Nghiên cứu sự biến động hàm lượng hormone steroid huyết tương trong chu kỳ sinh sản cá dìa siganus guttatus (bloch 1787)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG NGUYỄN VĂN AN NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỘNG HÀM LƯỢNG HORMONE STEROID HUYẾT TƯƠNG TRONG CHU KỲ SINH SẢN CÁ DÌA Siganus guttatus (Bloch, 1787) LUẬN ÁN TIẾN SĨ Khánh Hòa - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG NGUYỄN VĂN AN NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỘNG HÀM LƯỢNG HORMONE STEROID HUYẾT TƯƠNG TRONG CHU KỲ SINH SẢN CÁ DÌA Siganus guttatus (Bloch, 1787) Ngành đào tạo: Nuôi trồng Thủy sản Mã số: 9620301 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS PHẠM QUỐC HÙNG Phản biện 1: GS TS ĐỖ THỊ THANH HƯƠNG Phản biện 2: PGS TS NGUYỄN Khánh Hòa – TƯỜNG ANH Phản biện 3: TS TRƯƠNG QUỐC THÁI Khánh Hịa – LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan kết đề tài: “Nghiên cứu biến động hàm lượng hormone steroid huyết tương chu kỳ sinh sản cá dìa Siganus guttatus (Bloch, 1787)” cơng trình nghiên cứu cá nhân tơi chưa cơng bố cơng trình khoa học khác thời điểm Một phần kết nghiên cứu luận án nằm đề tài mã số 106.052017.40 Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) Nha Trang, ngày tháng năm 2022 Tác giả luận án (Ký ghi rõ họ tên) Nguyễn Văn An i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian thực đề tài, nhận giúp đỡ quý phòng ban trường Đại học Nha Trang, tạo điều kiện tốt cho hồn thành đề tài Tơi xin gửi lời cảm ơn đến Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) đề tài mã số 106.052017.40 hỗ trợ phần kinh phí thực luận án Lời cảm ơn đặc biệt chân thành tơi muốn giành cho người thầy đáng kính PGS TS Phạm Quốc Hùng định hướng chuyên môn, hướng dẫn đề tài, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Cuối xin gửi lời cảm ơn chân thành đến gia đình tất bạn bè, đồng nghiệp giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình học tập thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn! Nha Trang, ngày tháng năm 2022 Tác giả luận án (Ký ghi rõ họ tên) Nguyễn Văn An ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC HÌNH x MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số đặc điểm sinh học cá dìa 1.1.1 Đặc điểm hình thái 1.1.2 Đặc điểm phân bố 1.1.3 Đặc điểm môi trường sống 1.1.4 Đặc điểm dinh dưỡng 1.1.5 Đặc điểm sinh trưởng 1.1.6 Đặc điểm sinh sản .9 1.2 Tình hình nghiên cứu cá dìa giới Việt Nam 10 1.2.1 Trên giới 10 1.2.2 Tại Việt Nam .13 1.3 Chu kỳ sinh sản tự nhiên cá 14 1.4 Buồng trứng phát triển noãn bào 15 1.4.1 Các giai đoạn phát triển buồng trứng 15 1.4.2 Sự phát triển noãn bào 17 1.5 Tinh sào phát triển tinh bào 19 1.5.1 Các giai đoạn phát triển tinh sào 19 1.5.2 Các giai đoạn phát triển tinh bào cá xương .20 1.6 Hormone điều khiển chu kỳ sinh sản cá 21 iii 1.6.1 Hormone phóng thích KDT não (GnRH) 22 1.6.2 Kích dục tố tuyến yên (Gonadotropin) .23 1.7 KDT điều khiển chức tinh sào 23 1.7.1 Điều khiển tổng hợp tiết hormone steroid tinh sào 23 1.7.2 Điều khiển trình tạo tinh .24 1.8 KDT điều khiển chức buồng trứng .24 1.8.1 Điều khiển tổng hợp tiết hormone steroid nang trứng .24 1.8.2 Điều khiển trình tạo trứng 26 1.9 Hormone steroid tuyến sinh dục 27 1.9.1 Điều khiển trình phát triển tinh sào 27 1.9.2 Điều khiển trình phát triển buồng trứng .29 1.10 Hormone steroid chu kỳ sinh sản số loài cá biển 29 1.11 Ảnh hưởng môi trường lên chu kỳ sinh sản cá 32 1.11.1 Nhiệt độ 32 1.11.2 Chu kỳ trăng 32 1.11.3 Độ mặn 33 1.12 Các loại hormone sử dụng sinh sản nhân tạo cá .34 1.12.1 Kích dục tố màng đệm thai (hCG) 34 1.12.2 GnRH-A, chất kháng Dopamin phương pháp LinPe 36 1.12.3 Hormone steroid 38 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 2.1 Thời gian, địa điểm đối tượng nghiên cứu 40 2.2 Phương pháp nghiên cứu 41 2.2.1 Giả thuyết sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 41 2.2.1.1 Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu .42 2.2.1.2 Bố trí thí nghiệm .43 2.2.2 Thu phân tích mẫu 44 2.2.2.1 Phương pháp thu cố định mẫu 44 iv 2.2.2.2 Phương pháp xác định tiêu sinh học sinh sản 45 2.2.2.3 Phương pháp làm tiêu tổ chức tuyến sinh dục đọc kết 45 2.2.2.4 Phương pháp phân tích hàm lượng hormone steroid huyết tương 47 2.2.3 Xác định thành phần sinh hóa trứng cá dìa qua giai đoạn 52 2.3 Phương pháp phân tích xử lý số liệu .53 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 54 3.1 Sự phát triển tuyến sinh dục biến động hàm lượng hormone steroid cá dìa chu kỳ sinh sản .54 3.1.1 Sự phát triển tuyến sinh dục cá dìa chu kỳ sinh sản 54 3.1.1.1 Kích thước đàn cá nghiên cứu 54 3.1.1.2 Sự phát triển buồng trứng chu kỳ sinh sản .54 3.1.1.3 Sự phát triển tinh sào chu kỳ sinh sản 56 3.1.1.4 Hệ số gan (HSI) 58 3.1.1.5 Hệ số thành thục (GSI) 60 3.1.2 Biến động hàm lượng hormone steroid huyết tương .64 3.1.2.1 Biến động hàm lượng E2 cá 64 3.1.2.2 Mối quan hệ E2 với HSI, GSI phát triển buồng trứng 67 3.1.2.3 Biến động hàm lượng T 11–KT cá đực 68 3.1.2.4 Mối quan hệ T, 11–KT với HSI, GSI phát triển tinh sào .72 3.2 Ảnh hưởng hCG, LHRH–A lên hàm lượng E2 T huyết tương .74 3.2.1 Biến động hàm lượng E2 ảnh hưởng hCG LHRH – A cá 74 3.2.2 Biến động hàm lượng T ảnh hưởng hCG LHRH – A cá đực .76 3.3 Ảnh hưởng hCG, LHRH – A lên đặc điểm sinh lý sinh sản thành phần sinh hóa tinh sào buồng trứng cá dìa .77 3.3.1 Ảnh hưởng hCG, LHRH – A lên đặc điểm sinh lý sinh sản .77 3.3.1.1 Sức sinh sản 77 3.3.1.2 Kích thước nỗn bào đàn cá thí nghiệm 78 3.3.2 Ảnh hưởng hCG, LHRH – A lên thành phần sinh hóa tinh sào buồng v trứng cá dìa 79 3.3.2.1 Ảnh hưởng hCG, LHRH – A lên thành phần sinh hóa tinh sào cá dìa 79 3.3.2.1.1 Thành phần sinh hóa tinh sào cá dìa giai đoạn thành thục chưa thành thục 79 3.3.2.1.2 Ảnh hưởng hormone lên thành phần sinh hóa tinh sào cá dìa .80 3.3.2.2 Ảnh hưởng hCG, LHRH – A lên thành phần sinh hóa buồng trứng cá dìa 83 3.3.2.2.1 Thành phần sinh hóa buồng trứng cá dìa giai đoạn thành thục chưa thành thục 83 3.3.2.2.2 Ảnh hưởng hormone lên thành phần sinh hóa buồng trứng cá dìa (giai đoạn IV) 84 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 87 KẾT LUẬN .87 ĐỀ XUẤT 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO 90 PHỤC LỤC I vi DANH MỤC VIẾT TẮT Viết tắt Viết đầy đủ Tiếng Việt (nếu có) 11-KT 11 - Ketotestosterone 17-MT 17α - methyltestosterone 17P 17α - Hydroxyprogesteron 17α,20βP 17α, 20βP, dihydroxy-4-pregnen-3-one 20β-HSD 20β-hydroxysteroiddehydrogenase aa Amino acid Axit amin BW Body weight Trọng lượng thể DA Dopamineantagonist Chất kháng Dopamin DOC Desoxycorticosterone DOCA Desoxycorticosterone Acetate DOM Domperidone Dtn Determination EIA EnzymeImmunoassay E2 Estradiol - 17β ELISA Emzyme Linked Immunosorbent Assay Phân tích miễn dịch liên kết men FSH Follicle – Stimulating Hormone Hormon kích thích nang trứng GnRH Gonadotropin – Releasing Hormone Hormon gây phóng thích KDT GnRH - GnRH - Analog Chất tương tự GnRH A GSI Gonadosomatic Index Hệ số thành thục (HSTT) GnRH-A GnRH-Analog Chất tương tự GnRH GTH Gonadotropin Kích dục tố GTH-I Gonadotropic hormone - I Hormon kích dục I GTH-II Gonadotropic hormone - II Hormon kích dục II GV Germinal vesicles Túi mầm hCG Human Chorionic Gonadotropin KDT màng đệm thai người HSI Hepatosomatic Index Hệ số gan IU International Unit Đơn vị quốc tế Đơn vị định lượng Kích dục tố KDT L Chiều dài Length vi ... hormone steroid chu kỳ sinh sản cá dìa chưa thực [5] Trước bối cảnh đó, đề tài ? ?Nghiên cứu biến động hàm lượng hormone steroid huyết tương chu kỳ sinh sản cá dìa Siganus guttatus (Bloch, 1787)? ?? thực... trình sinh sản nhân tạo sản xuất giống cá dìa Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu tổng quát: Làm rõ biến động hàm lượng hormone steroid huyết tương cá dìa Siganus guttatus chu kỳ sinh sản làm sở cho nghiên. .. trứng cá dìa 83 xi TÓM TẮT NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN Đề tài luận án: ? ?Nghiên cứu biến động hàm lượng hormone steroid huyết tương chu kỳ sinh sản cá dìa Siganus guttatus (Bloch, 1787)? ?? Chun