THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN 19Số 70 Tháng 3/2022 1 MỞ ĐẦU Ung thư hiện nay là nguyên nhân gây tử vong hàng đầu trên toàn thế giới Theo ước tính của Cơ quan Nghiên cứu Ung thư Thế giới (IA[.]
THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO NANO SELEN/OLIGOCHITOSAN BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾU XẠ VÀ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH Nguyễn Ngọc Duy cộng Trung tâm Nghiên cứu Triển khai công nghệ xạ Selen (Se) chất khống, có thể người với hàm lượng nhỏ, vơ quan trọng Nó chất giải độc kỳ diệu chuyên “săn bẫy” kim loại nặng độc hại thải trừ chúng khỏi thể Người ta chứng minh Se đóng vai trị then chốt q trình ơxy hóa, chống lão hóa thể Selen coenzym glutathion peroxydase, chất chống ơxy hóa, giữ vai trị chủ chốt bảo vệ thể chống lại tác hại gốc tự Ngồi ra, Selen đóng vai trị quan trọng hệ miễn dịch phòng chống ung thư Nhiều cơng trình nghiên cứu Selen với số loại ung thư ruột, tiền liệt tuyến, da, phổi xác nhận Selen tăng cường miễn dịch, làm chậm phát triển khối u, kéo dài thời gian sống bệnh nhân ung thư Hàm lượng selen cần thiết chế độ ăn dinh dưỡng người lớn 50 - 200 μg/ngày So với selen dạng ion, nano selen có hoạt tính sinh khả dụng, hoạt tính sinh học cao độc tính thấp Nano selen chế tạo phương pháp chiếu xạ có ưu điểm thân thiện với môi trường, sản phẩm có độ tinh khiết cao, có khả sản xuất với khối lượng lớn có tiềm ứng dụng lĩnh vực y sinh, mỹ phẩm lĩnh vực khác MỞ ĐẦU Ung thư nguyên nhân gây tử vong hàng đầu tồn giới Theo ước tính Cơ quan Nghiên cứu Ung thư Thế giới (IARC), năm 2012 giới có 14,1 triệu ca ung thư 8,2 triệu ca tử vong Xạ trị, hóa trị xem biện pháp tối ưu bên cạnh phương pháp gây nhiều tác dụng phụ không mong muốn số lượng tế bào máu bị giảm trầm trọng dễ gây tượng thiếu máu nhiễm bệnh vi sinh vật hội gây hệ miễn dịch lúc bị suy yếu [1] Selen nguyên tố vi lượng quan trọng, có ảnh hưởng rộng rãi đến hệ thống sinh học, bao gồm hiệu ứng chống oxy hố, phịng chống ung thư hoạt động kháng virus [8, 75] Sự thiếu hụt selen dẫn đến số bệnh nghiêm trọng ung thư, tim mạch rối loạn miễn dịch gây ức chế miễn dịch, việc bổ sung selen với liều thấp làm tăng phục hồi chức miễn dịch [2] Hàm lượng selen cần thiết chế độ ăn dinh dưỡng người lớn 50 - 200 μg/ngày [2] So với selen dạng ion, nano selen (SeNPs) có hoạt tính sinh khả dụng, hoạt tính sinh học cao độc tính thấp [3, 4] Một số nghiên cứu trước SeNPs có độc tính cấp thấp nhiều chuột với LD50 ~ 91,2 mg Se/kg thể trọng so với methylselenocystein có LD50 ~ 14,6 mg Se/kg thể trọng [5] Gần đây, Zhai cộng [6] báo cáo LD50 SeNPs cho chuột Kunming 258,2 mg/kg LD50 H2SeO3 22 mg/kg Ngoài ra, nghiên cứu cịn SeNPs có tác dụng việc điều trị ung thư Sonkusre cộng [7] chứng minh SeNPs có hiệu cao đặc hiệu chống ung thư tuyến tiền liệt Ali cộng thử nghiệm nhận thấy chuột uống SeNPs có kích thước hạt khoảng 50-80 nm với liều lượng 0,2 mg/kg thể trọng có khả chống lại bệnh ung thư phổi [8] Faghfuri cộng [9] báo cáo Số 70 - Tháng 3/2022 19 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN khối lượng khối u vú chuột bổ sung 200 μg MỘT SỐ KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC SeNPs /ngày 60 ngày nhỏ so với nhóm 2.1 Đặc trưng tính chất dung dịch SeNPs/ đối chứng khơng sử dụng SeNPs OCS chế tạo phương pháp chiếu xạ gamCó nhiều phương pháp áp dụng để tổng ma Co-60 hợp SeNPs từ ion Se phương pháp khử hóa Nano selen chế tạo phương pháp chiếu học sử dụng axit ascorbic, glutathione, hydrazine xạ gamma Co-60 với liều xạ 21 kGy, dùng olihydrate, làm chất khử [4, 5, 10, 11], phương pháp gochitosan 2% làm chất ổn định theo cơng trình sinh học sử dụng sinh khối vi khuẩn làm chất tác giả Nguyễn Quốc Hiến cộng [13] khử [8, 9], phương pháp chiếu xạ gamma Co-60 Kết phổ UV-Vis, màu sắc dung dịch dùng sodium dodecyl sulfate làm chất ổn định ảnh TEM thể hình cho thấy có etanol làm chất bắt gốc tự [12, 13] Trong đó, thay đổi màu dung dịch trước sau chiếu phương pháp chiếu xạ xem phương xạ, từ màu vàng cam sang màu đỏ cam Phổ UVpháp hiệu để tổng hợp SeNPs với ưu Vis cho thấy quang phổ mẫu đỉnh điểm như: (1) phản ứng thực nhiệt đơn, hẹp với cường độ yếu đỉnh hấp thụ dao độ phòng, (2) hiệu suất tạo SeNPs cao, (3) SeNPs động λ ~ 265 – 266,5 nm Các đỉnh max có độ tinh khiết cao khơng tồn dư chất khử, đỉnh hấp thụ OCS Selen ion SeNPs/ (4) dễ dàng điều chỉnh kích thước hạt SeNPs OCS khơng có đỉnh hấp thụ đặc trưng Kết cách thay đổi liều suất liều chiếu xạ, (5) ảnh TEM dung dịch SeNPs/OCS cho có khả sản xuất với khối lượng lớn [12, 13] thấy hạt SeNPs có dạng hình cầu, kích thước Trong nghiên cứu này, SeNPs tổng hợp phương pháp chiếu xạ gamma Co-60 sử dụng oligochitosan (OCS), polysaccarit có tính tương hợp sinh học, phân hủy sinh học, kháng khuẩn, kháng nấm đặc biệt có khả tăng cường hệ miễn dịch, làm chất ổn định khảo sát độ ổn định theo thời gian Chế phẩm SeNPs/ oligochitosan có độ tinh khiết cao với khả tăng cường phục hồi hệ miễn dịch định hướng áp dụng thực phẩm chức để hỗ trợ phục hồi sức khỏe cho bệnh nhân điều trị ung thư trung bình khoảng 41,75 ± 5,46 nm Sau chiếu xạ màu dung dịch H2SeO3 2,5 mM/OCS 2% chuyển từ màu vàng nhạt sang màu đỏ cam (Hình 1) chứng tỏ trình khử ion selen thành SeNPs diễn Nguyên nhân nước bị xạ ly tạo thành tác nhân có tính khử mạnh e- H• nên dễ dàng khử Se4+ thành Se0 Tuy nhiên, phổ UV-Vis mẫu SeNPs khơng có đỉnh hấp phụ đặc trưng giống nano kim loại khác bạc (λmax~400-500 nm), vàng (λmax~520-570 nm) Theo Lin, Wang [14], Shah cộng [15], SeNPs có đường kính nhỏ 100 nm khơng có đỉnh hấp thụ đặc trưng Hình Phổ UV-Vis dung dịch oligochitosan, selen ion, SeNPs ảnh TEM dung dịch SeNPs/OCS 20 Số 70 - Tháng 3/2022 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN (λmax) vùng bước sóng 200-800 nm Kết phổ UV-Vis kích thước hạt phù hợp với kết nhóm tác giả Hiến cộng (2018) [13], Kong cộng (2014) [16], Bai cộng (2017) [17] OCS thời gian 60 ngày nhiệt độ 4oC 27oC thể hình 2, Kết cho thấy, bảo quản dung dịch nhiệt độ 4oC có ổn định màu sắc (màu đỏ cam) không thay đổi 60 ngày Ở nhiệt độ 27oC, màu sắc chuyển đổi từ đỏ cam sang nâu đỏ 2.2.2 Độ ổn định theo thời gian dung dịch xuất cặn lắng ngày thứ 25 trở (hình SeNPs/OCS chế tạo phương pháp gamma 2) Kết ảnh TEM cho thấy kích thước hạt Co-60 SeNPs tăng dần theo thời gian lưu giữ Ở nhiệt o Kết theo dõi độ ổn định dung dịch SeNPs/ độ 27 C kích thước hạt SeNPs tăng nhanh Hình Sự thay đổi màu sắc dung dịch SeNPs/OCS bảo quản nhiệt độ 4ºC (A) 27oC (B) thời gian từ ngày đến 60 ngày Hình Ảnh TEM đồ thị phân bố kích thước hạt SeNPs/OCS bảo quản nhiệt độ 4ºC theo thời gian: ngày (A,a); 30 ngày (B,b) 45 ngày (C,c) Số 70 - Tháng 3/2022 21 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ HẠT NHÂN Hình Ảnh TEM đồ thị phân bố kích thước hạt SeNPs/OCS bảo quản nhiệt độ 27ºC theo thời gian: ngày (A,a); 15 ngày (B,b); 30 ngày (C,c) 45 ngày (D) so với lưu giữ 4oC Cụ thể kích thước hạt SeNPs tăng từ 41,75 ± 5,46 nm (0 ngày) lên 50,91 ± 6,71 51,92 ± 9,51 nm tương ứng với thời gian bảo quản 30 ngày 45 ngày Trong đó, kích thước hạt SeNPs lưu giữ 27oC tăng nhanh lên tới 115,09 ± 16,48 125,75 ± 22,88 nm tương ứng với thời gian bảo quản 15 30 ngày Ở thời gian 45 ngày mẫu keo tụ, kết dính lại với khơng thể xác định kích thước hạt ảnh TEM Các hạt nano selen sau tạo thành ổn định kích thước hạt oligochitosan Cũng giống polysaccarit khác alginate, dextran, gelatin, oligochitosan có nhóm chức giàu điện tử nhóm –NH2, -OH ổn định hạt SeNPs thơng qua liên kết phối trí lực đẩy tĩnh điện [6] Có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định dung dịch SeNPs nồng độ H2SeO3, pH, nồng độ chất ổn định, [12, 13] Trong đó, nhiệt độ ảnh hưởng lớn đến độ ổn định đặc trưng tính chất dung dịch SeNPs/OCS trình bảo quản Ở nhiệt độ thấp (4oC) màu sắc dung dịch SeNPs không thay đổi thời gian 60 ngày kích thước hạt có tăng nhẹ từ 41,75 đến 51,92 nm 45 ngày lưu giữ Trong đó, nhiệt độ 27oC màu sắc dung dịch có thay đổi rõ rệt từ màu vàng nhạt sang màu cam đậm có tượng keo tụ sau 25 ngày lưu giữ Kích 22 Số 70 - Tháng 3/2022 thước hạt tăng mạnh lên 125,75 nm sau 30 ngày lưu giữ Điều giải thích nhiệt độ thấp chuyển động Brown bị hạn chế, nhiệt độ tăng làm tăng chuyển động Brown, dẫn đến tăng xác suất va chạm hạt SeNPs, làm cho hạt kết dính lại với từ gây tượng keo tụ làm màu dung dịch đậm lên kích thước hạt tăng lên [12, 13] Kết theo thời gian lưu giữ kích thước hạt ngày lớn dần sau 45 ngày hạt SeNPs dung dịch lưu giữ 27oC phần lớn keo tụ kết ảnh TEM hình (D) minh chứng cho ảnh hưởng nhiệt độ đến kích thước hạt SeNPs Xu hướng tăng kích thước hạt SeNPs theo thời gian bảo quản dẫn đến màu sắc dung dịch (màu đỏ cam) đậm dần ghi nhận nghiên cứu Lin Wang (2005) [14], Bai cộng [17] Từ kết nhận thấy nhiệt độ thích hợp để bảo quản dung dịch SeNPs/OCS 4oC Tuy nhiên, phải tiêu tốn lượng để hạ nhiệt độ nhằm bảo quản dung dịch điểm hạn chế cho khả ứng dụng dung dịch SeNPs/OCS Ngoài ra, việc lưu trữ vận chuyển dung dịch SeNPs/OCS lúc thuận tiện Để khắc phục khuyết điểm mở rộng phạm vi ứng dụng nano selen, SeNPs dạng bột chế tạo THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN 2.2.3 Chế tạo SeNPs/OCS dạng bột nguyên tố selen (4,53%), cacbon (45,25%) phương pháp sấy phun oxy (50,22%) Kết hình cho thấy bột Dung dịch SeNPs/OCS sau chiếu xạ để ổn định SeNPs/OCS tạo kỹ thuật sấy phun 24 sau đem sấy phun tạo từ dung dịch SeNPs/OCS có độ tinh khiết cao với thành dạng bột mịn có màu cam đậm hình thành phần có nguyên tố oxi, cacbon Phổ EDX cho thấy bột SeNPs/OCS chứa selen Với độ tinh khiết cao, bột SeNPs thích hợp cho ứng dụng y sinh dược phẩm Hình (A) Dung dịch SeNPs/OCS, (B) SeNPs/OCS dạng bột phổ EDX bột SeNPs/OCS KẾT LUẬN Đã nghiên cứu chế tạo SeNPs có nồng độ 2,5 mM, kích thước hạt ~ 42 nm sử dụng oligochitosan làm chất ổn định phương pháp chiếu xạ γ-Co-60 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến độ ổn định dung dịch SeNPs/ OCS cho thấy nhiệt độ thích hợp để bảo quản dung dịch SeNPs/OCS 4oC Để tăng cường độ ổn định mở rộng ứng dụng, SeNPs/OCS dạng bột chế tạo phương pháp sấy phun Bột SeNPs/OCS có độ tinh khiết cao có triển vọng ứng dụng làm chất bổ sung thực phẩm chức nhằm tăng cường sức đề kháng, hỗ trợ phục hồi sức khỏe cho bệnh nhân tiểu đường điều trị ung thư số lĩnh vực khác cer Prevention and Therapy”, International Journal of Molecular Sciences, 20(1), 1-26, 2019 [2] S Skalickova, V Milosavljevic, K Cihalova, et al “Selenium nanoparticles as a nutrition supplement”, Nutrition, 33, 83-90, 2017 [3] C Pelyhe, M Mézes “Myths and facts about the effects of nano-selenium in farm animals- mini review”, 12(2), 1049-1052, 2013 [4] J Zhang, H Wang, X Yan, L Zhang “Comparison of short-term toxicity between nano-Se and selenite in mice”, Life Sciences, 76(10), 1099-1109, 2005 [5] J Zhang, X Wang, T Xu “Elemental selenium at nano size (nano-Se) as a potential chemopreventive agent with reduced risk of selenium toxicity: comparison with Se-methylselenocysteine in mice”, Toxicological Sciences, 101(1), 22-31, 2008 TÀI LIỆU THAM KHẢO [6] X Zhai, C Zhang, G Zhao, S Stoll, F Ren, X Leng “Antioxidant capacities of the selenium nanoparticles stabilized by chitosan”, Journal of nanobiotechnology, 15:4, 2017 [1] H.W Tan, H.Y Mo, A.T.Y Lau, Y.M Xu “Selenium Species: Current Status and Potentials in Can- [7] P Sonkusre, R Nanduri, P Gupta, S.S Cameotra “Improved extraction of intracellular biogenic sele- Số 70 - Tháng 3/2022 23 THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN nium nanoparticles and their specificity for cancer chemoprevention”, Journal of Nanomedicine & Nanotechnology, 5:2, 1000194, 2014 [8] E.N Ali, S.M El-Sonbaty, F.M Salem “Evaluation of selenium nanoparticles as a potential chemopreventive agent against lung carcinoma”, International Journal of Pharmaceutical Biological and ChemicalSciences, 2(4), 38-46, 2013 [9] E Faghfuri, M.H Yazdi, M Mahdavi, Z Sepehrizadeh, M.A Faramarzi, F Mavandadnejad, A.R Shahverdi “Dose-response relationship study of selenium nanoparticles as an immunostimulatory agent in cancer-bearing mice”, Archives of medical research, 46(1), 31-37, 2015 [10] Y He, S Chen, Z Liu, C Cheng, H Li, M Wang “Toxicity of selenium nanoparticles in male SpragueDawley rats at supranutritional and nonlethal levels”, Life Sciences, 115(1-2), 44-51, 2014 [11] S.K Mehta, S Chaudhary, S Kumar, K.K Bhasin, K Torigoe, H Sakai, M Abe “Surfactant assisted synthesis and spectroscopic characterization of selenium nanoparticles in ambient conditions”, Nanotechnology 19(29):295601, 2008 [12] Y Zhu, Y Qian, H Huang, M Zhang “Preparation of nanometer-size selenium powders of uniform particle size by γ-irradiation”, Materials Letters, 28(13), 119-122, 1996 [13] N.Q Hien, P.D Tuan, D.V Phu, L.A Quoc, N.T.K Lan, N.N Duy, T.T Hoa “Gamma Co-60 ray irradiation synthesis of dextran stabilized selenium nanoparticles and their antioxidant activity”, Materials Chemistry and Physics, 205, 29-34, 2018 [14] Z.H Lin, C.R.C Wang “Evidence on the sizedependent absorption spectral evolution of selenium nanoparticles”, Materials Chemistry and Physics, 92(2-3), 591-594, 2005 [15] C Shah, M Kuma, K.K Pushpa, P.N Bajai.” Acrylonitrile-Induced Synthesis of Polyvinyl AlcoholStabilized Selenium Nanoparticles”, Crystal Growth & Design, 8(11), 4159 – 4164, 2008 [16] H Kong, J Yang, Y Zhang, Y Fang, K Nishinari, G.O Philips “Synthesis and antioxidant properties of gum arabic-stabilized selenium nanoparticles”, International Journal of Biological Macromolecules, 65, 155-162, 2014 24 Số 70 - Tháng 3/2022 [17] K Bai, B Hong, J He, Z Hong, R Tan “Preparation and antioxidant properties of selenium nanoparticles-loaded chitosan microspheres”, International Journal of Nanomedicine, 21:12:4527-4539, 2017 ... khơng sử dụng SeNPs OCS chế tạo phương pháp chiếu xạ gamCó nhiều phương pháp áp dụng để tổng ma Co-60 hợp SeNPs từ ion Se phương pháp khử hóa Nano selen chế tạo phương pháp chiếu học sử dụng axit... nồng độ 2,5 mM, kích thước hạt ~ 42 nm sử dụng oligochitosan làm chất ổn định phương pháp chiếu xạ γ-Co-60 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến độ ổn định dung dịch SeNPs/ OCS cho thấy nhiệt độ. .. phạm vi ứng dụng nano selen, SeNPs dạng bột chế tạo THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HẠT NHÂN 2.2.3 Chế tạo SeNPs/OCS dạng bột nguyên tố selen (4,53%), cacbon (45,25%) phương pháp sấy phun oxy