Luận án tiến sĩ nông nghiệp nghiên cứu tích hợp gen kháng bệnh bạc lá vào một số dòng giống lúa phục vụ chọn tạo giống

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM *** NGUYỄN THÚY ĐIỆP NGHIÊN CỨU TÍCH HỢP GEN KHÁNG BỆNH BẠC LÁ VÀO MỘT SỐ DÒNG/GIỐNG LÚA PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Hà Nội, 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM *** NGUYỄN THÚY ĐIỆP NGHIÊN CỨU TÍCH HỢP GEN KHÁNG BỆNH BẠC LÁ VÀO MỘT SỐ DÒNG/GIỐNG LÚA PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 9420201 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Khuất Hữu Trung TS Hoàng Hoa Long Hà Nội, 2019 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi dƣới hƣớng dẫn tận tình Thầy hƣớng dẫn giúp đỡ tập thể cán nghiên cứu thuộc Bộ môn Kỹ thuật Di truyền, Bộ môn Bệnh Học Phân tử - Viện Di truyền Nông nghiệp Toàn số liệu kết nghiên cứu luận án trung thực chƣa đƣợc sử dụng để cơng bố cơng trình nghiên cứu để nhận học vị Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm số liệu luận án Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận án Nguyễn Thúy Điệp ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đƣợc luận án này, nhận đƣợc hƣớng dẫn, quan tâm tận tình giúp đỡ thầy cô, bạn bè đồng nghiệp Trƣớc hết, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Khuất Hữu Trung TS Hoàng Hoa Long trực tiếp hƣớng dẫn, bảo, động viên tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán nghiên cứu thuộc Bộ môn Kỹ thuật Di truyền, Bộ môn Bệnh Học Phân tử - Viện Di truyền Nơng nghiệp nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện thời gian cho tơi hồn thành luận án Đồng thời, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến thầy cô thuộc Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, đồng nghiệp bạn bè quan tâm giúp đỡ, động viên tinh thần cho thời gian làm luận án Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Tác giả luận án Nguyễn Thúy Điệp iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH xi Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Những đóng góp đề tài CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan bệnh bạc lúa 1.1.1 Lịch sử phát bệnh 1.1.2 Vi khuẩn gây bệnh bạc lúa 1.1.3 Các chủng sinh lý giới Việt Nam 1.2 Tổng quan gen kháng chất gen kháng bệnh bạc 10 1.3 Chỉ thị phân tử vai trò thị phân tử chọn tạo giống trồng 18 1.3.1 Vai trò thị phân tử chọn tạo giống trồng 18 1.3.2 Các thị phân tử DNA dùng phổ biến lai tạo chọn giống 19 1.3.3 Phƣơng pháp chọn lọc nhờ hỗ trợ thị phân tử chọn tạo giống lúa (Marker Assisted Selection - MAS) 22 1.4 Tình hình nghiên cứu chọn tạo giống lúa kháng bệnh bạc 26 1.4.1 Sàng lọc nguồn gen kháng bệnh bạc 26 1.4.2 Tình hình nghiên cứu chọn tạo giống lúa kháng bệnh bạc giới 26 1.4.3 Tình hình nghiên cứu chọn tạo giống lúa kháng bệnh bạc Việt Nam 29 1.5 Tổng quan gen chất lƣợng thị liên kết với gen chất lƣợng 33 1.6 Khuynh hƣớng nghiên cứu quy tụ nhiều gen vào giống lúa 39 CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 41 iv 2.1 Vật liệu .41 2.1.1 Vật liệu nghiên cứu 41 2.1.2 Các loại hóa chất .43 2.1.3 Máy móc thiết bị sử dụng 44 2.2 Nội dung nghiên cứu 44 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 45 2.3.1 Phƣơng pháp xác định gen ứng viên liên quan kháng bệnh bạc 45 2.3.2 Phƣơng pháp thiết kế thị SSLP 46 2.3.4 Phƣơng pháp PCR 47 2.3.5 Phƣơng pháp đánh giá tính kháng/nhiễm bạc lây nhiễm nhân tạo .49 2.3.6.Thí nghiệm đồng ruộng 51 2.3.7 Phƣơng pháp xử lý số liệu .53 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 54 3.1 Xác định gen kháng bệnh bạc thiết kế mồi nhận diện gen ứng viên kháng bệnh bạc 54 3.1.1 Xác định thiết kế mồi nhận diện gen ứng viên kháng bệnh bạc có giống lúa địa Việt Nam 54 3.1.1.1 Xác định thiết kế mồi nhận diện gen ứng viên xa5 54 3.1.1.2 Xác định thiết kế mồi nhận diện gen ứng viên xa13 60 3.1.2 Xác định gen kháng bệnh bạc có nguồn vật liệu thu thập nhờ sử dụng thị liên kết 64 3.1.2.1 Kiểm tra gen ứng viên xa5 xa13 dòng/giống thu thập nhờ sử dụng cặp mồi thiết kế 64 3.1.2.2 Kiểm tra gen/gen ứng viên Xa4, Xa7 Xa21 dòng/giống bố mẹ 65 3.2 Đánh giá khả kháng/nhiễm bệnh bạc nguồn vật liệu 69 3.3 Tạo nguồn vật liệu mang đa gen/gen ứng viên kháng bệnh bạc 72 3.3.1 Xác định lai hệ BC1F1 mang đa gen/gen ứng viên kháng bệnh bạc 73 v 3.3.2 Xác định lai hệ BC2F1 mang đa gen/gen ứng viên kháng bệnh bạc 78 3.3.3 Xác định lai hệ BC3F1 mang đa gen/gen ứng viên kháng bệnh bạc 82 3.3.4 Xác định cá thể BC3F2 mang đa gen/gen ứng viên kháng bệnh bạc gen chất lƣợng (Waxy, BADH2) 86 3.4.1 Đánh giá số đặc điểm nơng sinh học khả kháng bệnh bạc (lây nhiễm nhân tạo) dòng BC3F3 mang gen ứng viên kháng bệnh bạc có di truyền giống An dân 11 99 3.4.2 Đánh giá số đặc điểm nơng sinh học khả kháng bệnh bạc (lây nhiễm nhân tạo) dòng BC3F3 mang gen ứng viên kháng bệnh bạc có di truyền giống DT39 104 3.4.3 Đánh giá số đặc điểm nơng sinh học khả kháng bệnh bạc (lây nhiễm nhân tạo) dòng BC3F3 mang gen ứng viên kháng bệnh bạc có di truyền giống Thủ Đô 111 3.4.4 Đánh giá số đặc điểm nông sinh học khả kháng bệnh bạc (lây nhiễm nhân tạo) dòng BC3F3 mang gen kháng bệnh bạc có di truyền giống Bắc thơm số 115 3.4.5 Chọn tạo dòng/giống lúa triển vọng 120 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 128 Kết luận 128 Đề nghị 128 CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 130 TÀI LIỆU THAM KHẢO 131 PHỤ LỤC MÔI TRƢỜNG NUÔI CẤY VÀ BẢO QUẢN VI KHUẨN 149 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH KIỂM TRA GEN/GEN ỨNG VIÊN KHÁNG BỆNH BẠC LÁ 150 PHỤ LỤC KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU IRRISTAT 164 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt AC Giải thích thuật ngữ tiếng Anh Amylose Content Hàm lƣợng amylose AFLP Amplified Fragment Length Sự đa hình đoạn khuếch đại BADH2 Polymorphism Betaine aldehyde dehydrogenase BC Backcross Lai trở lại hay lai hồi giao CAPs Cleaved Amplified Trình tự đa hình khuếch đại bị cắt CTAB Polymorphic sequence Cetyltrimethyl Amonium Bromide - Cộng Cơ sở liệu Đoạn dẫn xuất trình tự đa hình khuếch đại bị cắt Cs CSDL dCAPs DNA - Derived Cleaved Amplified Polymorphic sequence Deoxyribo Nucleic Acid Giải thích thuật ngữ tiếng Việt - - Axit đêơxiribơnuclêic ddNTPs Dideoxynucleotit Triphosphate 2',3'dideoxynucleotide (ddGTP, ddATP, ddTTP ddCTP) EDTA - MABC Ethylenediaminetetra Acetic Acid Ethidium bromide Insertions or Deletions International Rice Research Institute Marker-assisted MAS backcrossing Marker-assisted selection tử Chọn giống nhờ thị phân tử Trung tâm thông tin Công nghệ Sinh học quốc gia EtBr InDels IRRI NCBI National Center for Biotechnology Information - Đoạn thêm/bớt Viện nghiên cứu lúa quốc tế Lai hồi giao nhờ thị phân vii NILs NST Near-isogenic lines - Dòng cận đẳng gen Nhiễm sắc thể PCR PSA Polymerase chain reaction Potato semi-synthetic agar medium Phản ứng chuỗi polymerase Môi trƣờng nƣớc chiết khoai tây SDS SNPs Sodium Dodecyl Sulfate Single nucleotit polymorphisms - SSLP Single Sequence Length Polymorphism Kỹ thuật đa hình độ dài chuỗi đơn giản SSR Simple sequence repeat Chỉ thị phân tử vi vệ tinh STMS Sequence tagged hay thị “microsatellite” Vị trí vi vệ tinh đƣợc đánh STS microsatellite site Sequence Tagged Site dấu trình tự Vị trí đƣợc đánh dấu trình tự TAE TE Tris-Acetic acid-EDTA Tris-EDTA - RFLP Restriction Fragment Length Polymorphisms Xanthomonas oryzae pv Oryzae Đa hình chiều dài đoạn phân cắt giới hạn Xoo Chỉ thị nucleotit đơn - - viii DANH MỤC BẢNG TT Tên bảng bảng 1.1 Tổng hợp gen kháng đƣợc xác định giống lúa 1.2 Các giống lúa mang gen kháng bệnh bạc đƣợc chọn tạo nhờ 2.1 2.2 2.3 2.4 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 hỗ trợ thị phân tử (MAS) thƣơng mại hóa Châu Á Danh sách 36 giống lúa địa giải trình tự hệ gen Nguồn gốc số dòng/giống lúa ƣu tú sử dụng nghiên cứu Danh sách trình tự mồi sử dụng nghiên cứu Thang điểm đánh giá cấp bệnh bạc theo phƣơng pháp IRRI, 2014 Thống kê số lƣợng tỉ lệ nucleotit vùng CDS (Coding DNA Sequence) gen ứng viên xa5 số giống lúa có trình tự tƣơng đồng với gen tham chiếu xa5 công bố Thống kê số lƣợng tỉ lệ (%) axit amin vùng CDS gen ứng viên xa5 số giống lúa có trình tự tƣơng đồng với gen tham chiếu xa5 công bố Thống kê số lƣợng nucleotit vùng CDS (Coding DNA Sequence) gen ứng viên xa13 số giống lúa có trình tự tƣơng đồng với gen tham chiếu xa13 công bố Thống kê số lƣợng tỉ lệ (%) axit amin vùng CDS gen ứng viên xa13 số giống lúa có trình tự tƣơng đồng với gen tham chiếu xa13 công bố Bảng tổng hợp dòng/giống mang gen ứng viên kháng bệnh bạc Đánh giá khả kháng/nhiễm dòng/giống lúa nghiên cứu lây nhiễm nhân tạo (vụ Xuân 2014- Thạch Thất, Hà Nội) Danh sách tổ hợp lai thiết kế Thống kê kết xác định gen/gen ứng viên kháng bệnh bạc chọn lọc cá thể BC1F1, tạo BC2F1 (vụ Xuân 2015- Tây Tựu, Hà Nội) Thống kê kết xác định gen/gen ứng viên kháng bệnh bạc Trang 14 28 41 42 43 50 54 56 61 62 68 71 72 77 81 152 Ảnh điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên xa5, Xa7, xa13 cá thể BC1F1 tổ hợp lai An Dân 11*2/Hom râu B7.15-B7.24: Con lai BC1F1; B/U30: giống Hom râu, M/M45: giống An dân 11, (-): giống IR24 (đối chứng âm),(+): giống IRBB5, IRBB7 IRBB13 (đối chứng dương); O'RangeRuler 20bp DNA Ladder 100bp DNA Ladder 153 Ảnh điện di sản phẩm PCR xác định gen Xa4, Xa7, Xa21 cá thể BC1F1 tổ hợp lai Thủ Đô 1*2/IRBB62 T4.1-T4.24: cá thể BC1F1; M20: O'RangeRuler 20bp DNA Ladder, M100: 100bp DNA Ladder ; B: giống IRBB62; M: giống Thủ Đô 1; (-): giống IR24 (đối chứng âm) 154 Ảnh điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên Xa4, xa5 cá thể BC2F1 tổ hợp lai Thủ đô 1*3/Chấn thơm R5.1-R5.44: cá thể BC2F1; M20: O'RangeRuler 20bp DNA Ladder, B: giống Chấn thơm, M: giống Thủ đô 1; (-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB5, IRBB4 (đối chứng dương) Ảnh điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên Xa4+Xa7 cá thể BC2F1 tổ hợp lai DT39*3/Chấn thơm B1.25-B1.38: cá thể BC2F1; M20: O'RangeRuler 20bp DNA Ladder; B: giống Chấn thơm, M: giống DT39; (-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB4, IRBB7 (đối chứng dương) 155 Ảnh điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên xa5, Xa7, xa13 cá thể BC2F1 tổ hợp lai An Dân 11*3/Hom râu B7.1-B7.45: cá thể BC2F1; M20: O'RangeRuler 20bp DNA Ladde; B: giống Hom râu, M: giống An dân 11, (-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB5, IRBB7, IRBB13 (đối chứng dương) 156 Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen Xa4, Xa7, Xa21 cá thể BC2F1 tổ hợp lai Bắc thơm số 7*3/IRBB62 B6.1-B6.24: cá thể BC2F1; M20: O'RangeRuler 20bp DNA Ladder; M100: 100bp DNA Ladder; B: giống IRBB62; M: giống Bắc thơm số 7; (-): giống IR24 (đối chứng âm) 157 Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen/ gen ứng viên Xa4, xa5 cá thể BC3F1 tổ hợp lai Thủ đô 1*4/Chấn thơm R5.1-R1.24: cá thể BC3F1; M20: marker 50 bp, B: giống Chấn thơm, M: giống Thủ đô 1, (-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB5 (đối chứng dương xa5) giống IRBB4 (đối chứng dương Xa4) Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên Xa4+xa5 cá thể BC3F1 tổ hợp lai DT39*4/Chấn thơm B1.1-B1.24: cá thể BC3F1; M20: marker 20 bp, B: giống Chấn thơm, M: giống DT39, (-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB5 (đối chứng dương xa5) giống IRBB4 (đối chứng dương Xa4) 158 Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên Xa4+Xa7 cá thể BC3F1 tổ hợp lai DT39*4/Chấn thơm B1.25-B1.38: Các lai BC3F1; M20: marker 20 bp, B: giống Chấn thơm, M: giống DT39, (-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB4 (đối chứng dương Xa4) giống IRBB7 (đối chứng dương Xa7) 159 97300 bpbp 179 bp 179 bp Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen Xa4, Xa7, Xa21 cá thể BC3F1 tổ hợp lai Thủ Đô 1*4/IRBB62 T4.1-T4.24: cá thể BC3F1; M20: O'RangeRuler 20bp DNA Ladder, M100: 100bp DNA Ladder ; B: giống IRBB62; M: giống Thủ Đô 1; (-): giống IR24 (đối chứng âm) 160 Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen Xa4, Xa7, Xa21 cá thể BC3F1 tổ hợp lai Bắc thơm số 7*4/IRBB62 B6.1-B6.24: cá thể BC3F1; M20: O'RangeRuler 20bp DNA Ladder; M100: 100bp DNA Ladder ; B: giống IRBB62; M: giống Bắc thơm số 7; (-): giống IR24 (đối chứng âm 161 Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên Xa4+xa5 cá thể BC3F2 tổ hợp lai DT39/Chấn thơm B1.1-B1.22, B1.63-B1.82: cá thể BC3F2; M20: marker 20 bp, B: giống Chấn thơm, M: giống DT39, (-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB5 (đối chứng dương xa5) giống IRBB4 (đối chứng dương Xa4) 162 Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên Xa4+Xa7 cá thể BC3F2 tổ hợp lai DT39/Chấn thơm B1.1-B1.22, B1.63-B1.82: cá thể BC3F2; M20: marker 20 bp, B: giống Chấn thơm, M: giống DT39,(-): giống IR24 (đối chứng âm), (+): giống IRBB4 (đối chứng dương Xa4) giống IRBB7 (đối chứng dương Xa7) 163 Kết điện di sản phẩm PCR xác định gen ứng viên xa5, Xa7, xa13 cá thể BC3F2 tổ hợp lai An Dân 11/Hom râu B7.1-B7.50: cá thể BC3F2; M20: marker 50 bp, B: giống Hom râu, M: giống An dân 11, (-): giống IR24 (đối chứng âm),(+): giống IRBB5, IRBB7, IRBB13 (đối chứng dương) 164 PHỤ LỤC KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU IRRISTAT Dòng AD2 EANS FOR EFFECT CT$ CT$ An dân 11 AD2/1 AD2/2 AD2/3 SE(N= 5%LSD NOS 3 3 3) 6DF CT$ An dân 11 AD2/1 AD2/2 AD2/3 NOS 3 3 TSH 240.933 168.000 169.400 196.000 TLHC 88.0967 88.2000 87.5000 91.2000 NSLT 84.9633 63.3293 74.5319 73.1567 NSTT 66.0967 41.7960 52.4880 50.5440 5.01364 17.3430 0.965403 3.33948 2.22416 7.69372 2.88379 9.97547 SOBONGHH 6.46667 6.66667 7.60000 6.60000 SE(N= 3) 0.269430 5%LSD 6DF 0.932002 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE AD2 16/ 6/18 9:50 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TSH TLHC NSLT NSTT SOBONGHH GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 193.58 12 88.749 12 73.995 12 52.731 12 6.8333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 32.264 8.6839 4.5 0.0003 2.0249 1.6721 1.9 0.1191 8.9372 3.8524 5.2 0.0036 9.8266 4.9949 9.5 0.0066 0.58361 0.46667 6.8 0.0814 |NL | | | 0.0954 0.5745 0.1348 0.9361 0.9410 | | | | Dòng DT39 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS TSH TLHC NSLT NSTT DT39 160.200 82.6000 88.2233 61.2360 DT39/1 170.000 73.5333 70.4900 54.4320 DT39/2 150.800 71.8000 65.0867 47.6280 DT39/3 175.600 83.9333 99.0267 63.1800 DT39/4 200.000 91.2000 87.1533 61.2360 DT39/5 226.200 92.4667 88.8500 57.3480 DT39/6 179.000 90.2000 94.9567 59.2920 SE(N= 5%LSD 3) 12DF CT$ DT39 DT39/1 DT39/2 DT39/3 DT39/4 DT39/5 DT39/6 SE(N= 3) 5%LSD 12DF 4.35879 13.4309 NOS 3 3 3 SOBONGHH 8.60000 8.20000 8.66667 8.53333 7.46667 7.73333 9.20000 0.226312 0.697343 1.10679 3.41038 2.14796 6.61859 2.52310 7.77454 165 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DT39 16/06/18 9:57 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TSH TLHC NSLT NSTT SOBONGHH GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 180.26 21 83.676 21 84.827 21 57.765 21 8.3429 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 26.244 7.5496 4.2 0.0000 8.1086 1.9170 2.3 0.0000 12.858 3.7204 4.4 0.0000 6.4150 4.3701 7.6 0.0137 0.65465 0.39198 4.7 0.0026 |NL | | | 0.0014 0.4604 0.0013 0.1509 0.2898 | | | | Dòng BT6 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ BT BT6-1 BT6-2 BT6-3 SE(N= 5%LSD NOS 3 3 3) 6DF CT$ BT BT6-1 BT6-2 BT6-3 NOS 3 3 TSH 147.267 165.470 158.677 155.602 TLHC 95.1400 92.0615 85.0343 89.3435 NSLT 71.3725 65.1340 64.0063 63.9276 NSTT 57.0233 58.9680 56.3760 57.6720 4.00067 13.8390 1.07499 3.71855 0.923282 3.19378 1.23032 4.25586 SOBONGHH 7.60000 7.20000 7.40000 7.00000 SE(N= 3) 0.176383 5%LSD 6DF 0.610138 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DONG BT6 16/06/18 10:00 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TSH TLHC NSLT NSTT SOBONGHH GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 156.75 12 90.395 12 66.110 12 57.510 12 7.3000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.0044 6.9294 4.4 0.0870 4.2226 1.8619 2.1 0.0035 3.8071 1.5992 2.4 0.0042 2.3010 2.1310 3.7 0.5349 0.39543 0.30551 4.2 0.1958 |NL | | | 0.4416 0.3107 0.0376 0.1917 0.1245 | | | | 166 Dòng TĐ4 TĐ13 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ Th? dô (Ð/ TÐ4-1 TÐ4-2 TÐ4-3 TÐ13/1 SE(N= 5%LSD NOS 3 3 3) 8DF CT$ Th? dô (Ð/ TÐ4-1 TÐ4-2 TÐ4-3 TÐ13/1 NOS 3 3 TSH 241.800 181.347 163.397 189.777 254.467 TLHC 82.7667 86.2800 87.6733 81.4200 93.1000 NSLT 83.6167 63.5700 56.7733 64.9633 72.8433 NSTT 58.9667 54.4333 50.2200 56.3767 51.5167 8.07365 26.3274 1.33907 4.36656 1.54300 5.03158 1.53243 4.99709 SBHH 6.46667 7.00000 6.60000 6.66667 5.00000 SE(N= 3) 0.302214 5%LSD 8DF 0.985490 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DONG TD4 16/06/18 10:05 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TSH TLHC NSLT NSTT SBHH GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 206.16 15 86.248 15 68.353 15 54.303 15 6.3467 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 38.490 13.984 6.8 0.0002 4.6378 2.3193 2.7 0.0023 9.8032 2.6726 3.9 0.0000 4.0221 2.6542 4.9 0.0216 0.82277 0.52345 8.2 0.0122 |NL | | | 0.5865 0.6554 0.2517 0.3198 0.9623 | | | |