Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN PHI BẰNG MSHV P1014001 NGHIÊN CỨU DỊCH TỄ HỌC CỦA BỆNH SÁN DÂY TRÊN CHÓ TẠI MỘT SỐ TỈNH Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN ÁN TI[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN PHI BẰNG MSHV: P1014001 NGHIÊN CỨU DỊCH TỄ HỌC CỦA BỆNH SÁN DÂY TRÊN CHÓ TẠI MỘT SỐ TỈNH Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH: BỆNH LÝ HỌC VÀ CHỮA BỆNH VẬT NUÔI MÃ NGÀNH: 62 64 01 02 CẦN THƠ, 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN PHI BẰNG NGHIÊN CỨU DỊCH TỄ HỌC CỦA BỆNH SÁN DÂY TRÊN CHÓ TẠI MỘT SỐ TỈNH Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH: BỆNH LÝ HỌC VÀ CHỮA BỆNH VẬT NUÔI MÃ NGÀNH: 62 64 01 02 CÁN BỘ HƢỚNG DẪN PGS.TS NGUYỄN HỮU HƢNG CẦN THƠ, 2020 LỜI CẢM TẠ Trong suốt trình thực luận án, tơi nhận đƣợc nhiều giúp đỡ, động viên gia đình, thầy cô, bạn bè bạn sinh viên, số quan tổ chức hoàn thành luận án Xin gửi lòng tri ân đến ba mẹ - đấng sinh thành - anh chị em gia đình thân u ln nguồn động lực thúc đẩy nỗ lực phấn đấu Cảm ơn vợ tạo điều kiện cho tơi có thời gian học tập thật tốt Tất ngƣời thân yêu dành cho tơi tất tình u, khuyến khích ủng hộ tơi chặng đƣờng học tập hoàn thành luận án tiến sĩ Xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy PGS.TS Nguyễn Hữu Hƣng tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ tơi suốt trình học tập, thực đề tài hoàn thành luận án Đặc biệt, thầy ngƣời truyền cho tơi lịng nhiệt huyết niềm đam mê khoa học, khơi dậy tự tin, nỗ lực, cố gắng không ngừng không chùn bƣớc trƣớc khó khăn suốt thời gian thực luận án tiến sĩ Tôi quên ủng hộ hƣớng dẫn tận tình Nguyễn Hồ Bảo Trân, Bộ môn Thú y, Khoa Nông nghiệp, Đại học Cần Thơ, suốt thời gian thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô dành nhiều thời gian, công sức giúp có định hƣớng đắn học tập nghiên cứu Tơi ln ln ghi nhớ cơng ơn tình cảm PGS.TS Trần Đình Từ, PGS TS Võ Lâm ngƣời thầy dõi theo nâng đỡ suốt thời thực hoàn thành luận án Xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám Hiệu Trƣờng Đại học Cần Thơ, Khoa Nông Nghiệp, Khoa Sau Đại học, Ban lãnh đạo Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học quan tâm giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho hồn thành tiến trình học tập nghiên cứu Xin ghi nhớ công ơn quý Thầy, Cô Khoa Nông nghiệp hết lòng truyền đạt kinh nghiệm kiến thức quý báu cho suốt thời gian học Xin cảm ơn chia nghiên cứu đến bạn, em sinh viên Bộ môn Thú Y, khoa Nơng nghiệp; phịng thí nghiệm Sinh học phân tử Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, Đại học Cần Thơ Các anh, chị, bạn nghiên cứu sinh, học viên cao học em sinh viên Đại học đồng hành suốt trình học tập, nghiên cứu; chia sẻ khó khăn, khuyến khích động viên tơi suốt thời gian qua Các cán Chi cục Chăn nuôi Thú y tỉnh, trạm Chăn nuôi Thú y huyện, ban lãnh đạo cán kỹ thuật trại, hộ chăn nuôi tỉnh An Giang, Bến i Tre, Đồng Tháp, Sóc Trăng, Kiên Giang thành phố Cần Thơ tạo điều kiện giúp đỡ việc thu thập mẫu Xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu trƣờng Đại học An Giang, Ban Chủ nhiệm Khoa Nông nghiệp – Tài nguyên Thiên nhiên, trƣờng Đại học An Giang tạo điều kiện để đƣợc tham gia học tập nâng cao trình độ chun mơn, bạn đồng nghiệp không ngừng động viên giúp đỡ suốt thời gian học tập Cuối xin kính chúc tất ngƣời thật nhiều sức khỏe, hạnh phúc thành công! Nguyễn Phi Bằng ii TÓM LƢỢC Đề tài đƣợc thực nhằm nghiên cứu dịch tễ học bệnh sán dây chó số tỉnh Đồng sông Cửu Long (ĐBSCL) biện pháp phòng trị Qua phƣơng pháp kiểm tra phân mổ khám tìm diện sán dây chó tỉnh ĐBSCL (Cần Thơ, An Giang, Đồng Tháp, Kiên Giang, Sóc Trăng, Bến Tre) từ 2014 đến 2018 cho thấy, chó nhiễm sán dây với tỷ lệ nhiễm chung 22,51% (đối với phƣơng pháp kiểm tra phân) 25,86% (đối với phƣơng pháp mổ khám), với lồi sán dây đƣợc tìm thấy thuộc Cyclophyllidea Pseudophyllidea Dipylidium caninum, Taenia pisiformis, Taenia hydatigena, Spirometra mansoni, Diphyllobothrium latum, lồi Dipylidium caninum có tỷ lệ nhiễm cƣờng độ nhiễm cao chó vùng khảo sát Trong đó, chó có tỷ lệ nhiễm sán dây tăng dần theo lứa tuổi, thấp 1-12 tháng tuổi (12,10%), lứa tuổi 13-24 tháng (20,64%) cao >24 tháng (31,28%) Giống chó nội lai có tỷ lệ nhiễm (25,40%) cao giống ngoại (16,06%) Ngoài ra, chó ni ĐBSCL có tỷ lệ nhiễm sán dây chịu ảnh hƣởng tác động yếu tố nhƣ: vùng sinh thái, mùa năm, phƣơng thức nuôi, phƣơng thức vệ sinh gia súc, vệ sinh thú y, phƣơng thức cho ăn, kiểu lơng, thể trạng chó Cƣờng độ nhiễm trung bình cao lồi Dipylidium caninum (11,99±5,47 sán dây/chó), Spirometra mansoni (7,21±3,36 sán dây/chó), Taenia pisiformis (3,06±1,36 sán dây/chó), Taenia hydatigena (3,38±1,23 sán dây/chó) thấp Diphyllobothrium latum (2,23±1,37 sán dây/chó) Phân tích lồi Dipylidium caninum qua đặc điểm hình thái kỹ thuật sinh học phân tử qua khuếch đại vùng gene ITS gene 28S Nghiên cứu đối chiếu trình tự nucleotide đoạn gene ITS thu đƣợc từ mẫu đoạn gene Ngân hàng gene với 99% tƣơng đồng kiểu gene sán dây nghiên cứu so với mẫu sán đƣợc đăng ký ngân hàng gene Tỷ lệ tƣơng đồng mẫu sán dây Dipylidium caninum khu vực ĐBSCL dao động từ 99,3% đến 100% Kết nghiên cứu xác định đƣợc vòng đời sán dây Dipylidium caninum trải qua giai đoạn bên ký chủ trung gian Ctenocephalides bên ký chủ (chó) Chu trình phát triển ký chủ trung gian Ctenocephalides trải qua giai đoạn trứng, larva 1, larva 2, larva 3, kén, bọ chét trƣởng thành Cùng với thời gian biến đổi hình thái ấu trùng sán dây Dipylidium caninum từ oncosphere thành cysticercoid bên ký chủ trung gian Ctenocephalides tƣơng đƣơng với thời gian hồn thành vịng đời Ctenocephalides trung bình 20,9 ngày thời iii gian phát triển từ cysticercoid thành sán trƣởng thành bên ký chủ trung bình 29,5 ngày Nghiên cứu bệnh lý chó nhiễm sán dây thể triệu chứng lâm sàng phổ biến ngứa cắn hậu mơn, đồng thời chó bệnh sán dây thƣờng xuất bệnh tích phổ biến xuất huyết cục vị trí bám đầu sán Bệnh tích vi thể hệ tiêu hóa chó nhiễm sán dây Dipylidium caninum thể tổn thƣơng niêm mạc ruột, ruột hạch bạch huyết ruột với dấu hiệu điển hình nhƣ đầu cầu lơng nhung bong tróc, nhiều bạch cầu diện niêm mạc ruột áo cơ, viêm áo ruột, viêm sợi huyết bề mặt niêm mạc, tăng sinh hạch bạch huyết Chó nhiễm sán thƣờng có lƣợng bạch cầu tăng (13,83±1,63x103/mm3), hematocrit (6,62±0,65 g/dL) hồng cầu (4,12±0,27x106/mm3) giảm so với chó khơng nhiễm sán dây Thuốc praziquantel niclosamide có hiệu điều trị cao điều trị bệnh sán dây chó với tỷ lệ sán 100% liều 10 mg/kg thể trọng praziquantel 150 mg/kg thể trọng niclosamide Thuốc ivermectine có tác dụng 100% số chó bọ chét hai phƣơng thức cấp thuốc, nhỏ đƣờng sống lƣng tiêm bắp liều mg/3 kg thể trọng với lần cấp thuốc, ngày lặp lại sau ngày Từ khóa: Chó, sán dây, D caninum, tỷ lệ nhiễm, ĐBSCL iv ABSTRACT The project was conducted to study the epidemiology of tapeworms in dogs in several provinces at Mekong Delta and prevention measures The aim of thesis are as followed: -Identifying the species, distribution, biological characteristics and influential factors to the tapeworm infection rate in dog the Mekong Delta Suggesting the treatment methods for infected dog in Mekong Delta The results show that dogs in provinces of the Mekong Delta were tapeworm infection with the overall rate of 22.51% (for fecal examination) and 25.86% (for necropsy method), There are species of tapeworm have been found which belong to orders Cyclophyllidea and Pseudophylidea consisting of: Dipylidium caninum, Taenia pisiformis, Taenia hydatigena, Spirometra mansoni, Diphyllobothrium latum Among the species, Dipylidium caninum was found to have the highest infection rate and intensity in canines in the surveyed area In particular, canines have the rate of tapeworm infection increasing with age, the lowest is 1-12 months of age (12.10%), followed by the age group of 13-24 months (20.64%) and the highest is over 24 months (31.28%) Domestic and cross canine breeds have higher infection rate (25.40%) than foreign canine breeds (16.06%) In addition, canine raised in the Mekong Delta have a rate of tapeworm infection affected by factors such as: ecological zone, season of the year, breeding methods, pet caring methods, veterinary hygiene, feeding methods, hair characteristic, canine fitness The tapeworm necropsy method had similar infection rate with the stool test (25.86%) with the highest average intensity of infection was Dipylidium caninum (11.99 ± 5.47 tapeworm/dog), respectively Which are Spirometra mansoni (7.21 ± 3,36 tapeworm/dog), Taenia pisiformis (3.06 ± 1.36 tapeworm/dog), Taenia hydatigena (3.38 ± 1.23 tapeworm/dog) and the lowest is Diphyllobothrium latum (2.23 ± 1.37 tapeworm/dog) Analysis of Dipylidium caninum identification by morphological characteristics and molecular biology techniques through amplification of ITS and 28S gene regions The study collated the sequence of nucleotides of the ITS gene segment from the same gene segment in the GenBank with 99% of the tapeworm genotypes in the study compared with the tapeworm samples registered in the GeneBank The similarity rate of the samples of Dipylidium caninum in the Mekong Delta region ranged from 99.3% to 100% The results of the study determined that the life cycle of the tapeworm Dipylidium caninum has stages inside the intermediate host (Ctenocephalides) and inside the final host (dog) Ctenocephalides canis life cycle through stages of egg, 1st stage larva, 2nd stage larva, 3rd stage larva, cocoons, adult fleas The morphological transformation time of the tapeworm larvae Dipylidium caninum from oncosphere to cysticercoid inside v Ctenocephalides was equivalent to the average completion time of Ctenocephalides life cycle of 20.9 days and development time from cysticercoid to adult tapeworm in final host had an average of 29.5 days Pathological research in canine infected D caninum with tapeworms shows common clinical symptoms such as itchy anus, diarrhea The canine with D caninum tapeworm diseases often appears to have the most common gross lesions in small intestine which are localized hemorrhage at the site of the hook of the tapeworm, inflammatory bowel Microscopic lesions in the digestive system of canines infected with Dipylidium caninum tapeworm that showed lesions in the mucosal surface of the small intestine, intestinal muscle and mesenteric lymphadenitis These typical injuries were peeling off villi of intestinal myositis, precence of many leukocytes in the submucosal of small intestine, fibrinotis on mucosal surfaces, enlarged lymph nodes Regarding changes in canine complete blood counts, infected canines often had increased white blood cell counts (13.83±1.63 103/mm3), while hematocrit (6.62 ± 0.65 g/dL) and erythrocytes (4.12±0.27 106/mm3) was reduced compared to canines without tapeworm Praziquantel and niclosamide have a very high therapeutic effect in treating tapeworm infection in canines with a rate of 100% of canines cured at a dose of 10 mg/kg body weigh for praziquantel and 150 mg/kg body weigh for niclosamide The ivermectine is 100% effective against all flea bites in both drug delivery, transdermal, and intramuscular injections at a dose of mg/3kgP with two injection of the first day and repeated after days Keywords: Canines, tapeworms, rate of infection, Mekong Delta vi CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu nghiên cứu sinh Nguyễn Phi Bằng với hƣớng dẫn PGS.TS Nguyễn Hữu Hƣng Các số liệu kết trình bày luận án trung thực chƣa đƣợc công bố tác giả khác cơng trình trƣớc Ngƣời hƣớng dẫn khoa học Tác giả luận án PGS.TS NGUYỄN HỮU HƢNG NGUYỄN PHI BẰNG vii MỤC LỤC LỜI CẢM TẠ i TÓM LƢỢC i ABSTRACT v LỜI CAM ĐOAN vii MỤC LỤC viii DANH MỤC BẢNG xi DANH MỤC HÌNH xiii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xv CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Ý nghĩa khoa học 1.4 Ý nghĩa thực tiễn 1.5 Những đóng góp luận án CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sán dây bệnh sán dây 2.1.1 Phân loại sinh học sán dây 2.1.2 Đặc điểm hình thái sán dây 2.1.3 Đặc điểm sinh học sán dây 2.1.4 Bệnh sán dây chó 2.2 Sán dây chó 10 2.2.1 Phân loại sinh học loài sán dây ký sinh chó 10 2.2.2 Đặc điểm hình thái số lồi sán dây ký sinh chó 11 2.3 Đặc điểm ký chủ trung gian sán dây Dipylidium caninum 25 2.3.1 Đặc điểm phân loại hình thái Ctenocephalides 25 2.3.2 Vòng đời Ctenocephalides 28 2.4 Các phƣơng pháp chẩn đoán sán dây chó 28 2.4.1 Chẩn đốn sán dây cịn sống 28 2.4.2 Phƣơng pháp chẩn đoán vật chết 31 2.5 Các phƣơng pháp xác định loài sán dây 32 2.5.1 Phƣơng pháp xác định loài sán dây đặc điểm hình thái học 32 2.5.2 Phƣơng pháp xác định loài sán dây sinh học phân tử 32 2.6 Thuốc tẩy trừ sán dây ký chủ trung gian phổ biến chó 37 2.6.1 Praziquantel 37 2.6.2 Niclosamide 39 2.6.3 Ivermectine 41 2.7 Tình hình nghiên cứu bệnh sán dây ký sinh chó giới nƣớc 42 viii 301 tgcatgagca tacawgttga gacccgaaag atggtgaact atgcttgcgt aggttgaagc 361 cagaggaaac tctggtggag gaccgtagcg attctgacgt gcaaatcgat cgtcaaacgt 421 gagtataggg gcgaaagact aatcgaacca tctagtagct ggttccctcc gaagtttccc 481 tcaggatagc tggcattcat tggcataatc agttttatcc ggtaaagcga atgattagag 541 gtgctgggtt cgaaacgagc tcaacctatt ctcaaacttt aaatgggtga gaggctcgac 601 tcgccccgct atgctctggc ccgcgtggtc aggcctacag gagtcgggcg ttgaatgtgc 661 gaatgccaag tgggccattt ttggtaagca gaactggcgc tgtgggatga accaaacgcc 721 cggttaaggt gcctaacact gacgctcatg agacaccaca aaaggtgttg gttaatacag 781 acagcaggac ggtggccatg gaagtcggca tccgctaagg agtgtgtaac gactcacmtg 841 ccgaattgac cagccctgaa aatggatggc gctagagmgt cggacatata ccgggccgtc 901 atckcaagat gggcggagtt gggccaamtg cgttgcggtt gcgttacgct gatggtctga 961 cgagggtcca ggcatggagt gcgatggcga gtaggagggt ctccgtggtg agcgtagaag 1021 cctcgggcgt gggcctgggt ggagccgcca cgggtgcaga tcttggtggt agtagcaaat 1081 attcaagtga gagcc Dipylidium caninum ITS1, 5.8S rRNA gene and ITS2, isolate DcZJ GeneBank: AM491339.1 FASTA Graphics Go to: LOCUS AM491339 1385 bp DNA linear INV 02-FEB-2009 DEFINITION Dipylidium caninum ITS1, 5.8S rRNA gene and ITS2, isolate DcZJ ACCESSION AM491339 VERSION AM491339.1 KEYWORDS 5.8S ribosomal RNA; 5.8S rRNA gene; internal transcribed spacer 1; internal transcribed spacer 2; ITS1; ITS2 SOURCE Dipylidium caninum ORGANISM Dipylidium caninum Eukaryota; Metazoa; Platyhelminthes; Cestoda; Eucestoda; Cyclophyllidea; Dipylidiidae; Dipylidium REFERENCE AUTHORS Lin,R.Q., Lv,X.S., Deng,Y., Song,H.Q and Zhu,X.Q TITLE PCR amplification, cloning and sequence analysis of the ITS and 5.8S rDNA of Dipylidium caninum JOURNAL Unpublished REFERENCE (bases to 1385) AUTHORS Lin,R.Q TITLE Direct Submission JOURNAL Submitted (02-FEB-2007) Lin R.Q., Department of Parasitology, South China Agricultural University, Wushan, Tianhe District, Guangzhou, Guangdong Province 510642, CHINA FEATURES Location/Qualifiers source 1385 /organism="Dipylidium caninum" /mol_type="geneomic DNA" /isolate="DcZJ" /host="Canis familiaris" /db_xref="taxon:66787" /dev_stage="adult" /country="China:Guangdong Province,Zhanjiang" misc_feature 1385 /note="internal transcribed spacer 2, ITS2" 168 ORIGIN cgcgttctat gtgtgtgtgt gtgtggtggc gacgcggcct ttgttgccgt tgtcgtcgct 61 gggcaatctg gccacctcgc tcaccttagc cagctagctg tctagctagt tagctagggt 121 gagcgttatt gatctacccg ctacgatggg gtgcctgatc tgcctaacgc ctgaggtcgg 181 gtatgctcgc ctccttcgcc tcctcctgct cctctctgtg tgtgcgtgtg ttagcgtgag 241 catgagggtg tgggtgaggc cggtccatac cggggcggca gaagagtggg tgcatacgcg 301 tgtgtatgca tgcgcgaggc gcaagaggtt gggaccgcag tggactgtgg actgtgggcc 361 tccgccccgt catgtgtcgc attcagtgta ctgcgtgtgt tcgaccgggc atttgactcg 421 gtcgaggtgg gcgcttctgt gtggggagat tggactcggt tgacccaatc gcgcccacta 481 caaagcgtgc tcgacggtgc tttagcgccg ccggcgtgct gttcacgcac gtccactgtg 541 cgtggatcta actgggctcg cgtttagcgg ccatcatgta actaactgta tgcggcggat 601 cactcggctc gtgtgtcgat gaagagtgca gccaactgtg tgaattagtg tgaatcgcag 661 actgctttga acgtcgacat ctcgaacgcg ctttgcggcc acaggcttgc ctgtggccac 721 gtctgtccga gcgtcggctt ataaactatc gctacgcgta acaagtagcg gcttggagga 781 gtgcccgact tcctcatgct ctagctaggc gtgtggggtg tagagcaagg ctaggcggca 841 atgaggtgtg tcgaggtttc ctctcaaggt gttgtcgcgt aaggcggcct ggagacgcgg 901 tacttgagcg gagtggctaa tggctatgga taagcgtgaa tattgcctgc ctgcctgcct 961 gcctgccggt cggtgtcatc cttgaaatcc accaggtagg ggggtggggt gtggggtggc 1021 tgtttgttgg tgcccgccca tttgccccta catgcgccca tttgtccgtg tgtctgtggg 1081 tgtgtgtgtg ttttctcgtg cgtgttacca caggctaaca agcgggtatg ggcagtgtgg 1141 agcgtgaacg gggatggccg ctgtcagtgt gtgtagctgc ggtctattgg tcgtggcgga 1201 gtttgtcggc gcgcttacgc tctcgtggtg gtagcgctgt gcacgccgta gatcgtagtg 1261 ttggcttttg cccttgtcat cgttgtcatt gtcactgtat cgttgtctcc gtgtatatgt 1321 gtcctcagtc gggctgaggc tataccatgg ctatgatgtg gctgtggctg tggtgaacgc 1381 ctgcc 169 PHỤ LỤC D D1 Hình ảnh sán dây ký chủ trung gian điển hình thu nhận đƣợc trình nghiên cứu Hình phụ luc D1: Các phận sán dây D Caninum 170 Hình phụ lục D2: Các giai đoạn phận sán dây S mansoni 171 Trứng sán với độ phóng đại 10x100 Hình phụ lục D3: Các phận giai đoạn phát triển T pisiformis 172 Hình phụ lục D4: Các giai đoạn phận sán dây T Hydatigena 173 Hình phụ lục D5: Các giai đoạn phát triển phận sán dây D latum 174 Hình phụ lục D6: Các giai đoạn phát triển Cenocephalides canis 175 Thu thập phân loại định danh bọ chét nghiên cứu vịng đời sán dây Chó thí nghiệm chuồng kín Vị trí xuất huyết ruột Xuất tiết dịch nhầy ruột Chó thí nghiệm chuồng kín D caninum ký sinh trưởng thành tìm thấy ruột non D caninum ký sinh ruột non chó thí nghiệm Mổ khám thu thập D caninum Đốt sán D caninum ruột già ấu trùng C canis Hình phụ lục D7: Tóm tắt vịng đời sán dây D caninum 176 Hình phụ lục D8: Các bƣớc làm tiêu vi thể 177 Hình phụ lục D9: Mổ khảo sát thu thập D caninum chó thí nghiệm Hình phụ lục D10: D caninum hệ tiêu hóa chó thí nghiệm 178 D2 Quy trình nhuộm làm tiêu vĩnh viễn phục vụ cho công tác định danh nghiên cứu Hình phụ lục D11 Dụng cụ, Vật liệu hóa chất nghiên cứu Hình phụ lục D12 Làm mẫu KOH, rút nƣớc cồn 500, 600, 700 Hình phụ lục D13 Nhuộm Carmin, rút nƣớc cồn 700, 800, 850, 900, 950, 960, 99.990 179 Hình phụ lục D14 Làm khơ Xylen dán mẫu keo Bauma Canada Hình phụ lục D15 Mẫu sán dây đƣợc cố định quan sát dƣới kính hiển vi X10 Hình phụ lục D16 Mẫu sán dây đƣợc định danh dán nhãn PHỤ LỤC E 180 MỘT SỐ GIỐNG CHĨ PHỔ BIẾN CHĨ NỘI Xốy lƣng Màng vịt chân Hình phụ lục E1: Chó Phú Quốc Chó phèn Chó mực Chó vện Chó cị Hình phụ lục E2: Các giống chó ta Có tên gọi chung chó mực, chó phèn, chó vện, chó cị hay cịn gọi chung chó Việt Nam, có nguồn gốc Việt Nam 181 CHĨ NGOẠI NHẬP Hình phụ lục E3: Giống chó Chihuahua chó Bắc Kinh Hình phụ lục E4: Giống chó Shih-Tzu chó Toy Poodle Hình phụ lục E6: Giống chó Bulldog chó Rottweiler 182