1 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y DƢỢC BÀI TIỂU LUẬN MÔN TÀI NGUYÊN CÂY THUỐC Chủ đề 10 Tổng quan về cây thuốc sắn dây củ tròn (Pueraria mirifica) Giảng viên hƣớng dẫn PGS TS Vũ Đức Lợi Nhóm[.]
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y DƢỢC BÀI TIỂU LUẬN MÔN TÀI NGUYÊN CÂY THUỐC Chủ đề 10: Tổng quan thuốc sắn dây củ tròn (Pueraria mirifica) Giảng viên hƣớng dẫn: PGS.TS.Vũ Đức Lợi Nhóm thực hiện: 10 Hà Nội, 2022 BÀI TIỂU LUẬN MÔN TÀI NGUYÊN CÂY THUỐC Chủ đề 10: Tổng quan thuốc sắn dây củ tròn (Pueraria mirifica) Giảng viên hƣớng dẫn: PGS.TS.Vũ Đức Lợi Nhóm thực hiện: 10 Thành viên nhóm: Họ Tên MSV Cao Thị Hạnh 19100125 Hoàng Thị Diệu Linh Ngô Thị Xuân Mai Huyền Sâm 19100151 19100209 19100180 Trần Thiện Tài 19100181 Dương Thị Phương Thảo Nguyễn Thị Hương Thảo 19100183 19100185 Nguyễn Thị Huyền Trang Phạm Thị Thư 19100198 19100192 10 Nguyễn Thị Kim Anh 19100111 Xếp theo mức độ đóng góp, mức độ đóng góp Hà Nội, 2022 Mục Lục LỜI MỞ ĐẦU LỜI CẢM ƠN CHƢƠNG I TỔNG QUAN VỀ CHI 1.Tổng quan chi Pueraria 1.1 Đặc điểm thực vật 1.2 Đặc điểm hóa học tác dụng sinh học 2.Ứng dụng thuốc 12 CHƢƠNG II TỔNG QUAN VỀ LOÀI 15 Về thực vật 15 1.1 Tên khoa học 15 1.2 Mô tả dƣợc liệu 15 1.3 Bộ phận dùng: Rễ củ 17 1.4 Phân bố: 17 Về hóa học 18 2.1 Thành phần hóa học 18 2.2 Tình hình nghiên cứu nƣớc giới 20 2.3 Tình hình chiết xuất, phân lập, định tính, định lƣợng 25 Tác dụng sinh học 27 3.1 Tác dụng dƣợc lý 27 3.1.1 Tác dụng lên trình trao đổi chất 27 3.1.2 Tác dụng thần kinh 28 3.1.3 Tác dụng synapse 28 3.1.4 Tác dụng thời kỳ mãn kinh 28 3.1.5 Tác dụng sức khỏe tim mạch 29 3.1.6 Tác dụng xƣơng 30 3.1.7 Tác dụng miễn dịch 31 3.1.8 Tác dụng Hormon 31 3.1.8.1 Tác dụng tƣơng tự nhƣ Estrogen 31 3.1.8.2 Testosterol 32 3.1.8.3 Luteinizing Hormone 32 3.1.8.4 FSH 33 3.1.8.5 Hormon tuyến cận giáp 33 3.1.9 Tác dụng chống oxy hóa 33 3.1.10 Đối với số quan 33 3.1.10.1 Gan 33 3.1.10.2 Cơ quan sinh dục nữ 34 3.1.10.3 Tinh Hồn 35 3.1.11 Trong q trình trao đổi chất bệnh ung thƣ 36 3.2 Công dụng theo y học cổ truyền 37 3.3 Độc tính 37 Sản phẩm 38 CHƢƠNG III KẾT LUẬN 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 Danh mục hình ảnh bảng: Hình 1: Sự phân bố địa lý Pueraria (khu vực gốc tô màu đen, khu vực phát triển tô gạch dọc)……………………………… …………………………………………… Hình 2: Một số cơng thức hóa học đại diện………………………………………… ….10 Hình 3: Cơng thức hợp chất…………………………………………………….………11 Hình 4: P mirifica (a) trồng phía đông bắc Thái Lan, lá, hoa (b) rễ củ (c)……………………………………………………………………………… ……… 16 Hình 5: Cấu trúc củ P mirifica cho thấy (a) hệ thống rễ củ, (b) kết cấu rễ cắt rễ khô, (c) bột dược liệu rễ củ (d) số lượng hình dạng sợi hạt tinh bột…………………………………………………………………………………… …17 Hình 6: Cấu trúc hóa học β - Estradiol số phytoestrogen…………… ……18 Hình 7: Một số thành phần hóa học Pueraria mirifica……………………………….19 Hình 8: Hình ảnh mơ tả lồi Pueraria mirifica (Bên phải); Pueraria phaseoloides (Bên trái)………………………………………………………………………… ………… 20 Hình 9: Hình ảnh hoa lồi Pueraria mirifica (Bên phải) Pueraria phaseoloides (Bên trái)…………………………………………………………………………… ……… 21 Bảng 1: Bảng hoạt động gây độc tế bào điều trị với chiết xuất Pueraria peduncularis 10µg/mL tế ung thư khác nhau……………………………………… … 11 Bảng 2: Bản mơ tả hình thái Pueraria phaseoloides (Đậu ma) Pueraria mirifica (Sâm tố nữ)………………………………………………………………………………… … 21 LỜI MỞ ĐẦU Ngày nay, mở mang kiến thức y học ngày kéo theo nhu cầu phát hợp chất mới, nguồn tài nguyên dược liệu Vào năm 1952, Pueraria mirifica hay gọi sâm tố nữ sắn dây củ trịn thức ghi nhận tồn đặt tên Tuy nhiên, cịn nghiên cứu uy tín quy mơ lồi Tri thức sử dụng lồi cịn mơ hồ thiếu nhiều nghiên cứu, ngồi lợi ích mang lại chúng tiềm ẩn nhiều nguy cơ, việc tìm hiểu đánh giá tác dụng loài điều quan trọng Là sinh viên thuộc khối ngành liên quan trực tiếp đến sức khỏe đồng thời để phục vụ cho trình nghiên cứu học tập trường cho cơng việc Dược sĩ tương lai, nhóm 10 chúng em lựa chọn đề tài “Tổng quan thuốc sắn dây củ trịn” để tìm hiểu Hi vọng chúng em tìm mang lại nhìn tổng thể xác cho người tìm hiểu tác dụng sâm tố nữ, hỗ trợ thêm phần kiến thức cho bạn sinh viên ngành Dược nói riêng, khối ngành sức khỏe nói chung LỜI CẢM ƠN Tri thức y học nguồn tri thức quan trọng lồi người, dễ hiểu kiến thức y lại vô bao la rộng lớn cập nhật ngày Môn học Tài nguyên thuốc thuộc môn Dược liệu Dược học cổ truyền củng cố lại cho chúng em điều đó, chúng em tiếp thu thêm nhiều kiến thức liên quan đến y học lồi cây, phương thuốc, đơi thứ gần gũi đời sống Chúng em muốn gửi lời cảm ơn đến PGS.TS.Vũ Đức Lợi truyền đạt nhiều kiến thức bổ ích hướng dẫn chúng em vấn đề liên quan đến phương pháp học tập Mặc dù có nhiều cố gắng để thực đề tài cách hoàn chỉnh tiểu luận khơng tránh khỏi nhiều thiếu sót mà em chưa thấy Em mong nhận đóng góp thầy bạn sinh viên để tiểu luận chúng em hoàn thiện Chúng em xin trân trọng cảm ơn! CHƢƠNG I TỔNG QUAN VỀ CHI Tổng quan chi Pueraria Từ thời cổ đại, loài thực vật thuộc Chi Pueraria xuất có mặt hầu Châu Á, người sử dụng làm thức ăn, dệt vải, tráng trí làm thuốc để chữa bệnh hai thập kỷ qua Chi Pueraria chuyên khảo công bố chi thuốc công nghiệp.[1] 1.1 Đặc điểm thực vật Chi Pueraria thuộc họ Fabaceae - phân họ đậu Faboideae Chi Pueraria chứa khoảng 26 loài thực vật, phân bố chủ yếu Bắc Mỹ Nam Mỹ.[2] Sự phân bố Pueraria rộng rãi, loài thường sinh sống rừng, sống nhiều ven rừng thảm thực vật bụi có chế độ ẩm phù hợp.[1] Hình Sự phân bố địa lý Pueraria (khu vực gốc tô màu đen, khu vực phát triển tô gạch dọc) Việt Nam có lồi trồng từ vùng núi đến đồng Đặc điểm hình dạng: Cành to khỏe, tồn dạng dây leo thành bụi Cây có khả sinh trưởng dồi dào, hầu hết lồi có lơng ngắn thân, thân đâm trườn mặt đất Tốc độ sinh trưởng chi lên tới 30cm ngày, đạt 18-30m mùa Lá có hình dạng tam giác đặc trưng cho Fabaceae Cụm hoa nở nách lá, không phân nhánh.[3] 1.2 Đặc điểm hóa học tác dụng sinh học 1.2.1 Một số loài thuộc chi Pueraria Pueraria Thomsonii: loài thực vật có chi Pueraria, dây leo, rễ củ mập, có nhiều bột, thân cành có lơng, kép, mọc so le, cụm hoa mọc kẽ thành chùm dài 15-30cm Cây phân bố rộng từ Đông Ấn Độ đến Trung Quốc, Nhật Bản, Việt Nam, Lào, Campuchia Hiện trở thành trồng phổ biến Trung Quốc, Việt Nam, Lào hầu khác vùng Đơng Nam Á Rễ Pueraria Thomsonii có tác dụng hệ tim mạch, chống loạn nhịp tim, hạ huyết áp, chống ung thư, … dễ chứa thành phần sau: Các dẫn chất isoflavon genistin, puerarin, daidzein, daidzin, daidzein-7,4'-diglucosid, 4-methyl puerarin Daidzein Genistin O-glucosid puerarin C-glucosid daidzein, …[4] 10 1.000mg nơi khác ghi nhận ảnh hưởng đến chu kỳ động dục (thay đổi thời lượng pha, không ngừng).[33] Ở chuột, 10mg / kg dường khơng có tác dụng phụ (1,6mg / kg liều người quy đổi; phụ nữ 120lb, số tương đương 87mg phụ nữ 180lb 131mg) liều cao 10 lần có tác dụng phụ estrogen- ảnh hưởng đến tử cung Liều cao gần 1.000mg dùng hàng ngày chống lại khả sinh sản cao cách ngăn chặn chu kỳ động dục xảy Ít nghiên cứu người sử dụng 20-50mg Pueraria Mirifica ngày tháng phụ nữ sau mãn kinh khỏe mạnh ghi nhận tác dụng estrogen mô xương (được đánh giá nồng độ ALP huyết thanh) khơng tìm thấy tác dụng estrogen độ dày mô học nội mạc tử cung .[24] Một nghiên cứu đánh giá trực tiếp nghiên cứu độc tính người ghi nhận 20-50mg Pueraria Mirifica ngày tháng phụ nữ mãn kinh xác nhận tác dụng estrogen (giảm khô âm đạo tăng số trưởng thành âm đạo) mà khơng có tác dụng phụ đáng kể liên quan đến estrogen Dường phạm vi liều lượng từ 50mg Pueraria Mirifica trở xuống không gây tác dụng độc hại dùng hàng ngày, có số chứng hạn chế tồn người để hỗ trợ quan điểm Bổ sung Pueraria Mirifica ghi nhận làm giảm khô âm đạo, triệu chứng thiếu hụt estrogen (thường liên quan đến mãn kinh) 3.1.10.3 Tinh Hồn Miroestrol Deoxymiroestrol lập ủ tinh hồn chuột đực dường có tác dụng ức chế tương tự enzym đường chuyển hóa 37 tổng hợp steroid (mRNA 17β-HSD1 CYP19, mức độ thấp 3β-HSD CYP17) tạo mRNA 17β-HSD2; hướng hiệu ứng độ lớn tác dụng tương tự so sánh chromenes với estradiol.[34] Ở chuột đực tiêm Pueraria Mirifica với liều 10-100mg / kg ngày tuần (chống lại kiểm sốt tích cực tiêm estrogen diethylstilbestol 200mcg / kg) ghi nhận liều 10mg / kg khơng có tác dụng phụ nhóm 100mg / kg khơng có hầu hết tác dụng phụ việc giảm trọng lượng túi tinh mào tinh với khả di chuyển tinh trùng; kiểm soát estrogen làm suy giảm tất chức gây tác động độc hại đến tinh hồn Có thể có tác dụng kháng androgen (về kiểu hình hiệu lực) tương tự tác dụng ức chế kháng androgen tinh hồn estrogen 3.1.11 Trong q trình trao đổi chất bệnh ung thƣ Về mặt học, thành phần khơng tiêu chuẩn Pueraria Mirifica gây trình apoptosis phụ thuộc vào nồng độ tế bào ung thư vú MCF-7, T47D, SK-BR-3, HS578T MDA-MB-231 (nhưng khơng phải ZR-75-1); ghi nhận phân lập phân đoạn cụ thể (chiết xuất etanol lọc hai lần, sau chiết xuất hexan etyl axetat) có giá trị IC 50 việc giảm tăng sinh MDA-MB-231 6uM.[13] Spinasterol thành phần hoạt động (một đồng phân stigmasterol tìm thấy phần này), điều chưa xác nhận.[13] Ở chuột tiêu thụ 1g / kg Pueraria Mirifica hàng ngày tuần trước khởi phát khối u vú với 7,12-DMBA, người ta ghi nhận 20 tuần quan 38 sát chuột điều trị trước Pueraria Mirifica (so với đối chứng) liên quan đến giảm khối lượng, trọng lượng số lượng khối u 52,75%, 43,50% 50% mà không ảnh hưởng đáng kể đến di lan rộng khối u khắp thể.[35] Nghiên cứu ông lưu ý khối u cắt từ chuột có biểu phụ thuộc vào liều lượng thụ thể estrogen ERα ERβ, tỷ lệ hai tập hợp thụ thể giảm từ 0,83 +/- 0,04 xuống 0,42 +/- 0,02 in ủng hộ ERβ.[35] 3.2 Công dụng theo y học cổ truyền Trong y học cổ truyền người Thái Lan Pueraria Mirifica sử dụng làm trẻ hóa phụ nữ tuổi mãn kinh gần trăm năm Pueraria Mirifica sử dụng để phục hồi mái tóc đen, tăng cảm giác thèm ăn tuổi thọ Gần đây, sử dụng nhiều với mục đích để làm giảm bớt triệu chứng q trình lão hóa thiếu hụt estrogen, giảm nếp nhăn, tăng kích thước vịng Hiện nay, Pueraria Mirifica đưa vào sản phẩm mỹ phẩm thực phẩm chức năng.[3] 3.3 Độc tính - Nghiên cứu độc tính cấp tính chuột đồng cho ăn bột củ Pueraria Mirifica thu giá trị LD50 lớn 16g/kg trọng lượng thể ngày [36] - Nghiên cứu độc tính mãn chuột bạch cho thấy sử dụng SDCT thời gian dài ảnh hưởng đến công thức máu Nghiên cứu sử dụng đường uống dạng cao lỏng (1:5) với liều SDCT hàng ngày 10; 100 1000 mg/kg thể trọng 90 ngày liên tục Kết cho thấy với liều hàng ngày 100 1000 mg/kg làm chậm trình sinh trưởng giảm cảm giác thèm ăn so với nhóm chứng Với liều 1000mg/kg làm giảm hematocrit, số lượng hồng cầu huyết tương giới Số lượng bạch cầu tiểu cầu chuột đực thay đổi đáng kể so với nhóm chứng chuột khơng có thay đổi đáng kể Tử cung chuột 39 sử dụng liều 100 1000mg/kg có tượng sưng % khối lượng tử cung cao so với nhóm chứng [36] - Một nghiên cứu khác cho thấy với liều 100mg/kg thể trọng giảm/ngày tuần làm giảm lượng tinh trùng, tính chất tinh dịch, khả sống sót tinh trùng [37] Liều dùng: Trong can thiệp người, liều lên đến 50mg sử dụng can thiệp mà khơng có tác dụng phụ báo cáo đáng kể[24][19] liều khoảng 25-100mg nghiên cứu nhãn mở kéo dài đến tháng không cho thấy tác dụng độc hại liên quan nào.[16][17] FDA Thái Lan khuyến cáo liều mỹ phẩm không nên vượt 100mg/ngày [38] Hiện khơng có tác dụng phụ đáng kể liên quan đến Pueraria Mirifica bổ sung liều lượng bổ sung tiêu chuẩn Điều khơng có nghĩa Pueraria Mirifica hồn tồn an tồn, hiệu lực chế cho thấy mang rủi ro lợi ích tương tự liệu pháp thay estrogen (những điều chưa nghiên cứu) Sản phẩm 4.1 Trong nƣớc: 4.1.1 Viên uống đẹp da Sâm Tố Nữ Puecolazen: 40 Công dụng: Bổ sung isoflavon, vitamin E hỗ trợ cải thiện triệu chứng suy giảm nội tiết tố nữ giới, giúp làm giảm lão hóa da, giảm nám da, sạm da, giúp da sáng 4.1.2 Tố Nữ Khang Công dụng: Bổ sung nội tiết tố nữ, hỗ trợ giảm triệu chứng tiền mãn kinh, mãn kinh 4.1.3 Sâm Nhung Tố Nữ Tuệ Linh Công dụng: - Hỗ trợ tăng cường nội tiết tố nữ, hỗ trợ làm giảm triệu chứng tiền mãn kinh mãn kinh như: bốc hỏa, ngủ, suy giảm sinh lý 41 - Bồi bổ nguyên khí, hạn chế lão hóa da, giảm nếp nhăn da, tăng cường đàn hồi da, giúp da đẹp, mịn màng, sắc mặt hồng hào 4.1.4 Tố Ngọc Hồn Cơng dụng: Hỗ trợ cải thiện nội tiết tố nữ, hỗ trợ giảm triệu chứng thiếu hụt nội tiết tố như: nhăn da, khô da, nám da, chảy xệ, hỗ trợ hạn chế lão hóa da, làm đẹp da, dáng thon gọn 4.1.5 Ngọc Tố Nữ Công dụng: Giúp cải thiện triệu chứng thiếu hụt nội tiết tố estrogen phụ nữ, hỗ trợ làm săn vòng ngực Phụ nữ trung niên thiếu hụt nội tiết tố estrogen, bị hội chứng thời mãn 42 4.1.6 Queen Love Minh Khang Công dụng: Giúp bổ huyết, điều kinh Hỗ trợ cải thiện tình trạng thiếu hụt nội tiết tố nữ, tăng cường khả sinh lý nữ, giúp hạn chế lão hóa da, hỗ trợ làm đẹp da 4.2 Nƣớc ngồi: 4.2.1 Nature's Answer Pueraria Mirifica Cơng dụng: Giúp giảm bốc hỏa, đổ mồ hôi ban đêm tâm trạng bất ổn 43 4.2.2 Amata Life by Dr Christiane Northrup Pueraria Mirifica Plus Công dụng: Sản phẩm chức giúp làm giảm triệu chứng mãn kinh 4.2.3 Ainterol pueraria mirifica breast Công dụng: Giúp nâng ngực cải thiện ngực chảy xệ, vết rạn da, tái tạo da, cung cấp độ ẩm, chống lão hóa da 44 CHƢƠNG III KẾT LUẬN Mãn kinh trình sinh lý bình thường thể người phụ nữ Phụ nữ tuổi 45- 52 thường bước vào giai đoạn mãn kinh với xuất số triệu chứng như: bốc hỏa, vã mồ hôi, dễ căng thẳng lo lắng, hay ngủ, khô âm đạo có nguy cao bị lỗng xương xơ vữa động mạch Theo nhà khoa học ngun nhân dẫn đến thời kỳ mãn kinh phụ nữ giảm tiết hormon giới tính nữ estrogen Vì để làm giảm triệu chứng giai đoạn thường sử dụng liệu pháp thay hormon (Hormone replacement therapy - HRT) sử dụng thuốc có chất hormon để bổ sung lượng estrogen thiếu hụt thể Phương pháp HRT có ưu điểm tác dụng nhanh, hiệu triệu chứng giảm cách đáng kể nhiên việc sử dụng kéo dài làm tăng số nguy như: ung thư vú, đột quỵ, nhồi máu tim [39] Do liệu pháp khác lựa chọn sử dụng estrogen có nguồn gốc thảo dƣợc (Phytoestrogen) có ưu điểm tác dụng phụ điều trị kéo dài đồng thời giảm số triệu chứng phụ nữ thời kỳ mãn kinh Ở Thái Lan, sắn dây củ tròn loài sử dụng y học dân gian có tác dụng trẻ hóa phụ nữ tuổi mãn kinh [3] Các nghiên cứu cho thấy có chứa nhiều loại phytoestrogen có tác dụng hướng estrogen mạnh thuộc nhóm chromen, coumestan, isoflavonoid Đồng thời có số báo cáo thử nghiệm tiền lâm sàng, lâm sàng chứng minh tác dụng cải thiện triệu chứng phụ nữ thời kỳ mãn kinh Vì thế, năm gần sắn dây củ trịn khai thác sử dụng rộng rãi không Việt Nam mà khắp giới Bộ phận dùng sâm tố nữ rễ củ thu hái vào tháng 10-12 Hiện với phát triển khoa học công nghệ sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu 45 cao (HPLC) cho thấy Pueraria mirifica chứa 17 hợp chất có hoạt chất sinh học estrogen Năm 2018 Viện Hoá học-Viện hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam thực đề tài Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết xuất, phân lập hoạt chất sâm tố nữ ứng dụng vào sản xuất phân lập hoạt chất Deoxymiroestrol với hàm lượng cao đồng thời xây dựng thành cơng quy trình chiết xuất hoạt chất quý sâm tố nữ Năm 2019 Viện Hoá học-Viện hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam với nguyên liệu sâm tố nữ tách chiết thành cơng isoflavone xây dựng quy trình chiết xuất với đề tài tách chiết isoflavone thân sắn dây củ trịn Và cịn nhiều cơng trình nghiên cứu diễn với thành cơng thực tiễn Vì có nhiều cơng dụng hiệu nên sâm tố nữ khai thác nhiều sử dụng bừa bãi kèm theo sản xuất thuốc giả chất lượng dẫn đến không đem lại tác dụng mà cịn gây tác hại khơng mong muốn.Vì vậy, cần kiểm sốt việc khai thác sử dụng hợp lý hiệu đem lại lợi ích sức khỏe cộng đồng phát triển kinh tế từ loài Sâm tố nữ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Kashemsanta M L et al (1952), “A new species of Pueraria (Leguminosae) from Thailand, yielding an oestrogenic principle”, Kew Bulletin, pp 549-552 [2] Lavier MIC C (2005), “Dietary phytoestrogens: potential selective estrogen enzyme modulators?”, Planta Med 71, pp 287-294 [3] Malaivijitnond S (2012), “Medical applications of phytoestrogens from the Thai herb Pueraria mirifica”, Frontiers of medicine (1), pp 8-21 [4] Cherdshewasart W et al (2007), "Major isoflavonoid contents of the phytoestrogen rich-herb Pueraria mirifica in comparison with Pueraria lobata", Journal of pharmaceutical and biomedical analysis 43 (2), pp 428434 [5] Yusakul G et al (2011), “Comparative analysis of the chemical constituents of two varieties of Pueraria candollei”, Fitoterapia 82 (2), pp 203-207 [6] Shimokawa S, Kumamoto T, (2013), “Quantitative analysis of miroestrol and kwakhurin for standardisation of Thai miracle herb „Kwao Keur‟ (Pueraria mirifica) and establishment of simple isolation procedure for highly estrogenic miroestrol and deoxymiroestrol” Nat Prod Res.; 27(45):371-8 [7] Bang, MH., Lee, DG., Baek, YS et al “A new miroestrol glycoside from the roots of Pueraria mirifica” Chem Nat Compd 49, 443–445 (2013) [8] Juengsanguanpornsuk W, et al “Simple preparation and analysis of a phytoestrogen-rich extract of Pueraria candollei var mirifica and its in vitro 47 estrogenic activity”, Journal of Herbal Medicine, Volume 29, 2021,100463, ISSN 2210-8033 [9] Yusakul G, et al “(+)-7-O-Methyl Iso Miroestrol, a new chromene phytoestrogen from the Pueraria candollei var mirifica root” Nat Prod Res 2021 Nov; 35(21):4110-4114 10 [10] Cherdshewasart W et al (2007), “Major isoflavonoid contents of the 1year-cultivated phytoestrogen-rich herb, Pueraria mirifica”, Bioscience, biotechnology, and biochemistry 71 (10), pp 2527-2533 11 [11] Cho J.-G et al (2014), “Flavonoids from Pueraria mirifica roots and quantitative analysis using HPLC”, Food Science and Biotechnology 23 (6), pp 1815-1820 12 [12] Sucontphunt A, et al Protection of HT22 neuronal cells against glutamate toxicity mediated by the antioxidant activity of Pueraria candollei var mirifica extracts J Nat Med (2011) 13 [13] Jeon GC, et al Antitumor activity of spinasterol isolated from Pueraria roots Exp Mol Med (2005) 14 [14] Lee YS, et al Requirement of metabolic activation for estrogenic activity of Pueraria mirifica J Vet Sci (2002) 15 [15] Chindewa R, et al Pueraria mirifica, phytoestrogen-induced change in synaptophysin expression via estrogen receptor in rat hippocampal neuron J Med Assoc Thai (2008) 16 [16] Lamlert Kittikul S, Chandeying V Efficacy and safety of Pueraria mirifica (Kwao Krua Khao) for the treatment of vasomotor symptoms in perimenopausal women: Phase II Study J Med Assoc Thai (2004) 17 [17] Chandeying V, Lamlert Kittikul S Challenges in the conduct of Thai herbal scientific study: efficacy and safety of phytoestrogen, pueraria 48 mirifica (Kwao Keur Kao), phase I, in the alleviation of climacteric symptoms in perimenopausal women J Med Assoc Thai (2007) 18 [18] Virojchaiwong P, Suvithayasiri V, Itharat A Comparison of Pueraria mirifica 25 and 50 mg for menopausal symptoms Arch Gynecol Obstet (2011) 19 [19] Chandeying V, Sangthawan M Efficacy comparison of Pueraria mirifica (PM) against conjugated equine estrogen (CEE) with/without medroxyprogesterone acetate (MPA) in the treatment of climacteric symptoms in perimenopausal women: phase III study J Med Assoc Thai (2007) 20 [20] Wattanapitayakul SK, Chularojmontri L, Srichirat S Effects of Pueraria mirifica on vascular function of ovariectomized rabbits J Med Assoc Thai (2005) 21 [21] Gangula PR, et al Protective cardiovascular and renal actions of vitamin D and estrogen Front Biosci (Schol Ed) (2013) 22 [22] Rosenfeld CR, et al Nitric oxide contributes to estrogen-induced vasodilation of the ovine uterine circulation J Clin Invest (1996) 23 [23] Okamura S, et al Pueraria mirifica phytoestrogens improve dyslipidemia in postmenopausal women probably by activating estrogen receptor subtypes Tohoku J Exp Med (2008) 24 [24] Manonai J, et al Effects and safety of Pueraria mirifica on lipid profiles and biochemical markers of bone turnover rates in healthy postmenopausal women Menopause (2008) 25 [25] Setchell KD, Lydeking-Olsen E Dietary phytoestrogens and their effect on bone: evidence from in vitro and in vivo, human observational, and dietary intervention studies Am J Clin Nutr (2003) 49 26 [26] Tiyasatkulkovit W, et al Pueraria mirifica extract and puerarin enhance proliferation and expression of alkaline phosphatase and type I collagen in primary baboon osteoblasts Phytomedicine (2014) 27 [27] Tiyasatkulkovit W, et al Upregulation of osteoblastic differentiation marker mRNA expression in osteoblast-like UMR106 cells by puerarin and phytoestrogens from Pueraria mirifica Phytomedicine (2012) 28 [28] Trisomboon H, et al Ovulation block by Pueraria mirifica: a study of its endocrinological effect in female monkeys Endocrine (2005) 29 [29] Malaivijitnond S, et al Different effects of Pueraria mirifica, a herb containing phytoestrogens, on LH and FSH secretion in gonadectomized female and male rats J Pharmacol Sci (2004) 30 [30] Cherdshewasart W, Sutjit W Correlation of antioxidant activity and major isoflavonoid contents of the phytoestrogen rich Pueraria mirifica and Pueraria lobata tubers Phytomedicine (2008) 31 [31] Chatuphonprasert W, et al Effects of Pueraria mirifica and miroestrol on the antioxidation-related enzymes in ovariectomized mice J Pharm Pharmacol (2013) 32 [32] Trisomboon H, et al Assessment of urinary gonadotropin and steroid hormone profiles of female cynomolgus monkeys after treatment with Pueraria mirifica J Reprod Dev (2007) 33 [33] Trisomboon H, et al Estrogenic effects of Pueraria mirifica on the menstrual cycle and hormone-related ovarian functions in cyclic female cynomolgus monkeys J Pharmacol Sci (2004) 34 [34] Udomsuk L, et al Down regulation of gene related sex hormone synthesis pathway in mouse testes by miroestrol and deoxymiroestrol Fitoterapia (2011) 50 35 [35] Cherdshewasart W, Panriansaen R, Picha P Pretreatment with phytoestrogen-rich plant decreases breast tumor incidence and exhibits lower profile of mammary ERalpha and ERbeta Maturitas (2007) 36 [36] Chivapat S et al, "Toxicity study of Pueraria mirifica Airy Shaw et Suvatabandhu", Bulletin of the Department of Medical Sciences 42 (3), pp.202-223 (2012) 37 [37] Jaroenporn S et al, "Effects of Pueraria mirifica, an herb containing phytoestrogens, on reproductive organs and fertility of adult male mice", Endocrine 30 (1), pp 93-101 (2006) 38 [38] FDA ThaiLan http://www.fda.moph.go.th/News59/Cosmetic/cosmeticmanual151058.pdf 39 [39] Investigators G f t W s H I, "Risk and benefits of estrogen plus progestin in healthy postmenopausal women: principal results from the Women's Health Initiative randomized controlled trial", JAMA 288 (3), pp.321-333 (2002) 51