1 NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT PHÂN TÍCH SAI HÌNH NHIỄM SẮC THỂ DO TỔN THƢƠNG PHÂN TỬ DNA Ở PHA G2 ĐỂ ĐÁNH GIÁ ĐỘ NHẠY CẢM PHÓNG XẠ CỦA TẾ BÀO LYMPHO MÁU NGOẠI VI NGƢỜI PHẠM NGỌC DUY, CHẾ QUANG TUẤN, TRẦN THAN[.]
NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT PHÂN TÍCH SAI HÌNH NHIỄM SẮC THỂ DO TỔN THƢƠNG PHÂN TỬ DNA Ở PHA G2 ĐỂ ĐÁNH GIÁ ĐỘ NHẠY CẢM PHÓNG XẠ CỦA TẾ BÀO LYMPHO MÁU NGOẠI VI NGƢỜI PHẠM NGỌC DUY, CHẾ QUANG TUẤN, TRẦN THANH MAI, LÊ THỊ THÙY LINH, HÁN HUỲNH DIỆN, LÊ THỊ BÍCH THY, PHẠM XUÂN HẢI u t u Email: phamngocduynri@gmail.com t T ắ : Phương pháp xạ trị bên cạnh tác động tiêu diệt tế bào ung thư, cịn ảnh hưởng khơng chọn lọc đến tế bào thường xung quanh Kỹ thuật phân tích sai hình nhiễm sắc thể tổn thương phân tử DNA pha G2 chu trình tế bào kỳ vọng ứng dụng để đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ nhằm nâng cao hiệu điều trị an toàn xạ Trong nghiên cứu này, mẫu tế bào lympho máu ngoại vi người nuôi cấy in vitro chiếu xạ nguồn phát tia X với liều 0,5; 1,0; 2,0 4,0 Gy thời điểm 69 sau nuôi cấy, tế bào pha G2 Mẫu tiếp tục xử lý với caffeine nồng độ mM, thu hoạch tế bào tiêu hiển vi phân tích để xác định tần số sai hình kiểu nhiễm sắc tử mẫu có khơng xử lý caffeine Độ nhạy cảm phóng xạ đánh giá dựa số IRS = (G2 / G2caffeine) × 100% Kết cho thấy phương pháp có tiềm ứng dụng đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ cá nhân triển vọng đánh giá cho bệnh nhân ung thư trước xạ trị T ộ nh y cảm phóng x , sai hình nhiễm sắc t , x trị, caffeine, chu trình tế bào, đ ểm kiểm soát G2 MỞ ĐẦU trị nh ng phương pháp phổ biến hiệu để điều trị ung thư Mục đích xạ trị loại bỏ tồn tế bào ung thư khối u nguyên phát đồng thời giảm thiểu tổn thương cho tế bào mô lành xung quanh Có chiến ược quan tâm nghiên cứu nhằm nâng cao hiệu xạ trị bao gồm phát triển thiết bị xạ trị tiên tiến nghiên cứu hiệu ứng sinh học thích hợp hỗ trợ cá nhân hóa điều trị (personalized treatment) [3] Các kỹ thuật tiên tiến sử dụng xạ trị xác bao gồm xạ trị điều biến liều (IMRT) hỗ trợ kỹ thuật hình ảnh sử dụng chùm hạt proton ion nặng carbon (partic e therapy) giúp nâng cao hiệu điều trị cho bệnh nhân Ngoài ra, việc kết hợp gi a phương pháp xạ trị tiên tiến đánh giá hiệu ứng sinh học kỳ vọng mang lại kết tốt điều trị ung thư Có nhiều yếu tố sinh học ảnh hưởng đến tính kháng xạ hay nhạy xạ tế bào khối u, độ nhạy cảm tế bào (khả sửa sai tổn thương phân tử DNA); m i trường xung quanh khối u (nồng độ oxy); kích thước khối u trường hợp khác biệt độ nhạy cảm phóng xạ âm sàng yếu tố di truyền hay tính nhạy cảm phóng xạ nội tế bào [5, 9] Nh ng yếu tố iên quan đến tế bào khối u tế bào bình thường [4] Nghiên cứu hiệu ứng tác động in vitro xạ ion hóa cấp độ tế bào nhằm đánh giá mức độ tổn thương khả sửa sai phân tử DNA tế bào kỳ vọng mang lại phương pháp tiên ượng tính nhạy cảm phóng xạ cho bệnh nhân trước xạ trị Một phương pháp phân tích sử dụng phổ biến phân tích sai hình nhiễm sắc thể (NST) tổn thương phân tử DNA pha G2 chu trình tế bào (G2 assay) Phương pháp đánh giá phương pháp dự đốn đáng tin cậy độ nhạy có tương quan tốt dùng để nghiên cứu bệnh nhân ung thư [1] ầu hết nghiên cứu độ nhạy cảm phóng xạ tế bào thực tế bào ympho nguyên bào sợi, tế bào ympho có đặc điểm ưu quần thể tế bào bình thường kh ng phân chia u n đồng pha G chu trình tế bào hu trình phân chia tế bào bình thường qua pha G -G , S, G2 M Khi tế bào bị chiếu xạ pha G , phân tử N bị tổn thương dạng chuỗi đơn (single-strand break – SS ) chuỗi đ i (double-strand break – S ) Trong đó, tổn thương SS sửa sai dễ dàng nhờ chế bắt cặp bổ sung; tổn thương S phức tạp hơn, kh ng phục hồi phục hồi nhầm hình thành sai hình kiểu NST (mảnh, đa tâm, v.v.) quan sát tế bào pha M Khi tế bào bị chiếu xạ pha G2, pha tế bào sinh tổng hợp nhân đ i phân tử N nên pha chủ yếu có tổn thương dạng S hình thành sai hình kiểu đứt gãy nhiễm sắc tử (NSTử) quan sát tế bào pha M Phân tích xác định tần số sai hình dạng đứt gãy NSTử chiếu xạ pha G2 chu trình tế bào (G2-assay) đánh giá độ tính nhạy cảm phóng xạ tế bào Kết nghiên cứu Poggioli cộng (2 ) cho thấy nhóm bệnh nhân ung thư vú nhạy xạ nhóm đối chứng phương pháp phân tích G2-CA-assay phù hợp để phân tích độ nhạy cảm phóng xạ G assay [8] Tuy nhiên, nhiều nghiên cứu khác biệt độ nhạy cảm phóng xạ nhóm đối tượng mắc bệnh ung thư nhóm đối chứng nghiên cứu kỹ thuật [6] Điều theo nh ng phát Pante ias Terzoudi (2 ), phản ánh việc bệnh nhân có mang đột biến đa hình gen điều hịa nhân tố cyc inK điểm kiểm soát G2 (G2-checkpoint) gây ảnh hưởng đến khả sửa sai phân tử N Khi phân tử N bị tổn thương chiếu xạ pha G2 tế bào hoạt hóa G2-checkpoint tạm d ng chu trình để tế bào có thời gian huy động nhân tố sửa sai N trước tế bào đến pha M Như vậy, G2-checkpoint hoạt động bình thường hiệu sửa sai N cao nên sai hình NSTử quan sát pha M giảm, kh ng phản ánh hiệu tác động xạ ion hóa Trong đó, nhóm bệnh nhân ung thư có mang gen đột biến iên quan đến điều hịa chu trình tế bào nên biểu nh ng gen tác động đến G2checkpoint mức độ khác àm cho sai hình NSTử quan sát pha M khác biệt gi a bệnh nhân Để giải vấn đề này, Pante ias Terzoudi (2 ) bổ sung caffeine (4 mM) nu i cấy để tế bào kh ng d ng G2-checkpoint, nh ng tổn thương N xạ ion hóa gây pha G2 kh ng sửa sai G2-checkpoint nên kết phân tích sai hình NSTử pha M phản ánh tác động xạ ion hóa t ng đối tượng [6] Bài báo trình bày quy trình kỹ thuật G2 assay kết nghiên cứu thử nghiệm đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ nhóm người bình thường, làm tiền đề cho nh ng nghiên cứu đối tượng bệnh nhân ung thư với kỳ vọng nâng cao hiệu phương pháp xạ trị NỘI DUNG 2.1 Đối ƣợng p ƣơng p áp - Đối tượng nghiên cứu: 06 mẫu tế bào lympho máu ngoại vi người bình thường (5 n , nam t 24 – 36 tuổi) - Phương pháp chiếu xạ in vitro: Mẫu máu đựng ọ thủy tinh trung tính (thể tích m ọ) để chiếu xạ hiếu xạ in vitro nguồn phát tia (2 k ) iều ,5; , ; 2, ; 4, Gy vị trí có suất iều khoảng ,5 Gy phút đối chứng không chiếu xạ - Nu i cấy tế bào ympho ngoại vi toàn phần: ,6 mL máu toàn phần nu i cấy 5,4 mL m i trường RPMI- 64 (Sigma drich) có bổ sung huyết thanh, Phytohemag utinin (Invitrogen), Kanamycine su fate, ủ điều kiện 37 °C 5% CO2 Sau 69 giờ, tiến hành ly tâm, loại bỏ m i trường, chiếu xạ mẫu tế bào với liều thiết kế Thể tích mẫu tế bào sau chiếu xạ chia đ i, bổ sung lại m i trường RPMI1640 (Sigma Aldrich), phần không xử lý caffeine, phần xử lý caffeine nồng độ mM, ủ tế bào 37 °C/5% CO2 phút, sau xử o cemid trước thu hoạch Thu hoạch tế bào àm tiêu hiển vi nhuộm Giemsa - Phân tích tiêu hiển vi: Sử dụng kính hiển vi IO Imager kết hợp phần mềm Metafer để tự động qu t chụp ảnh metaphase, phân tích xác định tần số sai hình NSTử hình ảnh metaphase t mẫu nu i cấy - Tính số MI (Mitotic Index %): MI (%) = Số tế bào nguyên phân Số tế bào nguyên phân + số nhân lympho x 100 - Đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ (Individual radiosensitivity – IRS) thơng qua số: IRS = (G2/G2caffeine) × 100% Nếu IRS < 30%: kháng xạ; ≤ IRS ≤ : bình thường; IRS > 50%: nhạy xạ (Pantelias Terzoudi, 2011) đồ thị số iệu: Sử dụng phần mềm xce phân tích thống kê Sigmap ot 2.2 Kết Chỉ s phân bào Mitotic Index (MI %) – ák ả 06 mẫu tế bào lympho máu ngoại vi tồn phần t để ni cấy in vitro chiếu xạ liều ; ,5; , ; 2, làm phần, phần xử lý caffeine, phần không xử tương ứng thể bảng 1a 1b để vẽ ă s trưởng tế bào: người khỏe mạnh thu thập 4, Gy, sau mẫu chia lý caffeine Chỉ số MI % mẫu Bảng 1a 1b Chỉ số MI (%) mẫu tương ứng không có xử lý caffeine Mẫu khơng caffeine W1 W2 W3 W4 W5 W6 MI (%) Gy 0,5 Gy 1,0 Gy 2,0 Gy 4,0 Gy 4,19 3,37 1,52 2,98 2,39 2,58 Trung bình 2,84 SD 0,91 0,21 0,21 0,05 0,06 0,07 0,12 0,12 0,07 0,15 0,16 0,03 0,03 0,04 0,07 0,08 0,06 0,11 0,14 0,03 0,05 0,06 0,03 0,07 0,05 0,14 0,22 0,03 0,04 0,07 0,10 0,10 0,07 Mẫu có caffeine MI (%) Gy 0,5 Gy 1,0 Gy 2,0 Gy 4,0 Gy C1 C2 C3 C4 C5 C6 2,40 2,63 1,20 1,32 1,62 1,06 Trung bình 1,71 SD 0,66 1,28 1,19 0,26 0,26 0,30 0,51 0,63 0,48 1,30 0,88 0,20 0,16 0,42 0,37 0,56 0,45 0,43 0,68 0,07 0,09 0,10 0,12 0,25 0,25 0,25 0,42 0,07 0,06 0,12 0,10 0,17 0,14 Chỉ số MI trung bình khơng chiếu xạ mẫu không xử caffeine cao mẫu có xử lý caffeine (p = , 4) ịn mẫu chiếu xạ ngược lại, chiếu xạ liều 0,5 1,0 Gy số MI trung bình mẫu có xử caffeine cao mẫu không xử lý caffeine (p = 0,05) Khi chiếu xạ liều 2,0 4,0 Gy số MI thấp mẫu có xử caffeine có khuynh hướng cao mẫu khơng xử lý caffeine (hình 1) Hình Sự khác biệt số MI trung bình mẫu có kh ng xử lý caffeine chiếu xạ in vitro liều 0,5 – 4,0 Gy Chỉ s c chế phân bào Mitotic Inhibition (MIn %) – checkpoint chu trình tế bào với b c x ion hóa: á độ đáp ng G2- Chỉ số MIn hiệu số số MI liều Gy với số MI liều chiếu tương ứng, thể qua bảng 2a 2b Bảng 2a 2b Chỉ số MIn (%) mẫu tương ứng khơng có xử lý caffeine Mẫu không caffeine W1 W2 W3 W4 W5 W6 Trung bình SD MIn (%) 0,5 Gy 1,0 Gy 2,0 Gy 4,0 Gy 3,98 3,16 1,47 2,92 2,32 2,46 2,72 0,85 4,04 3,21 1,49 2,95 2,35 2,51 2,76 0,86 4,08 3,23 1,49 2,93 2,33 2,55 2,77 0,88 4,05 3,15 1,49 2,94 2,32 2,48 2,74 0,86 Mẫu có caffeine C1 C2 C3 C4 C5 C6 Trung bình SD MIn (%) 0,5 Gy 1,0 Gy 2,0 Gy 4,0 Gy 1,12 1,44 0,94 1,06 1,32 0,55 1,07 0,31 1,10 1,75 1,00 1,16 1,20 0,69 1,15 0,35 1,97 1,95 1,13 1,23 1,52 0,94 1,46 0,43 2,15 2,21 1,13 1,26 1,50 0,96 1,54 0,53 Chỉ số MIn trung bình mẫu khơng xử caffeine cao mẫu có xử lý caffeine tương ứng (p = , ) Đối với mẫu khơng xử lý caffeine, số MIn trung bình khơng khác biệt so sánh gi a liều chiếu xạ khác Đối với mẫu có xử lý caffeine, số MIn trung bình tăng tăng iều chiếu chứng tỏ mức độ đáp ứng G2checkpoint tăng, àm cho tế bào bị ức chế (hình 2) Hình Khả đáp ứng tế bào mẫu có kh ng xử lý caffeine chiếu xạ in vitro liều 0,5 – 4,0 Gy Sai hình d đ t gãy NST chiếu x ion hóa pha G2 chu trình tế bào: Bức xạ ion hóa tác động vào tế bào pha G0 dạng tổn thương phân tử DNA tạo DSB, t hình thành sai hình kiểu NST mảnh NST, NST đa tâm, NST vịng, v.v., quan sát tế bào pha M Trong đó, tế bào bị chiếu xạ pha G2, mà tế bào sinh tổng hợp nhân đ i phân tử N , nh ng tổn thương dạng S hình thành sai hình kiểu đứt gãy NSTử quan sát tế bào pha M (hình 3a) Ngoài ra, chiếu xạ với liều cao (4,0 Gy) xuất tế bào có NST bị đứt gãy nghiêm trọng, gọi “rough cell – tế bào hỗn lo n” (hình 3b) Hình 3a Tế bào có đứt gãy NSTử Hình 3b “Rough cell” Số đứt gãy NSTử trung bình tế bào tăng tăng iều chiếu mẫu có xử lý caffeine cao mẫu khơng xử lý caffeine Khi chiếu xạ liều 4,0 Gy rough cell chiếm tỷ lệ cao số tế bào phân tích được, số liệu đồ thị thể qua bảng 3a, 3b hình Bảng số IRS ( ) xác định theo công thức Tất mẫu chiếu dải liều 0,5 – 2,0 Gy đa số có ≤ IRS ≤ (hình 5) Bảng 3a 3b Số đứt gãy NSTử rough cell mẫu tương ứng khơng xử lý caffeine có xử lý caffeine chiếu xạ Mẫu không caffeine W1 W2 W3 W4 W5 W6 Đứt gãy NSTử/tế bào 0,5 Gy 1,0 Gy 2,0 Gy 1,35 1,91 5,39 1,30 1,72 2,68 1,10 2,58 1,94 1,62 2,42 2,55 1,26 2,50 2,41 1,54 3,14 5,72 Trung bình 1,36 2,38 3,45 SD 0,19 0,51 1,65 Rough cell (%) 4,0 Gy 80,00 62,00 57,69 74,00 67,31 86,00 71,17 10,83 Mẫu có caffeine Đứt gãy NSTử/tế bào 0,5 Gy 1,0 Gy C1 3,15 6,05 C2 3,24 4,66 C3 3,04 5,64 C4 4,12 6,98 C5 4,08 8,48 C6 3,70 6,74 Trung bình 3,56 6,43 SD 0,48 1,30 2,0 Gy 10,76 6,44 6,32 8,80 7,64 12,46 8,74 2,46 Rough cell (%) 4,0 Gy 84,00 62,00 43,86 74,00 82,00 82,00 71,31 15,73 Hình Biến động số đứt gãy NSTử mẫu tương ứng khơng xử lý caffeine có xử lý caffeine chiếu xạ Chỉ số IRS ( ) xác định theo công thức IRS = (G2/G2caffeine) × 100%, kết thể bảng Tất mẫu chiếu dải liều 0,5 – 2, Gy đa số có ≤ IRS ≤ (hình 5) ảng hỉ số IRS ( ) mẫu chiếu dải liều 0,5 – 2,0 Gy IRS (%) Mẫu 0,5 Gy 1,0 Gy 2,0 Gy 42,90 31,56 50,10 40,12 36,91 41,66 36,18 45,80 30,67 39,32 34,69 28,93 30,88 29,48 31,59 41,62 46,59 45,91 Hình iến động số IRS ( ) mẫu chiếu dải liều 0,5 – 2,0 Gy 2.3.Bàn luận Chỉ số phân bào MI % phản ánh khả sinh trưởng phân chia tế bào lympho nuôi cấy in vitro Ở loạt mẫu không chiếu xạ, số MI (%) trung bình mẫu khơng xử lý caffeine (W) cao mẫu có xử lý caffeine (C) Điều cho thấy caffeine yếu tố ảnh hưởng đến q trình tế bào vào pha M nên caffeine thêm vào thời gian ngắn (20 phút) Cịn loạt mẫu có chiếu xạ, số MI (%) trung bình mẫu C lại cao mẫu W số giảm tăng iều chiếu Chỉ số MI (%) số liệu để tính số MIn ( ), qua đánh giá khả đáp ứng G2-checkpoint chu trình tế bào với xạ ion hóa Trong nghiên cứu này, số MIn (%) trung bình mẫu W khơng khác gi a liều chiếu mẫu C số MIn (%) trung bình tăng tăng iều chiếu chúng thấp mẫu W Qua cho thấy mức độ đáp ứng khác G2-checkpoint chu trình tế bào Ở mẫu W, chiếu xạ pha G2, giá trị MIn ( ) cao mẫu C tế bào người bình thường bị chiếu xạ hoạt hóa điểm checkpoint chu trình tế bào, có điểm G2checkpoint Trong điều kiện bình thường, G2-checkpoint hoạt hóa CDC25 có chức ức chế CDC2 cho phép chu trình tế bào diễn bình thường Khi có tác nhân gây tổn thương phân tử N , để hoạt hóa CHK1 TM, Wee phosphoryl hóa nhằm ức chế CDC25 làm cho không kết hợp với CDC2, kết chu trình tế bào bị d ng G2 [3] Tế bào d ng pha G2 để thực chức sửa sai tổn thương phân tử DNA, phân tử N phục hồi hồn tồn tế bào tiếp tục vào pha M để tiếp tục phân chia, nh ng tổn thương N nghiêm trọng phục hồi tế bào vào đường chết theo chu trình (apoptosis – programmed cell death) Giá trị MIn (%) cao giá trị MI (%) thấp mẫu W chiếu xạ pha G2 cho thấy tế bào bình thường đáp ứng cao với tác động xạ ion hóa, chúng hoạt hóa chế để bảo vệ tế bào, hạn chế gây tổn thương cho tế bào hệ sau Còn mẫu C, giá trị MIn (%) thấp có tăng tăng iều chiếu xạ, đồng thời giá trị MI ( ) cao mẫu W, điều giải thích caffeine yếu tố làm giảm khả hoạt động G2-checkpoint, làm cho tế bào bị tổn thương xạ pha G2 tiếp tục vào pha M để phân chia o đó, việc sử dụng caffeine yếu tố để ức chế G2-checkpoint giúp đánh giá khả đáp ứng tế bào chiếu xạ pha G2, đồng thời phân tích mức độ tổn thương tế bào với thị sai hình NSTử đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ tế bào [6] Phân tích tối thiểu metaphase mẫu liều chiếu để xác định số ượng sai hình NSTử Đối với mẫu khơng chiếu xạ, tần số sai hình NSTử khơng khác biệt so với kết nghiên cứu sai hình NSTử ngẫu nhiên dân chúng mà phịng thí nghiệm thực trước [7] Trong dải liều 0,5 – 2,0 Gy, số đứt gãy NSTử trung bình tế bào tăng tăng iều chiếu cho thấy khả gây tổn thương S có tương quan với liều ượng xạ Khi chiếu xạ liều 4,0 Gy liều tương đối cao gây nh ng tổn thương nghiêm trọng cho tế bào mà quan sát dạng “rough cell” nên khó để định ượng số đứt gãy NSTử, tỷ lệ “rough cell” mẫu W phân tích tương đương Như vậy, để nghiên cứu độ nhạy cảm phóng xạ tế bào lympho máu ngoại vi dải liều thích hợp sử dụng ≤ 2, Gy, xem xét sử dụng liều 2,0 Gy mức liều phù hợp với iều S nghiên cứu tỷ lệ sống sót in vitro dự đoán đáp ứng khối u chiếu xạ in vivo [5] Khi chiếu xạ mẫu với liều 0,5; 1,0 2,0 Gy tế bào pha G2, ta thấy số đứt gãy NSTử trung bình tế bào nhóm mẫu cao nhóm mẫu W, điều cho thấy khả đáp ứng G2checkpoint với xạ Với nhóm mẫu W, không xử lý caffeine nên G2-checkpoint hoạt động với chức d ng chu trình để tế bào s a ch a, giảm thiểu tổn thương N trước chuyển qua pha M nên số đứt gãy NSTử trung bình tế bào nhóm thấp ới nhóm mẫu C, caffeine gây ức chế G2-checkpoint nên tế bào không d ng G2 để sửa sai trước đến pha M, số đứt gãy NSTử trung bình tế bào nhóm cao Để hạn chế khác biệt iên quan đến điều hịa chu trình tế bào G2-checkpoint, số IRS ( ) sử dụng [6] 06 mẫu chiếu dải liều 0,5 – 2, Gy đa số có 30% ≤ IRS ≤ , cho thấy độ nhạy cảm phóng xạ nằm khoảng bình thường Để đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ dựa vào số IRS (%), Pantelias Terzoudi nghiên cứu nhóm đối tượng gồm 78 người bình thường bệnh nhân T ( taxia Te angiectasia) bệnh nhân T đối tượng khả điều hịa d ng chu trình tế bào pha G2 có tác động xạ ion hóa Chỉ số IRS (%) nhóm người bình thường tuân theo luật phân bố chuẩn với giá trị trung bình M = , độ lệch chuẩn SD = 9,8% Dựa giá trị này, độ nhạy cảm phóng xạ cá nhân phân loại gồm IRS < MV – SD kháng xạ, IRS > MV + SD nhạy xạ MV – S ≤ IRS ≤ M + S bình thường Với cách phân loại vậy, nghiên cứu nhóm người bình thường có 6/78 người nhạy xạ (IRS > 50%), 78 người kháng xạ (IRS < ) 64 78 người bình thường (3 ≤ IRS ≤ ), tất bệnh nhân T có IRS > 70% thể nhạy xạ [6] Trong nhóm người bình thường mà chúng tơi nghiên cứu kết cho thấy độ nhạy cảm phóng xạ mức bình thường, phù hợp với phân loại Tuy nhiên, nghiên cứu bước đầu nên số ượng mẫu phân tích cịn Trong thời gian tới, số ượng mẫu người bình thường nghiên cứu thu thập thêm để có số liệu đầy đủ mở rộng nghiên cứu đối tượng bệnh nhân ung thư, điển hình bệnh nhân ung thư vú trước xạ trị Qua tạo tiền đề thực nghiên cứu đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ chiến ược cá nhân hóa điều trị KẾT LUẬN Kỹ thuật phân tích sai hình NST xạ ion hóa làm tổn thương phân tử DNA pha G2 chu trình tế bào kết hợp với xử lý caffeine kỹ thuật tiềm sử dụng để đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ nội tế bào Mở rộng ứng dụng kỹ thuật nói riêng kỹ thuật phân tích tế bào nói chung cần thiết để phát triển cơng cụ thích hợp nhằm đánh giá, dự đốn độ nhạy cảm phóng xạ, qua nâng cao hiệu điều trị cho bệnh nhân TÀI LIỆU THAM KHẢO aria, K , Warren, , Roberts, S , West, M , Scott, “ hromosoma radiosensitivity as a marker of predisposition to common cancers?”, Br J Cancer, 84, 892–6, 2001 Baumann, M., Krause, M., Overgaard, J., Debus, J., Bentzen, S.M., Daartz, J., Richter, C., Zips, , ortfe d, T “Radiation onco ogy in the era of precision medicine”, Nat Rev Cancer, 1–16, 2016 uddihy, R , O’ onne , M J “ e -cyc e responses to N damage in G2”, Int Rev Cytol, 222, 99–140, 2003 orr, W “Radiobio ogica mode s of norma tissue reactions”, Strahlenther Onkol, 174, 4–7, 1998 IAEA-TECDOC- 297 “Predictive assays and their ro e in se ection of radiation as the therapeutic moda ity” I , I NN , 2 Pante ias, G , Terzoudi, G I “ standardized G2-assay for the prediction of individual radiosensitivity”, Radiother Oncol., 101, 28–34, 2011 Pham, N.D., Nguyen, M.H., Tran, Q., Che, Q.T., Nguyen, V.H., Phan, V.T., Pham, V.D., Ern Lee, S , o, T L “ etermination of Spontaneous icentric requencies and stab ishment of Doseresponse Curves after Expose of Human Peripheral Blood Lymphocytes to Low and High Dose Rate 60Co Gamma Rays – The asis for ytogenetic iodosimetry in ietnam”, Int J Radiat Biol 95, 307–313, 2018 Poggioli, T., Sterpone, S., Palma, S , ozzi, R , Testa, “G and G2 hromosoma ssays in the va uation of Radiosensitivity in a ohort of Ita ian reast ancer Patients”, J Radiat Res., 51, 615–619, 2010 Turesson, I , Nyman, J , o mberg, , Od n, “Prognostic factors for acute and late skin reactions in radiotherapy patients”, Int J Radiat Oncol., Biol., Phys., 36, 1065–1075, 1996 ... xạ pha G2, đồng thời phân tích mức độ tổn thương tế bào với thị sai hình NSTử đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ tế bào [6] Phân tích tối thiểu metaphase mẫu liều chiếu để xác định số ượng sai hình. .. trước xạ trị Qua tạo tiền đề thực nghiên cứu đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ chiến ược cá nhân hóa điều trị KẾT LUẬN Kỹ thuật phân tích sai hình NST xạ ion hóa làm tổn thương phân tử DNA pha G2 chu... trình tế bào kết hợp với xử lý caffeine kỹ thuật tiềm sử dụng để đánh giá độ nhạy cảm phóng xạ nội tế bào Mở rộng ứng dụng kỹ thuật nói riêng kỹ thuật phân tích tế bào nói chung cần thiết để phát