ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC ====== ====== TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem ) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌ[.]
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC ====== ====== TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội - 2019 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC ======= ====== Người thực hiện: TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (NGÀNH DƯỢC HỌC) Khóa: QH2014.Y Người hướng dẫn: GV.TS NGUYỄN HỮU TÙNG Hà Nội - 2019 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm MỤC LỤC NU LỜI CẢM ƠN Danh mục ký hiệu tên viết tắt ac y, V Danh mục bảng Danh mục hình vẽ đồ thị ĐẶT VẤN ĐỀ dP rm CHƯƠNG – TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Sâm Vũ Diệp 1.1.1 Tên khoa học an 1.1.2 Đặc điểm thực vật 1.1.3 Đặc điểm phân bố sinh thái ed ici ne 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Tính vị, cơng .8 1.1.6 Tác dụng dược lý M 1.1.7 Công dụng of 1.2 Tổng quan Saponin 1.3 Tổng quan Stipuleanosid R2 10 ol 1.4 Tổng quan số nghiên cứu phân tích định tính định lượng Sc ho thành phần hóa học Sâm Vũ Diệp 11 CHƯƠNG - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 t@ 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 14 2.1.1 Nguyên liệu 14 rig h 2.1.2 Dung mơi, hóa chất 14 2.1.3 Thiết bị 14 Co py 2.2 PHƯƠNG PHÁP 15 2.2.1 Phương pháp chiết xuất Sâm Vũ Diệp 15 `2.2.2 Phương pháp phân tích TLC 16 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm 2.2.3 Phương pháp định lượng Stipuleanosid R2 HPLC 17 NU CHƯƠNG - KẾT QUẢ 25 3.1 Chiết xuất saponin từ phận lá, thân, rễ Sâm Vũ Diệp 25 ac y, V 3.2 Định tính TLC thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp 25 3.3 Định tính thành phần Stipuleanosid R2 cao chiết từ phận Sâm dP rm Vũ Diệp HPLC 26 3.4 Định lượng Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp HPLC 27 CHƯƠNG - BÀN LUẬN 29 an 4.1 Về chiết xuất xác định thành phần saponin có phận Sâm Vũ Diệp 29 ed ici ne 4.2 Về định lượng sơ thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp HPLC 29 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 31 M TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 Co py rig h t@ Sc ho ol of PHỤ LỤC 35 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm LỜI CẢM ƠN NU Trong thời gian tiến hành nghiên cứu hồn thiện đề tài khóa luận, nhận hướng dẫn, hỗ trợ giúp đỡ tận tình tâm huyết ac y, V thầy cô, anh chị trước Khoa Y Dược-ĐHQGHN với ủng hộ bạn bè người thân gia đình Qua đây, tơi xin trân trọng gửi lời cảm ơn chân thành tới người ln bên cạnh, dìu dắt, dạy ủng hộ tơi q trình thực khóa luận dP rm Trước hết, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Dương Thị Ly Hương, T.S Nguyễn Hữu Tùng - Khoa Y Dược ĐHQGHN, thầy cô dành thời gian để trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình, truyền đạt cho tơi kinh nghiệm quý báu động viên suốt q trình hồn thiện khóa luận Tơi xin cảm ơn sâu sắc tới anh Nguyễn Hoàng Việt ; chị Đặng Thị Ngần - Khoa Y an Dược ĐHQGHN, người tiền bối bên cạnh suốt q trình thực nghiệm labo, giúp tơi khắc phục sai sót hay vượt qua khó ed ici ne khăn thất bại qúa trình thí nghiệm Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Ban chủ nhiệm Khoa, thầy cô Khoa Y Dược, đặc biệt mơn Hóa dược Kiểm nghiệm thuốc tạo M điều kiện cho thực khóa luận of Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể Dược học khóa QH.2014.Y, đặc biệt bạn Nông Mỹ Hoa, Nguyễn Thị Hồng Nhung, Cao Thị Phương Thảo, Bùi Thị ol Thanh Vân đồng hành suốt thời gian nghiên cứu Co py rig h t@ hôm Sc ho Và cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình thân yêu bạn bè bên ủng hộ trình học tập, phấn đấu để đạt thành tích ngày Hà Nội, ngày 09 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trần Thị Ngọc Hà PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục ký hiệu tên viết tắt Tên đầy đủ EtOH Ethanol HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC-DAD Sắc ký lỏng hiệu cao đầu dò mảng diod MeOH Methanol ac y, V dP rm LOD Giới hạn phát Giới hạn định lượng RDS Độ lệch chuẩn tương đối SVD Sâm vũ diệp an LOQ TLC Sắc ký lớp mỏng Tài liệu tham khảo ed ici ne TLTK TPHH Thành phân hóa học TT Co py rig h t@ Sc ho ol of M UV UV-DAD NU Ký hiệu Thuốc thử Tử ngoại UV-detector aray diode PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục bảng NU Bảng 1.1 Các thành phần hóa học nghiên cứu Sâm Vũ Diệp Bảng 1.2 Điều kiện sắc ký kết phân tích định tính, định lượng acid ac y, V oleanolic dược liệu Sâm Vũ Diệp 12 Bảng 1.3 Chương trình pha động chạy HPLC-DAD .13 Bảng 2.1 Chương trình dung mơi chạy HPLC-DAD 18 dP rm Bảng 3.1 Hàm lượng cắn phân đoạn chiết xuất từ thân rễ Sâm Vũ Diệp 25 Bảng 3.2 Hàm lượng cắn phân đoạn chiết xuất từ thân Sâm Vũ Diệp 25 Bảng 3.3 Tính thích hợp hệ thống sắc ký 19 Bảng 3.4 Kết khảo sát khoảng tuyến tính stipuleanosid R2 .20 an Bảng 3.5 Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp 21 ed ici ne Bảng 3.6 Khảo sát độ thu hồi 22 Bảng 3.7 Kết định lượng stipuleanosid R2 thân rễ SVD 27 Co py rig h t@ Sc ho ol of M Bảng 3.8 Kết định lượng stipuleanosid R2 thân SVD 28 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục hình vẽ đồ thị NU Hình 1.1 Đặc điểm hình thái Sâm Vũ Diệp Hình 1.2 Đặc điểm thực vật vùng phân bố Sâm Vũ Diệp ac y, V Hình 1.3 Cấu trúc hóa học 10 saponin tách từ rễ SVD .5 Hình 1.4 Cấu trúc hóa học β-sitosterol, oleanolic acid daucosterol Hình 1.5 Cấu trúc hóa học Stipuleanosid R2(a) Aralosid A methyl(b) dP rm ester Hình 1.6 Thành phần saponin thuộc nhóm triterpenoid có Sâm Vũ Diệp.10 Hình 1.7 Công thức cấu tạo Stipuleanosid R2 11 Hình 2.1 Mẫu dược liệu Sâm Vũ Diệp 14 an Hình 2.2 Sơ đồ quy trình chiết 16 ed ici ne Hình 2.3 Dịch lọc rễ, thân, SVD 16 Hình 3.1 Sắc ký đồ dung dịch mẫu trắng, mẫu chuẩn mẫu thử 19 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn đường chuẩn stipuleanosid R2 21 Hình 3.3 Kết TLC Stipuleanosid R2 phận dược liệu Sâm Vũ M Diệp 26 of Hình 3.4 Sắc ký đồ HPLC stipuleanosid R2 (A) mẫu cao thân ol rễ (B), thân (C) Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) 26 Co py rig h t@ Sc ho Hình 3.5 Sắc ký đồ cao tổng thân SVD 28 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm ĐẶT VẤN ĐỀ NU Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem., họ Nhân sâm - Araliaceae) thuốc quý phân bố Trung Quốc dãy núi Hoàng Liên Sơn ac y, V Tây Bắc nước ta [9] Gần Sâm Vũ Diệp (SVD) hóa bước đầu trồng thử nghiệm số địa phương Hà Giang, Lào Cai Về mặt y học, SVD sử dụng làm thuốc bổ thành phần số thuốc truyền thống dân tộc vùng núi Tây Bắc Theo tài liệu nghiên cứu dP rm trước [2,12] cho thấy dược liệu SVD sử dụng phần thân rễ, chứa hàm lượng lớn saponin-Stipuleanosid R2-thành phần hoạt chất mang lại tác dụng dược lý giá trị sử dụng dược liệu q y học Tuy nhiên, chưa có cơng bố thức thành phần saponin phận mặt đất SVD Do đó, việc tập trung nghiên cứu thành phần saponin phận SVD an định lượng thành phần có ý nghĩa quan trọng việc ứng dụng dược liệu SVD thực tiễn Vậy liệu phận khác mặt đất ed ici ne SVD (lá, thân, hoa) có chứa thành phần saponin phần (dưới mặt đất) thân rễ hay không? Nếu có hàm lượng bao nhiêu? Có thể sử dụng phận thay dược liệu SVD không? Để trả lời câu hỏi trên, đồng thời đóng góp vào việc nghiên cứu M cách có hệ thống saponin xây dựng tiêu chí định tính, định lượng, sở liệu hóa thực vật tiêu chuẩn hóa dược liệu SVD; chúng tơi thực đề tài of “Phân tích thành phần Stipuleanosid R2 có phận Sâm Vũ ol Diệp” tiếp nối nghiên cứu bước đầu thành phần hóa học thân rễ SVD “Nghiên cứu thành phần saponin có thân rễ SVD trồng Sa Pa”-luận văn Sc ho thạc sĩ Nguyễn Thị Thu Thủy [12], với mục tiêu định tính bước đầu định lượng thành phần stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp gồm: Co py rig h t@ thân (trên mặt đất), thân rễ PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm CHƯƠNG – TỔNG QUAN NU 1.1 Tổng quan Sâm Vũ Diệp 1.1.1 Tên khoa học chi Sâm (Panax L), họ Ngũ gia bì (Araliaceae) [2] 1.1.2 Đặc điểm thực vật ac y, V Sâm Vũ Diệp có tên khoa học Panax bipinnatifidus Seem [1], SVD thuộc dP rm Sâm Vũ Diệp thân thảo sống nhiều năm, ưa bóng đặc biệt ưa ẩm Thân rễ dài có nhiều đốt vết sẹo thân rụng hàng năm để lại Thân khí sinh mảnh, cao 20 - 30 cm, thường đơn độc, mọc thẳng, rỗng giữa, có vạch dọc, thường lụi vào mùa đông, mọc chồi thân từ tháng đến đầu tháng dương lịch Lá kép chân vịt, gồm - mọc vịng Lá chét - (ít 3) thn, an dài 2,5 - 14 cm, rộng 1,5 - cm, gốc trịn, đầu thn thành mũi nhọn, xẻ thùy of M ed ici ne khơng đều, mép có cưa, có lơng [1] Sc ho ol Hình 1.1 Đặc điểm hình thái Sâm Vũ Diệp 1.1.3 Đặc điểm phân bố sinh thái Trong tự nhiên, SVD phân bố Trung Quốc, Ấn Độ Nepan (vùng cận t@ Hymalaya) dãy núi Hoàng Liên Sơn, Tây Bắc nước ta [1] Sa Pa-Việt Nam điểm phân bố cuối SVD phía nam Năm 1973, phát núi Hàm Rồng, sát thị trấn Sa Pa, độ cao 1600 m Hiện vùng phân bố rig h SVD bị thu hẹp dần, từ độ cao khoảng 1800 m trở lên, coi cực [1] Gần SVD hóa bước đầu trồng thử nghiệm số Co py địa phương Hà Giang Lào Cai [18] ...ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC ======= ====== Người thực hiện: TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA... hóa dược liệu SVD; thực đề tài of ? ?Phân tích thành phần Stipuleanosid R2 có phận Sâm Vũ ol Diệp? ?? tiếp nối nghiên cứu bước đầu thành phần hóa học thân rễ SVD “Nghiên cứu thành phần saponin có thân... chiết xuất xác định thành phần saponin có phận Sâm Vũ Diệp 29 ed ici ne 4.2 Về định lượng sơ thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp HPLC 29 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ