i VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT TRẦN THỊ THU HÀ PHÂN TÍCH ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA BA LOÀI CÂY BỐ MẸ (EUCALYPTUS UROPHYLLA, E CAMALDULENSIS, E EXSERTA) LÀM CƠ SỞ ĐỂ XÂY DỰNG CÁC TỔ HỢP BẠCH ĐÀN LAI KHÁC LOÀI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2017 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ii VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT TRẦN THỊ THU HÀ PHÂN TÍCH ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA BA LOÀI CÂY BỐ MẸ (EUCALYPTUS UROPHYLLA, E CAMALDULENSIS, E EXSERTA) LÀM CƠ SỞ ĐỂ XÂY DỰNG CÁC TỔ HỢP BẠCH ĐÀN LAI KHÁC LOÀI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 \ NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC TS Nguyễn Việt Cƣờng Hà Nội - 2017 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com i LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Việt Cƣờng - Bộ môn Lai giống – Viện NS Giống CNSH lâm nghiệp, ngƣời tận tình giúp đỡ, bảo, hƣớng dẫn tơi thực nghiên cứu hoàn thiện luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn thầy, cô giáo Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật; Ban lãnh đạo Viện NC Giống CNSH lâm nghiệp đồng nghiệp giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu Tơi gửi lời cảm ơn đến bạn bè ngƣời thân gia đình động viên, giúp đỡ thời gian vừa qua Cuối tơi xin kính chúc q thầy, cơ, anh, chị gia đình dồi sức khỏe, thành công nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 16 tháng 10 năm 2017 Học viên Trần Thị Thu Hà LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH vii MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Một số nghiên cứu chọn giống bạch đàn 1.1.1 Trên giới 1.1.2 Tại Việt Nam 1.2 Các loại thị phân tử dựa kỹ thuật ADN 1.3 Ƣu điểm chọn giống thị phân tử 13 1.4 Một số nghiên cứu ứng dụng thị phân tử phân tích đa dạng di truyền chọn giống lâm nghiệp 15 1.4.1 Trên giới 15 1.4.2 Tại Việt Nam 20 CHƢƠNG MỤC TIÊU, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Mục tiêu 25 2.2 Nội dung nghiên cứu 25 2.3 Đối tƣợng, vật liệu địa điểm nghiên cứu 25 2.3.1 Đối tượng 25 2.3.2 Các cặp mồi SSR sử dụng nghiên cứu 27 2.3.3 Địa điểm nghiên cứu 27 2.3.4 Hóa chất 27 2.3.5 Thiết bị 28 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com iii 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 28 2.4.1 Các phương pháp sử dụng phịng thí nghiệm 28 2.4.2 Các phương pháp trường 35 2.4.3 Phương pháp xử lý số liệu 37 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 40 3.1 Phân tích đa dạng di truyền bố mẹ chọn 40 3.1.1 Kết tách chiết ADN tổng số 40 3.1.2 Kết phản ứng PCR từ ADN tổng số mẫu bạch đàn với mồi SSR 40 3.1.3 Kết phân tích quan hệ di truyền bố mẹ chọn lai giống 41 3.2 Xây dựng tổ hợp lai 45 3.2.1 Xác định thời điểm nở hoa, kết bố mẹ tham gia lai giống 45 3.2.2 Lai giống 46 3.2.3 Khảo nghiệm tổ hợp bạch đàn lai Trường Sơn – Lương Sơn Hịa Bình 48 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 4.1 Kết luận 55 4.2 Kiến nghị 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 Tiếng Việt: 56 Tiếng Anh: 58 PHỤ LỤC 62 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN Acid Deoxyribonucleic AFLP Amplified fragment length polymorphism APS Amonium Persulfate ARN Axit Ribonucleic bp Base pair cM Centi Morgan CTAB Cetyltrimethyl Amonium Bromide CTPT Chỉ thị phân tử cs Cộng CU Dòng bạch đàn lai E camaldulensis x E urophylla dNTPs Deoxynucleotide triphosphate EDTA Ethylenediaminetetra Acetic Acid ISSR Inter-Simple sequence repeat kb Kilo base MAS Marker Assisted Selection Nu Nucleotide PCR Polymerase chain reaction PU Dòng bạch đàn lai E pellita E urophylla QTL Quantitative trait locus RAPD Random Amplified Polymosphic DNA RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism RNase Ribonuclease SDS Sodium Dodecyl Sulphate LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com v SNP Single nucleotide polymorphism SSR Simple sequence repeats STS Sequence Tagged Sites TBE Tris-Boric Acid-EDTA TE Tris-EDTA UC Dòng bạch đàn lai E urophylla E camaldulensis UE Dòng bạch đàn lai E urophylla E exserta UP Dòng bạch đàn lai E urophylla E pellita LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com vi DANH MỤC CÁC BẢNG TT Tên bảng Trang Bảng 2.1 Danh mục bạch đàn bố mẹ đƣợc sử dụng nghiên cứu 26 Bảng 2.2 Thành phần phản ứng PCR 31 Bảng 3.1 Khoảng cách di truyền 19 bạch đàn 41 Bảng 3.2 Vật hậu học loài tham gia lai giống 45 Bảng 3.3 Danh mục 61 tổ hợp lai loài bạch đàn 46 Bảng 3.4 Sinh trƣởng tổ hợp bạch đàn lai Hịa Bình 48 Bảng 3.5 Sinh trƣởng tổ hợp bạch đàn lai thuận nghịch 51 Bảng 3.6 Đánh giá hình thái tổ hợp bạch đàn lai Hịa Bình 51 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com vii DANH MỤC CÁC HÌNH TT Tên hình Trang Hình 2.1 Cây bố mẹ U4 (D1.3=17,9 cm) (U4 - sinh trƣởng chậm) .27 Hình 2.2 Cây bố mẹ U3 (D1.3=39,8cm) (U3 – sinh trƣởng nhanh)……………….27 Hình 2.3 Mẫu bảo quản 29 Hình 2.4 Chu trình nhiệt phản ứng PCR 32 Hình 2.5 Lắp đặt dàn giáo lai giống 36 Hình 2.6 Chọn hoa khử đực ………………………………………………… 36 Hình 2.7 Chụp bao cách ly …………………………………………………………36 Hình 3.1 Kết điện di tinh ADN tổng số 19 bạch đàn 40 Hình 3.2 Kết điện di sản phẩm PCR-SSR mồi EMBRA229 EMBRA165 với 19 mẫu bạch đàn gel polyacrylamide 4,5% 41 Hình 3.3 Cây phân loại di truyền 19 bạch đàn 42 Hình 3.4 Quan hệ di truyền 19 bạch đàn 42 Hình 3.5 Tổ hợp bạch đàn lai C4U4 Hịa Bình .53 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỞ ĐẦU Bạch đàn lâm nghiệp sinh trƣởng nhanh, có khả thích nghi với nhiều vùng sinh thái nên đƣợc xem loài dẫn đầu trồng rừng sản suất giới với tổng diện tích đạt 20,07 triệu vào năm 2014 Gỗ bạch đàn đƣợc sử dụng cho ngành xây dựng, đóng đồ nội thất, nguyên liệu chế biến ván ép, ván dăm ngành công nghiệp giấy nhƣ sản phẩm sinh khối cho ngành lƣợng Nghiên cứu chọn giống bạch đàn khâu quan trọng chƣơng trình cải thiện giống rừng, với mục tiêu tăng nâng cao chất lƣợng sản phẩm gỗ, cải thiện đặc tính sinh học nhƣ: tính chống chịu điều kiện ngoại cảnh bất lợi, chống chịu sâu, bệnh… Hiện nay, ứng dụng thị phân tử phân tích đa dạng di truyền làm sở cho trình chọn giống hƣớng nghiên cứu có triển vọng Có nhiều loại thị phân tử nhƣ: AFLP, RFLP, RAPD, SSR, STS, SNP,…mỗi kỹ thuật có ƣu nhƣợc - điểm riêng, đƣợc sử dụng phổ biến thị RAPD SSR Chỉ thị RAPD phù hợp cho nghiên cứu lồi chƣa biết rõ thơng tin trình tự ADN chƣa có nghiên cứu phát triển thị cho loài Do thị RAPD mồi đơn với trình tự chuỗi nucleotide ngắn (5-12 nucleotide) bắt cặp ngẫu nhiên nhiều vị trí nên sử dụng thị RAPD nghiên cứu, kết lần thí nghiệm khác nhau, cần phải có lặp lại thí nghiệm Trong đó, thị SSR cặp mồi đặc hiệu đƣợc thiết kế dựa hai đầu đoạn lặp lại có trình tự đặc hiệu thống chung cho đoạn ADN không phân biệt cá thể loài, nhƣng cá thể loài số lần lặp lại khác Vì vậy, việc sử dụng thị SSR cho kết xác so với thị RAPD thƣờng đƣợc sử dụng cho nghiên cứu loài LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 62 PHỤ LỤC LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 63 Phụ lục Danh mục 34 cặp mồi sử dụng phân tích đa dạng di truyền bố mẹ bạch đàn Cặp mồi Trình tự lặp lại Trình tự mồi 5’- 3’ Nhiệ độ bắt cặp EMBRA2 (AG)15 CgTgACACCAggACATTAC 56 121 11 56 94 56 98 54 146 11 56 106 58 115 60 130 50 144 56 143 56 104 58 90 10 58 99 54 116 60 115 10 58 273 56 122 56 215 10 60 247 1,6 60 144 10 Kích thƣớc Nhóm liên kết ACAAATgCAAATTCAAATgA EMBRA9 (AGA)3(AG)28 EMBRA12 (AG)22 AgTgAgAgAgATATTCgCgT CCAATACAATCATCAATCCA AggATTTgTggggCAAgT gTTCCCCATTTTCATgTCC EMBRA39 (AG)9(CA)11 gCATTCgTACTCATTTTCAA gCATCgAgAgTggATTAgTT EMBRA47 (AG)24 EMBRA51 (AG)20 AgAACCCTCTATAAAACCCC gggCTAgACATgATggAg gATgCATTCCTTTTTTTCC CATTCTCTTgCATCTggAC EMBRA53 (AG)17GT(AG)5 ATTAgCTTTTCTgTAACCCg gAATggACAAgCTCTgATg EMBRA54 (AG)17 TgTATgAggTACATCCgg AAAgTTATCAgCgAgAgTTC EMBRA58 (AG)20 CACCAACTggTACTATgAggAT TTggCTTAgggTAgAACACT EMBRA116 (TC)21 CTCCTACTACTggTTCTATCACT TCCTgCTCTTTCTCTCTCTA EMBRA124 (TC)34 TgTggACATgATAgATgAAgT AATTATTTCgATAgAAACggA EMBRA126 (TCCTC)4TCC (CT)18 gTAgTCCCTgACgCAAAC AgTACgATATTTTCgCgAgT EMBRA135 (AG)15AAT (AG)10 CTgACTTggCCggTACATA AAATCTAgTCggTCTCAAAgC EMBRA138 (TC)26CC(TC)3 gTTATgTTTggTTgAAAggAg AgACACCATgTCCCCAgg EMBRA147 (AG)n CTCgTCTTgCACgCTCTCTT gAgAgTgTgTTCATgCggCT EMBRA152 (AC)24 EMBRA153 (CT)24 TCTCCTCTggCTCTTCTA gCATgTACACTAACgACg CACACTTCTAgTCCATCC ggAgTATAgAACgATTgTg EMBRA157 (CT)19 TggATggTCAACggCgTA CATgCATTggCCATTggT EMBRA165 (TC)n ggTTgTCggTTCACTCTTgT ATAggATTgCgTCATgAAgC LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 64 EMBRA168 (GA)12 ggAgTgAAgACggTAAAT 55 82 56 186 56 193 56 180 56 143 57 254 57 348 56 147 57 182 57 316 58 225 56 181 56 173 50 222 3,7 56 344 ATCTCACTTTTCTCTCgC EMBRA186 (GA)27 ggAAggCTTTgAgATAAC ACCgAgACCAgTTgAgAg EMBRA188 (GA)9CAGG(GA)20 EMBRA191 (CT)25 CTCATgCATAgCTgCTACTC gCAgCTCAgTgTACATTgg gAgCgAgATCTAATCTTC ggATgCAgTTCTAgAgAg EMBRA194 (CT)17A(CA)14 CgTgCTTTTgAggCTCT gATTgAggATgAgTggTC EMBRA202 (CT)22 EMBRA206 (TC)21 gCCTTCCACTTCTTCAggTC gTTATACTgCggTgAAggCT CAgCAACgTCTACCTCTTCC TgATCCAgTTCCgACTAgTg EMBRA208 (TC)25 CTCgTgTggTTATgTgAACT gCTTgTCTACTATgCACATgA EMBRA209 (GA)21 AggAAggCggATTgATgAgg gAACggACggAggTgAgCTA EMBRA214 (GA)8AA(GA)11 gAACAgCTACTCgTCgATTC gTAACCAggCTTggACgAT EMBRA225 (CT)12 gATATTCCTCggTCTCTCTg TCCTCTTgTTgTCgCCTC EMBRA229 (GA)20 AgAACgTTAACTCCTAAggT CTgCAATACATATCTTCTCC EMBRA232 (GA)30 gTACTTAATCTgTggCAATC gATCCTTgCATTATCgAC EMBRA237 (CT)21 gTCATTgTTgCgATCACTgC ACgTgACTTggTTgATCTgC EMBRA240 (TC)21 CAgCAACgTCTACCTCTTCC CCAgTTCCgACTAgTgTTCC LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 65 Phụ lục Kết chạy SSR 34 cặp mồi sử dụng phân tích đa dạng di truyền bố mẹ bạch đàn Sample File pop EMBRA186 EMBRA194 EMBRA147 EMBRA214 C1 C1 0 0 0 230 230 C3 C3 180 194 140 164 190 204 0 C4 C4 0 0 0 0 C5 C5 0 140 164 190 204 0 C7 C7 175 185 164 164 190 190 0 C13 C13 0 164 164 0 0 E1 E1 190 190 0 0 110 110 E1BV E1BV 175 195 135 135 160 160 0 E2 E2 0 150 175 0 0 E5 E5 0 164 164 170 190 0 E6 E6 190 196 0 190 204 0 E7 E7 0 175 175 0 0 U1 U1 177 177 0 175 180 0 U2 U2 177 177 0 190 204 0 U3 U3 177 177 0 190 204 0 U4 U4 177 177 0 190 204 0 U5 U5 177 177 140 140 190 204 0 U8 U8 177 183 140 140 0 250 260 U29BV U29BV 160 170 85 85 0 0 Sample File pop EMBRA51 C1 C1 0 0 0 0 C3 C3 0 0 0 0 C4 C4 0 0 0 0 C5 C5 0 0 0 0 C7 C7 0 0 0 0 C13 C13 0 0 160 180 0 E1 E1 0 0 0 0 E1BV E1BV 0 140 140 120 130 220 220 E2 E2 0 0 140 140 0 E5 E5 0 0 0 240 260 E6 E6 0 0 0 180 180 EMBRA135 EMBRA126 EMBRA153 E7 E7 0 140 140 145 145 215 250 U1 U1 0 130 130 140 145 220 240 U2 U2 0 130 140 140 145 220 240 U3 U3 0 130 140 140 145 220 240 U4 U4 0 130 140 140 145 220 240 U5 U5 0 130 140 140 145 220 240 U8 U8 0 0 150 150 215 250 U29BV U29BV 105 110 130 140 130 145 155 155 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 66 Sample File pop EMBRA208 EMBRA237 EMBRA2 EMBRA138 C1 C1 0 0 0 120 120 C3 C3 0 0 125 125 0 C4 C4 0 0 0 0 C5 C5 0 0 125 125 0 C7 C7 0 0 0 0 C13 C13 0 0 125 125 0 E1 E1 0 0 0 0 E1BV E1BV 0 112 112 190 190 175 205 E2 E2 0 0 125 125 0 E5 E5 0 0 125 125 175 205 E6 E6 120 120 0 0 0 E7 E7 120 120 0 130 130 0 U1 U1 0 0 120 130 200 200 U2 U2 100 120 0 120 130 0 U3 U3 0 0 120 130 200 205 U4 U4 115 115 0 120 130 200 205 U5 U5 0 0 120 130 100 205 U8 U8 100 120 0 125 125 175 175 U29BV U29BV 130 135 105 105 100 100 0 Sample File pop EMBRA209 C1 C1 150 150 0 0 140 150 C3 C3 0 0 180 190 140 150 C4 C4 125 150 0 0 0 C5 C5 0 0 180 190 140 150 C7 C7 120 135 0 0 140 150 C13 C13 0 0 0 120 150 E1 E1 120 135 0 160 160 130 150 E1BV E1BV 130 130 125 125 0 140 145 E2 E2 0 90 90 0 140 140 E5 E5 130 130 0 160 160 0 E6 E6 130 145 0 0 140 140 E7 E7 155 155 90 90 0 0 U1 U1 0 90 105 164 170 120 140 U2 U2 130 150 90 105 164 164 0 U3 U3 130 150 90 105 0 120 140 U4 U4 130 150 0 0 120 140 U5 U5 0 0 0 120 140 U8 U8 0 90 90 170 175 0 U29BV U29BV 160 160 70 90 0 140 170 EMBRA168 EMBRA225 EMBRA232 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 67 Sample File pop EMBRA12 EMBRA188 EMBRA53 EMBRA58 C1 C1 0 240 240 150 150 145 160 C3 C3 0 0 150 150 175 180 C4 C4 0 0 150 150 175 180 C5 C5 0 0 150 150 0 C7 C7 0 0 0 175 180 C13 C13 0 0 140 160 0 E1 E1 0 0 150 155 165 190 E1BV E1BV 135 160 155 170 160 160 145 145 E2 E2 0 170 180 155 160 165 175 E5 E5 0 160 160 155 155 175 175 E6 E6 0 0 150 150 0 E7 E7 0 0 150 150 155 175 U1 U1 0 110 110 180 180 0 U2 U2 0 110 110 0 160 160 U3 U3 0 0 180 185 0 U4 U4 0 0 180 185 160 160 U5 U5 0 0 185 185 160 160 U8 U8 0 0 145 160 0 U29BV U29BV 155 160 170 190 163 170 0 Sample File pop EMBRA191 C1 C1 0 100 110 0 130 150 C3 C3 0 0 180 180 130 160 C4 C4 0 90 110 0 0 C5 C5 165 165 0 170 180 130 160 C7 C7 165 165 0 0 150 150 C13 C13 170 170 0 150 170 150 160 E1 E1 170 175 0 0 130 150 E1BV E1BV 190 200 0 145 145 150 150 E2 E2 0 95 105 0 130 150 E5 E5 0 0 0 130 135 E6 E6 0 0 0 130 140 E7 E7 0 0 0 150 160 U1 U1 0 0 0 0 U2 U2 0 0 0 0 U3 U3 0 0 0 130 160 U4 U4 0 0 0 130 160 U5 U5 0 0 0 130 160 U8 U8 175 185 0 0 130 160 U29BV U29BV 150 150 0 160 160 150 170 EMBRA206 EMBRA124 EMBRA116 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 68 Sample File pop EMBRA157 EMBRA165 EMBRA47 EMBRA240 C1 C1 140 150 110 140 160 160 0 C3 C3 140 150 120 140 160 160 380 380 C4 C4 140 160 120 140 0 380 380 C5 C5 140 150 110 145 160 160 390 390 C7 C7 140 150 0 0 380 400 C13 C13 140 160 140 140 0 0 E1 E1 140 160 140 145 170 170 400 400 E1BV E1BV 110 110 150 150 130 160 0 E2 E2 140 160 140 140 0 0 E5 E5 140 160 0 0 0 E6 E6 0 140 140 0 0 E7 E7 140 160 140 145 0 0 U1 U1 0 120 140 0 400 400 U2 U2 140 160 0 0 0 U3 U3 0 120 140 0 0 U4 U4 140 160 120 145 135 135 0 U5 U5 140 160 0 0 0 U8 U8 130 150 140 140 0 0 U29BV U29BV 140 160 150 175 155 160 320 370 Sample File pop EMBRA39 C1 C1 140 145 181 205 0 0 C3 C3 140 150 181 205 125 130 210 230 C4 C4 140 140 181 205 125 130 0 C5 C5 140 150 181 205 125 130 210 230 C7 C7 140 140 181 181 0 0 C13 C13 140 150 181 190 125 150 210 230 E1 E1 140 140 181 205 0 0 E1BV E1BV 142 142 170 185 130 145 0 E2 E2 140 140 181 205 140 140 210 230 E5 E5 140 150 181 205 0 0 E6 E6 140 150 181 205 0 0 E7 E7 140 150 181 205 120 150 210 230 U1 U1 140 150 181 240 125 150 210 230 U2 U2 140 150 181 190 125 150 210 230 U3 U3 140 150 181 240 125 150 210 230 U4 U4 140 150 181 190 125 150 210 230 U5 U5 140 150 181 190 0 210 230 U8 U8 140 150 181 240 160 160 210 230 U29BV U29BV 140 140 181 200 140 140 250 250 EMBRA229 EMBRA9 EMBRA202 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 69 Sample File pop EMBRA152 EMBRA54 C1 C1 0 0 C3 C3 0 0 C4 C4 150 160 0 C5 C5 0 0 C7 C7 160 160 0 C13 C13 0 0 0 0 E1 E1 E1BV E1BV 0 150 150 E2 E2 180 185 0 E5 E5 180 185 0 E6 E6 185 185 0 E7 E7 185 185 0 U1 U1 0 180 200 U2 U2 0 0 U3 U3 0 180 185 U4 U4 0 0 U5 U5 0 0 U8 U8 0 180 190 U29BV U29BV 0 200 205 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 70 Phụ lục Bảng hệ số tƣơng đồng di truyền 19 bạch đàn NGD Sheet1 Pairwise Population Matrix of Nei Genetic Identity C1 C13 C3 C4 C5 C7 E1 E2 E5 E6 E7 U1 U2 U3 U4 U5 U8 E1BV U29 1.000 C1 0.396 1.000 0.388 0.529 1.000 C13 0.405 0.756 0.313 1.000 0.250 0.373 0.388 0.381 1.000 0.184 0.418 0.252 0.402 0.316 1.000 0.268 0.228 0.321 0.233 0.342 0.283 1.000 0.121 0.064 0.021 0.066 0.104 0.073 0.034 1.000 0.251 0.362 0.300 0.305 0.274 0.409 0.312 0.110 1.000 0.119 0.333 0.228 0.295 0.310 0.327 0.302 0.099 0.370 1.000 0.316 0.369 0.315 0.327 0.211 0.194 0.283 0.073 0.361 0.251 1.000 0.215 0.281 0.309 0.267 0.172 0.272 0.231 0.089 0.393 0.205 0.408 1.000 0.089 0.188 0.160 0.149 0.157 0.236 0.175 0.046 0.265 0.085 0.165 0.250 1.000 0.171 0.205 0.204 0.209 0.171 0.257 0.119 0.101 0.245 0.209 0.206 0.378 0.589 1.000 0.180 0.311 0.215 0.269 0.180 0.297 0.125 0.142 0.328 0.220 0.297 0.353 0.711 0.626 1.000 0.205 0.277 0.218 0.283 0.183 0.289 0.156 0.126 0.250 0.239 0.217 0.314 0.531 0.668 0.749 1.000 0.175 0.303 0.149 0.310 0.200 0.264 0.146 0.104 0.274 0.215 0.211 0.301 0.425 0.634 0.667 0.753 1.000 0.129 0.321 0.129 0.287 0.108 0.340 0.147 0.059 0.373 0.205 0.227 0.296 0.269 0.231 0.331 0.177 0.280 1.000 0.147 0.120 0.154 0.123 0.184 0.116 0.143 0.140 0.285 0.088 0.097 0.190 0.148 0.161 0.151 0.151 0.165 0.079 C3 C4 C5 C7 E1 E2 E5 E6 E7 U1 U2 U3 U4 U5 U8 E1BV 1.000 U29 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 71 Phụ lục Đánh giá hình thái tổ hợp bạch đàn lai Tổ hợp: U4C1 Địa điểm: Trƣờng Sơn - Hịa Bình Ngày đo: 24/06/2016 STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 TB Dtt 4 5 5 4 5 5 4 5 4 5 4.3 Hdc 6.5 7.2 5.5 7.3 8.3 6.5 4.5 5.5 4.2 4.8 7.5 6.8 4.5 5.2 4.8 4.5 6.8 6.3 5.4 6.5 7.6 6.0 Dnc 5 5 5 5 3 4 5 5 4 4.2 Ptn 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 4.8 Msl 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 4.6 Drt 4 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 4.7 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 72 Đánh giá hình thái tổ hợp bạch đàn lai Tổ hợp: C7U4 Địa điểm: Trƣờng Sơn - Hịa Bình Ngày đo: 24/06/2016 STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 TB Dtt 3 4 5 4 4 4 3 4 4 3.5 Hdc 6.5 5.5 5 3.5 5.8 4.5 6.5 4.5 5.5 4.2 6.2 3.5 4.5 4.5 4.8 5.5 4.5 6.5 4.3 5.4 5.2 5.0 Dnc 5 5 5 3 4 5 4 4 4.0 Ptn 5 5 5 5 5 5 5 5 5 4.4 Msl 5 4 5 5 3 4 5 4 3 4.0 Drt 5 5 5 5 5 3 5 4.0 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 73 Đánh giá hình thái tổ hợp bạch đàn lai Tổ hợp: U4E1 Địa điểm: Trƣờng Sơn - Hịa Bình Ngày đo: 24/06/2016 STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 TB Dtt 4 5 5 4 4 4 5 4 5 4.0 Hdc 5.5 4.2 3.5 4.5 3.5 4.5 5 4.5 5 4.5 3.5 5.5 4.5 3.5 4.5 3.5 3.5 4.5 4.5 Dnc 3 5 4 5 5 5 5 5 4.0 Ptn 3 4 4 4 5 5 5 5 4.0 Msl 3 2 4 5 5 5 4 4 4 3.8 Drt 3 3 3 5 4 4 5 3 3 3.5 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 74 Đánh giá hình thái tổ hợp bạch đàn lai Tổ hợp: C4U4 Địa điểm: Trƣờng Sơn - Hịa Bình Ngày đo: 24/06/2016 STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 TB Dtt 2 4 3 4 5 4 5 4 5 3.7 Hdc 3.5 2.5 4.2 3.5 3.5 4.5 3.5 4 3.5 4 3.5 3.2 4.2 3.5 3.5 3 3.4 Dnc 4 4 5 5 5 5 4 3 3.9 Ptn 3 3 5 4 4 5 5 5 4 3.9 Msl 3 2 3 4 5 3 4 4 4 3.5 Drt 3 5 5 5 4 4 3 5 3 5 4.0 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 75 Đánh giá hình thái tổ hợp bạch đàn lai Tổ hợp: C7E5 Địa điểm: Trƣờng Sơn - Hịa Bình Ngày đo: 24/06/2016 STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 TB Dtt 2 3 1 3 2 2 3 2 2 2.0 Hdc 1.5 1.2 2.5 1.5 1.2 1.8 2.5 1.5 2.5 2.5 3.2 2.5 2.2 2.8 2.4 1.2 2.3 1.5 1.8 1.5 2.5 1.5 2.5 2.0 Dnc 3 4 3 3 3 3 3 3 3 2 4 3.0 Ptn 2 2 3 1 2 3 2 3 2 3 2 2.0 Msl 2 2 2 2 2 2 2 2 3 2 2 2.0 Drt 2 2 2 2 2 2 2 3 2 2.0 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 76 Phụ lục Mơ hình khảo nghiệm bạch đàn tổ hợp Trƣờng Sơn - Lƣơng Sơn - Hịa Bình năm 2014 5 5 5 5 5 11 16 26 25 11 16 26 25 11 16 26 25 11 16 26 25 5 11 16 26 25 5 11 16 26 25 5 11 16 26 25 5 11 16 26 25 21 13 14 22 28 30 17 21 13 14 22 28 30 17 7 7 7 7 7 7 18 18 18 18 18 18 18 18 26 25 16 21 23 10 13 15 27 17 22 28 19 14 20 18 30 12 24 29 11 7 7 7 27 27 27 27 27 27 27 27 26 25 16 21 23 10 13 15 27 17 22 28 19 14 20 18 30 12 24 29 11 7 21 13 14 22 28 30 17 7 21 13 14 22 28 30 17 7 21 13 14 22 28 30 17 7 21 13 14 22 28 30 17 7 21 13 14 22 28 30 17 7 21 13 14 22 28 30 17 12 24 20 19 10 15 23 29 8 8 8 7 7 7 7 26 26 26 26 26 26 1 1 1 1 2 2 2 9 9 9 9 4 4 4 11 11 11 11 11 11 11 11 1 1 23 23 23 23 23 23 8 8 8 8 1 1 10 10 10 10 10 10 20 20 20 20 20 20 20 20 1 1 13 13 13 13 13 13 14 14 14 14 14 14 14 14 1 1 1 1 1 12 12 12 12 12 12 12 12 1 1 7 7 7 19 19 19 19 19 19 19 19 39 39 39 39 39 6 6 6 30 30 30 30 30 30 30 30 39 39 39 39 39 5 5 5 3 3 3 3 39 39 39 39 39 15 15 15 15 15 15 24 24 24 24 24 24 24 24 3 3 27 27 27 27 27 27 2 2 2 2 3 3 17 17 17 17 17 17 25 25 25 25 25 25 25 25 3 3 3 3 3 10 10 10 10 10 10 10 10 3 3 22 22 22 22 22 22 23 23 23 23 23 23 23 23 3 3 9 9 9 21 21 21 21 21 21 21 21 4 4 24 24 24 24 24 24 13 13 13 13 13 13 13 13 4 4 6 6 6 6 3 3 10 10 10 10 10 10 10 10 3 3 24 24 24 24 24 24 24 24 11 11 11 11 1 1 1 1 11 11 11 11 25 25 25 25 25 25 25 25 30 30 30 30 28 28 28 28 28 28 28 28 30 30 30 30 4 4 4 4 14 14 14 14 18 18 18 18 18 18 18 18 14 14 14 14 29 29 29 29 29 29 29 29 7 7 21 21 21 21 21 21 21 21 7 7 23 23 23 23 23 23 23 23 12 12 12 12 27 27 27 27 27 27 27 27 12 12 12 12 5 5 5 5 16 16 16 16 12 24 20 19 10 15 23 29 12 24 20 19 10 15 23 29 12 24 20 19 10 15 23 29 12 24 20 19 10 15 23 29 12 24 20 19 10 15 23 29 33 33 33 12 24 20 19 10 15 23 29 33 33 33 12 24 20 19 10 15 23 29 33 33 33 25 25 25 25 25 25 18 18 18 18 18 18 18 18 16 16 16 16 16 16 15 15 15 15 15 15 15 15 21 21 21 21 21 21 22 22 22 22 22 22 22 22 Lặp I 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 31 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 32 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 34 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 35 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 Danh sách tổ hợp lai 10 E1U4 U4E1 E2U4 U4E2 E5U3 U3E5 E6U4 U4E6 E6U3 E1C1 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 E6C1 C4U3 C4U4 C5E5 C7E1 C7E5 C7E6 C7U4 U3E2 U4C1 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 E1 E2 E5 E6 E7 C1 C4 C7 U3 U4 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 C1E1 C1E6 E5C5 C1U4 E1C3 E1C5 E6C3 E7C3 U4C3 C7U3 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 37 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 Lặp II 38 38 38 38 38 38 38 38 Lặp III 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 19 19 19 19 19 19 6 6 6 6 39 39 39 39 39 14 14 14 14 14 14 16 16 16 16 16 16 16 16 39 39 39 39 39 20 20 20 20 20 20 29 29 29 29 29 29 29 29 4 4 18 18 18 18 18 18 27 27 27 27 27 27 27 27 4 4 30 30 30 30 30 30 5 5 5 5 4 4 12 12 12 12 12 12 17 17 17 17 17 17 17 17 4 4 29 29 29 29 29 29 28 28 28 28 28 28 28 28 4 4 11 11 11 11 11 11 4 4 4 4 4 4 Đƣờng đất vào khu thí nghiệm Lặp IV 40 40 40 40 40 40 40 28 28 28 28 28 28 26 26 26 26 26 26 26 26 39 39 39 39 39 9 9 9 9 22 22 22 22 20 20 20 20 20 20 20 20 22 22 22 22 26 26 26 26 26 26 26 26 16 16 16 16 19 19 19 19 19 19 19 19 17 17 17 17 2 2 2 2 17 17 17 17 13 13 13 13 13 13 13 13 15 15 15 15 8 8 8 8 15 15 15 15 Diện tích: 03 Phát dọn thực bị toàn diện, cuốc hố 40 x 40 x 40 cm Mật độ: 1.660 cây/ha Địa điểm: Lƣơng Sơn - Hịa Bình Phân bón: bón lót (200g phân lân + 200g NPK + 3kg phân chuồng)/hố + 200g NPK/ lần chăm sóc Đảo phân lấp hố trƣớc trồng Ngày trồng: 03/8/2014 Bố trí thí nghiệm:30 cơng thức x cây/cơng thức/lặp x lặp LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... THỊ THU HÀ PHÂN TÍCH ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA BA LOÀI CÂY BỐ MẸ (EUCALYPTUS UROPHYLLA, E CAMALDULENSIS, E EXSERTA) LÀM CƠ SỞ ĐỂ XÂY DỰNG CÁC TỔ HỢP BẠCH ĐÀN LAI KHÁC LOÀI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC... [25] Trong khn khổ luận văn thạc sĩ ? ?Phân tích đa dạng di truyền ba loài bố mẹ (Eucalyptus urophylla, E camaldulensis, E exserta) làm sở để xây dựng tổ hợp bạch đàn lai khác loài? ??, học viên ứng... Simple sequence repeats STS Sequence Tagged Sites TBE Tris-Boric Acid-EDTA TE Tris-EDTA UC Dòng bạch đàn lai E urophylla E camaldulensis UE Dòng bạch đàn lai E urophylla E exserta UP Dòng bạch đàn