Tổng quan về đinh lăng
Tên Việt Nam
Tên Việt Nam: Đinh lăng
Tên khoa học
Cây Đinh lăng có tên khoa học là Polyscias fruticosa (L.) Harms, họ Nhân sâm (Araliaceae) (Dược điển Việt Nam IV, 2009)
Tên đồng nghĩa: Nothopanax Fruticosus (L.) Harms (Đỗ Tất Lợi, 2004),
Tieghemopanax fruticosa(L.) Vig (Phạm Hoàng Hộ, 2003), Panax fruticosumI (J.Seidemann, 2005), Panax fruticosa L.(Phạm Hoàng Hộ, 2003; Đỗ Huy Bíchvà cs, 2006)
Tên gọi khác
Đinh lăng còn có các tên gọi khác như: Đinh lăng lá nhỏ, cây Gỏi cá, Nam dương lâm Tên nước ngoài: Ming aralie; Tea tree; Ginseng tree (Anh);
Polyscias (Pháp) Strau chige Fiederaralie (Greman); Taiwan momiji
(Japanese);Bani, Makan, Papua(Philipion); Ovang (Sumatra) (DĐVN IV,
2009; Đỗ Huy Bích và cs, 2006).
Hình 1.2 Toàn cảnh lá và cây đinh lăng
1.1.3 Một số loại Đinh lăng khác
Đinh lăng lá tròn 3 1.1.3.2 Đinh lăng lá ráng 3 1.1.3.3 Polyscias sambucifolia (Sieber) Harms
Tiểu mộc cao 1-2 m, thơm Lá kép thường mang 3 lá chét trên một cuống dài, lá chét hình tròn, đầu tù, xanh đậm, không lông, bìa có răng nhọn, cuống phụ 1 cm; cuống có đáy thành bẹ Chùm tụ tán mang tán to 1-1,5 cm; hoa có 6 cánh hoa, 6 tiểu nhụy.Thường được trồng làm kiểng, gốc Tân Caledonia III (Phạm Hoàng Hộ, 2003; Đỗ Huy Bích và cs, 2006).
1.1.3.2 Đinh lăng lá ráng Được gọi là Polyscias ilicifolia Bailf Có tên khác là Polyscias cumingiana
(J.Seidemann, 2004).Tiểu mộc cao đến 2,5 m; thân có bì khổng Lá kép có 11-
13 lá chét; lá chét hình mác có răng cưa và sâu Lá đặc biệt đa dạng: ở thân non, kép 1-2 lần thành đoạn hẹp nhọn, bìa có răng nhọn, dạng lá ráng; ở nhánh già lá đơn, xoan đến thon, thường lục tươi, gân giữa tía Trồng ở đảo Thái Bình Dương (Đỗ Huy Bích và cs, 2006; Phạm Hoàng Hộ, 2003)
Trồng ở Hà Nội làm thuốc, gốc Châu Úc (Phạm Hoàng Hộ, 2003).
Tên khoa học là Polyscias guilfoylei (Cogn & Marche) Bail Lá kép có 7 lá chét: lá chét thường có viền trắng (Đỗ Huy Bích và cs, 2006).
Đinh lăng lá răng
Tên khoa học là Polyscias serrata Balf.
Cây kiểng Bụi cao 50-150 cm; thân xám trắng, không lông, cành non xanh Lá thơm, 2 lần kép (Phạm Hoàng Hộ, 2003).
Polyscias grandifolia Volkens
Trồng ở Hà Nội (Phạm Hoàng Hộ, 2003)
Đinh lăng đĩa 4 1.1.4 Đặc điểm thực vật Đinh lăng
Tên khoa học là Polysicas scutellarius (Burm f.) Merr Cây nhỏ, cao 1-2m; thân nâu đen, có bì khẩu trắng Lá đơn hay do 2-3 lá phụ, phiến tròn bũm như cái dĩa hay bán cầu, xanh hay trổ, không lông Chùm tụ tán thông dài; tán 5-8 hoa, hoa giữa không cọng; cánh hoa xanh, cao 3,5mm Có nguồn gốc từ Mexico (Phạm Hoàng Hộ, 2003).
1.1.4 Mô tả đặc điểm thực vật Đinh lăng
Mô tả
Cây nhỏ dạ ng bụi, xanh tốt quanh năm, có thể cao từ 1,5 -2m Thân nhám, không gai, ít phân nhánh, mang nhiều vết sẹo to, màu xám, các nhánh non có dài 20-40 cm; lá chét có răng cưa nhọn không đều, đôi khi chia thùy, gốc và thuôn nhọn, có mùi thơm khi vò nát; cuống lá dài, phát triển thành bẹ to ở phần cui; các đoạn đều có cuống.
Cụm hoa mọc ở ngọn thành hình chùy ngắn mang nhiều tán; lá bắc rộng, sớm rụng; loa nhỏ, màu lục nhạt hoặc trắng xám; mép uốn lượn; tràng 5 cánh trái xoan; nhị 5, chỉ nhị ngắn; bán hạ, 2 ô.
Quả dẹt, hình trứng rộng, màu trắng bạc.
Mùa hoa quả: Tháng 4-7 (Armen Takhtajan, 2009; Phạm Hoàng Hộ, 2003; Trương Thị Đẹp, 2014; Võ Văn Chi, 2012).
Hình 1.3 Toàn cảnh cây và hoa đinh lăng
Sinh thái
Cây có khả năng tái sinh dinh dưỡng cao Người ta thường trồng chủ yếu bằng cách giâm cành; chọn những cành già, chặt thành đoạn ngắn 15
-20cm, cắm nghiêng xuống đất Thời gian gieo trồng vào tháng 2-4 hoặc tháng 8-10 Đinh lăng ưa đất cao ráo, hơi ẩm (Võ Văn Chi, 2012).
Thu hoạch rễ của cây đã trồng từ 3 năm trở lên (cây trồng càng lâu năm càng tốt).
Rễ củ thu hái thường vào mùa thu, lúc này rễ mềm, nhiều hoạt chất, rửa sạch Rễ nhỏ để nguyên, rễ to chỉ dùng vỏ rễ.Thái rễ mỏng, đem rửa sạch, phơi khô ở chỗ mát, thoáng gió để đảm bảo mùi thơm và hoạt chất Khi dùng để nguyên hoặc tẩm rượu gừng 5%, sao qua, rồi tẩm 5% mật ong hoặc mật mía.
Lá thu hái quanh năm thường dùng tươi (DĐVN IV, 2009; Võ Văn Chi, 2012).
Chi Polyscias Forst & Forstf có gần 100 loài trên thế giới, phân bố rải rác ở các vùng cận nhiệt đới và nhiệt đới, nhất là một số đảo ở Thái Bình Dương Ở Việt Nam có khoảng 7 loài đều là cây trồng. Đinh lăng có nguồn gốc ở vùng đảo Polynesic ở Thái Bình Dương Cây được trồng ở Malaysyia, Indonesia, Campuchia, Lào Ở Việt Nam, Đinh lăng cũng có từ lâu trong nhân dân và được trồng khá phổ biến ở vườn gia đình, đình chùa, trạm xá, bệnh viện, để làm cảnh, làm thuốc và rau gia vị. Đinh lăng là loại cây ưa ẩm và có thể chịu bóng, trồng được trên nhiều loại đất, thậm chí với một lượng đất rất ít trong chậu nhỏ, cây vẫn có thể sống được theo kiểu cây cảnh bonsai Trồng bằng cành sau 2-3 năm cây có hoa quả Chưa quan sát được cây con mọc từ hạt. Đinh lăng có khả năng tái sinh vô tính khỏe Từ một đoạn thân hoặc cành cắm xuống đất đều trở thành cây mới(Đỗ Huy Bích, 2006; Võ Văn Chi, 2012; Đỗ Tất Lợi, 2004; Phạm Hoàng Hộ, 2003; Nguyễn Thượng Dong và cs, 2007).
1.1.7 Trồng trọt Đinh lăng được trồng phân tán ở khắp nơi, để làm cảnh, lá làm gia vị, rễ làm thuốc Hiện nay, một số nơi đã bắt đầu trồng Đinh lăng ở quy mô sản xuất thử(1000 -2000m 2 ). Đinh lăng được nhân giống bằng cành trong chậu, góc sân, góc vườn, người ta chỉ cần lấy một đoạn thân cành cấm xuống đất là được Nếu trồng diện tích lớn, chọn cành bánh tẻ có đường kính 1-1,5 cm, cắt thành từng đoạn dài 5-7 cm, giâm trong cát ẩm(70%) Sau 7-10 ngày, Hom giống nảy mầm và sau 1,5 -2 tháng có thể ra ngòi Cành giâm lúc đầu chỉ ra rễ ở đầu dưới của cành Thực tiễn thấy rằng, rễ này nhỏ và chất lượng kém hơn rễ phát sinh từ gốc chồi tái sinh Tuy nhiên, chồi tái sinh của Đinh lăng ra rễ rất chậm Đó là lý do tại sao Đinh lăng lâu được thu hoạch Vấn đề này đang được nghiên cứu để tìm giải pháp khắc phục. Đất trồng Đinh lăng cần nhiều màu, tầng canh tác sâu Tơi xốp, cao ráo, thoát nước và tiện tưới Sau khi làm đất, khơi rãnh thoát nước hoặc lên thành luống, bứng cây con ra trồng vi khoảng cách 0,8x0,6 m Mỗi gốc cây, cần bón lót 3-5kg phân chuồng hoặc phân rơm mục Đinh lăng trồng được quanh năm, tốt nhất là giâm cành vào tháng 5-6 và trồng vào tháng 7-8 Khi trồng nên cắt bớt lá để hạn chế thoát hơi nước, giúp cây nhanh hồi phục Cây ưa bóng và ưa ẩm nên có thể trồng xen dưới tán cây trong vườn Thường xuyên làm cỏ, nhất là lúc mới trồng cây.
Từ giữa mùa xuân đến mùa thu, thi kỳ sinh trưởng mạnh, cần bón thúc cho cây Dùng nước phân chuồng, nước giải pha loãng, phân vi sinh, liều lượng tùy thuộc độ sinh trưởng của cây. Đinh lăng không có sâu bệnh nghiêm trọng Cây trồng sau 7-10 năm mới được thu hoạch Cây càng già, năng suất và chất lượng rễ càng cao(Đỗ Huy
Năm 1989, Nguyễn Khắc Viện đã nghiên cứu và cho thấy trong rễ có 4% saccarose, một chất kết tinh A chưa xác định cấu trúc hóa học, có điểm sôi trong khoảng 158-161 o C, tan nhiều trong chloroform và aceton (Nguyễn Khắc Viện, 1989).
Năm 1990, Nguyễn Thới Nhâm và cộng sự đã công bố trong thành phần của rễ, thân và lá có các glycosid, alkaloid, tanin, vitamin B1 và khoảng 20 loại acid amin như arginin, alanin, asparagin, acid glutamic, leucin, lysin, phenylalanin, prolin, threonin, tyrosin, cystein, tryptophan, metionin (Nguyễn Thới Nhâm và cs,
Lysine Hình 1.4 Một số acid amin có trong cây Đinh lăng
Năm 1990, Brophy Joseph J và cộng sự đã dùng phương pháp GC-MS để phân tích thành phần tinh dầu của lá cây mọc ở Fiji và Thái Lan Kết quả cho thấy trong tinh dầu có khoảng 24 cấu tử, trong đó có 4 chất chính là: β-elemen; β-germacren-D; E-γ-bisabolen và α-bergamoten (Brophy J.Jetal., 1990).
Năm 1991, Võ Xuân Minh cùng cộng sự đã khảo sát hàm lượng saponin toàn phần trong các bộ phận của cây Đinh lăng với kết quả: Rễ (0,49%), vỏ rễ (1,00%), lõi rễ (0,11%) và lá (0,38%) (Võ Xuân Minh và cs, 1991).
Năm 1992, trong nghiên cứu tiếp theo, Võ Xuân Minh cho biết trong cây Đinh lăng có các alcaloid, glucosid, saponin, các vitamin tan trong nước như B1, B2, B6, C Nghiên cứu cũng cho thấy rễ cây Đinh lăng có chứa tới 20 acid amin (Võ Xuân Minh, 1992).
Vitamin B6 ( Pyridoxin) Vitamin C(Acid ascorbic)
Hình 1.5 Một sốố vitamin có trong Đinh lăng
Năm 1992, Lutomski và cộng sự đã cô lập từ rễ 5 hợp chất thuộc loại hợp chất polyacetylen:(8E)-heptadeca-1,8-dien-4,6-diyn-3,10-diol; (8E)-heptadeca-1,8- dien-4,6-diyn-3-ol-10-on; (8Z)-heptadeca-1,8-dien-4,6-diyn-3-ol-10-on; falcarinol và panaxydol (Lutomskiet al.,1992).
(8E)-heptadeca-1,8-dien-4,6-diyn-3,10-diol (8Z)-heptadeca- 1,8-dien-4,6-diyn-3-ol10-on
Cũng vào năm 1992, Nguyễn Thị Nguyệt và cộng sự đã cô lập được acid oleanolic (1) (Nguyễn Thị Nguyệt và cs, 1992; Nguyễn Thị Nguyệt, Võ Xuân Minh, Nguyễn văn Bàn, 1992).
Năm 1995, Chaboud A và cộng sự đã cô lập từ lá một saponin triterpen, đó là acid 3- O-β-D-galactopyranosyl-(1→2)-β-D- glucopyranosyloleanolic (2) (Chaboud A et al., 1995).
Năm 1996, Chaboud A và cộng sự đã cô lập từ lá khô, một saponin triterpen là:
Acid 3-O-[α-rhamnopiranosyl-(1-4)-β-D-glucopyranosyl]-28-O-β-D glucopyranosyl] leanolic (3) (Chaboud A et al., 1996).
Năm 1998, Võ Duy Huấn cùng cộng sự đã cô lập được 11 saponin triterpen: Acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D- glucuronopyranosyloleanolic (4) (Võ Duy Huấn và cs, 1998).
Năm 2010, Nguyễn Thị Lan bằng phương pháp GC và GC/MS để phân tích thành phần tinh dầu của lá cây Đinh lăng ở tỉnh Nghệ An và Thanh Hóa Kết quả cho thấy trong tinh dầu Đinh lăng có 15 hợp chất như là β-elemen, -elemen, E-γ- bisabolen, αbergamoten, β-germacren-D, Gecmacren-B, -farnesen (Nguyễn Thị Lan, 2010). β-germacren-D Gecmacren-B
Hình 1.6 Một số hợp chất chính có trong tinh dầu
Năm 2012, Viện hóa sinh biển - Viện Khoa học và công nghệ Việt Nam đã phân lập được 3 hợp chất flavonoid từ lá Đinh lăng là quercitrin, afzelin và kaempferol-3-Orutinosid (Nguyễn Thị Luyến và cs, 2012).
Hình 1.7 Một số flavonoid từ lá Đinh lăng
Năm 2014, Hồ Lương Nhật Vinh từ lá cây Đinh lăng đã 3 saponin triterpen:
28-O-βD-glucopyranosyl ester (15) ( Hồ Lương Nhật Vinh, 2014).
Dglucoronopyranosyl} oleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester
Năm 2016 Trần Thị Hồng Hạnh cùng cộng sự đã phân lập được 3 saponin triterpen từ lá Đinh lăng Trong đó 3-O-{ -D-glucopyranosyl-(1→2)-[ -D- glucopyranosyl- (1→4)]- -D-glucuronopyranosyl} oleanolic acid 28-O- -D- glucopyranosyl-(1→2)- - D-galactopyranosyl ester là saponin được phân lập lần đầu tiên, và được đặt tên là polyscioside I
Năm 2016, Nguyễn Thị Bích Thu và công sự Viện dược liệu đã phân lập được 5 hợp chất saponin triterpen từ rễ Đinh lăng Và trong đó có một hợp chất lần đầu tiên được phân lập là falcarindiol (Nguyễn Thị Bích Thu và cs, 2016).
Hình 1.8 Công thức falcarindiol của cây Đinh lăng
Hình 1.9 Công thức chung saponin triterpenoid của cây Đinh lăng Bảng 1.1 Tóm tắt các saponin triterpen trong cây Đinh lăng
1.1.9 Tác dụng dược lý Đinh lăng là loài cây quen thuộc với nhiều gia đình Việt Nam Ở nước ta, Đinh lăng có từ lâu và được trồng phổ biến ở vườn trong gia đình, trong khuôn viên đình chùa, trạm xá, bệnh viện để làm cảnh, làm thuốc và còn được làm gia vị Trong cuộc sống thường ngày, lá cây được sử dụng như rau sống hoặc có thể ăn kèm trong món gỏi cá Theo y học cổ truyền, rễ cây có vị ngọt, hơi đắng, tính mát, có tác dụng thông huyết mạch, bồi bổ khí huyết; lá Đinh lăng có vị đắng, tính mát có tác dụng giải độc thức ăn, chống dị ứng, chữa ho ra máu, kiết lỵ Toàn cây Đinh lăng bao gồm rễ, thân, lá đều có thể sử dụng làm thuốc với nhiều công dụng và bài thuốc khác nhau.
Công dụng
Theo y học hiện đại, cây Đinh lăng có một số tác dụng chính như: Tác dụng bổ chung, ăn ngon, dễ ngủ và tăng cân, tăng lực, tăng khả năng lao động nặng và phục hồi sức khỏe tốt, hoạt hóa các tế bào thần kinh, tăng cường trí nhớ (Quách Tuấn Vinh, 2005; Nguyễn Thượng Dong và cs 2007).
Theo Đông y: Đinh lăng có tác dụng giải độc, ban chẩn, thương hàn nhập lý, thông tiểu tiện, mát phổi, ho ra máu, kiết lỵ, phong thấp, nhức mỏi chân tay
Rễ Đinh lăng được dùng làm thuốc bổ tăng lực, chữa cơ thể suy nhược, gầy yếu, mệt mỏi, tiêu hóa kém, phụ nữ sau khi sinh ít sữa Có nơi còn dùng chữa ho, đau tử cung, thuốc lợi tiểu, chống độc và co rút tử cung (Phạm Hoàng Hộ, 2003; DĐVN IV, 2009).
Lá chữa cảm sốt, mụn nhọt sưng tấy, sưng vú, dị ứng mẩn ngứa, vết thương (giã đắp) Thân và cành chữa thấp khớp, đau lưng. Ở Ấn Độ, Đinh lăng được dùng làm thuốc làm săn da và trị sốt rét Rễ và lá sắc uống có tác dụng lợi tiểu chữa sỏi thận, sỏi bàng quang, chứng khó tiểu tiện Bột lá được giã với muối và đắp trị vết thương (DĐVN IV, 2009; Đỗ Tất Lợi, 2004).
Liều dùng
Ngày dùng từ 1 g đến 6 g, dạng thuốc sắc hoặc 2 g trở lên với thuốc tán bột (Dược Điển Việt Nam IV, 2009).
Trên cơ sở kết quả nghiên cứu dược lý, Viện y học quân sự Việt Nam năm 1964 Đinh lăng trong một ngày dưới dạng thuốc sắc hay ngâm rượu nhẹ độ (khoảng 30o ) thì có kết quả tăng sức dẻo dai của cơ thể như khi nghiên cứu trong qui mô phòng thí nghiệm (Đỗ Tất Lợi, 2004)
Chữa mỏi mệt mỏi, biếng hoạt động
Rễ Đinh lăng phơi khô thái mỏng 5 g Thêm 100 ml nước, đun sôi trong 15 phút, chia 2 – 3 lần uống trong ngày.
Chữa sốt lâu ngày, nhức đầu, ho, đau, tức ngực, nước tiểu vàng Đinh lăng rễ tươi (rễ, cành) 30 g, lá hoặc vỏ Chanh 10 g, vỏ Quýt 10 g, Sài hồ (rể, lá, cành) 20 g, lá Tre tươi 20 g, Cam thảo dây hoặc Cam thảo đất 30 g, Rau má tươi 30 g, Me đất 20 g Các vị cắt nhỏ, đổ ngập nước, sắc đặc lấy 250 ml, chia uống 3 lần trong ngày.
Cành lá Đinh lăng 30 – 40 g Thêm 300 ml, sắc còn 200 ml, uống nóng.
Lá Đinh lăng tươi 50 – 100 g, Bong bóng lợn 1 cái Băm nhỏ, trộn với gạo nếp, nấu cháo ăn.
Cành lá Đinh lăng rửa sạch sao vàng, sắc uống thay nước Đây là kinh nghiệm của Hải Thượng Lãn Ông Chữa mẩn ngứa do dị ứng Lá Đinh lăng 80 g, sao vàng, sắc uống Dùng trong 2 - 3 tháng.
Rễ Đinh lăng, Hà thủ ô, Thục địa, Hoàng tinh, mỗi vị 100 g, Tam thất 20 g Tán bột, sắc uống ngày 100 g.
Chữa viêm gan mạn tính
Rễ Đinh lăng 12 g, Nhân trần 20 g, Ý dĩ 16 g; Chi tử, Hoài sơn, Biển đậu, rễ Cỏ tranh, Xạ tiền tử, Ngũ gia bì, mỗi vị 12 g; Uất kim, Nghệ, Ngưu tất, mỗi vị 8 g Sắc uống, ngày một thang.
Rễ Đinh lăng, Hoài sơn, Ý dĩ, Hoàng tinh, Hà thủ ô, Kỳ tử, Long nhãn,
Cám nếp, mỗi vị 12 g; Trâu cổ, Cao ban long, mỗi vị 8 g; Sa nhân 6 g.
Sắc uống, ngày một thang.
Rễ Đinh lăng, Sài hồ, mỗi vị 20 g; Rau má 16 g; lá Tre, Cam thảo nam, mỗi vị
12 g; Bán hạ sao vàng 8 g, Gừng 6 g Sắc uống.
Chữa phong tê thấp, đau xương khớp, đau lưng Đinh lăng 100 g, thái khúc, sao vàng, sắc uống hằng ngày thay nước Phòng tác dụng của thuốc điều trị lao Lá Đinh lăng sao vàng 20 g - 25 g, hãm uống nước dùng hằng ngày Phòng co giật ở trẻ em Lấy lá Đinh lăng phơi khô rồi lót vào gối hay trải xuống giường cho trẻ em nằm (Đỗ Huy Bích, 2006; Quách Tuấn Vinh, 2005; chuthapdo.org.vn; ydvn.net).
1.1.10 Sản phẩm đinh lăng có mặt trên thị trường
❖ Thành phần - Rễ Đinh lăng khô khoảng 100 g - 150 g - 1 lít rượu ngon có độ cồn khoảng 35 – 40 o
❖ Công dụng - Khí huyết lưu thông, ăn ngon, ngủ yên, tăng cường sinh lực - Trị đau xương khớp. Đinh lăng trà TRC
- Tăng tuần hoàn não, giảm hội chứng tiền đình, đau đầu, hoa mắt, chóng mặt, ù tai.
- Tăng khả năng tập trung, giảm tình trạng căng thẳng thần kinh, mất trí nhớ, run chân tay.
- Nhúng túi trà vào trong nước sôi, chờ 3 - 5 phút.
- Ngày dùng từ 4 - 6 túi (lasen.com.vn).
- Tăng tuần hoàn não, giảm hội chứng tiền đình: Đau đầu, chóng mặt, ù tai, mất ngủ, mất thăng bằng.
- Tăng khả năng tập trung, giảm tình trạng căng thẳng thần kinh, mất trí nhớ, run chân tay.
- Dùng cho mọi lứa tuổi.
- Những túi trà vào ấm nước sôi 150 ml - 200 ml, chờ 2 - 3 phút Có thể thêm đá theo ý thích (quagac.com).
Hoạt huyết dưỡng não HBN
- Cao mềm Đinh lăng 150 mg
- Cao lá Bạch quả 10 mg
- Tá dược vừa đủ 1 viên
- Phòng và điều trị chứng suy giảm trí nhớ, thiếu tuần hoàn não.
- Thích hợp cho người làm việc trí óc căng thẳng bị đau đầu, hoa mắt, chóng mặt, mệt mỏi.
- Người lớn: 1 - 2 viên/lần, ngày uống 2 - 3 lần.
- Trẻ em trên 6 tuổi: 1 viên/lần, ngày uống 2 lần.
❖ Công dụng Gối lá Đinh lăng được làm đúng quy cách tiêu chuẩn sẽ cho bé giấc ngủ ngon, chống mồ hôi trộm, hết tật giật mình, tránh được muỗi và côn trùng.
❖ Cách dùng Đối với trẻ từ 0 - 24 tháng tuổi nên sử dụng gối size 26 cm x 40 cm Trẻ trên 24 tháng tuổi nên sử dụng gối size 30 cm x 46 cm (goianhviet.com).
Gỏi cá Rượu Đinh lăng
Sản phẩm đinh lăng có mặt trên thị trường
Tổng quan về thành phần hóa học thực vật
Để khảo sát thành phần hóa thực vật của một loài cây thì các nhà nghiên cứu đã đưa ra quyết định và làm việc trên một loài cây mà tùy vào mục đích lựa chọn trước Việc lựa chọn này phụ thuộc rất nhiều tài liệu tham khảo và các phương tiện sẵn có hoặc liên kết được của phòng thí nghiệm đó Các tài liệu tham khảo đó có thể là dữ liệu tin học NAPRALERT cho biết các thông tin về hóa - thực vật, đặc điểm thực vật, hoạt tính sinh học của hợp chất cụ thể, hoặc tất cả các thông tin về vùng địa phương, từng quốc gia (Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007).
Trong nghiên cứu và sản xuất dược liệu và các chế phẩm từ Dược liệu, để chiết xuất và tinh chế các cao chiết Dược liệu; kiểm soát và đảm bảo chất lượng dược liệu và các chế phẩm từ dược liệu hay phân lập các chất tinh khiết người ta cần phải biết thành phần (ở mức độ cao hơn là cấu trúc hóa học) của các chất trong dược liệu đó Trong sử dụng Dược liệu, có nhiều trường hợp dược liệu được sử dụng nhiều và có hiệu quả trong điều trị nhưng thành phần hóa học của chúng lại không được biết đầy đủ hay đôi khi hoàn toàn chưa được nghiên cứu sâu Ngày nay việc hiểu biết về thành phần hóa thực vật của các dược liệu càng trở nên quan trọng hơn khi mà tiêu chuẩn hóa Dược liệu, kiểm soát chất lượng dược liệu và các dạng chế phẩm từ dược liệu có xu hướng là những yêu cầu bắt buộc để đảm bảo tính an toàn, hiệu quả và chất lượng của sản phẩm cho người sử dụng.
Thành phần hóa học của một dược liệu rất phức tạp và thường không thể được biết tường tận Vì thế, thông thường ở mức độ đơn giản nhất, việc nghiên cứu thành phần hóa học của dược liệu thường được bắt đầu bằng việc xác định các các phản ứng hóa học Việc xác định này được gọi là “Phân tích thành phần hóa thực vật”.
Trong phân tích thành phần hóa thực vật, người ta thường sử dụng các phản ứng hóa học đặc trưng cho một nhóm hợp chất để xác định sự có mặt của nhóm hợp chất này trong nguyên liệu thực vật Việc phân tích này được tiến hành theo 2 bước:
Phân tích sơ bộ: Các chất trong nguyên liệu thực vật được phân thành một vài phân đoạn đơn giản bằng cách sử dụng các quy trình chiết đơn giản, trong những điều kiện nhất định (dung môi, pH môi trường v.v…) Định tính nhanh các hợp chất trong các phân đoạn bằng một số thuốc thử chung. Định tính xác định: Dùng các quy trình chiết đặc hiệu hơn, nhiều phản ứng đặc hiệu hơn để xác nhận sự có mặt của nhóm hợp chất.
Không phải tất cả các nhóm hợp chất trong dược liệu đều có thể được định tính Phân tích thành phần hóa thực vật chỉ có thể xác định một số nhóm hợp chất phổ biến trong thực vật. Ở mức độ cao hơn, việc định tính các nhóm hợp chất bằng các phương pháp khác nhau như: Các phương pháp sắc ký kết hợp với định tính hóa học, kết hợp với phân tích quang phổ cũng có thể được sử dụng (ĐH Y Dược TPHCM, 2014).
Quy trình dùng để xác định nhanh một số nhóm hợp chất thường gặp trong nguyên liệu thực vật bằng các phản ứng hóa học (thường được gọi là phân tích sơ bộ thành phần hóa thực vật) dựa trên nguyên tắc:
Phân tách hỗn hợp các chất trong nguyên liệu thành những phân đoạn đơn giản.
Dùng các phản ứng hóa học đặc trưng (thường là các phản ứng kết tủa, phản ứng màu) để phát hiện các nhóm hợp chất có trong dịch chiết.
Kết quả của các phản ứng đặc trưng, đặc biệt là các phản ứng màu, phụ thuộc nhiều vào mức độ “tinh khiết” của nhóm chất đó trong môi trường phản ứng Phản ứng của một hợp chất hay một nhóm hợp chất “tinh khiết” có thể khác biệt nhiều hay ít, đôi khi khác biệt hoàn toàn với phản ứng của nó trong một hỗn hợp Trong hỗn hợp, các nhóm hợp chất ảnh hưởng đến kết quả phản ứng của một nhóm hợp chất khác thường được xem là các “tạp chất” Các “tạp chất” này có thể ảnh hưởng đến kết quả định tính theo hai hướng:
- Cản trở phản ứng, làm cho phản ứng khó xảy ra hay không thể xảy ra.
- Cản trở việc nhận định kết quả phản ứng do bản thân chúng che lắp kết quả phản ứng hay chúng cũng phản ứng với thuốc thử và tạo ra sản phẩm che lắp kết quả.
Vì thế, việc tách các chất có trong nguyên liệu thực vật thành các phân đoạn có các thành phần đơn giản trước khi tiến hành định tính là cần thiết để có thể thu được một kết quả tốt Trong phân tích sơ bộ thành phần hóa thực vât, tách các phân đoạn đơn giản chủ yếu dựa vào tính tan của các nhóm hợp chất trong các môi trường (dung môi, pH) khác nhau.
Các chất trong nguyên liệu thực vật được phân thành các nhóm theo độ phân cực của chúng Thông thường chúng được phân thành 3 nhóm:
- Nhóm các chất không hoặc kém phân cực.
- Nhóm các chất có độ phân cực trung bình.
- Nhóm các chất có độ phân cực mạnh.
Trong một số trường hợp, sự thay đổi mức độ ion hóa của phân tử (dẫn tới thay đổi tính tan) của một nhóm chất trong môi trường acid hay base cũng được dùng để tách các phân nhóm.
Yêu cầu chung của các phản ứng hay các thuốc thử sử dụng trong định tính cũng phải không hay ít bị ảnh hưởng bởi sự có mặt của các nhóm hợp chất khác có trong môi trường phản ứng Có một số quy trình khác nhau để định tính các nhóm hợp chất thường gặp trong thực vật Các quy trình khác nhau chủ yếu ở việc sử dụng dung môi để chiết tách hỗn hợp và số lượng các nhóm hợp chất được định tính.
Một số quy trình phân tích được sử dụng trong sàng lọc các chất vô cơ và hữu cơ đã được sử dụng từ lâu trong các phòng thí nghiệm là quy trình phân tích của Stas - Otto.
Quy trình này sử dụng chủ yếu cho các hỗn hợp các chất tổng hợp Các quy trình phân tích được sử dụng trong phân tích thành phần hóa học của các thực vật có thể kể là quy trình phân tích của Puri (Hungari), của Schreiber (Đức) và quy trình phân tích của I Ciulei (Trường Đại học Dược khoa Bucarest, Rumani) v.v…
Trong các quy trình trên, quy trình phân tích của I Ciulei (Trường Đại học Dược khoa Bucarest, Rumani) thường được dùng vì những ưu điểm của nó so với các quy trình khác Nó xác định được nhiều nhóm hợp chất trong nguyên liệu thực vật, cách thực hiện không quá phức tạp và có thể tiến hành trong một khoảng thời gian ngắn, với một lượng nguyên liệu nhỏ (khoảng 5 - 25 g) Kết quả có thể cho một khái niệm về thành phần hóa thực vật của một dược liệu (ĐH Y Dược TPHCM, 2014).
2.3 MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP CHIẾT TÁCH
Mục đích của việc tách chiết, cô lập hợp chất tự nhiên
Một số phương pháp chiết tách
Kĩ thuật chiết rắn- lỏng
- Mẫu cây tươi cả lá, thân, rễ Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms).
- Thân và rễ Đinh lăng dùng để nghiên cứu thành phần hóa học và chiết phân đoạn.
2.1.2 Dung môi và hóa chất
Ngoài một số dung môi hóa chất cơ bản dùng trong phòng thí nghiệm, trong phần thực nghiệm có sử dụng:
- Hóa chất khảo sát vi học: Dung dịch javel 50 %, dung dịch acid acetic
1 %, dung dịch iod 0,1 % (son phèn), dung dịch carmin 1 %, nước cất.
- Dung môi chiết xuất: EtOH 96 %, MeOH.
- Dung môi dùng trong lắc phân bố, sắc ký lớp mỏng: Diethyl ether, ethyl acetat, n-butanol.
- Dung môi sắc ký lớp mỏng: Chloroform, methanol, n-hexan, n-butanol, diethyl ether, ethyl acetat, petroleum ether, benzen.
- SKLM dùng bản silica gel F254 Merck tráng sẵn trên nền nhôm.
- Chất chuẩn: Acid oleanoid chuẩn.
Đối tượng và phương pháp nghiên cứu( nguyên liệu, thiết bị, nội dung, phương pháp nghiên cứu)
Đối tượng nghiên cứu
- Mẫu cây tươi cả lá, thân, rễ Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms).
- Thân và rễ Đinh lăng dùng để nghiên cứu thành phần hóa học và chiết phân đoạn.
2.1.2 Dung môi và hóa chất
Ngoài một số dung môi hóa chất cơ bản dùng trong phòng thí nghiệm, trong phần thực nghiệm có sử dụng:
- Hóa chất khảo sát vi học: Dung dịch javel 50 %, dung dịch acid acetic
1 %, dung dịch iod 0,1 % (son phèn), dung dịch carmin 1 %, nước cất.
- Dung môi chiết xuất: EtOH 96 %, MeOH.
- Dung môi dùng trong lắc phân bố, sắc ký lớp mỏng: Diethyl ether, ethyl acetat, n-butanol.
- Dung môi sắc ký lớp mỏng: Chloroform, methanol, n-hexan, n-butanol, diethyl ether, ethyl acetat, petroleum ether, benzen.
- SKLM dùng bản silica gel F254 Merck tráng sẵn trên nền nhôm.
- Chất chuẩn: Acid oleanoid chuẩn.
- Phát hiện vết chất: Đèn tử ngoại bước sóng 254 nm và 365 nm, thuốc thử vanillin sulfuric (VS), thuốc thử acid sulfuric 10 %/EtOH.
- Bình sắc ký Tây Ban Nha.
- Cân phân tích OHAUS PAJ 2102.
- Điện thoại di động SAMSUNG J7 Prime.
- Kính hiển vi OLYMPUS CX22.
- Máy cô quay Shendi RE-52CS-1.
- Máy khuấy EMCLAB OS20-Pro.
- Các dụng cụ thông dụng khác trong phòng thí nghiệm.
2.2.1 Thu hái xử lý và bảo quản Đinh lăng
Cây Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) được thu hái ngày 11/11/2016 tại Tri Tôn - An Giang, dược liệu thu hái về được PGS.TS Trần Công Luận định danh và so sánh với các tài liệu tham khảo xác định được là đúng loài Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) (Đỗ Tất Lợi, 2004; Võ Văn Chi, 2012).
2.2.1.2 Xử lý và bảo quản Để khảo sát cây khô thì rễ tươi và thân tươi sau khi thu hái được làm sạch và phơi khô ở nhiệt độ phòng hoặc sấy trong tủ sấy ở 60 – 80 o C, tránh tiếp xúc trực tiếp với ánh nắng mặt trời gay gắt vì tia tử ngoại (UV) có trong ánh sáng mặt trời có thể kích thích phản ứng hóa học, tạo nên các hợp chất giả tạo Tiến hành xay thành bột dược liệu để sử dụng cho nghiên cứu (Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007; ĐH Y Dược TPHCM, 2014). Để khảo sát cây tươi (khảo sát về đặc điểm vi học), Đinh lăng sau khi được thu hái, làm sạch thì đem đi khảo sát ngay, tránh để trong thời gian lâu vì sẽ làm mất các tế bào hay các tế bào sẽ không còn nguyên vẹn, chọn mẫu phải chính xác, có tính đại diện, không quá già không quá non (Nguyễn Kim Phi
Lưu trữ mẫu: Mẫu được lưu trữ tại Bộ môn dược liệu, Trường Đại Học Tây Đô.
2.2.2 Nghiên cứu về đặc điểm vi học
Quan sát các đặc điểm hình thái của toàn cây Đinh lăng tươi và mô tả bộ phận dùng bên ngoài của dược liệu như màu sắc, kích thước, hình dáng,…(ĐH Y Dược TPHCM, 2014, Phạm Hoàng Hộ, 2003).
Chọn mẫu có tính đại diện, không quá già cũng không quá non Để quan sát cấu tạo bên trong của những cơ quan thực vật thì nó được thực hiện bằng phương pháp cắt lát mỏng bằng tay và nhuộm hai màu với các cơ quan cắt ra thành từng khoanh (vi phẫu) trước khi quan sát Nếu mẫu cắt là lá thì thường lấy đoạn 1/3 gân giữa kể từ nơi tiếp giáp với cuống và một phần cuống lá ở hai bên Nếu là thân thì thường cắt ở lóng Nếu là rễ thì cắt ở phần rễ non (ĐH Y Dược TPHCM, 2014; Trương Thị Đẹp, 2014).
Có 2 loại phẫu thức được sử dụng:
Phẫu thức ngang: Lát cắt nằm trong mặt phẳng vuông góc với trục mẫu cắt.
Phẫu thức dọc: Lát cắt nằm trong mặt phẳng song song với trục mẫu cắt, thường sử dụng cho thân và rễ để quan sát các ống tiết hay ống nhựa mủ.
Nhuộm mẫu bằng cách nhuộm kép son phèn lục iod:
- Ngâm lát cắt vào dung dịch javel cho đến khi thấy lát cắt trắng, sau đó rửa lại bằng nước cất nhiều lần.
- Tiếp theo ngâm lát cắt vào dung dịch acid acetic trong vài phút để loại bỏ hết javel Rửa lại bằng nước cất.
- Ngâm lát cắt vào dung dịch son phèn lục iod cho đến khi lát cắt bắt được màu Rửa lại nhiều lần bằng nước cất cho đến hết màu.
- Vi phẫu sau khi nhuộm xong thì được ngâm trong nước cất.
Quan sát bằng kính hiển vi ở vật kính 4X, 10X, 40X và được ghi nhận lại bằng các thiết bị điện tử như máy ảnh, điện thoại di động,… (ĐH Y Dược TPHCM, 2014; Trương Thị Đẹp, 2014).
2.2.2.3 Khảo sát bột dược liệu
Lấy bộ phận lá, thân, rễ dược liệu Đinh lăng khảo sát (cũng là mẫu dùng cắt vi phẫu) cắt nhỏ, phơi sấy ở nhiệt độ 60 oC (hoặc phơi trong bóng râm) đến khô, xay bột mịn, rây qua rây cỡ 32 (rây mịn) Phần còn lại trên rây được đem đi sấy, xay và rây.
Bột dược liệu được quan sát bằng cách: Lấy một lượng nhỏ bột dược liệu khoảng bằng đầu tăm cho lên một phiến kính (lame) rồi nhỏ 1 - 2 giọt nước sau đó khuấy kỹ sau đó đậy lamelle lại và cuối cùng là soi kính hiển vi bắt đầu bằng vật kính 10X, sau đó với vật kính 40X.
Trước khi soi kính hiển vi phải quan sát bằng cảm quan để có thêm yếu tố kiểm nghiệm.
Các cấu tử tìm thấy được chụp lại bằng điện thoại trực tiếp qua thị kính (ĐH Y Dược TPHCM, 2014).
Phương pháp: Dùng cân phân tích OHAUS PAJ 2102 để tiến hành xác định độ ẩm của dược liệu. Độ ẩm dược liệu không quá 13,0 %, tiến hành theo phụ lục 9.6 của DĐVN
Cách thực hiện bằng cách trải mỏng khoảng 1,5 g dược liệu đã được nghiền mịn lên dĩa cân và tiến hành xác định độ ẩm theo hướng dẫn sử dụng cân phân tích OHAUS PAJ 2102 2.2.3.2 Xác định tro toàn phần
- Cách tiến hành: Cân khoảng 2 g dược liệu tiến hành theo phụ lục 9.8, phương pháp của DĐVN IV (2009).
2.2.3.3 Xác định chất chiết được trong dược liệu
-Không được ít hơn 5,0 % Theo phụ lục 12.10 DĐVN IV.
- Cân chính xác khoảng 2 g bột dược liệu cho vào bình nón Thêm khoảng 50 ml nước cất, đậy kín, cân lại khối lượng, sau đó để yên trong 1 giờ Đun sôi nhẹ dưới hồi lưu 1 giờ, để nguội, lấy bình ra cân lại khối lượng, dùng nước bổ sung lại khối lượng bị giảm, lọc qua phễu lọc thô vào bình lấy khoảng 25 ml vào cốc thủy tinh đã được bì khối lượng cốc Cô cách thủy đến cắn khô cắn thu được đem sấy ở 105 o C trong 3 giờ lấy ra để nguội trong bình hút ẩm 30 phút Cân nhanh để xác định khối lượng và tính
Trong đó: b: Khối lượng cắn (g). a: Khối lượng dược liệu cân (g). h: Độ ẩm (%).
Tất cả các chỉ tiêu thử tinh khiết nói trên đều được lấy kết quả là giá trị trung bình của 3 lần thử độc lập.
2.2.4 Nghiên cứu về hóa học
Theo Dược Điển Việt Nam IV (2009).
❖ Bột dược liệu Đinh lăng
Phản ứng tạo bọt và màu
Lấy khoảng 1 g bột dược liệu, thêm 5 ml nước cất, lắc mạnh trong 1 phút, sẽ thấy bọt bền trong 10 phút.
Lấy 5 g bột dược liệu, thêm 10 ml ethanol 90 % (TT), ngâm trong 3 giờ, lắc, lọc Lấy dịch lọc làm các phản ứng sau:
- Lấy 1 ml dịch lọc vào ống nghiệm nhỏ, thêm 0,5 ml anhydrid acetic (TT), thêm từ từ 0,5 ml acid sulfuric (TT), tại lớp phân cách giữa hai dung dịch xuất hiện vòng màu đỏ.
- Lấy 1 ml dịch lọc, thêm 1 ml (TT) Fehling, sau đó đun sôi hiện tủa đỏ gạch.
Lấy một ít bột dược liệu đặt trên khay sứ, nhỏ thêm 1 giọt dung dịch Lugol (TT) bột chuyển sang màu xanh đen (Dược điển Việt Nam IV, 2009).
Phản ứng tạo bọt và màu
Lấy khoảng 1 g bột dược liệu, thêm 5 ml nước cất, lắc mạnh trong 1 phút, sẽ thấy bọt bền trong 10 phút.
Lấy 5 g bột dược liệu, thêm 10 ml ethanol 90 % (TT), ngâm trong 3 giờ, lắc, lọc Lấy dịch lọc làm các phản ứng sau:
- Lấy 1 ml dịch lọc vào ống nghiệm nhỏ, thêm 0,5 ml anhydrid acetic (TT), thêm từ từ 0,5 ml acid sulfuric (TT), tại lớp phân cách giữa hai dung dịch xuất hiện vòng màu đỏ phía trên có màu xanh.
- Lấy 1 ml dịch lọc, thêm 1 ml (TT) fehling, sau đó đun sôi hiện tủa đỏ gạch
(Dược điển Việt Nam IV, 2009).
Phương pháp Sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4):
Bản mỏng: Silica gel 60 F254 Merck.
Dung môi khai triển: n-butanol - acid acetic - nước (4 : 1 : 5, lớp trên).
Mẫu thử: Cao toàn phần của dược liệu và các cao phân đoạn.
Phát hiện: UV 254 nm; UV 365 nm; phun thuốc thử acid sulfuric 10 % trong ethanol (TT), sấy bản mỏng ở 105 oC cho tới khi hiện rõ vết Quan sát dưới ánh sáng thường.
Dung môi khai triển: Chloroform - methanol - nước (65 : 35 : 10; lớp dưới).
Mẫu thử: Cao toàn phần của dược liệu và các cao phân đoạn.
Phát hiện: UV 254 nm; UV 365 nm; phun thuốc thử vanilin sulfuric (TT) và (TT) acid sulfuric 10% trong ethanol, sấy bản mỏng ở 105 oC cho tới khi hiện rõ vết. Quan sát dưới ánh sáng thường (Dược điển Việt Nam IV, 2009).
Chấm sắc ký với chất chuẩn Acid oleanolic
Mẫu thử: Cao toàn phần của dược liệu, các cao phân đoạn và chất chuẩn acid oleanolic 43