Luận văn thạc sĩ nghiên cứu đặc điểm dịch tễ hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (prrs) ở lợn tại hai huyện thuộc tỉnh bắc ninh, vai trò của một số vi khuẩn có khả năng gây viêm phổi kế phát và biện pháp điều trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HIỀN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN (PRRS) Ở LỢN TẠI HAI HUYỆN THUỘC TỈNH BẮC NINH, VAI TRÒ MỘT SỐ VI KHUẨN CÓ KHẢ NĂNG GÂY VIÊM PHỔI KẾ PHÁT VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chuyên ngành: Thú y Lớp: 43A Thú y Khoa: Chăn ni thú y Khóa học: 2011 - 2015 Giảng viên hƣớng dẫn: TS Nguyễn Văn Quang Thái Nguyên - năm 2015 e ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HIỀN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN (PRRS) Ở LỢN TẠI HAI HUYỆN THUỘC TỈNH BẮC NINH, VAI TRỊ MỘT SỐ VI KHUẨN CĨ KHẢ NĂNG GÂY VIÊM PHỔI KẾ PHÁT VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chuyên ngành: Thú y Lớp: 43A Thú y Khoa: Chăn ni thú y 2011 – 2015 Khóa học: Giảng viên hƣớng dẫn: TS Nguyễn Văn Quang Thái Nguyên - năm 2015 e i LỜI CẢM ƠN Qua thời gian học tập rèn luyện trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên thực tập tốt nghiệp sở tơi hồn thành đợt thực tập Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới: Ban giám hiệu nhà trường Đại học Nông Lâm - Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm khoa chăn nuôi thú y, tồn thể thầy giáo trường nhiệt tình dạy dỗ, dìu dắt tơi suốt thời gian học tập trường Đặc biệt, xin chân thành cảm ơn thầy giáo hướng dẫn: Nguyễn Văn Quang, người tận tình bảo hướng dẫn tơi q trình thực tập giúp tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tôi xin cảm ơn Bộ môn Vi trùng, Virus Viện Thú y Quốc gia anh chị quan hợp tác giúp đỡ q trình thực tập tốt nghiệp Đồng thời, tơi xin gửi lời cảm ơn tới ông Nguyễn Nhân Lừng Chi cục trưởng tồn thể anh chị phịng dịch tễ Chi cục Thú y tỉnh Bắc Ninh tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực tập Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn cảm ơn gia đình, bạn bè ln động viên giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi để học tập hồn thành tốt q trình thực tập Tôi xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng Sinh viên Nguyễn Thị Hiền e năm 2015 ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1: Kết xác định tỷ lệ lợn mắc PRRS theo loại lợn tỉnh Bắc Ninh từ năm 2010 đến 2015 34 Bảng 4.2: Kết xác định tỷ lệ lợn mắc chết PRRS loại lợn 36 Bảng 4.3: Kết xác định tỷ lệ lợn mắc chết PRRS theo mùa vụ 37 Bảng 4.4: Kết tổng hợp triệu chứng, bệnh tích chủ yếu lợn có huyết dương tính với PRRS 40 Bảng 4.5: Kết phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm phổi cuống họng lợn 42 Bảng 4.6: Kết giám định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 45 Bảng 4.7: Kết giám định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng vi khuẩn P multocida phân lập 47 Bảng 4.8: Kết giám định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng vi khuẩn S suis phân lập 48 Bảng 4.9: Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 50 Bảng 4.10: Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn P multocida phân lập 51 Bảng 4.11: Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn S suis phân lập 53 Bảng 4.12: Kết điều trị thử nghiệm lợn nghi mắc viêm phổi 56 e iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 4.1: Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc PRRS hai huyện tỉnh Bắc Ninh 35 Hình 4.2: Biểu đồ tỷ lệ chết PRRS hai huyện tỉnh Bắc Ninh 35 Hình 4.3: Biểu đồ tỷ lệ mắc PRRS loại lợn 37 Hình 4.4: Biểu đồ tỷ lệ chết mắc PRRS loại lợn 37 Hình 4.5: Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc PRRS theo mùa vụ 38 Hình 4.6: Biểu đồ tỷ lệ lợn chết PRRS theo mùa vụ 38 Hình 4.7: Biểu đồ tỷ lệ phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm lợn có huyết dương tính với PRRSV 43 e iv DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT ARN: Axít ribonucleic A pleuropneumoniae: Actinobaccillus pleuroneumoniae cs: Cộng Nxb: Nhà xuất P multocida: Pasteurella multocida PRRS: Porcine respiratory and rerpoductive syndrome PRRSV: Porcine respiratory and rerpoductive syndrome virus Sta aureus: Staphylococcus aureus S suis: Streptococcus suis TT: Thứ tự tr: Trang e v MỤC LỤC PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Mục tiêu yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học pháp lý đề tài 2.1.1 Sơ lược nghiên cứu hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) lợn 2.1.2 Vai trò vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis 10 2.2 Tổng quan nghiên cứu nước 26 2.2.1 Tình hình nghiên cứu giới 26 2.1.2 Tình hình nghiên cứu nước 29 PHẦN3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 30 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành 30 3.3 Nội dung nghiên cứu 30 3.3.1 Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tai xanh tỉnh Bắc Ninh 30 3.3.2 Phân lập xác định vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm dương tính với PRRSV tỉnh Bắc Ninh 30 3.3.3 Nghiên cứu biện pháp điều trị 30 3.4 Phương pháp nghiên cứu tiêu theo dõi 30 3.4.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ 30 3.4.2 Phương pháp lấy mẫu 31 e vi 3.4.3 Phương pháp xác định mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRSV phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida, S suis 31 3.4.4 Phương pháp xác định đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis 31 3.4.5 Phương pháp xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân lập 31 3.4.6 Xây dựng phác đồ điều trị lợn nghi mắc viêm phổi PRRS 32 3.4.7 Phương pháp xử lý số liệu 32 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 33 4.1 Tình hình dịch PRRS lợn kết chẩn đoán tỉnh Bắc Ninh 33 4.1.1 Kết xác định tỷ lệ lợn mắc tử vong PRRS số huyện thuộc tỉnh Bắc Ninh từ năm 2010 - 2015 33 4.1.2 Kết xác định tỷ lệ lợn mắc chết PRRS theo loại lợn, mùa vụ 35 4.1.3 Kết tổng hợp triệu chứng bệnh tích chủ yếu lợn mắc chết PRRS 39 4.2 Phân lập giám định đặc tính sinh học vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm lợn có triệu chứng đường hô hấp tỉnh Bắc Ninh 41 4.2.1 Kết phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PRRS 41 4.2.2 Giám định đặc tính sinh vật, hóa học của vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis mẫu bệnh phẩm lợn có triệu chứng bệnh đường hô hấp 44 4.2.3 Kết xác định khả mẫn cảm với số kháng sinh chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis phân lập 49 4.3 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị lợn nghi mắc viêm phổi 54 e vii PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 58 5.1 Kết luận 58 5.2 Kiến nghị 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 I Tài liệu nước 60 II.Tài liệu nước 64 e PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) lợn hay gọi bệnh Tai xanh bệnh truyền nhiễm virus gây nên, bệnh xảy lứa tuổi với biểu đặc trưng bệnh gây rối loạn sinh sản (hiện tượng sảy thai, đẻ non hay lợn sinh chết yểu, chết non ), rối loạn hô hấp (ho, khó thở ), bệnh gây chết nhanh lợn trước giai đoạn cai sữa, giai đoạn nuôi thịt Chăn nuôi lợn tỉnh Bắc Ninh phát triển Tính đến tháng 10/2014, tỉnh Bắc Ninh có 410.678 lợn, có 364.329 lợn thịt, 45.781 lợn nái, 568 lợn đực giống Chăn nuôi lợn mang lại nguồn thu nhập cao cho nhiều hộ gia đình Những năm gần đây, dịch lợn Tai xanh thường xảy địa bàn tỉnh gây thiệt hại lớn cho người chăn nuôi Các năm 2007, 2008, 2010, 2011, 2012, 2013 xảy dịch bệnh Tai xanh địa bàn tỉnh Đặc biệt năm 2010, dịch Tai xanh làm 64.073 lợn mắc bệnh, số tiêu hủy 29.742 con, thiệt hại khoảng 60 tỷ đồng Bệnh Tai xanh trở thành hiểm họa đe dọa thường trực cho nghành chăn nuôi tỉnh Là bệnh xuất hiện, việc nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, đánh giá ảnh hưởng bệnh tới suất chăn nuôi; phân lập vi khuẩn bội nhiễm gây viêm phổi chưa thực Trong bệnh Tai xanh, lợn chết nhiều vi khuẩn gây viêm phổi kế phát Việc sử dụng phác đồ điều trị Chi cục thú y tỉnh Bắc Ninh thực cách tích cực, song chưa đạt hiệu mong muốn Nguy thiệt hại chăn nuôi lợn dịch Tai xanh gây tỉnh Bắc Ninh lớn Vì việc xác định vai trị vi khuẩn gây viêm phổi kế phát để có phác đồ điều trị có hiệu cần thiết e 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu nƣớc Tiêu Quang An, Nguyễn Hữu Nam (2011), “ Xác định số vi khuẩn kế phát gây chết lợn vùng dịch lợn Tai xanh huyện Văn Lâm tỉnh Hưng Yên năm 2010”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18(3), tr 56 - 64 Bùi Quang Anh, Nguyễn Văn Long (2007), “Một số đặc điểm dịch tễ Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp (lợn tai xanh) tình hình Việt Nam”, Diễn đàn khuyến nông công nghệ, Bộ Nông nghiệp phát triển nơng thơn Bùi Quang Anh, Hồng Văn Năm, Văn Đăng Kỳ, Nguyễn Văn Long, Nguyễn Ngọc Tiến (2008), Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (Bệnh Tai xanh), Nxb Nông nghiệp - Hà Nội, tr - 21 Đặng Xuân Bình, Nguyễn Thị Kim Dung, Nguyễn Thị Hà, Lê Bá Hiệp (2010), “Khảo sát lưu hành vi khuẩn Pasteurella multocida gia súc số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 17(2), tr 53 - 57 Đặng Xuân Bình, Nguyễn Thị Ngân, Phan Thị Hồng Phúc (2007), “Vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae bệnh viêm màng phổi lợn”, Tạp chí Khoa học kĩ thuật, tập XVI số 2, hội thú y Việt Nam Trần Văn Bình (2008), Bệnh quan trọng lợn biện pháp phòng trị, Nxb Khoa học tự nhiên Công nghệ, tr 56 - 62 Nguyễn Văn Cảm, Nguyễn Tùng, Nguyễn Đăng Thọ, Tống Hữu Hiến (2011), “Điều tra lưu hành Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) đàn lợn số tỉnh Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18(1), tr 21 - 30 Cục thú y (2008), Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRS), tháng năm 2008, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội e 61 Trương Quang Hải, Nguyễn Quang Tính, Nguyễn Quang Tuyên, Cù Hữu Phú, Lê Văn Dương (2012), “ Kết phân lập xác định số đặc tính sinh học chủng Streptococcus suis Pasteurella multocida lợn mắc viêm phổi tỉnh Bắc Giang”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 19(7), tr 71 - 76 10 Nguyễn Thị Thu Hằng (2010), Nghiên cứu số đặc tính sinh học tính sinh miễn dịch Actinobacillus pleuropneumoniae phân lập từ lợn làm sở cho việc chế tạo vaccine, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội, tr 115 - 116 11 Nguyễn Bá Hiên, Nguyễn Minh Tâm (2007), Giáo trình Vi sinh vật Bệnh truyền nhiễm vật nuôi, Nxb Đại học Nông Nghiệp Hà Nội, tr 201 - 226 12 Nguyễn Bá Hiên, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Lê Văn Lãnh, Đỗ Ngọc Thúy (2012), Bệnh truyền nhiễm thú y, Nxb Đại học Nông Nghiệp, tr 289 - 302 13 Nguyễn Bá Hiên, Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Hữu Nam (2013), “Nghiên cứu chọn chủng virus gây Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) để sản xuất vaccine phòng bệnh Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 20(1), tr - 15 14 Cao Văn Hồng (2002), Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu, bò, lợn Đắc Lắc số biện pháp phịng trị, Luận án tiến sĩ Nơng nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp I - Hà Nội 15 Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, Trương Văn Dung (2005), Bệnh phổ biến lợn, Nxb Nông nghiệp, tr 115 - 142;151 - 155 16 Phạm Sỹ Lăng, Trương Văn Dung, Hoàng Văn Năm, Trần Duy Khánh (2006), Các bệnh truyền nhiễm thường gặp lợn biện pháp phòng trị, Nxb Nông Nghiệp, tr 88 - 97 17 Phạm Sỹ Lăng, Đỗ Ngọc Thúy, Nguyễn Bá Hiên, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Hoàng Văn Năm, Phạm Ngọc Thạch, Nguyễn Quốc Doanh, Phạm Ngọc Đính, Văn Đăng Kỳ, Nguyễn Thị Kim Oanh, Nguyễn Hữu Hưng, Phan Văn Long, Phan Quí Minh, Đỗ Hữu Dũng, Nguyễn Tùng, Trần Đức Hạnh (2012), Bệnh truyền lây từ động vật sang người, Nxb Nông nghiệp, tr 168 - 178 e 62 18 Khương Thị Bích Ngọc (1996), Bệnh cầu khuẩn số sở chăn ni lợn tập trung biện pháp phịng trị, Luận án PTS khoa học Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội 19 Trịnh Phú Ngọc, Lê Văn Tạo, Nguyễn Ngọc Nhiên (1999), “Một số tính chất vi khuẩn học chủng Streptococcus phân lập từ lợn tỉnh phía Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (2), tr 47 - 49 20 Trịnh Phú Ngọc (2002), Nghiên cứu số đặc tính sinh vật độc lực vi khuẩn Streptococcus gây bệnh lợn số tỉnh, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội 21 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Nguyễn Thu Hằng, Âu Xuân Tuấn, Nguyễn Bích Thuỷ, Vũ Ngọc Quý, Phạm Bảo Ngọc (2005), “Xác định nguyên nhân gây bệnh đường hơ hấp lợn ni số tỉnh phía Bắc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 12(4), tr 23 - 32 22 Cù Hữu Phú (2011), Nghiên cứu mối liên quan Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn với vi khuẩn gây bệnh kế phát xác định biện pháp phòng, trị bệnh, Báo cáo khoa học Viện Thú y Quốc gia 2011 23 Nguyễn Vĩnh Phước (1978), Giáo trình Bệnh truyền nhiễm gia súc, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 270 - 359 24 Nguyễn Viñ h Phước , Hồ Đình Chúc, Nguyễn Văn Hanh, Đặng Thế Huynh (1979), Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, Nxb Nông thôn, Hà Nội 25 Phan Thanh Phượng, Trần Thị Hạnh, Phạm Công Hoạt (2006), Bốn bệnh đỏ lợn biện pháp phòng trị, Nxb Nông nghiệp, tr.76 - 117 26 Lê Văn Tạo (2007), Một số bệnh truyền nhiễm thường gặp lợn biện pháp phòng trị, Nxb Lao động - Xã hội, tr - 15; 68 - 89 27 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (2001), Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 11 - 17 e 63 28 Nguyễn Như Thanh (2011), Dịch tễ học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 29 Tô Long Thành (2007), “Hội chứng rối loạn sinh sản hơ hấp lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14 (3), tr 81 - 88 30 Tô Long Thành Nguyễn Văn Long (2008), “Kết chẩn đoán nghiên cứu virus gây Hội chứng rối lọan hô hấp sinh sản lợn Việt Nam từ tháng 3/2007 đến 5/2008”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 15(5), tr - 13 31 Nguyễn Văn Thiện (1997), Phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 32 Nguyễn Ngọc Tiến (2011), “Tình hình dịch lợn Tai xanh (PRRS) Việt Nam cơng tác phịng chống dịch”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18(1), tr 12 - 20 33 Đỗ Quốc Tuấn, Nguyễn Quang Tuyên (2007), “Kết kiểm tra độc lực tính mẫn cảm kháng sinh Pasteurella multocida phân lập từ lợn khu vực miền núi phía bắc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14(6), tr 46 - 51 34 Đỗ Quốc Tuấn (2008), Nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng lợn số tỉnh miền núi phía bắc Việt Nam, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội 35 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 179 - 185 36 Nguyễn Quang Tuyên, Đỗ Quốc Tuấn (2007), “Kết phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida lợn khu vực miền núi phía bắc”, Tạp chí Nông nghiệp phát triển Nông thôn, (15), tr 45 - 47 37 Trần Cẩm Vân (2005), Giáo trình Vi sinh vật môi trường, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội, tr 138 - 140 e 64 II Tài liệu nƣớc 38 Bertram T A (1986), Intravascular macrophages in lungs of pigs infected with Haemophilus pleuropneumoniae Vet Pathol 23: 681691 39 Clifton-Hadley F A (1983), Streptococccus suis type infection, Br Vet J, No 139, pp - 40 Fedorka-Cray P J., Hoffman L., Cray W C., Gray J T., Breish S A., Anderson G A (1993), Actinobacillus (Haemophilus) pleuropneumoniae Part I History, epidemiology, serotyping, and treatment Compend Contin Ed Practic Vet 15:1447 - 1455 41 Kegong Tian, Yu X (2007), Emergence of Fatal PRRSV Varants: Unparalleled Outbreaks of Atypical PRRS in China and Molecular Dissection of the Unique Hallmark, PloS ONE 2(6) International PRRS Symposium 42 Kilian M (1976), A taxonomic study of the genus Haemophilus, with the proposal of a new species J Gen Microbiol - 62 43 Kilian M., Nicolet J., Biberstein E L (1978), Biochemical and serological characterization of Haemophilus pleuropneumoniae and proposal of a neotypee strain Int J Syst Bacteriol 28:20 - 26 44 Lun Z R., Wang Q P., Chen X G., Li A X., Zhu X Q (2007), Streptococcus suis: an emrging zoonotic pathogen, Lancet Infect Dis 7(3), pp 201 - 209 45 Moore G M., Basson R P., Tonkinson L V (1996), Clinical trials with tilmicosin phosphate in feed for the control of naturally- acquired pleuropneumonia caused by Actinobacillus pleuropneumoniae and Pasteurella multocida in swine Am J Vet Res 57:224 - 228 46 Nicolet J., Schifferli D (1982), In vitro susceptibility of HaemophilusPleuropneumoniae to antimirobial substances Porc Int Congr Pig Vet Soc 7:71 e 65 47 Nicolet J (1992), Actinobacillus pleuropneumoniae: In Leman AD, Straw B, Mengeling WL, D’Allaire S, Taylor DJ (ed.): Diseases of swine Iowa State University Press, Ames, pp 401 - 408 48 Perry M B., Altman E., Brison J R., Beynon L M., Richards J C (1990), Structural characteristics of the antigenic capsular polysachharides and lipopolysaccharides involved in the serological alaccification of Actinobacillus (Haemophilus) pleupneumoniae strains Serodiagnosis and Immunotherapy in Inf Dis 4, pp 299 - 308 49 Pijoan C (1996), Bacterial respiratory pathogens: What is their impact? In Proc 4th Annu Swine Dis Conf Swine Pract, pp 45 - 47 50 Reams R Y., Glickman L T., Harrington D D., Thacker H L., Bowersock T L (1994), Streptococcus suis infection in swine: A retrospective study of 256 cases Part II Clinical signs, gross and microcopic lessions, and coexisting microorganisms, J Vet Diagn Invest, No 6, pp 326 - 334 51 Wills R., Zimmerman J and Swenson S (1997), Transmission of porcine reproductive and respiratory syndrome virus by direct close or indirect contact, Swine Health and Production 5, pp.213-218 52 Wensvoort G., Terpstra C., Pol J M A (1991), “Mystery swine disease in the Netherlands: the isolation of Lelystad virus”, The Veterinary Quarterly, vol 13, No 3, pp 121 - 130 e 66 PHỤ LỤC I MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA ĐỀ TÀI Ảnh 1, 2, 3: Lợn có triệu chứng viêm phổi nghi mắc PRRS Ảnh 4, 5: Phổi lợn có bệnh tích viêm e 67 Ảnh 6, 7, 8, 9: Lấy mẫu để phân tích Ảnh 10, 11: Ni cấy phân lập vi khuẩn từ bệnh phẩm phổi cuống họng lợn bệnh e 68 Ảnh 12, 13: Khuẩn lạc A pleuropneumoniae môi trƣờng thạch TSA Ảnh 14: Khuẩn lạc P multocida môi trƣờng thạch máu Ảnh 15: Khuẩn lạc S suis môi trƣờng thạc máu e 69 Ảnh 16: Phản ứng lên men đƣờng loại vi khuẩn Ảnh 17: Phản ứng lên men đƣờng vi khuẩn A pleuropneumoniae Ảnh 18: Phản ứng lên men đƣờng vi khuẩn P multocida e 70 Ảnh 19: Phản ứng lên men đƣờng vi khuẩn S suis Ảnh 20, 21, 22, 23: Làm tiêu soi kính hiển vi điện tử e 71 Ảnh 25: Vi khuẩn P multocida với độ phóng đại 1000 lần Ảnh 24: Vi khuẩn A pleuropneumoniae với độ phóng đại 1000 lần Ảnh 26: Vi khuẩn S suis với độ phóng đại 1000 lần Ảnh 28, 29, 30: Thuốc điều trị thử nghiệm e 72 PHỤ LỤC II MẪU Mẫu Phổi lợn Dịch cuống họng Thạch TSA (1 - YE) Thạch máu cấy kèm Sta aureus 24 370C CO2 (5%) Khuẩn lạc nhỏ trắng Thạch PPLO + K/S + chất bổ trợ (YE, NAD) 24 370C CO2(5%) 24 370C CO2 (5%) Khuẩn lạc mọc xung quanh đường cấy Sta aureus hình thành vùng sung huyết kiểu β Khuẩn lạc trắng xanh nhày Chọn khuẩn lạc điển hình Nhuộm Gram, kiểm tra hình thái Xác định serotype Các đặc tính sinh hóa Giám định PCR Xác định độc lực Các phản ứng lên men đường Kháng sinh đồ Giữ giống Hình 1: Sơ đồ quy trình phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae (Viện Thú y Quốc gia) e 73 Mẫu Dịch cuống họng Phổi lợn Kiểm tra hình thái kính hiển vi - Mơi trường thạch máu: khơng gây dung huyết, khuẩn lạc trịn hình giọt sương, màu xanh tro nhạt - Môi trường thạch huyết thanh: hình thành khuẩn lạc đặc biệt có tượng phát dung quang Tiêm truyền qua chuột nhắt trắng 24 370C Chọn khuẩn lạc điển hình Giám định vi khuẩn Xác định serotype Giám định PCR Xác định độc lực Kháng sinh đồ Giữ giống Hình 2: Sơ đồ quy trình phân lập vi khuẩn P multocida (Viện Thú y Quốc gia) e 74 Mẫu Dịch cuống họng Phổi lợn Môi trường nước thịt Môi trường MacConkey Thạch máu 24 370C 24 370C 24 370C Hình thành khuẩn lạc hạt bông, lắng xuống đáy ống nghiệm Khuẩn lạc nhỏ đầu đinh ghim Khuẩn lạc tròn gọn, vồng, sáng trắng mịn Chọn khuẩn lạc điển hình Nhuộm Gram, kiểm tra hình thái Các đặc tính sinh hóa Các phản ứng lên men đường Phản ứng API Xác định serotype Giám định PCR Xác định độc lực Kháng sinh đồ Giữ giống Hình 3: Sơ đồ quy trình phân lập vi khuẩn S suis (Viện Thú y Quốc gia) e