Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu bằng vi khuẩn tạo màng sinh học trên than sinh học có nguồn gốc từ trấu

Vietnam J Agri Sci 2023, Vol 21, No 2: 207-214 Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 2023, 21(2): 207-214 www.vnua.edu.vn BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU TẠO CHẾ PHẨM XỬ LÝ Ô NHIỄM DẦU BẰNG VI KHUẨN TẠO MÀNG SINH HỌC TRÊN THAN SINH HỌC CÓ NGUỒN GỐC TỪ TRẤU Trần Thị Lương1, Đỗ Thị Liên2, Cung Thị Ngọc Mai2, Trần Thị Đào3, Trần Phương Minh4, Lê Thị Nhi Công1,2* Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Viện Công nghệ Sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học & Công nghệ Việt Nam Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Trường PTTH Chuyên Khoa học Tự nhiên, Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội * Tác giả liên hệ: lenhicong@ibt.ac.vn Ngày nhận bài: 01.02.2023 Ngày chấp nhận đăng: 07.03.2023 TĨM TẮT Vấn đề nhiễm mơi trường dầu sản phẩm gây mức báo động dầu thường có độc tính cao tương đối bền vững mơi trường Để giải vấn đề trên, biện pháp sinh học xem cách thức xử lý triệt để, thân thiện với mơi trường có chi phí thấp Trong nghiên cứu này, chủng vi khuẩn tạo màng sinh học có khả phân hủy/chuyển hóa thành phần có dầu mỏ lựa chọn để bước đầu tạo chế phẩm với chất mang than sinh học nhằm ứng dụng xử lý ô nhiễm dầu Các phương pháp nghiên cứu vi sinh vật truyền thống sàng lọc, đánh giá khả tạo màng sinh học, đánh giá mật độ vi sinh xác định hàm lượng dầu tổng số lại theo TCVN 4582-88 sử dụng Kết quả, sàng lọc bốn chủng vi khuẩn gồm Acinetobacter baumannii QN01, Rhizobium sp DG2, Rhodococcus sp BN5 Stenotophomonas maltophilia QNG02 Đã xác định nhiệt độ lên men phù hợp 40C độ ẩm chế phẩm 40% Chế phẩm tạo thành cho thấy hiệu loại bỏ dầu diesel lên tới 99% sau ngày nuôi cấy với nồng độ dầu ban đầu 10 g/kg đất Từ khóa: Lên men, màng sinh học, nước thải nhiễm dầu, phân hủy sinh học, than sinh học An Initial Study on oil Pollution Removal Product using Biofilm Forming Bacteria Attached on Husk Biochar ABSTRACT Oil contaminants create remarkably environmental pollution problems because they have high toxicity and are recalcitrant to the environment Bioremediation is an attractive alternative of utilizing bacteria to remove oil contaminants In the present study, bacterial strains producing biofilm capable of degrading oil contaminants/ components were screened and some fermentation conditions with rice husk biochar as carrier to produce biodegradation product to remove oil contaminants were tested Several microbial traditional methods such as screening, biofilm formation, fermentation, microbe denstity and total oil removal by TCVN 4582-88 were conducted As the results, four biofilm forming bacterial strains highly capable of degrading and metabolizing hydrocarbon compounds were selected, i.e Acinetobacter baumannii QN01, Rhizobium sp DG2, Rhodococcus sp BN5 and Stenotophomonas maltophilia QNG02 Fermentation on husk biochar to produce oil degrader product showed that suitable fermentation temperature was 40C and the product moisture was 40% The product exhibited high removal efficiency (99%) for diesel oil contaminants after day-incubation at the initial concentration of 10g/kg oil polluted soil Keywords: Biochar, biofilm, biodegradation, fermentation, oil polluted waste water ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện giĆi, ngành cơng nghiệp khai thác chế biến dỉu ngành mang läi lĉi ích kinh tế - xã hi rỗt ln Cựng vi s phỏt trin khụng ngng cỷa ngnh ny, vỗn 207 Bc u nghiờn cu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu vi khuẩn tạo màng sinh học than sinh học có ngun gc t tru ụ nhim mụi trỵng dổu sân phèm cûa nò gåy ć mc bỏo ng Cý th l, ỗt v nỵc nhim dæu hai nguyên nhân: tÿ khu văc kho chĀa bao gm cỏc hoọt ng nhỵ sỳc ra, lm mỏt bồn chĀa, vệ sinh máy móc thiết bð làm ri vói xởng dổu xung ngun ỗt v nỵc, nỵc mỵa chõy trn qua khu vc kho, hoc t khu vc cõng tip nhờn bao gm cỏc hoọt ng nhỵ nỵc dỡn tu, nỵc v sinh tu, nỵc ng dộn dỉu (khi kéo tÿ biển lên boong), rị rỵ ỵng ng dộn dổu t tu v kho cha Dổu thỵng cha hng ngn phõn t khỏc nhau, nhỵng phỉn lĆn hydrocarbon no có số carbon tÿ n 26 v hydrocarbon thm nhỵ hydrocarbon (HC) a vủng, phenol, benzen Hm lỵng thnh phổn HC thm cũ ỗt nhim dổu thỵng dao ng t 100-150ppm (Inyang & Dickenson, 2015; Kong & cs., 2011) Dổu thỵng cũ c tớnh cao v tỵng i bn vng mụi trỵng c tớnh v tỏc ng cỷa dổu n h sinh thái khơng giống mà phý thuộc vào lội dổu (Meliani & Bensoltane, 2014) giõi quyt vỗn trờn, cỏc quy trỡnh x lý ó ỵc ỏp dýng nhỵ vờt lý, húa hc, sinh hc Trong ũ, quy trình sinh học nhĂng quy trình x lý trit , thõn thin vi mụi trỵng v cú chi phớ thỗp Trong s cỏc quy trỡnh phõn hûy sinh học, màng sinh học nhĂng quy trình xā lý nhiễm dỉu hiệu q, chi phớ thỗp, nờn t lồu ó ỵc nhiu nỵc trờn giĆi quan tâm nghiên cĀu Āng dýng Bên cọnh ũ, tởng cỵng hiu quõ x lý ụ nhiễm dỉu dễ dàng áp dýng điều kiện đða hình khác nhau, việc sā dýng chỗt mang lm giỏ th cho vi sinh vờt tọo mng sinh hc gớn lờn ó v ang ỵc ng dýng rng rói Trong s cỏc chỗt mang ny, than sinh hc (biochar) ỵc xem l chỗt mang tim nởng x lý mụi trỵng cỹng nhỵ x lý ụ nhim ỗt v nỵc nhim dổu cú chi phớ thỗp, a dọng v khõ nởng hỗp thý tỵng i tốt hĄn than hột tính (Kearns & cs., 2014) Biochar l chỗt xp cú cỏc gc carbon v cú ngun gốc tÿ q trình nhiệt phân sinh khối lội chỗt thõi, xỏc ng, thc vờt, dỵi iu kin họn chế oxy khơng có oxy (Ahmad & cs., 2014) Cho tĆi nay, cị nhiều cơng bố gii v khõ nởng hỗp thý hp chỗt hydrocarbon dổu mú cũ ỗt v nỵc nhim dổu bi 208 biochar Chợng họn nhỵ biochar ó ỵc chng minh cú khâ nëng Āng dýng xā lý số hĉp chỗt khú phõn hỷy nhỵ naphthalene (Chen & Chen, 2009), phenanthrene (Kong & cs., 2011), PAH (Beesley & cs., 2010), pyrene (Hale & cs., 2011) i vi ỗt nhim dổu, vic s dýng biochar ó ỵc chng minh cú nhiu li th nhỵ rỳt ngớn thi gian v d dng thớch nghi vi nhiu loọi hỡnh khụng gian cỹng nhỵ tớnh chỗt phc tọp cỷa ỗt v chỗt ụ nhim cú mụi trỵng Hin chỵa cũ nhiu cụng b v s dýng biochar lm chỗt mang cho vi khuốn täo màng sinh học để tëng hiệu quâ xā lý ỗt nhim dổu Do ũ, nghiờn cu ny, chỳng têp trung vào việc sàng lọc chûng vi khuèn täo màng sinh học có khâ nëng phån hûy/chuyển húa cỏc thnh phổn cú dổu mú v bỵc đæu nghiên cĀu số điều kiện lên men chỗt mang l than sinh hc tọo ch phốm xā lý nhiễm dỉu PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Các chûng vi khuèn täo màng sinh học có khâ nëng phån hûy thành phỉn hydrocarbon (HC) dổu mú lỗy t B sỵu tờp cỷa Phũng Cụng ngh sinh hc mụi trỵng, Vin Cụng ngh sinh hc Biochar t trỗu cũ mu en, kớch thỵc: ì ì 0,5 (mm), ốm dỵi 10%, ỵc nhit hóa ć nhiệt độ 480-530C, có diện tích bề mặt c hiu l 1,5 m2/g, hm lỵng tro 42% v mt lỵng ln cỏc nhúm C-O, vớ dý phenolic, hydroxyl v cỏc gc ether Húa chỗt: Cỏc mụi trỵng nuụi cỗy s dýng nghiờn cu ỵc bỏn trờn th trỵng nhỵ LB (10g Tryptone+ 5g cao nỗm men + 10g NaCl), NB (5g NaCl + 5g pepton + 1,5g cao nỗm men Cỏc húa chỗt s dýng u l húa chỗt cỷa cỏc hóng Sigma, Merk (c) 2.2 Phng pháp nghiên cứu 2.2.1 Đánh giá khả tạo biofilm ca chng vi khun Cỏc chỷng vi sinh vờt ỵc đánh giá khâ nëng täo biofilm theo mô tâ cûa Morikawa & cs (2006) O’Toole & Kolter (1998) Trần Thị Lương, Đỗ Thị Liên, Cung Thị Ngọc Mai, Trần Thị Đào, Trần Phương Minh, Lê Thị Nhi Công 2.2.2 Kiểm tra tính đối kháng chủng vi khuẩn la chn Chuốn b ùa petri v mụi trỵng MPA thọch, tin hnh cỗy cỏc chỷng ging lờn ùa petri cho chúng cít tÿng cặp Sau cỗy xong, tin hnh nuụi 37C i vi vi khuốn vũng 24 gi Sau 24 gi nuụi cỗy, chûng có să đối kháng väch cỗy s b giỏn oọn tọi cỏc v trớ giao cûa chúng (Nguyễn Lån Düng, 1981) 2.2.3 Nghiên cứu số điều kiện lên men vi khuẩn to biofilm trờn biochar cú ngun gc t tru Bỵc 1: X lý s b biochar: biochar trỵc s dýng ỵc kh trựng ỵt 121C 30 phỳt để lội bó vi sinh vêt ngội lai, täo biofilm trờn vờt liu mang biochar Bỵc 2: Xỏc nh nhiệt độ lên men phù hĉp bìng cách nhân ni chûng vi khuèn lăa chọn qua đêm môi trỵng LB, nhỡm lm tỵi mi sinh khi; sau ũ ỵc nuụi lớc bỡnh tam giỏc cú th tớch 500ml cha mụi trỵng LB Ly tõm thu sinh ć tốc độ 150rpm 10 phút pha loãng trć läi để đät tĆi sinh khối 108 CFU/ml Sau 24h nuụi, b sung 100g biochar vo 100ml mụi trỵng LB 10ml hỗn hĉp giống (tỵ lệ 1:1:1:1) Cho hn hp vo cỏc tỷ nuụi cỗy cú nhit khỏc nhỵ 30, 35, 40 v 45C Sau 24, 48 v 72 gi lờn men, mộu ỵc lỗy ra, ỏnh giỏ mờt t bo bỡng phỵng phỏp m s lỵng khuốn lọc (CFU/ml) v ỏnh giỏ hiu quõ phân huỷ dỉu DO, tÿ đị tìm điều kin lờn men thớch hp nhỗt cho vic tọo ch phốm Bỵc : Xỏc nh ốm cỷa ch phèm phù hĉp bìng cách nhân ni chûng vi khuốn la chn qua ờm mụi trỵng LB, nhỡm làm mĆi chûng, sau đị ni líc bình tam giỏc cú th tớch 500ml cha mụi trỵng LB Ly tâm thu sinh khối ć tốc độ 150rpm 10 phút pha loãng trć läi để đät tĆi sinh khối 108 CFU/ml Sau 24h, bổ sung 100g biochar vào 0, 100, 150 v 200ml mụi trỵng LB v 10ml hỗn hĉp giống (tỵ lệ 1:1:1:1) Độ èm cûa chế phốm ỵc xỏc nh nhỵ sau: V1 = C2 C1 Trong ũ, V1 l lỵng nỵc cú ch phốm sau sỗy; C2 l lỵng ch phốm trỵc sỗy v ùa dựng ng ch phốm; C1 l lỵng ch phốm sau sỗy v ùa dựng ng ch phốm V2 = C1 trng lỵng đïa Trong đị, V2 Chế phèm khơ sau sỗy ốm = V1 V2 ì 100% Kim tra mêt độ hiệu quâ phân huỷ dæu DO cûa chế phèm ć độ èm đò 2.2.4 Đánh giá mật độ tế bào chế phẩm khả phân hủy dầu chế phẩm a Đánh giá mật độ tế bào vi khuẩn chế phẩm Mêt độ tế bào vi khuèn chế phèm ć độ èm, nhiệt độ thąi gian lên men khác ỵc xỏc nh bỡng phỵng phỏp m s lỵng khuốn lọc (CFU/g) (colony forming unit/g) Cý th nhỵ sau: Mt gram ch phốm ỵc hũa 9ml nỵc mui sinh lý, líc méu tÿ 1-2 gią ć nhiệt độ lên men tt nhỗt Hỳt 0,5ml mộu hũa 4,5ml nỵc mui sinh lý Mộu ỵc pha loóng ti họn v lặp läi độ pha lỗng lỉn Sau pha loãng tĆi hän, hút 0,1ml tÿ nồng độ pha loóng vo ùa mụi trỵng MPA thọch ó ỵc chuốn b trỵc v tin hnh cỗy gọt Cỏc ùa sau ỵc cỗy chỷng vi khuốn ỵc bao gúi cốn thờn v nuụi tỷ ỗm n khuốn lọc phỏt trin Tin hnh m s lỵng khuốn lọc nng pha loóng cao nhỗt cao nhỗt sau đị dăa vào cơng thĀc tính chỵ số khn läc (CFU/g) nhỵ sau: CFU/g = X ì 10 ì 10n × 10 = X × 10(n + 2) Trong đò, X l s khuốn lọc m ỵc; 10 l pha lỗng 10 lỉn; n số lỉn pha lỗng; 10 l 100 àl/1ml Mi thớ nghim u ỵc lp läi lỉn b Phân tích hiệu suất phân hủy dầu diesel chế phẩm tạo thành Chế phèm täo thnh ỵc ỏnh giỏ khõ nởng phồn hỷy dổu diesel (DO) bỡng phỵng phỏp phõn tớch lỵng theo tiờu chuèn 209 Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu vi khuẩn tạo màng sinh học than sinh học có nguồn gốc từ trấu TCVN 4582-88 Thờm 100g ch phốm (trỵc v sau xā lý dỉu diesel) vào dung mơi chloroform, sau hịa tan chloroform líc nhẹ (không 10 phút) cho dổu tan hon ton (quỏ trỡnh chit ỵc tin hành lỉn) Khi đị dỉu dung mơi tách làm hai lĆp, dùng phiễu chiết bó phỉn dung mụi dỵi i Phổn dch hũa tan cũn lọi ỵc cụ bay hi bỡng bp cỏch cỏt cho ti cọn v cõn lỵng, ta s thu ỵc lỵng cỷa lỵng dổu cũ lỵng ch phốm ũ Tựy vo iu kin cý th, cỏc chỵng trỡnh chọy để phân tích méu có nhĂng thay đổi cho phù hĉp KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khâ tạo màng sinh học chủng vi khuẩn lựa chọn Chín chûng vi khuèn täo màng sinh học có khâ nëng phån hûy thành phỉn hydrocarbon (HC) dỉu mú lỗy t B sỵu tờp cỷa Phũng Cụng ngh sinh hc mụi trỵng, Vin Cụng ngh sinh hc ó ỵc sng lc la chn nhng chỷng tọo mng cao nhỗt (Hỡnh 1) Chỷng Acinetobacter calcoaceticus P23 ỵc cung cỗp bi GS Morikawa (Trỵng ọi hc Hokkaido, Nhờt Bõn) chûng có khâ nëng täo màng sinh học tt, ó ỵc s dýng lm i chng dỵng i chĀng âm ống thí nghiệm khơng có vi sinh vêt Kết quâ theo dõi khâ nëng täo màng sinh học täi thąi điểm 24, 48 72h ỵc th hin trờn hỡnh Kt quõ trờn hỡnh cho thỗy, so vi chỷng i chng dỵng Acinetobacter calcoaceticus P23, câ chûng lăa chọn có khâ nëng täo màng tốt hĄn Đặc biệt, sau 72h, khâ nëng täo màng sinh học cûa chûng Rhodococcus BN5 không bð giâm, màng sinh học cûa chûng läi chûng P23 giâm sau 72h nuụi cỗy, nhiờn, lỵng giõm i l khụng ỏng kể Trong số chûng này, chûng DG25 B6 có khâ nëng täo màng sinh học khơng tốt bìng chûng cịn läi Do đị, chûng s ỵc s dýng nhng nghiờn cu tip theo Nghiên cĀu cûa Shimada & cs (2012) cüng chỵ rìng chi Pseudomonas, Rhodococcus chi có khâ nëng täo màng sinh học tốt Đặc biệt, chûng P stutzeri T102 củn ỵc chng minh l cú khõ nởng tọo mng sinh hc tt sau 120h nuụi cỗy (Shimada & cs., 2012) Vì vêy, nói rìng chỷng ỵc la chn l phự hp cho cỏc nghiờn cĀu 3.2 Khâ đối kháng lẫn vi khuẩn lựa chọn Hình bâng cho thỗy, chỷng VTD8, BQN21 v DGP2 i khỏng vĆi câ hai chûng QN01 QNG02; chûng läi khơng có să đối kháng Do đị, chỷng QN01, QNG02, BN5 v DG2 ỵc s dýng cho nhĂng nghiên cĀu Theo kết quâ k tha t cỏc nghiờn cu trỵc ũ cỷa nhúm tỏc giõ, chỷng ny ó ỵc nh tờn l: Acinetobacter baumannii QN01, Rhizobium sp DG2, Rhodococcus sp BN5 Stenotophomonas maltophilia QNG02 Hình Khâ tạo biofilm chủng vi khuẩn 210 Trần Thị Lương, Đỗ Thị Liên, Cung Thị Ngọc Mai, Trần Thị Đào, Trần Phương Minh, Lê Thị Nhi Cơng Hình Sự đối kháng chủng vi sinh vật lựa chọn Bâng Tính đối kháng chủng vi khuẩn BN5 BN5 BQN21 QNG02 VTD8 QN01 DGP2 DG2 + + + + + + - + - + + - + - + - + + - + BQN21 + QNG02 + - VTD8 + + - QN01 + - + - DGP2 + + - + - DG2 + + + + + + + Ghi chú: +: Các chủng không đối kháng nhau; -: Các chủng đối kháng 30oC 35C 40C 45C Hình Các mẫu chế phẩm lên men nhiệt độ khác 3.3 Xác định nhiệt độ lên men tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu 3.3.1 Lên men nhiệt độ khác Sau trình lên men ć nhiệt độ khác nhau, mêt độ tế bào cûa chỷng ch phốm ó ỵc xỏc nh Mờt t bo trung bỡnh ọt lổn lỵt l 25 ì 109; 41 × 109; 55 × 1010 35 × 109 (CFU/g), tỵng ng vi cỏc nhit lờn men l 30, 35, 40 v 45C Nhỵ vờy, cú th thỗy, mờt t bo cỷa cỏc mộu u ọt 109 (CFU/g) nhiên, ć nhiệt độ lên men 40C 211 Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu vi khuẩn tạo màng sinh học than sinh học có nguồn gốc từ trấu lờn men l 28,09; 35,13; 40 v 52,95% Nhỵ vờy, cú th thỗy, mờt t bo cỷa cỏc mộu đät 109 (CFU/g) nhiên, độ èm lên men 40% mờt ọt ỵc l cao nhỗt xỏc nh ốm no phự hp nhỗt, cổn ỏnh giá hiệu quâ phân huỷ dæu cûa méu chế phốm ny Cỏc ch phốm tọo thnh ỵc s dýng để đánh giá khâ nëng phån hûy, chuyển hóa dỉu DO Ch phốm cũ ốm phự hp nhỗt s ỵc s dýng cho cỏc nghiờn cu tip theo mờt ọt ỵc l cao nhỗt xỏc nh nhit lờn men no phự hp nhỗt, cổn ỏnh giỏ hiệu quâ phân huỷ dæu cûa méu chế phèm 3.3.2 Đánh giá khả loại bỏ DO chế phẩm biochar tạo thành Kết quâ hình cho thỗy, mộu ỵc sỗy 40C cho hiu suỗt phõn hu dổu DO l cao nhỗt (99%) Cỏc mộu ch phốm sỗy cỏc nhit khỏc chợ đät hĄn 75% Do đò, nhiệt độ lên men ć 40C ó ỵc la chn cho cỏc nghiờn cu tip theo 3.4.2 Đánh giá khả loại bỏ DO chế phẩm biochar tạo thành 3.4 Xác định độ ẩm lên men tạo chế phẩm Kết quâ hình cho thỗy, ch phốm mộu s 3, cũ ốm 40% cho hiu quõ phõn hỷy dổu cao nhỗt (99%) Các méu 1, đät hiệu suỗt hn 94% Mộu i chng chỗt mang th hin khõ nởng hỗp phý dổu cỷa chỗt mang biochar la chọn Kết q giâi thích mêt độ vi sinh vêt ć méu cò độ èm 40% l cao nhỗt, nờn hiu quõ x lý cỹng cao hĄn méu khác xử lý ô nhiễm dầu 3.4.1 Lên men độ ẩm khác Sau trình lên men vĆi độ èm khác này, mêt độ tế bào cûa chûng ch phốm ó ỵc xỏc nh Mờt t bo trung bỡnh ọt lổn lỵt l 85 ì 109; 46 × 1010; 81 × 1010 59 × 1010 (CFU/g), tỵng ng vi cỏc ốm Mu 30C Mu 35C Mẫu 40C Mẫu 45C Ghi chú: Kí hiệu mẫu 30C, 35C, 40C 45oC mẫu lên men nhiệt độ tương ứng với kí hiệu Hình Khâ phân hủy dầu DO chế phẩm sau ngày nuôi cấy với hàm lượng dầu DO ban đầu 10 g/kg Bâng Các độ ẩm khác chế phẩm thu sau sấy 40C Trước sấy Sau sấy (cả đĩa) (g) - C2 (cả đĩa) (g) - C1 Trọng lượng đĩa (g) - Khối lượng nước CP (g) - V1 Khối lượng CP khô (g) - V2 Độ ẩm (%) Mẫu (10% giống) 42 41 37,44 3.56 28,09 Mẫu (bổ sung 100ml môi trường 10% giống) 47 44 35,46 8.54 35,13 Mẫu (bổ sung 150ml môi trường 10% giống) 46 43,66 37,81 2.34 5,85 40,00 Mẫu (bổ sung 200ml môi trường 10% giống) 60 53 39,78 13,22 52,95 212 Trần Thị Lương, Đỗ Thị Liên, Cung Thị Ngọc Mai, Trần Thị Đào, Trần Phương Minh, Lê Thị Nhi Công Ghi chú: Mẫu 1, 2, tương ứng với độ ẩm 28,09; 35,13; 40 52,95% Hình Khâ phân hủy dầu DO chế phẩm sau ngày nuôi cấy với hàm lượng dầu DO ban đầu 10 g/kg Liang & cs (2009) chĀng minh sā dýng carbon hột tính v zeolite lm chỗt mang cho cỏc vi sinh vờt täo màng sinh học hiệu q phân hûy dỉu thụ ỗt nhim dổu tởng lờn ỏng k Cý th, dọng cú chỗt mang, hiu suỗt phõn hỷy đät 48,89%, để tă phân hûy tă nhiên 13% (natural attention), cịn thí nghiệm có bổ sung dinh dỵng (biostimulation) v t phõn hỷy ọt 26,3%; bổ sung vi sinh vêt ć däng tế bào tă vào vùng bð nhiễm (bioaugmentation) hiu suỗt phõn hỷy l 37,4% sau ngy nuụi cỗy vi 800g ỗt nhim dổu (hm lỵng dổu ỗt l 49,81 mg/g) Alessandrello & cs (2017) ó chng minh hai chûng Pseudomonas monteilii P26 Gordonia sp H19 täo màng sinh học vêt liệu mang mút xốp cú khõ nởng loọi bú 75% hm lỵng dổu thụ (0,1 g/g) sau ngy nuụi cỗy 30C Tuy nhiờn, cho ti chỵa cũ nhiu cụng b v vic s dýng biochar x lý ỗt nhim dổu Do vêy, méu chế phèm số 3, cò độ èm 40% s ỵc s dýng cho cỏc nghiờn cu tip theo Nhỵ vờy, cú th thỗy rỡng, vic s dýng phế phý phèm nông nghiệp để täo biochar làm chỗt mang cho cỏc vi sinh vờt tọo mng sinh hc va giõi quyt ỵc vỗn gõy ụ nhim mụi trỵng bi cỏc ph phý phốm ny, va tởng cỵng khõ nởng hỗp thý v loọi bú cỏc chỗt gõy ụ nhim khỏc mụi trỵng ng thi, ồy ỵc xem l giõi phỏp cú hiu quõ kinh t v thõn thin vi mụi trỵng Tuy nhiờn, hin chỵa cị nhiều cơng bố ć Việt Nam việc sā dýng biochar t trỗu, mt loọi ph phý phốm nụng nghip rỗt ph bin nỵc ta, lm chỗt mang cho vi sinh vêt täo màng sinh học nhìm tởng cỵng khõ nởng loọi bú dổu DO núi riờng thành phỉn hydrocarbon dỉu mó nói chung Do vờy, nghiờn cu ny s gúp phổn ỵa giõi phỏp giõi quyt bi toỏn mụi trỵng ph phý phèm nơng nghiệp gåy ra, đồng thąi xā lý nhiễm dỉu mó thành phỉn dổu mú KT LUN ó sng lc ỵc chûng vi khuèn Acinetobacter baumannii QN01, Rhizobium sp DG2, Rhodococcus sp BN5 Stenotophomonas maltophilia QNG02 täo biofilm tốt, có khâ nëng phân huỷ thành phỉn dỉu mó vi hiu suỗt cao (lờn n 99%) v khụng i khỏng lộn T cỏc chỷng ny ó bỵc ổu xỏc nh ỵc nhit lờn men tọo ch phốm l 40C v ốm phự hp nhỗt l 40% LI CM N Cụng trỡnh ỵc thc hin vi s hỗ trĉ kinh phí tÿ Nhiệm vý Phát triển cơng nghệ mã số 213 Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu vi khuẩn tạo màng sinh học than sinh học có nguồn gốc từ trấu UDPTCN 01/21-23 Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam (VAST) tài trĉ sā dýng trang thiết bð täi Phịng Cơng nghệ sinh hc Mụi trỵng, Vin Cụng ngh sinh hc, VAST TI LIỆU THAM KHẢO Ahmad M., Rajapaksha A.U., Lim J.E., Zhang M., Bolan N., Mohan D., Vithanage M., Le S.S & Ok Y.K (2014) Biochar as a sorbent for contaminant management in soil and water: A review Chemosphere 99: 19-33 Alessandrello M.J., Parellada E.A., Juárez Tomás M.S., Neske A., Vullo D.L & Ferrero M.A (2017) Polycyclic aromatic hydrocarbons removal by immobilized bacterial cells using annonaceous acetogenins for biofilm formation stimulation on polyurethane foam Journal of Environmental Chemical Engineering 5: 189-195 https://doi.org/10.1016/j.jece.2016.11.037 Beesley L., Jiménez E.M & Eyles J.L.G (2010) Effects of biochar and greenwaste compost amendments on mobility, bioavailability and toxicity of inorganic and organic contaminants in a multi-element polluted soil Environmental Pollution 158: 2282-2287 Chen B & Chen Z (2009) Sorption of naphthalene and 1-naphthol by biochars of orange peels with different pyrolytic temperatures Chemosphere 76: 127-133 Hale S E., Hanley K., Lehmann J., Zimmerman A.R & Cornelissen G (2011) Effects of chemical, biological, and physical aging as well as soil addition on the sorption of pyrene to activated carbon and biochar Environmental of Science and Technology 45: 10445-10453 Inyang M & Dickenson E (2015) The potential role of biochar in the removal of organic and microbial contaminants from potable and reuse water: A review Chemosphere 134: 232-240 214 Kearns J., Wellborn L., Summers R & Knappe D (2014) 2,4-D adsorption to biochars: effect of preparation conditions on equilibrium adsorption capacity and comparison with commercial activated carbon literature data Water Research 62: 20-28 Khan Z.A., Siddiqui M.F & Park S (2019) Current and emerging methods of antibiotic susceptibility testing Diagnostics 9: 49 https://doi.org/10.3390/diagnostics90200 Kong H., He J., Gao Y., Wu H & Zhu X (2011) Cosorption of phenanthrene and mercury (II) from aqueous solution by soybean stalk-based biochar Journal of Argicultural and Food Chemistry 59: 12116-12123 Liang Y., Zhang X., Dai D & Li G (2009) Porous biocarrier-enhanced biodegradation of crude oil contaminated soil International Biodeterioration and Biodegradation 63: 80-87 https://doi.org/10.1016/j.ibiod.2008.07.005 Meliani A & Bensoltane A (2014) Enhancement of hydrocarbons degradation by use of Pseudomonas biosurfactants and biofilms Journal of Petroleum & Environmental Biotechnology 5(1): 1-7 Morikawa M., Kagihiro S., Haruki M., Takano K., Branda S., Kolter R & Kanaya S (2006) Biofilm formation by a Bacillus subtilis strain that produces gamma-polyglutamate Microbiology 152: 2801-7 Nguyễn Lân Dũng (1981) Giáo trình Vi sinh vật học Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật O’Toole G.A., Kaplan H.B & Kolter R (2000) Biofilm formation as microbial development Annual Review Microbiology 54: 49-79 Shimada K., Itoh Y., Washio K & Morikawa M (2012) Efficacy of forming biofilms by naphthalene degrading Pseudomonas stutzeri T102 toward bioremediation technology and its molecular mechanisms Chemosphere 87: 226-233  ... triển công nghệ mã số 213 Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu vi khuẩn tạo màng sinh học than sinh học có nguồn gốc từ trấu UDPTCN 01/21-23 Vi? ??n Hàn lâm Khoa học Công nghệ Vi? ??t Nam.. .Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu vi khuẩn tạo màng sinh học than sinh học có nguồn gốc từ trấu nhiễm mụi trỵng dổu v cỏc sõn phốm cỷa... vi cỏc nhiệt độ lên men 30, 35, 40 45C Nhỵ vờy, cú th thỗy, mờt t bo cỷa méu đät 109 (CFU/g) nhiên, ć nhiệt độ lên men 40C 211 Bước đầu nghiên cứu tạo chế phẩm xử lý ô nhiễm dầu vi khuẩn tạo