Luận án tiến sĩ dược học nghiên cứu bào chế và bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên lornoxicam giải phóng có kiểm soát

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết luận án trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình Tác giả Đồng Thị Hồng Yến i LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Nguyễn Đăng Hòa TS Nguyễn Thạch Tùng ngƣời thầy nhiệt tình hƣớng dẫn hết lịng giúp đỡ tơi q trình thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn PGS TS Nguyễn Văn Long, GS TS Phạm Thị Minh Huệ, TS Nguyễn Trần Linh, PGS TS Vũ Thị Thu Giang gợi ý q báu giành cho tơi q trình nghiên cứu Tôi xin cảm ơn PGS TS Nguyễn Thị Thanh Duyên, DS Bùi Văn Thuấn toàn thể thầy cô giáo, kỹ thuật viên Bộ môn Bào chế Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội, Viện Công nghệ Dƣợc Phẩm Quốc Gia, Bộ môn Bào chế - Công nghiệp Dƣợc, Bộ mơn Hóa Dƣợc - Trƣờng Đại học Y Dƣợc - Đại học Thái Nguyên, Trung tâm đánh giá Tƣơng đƣơng sinh học Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ƣơng giúp đỡ tơi q trình học tập thực đề tài Tôi xin cảm ơn phối hợp giúp đỡ em sinh viên K69 q trình thực luận án Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Sau đại học - Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội quan tâm tạo điều kiện thuận lợi cho q trình học tập nghiên cứu Trƣờng Tơi xin cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Tổ chức- Trƣờng Đại học Y Dƣợc - Đại học Thái Nguyên ln động viên tạo điều kiện để tơi hồn thành luận án Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên, giúp đỡ để tơi hồn thành luận án Hà Nội, Ngày tháng… năm 2019 Tác giả Đồng Thị Hoàng Yến ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH xii ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 LORNOXICAM 1.1.1 Cơng thức hóa học .3 1.1.2 Tính chất 1.1.3 Dƣợc động học .4 1.1.4 Chỉ định chống định 1.1.5 Tác dụng không mong muốn 1.1.6 Một số chế phẩm lornoxicam thị trƣờng 1.1.7 Phƣơng pháp định lƣợng lornoxicam chế phẩm dịch sinh học 1.2 MỘT SỐ KỸ THUẬT VÀ CÔNG NGHỆ BÀO CHẾ ĐƢỢC ÁP DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN DẠNG THUỐC VỚI LORNOXICAM 10 1.2.1 Bào chế hệ phân tán rắn 11 1.2.2 Bào chế viên giải phóng nhanh 12 1.2.3 Bào chế viên giải phóng kéo dài 14 1.2.4 Bào chế viên giải phóng theo nhịp 16 1.2.5 Bào chế viên lƣu dày 18 1.2.6 Bào chế viên kiểm sốt giải phóng hệ đa đơn vị liều 20 1.2.7 Bào chế viên kiểm soát giải phóng hệ viên nén nhiều lớp 21 1.3 SINH KHẢ DỤNG 30 1.3.1 Đánh giá sinh khả dụng thuốc 30 1.3.2 Quy định đánh giá sinh khả dụng in vivo 33 iii 1.3.3 Một số nghiên cứu sinh khả dụng in vivo lornoxicam 34 CHƢƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 37 2.1.1 Nguyên liệu 37 2.1.2 Thiết bị dụng cụ 38 2.1.3 Đối tƣợng nghiên cứu 40 2.1.4 Động vật thí nghiệm 40 2.1.5 Địa điểm nghiên cứu 40 2.1.6 Nội dung nghiên cứu 40 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 41 2.2.1 Phƣơng pháp bào chế 41 2.2.2 Phƣơng pháp đánh giá 46 2.2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu độ ổn định viên 55 2.2.4 Phƣơng pháp đánh giá sinh khả dụng in vivo 56 2.2.5 Phƣơng pháp thiết kế thí nghiệm, tối ƣu hóa cơng thức xử lý số liệu 60 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 61 3.1 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG CÔNG THỨC 61 3.1.1 Nghiên cứu bào chế lớp bao giải phóng nhanh 61 3.1.2 Nghiên cứu xây dựng công thức viên nhân lornoxicam giải phóng kéo dài 72 3.1.3 Xây dựng cơng thức viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt 78 3.2 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH BÀO CHẾ VIÊN LORNOXICAM GIẢI PHĨNG CĨ KIỂM SỐT QUY MƠ 2000 VIÊN 87 3.2.1 Mơ tả quy trình bào chế viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt phƣơng pháp bao dập 88 3.2.2 Thẩm định quy trình sản xuất viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt 90 iv 3.3 THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG, XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ VÀ ĐỘ ỔN ĐỊNH VIÊN LORNOXICAM GIẢI PHĨNG CĨ KIỂM SỐT 104 3.3.1 Thẩm định phƣơng pháp định lƣợng 104 3.3.2 Nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn sở 113 3.3.3 Đánh giá độ ổn định 113 3.4 NGHIÊN CỨU SINH KHẢ DỤNG 116 3.4.1 Xây dựng phƣơng pháp phân tích 116 3.4.2 Kết thẩm định phƣơng pháp 120 3.4.3 Định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó 126 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 130 4.1 NGHIÊN CỨU CẢI THIỆN ĐỘ TAN CỦA LORNOXICAM 130 4.2 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN LORNOXICAM 12 MG GIẢI PHĨNG CĨ KIỂM SỐT 133 4.2.1 Nghiên cứu bào chế lớp bao giải phóng nhanh 133 4.2.2 Nghiên cứu bào chế viên nhân giải phóng kéo dài 135 4.2.3 Bào chế viên lornoxicam giải phóng có kiểm soát 136 4.2.4 Lựa chọn phƣơng pháp bào chế 138 4.3 QUY TRÌNH BÀO CHẾ 140 4.4 TIÊU CHUẨN CHẤT LƢỢNG VÀ ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH 144 4.4.1 Tiêu chuẩn chất lƣợng 144 4.4.2 Đánh giá độ ổn định 145 4.5 ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG 146 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 153 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƢỢC HỌC 155 TÀI LIỆU THAM KHẢO 156 v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AUC Diện tích dƣới đƣờng cong (Area under the curve) BCS Hệ thống phân loại Sinh dƣợc học bào chế (Biopharmaceutics Classification System) DC Dƣợc chất DĐH Dƣợc động học DĐVN Dƣợc điển Việt Nam ĐLC Độ lệch chuẩn FDA Cơ quan quản lý thực phẩm dƣợc phẩm (Food Drug Administration) GPKD Giải phóng kéo dài GPN Giải phóng nhanh HL Hàm lƣợng HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High performance liquid chromatography) HPTR Hệ phân tán rắn HQC Mẫu kiểm chứng khoảng nồng độ cao (High quality control) HSHQ Hệ số hồi quy HT Huyết tƣơng HPMC Hydroxypropylmethyl cellulose IS Chất chuẩn nội (Internal Standard) KL Khối lƣợng KLRBK Khối lƣợng riêng biểu kiến kl/kl Khối lƣợng/khối lƣợng kl/tt Khối lƣợng/thể tích KSGP Giải phóng có kiểm sốt LC - MS Sắc ký lỏng ghép nối khối phổ (Liquid chomatography - mass spectrometry) LLOQ Giới hạn định lƣợng dƣới (Lower limit of quantification) vi LQC Mẫu kiểm chứng khoảng nồng độ thấp (Low quality control) LNX Lornoxicam MS Khối phổ (Mass spectrometry) MELO Meloxicam MQC Mẫu kiểm chứng khoảng nồng độ trung bình (Medium quality control) MRT Mean residence time (Thời gian lƣu thuốc trung bình) Na CMC Natri carboxymethyl cellulose NSAID Thuốc chống viêm khơng steroid (Nonsteroidal anti- inflammatory drug) NTN Ngƣời tình nguyện PEG Polyethylen glycol PVP Polyvinyl pyrrolidon QC Kiểm nghiệm chất lƣợng (Quanlity control) RSD Độ lệch chuẩn tƣơng đối (Relative Standard Deviation) SD Độ lệch chuẩn (Standard deviation) SEM Kính hiển vi điện tử quét (Scanning electron microscope) SKD Sinh khả dụng STT Số thứ tự TB Trung bình TD Tá dƣợc TDSR Tá dƣợc siêu rã TEM Kính hiển vi điện tử truyền qua (Transmission electron microscope) Tmax Thời gian đạt nồng độ tối đa tt/tt Thể tích/thể tích UPLC Sắc ký lỏng siêu hiệu (Ultra performance liquid chromatography) USP Dƣợc điển Mỹ (United States Pharmacopoeia) vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Độ tan lornoxicam môi trƣờng pH khác nhiệt độ 25oC± 0,5oC Bảng 1.2 Một số chế phẩm chứa lornoxicam thị trƣờng Bảng 1.3 Một số phƣơng pháp định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng Bảng 2.1 Các nguyên liệu hóa chất sử dụng nghiên cứu 37 Bảng 2.2 Công thức lớp bao chứa mg lornoxicam 42 Bảng 3.1 Độ tan lornoxicam trƣớc giảm kích thƣớc tiểu phân môi trƣờng khác 25oC ± 0,5oC 61 Bảng 3.2 Độ tan lornoxicam sau giảm kích thƣớc tiểu phân môi trƣờng khác 25oC ± 0,5oC 63 Bảng 3.3 Công thức lớp giải phóng nhanh sử dụng tá dƣợc độn khác 65 Bảng 3.4 Cơng thức lớp giải phóng nhanh sử dụng tá dƣợc rã khác 67 Bảng 3.5 Cơng thức lớp giải phóng nhanh sử dụng tá dƣợc kiềm chất diện hoạt 69 Bảng 3.6 Thời gian rã viên lornoxicam giải phóng nhanh 71 Bảng 3.7 Cơng thức lớp bao giải phóng nhanh 72 Bảng 3.8 Công thức nghiên cứu ảnh hƣởng loại hydroxypropyl methylcellulose tới % lornoxicam giải phóng 73 Bảng 3.9 Cơng thức đánh giá ảnh hƣởng tỷ lệ Methocel K4M : Methocel E15LV tới % lornoxicam giải phóng 76 Bảng 3.10 Giá trị AIC R2adjusted theo mơ hình dƣợc động học 78 Bảng 3.11 Khoảng thiết kế biến đầu vào yêu cầu biến đầu 79 Bảng 3.12 Thiết kế thí nghiệm % giải phóng mẫu viên lornoxicam kiểm sốt giải phóng 80 viii Bảng 3.13 Hệ số hồi quy thể ảnh hƣởng biến đầu vào tới % lornoxicam giải phóng thời điểm giờ, giờ, 10 81 Bảng 3.14 Công thức tối ƣu thiết kế phần mềm MODDE 12.0 % lornoxicam giải phóng 85 Bảng 3.15 Tỷ lệ % lornoxicam giải phóng từ viên bào chế theo công thức tối ƣu (n = 5) 86 Bảng 3.16 Công thức cho lô 2000 viên 88 Bảng 3.17 Đánh giá nguy ảnh hƣởng đến độ ổn định quy trình bào chế 91 Bảng 3.18 Các thông số trọng yếu cần thẩm định 93 Bảng 3.19 Độ phân tán hàm lƣợng lornoxicam trộn bột kép 94 Bảng 3.20 Phân bố kích thƣớc hạt viên nhân giải phóng kéo dài quy mơ 2000 viên 95 Bảng 3.21 Một số đặc tính hạt với tốc độ trộn tá dƣợc trơn 50 vòng/phút 96 Bảng 3.22 Đặc tính viên thời điểm với tốc độ dập vịng/ phút 96 Bảng 3.23 Đặc tính viên thời điểm với tốc độ dập 10 vòng/ phút 97 Bảng 3.24 Đặc tính hạt viên nhân quy mô 2000 viên 97 Bảng 3.25 Đặc tính viên quy mơ 2000 viên 98 Bảng 3.26 Tỷ lệ % lornoxicam giải phóng từ viên nhân quy mơ 2000 viên (TB ± SD; n = 6) 98 Bảng 3.27 Đề xuất tiêu chuẩn viên nhân 99 Bảng 3.28 Phân bố kích thƣớc hạt lớp bao giải phóng nhanh quy mơ 2000 viên 100 Bảng 3.29 Một số đặc tính hạt lớp bao giải phóng nhanh với tốc độ trộn 50 vòng/phút (n= 3) .100 ix Bảng 3.30 Đặc tính viên thời điểm với tốc độ dập vịng/ phút 101 Bảng 3.31 Đặc tính viên thời điểm với tốc độ dập vòng/ phút 101 Bảng 3.32 Đặc tính hạt lớp bao quy mô 2000 viên .102 Bảng 3.33 Đặc tính viên quy mơ 2000 viên 102 Bảng 3.34 Tỷ lệ % lornoxicam giải phóng từ viên bao lơ quy mơ 2000 viên 103 Bảng 3.35 Độ hấp thụ dung dịch lornoxicam môi trƣờng acid hydrocloric 0,1N pH 1,2 đệm phosphat pH 6,8 (n = 3) .105 Bảng 3.36 Kết độ thích hợp hệ thống .105 Bảng 3.37 Ảnh hƣởng mẫu placebo đến kết định lƣợng 107 Bảng 3.38 Nồng độ mức đƣờng chuẩn 107 Bảng 3.39 Kết khảo sát độ tuyến tính .108 Bảng 3.40 Kết khảo sát độ 110 Bảng 3.41 Kết khảo sát độ xác .111 Bảng 3.42 Kết khảo sát độ xác .112 Bảng 3.43 Đề xuất tiêu chuẩn chất lƣợng viên lornoxicam 12 mg giải phóng có kiểm sốt 113 Bảng 3.44 Hàm lƣợng (%) lơ viên lornoxicam 12 mg giải phóng có kiểm sốt đƣợc bảo quản điều kiện thực sau 06 tháng .114 Bảng 3.45 Hàm lƣợng (%) lơ viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt đƣợc bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc sau 06 tháng 114 Bảng 3.46 % dƣợc chất giải phóng lơ viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt đƣợc bảo quản điều kiện thực sau 06 tháng 115 Bảng 3.47 % dƣợc chất giải phóng lơ viên lornoxicam giải phóng có kiểm sốt đƣợc bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc sau 06 tháng .116 Bảng 3.48 Các thông số detector khối phổ để định lƣợng LNX .117 Bảng 3.49 Các thông số detector khối phổ để định lƣợng LNX MELO 119 x PL 5.4 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 30 phút PL 5.5 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 60 phút PL 5.6 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 90 phút PL 5.7 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.8 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.9 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.10 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm PL 5.11 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 10 PL 5.12 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 12 PL 5.13 Sắc ký đồ định lƣợng lornoxicam huyết tƣơng chó uống viên lornoxicam 12 mg nghiên cứu thời điểm 24 PHỤ LỤC MỘT SỐ SẮC KÝ ĐỒ ĐỊNH LƢỢNG LORNOXICAM TRONG CHẾ PHẨM PL 6.1 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP lần PL 6.2 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP lần PL 6.3 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện thƣờng (lô 1) PL 6.4 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện thƣờng (lô 2) PL 6.5 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện thƣờng (lô 3) PL 6.6 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc (lơ 1) PL 6.7 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc (lơ 2) PL 6.8 Sắc ký đồ định lƣợng viên lornoxicam 12 mg KSGP sau tháng bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc (lơ 3) PHỤ LỤC PHIẾU KIỂM NGHIỆM NGUYÊN LIỆU LORNOXICAM