i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH VIỆN KHOA HỌC ỨNG DỤNG HUTECH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA ĐÈN LED VÀ MỘT SỐ YẾU TỐ GIÁ THỂ LÊN KHẢ NĂNG SỰ SINH TRƯỞNG VÀ[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH VIỆN KHOA HỌC ỨNG DỤNG HUTECH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA ĐÈN LED VÀ MỘT SỐ YẾU TỐ GIÁ THỂ LÊN KHẢ NĂNG SỰ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA CÂY CHUỐI ĐỎ (MUSA ACUMINATA RED DACCA) IN VITRO Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS TRỊNH THỊ LAN ANH Sinh viên thực : PHẠM THỊ NHẢ TRÂN MSSV : 1411100686 Lớp : 14DSH04 TP Hồ Chí Minh, 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài tơi thực hiện, cơng trình nghiên cứu khoa học độc lập riêng Những thông tin tham khảo đồ án trích dẫn cụ thể nguồn sử dụng Các kết nghiên cứu đồ án tơi thực hiện, phân tích cách trung trực, khách quan phù hợp với thực tiễn Các kết công bố nghiên cứu khác Tp.Hồ Chí Minh, ngày 30 tháng năm 2018 Sinh viên thực Phạm Thị Nhả Trân ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận mình, tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu trường Đại học Công Nghệ TP Hồ Chí Minh, ban chủ nhiệm Viện Khoa học Ứng dụng Hutech, tất thầy cô truyền đạt kiến thức cho em suốt trình học tập Đặc biệt, xin cảm ơn TS.Trịnh Thị Lan Anh người trực tiếp hướng dẫn, tận tình giúp đỡ động viên cá nhân suốt q trình thực khóa luận tốt nghiệp Với kiến thức làm tảng cho vận dụng vào sống trường Xin chân thành cảm ơn hỗ trợ, giúp đỡ, động viên tồn thể gia đình, bạn bè suốt q trình hồn thành đồ án tốt nghiệp, suốt trình học vừa qua Vì thời gian hạn hẹp, vốn kiến thức hạn chế nên báo cáo khơng tránh khỏi sai sót Rất mong bảo đóng góp quý thầy cô bạn để báo cáo hồn thiện Xin kính q Thầy, Cơ sức khỏe thành công nghiệp đào tạo hệ tri thức tương lai Một lần xin chân thành cảm ơn Tp Hồ Chí Minh, ngày 30 tháng năm 2018 Sinh viên thực Phạm Thị Nhả Trân iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC BIỂU ĐỒ x DANH MỤC HÌNH ẢNH viii MỞ ĐẦU .1 Đặt vấn đề .1 Mục đích đề tài .3 Đối tượng phạm vi nghên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Bố cục đồ án CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .5 1.1 Giới thiệu phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.1.1 Giới thiệu khái quát phương pháp nuôi cấy mô tế bào .5 1.1.2 Ưu nhược điểm nuôi mô tế bào thực vật 1.1.2.1 Ưu điểm .5 1.1.2.2 Nhược điểm 1.1.3 Các phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.1.4 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.1.4.1 Các khoáng đa lượng 1.1.4.2 Các vitamin 1.1.4.3 Nguồn carbohydrate 11 1.1.4.4 Nguồn sắt 11 1.1.4.5 pH 12 1.1.4.6 Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật .12 iv 1.1.5 Các giai đoạn nuôi cấy mô tế bào thực vật 19 1.1.5.1 Nuôi cấy đỉnh sinh trường 19 1.1.5.2 Tạo thể nhân giống in vitro 19 1.1.5.3 Nhân giống in vitro 20 1.1.5.4 Tái sinh hoàn chỉnh in vitro .20 1.1.5.5 Chuyển in vitro vườn ươm .20 1.1.5.6 Nhân giống ex vitro 21 1.1.5.7 Cây bầu đất 21 1.1.5.8 Trồng ruộng .21 1.1.5.9 Chọn lọc đầu dòng .21 1.1.6 Các vấn đề liên quan đến in vitro 22 1.1.6.1 Tính bất định mặt di truyền 22 1.1.6.2 Ảnh hưởng mẫu nuôi cấy 22 1.1.6.3 Sản sinh chất độc từ mẫu cấy 23 1.1.7 Giới thiệu sơ lược ánh sáng LED 24 1.1.7.1 Giới thiệu đèn LED .24 1.1.7.2 Ưu nhược điểm đèn LED .25 1.1.7.3 Ảnh hưởng đèn LED đến nuôi cấy mô tế bào thực vật .27 1.1.8 Các chất có hàm lượng khơng xác định bổ sung vào mơi trường cấy 28 1.1.8.1 Nước dừa 28 1.1.8.2 Than hoạt tính 29 1.1.9 Giới thiệu sơ lược giá thể nuôi cấy 29 1.1.9.1 Agar 29 1.1.9.2 Sương sáo 30 1.1.10 Giới thiệu sơ lược chuối 30 1.1.10.1 Sơ lược chuối giới .30 1.1.10.2 Các phương pháp truyền thống thường sử dụng nhân giống chuối 32 1.1.10.3 Phân loại 32 v 1.1.10.4 Sơ lược chuối đỏ 33 1.1.10.5 Tình hình nghiên cứu kỹ thuật nhân giống chuối phương pháp nuôi cấy mô (in vitro) 35 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 37 2.1 Địa điểm thời gian tiến hành đề tài 37 2.2 Vật liệu .37 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 37 2.2.2 Hóa chất, dụng cụ thiết bị .37 2.2.3 Môi trường nuôi cấy 37 2.2.4 Điều kiện ni cấy phịng ni cấy in vitro .37 2.2.4 Thiết kế hệ thống LED 38 2.3 Bố trí thí nghiệm .41 2.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng agar lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) 41 2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng sương sáo lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) .41 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng nước dừa lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) .42 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) .43 2.3.5 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn LED kết hợp lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) .44 2.3.6 Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần môi trường dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên khả tăng trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) .45 2.3.7 Chỉ tiêu nghiên cứu 46 2.3.8 Thống kê xử lý số liệu .47 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng agar lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro 48 vi 3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng sương sáo lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro 55 3.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng nước dừa lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) 63 3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) .72 3.5 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn LED kết hợp lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) .80 3.6 Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần môi trường dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên khả tăng trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ in vitro (Musa acuminata Red Dacca) 88 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 96 4.1 Kết luận 96 4.2 Kiến nghị 96 TÀI LIỆU THAM KHẢO 97 PHỤ LỤC 99 vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ADN : Acid deoxynucleotic BA : 6-benzyladenine BAP : N6-benzylaminopurine CNSH : Công nghệ sinh hoc CV% : Hệ số sai dị CAD : Cinnamyl alcohol dehydrogenase CCR : Cinnamoyl CoA redductase CRD : Completely randommized desugin DHSTTV : Chất diều hòa sinh trưởng thực vật ĐC : Đối chứng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid IBA : Indol butyric acid LED : Light Emitting Diodes MS : Murashige skoog NAA : α-naphtaleneacetic acid viii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Khảo sát ảnh hưởng agar lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Bảng 2.2 Khảo sát ảnh hưởng sương sáo lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Bảng 2.3 Khảo sát ảnh hưởng nước dừa lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Bảng 2.4 Khảo sát ảnh hưởng đèn LED lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Bảng 2.5 Khảo sát ảnh hưởng đèn LED kết hợp lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Bảng 2.6 Khảo sát ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần môi trường dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên khả tăng trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Bảng 3.1 Ảnh hưởng agar đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro Bảng 3.2 Ảnh hưởng sương sáo đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ in vitro Bảng 3.3 Ảnh hưởng nước dừa đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ in vitro Bảng 3.4 Ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ in vitro Bảng 3.5 Ảnh hưởng ánh sáng đèn LED kết hợp đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ in vitro Bảng 3.6 ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần môi trường dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên khả tăng trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ in vitro (Musa acuminata Red Dacca) ix DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Ảnh hưởng agar đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.2 Ảnh hưởng agar lên trọng lượng tươi trọng lượng khô chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.3 Ảnh hưởng agar lên chiều cao đường kính thân chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.4 Ảnh hưởng agar lên chiều dài rễ số rễ chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.5 Ảnh hưởng sương sáo đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.6 Ảnh hưởng sương sáo lên trọng lượng tươi trọng lượng khô chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.7 Ảnh hưởng sương sáo lên chiều cao đường kính thân chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.8 Ảnh hưởng sương sáo lên chiều dài rễ số rễ chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.9 Ảnh hưởng nước dừa đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.10 Ảnh hưởng nước dừa lên trọng lượng tươi trọng lượng khô chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.11 Ảnh hưởng nước dừa lên chiều cao đường kính thân chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.12 Ảnh hưởng nước dừa lên chiều dài rễ số rễ chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.13 Ảnh hưởng ánh sáng đơn sắc đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro tuần nuôi cấy x Biểu đồ 3.14 Ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên trọng lượng tươi trọng lượng khô chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.15 Ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên chiều cao đường kính thân chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi Biểu đồ 3.16 Ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên số rễ chiều dài rễ chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi Biểu đồ 3.17 Ảnh hưởng ánh sáng kết hợp đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.18 Ảnh hưởng ánh sáng kết hợp lên trọng lượng tươi trọng lượng khô chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.19 Ảnh hưởng ánh sáng kết hợp lên chiều cao đường kính thân chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi Biểu đồ 3.20 Ảnh hưởng ánh sáng kết hợp lên số rễ chiều dài rễ chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi Biểu đồ 3.21 Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng đến phát triển tạo hoàn chỉnh chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.22 Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên trọng lượng tươi trọng lượng khô chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy Biểu đồ 3.23 Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên chiều dài đường kính chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi Biểu đồ 3.24 Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên chiều cao đường kính thân chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi Biểu đồ 3.25 Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên số rễ chiều dài rễ chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi xi DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Hình 1.2 Cây chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Hình 2.1 Mơ hình thiết kế hệ thống chiếu sáng đèn LED đơn a Hệ thống chiếu sáng đèn LED trắng; b Hệ thống chiếu sáng đèn LED vàng; c Hệ thống chiếu sáng đèn LED xanh; d Hệ thống chiếu sáng đèn LED đỏ Hình 2.2 Hệ thống chiếu sáng đèn LED đơn sau thiết kế thi công A Hệ thống chiếu sáng đèn LED trắng; B Hệ thống chiếu sáng đèn LED vàng; C Hệ thống chiếu sáng đèn LED xanh; D Hệ thống chiếu sáng đèn LED đỏ Hình 2.3 Mơ hình hệ thống chiếu sáng LED kết hợp a 100% LED đỏ (ĐC); b 50% LED đỏ kết hợp 50% LED vàng; c 50% LED đỏ kết hợp 50% LED xanh dương; d 50% LED vàng kết hợp 50% LED xanh dương Hình 2.4 Mơ hình hệ thống chiếu sáng LED kết hợp A 100% LED đỏ (ĐC); B 50% LED đỏ kết hợp 50% LED vàng; C 50% LED đỏ kết hợp 50% LED xanh dương; D 50% LED vàng kết hợp 50% LED xanh dương Hình 3.1 ảnh hưởng agar lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (A1, A2, A3, A4 tương ứng với nồng độ ,9 , 12, 15 g/l) Hình 3.2 ảnh hưởng agar lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (A1, A2, A3, A4 tương ứng với nồng độ ,9 , 12, 15 g/l) Hình 3.3 Ảnh hưởng sương sáo lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (B1, B2, B3, B4, B5 tương ứng với nồng độ 3, 6, 9, 12, 15 g/l) Hình 3.4 Ảnh hưởng sương sáo lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (B1, B2, B3, B4, B5 tương ứng với nồng độ 3, 6, 9, 12, 15 g/l) viii Hình 3.5 Ảnh hưởng nước dừa lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (C0, C1, C2, C3, C4, C5 tương ứng với nồng độ 0, 5, 10, 15, 20, 25%) Hình 3.6 ảnh hưởng nước dừa lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (C0, C1, C2, C3, C4, C5 tương ứng với nồng độ 0, 5, 10, 15, 20, 25%) Hình 3.7 ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (D0, D1, D2, D3, D4 tương ứng với loại ánh sáng huỳnh quang, LED trắng, LED đỏ, LED xanh dương) Hình 3.8 ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (D0, D1, D2, D3, D4 tương ứng với loại ánh sáng huỳnh quang, LED trắng, LED đỏ, LED xanh dương) Hình 3.9 Ảnh hưởng ánh sáng đèn LED kết hợp lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (E0, E1, E2, E3 tương ứng với loại ánh sáng đèn LED đỏ, đèn LED đỏ kết hợp đèn LED xanh dương, đèn LED xanh dương kết hợp đèn vàng, đèn LED đỏ kết hợp đèn LED vàng) Hình 3.10 Ảnh hưởng ánh sáng đèn LED kết hợp lên sinh trưởng phát triển chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (E0, E1, E2, E3 tương ứng với loại ánh sáng đèn LED đỏ, đèn LED đỏ kết hợp đèn LED xanh dương, đèn LED xanh dương kết hợp đèn vàng, đèn LED đỏ kết hợp đèn LED vàng ) Hình 3.11 ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (F0, F1, F2, F3, F4, F5 tương ứng với thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng tuần, tuần, tuần, tuần, tuần Hình 3.12 Ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng chuối đỏ in vitro sau tuần nuôi cấy (F0, F1, F2, F3, F4, F5 tương ứng với thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng tuần, tuần, tuần, tuần, tuần) ix MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Cây chuối trồng phổ biến 100 nước có diện tích trồng hàng năm khoảng 10 triệu sản lượng 88 triệu Cây chuối xếp vào 130 loại ăn đặc biệt quan tâm Chuối loại thực phẩm, đồng thời dược liệu thiên nhiên để hỗ trợ cho nhiều bệnh Trong chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) ưu tiên đầu tư phát triển với quy mô lớn giới Với ưu vượt trội mặt chất lượng hàm lượng dinh dưỡng chuối đỏ so với loại chuối khác giá trị vượt trội mặt kinh tế thông qua chế biến bảo quản xuất vô to lớn Hiện giới chuối đỏ trồng chủ yếu Úc, New Zealand, nhiều nơi quần đảo Thái Bình Dương, mạng lại thu nhập ổn định khả phát triển kinh tế cao cho người trồng, nước ta nắm bắt xu chuối đỏ chưa đầu tư rộng tập trung chủ yếu tỉnh Lâm Đồng, Bình Dương tỉnh miền Tây Tuy chuối đỏ mang lại hiệu kinh tế khả phát triển cao tình hình sản xuất chuối đỏ chưa đáp ứng nhu cầu ngày tăng thị trường cịn gặp nhiều khó khăn việc cải thiện số lượng chất lượng sản phẩm chuối đỏ Một nguyên nhân lượng giống chưa đáp ứng kiệp cầu gieo trồng với chất lượng giống chưa đảm bảo Ngồi việc nhân giống theo phương pháp truyền thống (tách chồi) thường sinh trưởng kém, phát triển chậm, không đồng đều, lâu thu hoạch thu hoạch không tập trung Phương pháp nhân giống thường làm cho bị mắc bệnh virus nguy hiểm đến tình trạng thối hóa giống Hiện người dân thường sử dụng chuối từ phương pháp nuôi mô, đặc biệt phổ biến vùng trồng chuối lớn, tập trung Từ củ chuối thông qua phương pháp nuôi cấy mơ sản xuất đạt tới 2000 chuối bệnh chất lượng cao để trồng vườn sản xuất Trồng phương pháp nuôi cấy mô cho tỉ lệ sống cao, sinh trưởng nhanh, phát triển mạnh, đồng đều, thời gian từ lúc trồng đến lúc thu hoạch ngắn Tính đồng giống chuối ni cấy mơ giúp điều khiển thời gian hoa thời gian thu hoạch tăng xuất chất lượng trái Thông qua phương pháp nuôi cấy mô người ta tạo bệnh, đặc biệt với bệnh virus gây Theo tổng kết nhà khoa học thực tế sản xuất số địa phương cho thấy trồng chuối cấy mô bệnh có khả tăng xuất từ 15 – 20% Một số biện pháp nhân giống in vitro chuối giúp phát triển rễ tiêu sinh trưởng trước đem vườn ươm bước quan trọng để đạt tỷ lệ sống cao Ánh sáng yếu tố quan trọng sinh trưởng thực vật bao gồm rễ Đèn LED có nhiều ưu điểm với kích thước, thể tích nhỏ, tuổi thọ cao, vùng quang phổ kiểm sốt được, hao tốn điện tỏa nhiệt Trong đó, đèn huỳnh quang ni cấy mơ chiếm nhiều khơng gian, tuổi thọ thấp, có vùng quang phổ không cần thiết Tuy nhiên ứng dụng khoa học kỹ thuật vào ngành công nghệ sinh học thực vật, đặc biệt nuôi cấy mô tế bào thực vật Việt Nam bị bỏ ngỏ Hiện có nhiều nghiên cứu ứng dụng đèn LED đời sống nói chung ứng dụng ni cấy mơ tế bào thực vật nói riêng Nhưng ứng dụng chưa triễn khai đại trà áp dụng rộng rãi Với mục đích đưa ứng dụng công nghệ sinh học việc phát triễn nông nghiệp bền vững, vừa tăng suất trồng, tiết kiệm chi phí tối đa mà đảm bảo chất lượng, thực nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng đèn LED số yếu tố giá thể lên khả sinh trưởng phát triển chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro” 2 Mục đích đề tài Khảo sát yếu tố giá thể ảnh hưởng đến trình sinh trưởng phát triển chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) nghiên cứu ảnh hưởng hệ thống đèn LED đến trình sinh trưởng từ mẫu cấy chồi Từ tìm yếu tố thích hợp cho q trình sinh trưởng phát triển chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro Đối tượng phạm vi nghên cứu Đối tượng nghiên cứu chồi chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) đươc sử dụng làm nguồn mẫu để nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố giá thể hệ thống đèn LED đến trình sinh trưởng phát triển chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro Nhiệm vụ nghiên cứu - Khảo sát ảnh hưởng agar lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) - Khảo sát ảnh hưởng sương xáo lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) - Khảo sát ảnh hưởng nước dừa lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) - Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) - Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn LED kết hợp lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) - Khảo sát ảnh hưởng kiểu bổ sung thành phần môi trường dinh dưỡng thời gian bổ sung thêm dinh dưỡng lên khả tăng trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) Phương pháp nghiên cứu - Nghiên cứu lý thuyết: thu thập, phân tích, tổng hợp tài liệu sách chun ngành, tập chí chun ngành, cơng trình nghiên cứu, báo khoa học nước - Nghiên cứu thực nghiệm: tiến hành bố trí thí nghiệm để khảo sát ảnh hưởng số yếu tố giá thể hệ thống đèn LED Các thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên Các nghiệm thức lập lại lần, ghi nhận kết trung bình Các số liệu thu thập xử lý thống kê phần mềm SAS 9.1 chương trình MicroSoft Excel 2010 Bố cục đồ án Đồ án tốt nghiệp bao gồm chương sau: - Chương 1: Tổng quan tài liệu - Chương 2: Vật liệu phương pháp - Chương 3: Kết thảo luận - Chương 4: Kết luận kiến nghị CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.1.1 Giới thiệu khái quát phương pháp nuôi cấy mô tế bào Nuôi cấy mô tế bào thực vật thuật ngữ dùng cách rộng rãi để nói việc mơ tả phương thức nuôi cấy phận thực vật (tế bào đơn, mơ, quan) ống nghiệm có chứa mơi trường xác định điều kiện vơ trùng Mục đích chung nuôi cấy mô tế bào thực vật sử dụng điều kiện như: nhiệt độ, ánh sáng, thành phần dinh dưỡng, chất điều hòa sinh trưởng thực vật, để điều khiển trình sinh trưởng phát triển tế bào, mô nuôi cấy theo mục tiêu yêu cầu đặt Nuôi cấy mô tế bào thực vật phương pháp nghiên cứu hiệu trình phát triển hình thái nhiều loài thực vật Phương pháp giúp mở hướng nghiên cứu sinh lý di truyền thực vật như: chế sinh tổng hợp chất, sinh lý phân tử - đột biến, sinh lý dinh dưỡng tế bào thực vật nhiều vấn đề sinh học khác, Tất dạng nuôi cấy mô tiến hành qua hai bước: - Các phần thực vật quan thực vật tách khỏi phần cịn lại Đó tách rời tế bào, mơ hay quan tương tác lẫn tổ chức thực vật nguyên vẹn - Các phần tách nói phải đặt mơi trường thích hợp để biểu lộ hết chất khả đáp ứng 1.1.2 Ưu nhược điểm ni mô tế bào thực vật 1.1.2.1 Ưu điểm - Phương pháp in vitro có khả hình thành số lượng lớn giống từ mô, quan với kích thước nhỏ khoảng 0,1 – 10 mm Trong phương pháp nhân giống truyền thống để tạo thành giống, phải sử dụng phần quan dinh dưỡng với kích thước từ – 20 cm - Hồn tồn tiến hành điều kiện vơ trùng nên giống tạo không nhiễm bệnh từ môi trường bênh - Sử dụng vật liệu virus có khả nhân nhanh số lượng lớn giống virus - Hoàn toàn chủ động điều chỉnh tác nhân, điều chỉnh khả tái sinh thành phần dinh dưỡng, ánh sáng, nhiệt độ, chất điều hòa sinh trưởng thực vật,… theo ý muốn - Hệ số nhân giống cao nên sản xuất số lượng lớn giống thời gian ngắn - Có thể tiến hành quanh năm mà không chịu chi phối điều kiện ngoại cảnh, mùa vụ - Cây giống in vitro chưa có nhu cấu sử dụng bảo quản thời gian dài điều kiện in vitro 1.1.2.2 Nhược điểm - Mặc dù hệ số nhân giống cao giống tạo có kích thước nhỏ đơi xuất dạng không mong muốn - Nhân giống mơi trường agar giá thành cao thời gian dài - Cần trang thiết bị đại, kĩ thuật viên có tay nghề cao - Quy trình nhân giống phức tạp - Giới hạn đa dạng dòng sản phẩm nhân giống tạo thường đồng mặt di truyền 1.1.3 Các phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Nuôi cấy mô tế bào thực vật bao gồm: - Cấy cây: nuôi cấy non lớn - Cấy phôi: gồm nuôi cấy phôi cô lập trưởng thành chưa trưởng thành - Cấy quan: cấy quan thực vật tách rời - Cấy mô mô sẹo: cấy loại mơ tách từ phần quan thực vật - Cấy tế bào huyền phù tế bào: cấy tề bào cô lập cụm tế bào nhỏ môi trường lỏng - Cấy tế bào trần: cấy tế bào trần thực vật ni cấy tế bào khơng có thành (vách) dùng kỹ thuật di truyền - Cấy túi phấn (thể đơn bội): cấy túi phấn hạt phấn chưa trưởng thành để thu tế bào đơn bội hay mô sẹo kĩ thuật di truyền 1.1.4 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật đa dạng gồm số thành phần sau: - Các muối khoáng đa lượng vi lượng - Các vitamin - Các amino acid - Nguồn carbon: số loại đường - Các chất điều hoà sinh trưởng - Các chất hữu bổ sung: nước dừa,… - Chất làm thay đổi trạng thái môi truờng: loại thạch (agar) Tất hợp chất tham gia vào nhiều chức sinh trưởng phân hoá thực vật nuôi cấy in vitro ... trưởng phát triển chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) in vitro? ?? 2 Mục đích đề tài Khảo sát yếu tố giá thể ảnh hưởng đến trình sinh trưởng phát triển chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) nghiên cứu ảnh. .. chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) - Khảo sát ảnh hưởng nước dừa lên sinh trưởng tạo hoàn chỉnh giống chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) - Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng đèn LED đơn sắc lên sinh. .. tượng nghiên cứu chồi chuối đỏ (Musa acuminata Red Dacca) đươc sử dụng làm nguồn mẫu để nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố giá thể hệ thống đèn LED đến trình sinh trưởng phát triển chuối đỏ (Musa acuminata