(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta

(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học từ phân đoạn H2 của cao Hexane điều chế từ thân cây cà phê Robusta

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC TỪ PHÂN ĐOẠN H2 CỦA CAO HEXANE ĐIỀU CHẾ TỪ THÂN CÂY CÀ PHÊ ROBUSTA MÃ SỐ KHÓA LUẬN: HC.19.19 Sinh viên: Đào Thị Ánh Ngọc MSSV: 15128041 Giáo viên hướng dẫn: TS Võ Thị Ngà Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 LỜI CẢM ƠN Lời xin gửi lời cảm ơn đến lãnh đạo, thầy Khoa Cơng nghệ Hóa học Thực phẩm - Trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật TPHCM tạo điều kiện cho học tập, nghiên cứu, rèn luyện để hồn thành chương trình học tập suốt năm qua làm khóa luận tốt nghiệp Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS.Võ Thị Ngà, người ln tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn thầy mơn hóa tận tình truyền đạt kiến thức đồng thời tạo điều kiện trang thiết bị, dụng cụ đầy đủ để thực đề tài Cuối xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè người luôn quan tâm, giúp đỡ, động viên suốt thời gian qua Tôi xin chân thành cảm ơn! I LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan tồn nội dung trình bày khóa luận tốt nghiệp kết nghiên cứu riêng tôi, thực hướng dẫn TS Võ Thị Ngà Các số liệu kết khóa luận trung thực Tơi xin cam đoan nội dung tham khảo khóa luận tốt nghiệp trích dẫn tài liệu rõ ràng, xác đầy đủ theo quy định Tp.HCM ngày 22 tháng 07 năm 2019 Sinh viên thực Đào Thị Ánh Ngọc II MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC SƠ ĐỒ vii DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT viii TÓM TẮT ĐỀ TÀI ix MỞ ĐẦU x CHƯƠNG :TỔNG QUAN 1.1.Giới thiệu chi Coffea 1.1.1.Nguồn gốc phân bố chi Coffea 1.1.2.Phân loại thực vật chi Coffea 1.2.Giới thiệu cà phê robusta 1.2.1.Sự phân bố 1.2.2.Đặc điểm sinh thái 1.2.3.Công dụng cà phê 1.2.4.Nghiên cứu dược tính 1.2.5.Thành phần hóa học cà phê CHƯƠNG :THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1.Hóa chất thiết bị, dụng cụ 13 2.1.1.Hóa chất 13 2.1.2.Thiết bị, dụng cụ 14 2.2.Các phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1.Nguyên liệu 16 2.2.2.Điều chế cao thô methanol 16 2.2.2 Điều chế phân đoạn cao hexane 18 2.2.3 Phân lập hợp chất từ phân đoạn H2 cao hexane 19 2.2.4.Xác định cấu trúc hợp chất 23 CHƯƠNG : KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 24 III 3.1.Trích ly lập chất 24 3.2.Xác định nhận dạng cấu trúc hợp chất phân lập 25 3.2.1.Hợp chất AN01 25 3.1.2.Hợp chất AN02 27 KÊT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 30 1.Kết luận 30 2.Kiến nghị 30 Tài liệu tham khảo 31 PHỤ LỤC 33 Phụ lục Các thiết bị, dụng cụ sử dụng nghiên cứu đề tài 33 Phụ lục Hình ảnh sắc kí lớp mỏng phân lập hợp chất AN01 35 Phụ lục Hình ảnh sắc kí lớp mỏng phân lập hợp chất AN02 38 Phụ lục Kết sắc kí cột silica gel phân đoạn cao hexan phân đoạn H2 40 Phụ lục Phổ hợp chất AN01 44 Phụ lục Phổ hợp chất AN02 46 IV DANH MỤC BẢNG Bảng 1.So sánh hai phương pháp trích ly cao hexane từ thân cà phê robusta 24 Bảng 2.Số liệu phổ NMR* hợp chất AN01 so sánh với stigmasterol 25 V DANH MỤC HÌNH Hình 1.Hình ảnh cà phê Hình Thân cà phê ( trái) cà phê (phải) Hình Mẫu thân vỏ cà phê robusta 16 Hình 2.Sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2 cao hexane trước lên cột .21 Hình Sắc kí lớp mỏng cao phân đoạn H2 hợp chất phân lập .23 Hình 1.Cấu trúc stigmasterol .27 VI DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.Sơ đồ nghiên cứu 15 Sơ đồ 2.Quy trình điều chế cao thơ methanol cao thành phần .18 Sơ đồ 3.Các phân đoạn phân tách từ cao hexane 19 Sơ đồ 4.Quy trình điều chế phân đoạn từ phân đoạn H2 cao hexane cô lập hợp chất hữu .20 VII DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Ý nghĩa C Chloroform CGA Chlorogenic acids E Ethyl acetate Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H (Proton Nuclear Magnetic Resonance) H-NMR 13 C-NMR HMBC Phổ cộng hưởng từ 13 C (Carbon Nuclear Magnetic Resonance) Tương quan dị nhân qua nhiều liên kết (Heteronuclear Multiple Quantum Correlation) HSQC Tương quan dị nhân qua liên kết (Heteronuclear Single Quantum Correlation) H Hexane J, δ Hằng số ghép (Hz), độ dịch chuyển hóa học (ppm) M Methanol MS Phổ khối lượng (Mass Spectrometry) pđ Phân đoạn s/d/t/dd/m Singlet, doublet, triplet, doublet of doublets, multiplet TLC Sắc kí lớp mỏng (Thin Layer Chromatography) UV Ultra Violet VIII TÓM TẮT ĐỀ TÀI Các nghiên cứu cà phê đăng tải tạp chí chuyên ngành chủ yếu tập trung vào phân lập chất có hạt, cà phê sau xác định thành phần hóa học, cơng dụng, hoạt tính sinh học chất Cịn phần thân chưa tìm thấy báo nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học hợp chất thân Do đó, đề tài “Khảo sát thành phần hóa học phân đoạn H2 cao hexane từ thân cà phê robusta” thực Cây cà phê robusta lấy từ tỉnh Lâm Đồng, Việt Nam Thân sau phơi khô đem xay nhuyễn thành bột Bột chia thành hai phần Phần đem ngâm dầm với methanol, phần trích nóng với methanol hệ thống đun hồi lưu Dịch trích đem cô quay để thu cao thô methanol Cao thô methanol trích ly phương pháp ngâm dầm đem hịa tan với hexane, ethyl acetate, methanol thu cao hexane, cao ethyl acetate, cao methanol tương ứng Từ cao hexane tách phân đoạn Chấm sắc kí lớp mỏng cao hexane phân đoạn H2 thấy vết rõ ràng Sau áp dụng kỹ thuật sắc kí phân lập chất tinh Hai chất cô lập đem đo phổ 1H-NMR, 13C-NMR, HMBC, HSQC Kết hợp phổ để xác định hợp chất có cấu trúc stigmasterol hợp chất acid béo mang liên kết đôi IX Phụ lục 2.4 Sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2.4.3.5 Phụ lục 2.5 Sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2.4.3.5.2 Phụ lục 2.6 Sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2.4.3.5.2.3 37 Phụ lục Hình ảnh sắc kí lớp mỏng phân lập hợp chất AN02 Phụ lục 3.1 Hình ảnh sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2.4.3.3 Phụ lục 3.2 Sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2.4.3.3.2 38 Phụ lục 3.3 Sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2.4.3.3.2.2 Phụ lục 3.4 Sắc kí lớp mỏng phân đoạn H2.4.3.3.2.2.4 39 Phụ lục Kết sắc kí cột silica gel phân đoạn cao hexan phân đoạn H2 Phụ lục 4.1 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2 Phân Hệ dung môi Khối lượng đoạn chạy cột (g) H2.1 1-9 H:EA 98:2 0.1874 Nhiều vết H2.2 10-32 H:EA 98:2 5.1944 Nhiều vết H2.3 33-65 H:Ea 95:5 5.5729 Vệt dài H2.4 66-76 H:Ea 9:1 2.4197 vết Rf = 0.37 STT Sắc kí mỏng Ghi Khảo sát Rf = 0.29 H2.5 77-83 H:Ea 8:2 1.1962 Nhiều vết H2.6 84-102 H: Ea 5:5 1.2686 Nhiều vết Phụ lục 4.2 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4 Phân Hệ dung mơi Khối lượng Sắc kí mỏng đoạn chạy cột (g) H2.4.1 1-32 100% C 0.0773 Nhiều vết H2.4.2 33-47 100% C 0.2186 Nhiều vết H2.4.3 48-83 100% C 1.8399 vết Rf = 0.37 STT Rf = 0.29 H2.4.4 84-107 100% C 0.4983 40 Nhiều vết Ghi Khảo sát Phụ lục 4.3 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3 STT Hệ dung mơi Khối lượng Sắc kí mỏng Phân đoạn chạy cột Ghi (g) H2.4.3.1 1-15 H:EA 8:2 0.0175 Nhiều vết H2.4.3.2 16-17 H:EA 8:2 0.0172 Nhiều vết H2.4.3.3 18-28 H:EA 8:2 0.2626 Nhiều vết H2.4.3.4 29-31 H:EA 8:2 0.0889 Nhiều vết H2.4.3.5 32-46 H:EA 8:2 1.2833 vết Rf = 0.37 H2.4.3.6 57-58 H:EA 8:2 0.0122 Nhiều vết Khảo sát Phụ lục 4.4 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3.5 STT Hệ dung môi chạy cột Phân đoạn Khối lượng (g) Sắc kí mỏng H:EA 8:2 0.0274 Nhiều vết H2.4.3.5.2 23-39 H:EA 8:2 1.1879 vết Rf = 0.37 H2.4.3.5.3 40-60 H:EA 8:2 0.028 Nhiều vết H2.4.3.5.1 1-22 Ghi Khảo sát Phụ lục 4.5 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3.5.2 STT Phân đoạn Hệ dung môi chạy cột Khối lượng Sắc kí mỏng H2.4.3.5.2.1 1-16 100 %C 0.0110 g Vệt dài H2.4.3.5.2.2 17-23 100 %C 0.5432g Vệt dài H2.4.3.5.2.3 24-29 100 %C 0.2177 g vết Rf = 0.37 41 Ghi Khảo sát H2.4.3.5.2.4 30-39 100 %C 0.3575 g Nhiều vết H2.4.3.5.2.5 40-60 100 %C 0.2073 g Nhiều vết Phụ lục 4.6 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3.5.2.3 Phân đoạn STT Hệ dung môi chạy cột Khối lượng (g) Sắc kí mỏng H2.4.3.5.2.3.1 1-24 C:M 1:4 0.0018 g Vết mờ H2.4.3.5.2.3.2 25-31 C:M 1:4 0.0154 g vết Rf = 0.37 H2.4.3.5.2.3.3 32-52 C:M 1:4 0.0038 g Vết mờ Phụ lục 4.7 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3.3 STT H2.4.3.3.1 H2.4.3.3.2 H2.4.3.3.3 H2.4.3.3.4 H2.4.3.3.5 Phân đoạn 1-4 5-11 12-21 22-57 58-78 Hệ dung môi chạy cột H:EA 8:2 H:EA 8:2 H:EA 8:2 H:EA 8:2 H:EA 8:2 Khối lượng (g) Sắc kí mỏng 0.0251 0.0581 0.0233 0.0351 0.0214 Nhiều vết vết Rf = 0.29 Nhiều vết Nhiều vết Nhiều vết Ghi Khảo sát Phụ lục 4.8 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3.3.2 STT Phân đoạn Hệ dung môi chạy cột Khối lượng (g) Sắc kí mỏng Ghi H2.4.3.3.2.1 1-4 C:M 97:3 0.0149 Nhiều vết H2.4.3.3.2.2 5-11 C:M 97:3 0.0289 vết Rf = 0.29 Khảo sát H2.4.3.3.2.3 12-37 C:M 97:3 0.0086 Nhiều vết 42 Phụ lục 4.9 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3.3.2.2 STT Phân đoạn Hệ dung Khối lượng môi chạy cột (g) Sắc kí mỏng Ghi H2.4.3.3.2.2.1 1-21 100 % C 0.0027 Nhiều vết H2.4.3.3.2.2.2 H2.4.3.3.2.2.3 H2.4.3.3.2.2.4 H2.4.3.3.2.2.5 22-33 34-60 61-75 76-80 100 % C 100 % C 100 % C 100 % C 0.0051 0.0147 0.0066 0.0008 Nhiều vết Vệt dài vết Rf = 0.29 Nhiều vết Khảo sát Phụ lục 4.10 Kết sắc kí cột silica gel cao phân đoạn H2.4.3.3.2.2.4 STT Phân đoạn H.2.4.3.3.2.2.4.1 1-32 H.2.4.3.3.2.2.4.2 33-53 H.2.4.3.3.2.2.4.3 54-63 Hệ dung môi chạy cột C:M 1:4 C:M 1:4 C:M 1:4 43 Khối lượng (g) 0.0011 0.0059 0.0004 Sắc kí mỏng Vết mờ vết Rf = 0.29 Vết mờ Phụ lục Phổ hợp chất AN01 44 45 Phụ lục Phổ hợp chất AN02 46 47 48 49 50 S K L 0 ... x? ?cao lý mẫu thành phần Điều chế phân cao Điều đoạn chế cao thô hexane methanol, cao thành phần Phân lập hợp chất từ? ?iều phânchế đoạn cácH2 cao? ?oạn hexane phân cao hexane - Thu hái phần thân cà. .. nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học hợp chất thân Do đó, đề tài ? ?Khảo sát thành phần hóa học phân đoạn H2 cao hexane từ thân cà phê robusta? ?? thực Cây cà phê robusta lấy từ tỉnh Lâm... nhóm phân cơng khảo sát phân đoạn Đề tài khảo sát phân đoạn H2 2.2.3 Phân lập hợp chất từ phân đoạn H2 cao hexane 19 Cao hexane phân đoạn H2 SKC silica gel H:EA từ 98:2 đến 5:5 pđ H2. 4 pđ H2. 1