(Luận án tiến sĩ) nghiên cứu thành phần hóa học và tác dụng ức chế enzyme α glucosidase từ loài trà shan tuyết camellia sinensis var assamica (j w mast ) kitam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Dương Thị Ngọc Bích NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC VÀ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE TỪ LOÀI TRÀ SHAN TUYẾT Camellia sinensis var assamica (J.W.MAST.) Kitam LUẬN VĂN THẠC SĨ: HÓA HỌC Hà Nội – 2020 luan an BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Dương Thị Ngọc Bích NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE TỪ LOÀI TRÀ SHAN TUYẾT Camellia sinensis var assamica (J.W.MAST.) Kitam Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ: HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Thị Cúc Hà Nội – 2020 luan an i Lời cam đoan Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng cơng trình khác Tôi xin cam đoan rằng, giúp đỡ việc hoàn thành luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm số liệu luận văn Hà Nội, ngày 28 tháng năm 2020 Học viên Dương Thị Ngọc Bích luan an ii Lời cảm ơn Luận văn hồn thành Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Để hoàn thành luận văn tốt nghiệp này, bên cạnh cố gắng nỗ lực thân, nhận động viên giúp đỡ lớn nhiều cá nhân tập thể Tôi xin chân thành cảm ơn đề tài Quỹ phát triển khoa học công nghệ Việt Nam (NAFOSTED) mã số 104.01-2014.02 hỗ trợ thực thành công luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Thị Cúc - Viện Hoá sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình nghiên cứu hồn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới đồng nghiệp thuộc phịng Nghiên cứu cấu trúc, Viện Hố sinh biển tạo điều kiện, hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian làm luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo thầy cô giáo Học viện Khoa học Công nghệ giúp đỡ, tạo điều kiện truyền đạt vốn kiến thức quý báu cho suốt thời gian tơi học tập hồn thành luận văn Tơi trân trọng biết ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè động viên giúp đỡ vượt qua khó khăn để hồn thành luận văn Hà Nội, 28 tháng năm 2020 Học viên Dương Thị Ngọc Bích luan an iii Danh mục ký hiệu chữ viết tắt Kí hiệu 13 Tiếng Anh C-NMR Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Diễn giải Cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 Proton Nuclear Magnetic Resonance Cộng hưởng từ hạt nhân proton CC Column chromatography Sắc kí cột DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer Phổ DEPT DMSO Dimethylsulfoxide (CH3)2SO HMBC Heteronuclear mutiple Bond Connectivity Tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết HSQC Heteronuclear Single-Quantum Coherence Tương tác dị hạt nhân qua liên kết IC50 Inhibitory concentration at 50% Nồng độ ức chế 50% đối tượng thử nghiệm RP-18 Reserve phase C-18 Chất hấp phụ pha đảo C-18 TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng TMS Tetramethylsilane (CH3)4Si H-NMR luan an iv Danh mục bảng Bảng 4.1 Số liệu NMR CA1 chất tham khảo CA1a 35 Bảng 4.2 Số liệu NMR CA2 chất tham khảo CA1 40 Bảng 4.3 Số liệu NMR CA3 chất tham khảo 47 Bảng 4.4 Số liệu NMR CA4 chất tham khảo 51 Bảng 4.5 Số liệu NMR CA5 chất tham khảo 55 Bảng 4.6 Số liệu NMR CA6 chất tham khảo 58 Bảng 4.7 Số liệu NMR CA8 chất tham khảo 64 Bảng 4.8 Kết đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase hợp chất 71 luan an v Danh mục hình vẽ Hình 1.1 Cây trà Shan tuyết (C sinensis var assamica) Hình 3.1 Sơ đồ phân lập hợp chất từ loài trà Shan tuyết C sinensis var assamica…………………………………………………………………… 29 Hình 4.1 Cấu trúc hóa học CA1 hợp chất tham khảo CA1a………34 Hình 4.2 Các tương tác HMBC COSY CA1 36 Hình 4.3 Phổ HR-ESI-MS hợp chất CA1 37 Hình 4.4 Phổ 1H-NMR hợp chất CA1 37 Hình 4.5 Phổ 13C-NMR hợp chất CA1 38 Hình 4.6 Phổ HSQC hợp chất CA1 38 Hình 4.7 Phổ HMBC hợp chất CA1 39 Hình 4.8 Phổ COSY hợp chất CA1 39 Hình 4.9 Cấu trúc hóa học CA2 hợp chất tham khảo CA1 40 Hình 4.10 Các tương tác HMBC COSY CA2 42 Hình 4.11 Phổ HR-ESI-MS hợp chất CA2 42 Hình 4.12 Phổ 1H-NMR hợp chất CA2 43 Hình 4.13 Phổ 13C-NMR hợp chất CA2 43 Hình 4.14 Phổ HSQC hợp chất CA2 44 Hình 4.15 Phổ HMBC hợp chất CA2 44 Hình 4.16 Phổ COSY hợp chất CA2 45 Hình 4.17 Phổ NOESY hợp chất CA2 45 Hình 4.18 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC CA3 46 Hình 4.19 Phổ 1H-NMR hợp chất CA3 48 Hình 4.20 Phổ 13C-NMR hợp chất CA3 48 Hình 4.21 Phổ HSQC hợp chất CA3 49 luan an vi Hình 4.22 Phổ HMBC hợp chất CA3 49 Hình 4.23 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC CA4 50 Hình 4.24 Phổ 1H-NMR hợp chất CA4 52 Hình 4.25 Phổ 13C-NMR hợp chất CA4 52 Hình 4.26 Phổ HSQC hợp chất CA4 53 Hình 4.27 Phổ HMBC hợp chất CA4 53 Hình 4.28 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC CA5 54 Hình 4.29 Phổ 1H-NMR hợp chất CA5 56 Hình 4.30 Phổ 13C-NMR hợp chất CA5 56 Hình 4.31 Phổ HSQC hợp chất CA5 57 Hình 4.32 Phổ HMBC hợp chất CA5 57 Hình 4.33 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC CA6 58 Hình 4.34 Phổ 1H-NMR hợp chất CA6 59 Hình 4.35 Phổ 13C-NMR hợp chất CA6 60 Hình 4.36 Phổ HSQC hợp chất CA6 60 Hình 4.37 Phổ HMBC hợp chất CA6 61 Hình 4.38 Cấu trúc hóa học CA7 61 Hình 4.39 Phổ 1H-NMR hợp chất CA7 62 Hình 4.40 Phổ 13C-NMR hợp chất CA7 63 Hình 4.41 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC CA8 63 Hình 4.42 Phổ 1H-NMR hợp chất CA8 65 Hình 4.43 Phổ 13C-NMR hợp chất CA8 66 Hình 4.44 Phổ HSQC hợp chất CA8 66 Hình 4.45 Phổ HMBC hợp chất CA8 67 Hình 4.46 Cấu trúc hóa học CA9 67 luan an vii Hình 4.47 Phổ 1H-NMR hợp chất CA9 68 Hình 4.48 Phổ 13C-NMR hợp chất CA9 69 Hình 4.49 Phổ DEPT hợp chất CA9 69 luan an viii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN I LỜI CẢM ƠN II DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT III DANH MỤC CÁC BẢNG IV DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ V MỤC LỤC VIII MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CHI Camellia 1.2 GIỚI THIỆU VỀ CÂY TRÀ SHAN TUYẾT (Camellia sinensis var assamica) 1.2.1 Thực vật học 1.2.2 Đặc điểm thực vật 1.2.3 Bộ phận dùng, tính vị, tác dụng, cơng dụng 1.2.3.1 Bộ phận dùng 1.2.3.2 Tính vị, tác dụng 1.2.3.3 Công dụng 1.2.4 Tác dụng dược lý 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LỒI Camellia sinensis var assamica 1.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 1.3.1.1 Các hợp chất flavonoid 1.3.1.2 Các hợp chất terpenoid 14 1.3.2 Tình hình nghiên cứu nước 17 luan an 62 proton oxymethine H 5.05 (1H, br s) 5.55*(1H), proton methylene H 2.89 (1H, dd, J = 2.5, 17.0 Hz)/3.02 (1H, dd, J = 4.5, 17.0 Hz) Phổ 13C-NMR hợp chất CA7 thấy xuất tín hiệu 22 carbon bao gồm: carbon carbonyl C 167.6; mười carbon không liên kết với hydro C 99.4, 121.5, 131.4, 139.7, 145.9×2, 146.2×2, 157.2, 157.8×2; chín carbon methine C 70.0, 78.5, 95.9, 96.6, 110.2×2, 115.1, 116.0, 119.4; carbon methylene C 26.8 Số liệu phổ NMR hợp chất CA7 giống với số liệu phổ epicatechin 3-O-gallate [25] ở vị trí tương ứng Từ phân tích trên, hợp chất CA7 xác định epicatechin 3-O-gallate Hình 4.39 Phổ 1H-NMR hợp chất CA7 luan an 63 Hình 4.40 Phổ 13C-NMR hợp chất CA7 4.1.8 Hợp chất CA8: Epigallocatechin 3-O-gallate Hình 4.41 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC CA8 Hợp chất CA8 thu dạng bột vơ định hình, màu vàng Trên phổ 1H-NMR CA8 thấy xuất tín hiệu proton thơm H 6.03 (2H, s), 6.57 (2H, s) 7.00 (2H, s) Ngồi cịn xuất tín hiệu hai luan an 64 oxymethine H 5.00 (1H, br s) 5.56* (1H), proton methylene H 2.90 (1H, br d, J = 17.5 Hz)/3.01 (1H, dd, J = 4.5, 17.5 Hz) Phổ 13C-NMR HSQC hợp chất CA8 xuất tín hiệu 22 carbon bao gồm: carbon carbonyl C 167.6; mười hai carbon không liên kết với hydro C 99.4, 121.3, 130.7, 133.6, 139.7, 146.1×2, 146.5×2, 157.0, 157.5×2; tám carbon methine C 69.9, 78.4, 95.9, 96.6, 106.9×2 110.2×2; carbon methylene C 26.6 Phân tích số liệu phổ NMR gợi ý hợp chất CA8 flavan, tương tự hợp chất tham khảo epigallocatechin 3-O-gallate [26] Trên phổ HMBC hợp chất CA8 thấy xuất tương tác H-6 (H 6.03) với C-5 (C 157.5)/C-7 (C 157.5)/C-8 (C 96.6)/C-10 (C 99.4) gợi ý vị trí nhóm hydroxyl C-5 C-7 Vị trí nhóm hydroxyl C-3, C-4, C-5 xác định dựa tương tác HMBC H-2 (H 6.57) với C-3 (C 146.5)/C-4 (C 133.6)/C-6 (C 106.9) H-6 (H 6.57) với C-2 (C 106.9)/C-4 (C 133.6)/C-5 (C 146.5) Tương tác HMBC H2(H 7.00) với C-1 (C 121.3)/C-3 (C 146.1)/C-4 (C 139.7)/C-6 (C 110.2)/C7″ (C 167.6); tương tác H-3 (H 5.56) với C-7″ (C 167.6) gợi ý vị trí nhóm hydroxyl C-3, C-4, C-5 nhóm carbonyl C7″ Tín hiệu proton vị trí H-2 dạng broad singlet khẳng định proton H-2 H-3 dạng β So sánh số liệu phổ hợp chất CA8 với hợp chất tham khảo epigallocatechin 3-O-gallate thấy tương tự Vì vậy, cấu trúc hợp chất CA8 xác định epigallocatechin 3-O-gallate Bảng 4.7 Số liệu NMR CA8 chất tham khảo C δC# 78.1 69.2 26.6 δCa,b 78.4 69.9 26.6 157.1 95.8 157.8 96.5 157.4 157.5 95.9 157.5 96.6 157.0 luan an δHa,c (mult., J = Hz) 5.00 (br s) 5.56* 2.90 (br d, 17.5) 3.01 (dd, 4.5, 17.5) 6.03 (s) 6.03 (s) - 65 10 1′ 2′, 6′ 3′, 5′ 4′ 1″ 2″, 6″ 3″, 5″ 4″ 7″ a 99.0 130.7 106.7 146.2 133.1 121.9 110.0 146.2 133.1 166.0 99.4 130.7 106.9 146.5 133.6 121.3 110.2 146.1 139.7 167.6 6.57 (s) 7.00 (s) - đo CD3OD, b125 MHz, c500 MHz, *tín hiệu bị chập, #δC epigallocatechin 3-Ogallate đo acetone-d6 Hình 4.42 Phổ 1H-NMR hợp chất CA8 luan an 66 Hình 4.43 Phổ 13C-NMR hợp chất CA8 Hình 4.44 Phổ HSQC hợp chất CA8 luan an 67 Hình 4.45 Phổ HMBC hợp chất CA8 4.1.9 Hợp chất CA9: Kaempferol -3-O-β-D-glucopyranoside Hình 4.46 Cấu trúc hóa học CA9 Hợp chất CA9 phân lập dạng bột vô định hình, màu vàng Phổ 1H-NMR hợp chất CA9 thấy xuất tín hiệu proton vịng thơm thuộc hệ tương tác spin-spin AA′BB′ H 6.88 (2H, d, J = 9.0 Hz) 8.04 (2H, d, J = 9.0 Hz) cho thấy vịng B đối xứng có nhóm ở vị trí C-4′ Trên vịng A, giá trị H 6.20 (1H, d, J = 1.5 Hz) 6.43 (1H, d, J = 1.5 luan an 68 Hz) khẳng định ở vòng A bị vị trí Ngồi ra, phổ cịn thấy xuất proton anome δH 5.45 (1H, d, J = 7.5 Hz) gợi ý có mặt đơn vị đường Phổ 13C-NMR DEPT hợp chất CA9 xuất tín hiệu 21 carbon bao gồm: chín carbon không liên kết trực tiếp với hydro (C 103.9, 120.9, 133.2, 156.2, 156.4, 160.0, 161.2, 164.4 177.5), mười carbon methine (C 69.9, 74.2, 76.4, 77.5, 93.7, 98.8, 100.9, 115.1×2 130.9×2) carbon methylene (C 60.9) Số liệu phổ NMR hợp chất CA9 giống với số liệu phổ kaempferol -3-O-β-D-glucopyranoside [27] ở vị trí tương ứng Từ phân tích cho phép kết luận hợp chất CA9 kaempferol -3-O-β-Dglucopyranoside Hình 4.47 Phổ 1H-NMR hợp chất CA9 luan an 69 Hình 4.48 Phổ 13C-NMR hợp chất CA9 Hình 4.49 Phổ DEPT hợp chất CA9 luan an 70 4.1.10 Danh sách hợp chất phân lập từ loài trà Shan tuyết (C sinensis var assamica) Từ cặn chiết methanol loài loài trà Shan tuyết (C sinensis var assamica) phân lập xác định cấu trúc chín hợp chất: 4.2 HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐÃ PHÂN LẬP Các hợp chất phân lập từ loài trà Shan tuyết sàng lọc đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase Ở nồng độ 200 μM, hợp chất CA6-CA9 cho thấy khả ức chế enzyme α-glucosidase với phần trăm ức chế 50% Vì vậy, hợp chất đánh giá ở nồng độ 10, 25, 50, 100 200 µM để xác định giá trị IC50 Kết cho thấy: hợp chất thể hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase ở mức độ khác Cụ thể: hợp chất CA7 có khả ức chế enzyme α-glucosidase tốt với giá trị IC50 52.98 ± 0.87 µM, hợp chất CA6, CA8, CA9 có khả ức chế enzyme α-glucosidase yếu với giá trị IC50 tương ứng là: 84.53 ± 0.79 µM, 61.05 ± 1.31 µM, 123.03 ± 2.08 µM, đối chứng dương acarbose IC50 = 72,4 ± 0,8 µM luan an 71 Bảng 4.8 Kết đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase hợp chất Hợp chất IC50 (µM) CA6 84.53 ± 0.79 CA7 52.98 ± 0.87 CA8 61.05 ± 1.31 CA9 123.03 ± 2.08 Acarbose 72,4 ± 0,8 luan an 72 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Sử dụng kết hợp phương pháp sắc ký phương pháp phổ đại phân lập xác định cấu trúc chín hợp chất từ loài trà Shan tuyết (Camellia sinensis var assamica) Trong đó:  Hai hợp chất mới: 5,4′-dihydroxydihydrostilbene 3-O-[6′′-O-(4′′′methoxy)galloyl]-β-D-glucopyranoside (CA1) 5,4′dihydroxydihydrostilbene 3-O-(6-O-(3′′′,4′′′-dimethylgalloyl))-β-Dglucopyranoside (CA2)  Bảy hợp chất biết: 5,4′-dihydroxydihydrostilbene 3-O-β-Dglucopyranoside (CA3), 3-methoxy-5-hydroxydihydrostilbene 4′-O-β-Dglucopyranoside (sasastilboside A) (CA4), 3,5-dihydroxydihydrostilbene 4′O-β-D-glucopyranoside (CA5), epicatechin (CA6), epicatechin-3-O-gallate (CA7), epigallocatechin 3-O-gallate (CA8) kaempferol -3-O-β-Dglucopyranoside (CA9) Đã tiến hành thử hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase hợp chất phân lập Kết cho thấy: hợp chất CA6-CA9 có khả ức chế enzyme α-glucosidase, cụ thể: hợp chất CA7 có khả ức chế enzyme α-glucosidase tốt với giá trị IC50 52.98 ± 0.87 µM, hợp chất CA6, CA8, CA9 có khả ức chế enzyme α-glucosidase yếu với giá trị IC50 tương ứng là: 84.53 ± 0.79 µM, 61.05 ± 1.31 µM, 123.03 ± 2.08 µM 5.2 KIẾN NGHỊ Từ kết nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài trà Shan tuyết (Camellia sinensis var assamica), chúng tơi nhận thấy: Hợp chất CA7 có khả ức chế enzyme α-glucosidase tốt Vì vậy, cần thêm nghiên cứu sâu chế, tác dụng dược lý hợp chất luan an 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO Ninh L.N.H., 2017, Nghiên cứu phân loại chi Camellia L thuộc họ Chè – Theaceae ở Việt Nam, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội, Luận án tiến sĩ Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, T Toàn, 2003, Cây thuốc động vật làm thuốc ở Việt Nam, tập I Chi V.V., 2012, Dictionary of Vietnamese medicinal plants, Publishing House Medicine Nguyễn Cao Minh, 2010, Nghiên cứu chiết tách caffeine từ trà CO2 lỏng ở trạng thái siêu tới hạn Fumio Hashimoto, Gen-ichiro Nonaka and Itsuo Nishioka, 1989, Tannins and Related Compounds LXXVII Novel Chalcan-flavan Dimers, Assamica A, B and C, and a New Flavan-3-ol and Proanthocyanidins from the Fresh Leaves of Camellia senesis L var assamica KITAMURA, Chem Pharm Bull., 37(1), pp 77-85 Zhou Z.H., Zhang Y.J., Xu M., and Yang C.R., 2005, Puerins A and B, Two New 8-C Substituted Flavan-3-ols from Pu-er Tea, J Agric Food Chem., 53, pp 8614-8617 Tao M.K., Xua M., Zhu H.T., Cheng R.R., Wang D., Yang C.R., and Zhang Y.J., 2014, New Phenylpropanoid-Substituted Flavan-3-ols from Pu-er Ripe Tea, Natural Product Communications, (8), pp 1167-1170 Tian L.W., Tao M.K., Xu M., Hu J., Zhu H.T., Xiong W.Y., Zhang Y.J., 2014, Carboxymethyl and Carboxyl Catechins from Ripe Pu-er Tea, J Agric Food Chem., 62(50), pp 12229–12234 Wang W., Zhang L., Wang S., Shi S., Jiang Y., Li N., Tu P., 2014, 8-C Nethyl-2-pyrrolidinone substituted flavan-3-ols as the marker compounds of Chinese dark teas formed in the post-fermentation luan an 74 process provide significant antioxidative activity, Food Chemistry, 152, pp 539–545 10 Wang X., Liu Q., Zhu H., Wang H., Kang J., Shen Z., & Chen R., 2017, Flavanols from the Camellia sinensis var assamica and their hypoglycemic and hypolipidemic activities, Acta Pharmaceutica Sinica B, 7(3), pp 342–346 11 Zhou H., Li H.M., Du Y.M., Yan R.A., Ou S.Y., Chen T.F., Fu L., 2017, C-geranylated flavanones from YingDe black tea and their antioxidant and α -glucosidase inhibition activitie, Food Chemistry, 235, pp 227–233 12 Cheng J., Wu F.H., Wang P., Ke J.P., Wan X.C., Qiu M.H., & Bao G.H., 2018, Flavoalkaloids with a Pyrrolidinone Ring from Chinese Ancient Cultivated Tea Xi-Gui, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 66(30), pp 7948–7957 13 Murakami T., Nakamura J., Matsuda H., and Yoshikawa M., 1999, Bioactive saponins and glycoside XV1) Saponin constituents with gastroprotective effect from the seeds of tea plant, Camellia sinensis L var assamica pierre, cultivated in Sri Lanka: Structures of Assamponins A, B, C, D, and E, Chem Pharm Bull., 47(12), pp 1759-1764 14 Murakami T., Nakamura J., Kaguera T., Matsuda H., and Yoshikawa M., 2000, Bioactive saponins and glycoside XVII1) Inhibitory effect on gastric emptying and accelerating effect on gastrointestinal transit of tea saponins: Structures of Assamponins F, G, H, I, and J from the seeds and leaves on the plant tea, Chem Pharm Bull., 48(11), pp 1720-1725 15 Lu Y., Umeda T., Yagi A., Sakata K., Chaudhuri T., Ganguly D.K., & Sarma S., 2000, Triterpenoid saponins from the roots of tea plant (Camellia sinensis var assamica), Phytochemistry, 53(8), pp 941–946 16 Ohta T., Nakamura S., Nakashima S., Matsumoto T., Ogawa K., Fujimoto K., Matsuda H., 2015, Acylated oleanane-type triterpene oligoglycosides from the flower buds of Camellia sinensis var assamica, Tetrahedron, 71(5), pp 846–851 luan an 75 17 Liên T.T., 2014, Nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học phụ phẩm chè q trình chế biến chè khơ lồi chè xanh (Camellia sinensis (L.) kuntze) ở Thái Nguyên, Trường Đại học Sư phạm Đại học Thái Nguyên 18 Huong N.T., Vien L.T., Hanh T.T.H., Dang N.H., Thanh N.V., Cuong N.X., Nam N.H., Truong L.H., Ban N.K., Kiem P.V., Minh C.V., 2017, Triterpene saponins and megastigmane glucosides from Camellia bugiamapensis, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 27, pp 557561 19 Nguyen H., Pham B., Cam I., Phuong D., Le T., Tran T., Pham L., 2019, Flavonoids isolated from the flowers of Camellia chrysantha, Vietnam Journal of Science and Technology, 57, pp 287-293 20 Shengi F.W., Wei C.X., Xue K.H., Ke Z.X., 2005, A new stilbene glycoside from Dryopteris sublaeta, Acta Pharmaceutica Sinica, 40, pp 1131-1134 21 Nhiem N.X., Tai B.H., Quang T.H., Van Kiem P., Van Minh C., Nam N.H., Kim J.H., Im L.R., Lee Y.M., Kim Y.H., 2011, A new ursane-type triterpenoid glycoside from Centella asiatica leaves modulates the production of nitric oxide and secretion of TNF-a in activated RAW 264.7 cells Bioorg Med Chem Lett., 21(6), pp 1777-1781 22 Cuc N.T., Cuong N.T., Anh L.T., Yen D.T.H., Tai B.H., Thu Trang D., Yen P.H., Kiem P.V., Nam N.H., Minh C.V., Nhiem N.X., 2020, Dihydrostilbene glycosides from Camellia sasanqua and their αglucosidase and α-amylase inhibitory activities, Natural Product Research, pp 1-7 23 Oode C., Shimada W., Izutsu Y., Yokota M., Iwadate T., & Nihei K., 2014, Synthesis of dihydroresveratrol glycosides and evaluation of their activity against melanogenesis in B16F0 melanoma cells, European Journal of Medicinal Chemistry, 87, pp 862–867 24 Nishino C., Enoki N., Tawata S., Mori A., Kobayashi K., and Fukushima M., 1987, Antibacterial Activity of Flavonoids against luan an 76 Staphylococcus epidermidis, a Skin Bacterium, Agric Biol Chem., 51 (1), pp 139-143 25 Khallouki F., Haubner R., Hull W.E., Erben, G., Spiegelhalder B., Bartsch H., & Owen R.W., 2007, Isolation, purification and identification of ellagic acid derivatives, catechins, and procyanidins from the root bark of Anisophyllea dichostyla R Br., Food and Chemical Toxicology, 45(3), pp 472–485 26 Davis A.L., Cai Y., Davies A.P., Lewis J.R., 1996, 1H- and 13C-NMR assignments of some green tea polyphenols, Magnetic Resonance in Chemistry, 34, pp 887-890 27 Jayasinghe U.L., Balasooriya B.A., Bandara A.G., Fujimoto Y., 2004, Glycosides from Grewia damine and Filicium decipiens, Natural Product Research, 18, pp 499-502 luan an ... ? ?Nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng ức chế enzyme α- glucosidase từ loài trà Shan tuyết Camellia sinensis var assamica (J. W. Mast. ) Kitam? ?? Nghiên cứu góp phần làm rõ giá trị cơng dụng lồi trà. .. THIỆU VỀ CÂY TRÀ SHAN TUYẾT (Camellia sinensis var assamica) 1.2.1 Thực vật học Tên khoa học: Camellia sinensis var assamica (J. W. Mast. ) Kitam Tên thường gọi: Trà (ch? ?) Shan tuyết hay trà tuyết Giới... TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU Mẫu trà Shan tuyết (Camellia sinensis var assamica (J. W. MAST. ) Kitam .) thu hái Nguyên Bình, Cao Bằng, Việt Nam vào tháng 4/2019 Tên khoa học