sách chữ viết tắt viii Danh sách hình .ix Danh sách bảng x MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Nội dung thực 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Hệ vi sinh vật nước 2.2 Các tiêu vi sinh vật nước 2.2.1 Nước dùng cho mục đích sinh hoạt, sản xuất 2.2.2 Nước uống 2.3 Sơ lược Coliforms 2.4 Sơ lược E coli .8 2.4.1 Đại cương 2.4.2 Tính chất vi sinh học 2.4.3 Đặc điểm nuôi cấy 2.4.4 Đặc tính sinh hố 10 2.4.5 Sức đề kháng 10 2.4.6 Kháng nguyên 10 2.4.7 Độc tố 11 2.4.8 Tình hình nhiễm 11 2.5 Phương pháp định lượng vi sinh vật MPN (Most probable number ) .13 2.5.1 Khái niệm 13 vi 2.5.2 Cách tiến hành 13 MỤC LỤC 2.5.3 Cách lập số MPN 14 2.5.4 Cách tính kết 15 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 16 3.1 Thời gian địa điểm 16 3.1.1 Thời gian 16 3.1.2 Địa điểm 16 3.2 Vật liệu 16 3.2.1 Dụng cụ thiết bị 16 3.2.2 Hố chất mơi trường 17 3.2.3 Vật liệu thí nghiệm 18 3.3 Phương pháp thực 18 3.3.1 Bố trí thí nghiệm 18 3.3.2 Cách lấy mẫu 19 3.3.3 Chọn mẫu âm tìm giói hạn phát 19 3.3.4 Định lượng Coliforms E coli nước 19 3.3.5 Phương pháp định lượng E coli dịch pha loãng phương pháp đếm khuẩn lạc 21 3.3.6 Xử lý số liệu 21 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Khảo sát giới hạn định lượng Coliforms E coli loại nước phương pháp MPN 25 4.2 Khảo sát mật độ Coliforms E coli loại nước giải khát 27 4.3 Đánh giá tình hình nhiễm Coliforms E coli nước giải khát .30 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 31 5.1 Kết luận 31 5.2 Đề nghị 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 PHỤ LỤC 34 vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BGA : Brilliant green agar BGBL : Brilliant Green Lactose Bile Salt CFU : Colony Forming Unit EMB: Eosin Methylene Blue E coli: Escherichia coli LT: Heat Labile ST: Heat stable MR-VP: Methyl Red- Voges Proskauer MPN: Most Probable Number 10 MCK: MacConKey 11 KIA: Kligler Iron agar 12 IMViC: Indol, Methyl red, Voges proskauer, Citrate 13 SPW: Saline Peptone Water 14 TSA: Tryptone Soya agar 15 TCVN: Tiêu chuẩn Việt Nam viii DANH SÁCH CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ TRANG Hình 2.1: Hình dạng vi khuẩn E coli Hình 2.2: Vị trí kháng nguyên E coli 11 Sơ đồ 3.1: Quy trình định lượng Coliforms E coli 22 Hình 3.1: Biểu E coli mơi trường canh BGBL 23 Hình 3.2: Khuẩn lạc E coli môi trường EMB 23 Hình 3.3: Biểu sinh hóa E coli 24 Biểu đồ 4.1: Biểu đồ so sánh độ thu hồi nhóm nước 26 Biểu đồ 4.2: Biểu đồ so sánh Coliforms E coli mẫu nước giải khát 28 ix DANH SAÙCH CÁC BẢNG TRANG Bảng 2.1: Biểu sinh hố giống Coliforms Bảng 2.2: Thí dụ lựa chọn kết dương tính việc tính tốn MPN .15 Bảng 3.1: Biểu sinh hoá E coli .20 Bảng 4.1: Kết khảo sát giới hạn dịnh lượng Coliforms E coli nhóm nước 25 Bảng 4.2: Kết khảo sát mật độ Coliforms E.coli loại nước giải khát 27 x Hình 3.3 Biểu sinh hóa E coli 1: Indol (+), 2: Methyl Red (+), 3: Voges Prokauer (-), 4: Citrate (-) Phần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Khảo sát giới hạn định lượng Coliforms E coli loại nước phương pháp MPN Thí nghiệm tiến hành mẫu âm, mẫu không nhiễm Coliforms Các mẫu sử dụng thí nghiệm thuộc nhóm: nước uống tinh khiết đóng chai Lavie, nước có gas đóng chai Pepsi, nước giải khác có cồn bia Sai Gòn đỏ Mẫu chọn gây nhiễm E coli với mật độ: 0, 1-10, 10 – 100, > 100 CFU/100ml Kết khảo sát thể Bảng 4.1 Bảng 4.1 Kết khảo sát giới hạn định lượng Coliforms E coli nhóm nước Mẫu Nước uống Lavie Nước có gas Pepsi Nước có cồn bia Sài Gịn Mật độ gây nhiễm Mật độ phát Độ thu hồi(%) (CFU/100ml) (MPN/100ml) trung bình 21 56 105 296 39 64 240 21 56 105 296 0 28 64 240 21 56 105 296 0 23 48 150 60,86 b 38,40 a 27,49 a Ghi *: Các số trung bình có chữ khác theo cột dọc thể khác biệt có ý nghĩa mật thống kê mức P