Untitled Science & Technology Development, Vol 20, No T4 2017 Trang 138 Chế tạo vi cầu chitosan ứng dụng trong y sinh bằng phương pháp khâu mạng nhũ tương • Từ Thị Trâm Anh • Lê Văn Hiếu • Hà Thúc Huy[.]
Science & Technology Development, Vol 20, No.T4-2017 Chế tạo vi cầu chitosan ứng dụng y sinh phương pháp khâu mạng nhũ tương • • • Từ Thị Trâm Anh Lê Văn Hiếu Hà Thúc Huy Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-HCM (Bài nhận ngày 23 tháng 12 năm 2016, nhận đăng ngày 30 tháng 10 năm 2017) TÓM TẮT Phương pháp khâu mạng nhũ tương sử cầu, với kích thước trung bình vi cầu giảm dụng để chế tạo vi cầu chitosan Trong đó, ảnh tăng tốc độ khuấy, tăng tỉ lệ O/W, giảm tỉ lệ hưởng kĩ thuật chế tạo tốc độ khuấy, tỉ lệ O/E, tăng hàm lượng chất khâu mạng Khi pha dầu pha nước (O/W), tỉ lệ pha dầu tốc độ khuấy 6000 vịng/phút, tỉ lệ O/E=1,5, chất nhũ hóa Span80 (O/E), hàm hượng chất O/W=15, tỉ lệ mol chitosan khâu mạng glutaraldehyde lên cấu trúc sản glutaradehyde R=1 kích thước trung bình phẩm khảo sát Cấu trúc hình thái sản vi cầu 2,40 μm, độ phân tán kích thước hẹp phẩm phân tích phương pháp quang Có thể sử dụng vi cầu chitosan để làm giá mang phổ hồng ngoại (FT-IR), kính hiển vi quang học cho hệ dẫn truyền thuốc mục tiêu nhờ vào OTM, phương pháp tán xạ laser động (DLS) Kết tính đáp ứng pH chúng phân tích cho thấy sản phẩm có dạng hình Từ khóa: vi cầu chitosan, glutaraldehyde, khâu mạng nhũ tương MỞ ĐẦU Khi đưa vào thể lượng đáng kể, thuốc ảnh hưởng đến mô quan bình thường khơng mang bệnh, dẫn đến tác dụng phụ nghiêm trọng Một phương pháp hiệu để khắc phục vấn đề phát triển hệ thống phân phối thuốc mục tiêu để nhả loại thuốc hoạt tính sinh học vị trí mong muốn Điều làm tăng hiệu điều trị thuốc thông qua cải thiện ảnh hưởng thuốc đến thể phân bố sinh học thuốc Hệ thống phân phối thuốc mục tiêu bao gồm phần: tác nhân trị liệu, tác nhân nhắm mục tiêu hệ thống vận chuyển Thuốc kết hợp cách hấp thụ thụ động liên kết hóa học vào hệ thống vận chuyển Sự lựa chọn phân tử vận chuyển quan trọng ảnh hưởng đáng kể đến tính chất thuốc Một loạt vật liệu polymer tự nhiên tổng hợp, lipid dendrimer sử dụng Trang 138 vật liệu vận chuyển thuốc Trong đó, polysaccharide nhận nhiều quan tâm tính chất vật lí sinh học vượt trội Chitosan polysaccharide tự nhiên phổ biến tìm thấy vỏ động vật giáp xác cua tôm Loại polymer thu hút quan tâm ngày nhiều dược phẩm y sinh học ứng dụng tính chất hóa lý độc đáo số tính chất có lợi tương thích sinh học, phân hủy sinh học, độc tính thấp [1] Do đó, chitosan xem loại vật liệu tiềm hệ thống vận chuyển thuốc có mục tiêu [2, 3] Vi cầu hạt rắn hình cầu có kích thước khoảng 1–1000 μm Vi cầu chitosan có tính chất trương nở phụ thuộc vào pH nên sử dụng vi cầu chitosan làm hệ thống dẫn thuốc, chúng có khả làm giảm nồng độ thuốc vị trí khơng phải mục tiêu cần chữa trị, đồng thời bảo vệ loại thuốc có tính khơng ổn định TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KH&CN, TẬP 20, SOÁ T4- 2017 trước sau tiêm, trước thuốc hoạt động vị trí mong muốn Bên cạnh cịn có khả điều khiển hoạt động thuốc thể, dược động học, phân phối đến mô tương tác đến tế bào thuốc kiểm sốt khả nhả thuốc [4] Tính chất vi cầu chitosan hình dạng, kích thước, độ khâu mạng có ảnh hưởng lớn đến khả tải thuốc hệ, nghiên cứu chủ yếu tập trung vào việc kiểm sốt tính chất sản phẩm vi cầu chitosan thơng qua thơng số thực nghiệm q trình chế tạo vi cầu VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Vật liệu Chitosan (CS) mua từ công ty Chitoworld, KCN Tân Tạo, Q Bình Tân, Tp Hồ Chí Minh có DDA ≈ 90 %, kích thước 90 mesh, hàm lượng tro 0,6 % deacetyl hóa thêm phịng thí nghiệm để thu chitosan có độ deacetyl hóa cao (HDCS) với DDA ≈ 99 %, Mn = 1,5848 × 104, Mw = 3,0154 × 104, PI = 1,9027 Acetic axcid (AcOH) (99,8 %, Trung Quốc), n-heptane (CH3(CH2)5CH3) (99 %, Trung Quốc), Span 80 (C24H44O6) (99,8 %, Trung Quốc), glutaraldehyde (99,9 %, Merck-Đức), ether dầu hỏa 60-90 (98 %, Trung Quốc), ethanol (99 %, Việt nam), acetone (99 %, Việt Nam) Phương pháp Chế tạo vi cầu chitosan phương pháp khâu mạng nhũ tương Quy trình chế tạo vi cầu chitosan phương pháp vi nhũ tương mô tả Hình Hệ nhũ tương đảo nước dầu sử dụng nghiên cứu gồm thành phần sau: pha nước (pha phân cực,W) dung dịch chitosan acetic acid (4 %), pha dầu (pha phân cực, O) n-heptane, chất tạo nhũ Span80, chất khâu mạng glutaraldehyde (GA) Đầu tiên, chitosan hòa tan dung dịch acetic acid % có pH=2, để tạo thành dung dịch chitosan Tiếp theo cho m(g) chất tạo nhũ Span80 90 (g) pha dầu n-heptane vào lúc becher, khuấy từ tốc độ 500 vòng/phút vòng 15 phút Sau dung dịch khuấy máy khuấy siêu tốc tốc độ định vòng phút thu hỗn hợp A, sau nhỏ giọt dung dịch chitosan vào hỗn hợp A với tốc độ 10 giọt/phút, sau cho hết chitosan khuấy thêm phút bắt đầu thêm m2 (g) dung dịch glutaraldehyde 25 % với tốc độ 10 giọt/phút tiếp tục khuấy thêm phút thu hỗn hợp C Sau hỗn hợp phản ứng tiếp tục khuấy từ vòng thu hỗn hợp D Sau giờ, đưa dung dịch D khỏi máy khuấy từ, để lắng vòng Sau lắng gạn bỏ phần dung dịch D2 trên, thu phần lắng D1 rửa quay li tâm lần ether dầu hỏa lần ethanol, cuối cho phần D1 rửa vào đĩa petri sấy 70 oC khối lượng không đổi, để thu vi cầu CS [5] Hình Quy trình chế tạo vi cầu chitosan Trang 139 Science & Technology Development, Vol 20, No.T4-2017 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ khuấy thông số phản ứng Bảng 1, tốc độ khuấy thay đổi với giá trị 500 vòng/phút, 1000 vòng/phút 6000 vòng/phút Vi cầu chitosan tổng hợp theo quy trình trình bày Sơ đồ với Bảng Số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng tốc độ khuấy Tốc độ khuấy (vòng/phút) 500 1000 6000 Tên mẫu V500 V1000 V6000 O/W O/E Ccs(%) R=ncs:nglu 15 15 15 1,5 1,5 1,5 2,00 2,00 2,00 1 Với ncs số mol mắc xích glucosamine nglu số mol glutaraldehyde: m 2% mdd ncs =M = M Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ O/E Vi cầu chitosan tổng hợp theo quy trình trình bày Sơ đồ với thông số phản ứng Bảng 2, tỉ lệ khối lượng O/E thay đổi với giá trị 1,5, 2, 4, 6, 15 điều kiện thí nghiệm (1) Trong đó: m: khối lượng chitosan (g) mdd: khối lượng dung dịch chitosan M: khối lượng mắc xích glucosamine, M=161 g Bảng Số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ O/E Tên mẫu MR1 OE2 OE4 OE6 OE15 Tốc độ khuấy (vòng/phút) 6000 6000 6000 6000 6000 O/W 15 15 15 15 15 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ O/W Vi cầu chitosan tổng hợp theo quy trình trình bày Sơ đồ với thông số phản ứng Bảng 3, tỉ Tên mẫu OW5 OW10 MR1 Trang 140 O/E 1,5 15 Ccs(%) 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 lệ khối lượng O/W thay đổi với tỉ lệ 5, 10, 15 điều kiện thí nghiệm Bảng Số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ O/W Tốc độ khuấy (vòng/phút) O/W O/E Ccs(%) 6000 6000 6000 R=ncs:nglu 1 1 10 15 1,5 1,5 1,5 2,00 2,00 2,00 R=ncs:nglu 1 TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KH&CN, TẬP 20, SỐ T4- 2017 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ R=ncs:nglu Vi cầu chitosan tổng hợp theo quy trình trình bày Sơ đồ với thông số phản ứng Bảng 4, tỉ lệ mol R=ncs:nglu thay đổi giá trị từ 1, 2, 10 Bảng Số liệu thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ R=ncs:nglu Tên mẫu MR1 MR2 MR10 Tốc độ khuấy (vòng/phút) 6000 6000 6000 O/W 15 15 15 Phân tích sản phẩm Phổ hồng ngoại biến đổi Fourier (FT-IR) Cấu trúc của chitosan thương mại vi cầu chitosan xác định phương pháp phân tích phổ hồng ngoại Các mẫu chitosan thương mại, sản phẩm MR1, MR2, MR10 nghiền ép viên với KBr theo tỷ lệ định phân tích FT-IR, phổ FT-IR ghi nhận máy máy FT-IR -8400S – SHIMADZU Kính hiển vi quang học (OTM) Cho 0,002 g vi cầu chitosan vào mL dung dịch ethanol, siêu âm khoảng 20 phút để mẫu phân tán ethanol Nhỏ dung dịch ethanol có chứa vi cầu chitosan lên lam kính, để bay hết dung dịch sau sấy khơ lam kính quan sát kính hiển vi quang học LEICA để phân tích hình thái bên ngồi kích thước kính hiển vi quang học LEICA Các mẫu phân tích OTM V500, V1000, V6000, OE1.5, OE2, OE4, OE6, OE15, OW5, OW10, OW15, MR1, MR2, MR10 Phân tích tán xạ laser động (DLS) Khoảng 0,02 g vi cầu chitosan đánh siêu âm phân tán ethanol trước tiến hành phân tích DLS để xác định khoảng phân bố kích thước vi cầu, q trình phân tích tiến hành máy DLS–LB550–HORIBA Các mẫu phân tích DLS gồm OE1.5, OE2, OW10, OW15, MR1, MR2, MR10 Khả trương nở vi hạt chitosan khâu mạch theo pH Ngâm 0,02 g vi cầu chitosan cần khảo sát dung dich đệm phosphate có pH =5,6; O/E Ccs(%) R = ncs:nglu 1,5 2,00 1,5 2,00 1,5 2,00 10 7,0 8,0 vòng 30 sau đưa mẫu ngồi để lên giấy thấm để đảm bảo khơng cịn dung dịch đệm, sau cân lại khối lượng, so sánh với khối lượng ban đầu để so sánh khả trương nở vi cầu mơi trường pH khác Cơng thức tính độ trương A (%): A (%) = Trong đó: 𝒎−𝒎𝒐 𝒎𝒐 × 100 (2) m khối lượng hạt sau ngâm mo khối lượng hạt ban đầu KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Định danh sản phẩm Kết phân tích FT-IR chitosan thương mại sản phẩm MR1 thể Hình Trong phổ FT-IR CS thương mại vi cầu CS mũi xuất số sóng 3429,3 cm1 , 3448,8 cm-1 tương ứng với dao động co giãn nhóm -OH Mũi 2923,9 cm-1, 2924,1 cm-1 tương ứng với dao động co dãn liên kết C-H nhóm CH2, mũi 2881,6 cm-1, 2877,8 cm-1, tương ứng với dao động đối xứng C-H nhóm CH2 Mũi số sóng 1602,8 1604,8 tương ứng với dao động biến dạng liên kết -NH Mũi số sóng 1421,5, 1411,9 cm-1 đặc trưng cho dao động biến dạng liên kết C-H nhóm -CH2 Mũi hấp thu số sóng 1097,5 1072,4 cm-1 đặc trưng dao động co giãn bất đối xứng liên kết C-O-C Mũi hấp thu số sóng 1026,1 cm-1 1031,8 cm-1 đặc trưng cho dao động co giãn đối xứng liên kết C-O-C [6] Nhóm azomethine - Trang 141 Science & Technology Development, Vol 20, No.T4-2017 N=CH- đặc trưng mũi hấp thu 1651,1 cm-1 có phổ FT-IR mẫu MR1, phổ chitosan thương mại không thấy xuất đỉnh phổ khoảng số sóng này, Hình Phổ FT-IR chitosan thương mại sản phẩm MR1 Phân tích TOM cho thấy sản phẩm có dạng hình cầu có kích thước khoảng 1-8 μm (Hình 4) Từ kết phân tích OTM FT-IR cho thấy thành công việc chế tạo vi cầu chitosan khâu mạng glutaraldehyde Ảnh hưởng tốc độ khuấy Ảnh OTM cho thấy thay đổi tốc độ khuấy, sản phẩm có dạng hình cầu (Hình 4, 5, 6) Ở tốc độ khuấy 6000 vịng/phút hạt có kích Hình Kết phân tích OTM mẫu MR1 Trang 142 chứng tỏ liên kết kết phản ứng tạo liên kết ngang nhóm amine mạch chitosan nhóm carbonyl theo sơ đồ biểu diễn Hình Hình Sơ đồ phản ứng chitosan glutaradehyde thước nhỏ (nhỏ 10 μm), mẫu tốc độ khuấy 500 vịng/phút hạt có kích thước lớn (lớn 100 μm) Kích thước hạt phụ thuộc vào tốc độ khuấy, tốc độ khuấy lớn kích thước hạt nhỏ Như với tốc độ khuấy 6000 vịng/phút cho hạt nhỏ 10 μm, chọn tốc độ khuấy 6000 vòng/phút để khảo sát mẫu Hình Kết phân tích OTM mẫu V1000 TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KH&CN, TẬP 20, SỐ T4- 2017 Ảnh hưởng tỉ lệ O/E Kết phân tích OTM cho thấy tỉ lệ O/E 4, 15 (Hình 7, 8, 9) lượng chất tạo nhũ chưa đủ để nhũ hóa tồn pha nước hệ, nên có số mảng rắn khơng có dạng hình cầu Các mẫu có tỉ lệ O/E 1,5 (Hình 4, 10) có dạng hình cầu, kích thước tương đương nên phân tích DLS để xem xét kĩ phân bố kích thước hạt tồn mẫu kích thước trung bình vi cầu Theo kết phân tích Hình Kết phân tích OTM mẫu V500 DLS mẫu MR1 tương ứng với tỉ lệ O/E 1,5 (Hình 11) có kích thước hạt trung bình 2,4052 µm, mẫu OE2 tương ứng với tỉ lệ O/E (Hình 12) có kích thước hạt trung bình 2,7679 µm Từ kết phân tích DLS cho thấy hai tỉ lệ tỉ lệ O/E 1,5 có kích thước vi cầu có độ đa phân tán hẹp kích thước trung bình nhỏ so với tỉ lệ Vậy chọn điều kiện tỉ lệ O/E 1,5 để tiếp tục tổng hợp mẫu Hình Kết phân tích OTM OE15 Hình Kết phân tích OTM OE4 Hình Kết phân tích OTM OE6 Hình 10 Kết phân tích OTM OE2 Trang 143 Science & Technology Development, Vol 20, No.T4-2017 Hình 11 Kết phân tích DLS mẫu MR1 Hình 12 Kết phân tích DLS mẫu OE2.Ảnh hưởng tỉ lệ O/W Theo kết phân tích OTM (Hình 4, 13, 14), cố định điều kiện thí nghiệm thay đổi tỉ lệ O/W 15, 10 cho hạt có dạng hình cầu, kích thước khơng chênh lệch nhiều Nên ba Hình 13 Kết phân tích OTM mẫu OW10 Trang 144 mẫu phân tích DLS để xác định kích thước hạt trung bình phân bố kích thước hạt tồn mẫu Hình 14 Kết phân tích OTM mẫu OW5 TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KH&CN, TẬP 20, SỐ T4- 2017 Kết phân tích DLS Hình 11, 15 16 tương ứng với mẫu có tỉ lệ O/W 15, 10 Mẫu OW5 tương ứng với tỉ lệ O/W có kích thước vi cầu trung bình 2,8714 µm, mẫu OW10 tương ứng với tỉ lệ O/W 10 có kích thước vi cầu trung bình 2,6827 µm, mẫu MR1 tương ứng với tỉ lệ O/W 15 có kích thước vi cầu trung bình 2,4052 µm Từ kết phân tích DLS dễ dàng nhận thấy mẫu trên, mẫu có tỉ lệ O/W 15 có kích thước trung bình nhỏ nhất, độ đa phân tán hẹp hai mẫu lại Nguyên nhân tăng hàm lượng pha nước giọt micelle dễ tập hợp lại tạo thành giọt lớn hơn, từ tạo nên hạt sau khâu mạng lớn Các giọt micelle dễ tập hợp tăng hàm lượng pha nước hàm lượng liên kết hydrogen liên phân tử tăng làm tăng độ nhớt dung dịch, khoảng cách phân tử nhũ tương gần hơn, lực kháng cự với dịng chảy lớn Do với lực xé (cùng tốc độ khuấy 6000 v/p) hệ có hàm lượng pha nước lớn tạo thành hạt lớn Kết phù hợp với kết công bố cơng trình A.N Ilia Anisa [7] Hình 16 Kết phân tích DLS mẫu OW5Ảnh hưởng tỉ lệ R= nglu:ncs Kết phân tích FT-IR sản phẩm vi cầu chitosan điều kiện tỉ lệ mol R khác thể Hình 17 Phổ FT-IR chitosan thương mại mẫu MR1, MR2, MR10 so sánh Bảng Đỉnh hấp thu đặc trưng cho nhóm azomethine -N=CH xuất tỉ lệ R tăng đến 10 Kết phân tích OTM, DLS cho thấy với tỉ lệ O/W 15, sản phẩm có kết phù hợp nhất, tỉ lệ phù hợp để tổng hợp mẫu Hình 17 Phổ FT-IR mẫu MR10 Hình 15 Kết phân tích DLS mẫu OW10 Trang 145 Science & Technology Development, Vol 20, No.T4-2017 Bảng So sánh phổ FT-IR MR1, MR2, MR10 Số sóng (cm-1) Dao động định thông qua phổ FT-IR dựa tỉ lệ cường độ hấp thu hai đỉnh đặc trưng cho nhóm azomethine số sóng khoảng 1651 đỉnh đặc trưng cho dao động bất đối xứng C-O-C 1072 cm-1 với công thức đề xuất sau: Chitosan thương mại MR1 νOH 3429,3 3448,8 3448,8 3425,6 νasCH2 2923,9 2924,1 2916,4 2924,1 νsCH2 2881,6 2877,8 2870,1 2862,4 νN=CH Không quan sát thấy 1651,1 1651,1 1643,4 δN-H A1651 cường độ hấp thu đỉnh đặc trưng cho nhóm azomethine 1602,8 1604,8 1604,8 1581,6 δCH2 1421,5 1411,9 1419,6 1419,6 A1072 cường độ hấp thu đỉnh đặc trưng cho dao động bất đối xứng C-O-C asC-O-C 1097,5 1072,4 1072,4 1080,1 sC-O-C 1031,8 1026,7 1033,8 1041,5 MR2 MR10 Để hiểu rõ ảnh hưởng tỷ lệ mol R lên cấu trúc vi cầu, độ khâu mạng xác K(%) = Trong đó: 𝑨𝟏𝟔𝟓𝟏 𝑨𝟏𝟎𝟕𝟐 × 100 (3) K độ khâu mạng (%) Kết tính tốn độ khâu mạng ba mẫu MR1, MR2, MR10 thể Bảng Độ khâu mạng giảm tăng tỉ lệ R, R tăng hàm lượng chất khâu mạng GA giảm Bảng Độ khâu mạng ba mẫu MR1, MR2, MR10 MR1 MR2 MR10 R 10 A1651 18,773698 25,6600408 13,1396489 Phân tích TOM mẫu tỉ lệ R 1, 2, 10 thể Hình 4, 18, 19 cho thấy ba tỉ lệ, sản phẩm có dạng hình cầu Dựa vào phân tích DLS mẫu (Hình 11, 20, 21), R 1, vi cầu có kích thước trung bình 2,4052 µm, R 2, vi cầu có kích Hình 18 Kết phân tích OTM mẫu MR2 Trang 146 A1072 33,3941373 55,8822398 33,7306084 A1651/A1072 0,56 0,46 0,39 K (%) 56 46 39 thước trung bình 2,5985 µm, R vi cầu có kích thước trung bình 2,9432 µm Co thể thấy mẫu tạo thành với tỉ lệ R có kích thước hạt trung bình nhỏ hạt phân bố kích thước hẹp Như theo xu hướng tăng dần R kích thước trung bình vi cầu tăng Hình 19 Kết phân tích OTM mẫu MR10 TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KH&CN, TẬP 20, SỐ T4- 2017 Hình 20 Kết phân tích DLS mẫu MR2 Khảo sát độ trương vi cầu chitosan theo pH Kết khảo sát độ trương vi cầu chitosan điều kiện pH khác thể qua Bảng Độ trương hạt vi cầu chitosan có tỉ lệ mol R=1 tăng dần giảm pH mơi trường pH giảm nhóm Hình 21 Kết phân tích DLS mẫu MR10 amine chitosan bị proton hóa, mạch chitosan tích điện dương nhiều nên đẩy nhiều dẫn đến độ trương lớn Cụ thể pH = 8,0 độ trương 38,85 % đến pH =5,6 độ trương hạt 54,32 % Đây sở giúp vi cầu chitosan trở thành ứng viên tiềm cho hệ thống dẫn truyền thuốc nhạy pH [8] Bảng Kết khảo sát độ trương vi cầu chitosan có tỉ lệ mol R= theo điều kiện pH MR1 pH = 5,6 pH = 7,0 pH = 8,0 Khối lượng ban đầu 0,0204 g 0,0202 g 0,0203 g Khối lượng sau trương 0,0446 g 0,0439 g 0,0332 g Độ trương 54,32 % 53,98 % 38,85 % KẾT LUẬN Nghiên cứu tổng hợp thành cơng vi cầu CS có kích thước trung bình 2,4052 µm phương pháp khâu mạng nhũ tương với pha dầu n-heptane, chất nhũ hóa Span80, chất khâu mạng glutaraldehyde Kích thước hình dạng vi cầu bị ảnh hưởng yếu tố tốc độ khuấy, tỷ lệ O/E, tỷ lệ O/W, tỷ lệ R=nCS:nglu Từ kết phân tích OTM DLS cho thấy kích thước vi cầu giảm tăng tốc độ khuấy, tăng hàm lượng Span80 giảm hàm lượng dung dịch CS Kết quan sát OTM, FT-IR cho thấy tỷ lệ mol R=10 CS khâu mạng Phân tích DLS cho thấy R=1, kích thước hạt nhỏ có độ đa phân tán hẹp Như vậy, hệ khâu mạng nhũ tương nghiên cứu điều kiện để tạo vi cầu CS có kích thước nhỏ, độ đa phân tán hẹp xác định sau: tốc độ khuấy 6000 vòng/phút, tỷ lệ O/E = 1,5, tỷ lệ O/W = 15, nồng độ dung dịch CS ban đầu %, tỷ lệ R= nCS:nglu=1 Vi cầu chitosan có độ trương tăng pH giảm nên vi cầu chitosan có khả ứng dụng làm chất mang thuốc phân phối thuốc mục tiêu theo pH Trang 147 Science & Technology Development, Vol 20, No.T4-2017 Preparation of chitosan microspheres by emulsion crosslinking method for biomedical application • • • Tu Thi Tram Anh Le Van Hieu Ha Thuc Huy University of Science, VNU-HCM ABSTRACT The emulsion crosslinking method using spherical in shape The average diameter of glutaraldehyde as a crosslinking agent was chitosan microspheres decreased with the exploited to prepare chitosan microspheres increase of homogenization speed, O/W ratio, Effects of preparation factors such as crosslinker concentration or decrease of O/E homogenization speed, oil/emulsifier ratio (O/E), ratio When homogenization speed is 6000 rpm, oil/water ratio (O/W), crosslinker concentration O/E =1.5, O/W=15, and molar ratio of chitosan on the structure of products were investigated to glutaraldehyde R=1, the average diameter of Structure and morphology of the obtained the chitosan microspheres was about 2.40 μm products were determined by Fourier transform with a narrow size distribution Chitosan infrared spectroscopy (FT-IR), Trasmission microspheres are able to be used as a polymer Optical Microscope systems (TOM), and Dynamic matrix for targeted drug delivery systems due to Laser Scattering analysis (DLS) The results their pH-responsive property indicated that the obtained products were Keyword: emulsion crosslinking, glutaraldehyde, chitosan microspheres TÀI LIỆU THAM KHẢO responsive bovine serum albumin-loaded chitosan [1].M Rinaudo, Chitin and chitosan: Properties and microspheres, Journal of Industrial and applications, Progress in Polymer Science, 31, Engineering Chemistry, 21, 1389–1397 (2015) 603–632 (2006) [6].Y Shigemasa, H Matsuura, H Sashiwa, H [2].M Dasha, R.M Ottenbrite, Chitosan—A versatile Saimoto, Evaluation of different absorbance ratios semi-synthetic polymer in biomedical applications, from infrared spectroscopy for analyzing the Progress in Polymer Science, 36, 981–1014 degree of deacetylation in chitin, International (2011) Journal of Biological Macromolecules, 18, 237– [3].J.J Wang, Z.W Zeng, R.Z Ziao, et al., Recent 242 (1996) advances of chitosan nanoparticles as drug carriers, [7].A.N Ilia Anisa, A.H Nour, Affect of viscosity and International Journal of Nanomedicine, 6, 765– droplet diameter on water-in-oil (w/o) emulsions: 774, (2011) An experimental study, International Journal of [4].S.A Agnihotri, N.N Mallikarjuna, T.M Chemical, Molecular, Nuclear, Materials and Aminabhavi, Recent advances on chitosan-based Metallurgical Engineering, 4, 2, 213–216 (2010) micro- and nanoparticles in drug delivery, Journal [8].K Sato, K Yoshida, S Takahashi, J Anzai, pHof Controlled Release, 100, 5–28 (2004) and sugar-sensitive layer-by-layer films and [5].X Zou, X Zhao, L Ye, Q Wang, H Li, microcapsules for drug delivery, Advanced Drug Preparation and drug release behavior of pHDelivery Reviews, 63, 809–821 (2011) Trang 148 ... Preparation of chitosan microspheres by emulsion crosslinking method for biomedical application • • • Tu Thi Tram Anh Le Van Hieu Ha Thuc Huy University of Science, VNU-HCM ABSTRACT The emulsion crosslinking. .. crosslinking method using spherical in shape The average diameter of glutaraldehyde as a crosslinking agent was chitosan microspheres decreased with the exploited to prepare chitosan microspheres. .. and molar ratio of chitosan on the structure of products were investigated to glutaraldehyde R=1, the average diameter of Structure and morphology of the obtained the chitosan microspheres was