Luận án nghiên cứu phân lập và khảo sát hoạt tính kháng sinh, gây độc tế bào của các hợp chất thứ cấp từ ba chủng xạ khuẩn streptomyces g246, g261, g248 thu thập tại vùng biển miền trung

1 MỞ ĐẦU Đại dương chiếm 70% diện tích bề mặt trái đất, nơi có đa dạng sinh học lớn trái đất Đây nơi sinh sống 34 36 ngành động thực vật trái đất với 300000 loài sinh vật biết đến Môi trường biển biết đến nguồn phong phú cung cấp hợp chất thiên nhiên, kho dược liệu khổng lồ chờ khai thác khám phá Đặc thù môi trường sống khắc nghiệt biển sâu điều kiện để hình thành hợp chất hữu với đặc điểm cấu trúc hóa học độc đáo hoạt tính sinh học quý giá Việc nghiên cứu hoạt chất thứ cấp sản sinh từ vi sinh vật biển giới thu nhiều thành tựu đáng kể Trong số có nhiều hợp chất thứ cấp với cấu trúc hóa học hoạt tính sinh học lý thú Đồng thời nhiều hợp chất số thử nghiệm sâu nhằm ứng dụng y dược Việt Nam nằm khu vực Thái Bình Dương (có chủ quyền biển với diện tích khoảng 1.000.000 km2) có hệ sinh vật biển đa dạng phong phú, có tiềm to lớn tài nguyên biển Chính phủ Việt Nam có định hướng phát triển kinh tế biển, khai thác tài nguyên thiên nhiên nghiên cứu sản phẩm tự nhiên từ biển Tuy nhiên nghiên cứu hợp chất thứ cấp từ nguồn vi sinh vật biển Việt Nam bắt đầu, có nghiên cứu công bố, nguồn đa dạng vi sinh vật biển nước ta lớn Các bệnh truyền nhiễm chiếm phần lớn bệnh người động vật Khoảng nửa sau kỷ 19, người ta phát vi sinh vật nguyên nhân gây bệnh truyền nhiễm Do liệu pháp hóa học nhằm vào vi sinh vật gây bệnh phát triển thành liệu pháp điều trị Năm 1928, Alexander Fleming phát Penicillin – hợp chất có hoạt tính kháng sinh mạnh Abraham, Chain, Florey tinh chế dạng ổn định có tác dụng chữa bệnh vào năm 1941 Thuốc kháng sinh Penicillin trở nên tiếng cứu sống nhiều người chiến tranh giới II Kể từ đó, kháng sinh trở thành dược phẩm thần kì sớm chiếm vị trí hàng đầu lĩnh vực dược phẩm giới, với kết ngày lạ, với nhu cầu ngày tăng lượng sản xuất ngày lớn Hiện nay, có thêm nhiều loại kháng sinh chiết xuất từ nấm, vi khuẩn, xạ khuẩn, mà xạ khuẩn chiếm phần lớn có xạ khuẩn biển Nhưng ngày nhiều vi sinh vật gây bệnh kháng với kháng sinh có Do vậy, cần phải tiếp tục nghiên cứu, tìm kiếm, phát loại kháng sinh mới, hoạt chất có tính kháng lao, chống ung thư Vì thực luận án với tên đề tài: ‘‘Nghiên cứu phân lập khảo sát hoạt tính kháng sinh, gây độc tế bào hợp chất thứ cấp từ ba chủng xạ khuẩn Streptomyces G246, G261, G248 thu thập vùng biển miền Trung - Việt Nam” Mục tiêu nghiên cứu: Phát hợp chất có hoạt tính kháng sinh gây độc tế bào từ nguồn vi sinh vật đáy biển miền Trung Việt Nam, cụ thể là: - Nghiên cứu phân lập xác định cấu trúc hợp chất thứ cấp từ dịch nuôi cấy chủng vi sinh vật phân lập từ vùng biển miền Trung – Việt Nam - Khảo sát hoạt tính gây độc tế bào hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chất phân lập làm sở khoa học định hướng cho việc nghiên cứu ứng dụng hợp chất Nhiệm vụ nghiên cứu: - Tổng quan tài liệu nghiên cứu trước hợp chất thứ cấp hoạt tính sinh học từ chủng vi sinh vật biển - Tìm quy trình xử lý dịch nuôi cấy để tạo dịch chiết Tinh chế cặn dịch chiết sắc ký cột để thu phân đoạn - Tinh chế chất có phân đoạn để thu hợp chất - Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập - Thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chất phân lập - Thử hoạt tính gây độc tế bào in vitro số dòng tế bào ung thư KB, MCF-7, Hep-G2, Lu-1 hợp chất phân lập CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Sự phân bố tính đa dạng vi sinh vật biển Biển môi trường sống đặc biệt, nghèo chất dinh dưỡng độ mặn cao Biển hệ sinh thái tự nhiên lớn địa cầu 70% bề mặt trái đất bao phủ nước Vi sinh vật biển có khả thích nghi với điều kiện mơi trường biển bị thay đổi, điều mở triển vọng phát triển hợp chất hữu thứ cấp đặc biệt Số lượng vi sinh vật biển khơng cao cạn Vi sinh vật biển phân lập từ trầm tích biển, nước biển, từ đối tượng sinh vật biển mà vi sinh vật liên kết Hiểu qui luật phân bố vi sinh vật biển tạo điều kiện thuận lợi để thu thập chúng từ vật mẫu thích hợp cho việc phân lập định hướng nhóm vi sinh vật có hoạt tính sinh học phân loại [14] Có 109 đơn vị phân loại vi khuẩn đất 106 taxa từ đại dương Sự phân bố vi sinh vật biển 105TB/ml dự báo đại dương chứa 3,6.1029 TB vi sinh vật, với phần lớn sinh khối từ vi khuẩn, cổ khuẩn, xạ khuẩn nấm đơn bào Vi khuẩn thường chiếm ưu nước biển Pseudomonas sp., Vibrio sp., Achromobacter sp., Flavobacterium sp., Micrococcus sp Quần thể vi sinh vật biển chia theo điều kiện sống chúng Các sinh vật biển hải miên, san khô mềm, thân mềm, rong, da gai số vật liệu biển khác trầm tích biết vật chủ cộng đồng vi sinh vật lớn vai trò vi sinh vật thay đổi theo nguồn dinh dưỡng đặc hữu loài Dựa nghiên cứu cộng đồng vi sinh vật phương pháp điện di (DGGE), giải trình tự gen 16S rRNA, người ta nhận thấy cộng đồng vi khuẩn liên kết với hải miên, san hô mềm số vật liệu biển khác có tới 25 phyla, có Proteobacteria, Nitrospira, Cyanobacteria, Bacteriodetes, Actinobacteria, Chloroflexi, Planctomycetes, Acidobacteria, Poribacteria Verrucomicrobia, thành viên cổ khuẩn Các quần thể vi sinh vật khác sống hải miên nấm, xạ khuẩn microalgae Rất biết virus hải miên, hạt giống virus phát nhân tế bào Aplysina (Verongia) cavernicola Những nghiên cứu hải miên loại vi sinh vật liên kết hải miên có thành viên Proteobacteria, Firmicutes, Bacteroidetes, Actinobacteria, Cyanobacteria Archaea [5] Nhóm vi khuẩn hiếu khí vi khuẩn dị dưỡng, có khả phát triển nguồn chất sẵn có hiđrocacbon, lipit, protein điều kiện có oxy hay oxy Nhóm vi khuẩn chuyển hóa hợp chất chứa nitơ: bao gồm vi khuẩn nitrit hóa, nitrat hóa vi khuẩn khử nitrat Trong nhóm vi khuẩn nitrit hóa oxy hóa amonium thành nitrit để nhóm vi khuẩn nitrat hóa oxy hóa tiếp thành nitrat Cịn nhóm vi khuẩn khử nitrat khử nitrat thành nitơ phân tử, khép kín chu trình chuyển hóa hợp chất chứa nitơ Nhóm vi sinh vật sử dụng hydrocacbon tạo chất hoạt hóa bề mặt vi sinh vật có khả tạo chất hoạt hóa bề mặt sử dụng hyđrocacbon dầu mỏ làm chất cho phát triển Số lượng vi khuẩn sử dụng hydrocacbon thị cho ô nhiễm dầu Với mức đa dạng sinh học cao vi sinh vật biển đóng vai trị quan trọng vịng tuần hồn sinh địa hóa ngun tố Những vi sinh vật tìm thấy ngõ ngách đại dương từ bề mặt đến thềm đáy biển, thể sinh vật biển hay dòng hải lưu Khoảng 1% số tế bào vi khuẩn quan sát mẫu sinh vật lấy từ biển phát triển môi trường nuôi cấy nhân tạo Vi sinh vật biển từ lâu biết đến số nguồn tài nguyên quan trọng sản sinh chất hữu với cấu trúc hóa học đa dạng có hoạt tính sinh học thú vị [1-4] Ngoài ra, vi sinh vật biển nghiên cứu ứng dụng nhiều lĩnh vực đời sống nhờ tính chất đặc hiệu chúng [6] Hầu hết hợp chất thứ cấp biết từ vi khuẩn tạo xạ khuẩn (actinobacteria) khuẩn lam (cyanobacteria) 1.2 Xạ khuẩn hình thành hợp chất thứ cấp từ xạ khuẩn 1.2.1 Xạ khuẩn (Actinobacteria) Xạ khuẩn ngành đặc biệt thuộc vi khuẩn Gram dương, có phát triển theo cấu trúc khoang, sợi (filamentous growth) đôi lúc giống nấm Trước đây, xạ khuẩn thường phân loại nấm sợi (filamentous fungi) gọi ″vi khuẩn bậc cao″ Chúng có đặc điểm hố sinh học đặc biệt, tạo lượng lớn loại hợp chất tự nhiên, nhiều số có hoạt tính sinh học mạnh kháng sinh hoạt tính dược học khác Về khía cạnh hợp chất tự nhiên, chi quan trọng xạ khuẩn Streptomyces Actinomyces Xạ khuẩn biển có trầm tích biển nhiều sinh vật biển khác (endophytes) Gần đây, nhà khoa học phát số chi xạ khuẩn biển với hợp chất đặc trưng quan trọng [7, 8] Đặc biệt, chi có khả thích nghi với mơi trường có độ mặn khác Các nghiên cứu hầu hết sử dụng hệ thống phân loại xạ khuẩn tác giả Bergey [9, 10] Hệ thống phân loại chủ yếu dựa phân tích dải trình tự nucleotide gene RNA thay liệu kiểu truyền thống Kể từ xuất phương pháp so sánh dải trình tự rRNA [2], có tranh luận kéo dài hiệu marker đơn phân tử (đơn gene), việc giải mã xác định lồi Mặc dù phân tích dựa việc so sánh nhiều gene sử dụng từ lâu, nhiên phân loại học, phương pháp chưa thể áp dụng chưa có sở liệu đầy đủ chuỗi đa phân tử (đa gene) Ngay kỷ nguyên di truyền học nay, có liệu cho chuỗi rRNA, có 400.000 cấu trúc rRNA thuộc sở liệu chung chuyên ngành Bên cạnh đó, liệu dự án lập đồ gene giúp xác định tập hợp nhỏ gene đại diện cho kiểu gene sinh vật tiền nhân Hơn nữa, kết nghiên cứu sử dụng phương pháp so sánh trình tự đơn gene giới phù hợp với hiểu biết tiến hoá sinh vật tiền nhân Mặc dù hình dạng chi tiết tiến hố xây dựng từ marker khác có khác nhau, chúng có nhóm/ bậc phân loại tương đồng khơng đối lập phương pháp phân loại Bergey dựa sở liệu cấu trúc đơn gene rRNA phương pháp có độ tin cậy cao [11] Xạ khuẩn ngành lớn giới vi khuẩn, phân loại dựa đặc điểm phân nhánh gene 16S rRNA dấu hiệu phân loại đặc trưng gen 16S rRNA Dựa kết nghiên cứu gen 23S rRNA xếp gen, xạ khuẩn khác ngành vi khuẩn khác chúng có số protein đặc hữu như: cytochrome-c, oxidase subunit 1, CTP synthase and glutamyl-tRNA synthase Theo Bergey, đến năm 2012, xạ khuẩn bao gồm lớp, 19 bộ, 50 họ 221 chi [9, 10] Xạ khuẩn vi khuẩn Gram dương vi khuẩn hiếu khí, kỵ khí với phản ứng nhuộm mầu thay đổi (Gram-stain-variable), với cấu trúc thành tế bào cứng, cố định có chứa muramic acid Hầu hết xạ khuẩn chemo-organotrophs (nguồn lượng có từ q trình oxi hố liên kết hố học hợp chất hữu cơ) phát triển môi trường pH trung tính, nhiên, có số xạ khuẩn sống môi trường acid môi trường kiềm Một số khác sống nơi có độ mặn cao (halophiles) có nhiệt độ cao (thermophiles) Xạ khuẩn có kiểu hình đa dạng, từ đơn giản hình cầu đến hình dạng có độ phân nhánh cao Hầu hết xạ khuẩn sinh vật hoại sinh (saprophytic) nhiên số gây bệnh cho thực vật động vật (pathogenic) Tỷ lệ G+C ADN xạ khuẩn nằm khoảng từ 50 mol% (Hoyosella and Tropheryma) đến 70 mol% (Frankia and Streptomyces) Xạ khuẩn phân bố rộng khắp lục địa nước [12, 13] Năm 1884, nhà khoa học người Đan Mạch Hans Christian nghĩ phương pháp nhuộm phân biệt để phân chia vi khuẩn thành nhóm khác nhau: vi khuẩn Gram dương (G+) vi khuẩn Gram âm (G-) Phương pháp nhuộm Gram sau sử dụng rộng rãi định loại vi sinh vật Thành phần hố học nhóm khác chủ yếu sau [14]: Bảng 1 Thành phần hóa học nhóm vi khuẩn Gram dƣơng Thành phần Gram âm Tỷ lệ % khối lƣợng khô thành tế bào Peptidoglycan 30-95 Acid teichoic Cao Hầu khơng có 20 Lipid Protein Khơng có có 5-20 Cao Hình 1 Cấu tạo thành tế bào vi khuẩn Gram dương Gram âm Thành tế bào (Cell wall) giúp trì hình thái tế bào, hỗ trợ chuyển động tiên mao (flagellum), giúp tế bào đề kháng với áp suất thẩm thấu, hỗ trợ trình phân cắt tế bào, cản trở xâm nhập số chất có phân tử lớn, liên quan đến tính kháng ngun, tính gây bệnh, tính mẫn cảm với thực khuẩn thể (bacteriophage) [14, 15] 1.2.2 Sự hình thành hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học xạ khuẩn Một đặc điểm quan trọng xạ khuẩn khả hình thành chất kháng sinh Đa số chất kháng sinh dùng y học có nguồn gốc từ xạ khuẩn, khoảng 5500 chất kháng sinh biết đến có khoảng 4000 chất kháng sinh từ xạ khuẩn [16] Đa số chất kháng sinh có nguồn gốc từ xạ khuẩn có phổ kháng sinh rộng, kìm hãm ức chế sinh trưởng phát triển nhiều loại vi sinh vật khác Ngày nay, người ta biết chất kháng sinh sản phẩm trao đổi thứ cấp vi sinh vật Tuy nhiên nhiều giả thuyết khác vai trò chất kháng sinh xạ khuẩn Một số cho rằng, hình thành chất kháng sinh chế giúp xạ khuẩn tồn môi trường tự nhiên, hình thành chất kháng sinh cạnh tranh mơi trường dinh dưỡng Lại có giả thuyết cho chất kháng sinh sản phẩm thải q trình trao đổi chất tế bào [17] Có đường sinh tổng hợp chất kháng sinh xạ khuẩn: - Chất kháng sinh tổng hợp từ chất trao đổi sơ cấp, thông qua chuỗi phản ứng enzyme (như chất kháng sinh cloramphenicol, chất kháng sinh thuộc nhóm nucleozit) - Chất kháng sinh hình thành từ chất trao đổi sơ cấp khác (như chất kháng sinh lincomicin, novobiocin) - Chất kháng sinh hình thành cách polyme hóa chất trao đổi sơ cấp, sau tiếp tục biến đổi qua phản ứng ezyme khác Có thể phân biệt thành dạng: + Chất kháng sinh nhóm polypeptide theo đường trùng ngưng acid amin : bacitracin, polymycin + Chất kháng sinh tạo thành nhờ phản ứng polymer hóa đơn vị acetat, propionat: chất kháng sinh nhóm macrolit, tetracilin, rifamicin + Chất kháng sinh aminoglycoside tạo thành nhờ phản ứng trùng hợp polysacarit: neomycin, streptomycin + Chất kháng sinh hình thành theo đường tổng hợp hợp chất izopreonit từ đơn vị acetat… Nhiều chủng xạ khuẩn có khả tổng hợp đồng thời hai hay nhiều chất kháng sinh có cấu trúc hóa học tác dụng sinh học tương tự [18] 1.3 Các họ xạ khuẩn biển thƣờng gặp 1.3.1 Họ Streptomycetaceae Trong họ Streptomycetaceae, có chi có nguồn gốc từ biển có khả sản xuất chất chuyển hóa thứ cấp có cấu trúc đa dạng Streptomyces Marinispora: Các xạ khuẩn thuộc chi Streptomyces sản xuất phần lớn chất chuyển hóa thứ cấp tách chiết từ xạ khuẩn có nguồn gốc từ biển Mặc dù Streptomyces phổ biến đất nghiên cứu gần cho thấy chúng thích nghi sinh trưởng mơi trường biển Các chất chuyển hóa từ Streptomyces có nguồn gốc từ biển có cấu trúc thú vị độc đáo mà xảy hồn tồn chưa có từ nguồn cạn Các đặc tính Streptomyces có nguồn gốc từ biển nhu cầu chúng thành phần muối tăng trưởng Các chi thuộc biển dường có khả sản xuất hợp chất lý thú [19] Phân tích liệu chuỗi 16S rARN cho thấy Marinispora chi họ Streptomycetaceae 20 chủng phân lập từ mơi trường biển Các nghiên cứu hóa học loài Marinispora phân lập marinomycins, macrolides vịng 44 cạnh với mơ hình thay bất thường polyol polyene so sánh với macrolides polyene điển amphotericin [19] 1.3.2 Họ Micromonosporaceae Trong họ Micromonosporaceae có hai chi đại diện xạ khuẩn biển, sản xuất chất trao đổi thứ cấp có cấu trúc đặc biệt Các chi Micromonospora Salinispora phát triển tốt môi trường mặn nước biển Mặc dù trước vi sinh vật thu thập đại dương mang vài khác biệt so với các chủng tương tự đất liền Chi Salinispora bao gồm ba loài Salinispora arenicola, Salinispora tropica, Salinispora pacifica Toàn trình tự hệ gen S arenicola, S Tropica S Pacifia sinh vật dành 10,9% 8,8% quan tổng hợp sinh học chúng để sản xuất chất chuyển hóa thứ cấp [19, 20] Chi thứ ba họ Micromonosporaceae Verrucosispora Verrucosispora maris, phân lập từ mẫu trầm tích từ vùng biển Nhật Bản (độ sâu 289 mét), sản xuất abyssomicins (abyssomicin C, 90) proximicins, đặc trưng 4-amino-furan-2-carboxylic acid Abyssomicin C sản phẩm tự nhiên tìm thấy, gây nên ức chế sinh tổng hợp acid aminobenzoic p- (PABA) Hoạt tính sinh học, cấu trúc hóa học độc đáo chế cho thấy khả khám phá lồi biển Cuối cùng, proximicin A tìm thấy có chứa -amino acid, có khả gây độc số dòng tế bào ung thư Trong nghiên cứu từ chủng Verrucosispora phân lập từ trầm tích Đại Tây Dương tạo phân tử proximicin-type khơng có khả cho việc sản xuất abyssomicins, từ cho thấy chủng tương tự từ vị trí địa lý khác có chuyển hóa khác [19, 20] 1.3.3 Các họ khác xạ khuẩn biển Các họ Nocardiopsaceae tìm thấy vào năm 1996, phải kể đến chi Nocardiopsis, chi thường xuyên phân lập từ mơi trường có độ mặn trung bình đến cao Hai peptide MKN-349A lucentamycin A chất chuyển hóa từ chi Nocardiopsis Lucentamycin A chất có hoạt tính độc tế bào tách chiết từ Nocardiopsis lucentensis, Bahamas Đây báo cáo đơn vị acid amin ethylideneproline tự nhiên Kahakamide A N- glycosyl indole antibiotic tách chiết từ N dassonvillei từ trầm tích đại dương Kauai, Hawaii Hợp chất có hoạt tính kháng khuẩn B subtilis [19, 20] Họ Pseudonocardiaceae gồm khoảng 20 chi Pseudonocardia, Actinobispora, Actinopolyspora, Amycolatopsis, Kibdelosporangium, Prauserella, Saccharomonospora, Saccharopolyspora, Thermocrispum[19, 20] 1.4 Các hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học từ xạ khuẩn biển Vi sinh vật biển bao gồm vi khuẩn, xạ khuẩn nấm xem nguồn nhiều tiềm cho việc cung cấp hợp chất có hoạt tính sinh học cao [1-4] Nhiều loại vi sinh vật biển sinh sống điều kiện khắc nghiệt, chúng thường sản sinh hợp chất có hoạt tính sinh học lý thú [6, 21] 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 1.4.1.1 Các hợp chất có hoạt tính kháng sinh Nhiều chất kháng sinh sản xuất quy mô công nghiệp sử dụng việc chữa bệnh streptomycin, tetraxyclin, chloramphenicol, kanamycin, vancomycin, neomycin nhiều loại dùng phòng chống bệnh cho trồng kasugamycin, blastisidin S Có nhiều lập luận khác theo nguồn gốc theo hướng điều trị bệnh nhìn chung hiểu chất kháng sinh (antibiotic) chất có tác dụng ức chế sinh trưởng tiêu diệt số vi sinh vật khác cách có chọn lọc nồng độ thấp Chất kháng sinh chất hóa học có hoạt tính 10 nồng độ thấp kháng lại vi sinh vật vi khuẩn gây bệnh cho người động vật, nấm gây bệnh động vật thực vật Các vi sinh vật mẫn cảm với chất kháng sinh mức độ khác nhau, đa số vi khuẩn Gram dương mẫn cảm với chất kháng sinh vi khuẩn Gram âm Công bố Brotzu cephalosporins C (1) P1 (2) chất chuyển hoá khác từ chủng Cephalosporium sp., phân lập từ rong biển Sardinia xem công bố chất chuyển hoá thứ cấp từ vi sinh vật biển [22] Sau nhiều cơng trình cơng bố hoạt tính kháng vi sinh vật gây bệnh ví dụ từ chủng Actinopolyspora AH1, phân lập từ vùng duyên hải Alibage, Maharashtra, sản xuất hợp chất thứ cấp kháng vi khuẩn gây bệnh Staphyloccoccus aureus, S epidermidis, Bacillus subtilis hoạt tính kháng nấm Aspergillus niger, A fumigatus, Penicillium Trong cơng trình nghiên cứu khác, người ta phân lập 75 chủng vi khuẩn từ bốn loài hải miên (Echinodictyum sp., Spongia sp., Sigmadocia fibulatus Mycale mannarensis) bờ biển Tuticorin, khu vực Vịnh Mannar Trong số đó, 21% chủng vi khuẩn tìm thấy có khả sản xuất kháng sinh [23] William, Paul phân lập chủng thuộc chi Streptomyces từ mẫu trầm tích biển San Diego, sản sinh dãy lớp chất quinone mà điển hình marinone (3) xác định Cấu trúc hóa học lớp chất cho thấy chúng sinh tổng hợp từ phần polyketide terpenoid Cũng từ số chủng khác chi Streptomyces, người ta phân lập napyradiomycin (4) azamerone (5) hợp chất có hoạt tính kháng sinh tốt [23] Cũng có nguồn gốc từ chủng xạ khuẩn phân lập từ trầm tích biển, hợp chất maduralide (6) tách chiết từ chủng Actinomycetales Kết khảo sát hoạt tính cho thấy hợp chất thể hoạt tính chủng Bacillus subtilis [24] Các hợp chất thuộc lớp chất phenazine (7-8) biết đến với hoạt tính kháng khuẩn phát từ chủng xạ khuẩn Streptomyces sp từ trầm tích biển Đây hợp chất có khung cấu trúc tự nhiên chứa phần L-quinovose ester[25] Các hợp chất thể hoạt tính kháng khuẩn nhiều chủng vi khuẩn Hiện số sản phẩm dẫn chất phenazine nghiên cứu sử dụng khai thác hoạt tính kháng khuẩn chúng lĩnh vực y dược nơng nghiệp Trong nghiên cứu lồi thuộc Streptomyces phân lập từ trầm tích biển, nhà khoa học Mỹ phát bốn hợp chất bioxalomycin α1, α2, β1 β2 (9-12) Các khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cho thấy bốn hợp chất thể hoạt tính mạnh chủng Staphyloccoccus Enterococcus sp Đặc biệt hợp chất bioxalomycin β2 (12) thể hoạt tính mạnh với giá trị MIC nằm khoảng 76 77 Phổ 13C NMR hợp chất G248-10: 125.76 MHz, CD3OD PLIII 11 Hợp chất G248-11: (2S,2″S)-6-lavandulyl-5,7,2′,4′tetrahydroxylflavanone Phổ khối HR-ESI-MS hợp chất G248-11 78 Phổ 1H-NMR (500 MHz; CD3OD) hợp chất G248-11 79 Phổ 13C-NMR hợp chất G248-11 80 Phổ DEPT hợp chất G248-11: 125.76 MHz, CD3OD Phổ 1H-1H COSY hợp chất G248-11: 500.13 MHz, CD3OD 81 Phổ HMBC G248-11 (1H: 500.13 MHz, 13C: 125.76 MHz, CD3OD) HSQC hợp chất G248-11 (1H: 500.13 MHz, 13C: 125.76 MHz, CD3OD) 82 Phổ CD hợp chất G249-11 Phổ CD ECD hợp chất G249-11 83 PL III 12 Hợp chất G248-12: (2″S)-5′-lavandulyl-2′-methoxy-2,4,4′,6′tetrahydroxylchalcone Phổ HR- ESI-MS hợp chất G248-12 100 98 96 94 92 511.19cm-1 %T 90 88 3695.84cm-1 86 1546.2cm-1 84 1449.61cm-1 2925.37cm-1 82 2854.5cm-1 1605.33cm-1 1233.43cm-1 1141.94cm-1 1104.55cm-1 80 78 4000 3500 3000 2500 2000 cm-1 Phổ IR hợp chất G248-12 1500 1000 500450 84 85 Phổ 1H-NMR (500 MHz; CD3OD) hợp chất G248-12 Phổ 13C NMR hợp chất G248-12: 125.76 MHz, CD3OD 86 Phổ DEPT hợp chất G248-12: 125.76 MHz, CD3OD Phổ 1H-1H COSY hợp chất G248-12: 500.13 MHz, CD3OD 87 Phổ HMBC G248-12 (1H: 500.13 MHz, 13C: 125.76 MHz, CD3OD) HSQC hợp chất G248-12 88 Phổ CD hợp chất G249-12 Phổ CD ECD đồng phân 2″S- G248-12 2″R-G248-12 89 PL III 13 Hợp chất G248-13: (2S,2″S)-6-lavandulyl-7-methoxy-5,2′,4′trihydroxylflavanone Phổ HR-ESI-MS hợp chất G248-13 Phổ 1H-NMR (500 MHz; CD3OD) hợp chất G248-13 90 ... ‘? ?Nghiên cứu phân lập khảo sát hoạt tính kháng sinh, gây độc tế bào hợp chất thứ cấp từ ba chủng xạ khuẩn Streptomyces G246, G261, G248 thu thập vùng biển miền Trung - Việt Nam” Mục tiêu nghiên cứu: ... tính kháng chủng Gram (+), chủng nấm, hoạt tính gây độc tế bào KB, chủng G261 có hoạt tính kháng chủng Gram(+), chủng Gram(-), chủng nấm, hoạt tính gây độc tế bào KB chủng G248 có hoạt tính kháng. .. vật phân lập từ vùng biển miền Trung – Việt Nam - Khảo sát hoạt tính gây độc tế bào hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chất phân lập làm sở khoa học định hướng cho việc nghiên cứu ứng dụng hợp