Luận văn thạc sĩ nghiên cứu đặc điểm dịch tễ hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn (prrs) tại ba huyện thuộc tỉnh bắc ninh, vai trò của một số vi khuẩn có khả năng gây viêm phổi kế phát và biện pháp điều trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - NGUYỄN CÔNG ĐẠT Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN Ở LỢN (PRRS) TẠI BA HUYỆN THUỘC TỈNH BẮC NINH, VAI TRỊ CỦA MỘT SỐ VI KHUẨN CĨ KHẢ NĂNG GÂY VIÊM PHỔI KẾ PHÁT VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chun ngành: Khoa: Khóa học: Chính quy Thú y Chăn nuôi Thú y 2011 - 2016 Thái Nguyên - 2015 e ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - NGUYỄN CÔNG ĐẠT Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN Ở LỢN (PRRS) TẠI BA HUYỆN THUỘC TỈNH BẮC NINH, VAI TRỊ CỦA MỘT SỐ VI KHUẨN CĨ KHẢ NĂNG GÂY VIÊM PHỔI KẾ PHÁT VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chuyên ngành: Lớp: Khoa: Khóa học: Giảng viên hƣớng dẫn: Chính quy Thú y K43 - TY N02 Chăn nuôi Thú y 2011 - 2016 TS Nguyễn Văn Quang Thái Nguyên - 2015 e i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian nghiên cứu, để hồn thành khóa luận mình, tơi nhận bảo tận tình thầy giáo hướng dẫn, giúp đỡ Trường Đại học Nông Lâm, khoa Chăn nuôi Thú y, Chi cục Thú y tỉnh Bắc Ninh Bộ môn Vi trùng, Virus, Viện Thú y Quốc gia Tôi nhận cộng tác nhiệt tình bạn bè, giúp đỡ, cổ vũ động viên người thân gia đình Nhân dịp tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo TS Nguyễn Văn Quang cô giáo GS TS Nguyễn Thị Kim Lan tận tình trực tiếp hướng dẫn tơi thực thành cơng đề tài hồn thiện khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm, khoa Chăn nuôi Thú y thầy cô tạo điều kiện thuận lợi cho phép thực đề tài tốt nghiệp Tôi xin cảm ơn tới Bộ môn Vi trùng, Virus, Viện Thú y Quốc gia Chi cục Thú y tỉnh Bắc Ninh anh chị sở thực tập hợp tác giúp đỡ bố trí thí nghiệm, theo dõi tiêu, thu thập số liệu làm sở cho khóa luận Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè đồng nghiệp giúp đỡ động viên suốt thời gian hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn ! Thái nguyên, ngày tháng năm 2015 Sinh viên Nguyễn Công Đạt e ii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 4.1 Tỷ lệ lợn mắc chết PRRS huyện thuộc tỉnh Bắc Ninh 35 Bảng 4.2 Tỷ lệ lợn mắc chết PRRS loại lợn 37 Bảng 4.3 Kết xác định tỷ lệ lợn mắc chết PRRS theo mùa vụ 38 Bảng 4.4 Kết tổng hợp triệu chứng, bệnh tích chủ yếu lợn mắc PRRS xác định mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRSV 40 Bảng 4.5 Kết phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis từ phổi cuống họng lợn .44 Bảng 4.6 Kết giám định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập .47 Bảng 4.7 Kết giám định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn P multocida phân lập 49 Bảng 4.8 Kết giám định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn S suis phân lập 50 Bảng 4.9 Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập .52 Bảng 4.10 Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn P multocida phân lập 54 Bảng 4.11 Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn S suis phân lập .55 Bảng 4.12 Kết tổng hợp khả mẫn cảm mạnh kháng với kháng sinh vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis 56 Bảng 4.13 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị lợn nghi mắc viêm phổi 59 e iii DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 4.1 Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc chết PRRS huyện 36 Hình 4.2 Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc chết PRRS loại lợn 37 Hình 4.3 Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc chết PRRS theo mùa vụ .39 Hình 4.4 Biểu đồ tỷ lệ phân lập loại vi khuẩn mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRSV 45 e iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ADN: Acid Deoxyribonucleic A pleuropneumoniae: Actinobaccillus pleuroneumoniae CAMP: Chiristie - Atkinson - Munch - Peterson CFU: Colony Forming Unit CPS: Capsule polysaccharide Cs: Cộng DNT: Dermanecrotic toxin ELISA: Enzyme - linked Immuno sorbant assay NAD: Nicotinamide Adenine Dinucleotide OMPs: Outer membrane proteins PCR: Polymerase Chain Reaction P multocida: Pasteurella multocida PRRS: Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome PRRSV: Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus UBND: Uỷ ban nhân dân Sta Aureus: Staphylococcus aureus S suis: Streptococcus suis TSA: Tryptic Soya Agar TSB: Tryptone soya broth VK: Vi khuẩn VP: Voges Prokauer YE: Yeast Extract e v MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC CÁC HÌNH iii DANH MỤC CÁC HÌNH iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv MỤC LỤC v Phần 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 Mục tiêu nghiên cứu 1.4 Ý nghĩa đề tài .2 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn .2 Phần 2: TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 Cơ sở khoa học pháp lý đề tài 2.1.1 Sơ lược nghiên cứu hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) lợn 2.1.1.1 Cấu trúc virus gây Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRSV) lợn đặc tính sinh học 2.1.1.2 Sức đề kháng khả gây bệnh virus 2.1.1.3 Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn 2.1.2 Vai trò vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn 10 2.1.2.1 Vi khuẩn A pleuropneumoniae bệnh viêm phổi - màng phổi lợn .10 2.1.2.2 Vi khuẩn P multocida bệnh viêm phổi lợn P multocida gây 16 2.1.2.3 Vi khuẩn S suis bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn S suis gây 22 2.2 Tổng quan nghiên cứu nước 27 2.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 27 2.2.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 28 e vi Phần 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 31 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành 31 3.3 Nội dung nghiên cứu 31 3.3.1 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) lợn tỉnh Bắc Ninh .31 3.3.2 Phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm dương tính với PRRS tỉnh Bắc Ninh 31 3.3.3 Nghiên cứu biện pháp điều trị 31 3.4 Phương pháp nghiên cứu tiêu theo dõi 31 3.4.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ .31 3.4.2 Phương pháp lấy mẫu 32 3.4.3 Phương pháp xác định mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRS phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida, S suis .32 3.4.4 Phương pháp xác định đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis 32 3.4.5 Phương pháp xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân lập 32 3.4.6 Xây dựng phác đồ điều trị lợn nghi mắc viêm phổi PRRS 33 3.4.7 Phương pháp xử lý số liệu .33 Phần 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN .34 4.1 Tình hình dịch PRRS lợn kết chẩn đoán tỉnh Bắc Ninh từ năm 2010 - 2015 34 4.1.1 Kết xác định tỷ lệ lợn mắc tử vong PRRS số huyện thuộc tỉnh Bắc Ninh từ năm 2010 - 2015 34 4.1.2 Kết xác định tỷ lệ lợn mắc tử vong PRRS theo lứa tuổi, mùa vụ 36 4.1.3 Kết tổng hợp triệu chứng, bệnh tích chủ yếu lợn mắc PRRS xác định mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRSV tỉnh Bắc Ninh 39 4.2 Phân lập giám định đặc tính vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRS tỉnh Bắc Ninh 41 e vii 4.2.1 Kết phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRS .41 4.2.2 Giám định đặc tính sinh học chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm lợn phân lập 45 4.2.2.1 Kết giám định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập .45 4.2.2.2 Kết giám định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn P multocida phân lập .48 4.2.2.3 Kết giám định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn S suis phân lập 49 4.2.3 Kết xác định khả mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân lập .51 4.2.3.1.Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 51 4.2.3.2 Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn P multocida phân lập 53 4.2.3.3 Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn S suis phân lập 54 4.3 Kết nghiên cứu biện pháp điều trị .57 Phần 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 61 5.1 Kết luận 61 5.2 Kiến nghị 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt II Tiếng Anh PHỤ LỤC e Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong bối cảnh hội nhập kinh tế, nơng nghiệp Việt Nam nói chung ngành chăn ni nói riêng có nhiều chuyển biến để theo kịp với nước có chăn ni phát triển khu vực giới Những năm gần đây, có bước phát triển vượt bậc chất lượng giống, chất lượng thịt xuất chăn nuôi Song song với phát triển dịch bệnh gia súc ngày nhiều mối quan tâm nhà chăn nuôi người làm cơng tác thú y Một bệnh có khả lây lan nhanh gây thiệt hại nhiều cho chăn nuôi lợn hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (Porcine Reproductive and Respiratory Sydrome - PRRS) hay bệnh tai xanh lợn Bệnh làm ảnh hưởng trực tiếp đến khả sinh sản lợn nái, gây sảy thai đẻ sớm, lợn sơ sinh yếu, chết thai, thở khó, đơi có triệu chứng thần kinh, tỷ lệ chết cao, lợn thịt giảm ăn, sút cân, lợn đực chất lượng tinh giảm… Từ năm 2007 - 2014 dịch PRRS xảy nước ta gây thiệt hại lớn cho ngành chăn ni Tại Bắc Ninh tính tới tháng 10/2014 tồn tỉnh có 64.073 mắc bệnh, chết tiêu hủy 30.000 Dịch xảy nhiều thôn xã, phường, thị trấn Những vấn đề cho thấy, việc nghiên cứu lưu hành virus gây hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản việc làm cần thiết Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn chăn nuôi lợn, thực đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRS) ba huyện thuộc tỉnh Bắc Ninh, vai trị số vi khuẩn có khả gây viêm phổi kế phát biện pháp điều trị” 1.2 Mục đích nghiên cứu Xác định số đặc điểm dịch tễ hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRS) ba huyện địa bàn tỉnh Bắc Ninh, vai trò số vi khuẩn viêm phổi kế phát biện pháp điều trị, từ giảm thiểu tác hại dịch bệnh đàn lợn e TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Tiêu Quang An, Nguyễn Hữu Nam (2011), “Xác định số vi khuẩn kế phát gây chết lợn vùng dịch lợn Tai xanh huyện Văn Lâm tỉnh Hưng Yên năm 2010”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18(3), tr 56 - 64 Bùi Quang Anh, Hoàng Văn Năm, Văn Đăng Kỳ, Nguyễn Văn Long, Nguyễn Ngọc Tiến (2008), Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (Bệnh Tai xanh), Nxb Nông nghiệp - Hà Nội, tr - 21 Đặng Xuân Bình, Nguyễn Thị Ngân, Phan Hồng Phúc (2007), “Tình hình nhiễm Actinobacillus pleuropneumoniae bệnh viêm phổi màng phổi lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14 (2), tr 36 - 39 Đặng Xuân Bình, Nguyễn Thị Kim Dung, Nguyễn Thị Hà, Lê Bá Hiệp (2010), “Khảo sát lưu hành vi khuẩn Pasteurella multocida gia súc số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 17 (2), tr 53 - 57 Trần Văn Bình (2008), Bệnh quan trọng lợn biện pháp phòng trị, Nxb Khoa học tự nhiên Công nghệ, tr 56 - 62 Nguyễn Văn Cảm, Nguyễn Tùng, Nguyễn Đăng Thọ, Tống Hữu Hiến (2011), “Điều tra lưu hành Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) đàn lợn số tỉnh Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18 (1), tr 21 - 30 Chi cục Thú y tỉnh Bắc Ninh (2010), “Báo cáo kết phòng chống bệnh Tai xanh lợn năm 2010 địa bàn tỉnh Bắc Ninh” Nguyễn Tiến Dũng (2011), “Những vấn đề thời Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18(1), tr - 11 Nguyễn Thị Thu Hằng (2010), “Nghiên cứu số đặc tính sinh học tính sinh miễn dịch Actinobacillus pleuropneumoniae phân lập từ lợn làm sở cho việc chế tạo vaccine” Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội, tr 115 - 116 e 10 Nguyễn Bá Hiên, Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Hữu Nam (2013), “Nghiên cứu chọn chủng virus gây Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) để sản xuất vaccine phòng bệnh Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 20 (1), tr -15 11 Trịnh Quang Hiệp, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thu Hằng, Âu Xuân Tuấn (2004), “Xác định đặc tính sinh vật hố học, độc lực vi khuẩn Actinobacillus, Pasteurella Streptocococcus gây bệnh viêm phổi lợn”, Tạp chí khoa học-cơng nghệ Bộ Nông nghiệp PTNT (4), tr 476 - 477 12 Lê Thanh Hịa, Lê Thị Kim Xuyến, Đồn Thị Thanh Hương, Trần Quang Vui, Phạm Công Hoạt, Nguyễn Bá Hiên (2009), “Phân tích gen M mã hóa protein màng virus gây PRRS Việt Nam so sánh với chủng Trung Quốc, giới”, Tạp chí Khoa học phát triển, 7(3), tr 282 - 290 13 Cao Văn Hồng (2002), Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu, bò, lợn Đắc Lắc số biện pháp phòng trị, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp I - Hà Nội 14 Lý Thị Liên Khai, Võ Thị Cẩm Giàng (2012), “Khảo sát tình hình nhiễm ghép Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản với dịch tả heo tỉnh Bạc Liêu Sóc Trăng”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 19(6), tr 29 - 39 15 Phạm Sỹ Lăng, Trương Văn Dung, Hoàng Văn Năm, Trần Duy Khánh (2006), Các bệnh truyền nhiễm thường gặp lợn biện pháp phòng trị, Nxb Nông nghiệp, tr 88 - 97 16 Trịnh Phú Ngọc (2002), Nghiên cứu số đặc tính sinh vật độc lực vi khuẩn Streptococcus gây bệnh lợn số tỉnh, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội 17 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Nguyễn Thu Hằng, Âu Xuân Tuấn, Nguyễn Bích Thuỷ, Vũ Ngọc Quý, Phạm Bảo Ngọc (2005), “Xác định nguyên nhân gây bệnh đường hô hấp lợn ni số tỉnh phía Bắc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 12 (4), tr 23 - 32 e 18 Nguyễn Viñ h Phước , Hồ Đình Chúc, Nguyễn Văn Hanh, Đặng Thế Huynh (1979), Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, Nxb Nơng thơn, Hà Nội 19 Nguyễn Vĩnh Phước, Lê Thanh Tòng, Lê Anh Phụng, Nguyễn Văn Vĩnh, Mai Hồng Phước (1986), “Phân lập định type huyết học vi khuẩn tụ huyết trùng trâu bị tỉnh phía Nam”, Kết hoạt động khoa học kỹ thuật thú y 1975 - 1985, Nxb Nông nghiệp, tr 126 - 128 20 Phan Thanh Phượng, Trần Thị Hạnh, Phạm Công Hoạt (2006), Bốn bệnh đỏ lợn biện pháp phịng trị, Nxb Nơng nghiệp, tr.76 - 117 21 Phạm Ngọc Thạch (2007), “Một số tiêu lâm sàng, tiêu máu lợn mắc Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (bệnh Tai xanh) số đàn lợn tỉnh Hải Dương Hưng Yên”, Hội thảo khoa học Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản bệnh liên cầu gây lợn 10/2007, Trường Đại học Nông nghiệp, Hà Nội, tr 25 - 34 22 Nguyễn Như Thanh (2007), “Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản”, Hội thảo PRRS bệnh liên cầu khuẩn gây lợn tháng 10/2007, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội 23 Tô Long Thành (2007), “Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14 (3), tr 81 - 88 24 Cao văn Thật, Trần Thị Dân, Trần Thị Bích Liên, Thái Quốc Hiếu, Nguyễn Văn Hân, Hồ Huỳnh Mai, Nguyễn Thị Mến (2012), “Mức độ nhiễm virus PRRS ảnh hưởng nhiễm ghép PRRSV-Leptospira lên suất sinh sản heo nái tỉnh Tiền Giang”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 19 (6), tr 17 - 23 25 Nguyễn Ngọc Tiến (2011), “Tình hình dịch lợn Tai xanh (PRRS) Việt Nam cơng tác phịng chống dịch”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18 (1), tr 12 - 20 26 Đỗ Quốc Tuấn, Nguyễn Quang Tuyên (2007), “Kết kiểm tra độc lực tính mẫn cảm kháng sinh Pasteurella multocida phân lập từ lợn khu vực miền núi phía bắc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14 (6), tr 46 - 51 e 27 Đỗ Quốc Tuấn (2008), Nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng lợn số tỉnh miền núi phía bắc Việt Nam, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội II Tiếng Anh 28 Albina E., Madec F., Cariolet R., Torrison J (1994), Immune response and persistence of the porcine reproductive and respiratory syndrome virus in infected pigs and farm units, Vet Rec 134, pp 567 - 573 29 Belanger M., Dubreuil D., Harel J., Girard C., Jacques M (1990), Role of lipopolysaccharides in adherence of Actinobacillus pleuropneumoniae to porcine tracheal rings Infect Immun 58:3523 - 3530 30 Bergey (1974), Manual of determinative bacteriology 8th Buchanan R.E and Gibbsons N.E Co - editors, Saltimore, the Williams anh Wiking Company 31 Bertram T A (1986), Intravascular macrophages in lungs of pigs infected with Haemophilus pleuropneumoniae Vet Pathol 23: 681 - 691 32 Blackall P J., Klaasen H B L M., van den Bosch H., Kuhnert P., Frey J (2002), Proposal of a new serovar of Actinobacillus pleuropneumoniae: serovar 15, Vet Microbiol (84) 47 - 52 33 Carter G R (1955), Studies on Pasteurella multocida I, a haemagglutination test for indentification of serological type, American Juornal of Vet Reseach 16, pp 481 - 484 34 Carter G.R (1984), Pasteuralla Yersinia and Franciella page: 111-121 in Diagnostic procedures in veterinary bacteriology and Mycology 4th ed (Carter G.R, ed), Charles C, Thomas Publisher, Springfield 35 Chung J Y., Wilkie I., Boyce J D., Townsend K M., Frost A J., Ghoddusi M., Adler B (2001), “Role of capsule in the pathogenesis of fowl cholera caused by Pasteurella multocida serogroup A”, Infect Immin, 69(4), pp 2487 - 2492 36 Clifton-Hadley F A (1983), Streptococccus suis type infection, Br Vet J, No 139, pp - e 37 Collins J E., Benfield D A., Christianson W T., Harris L., Hennings J C., Shaw D P., Goyal S M., McCullough S., Morrison R B., Joo S H., Gorcyca D., Chladek D (1992), “Isolation of swine infertility and respiratory syndrome virus (isolate ATCC VR- 2332) in North America and experimental reproduction of the disease in gnotobiotic pigs”, J Vet Diagn Invest 4: 117 - 126 38 Devenish J., Rosendal S., Bosse J T., Wilkie B N., Johnson R (1990), Prevalence of seroreactors to the 104-kilodalton hemolysin of Actinobacillus pleuropneumoniae in swine herds, J Clin Microbiol 28:789 - 791 39 Diallo I S., Frost A J., Spradbrow P B (1995), “Molecular studies on avian stranins of Pasteurella multocida in Australia”, Vet Microbiol, pp 335 - 342 40 D'Silva C G., Archibald F S., Niven D F (1995), Comparative study of iron acquisition by biotype and biotype strains of Actinobacillus pleupneumoniae, Vet Microbiol 44: 11 - 23 41 Fedorka-Cray P J., Hoffman L., Cray W C., Gray J T., Breish S A., Anderson G A (1993), Actinobacillus (Haemophilus) pleuropneumoniae Part I History, epidemiology, serotyping, and treatment Compend Contin Ed Practic Vet 15:1447 - 1455 42 Fenwick B., Henry S (1994), Porcine pleuropneumonia J Am Vet Med Assoc 204:1334 - 1340 43 Frey J., Bosse J T (1993), Actinobacillus pleupneumoniae RTX toxins: Uniform designation of haemolysins, cytolysins pleurotocin and their genes, J Gen Microbiol 139, pp 1723 - 1728 44 Han J., Wang Y., Faaberg K S (2006), Complete genome analysis of RFLP 184 isolates of porcine reproductive and respiratory syndrome virus: Virus Research 122 (1-2): pp 175 - 183 45 Hartmann L., Schroeder W., Luebke A (1995), Isolation of the major outer membrane proteins of Actinobacillus pleuropneumoniae and Haemophilus parasuis J Vet Med (B) 42:59 - 63 e 46 Hunt M L., Adler B., Townsend K M (2000), “The molecular biology for Pasteurella multocida”, Vet Microbiology 72 (1), pp - 25 47 Kegong Tian, Yu X (2007), Emergence of Fatal PRRSV Varants: Unparalleled Outbreaks of Atypical PRRS in China and Molecular Dissection of the Unique Hallmark, PloS ONE 2(6) International PRRS Symposium 48 Kilian M., Nicolet J., Biberstein E L (1978), Biochemical and serological characterization of Haemophilus pleuropneumoniae and proposal of a neotypee strain Int J Syst Bacteriol 28:20 - 26 49 Kume K., Nagano I., Nakai T (1986), Bacteriological, serological and pathological examination of Haemophilus pleuropneumoniae infection in 200 slaughtered pigs Jpn J.Vet Sci 48: 965 - 970 50 Leman A D (1992), The decision to repopulate In Proceedings Am Assoc Swine Pract pp - 12 51 Lun Z R., Wang Q P., Chen X G., Li A X., Zhu X Q (2007), Streptococcus suis: an emerging zoonotic pathogen, Lancet Infect Dis 7(3), pp 201 - 209 52 MacInnes J I., Rosendal S (1988), Prevention and control of Actinobacillus (Haemophilus) pleuropneumoniae infection in swine: A review Can Vet J 572 - 573 53 Moller K., Nielsen R., Andersen L V., Killian M (1996), Clonal analysis of the Actinobacillus pleupneumoniae population in a geographically - restricted area bu multilocus enzyme electrophoresis, J Clin Micro 30, pp 623 - 627 54 Nicolet J (1992), Actinobacillus pleuropneumoniae: In Leman AD, Straw B, Mengeling WL, D’Allaire S, Taylor DJ (ed.): Diseases of swine Iowa State University Press, Ames, pp 401 - 408 55 Nielsen R., Adresen L O., Plambeck T., Nielsen J P., Krarup L T., Jorsal S V (1997), Serological characterization of Actinobacillus pleuropneumoniae biotype strains isolated from pigs in two Danish herds Vet Microbiol 54, 35 - 46 e 56 O'Reilly T., Niven D F., Brown M R W (1991), Phenotypeic variotion in the outer membrance protein compositin of Actinobacillus (H.) pleuropneumoniae: Non - Specific effect of exogenous pyridine supply, Vet Micro 29, pp 159 - 172 57 Perry M B., Altman E., Brison J R., Beynon L M., Richards J C (1990), Structural characteristics of the antigenic capsular polysachharides and lipopolysaccharides involved in the serological alaccification of Actinobacillus (Haemophilus) pleupneumoniae strains Serodiagnosis and Immunotherapy in Inf Dis 4, pp 299 - 308 58 Pohl S., Bertschinger H U., Frederiksen W., Manheim W (1983), Transfer of Haemophilus Pleuropneumoniae and the Pasteurella haemolytica-like organism causing porcine necrotic pleuropneumonia to the genus Actinobacillus (Actinobacillus pleuropneumoniae comb Nov.) on the basis of phenotypeic and deoxyribonucleic acid relatedness Inst J Syst Bacteriol 33: 510 - 514 59 Rogers R J., Eaves L E., Blackall P J., Truman K F (1990), The comparative pathogenicity of four serovars of Actinobacillus (Haemophilus) pleuropneumoniae Australian Vet J 67: - 12 60 Utrera V., Pijoan C (1991), Fimbriae in Actinobacillus pleuropneumoniae strains isolated from pig respiratory tracts Vet Rec 128 (15): 357 - 358 61 Ward C K., Inzana T J (1997), Identification and characterization of a DNA region involved in the export of capsular polysaccharide by A pleuropneumoniae serotype 5a Infect and Immun 65: 2491 - 2496 62 Wensvoort G., Terpstra C., Pol J M A (1991), “Mystery swine disease in the Netherlands: the isolation of Lelystad virus”, The Veterinary Quarterly, vol 13, No 3, pp 121 - 130 63 Willson PJ, Deneer HG, Potter A, Albritton W (1989), Characterization of a streptomycin - sulfonamide resistance plasmid from Actinobacillus pleuropneumoniae, Antimicrob Agents Chemother 33:235 - 238 e MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA Ảnh 1, 2: Lợn có huyết dương tính với PRRSV có triệu chứng viêm phổi Ảnh 3, 4, 5: Mổ khám kiểm tra bệnh tích phổi e Ảnh 6, 7,8, 9: Một số mẫu máu lợn để chắt huyết e Ảnh 10: Nuôi cấy vi khuẩn môi trường thạch máu Ảnh 12: Khuẩn lạc vi khuẩn Pasteurella môi trường thạch máu e Ảnh 11: Khuẩn lạc vi khuẩn Actinobacillus môi trường PPLO Ảnh 13: Khuẩn lạc vi khuẩn Streptococcus môi trường thạch máu Ảnh 14, 15, 16: Làm tiêu vi khuẩn để nhuộm Gram, kiểm tra hình thái vi khuẩn Ảnh 17: Hình thái vi khuẩn A pleruopneumoniae kính hiển vi (x 1000) Ảnh 18: Hình thái vi khuẩn P multocida kính hiển vi (x 1000) e Ảnh 19: Hình thái vi khuẩn S suis kính hiển vi (x 1000) Ảnh 20: Phản ứng lên men đường loại vi khuẩn Ảnh 21: Phản ứng lên men đường vi khuẩn khuẩn A pleruopneumoniae Ảnh 22: Phản ứng lên men đường vi khuẩn khuẩn P multocida Ảnh 23: Phản ứng lên men đường vi khuẩn khuẩn S suis Ảnh 24, 25: Thuốc điều trị lợn e PHỤ LỤC I MẪU Mẫu Phổi lợn Dịch cuống họng Thạch máu cấy kèm Sta aureus Thạch TSA (1 - YE) 24 370C CO2 (5%) 24 370C CO2(5%) Thạch PPLO + K/S + chất bổ trợ (YE, NAD) 24 370C CO2 (5%) Khuẩn lạc mọc xung quanh đường cấy Sta aureus hình thành vùng xung huyết kiểu β Khuẩn lạc nhỏ trắng Khuẩn lạc trắng xanh nhày Chọn khuẩn lạc điển hình Nhuộm Gram, kiểm tra hình thái Xác định serotype Các đặc tính sinh hóa Giám định PCR Các phản ứng lên men đường Xác định độc lực Kháng sinh đồ Giữ giống Hình 1: Sơ đồ quy trình phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae (Viện Thú y Quốc gia) e Mẫu Dịch cuống họng Phổi lợn Kiểm tra hình thái kính hiển vi - Môi trường thạch máu: không gây dung huyết, khuẩn lạc trịn hình giọt sương, màu xanh tro nhạt - Mơi trường thạch huyết thanh: hình thành khuẩn lạc đặc biệt có tượng phát dung quang 24 Tiêm truyền qua chuột nhắt trắng 370C Chọn khuẩn lạc điển hình Giám định vi khuẩn Xác định serotype Giám định PCP Xác định độc lực Kháng sinh đồ Giữ giống Hình 2: Sơ đồ quy trình phân lập vi khuẩn P multocida (Viện Thú y Quốc gia) e Mẫu Phổi lợn Dịch cuống họng Môi trường nước thịt Môi trường MacConkey 24 370C Thạch máu 24 370C Hình thành khuẩn lạc hạt bông, lắng xuống đáy ống nghiệm Khuẩn lạc nhỏ đầu đinh ghim 24 370C Khuẩn lạc tròn gọn, vồng, sáng trắng mịn Chọn khuẩn lạc điển hình Nhuộm Gram, kiểm tra hình thái Xác định serotype Các đặc tính sinh hóa Các phản ứng lên men đường Phản ứng API Giám định PCR Xác định độc lực Kháng sinh đồ Giữ giống Hình 3: Sơ đồ quy trình phân lập vi khuẩn S suis (Viện Thú y Quốc gia) e